Стимулятор митоза

Стимулятор митоза

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН Ия

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советскин

Социалистические

Республик (») 950392

1

/ г (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 26.12. 80 (21) 3226206/28-13 (51)М. Кл.

А 61 К 31/045 с присоединением заявки М—

1Ъеударстееный комнтет

СССР (23)Приоритет ао Лелем нзобретеннй и отнрытнй

Опубликовано 15. 08. 82 Бюллетень Мю 30

Дата опубликования описания15.08.82 (53уУДК 616.07 (088.8) (72) Авторы . изобретения

Б.В.Богуцкий, В.В.Николаевский, А.E..Åðåìåíêî

А.А.Тихомиров, М.И.Говорун, И.К.Иванов В.И

„Крючников

1 ....

k

) тф4 физических ии ; С "1

Ялтинский научно-исследовательский инст методов лечения и медицинской климатоло им. И.М.Сеченова (7l ) Заявитель (54) СТИМУЛЯТОР МИТОЗА

ОН н"сн

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть ис- пользовано в эксперименте на животных и изолированной культуре клеток для.стимуляции митоза.

Известны средства для ускорения процессов восстановления тканей, такие как метацил, френолон, ретаболил, сиренар 1).

Однако известные средства стимулируют, s основном, только гипертрофию клеток резацированного и повреж денного органа.

Целью изобретения является расширение ассортимента высокоэффективных стимуляторов митоза.

Поставленная цель достигается применением в качестве стимулятора митоза эвгенола (1-окси-2-метокси-4аллилбензола) — известного компонента 2о эфирного масла многолетнего полукустарникового растения рода Осimum

gratissimum (базилика эвгенольного) семейства Zabiata) (губоцветных).

Эвганол (1-окси-2-метокси-4-аллилбензол), полученный из эфирного масла базилика эвгенольного, желтоватая жидкость с запахом гвоздики, растворимая в спирте, эфире и других органических растворителях, ограничен" но - в воде.

Хймическая структура эвганола

Т.пл. - 10,3 С, т.кип. - 252,7 С, плотность 1,066 г/см (20 С7. 3

Испытание острой токсичности эвгенола на белых мышах весом 15- 18 r .показали, что доза, вызывающая гибель 504 животных (Д!со ) при внутрибрюшинном введении, равна 353 мг/кг.

Интенсивность счета

Куль, тура, И

Концентрация эмульсии эвгенола,3

Показатели достоверности различий каждая культура в среднем на концентрацию

0,5

196,5 + 23,5

220 р > 0,05

0 5

173

0,05

659ю5 + 99,0

759 р с0,05, 4

0,05

560

1487

0,005

0,005

0,0005

0,0005

14«,5+ 76,2 р c 0,001

1336

855

481 19,0 р >0,05

360

Контроль

С гепарином 210

240

225+1 5, О

С физиологическим раствором 143

100

121,5+21,5

3 95039

Экспериментами установлено, что эвгенол может быть введен в организм различными путями: внутрибрюшинно, внутримышечно, перорально, ингаляционно, интратрахеально, подкожно, íà- S кожно (хорошо проникает внутрь через кожные покровы). Применение эвгенола возможно в Различных формах, например в виде водной эмульсии, спиртового раствора, масляного раствора (мас- >В ло какао и другие растительные масла) .

Средство проверено s лабораторных условиях на культуре фибробластов.

Для этого в среду 199, содержащую телячью сыворотку, добавляют водную эмульсию эвгенола в концентрации 0,550 мг/100 мл.

При этом содержание всех указан ных ингредиентов находится в следующих соотношениях: среда 199-80 мл, телячья сыворотка 20 мл, эвгенол

0,5-50 мг.

Культуру клеток фибробластов легкого плода человека (посевная доза

15 000 клеток s 2 мл среды 199 с добавлением 20 сыворотки кРупного

° рогатого скота) помещают в пробирки в асептических условиях. Пробирки устанавливают в наклонном положении и ставят в термастат при 37 С. Через

72 ч проводят микроскопический контроль монослоя фибробластов. 0,5ьную водную эмульсию эвгенола, приготовленную с помощью ультразвукового дезинтегратора, разводят до концентрации соответственно 0,5; 0,05;

0,005; 0,00051.

В опытные культуры клеток добавляют по 0,1 мл эмульсии эвгенола укаэанных концентраций. Каждая концентрация эмульсии изучается на двух параллельных культурах фибробластов.

В контрольные культуры добавляют по 0,1 мл физиологического раствора, в контрольные культуры - 0,014 гепарина. Во все опытные и контрольные культуры клеток добавляют по 2 мкК и

Н -тимидина и вновь инкубируют 18 ч в термостате, Через 18 ч культуры изучают в световом микроскопе, затем сливают в среду, отмывают от несвязавшейся матки и готовят с счету импульсов на P --..счетчике.

В таблице приведены результаты опытов.

950392 формула изобретения

Составитель Т. Журавкина

Редактор Т. Веселова Техред К. Мыцьо Корректор С.Шекмар

Заказ 5801/10 Тираж 714 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", r. Ужгород,» уп. Проектная, 4

Полученные данные показывают,что, 0,0053-ная эмульсия эвгенола способствует значительному повышению включения изотопа Н в клетки. Зто свиЭ детельствует о повышении интенсивности метаболической и митотической активности клеток (р < 0,001) . Аналогичные данные получают при изучении культур в световом микроскопе: количество клеток в поле зрения при добавлении в культуру фибробластов

О,1 мл 0,0053-ной эмульсии звгенола в 4-6 раз превышает аналогичные показатели в контрольных культурах.

Приведенные данные показывают, что эвгенол является высокоэффективным стимулятором митоза

Средство может использоваться для ускорения регенерации тканей при проведении экспериментов, размножения культур клеток, необходимых для постановки опытов; получения данных для выявления скрыть1х нарушений в генетическом аппарате клеток при их делении.

Применение эвгенола (1-окси-2-метокеи-4-аллилбензола) в качестве стимулятора митоза.

Источники информации, принятые во внимвние при экспертизе

1. Полуденный Л.В., Сотник В,Ф

Хлапуев Е.Е. Зфирномасляничные и лекарственные растения. M., "Колос", 1979, с. 32-33.