Способ определения димедрола в биологических объектах

Способ определения димедрола в биологических объектах

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ДИИЕДРОЛА В БИОЛОГИ4ЕСКИХ

ОБЪЕКТАХ

Изобретение относится к аналити" ческой химии и касается определения димедрола.

Известен способ определения димед-. рола в биологических объектах путем обработки пробы концентрированной серной кислотой с последующим фотометрированием-полученного раствора (lj .

Однако известный способ обладает недостаточно высокой чувствительнос.тью.

1Ю

Цель изобретения - повышение чувствительности способа.

Поставленная цель достигается тем, 35 что согласно способу определения ди;. медрола в биологических объектах, осуществляемому путем обработки пробы концентрированной серной кислотой с последующим фотометрированием полученного раствора, в пробу дополнительно вносят диметилформамид:и по флуоресценции полученной смеси определяют концентрацию димедрола.

Пример 1. Определение димедро ла в 13-ном растворе. К l мл 13-ного раствора из ампулы приливают 9 мл концентрированной серной кислоты, перемешивают. К 1 мл полученного раствора осторожно приливают 9 мл диметил юрмамида, перемешивают переворачиванием и замеряют интенсивность, флуоресценции. Содержание димедрола

- рассчитывают по стандартному образцу, для приготовления которого к

1 мл водного раствора димедрола с содержанием препарата 10000(мкг/мл) приливают осторожно 9 мл концентрированной .серной кислоты и 1 мл полученного раствора разбавляют 9 мп диметилформамида. Измеряют интенсив" ность флуоресценции одновременно с исследуемыми образцами. По результатам этих измерений рассчитывают содержание димедрола в анализируемой пробе. Результаты флуореметрического определения димедрола в 1Ф растворе представлены в табл. 1.

930123

Т а б л и ц а 1

Найдено димедрола

0,090

0,094.-90

0,092

90

90

0,091

О, 090

Табл ица 2 айдено димедрола о калибровочному рафику, мкг/мл

Из расчета на

1 таблетку, гр

О 155

0,149

0,149

45,0

0,045

46,0

0,046

0,152

46,0

0,046

46,0

0,144

0,046

0,046

46,0

0,150

По калибровочному графику (мкгlмл) Пример 2. Определение димедрола в таблетках 0,05. зо

Точную навеску мелкоизмельченных таблеток, равную 0,15, растворяют в

l0 мл дистиллированной "воды. К 1 мп данного раствора приливают осторожно 9 мл концентрированной, серной кис- з лоты, тщательно перемешивают. К l мл полученного раствора добавляют 9 мл . диметилформамида и замеряют интенсивность флуоресценции. Содержание димедНавеска таблеток мелкоизмельченных, гр

В 14-ном растворе (гр/мл) О, 090

0,090

0,088 .0,090

0,098 рола определяют по стандартному раствору, для приготовления которого к

1 мл водного раствора димедрола с содержанием препарата 5000 мкгlмл приливают 9 мл концентрированной серной кислоты, перемешивают. К 1 мл полученного раствора прибавляют 9 мл диметилформамида и флуориметрируют одновременно с растворами исследуемых образцов. Результаты флуориметрического определения димедрола в таблетках 0.,05 представлены в табл. 2.

48,0 О, 048

930123

Продолжение табл. айдено димедрола о калибровочному рафику, мкг/мл

Из расчета на

1 таблетку, гр

45,0

0,147

О, 045

0,153

0,046

46,0

О, 151

0,047

47,0

Т а б л и ц а 3

В 1 мл сыворотки, мкг/мл

455,0

45,5

442,0

44,2

42,8

428,0

428,0

442, О.

428,0

42,8

44,2

42,8

400,0

414,0

428,0

40,0

41,4

42,8

442,0

Навеска таблеток мелкоизмельченных, rp

Пример 3. Определение димед" рола в сыворотке крови., 5 мл исследуемой оксалатной кро" ви помещают в центрифужную кювету и 2© центрифугируют в течение 20 мин при

8 тыс об/мин. К 1 мл. центрифугата в делительной воронке прибавляют 1 мп

53-ного раствора едкого натрия и

10 мл гексана и перемешивают в течение. 15 мин. Верхний слой отделяют в чашку для выпаривания. Зкстракционирование повторяют. Гексан выпаривают на водяной бане при температуре не выше 60 С. К сухому остатку приливают

1 мл концентрированной серной кисло" ты, перемешивают стеклянной палочкой, добавляют 9 мл диметилформамида и переносят в кювету флуориметра. ФлуоПо калибровочному графику, мкг/мл риметрируют раствор одновременно со стандартными образцами. Количество димедрола в исследуемой пробе определяют по калибровочному графику, для построения которого к 1 мп вод" . ного раствора димедрола с содержанием препарата 10 000 мкгlмл пРиливают

9 мл концентрированной серной кислоты, перемешивают. К 1,0;0,5 и 0,1 мл данного раствора соответственно приливают 9,0; 9,5 и 9,9 мл диметилформамида. Стандартные образцы флуориметрируют одновременно с исследуемыми растворами. По результатам флуори-. метрии строят калибровочный график.

Результаты определения содержания димедрола в сыворотке крови отражено в табЛ-. 3.

0123 8 со стандартными образцами. Количество димедрола в моче определяют по калибровочному графику, для построения которого к 1 мп водного стандартного раствора димедрола, с содержанием препарата 10 000 мкг/мп, прибавляют 9 мл концентрированной серной кислоты, перемешивают переворачиванием осторожно. К 1, 0,5 и 0,1 мл полученной

10 смеси приливают соответственно-9,0

9,5 9,9 мл диметилформамида и флуориментрировать одновременно с опытными образцами. По результатам измерений строят калибровочный график. Результаt ты определения димедрола в моче приведены в табл. 4.

Табл ица 4

7 93

Il p и м е р 4. Определение димед- рола в моче.

Найдено димедрола в моче, мкг/мл

По калибровочному графику В 1 мл мочи

40,0

400,0

44,0

440,0

42,0

420,0

420,0

42,0

4Р,5

405,0

45,1

451, О

45,0

450,0

420,0

42,0

44,0

440,0

420,0

Формула изобретения

Способ определения димедрола в биологических объектах путем обработки пробы концентрированной серной

50 кислотой с последующим фотометрироввнием полученного раствора, о т л и"

ВНИИПИ Заказ 3457/56 Тираж ЯЯ Подписное

Ю филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

К 1 мл мочи в делительной воронке

1 приливают 10 мл гексана и встряхива" ют 10 мин. Дают отстояться до полно" го разделения фаз. Верхний слой отделяют в фарфоровую чашку дпя выпари-. вания. Экстрагирование повторяют. Выпаривают гексан в чашке на водяной бане при температуре не более 60 С, К сухому остатку приливают 1 мл концентрированной серной кислоТы, тщательно перемешиваюТ стеклянной палочкой, добавляют 9 мл димегилформамида и флуориметрируют одновременно, 42,0

Предлагаемый способ позволяет по-.,: высить чувствительность до мкг/мл по сравнению с известной 5 мкг/мл.

7 . ч а ю щ и " с я тем, что, с целью по"., вышения чувствительности способа, в пробу дополнительно вносят диметилформамид и по флуоресценции полученной смеси определяют концентрацию димедрола.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Государственная фармакопея

СССР. И., 1978, (Изд. 10-е), с. 254256.