Способ получения вещества, обладающего противоопухолевым действием
Реферат
(19)RU(11)944191(13)C(51) МПК 5 A61K35/30Статус: по данным на 17.12.2012 - прекратил действиеПошлина: учтена за 20 год с 26.08.1999 по 25.08.2000
(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВЕЩЕСТВА, ОБЛАДАЮЩЕГО ПРОТИВООПУХОЛЕВЫМ ДЕЙСТВИЕМ
Изобретение относится к медицинской промышленности и касается выделения биологически активного вещества из органов животных. Предложенный способ в патентной и научно-технической литературе не описан. Целью изобретения является получение вещества, обладающего противоопухолевым действием. Способ получения вещества, обладающего противоопухолевым действием, характеризуется тем, что эпиталамо-эпифизарную область мозга животного обрабатывают ацетоном при отношении ацетона к сырью (8-10):1 при температуре 1-4оС, затем измельчают, экстрагируют 3%-ным раствором уксусной кислоты в присутствии хлористого цинка, экстракт центрифугируют, полученную надосадочную жидкость обрабатывают ацетоном при температуре (-3)- (-5)оС, промывают ацетоном, эфиром при той же температуре, далее осадок растворяют 1%-ным раствором уксусной кислоты с добавлением гликокола при соотношении 1:3, стерилизуют и лиофилизируют. П р и м е р. В качестве сырья для получения экстракта берут мозги крупного рогатого скота в возрасте 1-3 года. Непосредственно после убоя животных и извлечения мозга выделяют эпифизу, субкомиссуральный орган и габенулярную область. Выделенные куски мозга очищают от сосудов, сгустков крови и взвешивают. Берут 1 кг сырья. С целью частичного обезвоживания, обезжиривания сырье заливают 9 л охлажденного ацетона, затем периодически перемешивают каждые 6 ч. Через 24 ч инкубации ацетон заменяют свежим, а еще через 24 ч после замены ацетона сливают. Сырье взвешивают. Вес после обработки ацетоном уменьшается на 30% за счет потери воды и жировых веществ. Вес стал 700 г. Сырье пропускают через волчок-мясорубку. Измельченное сырье заливают 3%-ным раствором уксусной кислоты с температурой 1оС (в соотношении сырья и раствора 1:7); рН раствора 2,5; экстракцию проводят в течение 72 ч периодически (через 6 ч), перемешивая по 3 ч на шуталь-аппарате. С момента экстракции к раствору уксусной кислоты добавляют хлористый цинк из расчета 1 кг хлористого цинка на 1 л раствора. После окончания экстракции субстрат центрифугируют в течение 20 мин со скоростью 3000 об/мин. Прозрачную надосадочную жидкость декантируют и к ней добавляют ацетон с температурой -5оС в соотношении 1:6 (6 частей ацетона). Через 1 ч полученную смесь перемешивают, а через 2 ч от начала осаждения супернатант декантируют. Оставшийся осадок промывают 3 раза ацетоном и 3 раза эфиром при температуре -5оС. Затем осадок помещают на фильтр и высушивают на воронке Бюхнера. Образовавшийся порошок собирают с фильтра и досушивают на воздухе для удаления паров ацетона и эфира. Вес полученного порошка 7 г. Полученный белый порошок, без запаха, растворяют в 1%-ном растворе уксусной кислоты. Добавляют гликокол (на 1 г порошка 3 г гликокола); рН 4,0. Раствор готовят таким образом, чтобы в 1 мл содержалось 10 мг порошка (сухого). Раствор стерилизуют в течение 20 ч с укупоркой флаконов. В каждом флаконе содержится 10 мг лиофилизированного порошка белого цвета. Изучение физико-химических свойств биологически активного вещества, выделенного из эпиталамо-эпифизарной области позволило получить следующие данные (см. таблицу). Результаты проведенного аминокислотного анализа вещества указывают на принадлежность его к веществам белковой природы (полипептидам). Вещество, полученное предложенным способом, обладает противоопухолевым действием. Наибольший противоопухолевый эффект наблюдается при гепатоме и аденокарценоме молочной железы. Препарат может быть применен при лечении заболеваний системы крови (лейкозы), лучевой болезни, некоторых видов злокачественных опухолей.
Формула изобретения
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВЕЩЕСТВА, ОБЛАДАЮЩЕГО ПРОТИВООПУХОЛЕВЫМ ДЕЙСТВИЕМ, характеризующийся тем, что эпиталамо-эпифизарную область мозга животных обрабатывают ацетоном при отношении ацетона к сырью (8 - 10) : 1 при температуре 1 - 4oС, затем измельчают, экстрагируют 3%-ным раствором уксусной кислоты в присутствии хлористого цинка, экстракт центрифугируют, полученную надосадочную жидкость обрабатывают ацетоном при температуре (-3) - (-5)oС, промывают ацетоном, эфиром при той же температуре, далее осадок растворяют 1%-ным раствором уксусной кислоты с добавлением гликола при соотношении 1 : 3, стерилизуют и лиофилизируют.РИСУНКИ
Рисунок 1PC4A - Регистрация договора об уступке патента Российской Федерации на изобретение
Номер и год публикации бюллетеня: 27-1999
(73) Патентообладатель:ООО "Клиника Института биорегуляции и геронтологии"
Договор № 8608 зарегистрирован 28.04.1999
Извещение опубликовано: 27.09.1999