Способ диагностики скрытых форм сахарного диабета
Иллюстрации
Показать всеРеферат
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
Союз Советских
Социалистических
Республик
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
М (61) Дополнительное к авт, саид-ву (22) 3аявлено 09.1080 (21) 3217435/28-13 ($11М. Кл.з
A 61 В 10/00
G 0l N 33/48 с присоединением заявки ¹ (23) Приоритет
Государственный комитет
С.СС P по делам изобретений н открытий (53) УДК 616-07 (088. 8) Опубликовано 150982. Бюллетень №34
Дата опубликования описания 150982 (72) Авторы изобретения
Матулявичюс, A.Ï. ян (71) Заявитель
Каунасский филиал Институт эндокринологии и химии (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ СКРЫТЫХ ФОРМ САХАРНОГО
ДИАБЕТА
Изобретение относится к медицине, в частности к эндокринологии, и касается диагностики скрытьк форм сахарного диабета.
Известен способ диагностики.скрытых форм сахарного диабета путем определения концентрации имкунореактивного инсулина в элементах крови (1). (О
Однако известный способ недостаточно точен, так как, например, у больных диабетом с ожирением наблюдается повышенный уровень имкуно-реактивного инсулина в плазме, и их результаты нельзя сравнить с резуль- 15 татами людей, имеющих нормальный вес, Цель изобретения - повышение точ-. ности диагностики скрытых форм сахарного диабета. указанная цель достигается тем, что в способе диагностики скрытых форм сахарного диабета путем определения концентрации нмкунореактивного инсулина в элементах крови, отличи- 25 тельной особенностью является то, что нммунореактивный инсулин определяют в э итроцитах, и по увеличению
его концентрации, по сравнению с нормой, диагностируют заболевание. 30
Способ осуществляется следующим образом.
В гепаринизированные пробирки забирают кровь 1 ч после 75 г пероральной нагрузки глюкозой. Эритроциты для определения иммунореактивного инсулина подготавливают следующим образом: после отсасывания плазмы. и лейкоцитов добавляют в массу эритроцитов 1/1 0,9% раствор хлористого натрия, тщательно перемешивают и центрифугируют 5 мин по 3000 об/мин.
Потом отсасывают надосадочную жидкость и разливают эритроциты в пластмассовые пробирки. ТаК подготовленные эритроциты могут хранить в холодильнике при -20 С до определения иммунореактивного инсулина. Отогревание проводят при комнатной температуре. Инсулин в эритроцитах определяют радиоиьмунологическим методом двойных антител, используя реагенты фирмы CIS SEA-SORlN (Франция) .
Результаты исследования представлены s табл.1.
В зритроцитах 31 пациента без нарушения толерантности глюкозы обнаружено 36,0+4,5 микроединицы инкунореактивного инсулина на 1 мл. Из
957864
13. пациентов с нарушением толерантности глюкозы у шести уровень иммунореактинного инсулина в эритроцитах был в пределах нормы, а у семи пациентов этой группы был статйстически достоверно выше, чем у предыдущих 5 групп, хотя уровень глюкозы н крови этих пациентов не отличался от уровня глюкозы пациентов с нарушением толерантности глюкозы, по нормальным уровням иммунореактинного инсулина 10 в эритроцитах.
Таким образом, среди пациентов с нарушением толерантности глюкозы, которые по уровню глюкозы в крови после 1 ч после нагрузки глюкозой не отличаются, можно различать две разные группы по определению иммунореактивного инсулина в эритроцитЬх.
Пациенты с нормальным уровнем имму- нореактивного инсулина н эритроцитах, не смотря на понышенный по сравнению со здоровыми уровень глюкозы крови, после нагрузки глюкозой можно считать более близким к норме, а пациенты с повышенным уровнем иммунореактинногo инсулина н эритроцитах — более близкими к сахарному диабету.
Количество инсулина в плазмер в эритроцитах и глюкозы у больных без нарушения толерантности глюкозы ЗО (НТГ) с нормальным весом (не больше, +10% идеального веса) и с ожирением (больше + 203 идеального веса) 1 ч после перроральной нагрузки глюкозой приведены н табл.2. 35
Количество иьмунореактивного инсулина (ИРИ) в плазме у пациентов с ожирением увеличено, что лишает. этот анализ информационной ценности, а в то же время количество ИРИ в. эритроцитах у пациентов с ожирением отличается незначительно, что открывает более широкие возможности ис" пользования определения ИРИ в эрит. Роцитах в раннем диагнозе сахарного диабета.
Пример 1. Пациент мужчина.
Провели пероральную нагрузку глюкозой и взяли кровь в гепаринизированные пробирки 1 ч после нагрузки.. глюкозой. Кровь центрифугировали, отделяя плазму от массы эритроцитов, определяли глюкозу ортотолуйдиновым методом в плазме. После отсасывания, плазмы и лейкоцитов дОбавляли в Массу эритроцитов 1/1 0,9% раствор хлористого натрия, тщательно перемешивали и центрифугировали 5 мин по 3000 об/мин. Эатем отсасывали надосадочную жидкость и разливали 60 эритроциты н пластмассовые пробирки.
Подготовленные эритроциты и плазму о хранили в холодильнике при -20 С до момента определения иммунореактивного инсулина (ИРИ). 65
Количество глюкозы в крови
191 мг/100 мг/100 мл, ИРИ в плазме
120 мкед/мл, ИРИ в эритроцитах б1,75. В этом случае все показатели унеличены по сравнению с нормой.
Ранее использонанное в диагностике скрытых форм сахарного диабета определение глюкозы в плазме крови указывает на присутствие НТГ, а то, что
ИРИ н эритроцитах больше нормы (36,0 4,5 мкед/мл), подтверждает присутствие НТГ. В этом случае определение ИРИ в плазме не понижено, как это бынает при диабете, и поэтому определение ИРИ в плазме не имеет информационной ценности (сравнительно высокое значение ИРИ в плазме пациента при ИТГ объясняется ожирением, что создает резистентность к инсулину) .
Пример 2. Пациент мужчина, Исследование проводили как описано в примере 1.
Количество глюкозы - 241 мг/100 мл
ИРИ в плазме — 118 мкед/мл, ИРИ в эритроцитах - 30,9 мкед/мл.
По уровню глюкозы крови пациент относится к группе с ИТГ, а по уровню ИРИ в эритроцитах - к норме.
Количество ИРИ в плазме понышено— свойственные данные для ожирения, в диагностике информационной ценности не имеет.
Пример 3. Пациент мужчина.
Исследования проводились по методике примера 1. Результаты: количество глюкозы было 218 мг/100 мл, ИРИ в плазме - бб,5 мкед/мл, ИРИ н эритро-, цитах — 84 мкед/мл. По уровню глюкозы в крови, больного можно отнести к группе с НТГ, но уровень ИРИ в эритроцитах нормальный, поэтому пациента нужно относить к отдельной группе: НТГ с нормальным уровнем
ИРИ в эритроцитах. Уровень ИРИ в плазме нормальный, Пример 4. Пациент мужчина.
Исследование проводились аналогично пРимеРУ 1. Результаты: количество глюкозы - 195 мг/100 мл, ИРИ в плазме — 47,8 мкед/мл, ИРИ н эритроцитах - 47,5 мкед/мл. При повышенном уровне глюкозы отмечается повышение
ИРИ н эритроцитах, что является данным о присутствии НТГ.
Таким образом среди пациентов, которые по общепризнанным критериям относятся к группе с НТГ, на основании нормального уровня ИРИ н эритроцитах можно выделить отдельную группу пациентов, которые по этим показателям более близки к норме, чем к НТГ. Это позволяет проводить более точный диагноз скрытых форм сахарного диабета. Предлагаемый способ по сравнению с известным дает нозможность более точно опре957864 явления диабета, н не сложен технически.
Таблица 1
Группа
Глюкоза крови, мг/100 мл
36+4,5 (n = 31) (p > 0,5) 112,4+3,8
32,4+1,9 (n 6) (р < 0,001) 202,5+9,6 (р 0,5) 61,7+4,5 (и = 7) 199,4 +3,6 число случаев.
Т а блица 2
Пациенты с нормальным весом
72,4
138
46,2
26,5
120
25,5, 50
37,5
76,9
107
161
43,3
26,5
75 9
174
17 5
69,2
48 1
39,5
169
21 3
51,7
27,.5
156
45
155
26
160
31
7 2
27,5
34,5
22,9
51+5,6
29,7+0,7 3
123,5 11,5 делить заболевание, в связи с чем уменьшаются случаи неправильного вы-
Пациенты без нарушения телерантности глюкозы
Пациенты с нарушением толерантности глюкозы и нормальным уровнем иммунореактивного инсулина в зритроцитах
Пациенты с нарушением толерантности глюкозы н повышенным уровнем иммунореактивного инсулина в эритроцитах
Иммунореактивный инсулин в зритроцитах,мкед/мл
957864
Продолжение табл. 2
Пациенты с ожирением
110
84,7
149,79
123
50 м
48,3
137
183
3I 2
4.6, 9
1 65
38 6
130
136
170
131,6
82,1
99
31,5
98,9
26 5
37,7
169
34,2
79,9
"ф е,еФ
110 4>12 9
120,3 11у8
36+2,8
Составитель А. Бражникова
Редактор Т. Парфенова Техред T.Маточка
Корректор А. Гриценко
Заказ 6650/5 Тираж 714
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Подписное
Филиал ППП Патент, r. Ужгород, ул. Проектная, 4
Ф е 1, Ф. а.
Формула изобретения
Способ диагностики скрытых форм сахарного диабета путем определения концентрации иммунореактивного инсу; лина в элементах крови, о т л и" ч а ю шийся тем, что, с целью повышения точности диагностики, иммунореактивный инсулин определяют в эритроцитах, н по увеличению его концентрации, по сравнению с нормой, диагностиРуют заболевание.
Источники информации., принятые во внимание при экспертизе
1. Сегав1 Е, Luft R. The plasma
insuXin response to qiukose infusion
4, in healthy subjcetsfand in diabetes
mefX1tus . Acta Endoer Copenh,1967, 55, р. 278-281.