Способ приготовления сенсибилизированных эритроцитов для определения в-лимфоцитов

Способ приготовления сенсибилизированных эритроцитов для определения в-лимфоцитов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Союз Советских

Социалистических

Республик

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 30.07.80 (21) 2963326/28-13 с присоединением заявки №вЂ” (23) Приоритет— (51) М. Кл.з

А 61 К 39/00

Гоеударствелный комитет

СССР

Опубликовано 23.07.82. Бюллетень №27 (53) УДК Ъ 616-07 (088.8) ло делам каобретевий и открытий

Дата опубликования описания 28.07.82(72) Авторы изобретения

P. В. Хомерики, В. P. Османова и М. Б. Дондоладзе

/

Онкологический научный центр Министерства здравоохранения Грузинской CCP (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ СЕНСИБИЛИЗИРОВАННЫХ

ЭРИТРОЦИТОВ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ В-ЛИМФОЦИТОВ

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для диагностики.

Известен способ приготовления сенсибилизированных эритроцитов для определения В-лимфоцитов путем растворения сухой гемолитической сыворотки в питательной среде в присутствии фенолового красного с последующей сенсибилизацией эритроцитов данной сывороткой и добавлением к полученной суспензии комплемента 11) .

Однако известный способ не обеспечивает высокой активности сыворотки.

Целью изобретения является повышение активности сыворотки.

Цель достигается тем, что согласно способу приготовления сенсибилизированных эритроцитов для определения В-лимфоцитов путем растворения сухой гемолитической сыворотки в питательной среде в присутствии фенолового красного с последующей сенсибилизацией эритроцитов данной сывороткой и добавлением к полученной суспензии комплемента, растворенную сыворотку предварительно подвергают ультрафиолетовому облучению 5 — 50 мин при длине волны 240 †2 нм и интенсивности 100—

250 мкВт/см при комнатной температуре.

Пример. Проводят приготовление рабочего раствора для выявления В-лимфоцитов. Раствор сухой, годный к употреблению гемолитической сыворотки кролика, иммунизированного эритроцитами барана, в питательном растворе Хенкса с феноловым красным в отношении 1 г: 1 мл, в объемах

0,5 и 1,0 мл, подвергают УФ-облучению от бактерицидной лампы БУ — 30, с максимумом энергии излучения (-80%) на длине волны 253,7 нм, интенсивностью облучения для расстояния «поверхность лампы — поверхность раствора» 25 см — 375 мкВт/см2 при комнатной температуре. В процессе облучения раствор находится в стеклянных цилиндрических ампулах с верхним открытым концом, диаметром отверстия 0,8 см (0,5 см 2), через которое УФ лучи проникают в ампулы (испытано 8 образцов). Пересчитанная средняя энергия УФ излучения, падающая на 0,5 см поверхности раствора, 2о заключается в интервале 100 — 250 мкВт/см поверхности. После облучения проводят разведение сыворотки — сначала 1:10, затем

1:100 (рабочее разведение) в питательном растворе Хенкса с феноловым красным, к разведенной сыворотке добавляют (1:1) 944579

Составитель С. Малютина

Редактор П. Коссей Техред А. Бойкас Корректор А. Дзятко

Заказ 5186/4 Тираж 714 Подиисное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж вЂ” 35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП «Патент», г. Ужгород, ул. Проектная, 4 эритроциты барана, разведенные в питательном растворе Хенкса с феноловым красным (2,5о/р-ный раствор) и далее по стандартной методике определяют количество В-лимфоцитов.

Предложенный способ позволяет повысить выход эритроцитов в 2 раза и обеспечивает высокую активность и экономию сухой гемолитической сыворотки при выявлении В-лимфоцитов в 2 раза.

1О

Формула изобретения

Способ приготовления сенсибилизированных эритроцитов для определения В-лимфоцитов путем растворения сухой гемолитической сыворотки в питательной среде в присутствии фенолового красного с последующей сенсибилизацией эритроцитов данной сывороткой и добавлением к полученной, суспензии комплемента, отличающийся тем, что, с целью повышения активности сыворотки, растворенную сыворотку предварительно подвергают ультрафиолетовому облучению в течение 5 — 50 мин по длине волны 240—

260 нм и интенсивности 100 — 250 мкВт/см при комнатной температуре.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. The Jornal of Experimental Medicine, .(M. Jondal, G. Holm and Н. Wigzell.

Surface markers of human Т and. В lymphocytes. l. А large population of lympho cytes forming nonimmune rosettles with

sheep red cellsj 1972, 136, № 2, р. 207 — 216.