Способ определения бактерицидности производственных сточных вод

Способ определения бактерицидности производственных сточных вод

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Союз Советскик

Социалистическии

Республик

ОП ИСАНИЕ

И ЗОБРЕТЕ Ы ИЯ

934323

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (6l ) Дополнительное к ввт, свиид-ву(22) Заявлено 04. 11. 80 (21) 3003302/29-26 с присоединением заявки йе(23)Приоритет

Опубликовано 07. 06 . 82. Бюллетень Jg 2 ) (5! )М. Кл.

G 01 N 21/77

С 02 F 5/10

3Ьсудврстмииый комитет

СССР ао делам изебретеиий и открытий (53) УДК 628. 543 (088.8) Дата опубликования описания 07. 06. 82 (72) Авторы изобретения

Е.Г. Выглазова, Г.П. Черныш и Л.Н. Бала анова -:: - " Я (71) Заявитель

Белгородский филиал Всесоюзного научн витаминного института (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БАКТЕРИЦИДНОСТИ

ПРОИЗВОДСТВЕННЫХ СТОЧНЫХ ВОД

Изобретение относится к биохимической очистке сточных вод и может быть использовано для быстрого определения бактерицидности производственных сточных вод и их компонентов, а такжв для контроля за работой сооружений.

Известен способ контроля качества биохимической очистки сточных вод, заключающийся в,сравнении двух видов !

О дегидрогенаэнои активности исходнои иловой смеси с добавлением 1-23 неочи. щенной сточной воды и оценке качества биохимической очистки по разности во времени появления окрашивания

15 сравниваемых образцов (1 ).

Количество добавляемой неочищенной сточной воды устанавливают в зависимости от значения ее БПКполн.

Контроль за изменением дегидроге20 назной активности осуществляют, используя известное свойство трифенилтетразолия хлористого изменять окраску при переходе из бесцветной окис2 ленной формы в окрашенную (формаэан) восстановленную, когда в образце возникают анаэробные условия.

Способ может быть применен для контроля качества процесса биохимической очистки промышленных сточных вод.

Однако использование визуального метода фиксирования момента окрашивания приводит к снижению точности определения.

Наиболее близким по технической сущности и достигаемому результату к предлагаемому является способ определения бактерицидности производственных сточных вод и их .компонентов, который включает следующие операции: наливают в ряд пробирок по

10 мл исследуемой сточной воды или искусственного раствора с исследуе-! мым бактерицидным соединением в раз. личных разведениях. В контрольную пробирку наливают по 2 мл лловой жиак сти с адаптированным активным

15

20 е25

3 9 илом и после тщательного перемешивания по .!,5 мл 1ь-ного раствора

2,3,5-трифенилтетразолия хлорида (ТТХ), что соответствует

0,48 10 моль/л в конечном объеме исследуемого раствора. Содержимое пробирок вновь перемешивают и пробир ки ставят в термостат или водяную баню с температурой 37 С. Через определенный промежуток времени в зависимости от степени развития бактериальной флоры активный ил приобретает окраску от розового до рубинового цвета за счет образования кристаллов формазана (2 ).

Недостатки известного способа заключаются в сравнительно -низкой чувствительности и недостаточной скорости определения (продолжитель ность анализа 2 ч).

Цель. изобретения — увеличение точности и чувствительности с одновр менным сокращением времени определения бактерицидности производственных сточных вод.

Указанная цель достигается тем, что в способе, основанном на сравнении различных видов дегидрогенаэной активности иловой смеси при 35-37 С, включающем операцию добавления в образцы раствора соли тетразолиЭ с последующей оценкой бактерицидности по окрашиванию сравниваемых образцов, в качестве соли тетразолия используют раствор бромистого 3-(4,5диметилтиазолил-2)-2,5-дифенилтетразолия (МТТ) концентрации 0,74 1040,56 10 моль/л в конечном объеме исследуемого раствора.

На фиг. 1 представлено изменение дегидрогенаэной активности с ростом концентрации МТТ; на фиг. 2 - зависимость накопления формазана от времени: а - при применении соли МТТ, d- соли ТТХ.

С ростом концентрации MTT (фиг.1) наблюдается увеличение дегидрогеназной активности. Однако при концентрации более 0,56 ° 10 моль/л отмечено ингибирование микроорганизмов актизного ила, и кривая дегидрогеназной активности падает, в связи с чем в качестве рабочих пределов выбраны концентрации МТТ в конечном объеме исследуемого раствора 0,74"10 0,56 10 моль/л.

Для TTX предельно допустимой концентрацией, при которой не наблюдается иt-!гибированич, является

34323 4

0,8 10 моль/л, а рабочей концентрат 3 цией выбрана концентрация

0,48 10 моль/л в конечном. объеме исследуемого раствора.

Наблюдаемое явление можно объяснить гораздо большей проницаемостью

MTT в микробную клетку и подключения этого акцептора в более глубокие места дыхательной цепи.

Следовательно, в предлагаемом способе расходуется меньше реактивов и возрастает чувствительность.

В табл. 1 приведены результаты определения общей дегидрогеназной активности микроорганизмов активного ила предлагаемым и известным способами.

Из табл. 1 видно, что ошибка воспроизводимости результатов по предлагаемому способу почти вдвое ниже, чем по известному, В табл. 2 приведены сравнительные исследования зависимости накопления формазана от времени.при использовании МТТ и ТТХ, показывающие, что использование МТТ в предлагаемых пределах позволяет сократить время определения до 15-20 мин вместо 2 ч с ТТХ

Способ осуществляют следующим образом.

Наливают в пробирки одинаковые объемы (10 мл) сточной воды или искусствен toro раствора. В контрольную пробирку наливают такой же объем раэбавляющей воды. Затем доливают во все пробирки по 2 мл иловой жидкости с адаптированным активным илом (содержание 9,2-10 мг). Содержимое пробирок тщательно перемешивают и добавляют раствор MTT из расчета

0,74 ° 10 -0,56 1О моль/л в конечном объеме исследуемого раствора.

Содержимое пробирок вновь тщательно перемешивают и термостатируют при

37 С. Через 15 мин процесс восстановления прекращают добавлением к испытуемой.смеси 1 мл ледяной уксусной кислоты, которую вносят непосредствен но в осадок, и смесь центрифугируют

10 мин при 5000 об/мин. Осадок выдерживают в растворителе, например спирте,до полного обесцвечивания.

Затем вновь центрифугируют и окрашенные вытяжки калориметрируют на фотоэлектрическом абсорциометре- нефеломет. ре--69 со светофильтром Ю 1 в кювете

10 мм.

323

Табли ца 1.

Дегидрогеназная активность, мг/г мин.

Ошибка воспроиз- Время проведения водимости, 3 анализа, Способ

126,3 + 11,0

509,0 + 24,0 8,7

+ 4,8

2,0 - 3,0

0,3 — 1,0

Известный

Предлагаемый

Т а б л и ц а 2 (120 мин) (20 мин) ТТХ

МТТ

Оптическая плотность

Концентрация формазана, мг/л

Концентрация формазана, мг/л

Оптическая плотность

65,о

37,8

О, 825

0,820

О, 920

0,920

65,0

37,7

67,5

40,3

0,870

0,955

34,0

0,928

66,0

0,740

0,760

62,0 о,855

34,9

66,о

0,928

34,5

О, 759

5 934

Пример 1. В первую пробирку помещают 10 мл сточной воды Белгородского витаминного комбината, во вторую 10 мл воды (контроль). Затем в каждую пробирку вносят по 2 мл S иловой жидкости с адаптированным активным илом (содержание 9,2-10 мг).

Перемешивают и добавляют по 1 мл

0,14-ного раствора. МТТ (т.е.

О, 19 10 моль/л в конечном объеме), повторно перемешивают, помещают в термостат при 37 С. Через 15 мин добавляют к испытуемой смеси 1 мл ледяной уксусной кислоты.

П р м е р 2. Определение ведут 15 аналогично примеру 1.

В табл. 3 приведены результаты анализа исследуемой и контрольной про. бы сточной воды по примерам 1 и 2.

Ингибирование дегидрогеназной активности больше чем на 204 указывает на токсичность промышленных сточных вод.

Применение предлагаемого способа для ускоренного определения бактерицидности производственных сточных вод позволит повысить в два раза точность определения, снизить расход реагентов и повысить чувствительность метода. При этом время определения сокращается с 2 ч до 15 мин, т.е.. приблизительно в восемь раз.

его использование на очистных сооружениях обеспечит санитарный эффект за счет оперативного контроля за состоянием активного ила и определением токсичности воды при биохимической очистке.

934323

Т а б л и ц а 3

Пример

Проба воды

Концентрация

АИ, r/л

ЗольКонцентрация формазана

10, мг/л

Оптичес

Удельная

ДАИ мл/л

Инг.уд.

ДАИ, 3 ность, r/ë кая плотность раствора

1 Сточ- 7,4 2,68 0,382 17,3 0,365 ная

1,88

Контроль

0,388 17,8

0,372

7,4 2,69 0,296 13,5

0,282 24,2

2 Сточная

Контроль

0,388 17,8

0,372

Формула изобретения

Способ определения бактерицидности производственных сточных вод путем сравнения различных видов дегидрогеназной активности иловой смеси при 35-37 С, включающий введение в о6разец соли тетразолия с последующей оценкой бактерицидности по интенсивности окраски, о т л и ч а ю щ и и

35 с я тем, что, с целью сокращения времени и повышения точности анализа, в качестве соли тетразолия используют раствор бромистого 3-(4,5Риму

Arz

I диметилтиазолил-2)-2,5-дифенилтетразолия концентрации 0,74 10 40,56 -10" моль/л в конечном обьеме исследуемого раствора.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Авторское свидетельство СССР

И 654548, кл. С 02 С 1/02, 1976.

2. Зотов В. Ускоренное определение бактерицидности производственных сточных вод и их компонентов. — "Водоснабжение и санитарная техника", 1972, Ю 3 (прототип).

934323

Ю Ю Ф 120 1Я f8

2rrue

Составитель А. )жаворонкова

Редактор А. Лежнина .Техред Т. Иаточка

Корректор В. Синицкая

Подписное

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Заказ 3916/37 Тираж 887

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

IlO 3 6 eT H H OTKpbfTNH

113035, Иосква, Ж-35, Раушская наб., д 415