Способ изготовления вакцины против трихофитии крупного рогатого скота

Способ изготовления вакцины против трихофитии крупного рогатого скота

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Способ изготовления вакцины против трихофитии крупного рогатого скота, включающий приготовление «питательной среды, состоящей из cyc,iia и агара, выращивание на ней культуры гриба, съем, гомогенизацию, добавление антибиотиков, приготовление защитной среды, содержащей сахарозу и желатин, стерилизацию защитной среды , смешивание гомогената с защитной средой, расфасовку, замораживание и сушку, отличающийся тем, что, с целью повышения иммуногенности вак1щны, в качестве культуры . гриба используют живую культуру- J ТФ-130 Л, вырапщвание ее проводят до концентрации 250-650,млн. .жизне (Л способных микроконидий на 1 мл пита тельной среды на сусло-агаре с кислотностью 1,6-2,4, причем стерилизацию защитной среды проводят паром в течение трех дней по 30 мин, а сушку проводят при температуре 20-40 С в течение 26-60 ч.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (11) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ABTOPCH0MV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

»-: ....

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 2894951/30-15 (22) 26 ° 03.80 (46) 07.11.84. Бюл. В 41 (72) А.Х.Саркисов, Л.М.Яблочник, Л.И.Никифоров, С.В.Петрович, К.П.Летягин, Т.Н.Махина, Г.Ф.Денисенко, И.И.л(арков, В.Ф.Ковалев и Ю.П.Чернецкий (71) Всесоюзный государственный научно-контрольный институт ветеринарных препаратов и Всесоюзный ордена Ленина институт экспериментальной ветеринарии им. Я. P. Коваленко (53) 615.371/372(088.8) (56) 1. Авторское свидетельства СССР

9268593, кл. С 12 К 5/00, 1970.

2. Патент Великобритании

91339240, кл. А 5 В 1973, (54) СПОСОБ ИЗГОТОВЛЕНИЯ ВАКЦИНЫ

ТФ-t30 (К) ПРОТИВ ТРИХОФИТИИ КРУПНОГО

РОГАТОГО СКОТА.

3(59 61 К 39/00 А 61 К 35/70р

С 12 1(1/14 С 12 R 1/645 (57) Способ изготовления вакцины против трихофитии крупного рогатого скота, включающий приготовление питательной среды, состоящей из сусла и агара, выращивание на ней культуры гриба, съем, гомогенизацию, добавление антибиотиков, приготовление защитной срецы, содержащей сахарозу и желатин, стерилизацию защитной среды, смешивание гомогената с защитной средой, расфасовку, замораживание .и сушку, отличающийся тем, что, с целью повышения иммуногенности вакцины, в качестве культуры гриба используют живую культуру

ТФ-130 Л, выращивание ее проводят Я до концентрации 250-650,млн..жизнеспособных микроконидий на 1 мп питательной среды на сусло-агаре с кислотностью (,6-2,4, причем стерилизацию защитной среды проводят паром в Я течение трех дней по 30 мин, а сушку проводят при температуре 20-40 C о в течение 26-60 ч.

955570 2

Изобретение относится к области ветеринарной микробиологии, в частности к способу изготовления вакцины против трихофитии крупного рогатого скота. 5

В настоящее время известен способ изготовления препарата ТФ-130 против трихофитии крупного рогатого скота, включающий приготовление питательной среды для выращивания культуры 1О

Trichophyton fariforme штамм 13(), засева, выращивания культуры, съема, гомогенизации культуры и разбавления ее физиологическим раствором (1) .

Недостатком данного способа являет.11, ся то, что полученный препарат имеет короткий срок годности и требует жесткий температурный режим хранения.

Известен также способ изготовления ,вакцины ЛТФ-130 против трихофитии 2п крупного рогатого скота, состоящий из приготовления питательной среды на основе сусло-агара для выращивания культуры Trichophyton fariforme штамм 130, засева, выращивания, съе- 2s ма кипения, гомогенизации культуры, приготовления защитной среды и ее. дробной трехдневной стерилизации при 100 С, смешения гомогената с о защитной средой в соотношении 1:1, расфасовки, заморозки и сублимационной сушки в аппаратах КС-30 и

ТТ-50 (2).

Недостатком данного способа является низкое спороношение культуры

Tryhaphyton fariforme штамм 130 и низкий выход вакцины, а также то, что для выращивания культуры брали сусло без учета его кислотности.

Размол-культуры и гомогенизатора не всегда обеспечивал выход мелкодисперсной массы, что неблагоприятно отражалась на качестве вакцины и ее выходе.

Сублимационную сушку вакцины проводили в аппаратах КС-30 и ТГ-50, однако не регулировали автоматически температуру полок. Это неблагоприятно сказывалось на качестве вакцины.

Цель изобретения — повышение иммуногенности вакцины и сокращение технологического цикла.

Для достижения указанной цели в способе, включающем приготовление питательной среды, состоящей из сус- Ы ла и агара, выращивание на ней культуры гриба, съем, гомогенизацию, добавление антибиотиков, приготовление защитной среды, содержащей сахарозу и желатин, стерилизацию защитной среды, смешивание гомогената с защитной средой, расфасовку, замораживание и сушку, в качестве культуры гриба используют дикую культуру ТФ-130 Л, выращивание ее проводят до концентраций 250-650 мпн, жизнеспособных микрокоиидий на 1 мл питательной среды на сусло-агаре с кислотностью

1,8-2 ° .4, причем стерилизацию защитной среды проводят паром в течение трех дней по 30 мин, а сушку проводят при температуре 20-40 С в течение 26-60 ч;

Пример. Приготовление питательной среды. Питательной средой для выращивания культуры Trichophyton fariforme 130 Л при изготовлении вакцины ТФ-130(К) служит суслоагар.

Для приготовления сусло-агара используют пивное неохмеленное сусло с кислотностью 1,9-3 4. Сусло подвергают дробной стерилизации текучим паром в течение 3 пней по

30 мин ежедневно. Простерилизированное сусло может храниться 30 дней при температуре не выше 15 С. Пивное о сусло разводят водопроводной водой (ГОСТ-284-73) нли дистиллированной водой (ГОСТ-609-72) до содержания углеводов по Баллингу 7-8, заливают в нарочный котел и устанавливают рН до стерилизации 7,0-7,4, а затем добавляют 2,5-3,0 агарагара (микробиологический ГОСТ-1720671), кипятят до растворения агара, фильтруют .через ватно-марлевый фильтр, разливают в стерильную посуду матрицы по 300 мл и в пробирки по 7 мл. Стернлиэуют 40 мин при

0,5- 0,7 атм. После стерилизации сусло агара рН должна быть в пределах

6,3-6,8. Матрацы с суслом агара после стерилизации для контроля на отсутствие микрофлоры выдерживают 2-3 суток в термостате при 26 и 37 С. Затем их тщательно просматривают на,чистоту.

Приготовление защитной среды.

Ь качестве защитной среды (среды высушивания) используют стерильный водный раствор, содержащий 20 сахарозы (ГОСТ-5833-54) и. 4 желатина (пищевой ГОСТ-11293-65) .

Дпя приготовления среды в горячую дистиллированную воду добавляют желатин из расчета 4 и после растворе3 955570 4 ния сахарозу из расчета 20Х (по весу) 130 и, выращенную на сусло arape на взятый объем воды, фильтруют и в матрацах, смывают 150-200 мл стерильустанавливают РН 7,0-7,4 . Стерилизуют ного физиологического раствора. ПолутекУчим паРом 3 днЯ подрЯд по 30 мин. ченную взвесь набирают пипеткой ИоПосле стериттизадии РН Должен быть ра или вставляют сифон в матрац и в пределах 6 2-6,8. Хранят в холодиль- засевают новые матрацы с суслоаганике пРи 2-8 С не более 15 дней. Ром (иэ расчета 5-7 мл грибной взвеЗаЩитную сРедУ проверЯют на сте-. си на один матрац). На каждом матраРильность. ДлЯ этого беРУт пРобУ сРе- це отмечают номер ш*амма и дату заседы, из котоРой делают высевы (по 1-2 10 ва, Количество засеваемых матрацев капли) по две пробирки íà NIA., МПБ определяется объемом выпуска вакцины.

Китт-Тароцци, сусло агар и агар Чапе- Засеенные матрацы ставят в термо-. о ка (помещают в термостат при 26 С), стат в полунаклонном положении и выпо две пРобиРки с ИПА, ИПБ и Китт-. держивают при температуре 26-28оС.

Тароцци помещают в термостат на 10 15 Выращивание культуры производят о днеи при температуре 37 С. После в течение 12-15 дней. Заметный рост термостатирования посевов в течение на сусло агаре появляется на 3-5-й о„

5 суток при 37 С их просматривают день. Культура должна покрывать и с ИПБ и Китт-Тароцци пересевают всю поверхность сусло агара. на те же питательные сРеды и выцержи-gp В процессе вырашивания матрацы вают еще .в течение 5 сУток пРи Ука- с культурой T.fariforme визуально заннои теМпературе Посевы Должны просматривают .начиная со второго

>Ф быть чистыми и не давать роста микро- дня, через каждые двое суток на нафлоре. личие постороннего загрязнения.

Посев и выращивания культуры Ь При бактериальном или грибковом Т.fariforme 130 Д. загрязнении матрацы выбраковывают

При посеве культуры из диофильно и немеДленно отпРавлЯют в Убивку высушенного состояния для полного (автоклавирование в течение 1 ч восстановления ее энергии роста при 2. атм) . требуется три пассажа. Ампулу вскры- ZO У вают над пламенем горелки, пастеровс- рацах для производственных целей

-кой пипеткой вносят в нее физиологиможет храниться в холодильнике при ческий раствор до полного растворения температуре 2-4"C a TeweHHe 10 дней, культуры. Полученную взвесь переносят Съем и гомогенизация,грибковой во флакон, содержащий 25 мл стериль-,5 массы. Матрацы с кУльтУРой Т.йагт.ного физиологического раствора с forme 130 Л предварительно протиРН 6,4-7,0. 1рибковую суспензию выдер- Рают спиртом, затем откРывают пройживают после растворения в течение . ки под горящими спиртовками или ч при комнатной температуре, за в газовыми горелками. Специальными тем высевают по 5 мл на 4-5 матрацев тО скребками снимают грибную массу с и ставят для выращивания в термостат поверхности сусло агара и с соблюс при 26 С на 12-14 дней. Периодически дением стерильности помещают ее культуру просматривают макроскопи- в стерильные банки с крышками или чески (визуально) на наличие посто- чашки Петри для последующего етерильроннего загрязнения. Рассев культуры 45 ного измельчения в гомогенизаторе

f для получения второй генерации делают миксере или коллоидной мельнице. через 12-14 дней после макроскопичес- Съем грибной массы следует вести, кого и микроскопического исследова- .не захватывая питательную среду. ния культуры, затем еще через 10- Для размола грибной массы исполь- .

15 дней делают рассев для получения 50 зуют гомогенизаторы (миксеры) третьей генерации. Третью генерацию различных марок. или коллоидные мелькультуры берут как производственную ннцы (1У-8, 1У-10) . В течение всего для последующих расплодок, предвари- времени загрузки, измельчения и тельно проверив на чистоту, концент- выгрузки биомассы темтература в paboрацию и жизнеспособность микрокони- з чих камерах (емкостях, где измельдине чается и циркулирует биомасса) гомоДля получения посевного материала генизаторов и коллоидных мельниц

10-15-дневную культуру Т.fariforme не должна быть выше 30 С.

3 9555

Режим работы коллоидной мельницы.

Для измельчения грибной массы, снятой с сусло-агара, могут быть использованы коллоидные мельницы с внесенными дополнениями в их » конструкцию. 5

Основным дополнением является съемная доводка (закрытый бункер), изготовленная иэ нержавеющей стали. В верхней крышке бункеров имеется герметически закрывающийся загрузочный tO люк диаметром 100 мм и два штуцера по 22 мм, один из которых используется для подачи стерильного воздуха в бункер, а второй посредством вакуумной трубки и тройника соединяется 15 с выходным патрубком коллоидной мельницы (для обеспечения циркуляции грибной массы во время размола).

Перед началом работы съемный бункер присоединяют к коллоидной мельни- 20 це. Один из штуцеров бункера посредством вакуумной трубки через тройник .соединяют с выходным патрубком мельницы и бутылью (через короткий сифон), а другой — с системой сжатого возду- 25 ха. В целях исключения поступления воздуха в бункер и попадания в него посторонней микрофлоры включают систему подачи стерильного воздуха, Зо что позволяет в момент загрузки массы поддерживать избыточное давление.

Через люк загружают в бункер грибную массу, антибиотики пенициллин и стрептомицин (иэ расчета по 300 ед. на 1 мл) и заливают стерильный физиологический раствор. В бункер ем> костью 40 л загружают культуру гриба, снятую приблизительно с 65 мат- 4о рацев. На зто количество грибной .массы в бункер заливают 10-33 л физиологического раствора.

Загрузочный люк бункера герметически закрывают, прекращают подачу 45 стерильного воздуха, регулирующим устройством. устанавливают. ножи на нулевую отметку, затем включают кол-, лоидную мельницу, которая производит размол грибной массы в течение 57 мин. В этот период суспензия (концентрат) грибной массы циркулирует по закрытой системе (из бункера в коллоидную мельницу и через вакуумную трубку вновь в бункер и т.д.).

Для исключения попадания суспенэии в баллон вакуумная трубка, соеди70 б няющая тройник с бутылью, эажимается зажимом, По истечении указанного срока времени работы коллоидной мельницы вакуумную трубку, соединяющую бункер с выходным патрубком мельницы, пережимают зажимом, а зажим со сливной трубы снимают. Перекачка грибной массы в бутыль проводится при включенной мельнице с одновременной подачей стерильного воздуха в бункер. Измельченная грибная масса поступает в бутыль, которая имеет два сифона (длинный и короткий), вмонтированные в пробку. Короткий сифон служит для приема грибной массы в бутыль иэ мельницы, а также для создания избыточного давления в момент слива содержимого в реактор при составлении герии вакцины. К наружному концу. длинного сифона присоединяют 1,52,0-метровую резиновую трубку, через которую берется проба для проверки стерильности. . Цеховой контроль грибной суспенэии.

Из полученной после развода концентрированной грибной массы с соблюдением стерильности берут пробу для проведения цехового контроля, определяют концентрацию грибной массы, количество мнкроконидий, проверку на отсутствие посторонней микрофлоры путем высевов по две пробирки на

МПА, MIH, Китт-Тароцци, а для выявления плесневых грибов на пробирки с агаром Чапека и сусло агаром. Посевы выдерживают в термостате при

37 и 26 С в течение 5-7 суток. По исФ течении указанного срока пробирки визуально просматривают.

Из пробирок с культурами на указанных средах делают мазки и просматривают их в иммерсионной системе.

При наличии пасторонйей микроФлоры суспензию уничтожают, путем автоклавировании при 2 ати в течение чБутыли с концентрированной грибной массой можно хранить в течение

5-7 суток в холодильнике при температуре 2-4 С.

Соединение гомогената с защитной средой. При получении положительных результатов цехового контроля приступают к смешиванию гомогената с защитной средой. Бутыпь с гомогенатом при помощи стерильного шланга присое9555 диняют к другой стерильной бутыли или ферментеру, снабженному мешалкой, куда перекачивают защитную среду

»высушивания и гомогенат в соотношении 1: 1.

Предварительно определяют концентрации гомогената по BOCM ¹10, исходя из того, что 1 млрд. по БОСМ приблизительно соответствует 6-10 млн. микроконидий в 1 мл. Используют гомо- 10 генат. содержащий 360-600.млн/мл микроконидий, что соответствует приблизительно 40-60 млрд. по БОСМ.

Всю работу проводят в стерильном о боксе при температуре не выше 25 С.. !5

Бутыль с гомогенатом устанавливают в шуттель-аппарат и тщательно перемешивают содержимое или используют ферментер с мешалкой, затем при периодическом перемешивании проводят 20 розлив вакцины.

Розлив по флаконы. Вакцину расфа— совывают по 2,5 или 5.мл в стерильные пенициллиновые флаконы (МВТУ

"64-2-15-15-69") емкостью 10 мл и по 25

10 мл в пенициллиновые флаконы емкостью 20 мл, что соответствует

10,20 и 40 дозам вакцины.

Сублимационная сушка вакцины

ТФ-130 К. Сушка вакцины состоит из

30 двух процессов: замораживания продук— та в низкотемпературном холодильнике и последующей сублимации (лиофилизации) в сублимационном аппарате.

Кассеты с материалом сразу после 35 розлива помещают в охлажденную от о

-40 до -50 С камеру холодильника типа КС-.70/250 или другого типа, обеспечивающую указанную температуру.

В 2-3 флаконах с вакциной в разных40 кассетах устанавливают датчики для снятия показаний температуры продукта в процессе сублимации. Материал промораживаю» при данной температуре в течение 6-20 ч.

Кассеты с замороженной вакциной в течение 2-3 мин, не допуская .оттаивания продукта,. перегружают в подготовленную и охлажденную камеру (в аппарате КС-30 охлаждают камеру от -40 до -50 С в аппаратах

Тà — от — 30 до -50 С, подключают датчики, закрывают крышку (дверцу) камеры и включают вакуумные насосы.

Спустя 1-3 ч при достижении показателей вакуума 9-10 (аппарат КС-30) включают нагрев полок до температуры 35-40 С. Нагрев поддерживают при

70 8 данной температуре до достижения о температуры продукта от -8 до -10 С» а затем повышают нагрев полок до 25 С и выдерживают его до окончания сушки.

В течение всей сушки нагрев полок поддерживают таким образом, чтобы температура продукта повышалась в 1 ч на 1-3 С. Продолжительность о сушки составляет 38-96 ч. В аппарате ТГ-50 продолжительность сушки составляет 18-96 ч, После завершения сушки камеру через специальный фильтр заполняют сухим стерильным воздухом или нейтральным газом.

Кассеты, закрытые марлевыми салфетками, переносят в бокс„ флаконы над спиртовками закрывают стерильными резиновыми пробками, закать1вают, металлическими колпачками и этикируют.

Хранят вакцину при теь.нературе

2-10 С.

Контроль вакцины ТФ-130(К). Вакцину подвергают контролю на. растворимость> наличие механических примесей и других посторонних включений. остаточную влажность, отсутстгие контаминации посторонней микрофлорой, количества микроконидий, типичность роста и морфологические признаки культуры, использованной для ее приготовления, жизнеспособность микроконидий, безвредность, иммуногенную активность.

Растворимость. Дня опрсделения растворимости во флаконы с вакциной вносят 10 мл растворителя (1 Н 6,27,0) . Содержимое флакона при встряхивании должно растворяться в течение не более 2-3 hGiH и иметь вид гомогенной взвеси.

Механические примеси. Для выявления механических примесей и других посторонних включений флаконы с растворенной вакциной просматривают в проходящем свете. Флаконы, включающие механические примеси и другие посторонние включения, бракуют.

Для определения внешнего вида, наличия механических примесей и других посторонних включений флаксны с сухой вакциной просматривают при встряхивании на свету, после чего проверяют их на плотность укупорки.

Для определения остаточной влажности берут 3 навески из отдельного флакона каждую и высушивают при о температуре 100-105 С в течение

955570 (В-С) 100

А= — — — ——

5

«k где С вЂ” вес навески после высушива« ния, r,  — первоначальный вес навески (вес вакцины), г. 10

За окончательный результат принимают среднее арифметическое результатов всех проб. Остаточная влажность каждого флакона из проверяемых флаконов с вакциной должна быть в пределах 15

1,0-3,5Х.

Для проверки отсутствия контаминации посторонней микрофлорой берут

5 флаконов с вакциной, разводят из расчета 1 доза в 5 мл растворите- 20 ля и высевяют на питательные среды.

Из каждого флакона по 1-2 капли высевают на питательные среды в пробирки: сусло-агар, агар Чапека, ИПА,. ИПБ и Китт-Тароцци. Посевы 25 на сусло-агаре и агаре Чапека, а также и.по две пробирки на ИПА, ИПБ и Китт-Тароцци выдерживают в термостате при 26оC в течение 10 дней. По две пробирки высевов на средах МПА, ИПБ и Китт-Тароцци выдерживают в термостате при 37 С в течение 10 дней.

После термостатирования.посевов в о течение 5 суток при 37 С их просматривают с МПБ и Китт-Тароцци пересе35 вают на те же питательные среды и выдерживают еще 5 суток при укаэанной температуре.

40 используя счетчик для подсчета коло50

1 ч. Содержание влаги (А) в процентах определяют по формуле

Посевы должны быть чистыми и не давать роста посторонней микрофлоры.

Пробирки со средой Китт-Тароцци предварительно прогревают в водяной бане при 30 С в течение 30 мин и затем охлаждают до 18-20 С.

Типичность роста. Посев на сусло агар должен давать характерный рост

Т.fariforme культуры 130 Л (при засеве суспензией) в виде ровной, порошистой, зернистой, стелющейся беловатой грибницы.

При микроскопии морфологические элементы представлены бесцветным, септированным, ровным мицелием, в диаметре 2-5 мкм. Микроконидии, овальной, округлой, грушевидной или палочковидной формы в диаметре

1-2 мк.

Проверку количества микроконидий, жизнеспособности микроконидий и контаминации проводят из одних и тех же флаконов спустя 2 ч после ресуспензирования вакцины.

Количество микроконидий определяют путем подсчета их в счетной камере

Горяева. 1 мл вакцины должен содержать не менее 6 и не более 12 млн. микроконидий.

Жизнеспособность микроконидий определяют в каждом из 5 флаконов контролируемой серии. Проверку вакцины на жизнеспособность микроконидий проводят проводят спустя 2 ч после ресуспендирования вакцины.

На каждый флакон берут 5 пробирок и в каждую пробирку пипеткой или бюреткой наливают по 4,5 мл растворителя (рН 6,2-7,0). Флакон с вакциной встряхивают, берут из него 0 5 мл суспензии и вносят в первую пробирку, перемешивают содержимое легким встряхиванием пробирки и новой пипеткой берут 0 5 мл и переносят во вторую пробирку и т.д., т.е. приготавливаЧ -5 ют разведения от 10 до 10 . Запрещается перемешивание пробирок пилеткой во избежание оседания на стенках пипетки микроконидий.

Из пятой пробирки каждого флакона пипеткой засевают по 0,5 мл в каждую из двух чашек Петри. Всего 10 чашек на серию. Легким покачиванием чашек распределяют суспензию по поверхности питательной среды. Засеянные чашки Петри помещают в термостат при 26 С. Количество выросших колоо ний подсчитывают на 7-9-й день, ний. Суммируют количество выросших колоний в 10 чашках Петри, полученный результат делят на 5 и умножают на 10 (степень разведения). Конечный результат соответствует количеству жизнеспособных микроконидий в 1 мп вакцины. Количество жизнеспособных микроконидий в каждом флаконе должно быть не менее 4 млн. и не более 12 мпн. в 1 мп.

Безвредность вакцины проверяют на морских свинках или белых мьппах по трем флаконам. На 1 серию берут 6 морских свинок массой 300-350 r или 6 белых мьппей массой 15-20 r.

Подкожно в область спины вводят морским свинкам по 0,2 мп, белым мышам по 0,1 мл вакцины, ресуспен12

955570 зированной из расчета 1 доза в 1 мл растворителя.

Наблюдение за животными ведут в течение 10 дней, Животные за время наблюдения должны оставаться живыми при удовлетворительном общем состоянии.

Каждая десятая серия проверяется на иммуногенную активность на

6 телятах 1-4-месячного возраста, 10 ранее не иммунизированных вакциной

ТФ-130 (К) и не болевших триход итией., Для этого используют 3 флакона. вакцины. Иммунизацию проводят согласно наставлению по применению вакцины 15

ТФ-130 К.

Критерием оценки активности служит образование у животных спустя

10-14 дней после второй иммунизации на месте введения вакцины на поверх- 20 ности кожи специфической локализованной корочки.

Один раз в шесть месяцев одна серия вакцины проверяется путем иммунизации и последующего экспериментального заражения. Спустя месяц после второй иммунизации 6 опытных и 3 контрольных (не иммунизированных) телят заражают месячной вирулентной культурой Т,fariforme путем втирания гомо- ЗО гената в предварительно выстриженный и скарифицированный участок кожи в средней трети шеи. Учет результатов проводят спустя 40 дней после заражения. Из 6 иммунизированных телят

5 не должны иметь клинических признаков трихофитии. Все контрольные телята цолжны проявить клиническую картину заболевания, которую подтверждают микроскопическими исследования-40 мие

Вакцина ТФ-130(К) против трихофитии крупного рогатого скота представляет собой однородную, аморфную, пористую, иногда кристаллическую сухую массу в виде тюбика без посторонних примесей серого цвета.

Срок годности вакцины ТФ-130 (К)

18 месяцев со дня изготовления и хра нения ее при температуре 2-20 С и о соблюдения правил транспортировки, хранения и применения.

Для производства одной серии вакцины ТФ-130 (К) объемом 170 тыс. доз необходимо расфасовать вакцину во флаконы по 10 мл в количестве 4680 штук, из которых 430 штук могут быть выбракованы по различным причинам (бой во время заморозки, бой во время обкатки, этикировки и т.д.) а деловых флаконов останется 4250 штук.

Сь|рья требуется для заполнения этих флаконов 4680х10 мп=46,8 л

Потери при розливе вакцины составляют 2,57., следовательно, сырья требуется 48,0 л. Для приготовления

48,0 л сырья необходимо иметь 24,0 л гомогената с концентрацией микроконидий 320 млн/мл и 24,0.л защитной среды. При съеме грибной массы и ее перемоле с одного матраца получается 100 мл гомогената.

Вакцину против трихофитии крупного рогатого скота применяют с профилактической .и лечебной целью. С профилактической целью ее вводят двукратно внутримышечно в область бедра в дозе 1-2 мл, а с лечебной целью—

2-4 мл, в обоих случаях с интервалом 10-14 дней, Вакцина ТФ-130(К) по сравнению с вакциной ЛТФ-130 обладает более высокой иммуногенностью, повышенной концентрацией и жизнеспособностью микроконидий. Выход вакцины с одного матраца увеличивается в 3-4 раза за счет повышения спорообраэопапия культуры ТФ-130 Л и уменьшения вводимого объема растворителя.

Вводимая доза вакцины в 5 раз меньше по сравнению с вакциной

ЛТФ-130 °

Технико-экономический эффект.

Ранее одна доза сухой вакцины

ЛТФ-130 растворялась в 5 мл специального растворителя, для чего промышленностью ежегодно выпускалось 800 тыс.л растворителя по цене 1,56 руб. за

1 л на сумму 1248 тыс . руб. При новом режиме одна доза сухой вакцинь1

ТФ-130 (К) растворяется в l мл специального растворителя, что позволит сократить его промышленный выпуск до 160 тыс.л. (800:5=f60) и снизить затраты на изготовление до

249,6 тыс.ру6 (160х1,56=249,6).

Экономический эффект составляет (1248-24916)=998,4 тыс.руб.

Эконоьмческая эффективность внедрения культуры ТФ-130 Л на Ставропольской биофабрике.

Всего за. 1975-78 г,из культуры

ТФ-130 Л изготовлено 92 146 000 доз.

Экономия, руб:

По питательной среде 2285

Матрацев 43240

Заказ 8917/1 Тирак 687

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская .наб., д. 4/5

Подписное

Филиал ППП "Патент", г. Ухгород, ул. Проектная, 4

Себестоимости вакцины 607242.

В 1977 r, на четырех биофабриках (Ставропольской, Приволжской, Галишинской, Омской). произведено вакцины,5

ЛТФ-130 135 231 тыс.доз. Годовой зкономический эффект составил Редактор П. Горькова Техред А.Бабинец

570. !4

652,764 руб. За 4 года в среднем зкономичесКий эффект. от внедрения культуры ТФ-.130 Л ВГНКИ составил

° 2 млн.руб.

Годовой эффект от внедрения концентрированной вакцины ТФ-130 (К) (998 4+652,7) 1, 650 тыс.руб.

Корректор М. Максимнщинец