Синтетическая питательная среда для выращивания бруцелл

Синтетическая питательная среда для выращивания бруцелл

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Союз Соввтсиик

Соцмапистмчвсииз

Рвспублмк

О П И С А Н И Е ()933702

ИЗО6РЕТЕН Ия

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (6I ) Дополнительное к авт. санд-ву (22) Заявлено 23.07.80 (2I ) 2962205/28-13 с присоединением заявки Ле (23) П риоритет

Опубликовано 07.06.82. Бюллетень Ют 21

Дата опубликования описания 09.06.82 (5! )М. Кд.

С 12 М 1/20 Ъвударкткенный кюмнтет

СССР ао делам нзооретеннй н открытий (M) т ДК 576.8. .093.1 (088.8) (72) Авторы изобретения

C. П. Меринов, В. А. Широков, Е. П. Голубинский, A. Ф. Пинигин и О. С. Петухова

Иркутский государственный научно-исслецователЫкий., противочумный институт Сибири и Дальнего Востока (7l ) Заявитель (54) СИНТЕТИЧЕСКАЯ ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА

ДЛЯ ВЫРАШИВА Н ИЯ БРУЦЕ ЛЛ

Изобретение относится к микробиологий и может быть использовано в научноисслецовательской работе, в частности цля изучения питательных потребностей, обменных процессов у бруцелл, в генетических исслецованиях.

Известна синтетическая питательная среца цля выращивания бруцелл сопер- . жащая агар, источник углероца - глюкозу, нитрат натрия, аминокислоты -Xlli10

-алании,I -глутаминовую кислоту, I, -цистеин, )Ь -метионин, (, «лизин, . -гнстицин, втттамины - тиамин, никотиновую кислоту, рибофлавин, пирицоксин, минеральные соликалий фосфорнокислый оцнозамещенны, калий фосфорнокислый цвузамещенный, соль магния, сернокислый аммоний и воду (1).

Однако на известной среце растут бруцеллы лишь трех виаов -Ьгцс Иа meE1тетив,Ит осе Иа оЪот Сов, B>ucelta вм .

Целью изобретения является повышение ростовь х свойств срецы.

Цель постигается тем, что синтетическая питательная среца цля вьгращивания бруцелл, соцержащая агар, источник углеpoflB, аминокислоты. витамины, минеральные соли и воцу, в качестве источника углероца соцержит натрий пировинограцнокислый, в качестве аминокислот - 4 -метионин и 1 -аспарагин, в качестве витаминов - никотиновую кислоту, кальций пантотенат и биотин, в качестве минеральных солей - калий фосфорнокислый оцнозамещенный, натрий хлористый, натрий сернистокислый и аммоний хлорисгый при следующем количественном соотношении компонентов, г/л вопч:

Агар 14,0-1 6,0

Натрий пировииограцнокислый 0,9-1, 1 (, -Мет ионин 0,02-0,03

L -Аспара гик 0,09-0,11

Никотиновая кислота 1,5-2,5.10

-4

Кальций пантотенат 1,5-2,5.10

-1

Биотин 0,5-1 ° 5.10

Калий фосфорнокислый оцнозамещенный

Натрий хлористый 7,3-7, 7 около 2 10и. Посевы выдерживают в термостате при 37 С. Учет роста производят цважцнп через 5 и 10 сут визуаль-. но в крестах.

Bcего изучено 32 штамма бруцелл, среди которых 4 -Btucetta юейМеич13, 6 -Ъ ..ФзоИой, 8 -3гос,ецио svis

10 -Вг.rangife, 1 - S-. heoto e, 2 - В- оч1в, 1 - а-осеЕЕЬ соттв.

10 В таблице приведены данные роста бруцелл разных видов на питательной среде. Результаты испытания ростовых качеств среды показывают, что на прецла15 гаемой среде растут все испытанные штам» мы бруцепл разных вицов (см. таблицу).

Предлагаемая среда для возбудителя бруцеллеза содержит меньше число ингредиентов и в меньших количествах, чем

20 известных видов.

Среца позволяет при одинаковых рос° товых условиях изучать влияние различных дополнительных компонентов (мутагены, антибиотики и т.ц.) на биологические свойства, в частности на питательные потребности, бруцелл разных видов.

Brucel Ia

melitensis

16М

63/9

: Ether

И-32

544

Brucella

abortus

86/8/59

Tul уа

870

63/75

376/5 723

Brucella suis

Th0msen

686

192

И91

3 М3702

Натрий сернистокиспый 0,09-0, 1 1

А ммоний хлористый О, 9-1, 1

Готовят среду следующего состава, г/л: агар Дифко 15,0; хлористый натрий

7,5; фосфорнокиспый калий оцноэамещен« ный 2,7; сернистокислый натрий 0,1; хлористый аммоний 1,0; пировинограднокислый натрий 1,0; g -метионин 0,025;

-аспарагин 0,10, а также, Mt". никотиновая кислота 0,2, пантотенат кальция

0,2; биотин 0,0001 и воца дистиллированная - остальное. Среду нагревают цо полного расплавления арага, доводят рН цо 6,8 и;стерилиэуют íà водяной бане при 100 С 30 мин. Готовую среду разли» вают в стерильные чашки Петри по 30мл.

После застывания и поцсушивания среду, используют в течение 7-15 дней при условии ее хранения в холодильнике.

Испытуемые культуры бруцелл выращивают на глюкозоглицериновом агаре

Мартена, рН 6,8, при 37оС в течение

48 ч. На пластинки arapa засевают о взвесь бруцелл густотой 10 микробов по оптическому станцарту мутности ГИКС при помощи репликатора с диаметром штырьков 4 мм. Посевная доза при етом

933702 в

Продолжение таблицы б.Ф.

И-93

645

Brucella

rangiteri

1 81/ - 38/

И-17

И-49

И-227

-283

И-289

И-292

И-293

1/20/1 .

1/20/2

Brucella

neotomae

5К33 н+

Brucella ovis

63/290. И-19

Brucel Ia сап ь РМ6/66

0,02-0, 03

0,09-0, 1 1

1,5-2,5. 10 .1,5-2,5. 1 0

0,5-1,5. 1 0

Заказ 3863/6 Тираж 505 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г., Ужгород, ул. Проектная, 4

Формула изобретени я Р -Метионин

Синтетическая питательная среда. для l,-Аспарагин выращивания бруцелл, содержащая агар . Никотиновая кислота источник углерода, аминокислоты, винтами-. Кальций пантотенат ны,: минеральные соли и воду, о т л и - З Биотин ч а ю щ а я с я тем, что, с целью иовы- Калий фосфорнокислый шения ростовых свойств среды. она s .однозамещенный 2,5-2,9 качестве источника углерода содержит Натрий хлористый 7,3-7,7 натрий пировинограднокислый, в качестве Натрий сернистокислый .0,09-0,11 аминокислоты - „-метионин и l -аспа- 4е Аммоний хлористый 0,9-1,1 рагин, в качестве витаминов - никотинову кислоту кальци» HRHT07eHBT " биотин Источники информации, в качестве минеральных солей - калий принятые во внимание при экспертизе

Яюсфорнокислый однозамещенный, натрий . хлоРистый, натРий сеРнистокислый и аммо-iS 1.. Кондратьева О. В., Степанов В. М. . ний июристый при следУющем количествен- К излучению питательных потребностей ном соотношении компонентов, г/л воды: бруцелл Сообщение 1. Сб. МикробиолоАгар 14 0-16. 0 гия и иммунология особо опасных инНатрий пировиноградно- фекций", Саратов, МЗ, 1968, с. 335 кислый О, 9-1, 1 336.

Составитель С. Малютина

Редактор Т. Веселова Техред М.Рейвес Корректор К). Макаренко