Штамм клубеньковых бактерий сои rнizовiuм jароniсuм 629 @ 187 (вниисхм)-активный симбоитический азотфиксатор
Иллюстрации
Показать всеРеферат
ОП ИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕН ИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Союз Советских
Социалистических
Республик
« «939547 (6! ) Дополнительное к авт. свнд-ву(22) Заявлено 05. 01.81(21) 3232824/30-15 с присоединением заявки М— (23) Приоритет—
Опубликовано 30. 06. 82. Бюллетень М 24 (53)М. Кл.
С 12 N 1/20 т1теударстмнный квинтет
СССР вв делан изобретений и открытий (53) УДК 576.851. .155 (088.8) Дата опубликования описания 30. 06. 82
А.Т. Новикова, Г.А. Бондаренко, А.В. Хотянович и А.И. Позднякова (72) Авторы изобретения
l т
Всесоюзный научно-исследовательский институт сельскохозяйственной микробиологии (71) Заявитель (4) ШТАММ КЛУБЕН6КОВЫХ БАКТЕРИЙ СОИ RHIZQBIUM
JAPONIGN 629 (87) (ВНИИСХМ) - AKTHBHHA
СИМБИОТИЧЕСКИЙ АЗОТФИКСАТОР
Изобретение относится к микробиологическим средствам повышения урожайности бобовых культур и представляет собой новый штамм клубенько" вых бактерий сои Rhizobium jagonicum 629+, (87), предназначенный для промышленного изготовления препаратов клубеньковых бактерий под сою.
Известен бактериальный препарат нитрагин на основе использования симбиотических азотфиксирующих микроорганизмов - клубеньковых бактерий - широко применяемый для повы- . шения урожайности бобовых культур 1 1).
Однако в известном препарате т5 недостаточно хорошие технологические свойства, т.е. пригодность для промышленного изготовления препаратов клубеньковых бактерий.
Известен штамм клчбеньковых бактерий сои Rhizobium japonicum б46, который в настоящее время используется для изготовления нитрагина f 2).
Недостаток известного штамма— относительно невысокая азотфиксирующая активность и конкурентная способность.
Цель изобретения - получение штамма клубеньковых бактерий сои с более высокой азотфиксирующей активностью и конкурентной способностью в сравнении с известным штаммом для получения более высокого урожая зерна сои с повышенным содержанием в нем белка, одновременно обладающего хорошей технологичностью при массовом производстве препарата.
C%
Ятамм ИпгоЬипп japonicum 629 (87) является высокоэффективным симбиотическим азотфиксатором.
Хранится в коллекции клубеньковых бактерий Всесоюзного научно-исследовательского института сельскохозяйственной микробиологии в r.Ëåнинграде и имеет регистрационный номер 629 се
3 93954
Бактерии штамма 629 (87 ) выделены из клубеньков сои сорта Смена, произраставшей на бурой луговой почве
Приморского края. Растут на питательных средах следующего состава: s люпиновый агар, г/л: К НР04 0,5 .
КНаРО. 0,5; И О 0,2; WCe0,2; СаО,, 0,1; (Н4,) ИоО следы, маннит 20,0; люпиновая мука 10,0," агар 20,0; рН. среды 6,8-7,0. Гороховый агар, г/л: горох 100,0, сахароза 20,0, агар
20,0 рН среды 6,8,-7,0.
Иорфолого-культуральные признаки.
Величина клеток пятисуточной культуры на люпиновом агаре 2,0- )5
5,0х1,0-1,3 мк. Палочки в молодом возрасте подвижные, монотрихи. Бактероиды - такие же палочки,,как и клетки в молодом возрасте, лишь значительно крупнее. Иедленнорасту- 20 щая культура. Штрих на люпиновом агаре обильный, умеренно слизистый, белый. Колонин на гороховом агаре на 7-8-ой день мелкие, круглые выпуклые, слизистые, белые, до 1,5 мм25 в диаметре. физиолого-биохимические признаки.
Иолоко с лакмусом не пентонизирует; подщелачивает. Желатину не разжижает. Аэроб, оптимум температуры зв
7 4
26-28 С. Оптимальное значение рН
6,8-7,0.
Отношение к углеводам.
Хорошо используют лактозу, мальтозу, рамнозу, сорбит, маннит, сахарозу> слабее — глюкозу, декстрин, галактоэу; очень слабо - ксилозу.
Не усваивают клетчатку и крахмал.
Отношение к источникам азота.
Растут на средах с аммонийными и аэотнокислыми солями. Иаксимальный рост достигается в присутствии аминокислот глицина и тирозина.
На ИПА бактерии не растут.
Серологическая характеристика..
Бактерии имеют антигены серогруп-i пы 617. Признаки штамма устойчивы.
Штамм не патогенен. Пересевается один раз в 6 месяцев и хранится о на люпиновом агаре при Й-5 С.
Азотфиксирующая активность штамма 629о (87) определяется по высоте урожая и содержанию в нем белка в полевых опытах. Географической сети опытов с нитрагином в 19751978 г.г. В схему каждого опыта включен в качестве эталона штамм 646.
Результаты этих исследований представлены в табл.l.
939547
CV
>.О м
СМ ш .;1
- 3
- . -0.
С0 м -.т
О0 сч м
- 2 О л л сч
М -0-а О ш. л л л сч м о м л х
2i
Э о с с4 о
° е а
О LA
CV - 1" N ш
С > со м о л
С
°
m м е л о
С:>
° О ш е — С > л л л м в ш ш м л
СМ л
0О
С 4 .О ш м
СЧ
S о и с м
СМ ш лл
Я Се ) С0 м л м
C>I л е, л. 00 л
CD ш О
° л
Cjl c
СМ
0 1 л
С е 1
CD ш
СМ
СС
1 Ig о х
m u
СС а сп
-з.
g>
1 Ig
СЭ Z
=1 х о
СО Л
Z - Л
S СЧ
Се>
01 IL а С0
0I о
1 Ю сх л
X O а
ID K
X >О
1 Z о
E
Ig
1>Х
Х
Ig
1о
IZ:
:1
Iо
С
Е с ч
0I с
0) E о
X
1э
X о о
Iз с о
Сс.
IQ
Х
1Б с о х и х о
)X и х
Ig
С0 х и
ji а
ЬС
Ig
Ф
Z о
С:
>S СО
S а 01
Cg хш
Щ
tQ 01
>ХС л X
I2 С0
О 1
Z> .0 С
Z O
0) сс
>) .Л
1.о Х
1Y е е
С>Ъ
-1 СО Л =1- m СО л л л е о л СО О >,О 1О â€” . м м м сч м м сч О -т .ш >О с4 м Ch е л ° л л л о ш ш ш т сч сч
K т
Ю
>Х
X Z
V >X
)Х S
X X о о о о х а С0
0I и а
1В
N м ш О л сО о и
tg
Cf 3 Х о е
I- 01
З Z
1- Ig с0 оа с0 О
Cg>YO
0I 6
z m
ct сои
0I S 01 а асч
С Э
Повышение сбора белкас ra по сравнению со штаммом
646, кг
Валовой сбор белка с гектара, кг
Прибавка урожая
Содержание белка в зерне,4
Урожай зерна, ц/га по сравнению со штаммом 646, ц/га по отношению к контролю, ц/га
Без инокуляции контроль
586
36,6
16,0
Инокуляция штаммом 646 21,9
42,0
920
5,0
Инокуляция штаммом
1074
629О(87 ) 154
8,8
24,8.2,9 18,1 43,3 тара, чем при использовании штам ма 646.
Эффегтивность нитра гина (гамма ризоторфина,)изготовленного на штамме 629+(87), проверена в производ. ственных условиях Крымской области в 1979 г. Урожай зерна сои при применении этого штамма на площади
260 га выше на 1,5 ц, а чистый доход больше на 32,56 рубля с гекФормула изобретения
Штамм клубеньковых бактерий сои
Rhi zobium. 1яроп слп 629% 871 (ВПИИСХН)активный симбиотический аэотфикса7 939547 8
Как видно иэ табл. 1, предлагаемый вами дает высокие титры при выра2 d(8
Э штамм 629 (87) отличается от извест- - щивании на жидких регламентных ного штамма 646 более высокой актив- средах и в торфяной культуре ф преностью азотфиксации. При инокуляции парат ризоторфии7. Бактерии штамма сои бактериями штамма 629 (87) уро- g 629 (87) хорошо сохраняются в. жай зерна повышается на 7,3 ц/ra, торфяном препарате при его длительчто на 3,1 ц/га или 17,34 выше, ном хранении. Изложенное показывает чем. при использовании штамма 646. возможность использования штамма
Содержание белка в зерне сои, бакте- 629ш(87) для промышленного изго.риэованной предлагаемым штаммом, на 10 товления препаратов клубеньковых бак1,6 выше, чем при применении иэвест- терий под сою. ного штамма.
Бактерии штамма 629 (87 ) обладают
В течение 5 лет предлагаемый более высокой конкурентной способ- штамм 6290(87)испытывался на Крымностью, чем бактерии штамма 646: ской сельскохозяйственной опытной при смешанной инокуляции сои этими станции. Урожай зерна сои, семена штаммами 853 клубеньков на корнях которой обрабатывали штаммом 629О растений образуют бактерии предла- (87), в среднем на 2,9 ц/га выше, гаемого штамма. Они имеют также чем при применении штамма 646. При широкий спектр инокуляции, так этом содержание белка в зерне сои как вступают в эффективный симбиоз выше на 1,34, В результате валовой с различными сортами сои. сбор белка с гектара посева с приШтамм 629 с1 (87 ) характеризуется менением инокуляции штаммом 629 высокими технологическими свойст- (07 ) увеличился на 154 кг (табл.2).
Табли ца 2
Урожай зерна и валовой сбор белка при инокуляции сои штаммами Rhizobium jaionicufii 646 и 629С (87) на Крымской сельскохозяйственной опытной станции за 1975-1979 r.г. (среднее из 5 опытов) тор, предназначен для промышленного изготовления препаратов клубень ковых бактерий под сою. Хранится в коллекции клубеньковых бактерий
Всесоюзного научно-исследовательского института сельскохозяйственной микробиологии в г.Ленинграде под номером 629О.
939547
Источники информации, принятые во внимание при экспертизе
1. Дорсинский Л.М. Клубеньковые бактерии и нитрагин. Л., "Колос", 1970, с.51, 123.
2. Авторское свидетельство СССР
И 491695, кл. С 12 К 1/00.
Составитель А. Грачев
Т М. Тепер Ко екто E. з 599/ р 505 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, N-35, Раушская наб., д. 4/5 филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная,