Способ получения трипептидамидов
Патент 963463
Авторы
Способ получения трипептидамидов
Иллюстрации
Реферат
О Й И С А Н И E „,963463
ИЗОБРЕТЕНИЯ
Союз Советских
Социалистических
Республик
К ПАТЕНТУ (61) Дополнительный к патенту— (22) Заявлено 26.06.80 (21) 2938611/23-04 (23) Приоритет — (32) 28.06.79 (31) Б 1-717 (33) ВНр
Опубликовано 3009.82. Бюллетень № 36
Дата опубликования описания 30.09.82 (51) М. Кл. С 07 С 103/521(A 61 К 37/02
Государственный комитет
СССР по делам изобретений и открытий (53) УДК 547.964. .4.07(088. 8) Иностранцы
Лайош Кишфалуди, Тамаш Сиртеш, Лайош Бал
Ева Палоши, Ласло Шц и Адам Шаркади (ввв) / Г
Иностранное предприятие j
"Рихтер Гедеон Ведьесети Дьяр РТ" (ВНР) й- :- Л.::, :1- --, (72) Авторы изобретения (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ТРИПЕПТИДАМИДОВ
Изобретение относится к способу получения трипептидамидов — новых, биологически активных соединений, которые могут найти применение в меди ци не .
В пептидной химии широко используют ступенчатый способ получения пептидов путем нараживания цепи с ,С-конца исходной аминокислоты с применением активированных производных аминокислот, например, пентафторфениловых эфиров (11.
Использование известных методов позволяет получить новые соединения, обладающие интересными фармакологиl5 ческими свойствами.
Цель изобретения — получение новых трипептидамидов, расширяющих арсенал средств воздействия на живой организм.
Поставленная цель достигается способом получения трипептидамидов общей формулы I ,1p-X-Y-NH-А (i) где Х вЂ” 1.еН, 1) — 1.eu, nleu, val, ти а1, Т!1г, Pro, L- -аминобу тирил, !.-g-ами нодеканои ч, !.-циклогексилаланил, !.- 1-трет-бутилсерил:
Y — Pro;
А — водород, А1)с (С -С,о), 3)2. (3) при условии, если Х вЂ” Leu то А имеет значение, отличающееся от водорода, или Х вЂ” His, Y - HPro, D — пипеколил, заключающийся в том, что наращивают пептидную цепь, начиная с амида аминокислоты общей формулы П
Y — NH - А. (и) где Y и А имеют указанные значения, с аминокислотами, их производными или соответствующим дипептидом методом пентафторфениловых эфиров или азидным методом и, в случае использования глутаминовой кислоты, циклизации последней в пироглутамин с последующим снятием защитных групп.
В приведенных примерах использованы следующие сокращения:
Ada — L-2-.аминодекановая кислота;
Abu — Ь-2-аминомасляная кислота;
Cha — L-циклогексил-алании;
Dopa — диоксифенилаланин;
Pip — L-пипеколиновая кислота;
НРто — Ь-гомопролин;
963463
DAB — 2-диметилами ноэтил;
DCC - дициклогексил-карбодиимид;
PFPOII — пентафторфенол;
DCU — дициклогексил-мочевина;
DMFA — диметилформамид.
Величины оптического вращения измеряют с помощью поляриметра Перкин-Эльмер 141. При тонкослойных хроматографических исследованиях применяют силикагельные пластины (Е.Merck). При хроматографии исполь- 10 зуют следующие смеси растворителей: (1) хлороформ:метанол 9:1; (2) этилацетат:(пиридин:уксусная кислота .вода 20:б:11) 9:1; (3) этилацетат - (пиридинТуксусная 15 кислота: вода 20:б:11) 8:2; (4) этилацетат :(пиридин:уксусная кислота: вода 20:б:11) 3:2
Для обнаружения используют раствор
° нингидрина. Пластины после опрыскивания сушат н течение около 5 мин при 105 С. Затем хроматограммы обрабатывают газообразным хлором, обдувают воздухом и обрызгивают раствором о-толидин-калийиодида.
« с
1.З
Для хроматографической очистки на колонне применяют силикагель
"Силикагель" (Е.MercR) с величиной частиц О, 06 2-0, 2 мм.
Пример 1. L-Пироглутамил-Ь— норл ейцил- L-проли н амид .
1-я стадия .
Раствор 2,28 r (20 ммоль)
HProNH< и 3,95 r (10 ммоль) BocNleuОРДЕР растворяют в 40 мл диметилформамида, после 5 мин стояния упаринают в вакууме. Полученное в остатке масло растворяют и 50 мл хлороформа, раствор трижды промывают в делительной воронке 10 мл 1 н. раствора соляной кислоты, затем трижды 10 мл 1 н. рас-40 твора бикарбоната натрия и, наконец, один раз 10 мп воды сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают.
Остаток растворяют н 5 мл этилацетата и раствор смешивают с 10 мл 5 н. рас- 4g твора соляной кислоты в этилацетате. Через 30 мин реакционную смесь разбавляют эфиром, выпавший в осадок продукт отфильтронывают и сушат в вакууме над безводной гидроокисью натрия. Получают 2,48 r HNleu-Рго-ИН HCl (943 от теоретического выхода, рассчитанного на ВОС-Nleu
;OPFP); ф = 0,20.
2-я стадия: бензилоксикарбонил-Ь—
55 — ггироглутамил-Ь-норлейцил-Ь-пролинамид .
Раствор 1,05 r (.4 ммоль) HNleu-Pro-ЫН ° HC1 в 10 мл диметилформамида охлаждают льдом и не снимая охлаж- 60 дения при перемейинании смешивают с
0,56 мл (4 ммоль) триэтиламина и
1,89 r (4,4 ммоль) Z-Glp-OPFP. Через
5 мин,не прекращая перемешинание, добавляют к смеси 0,56 мл (4 ммоль) триэтиламина, перемешиванИе продо..— жают еще 20 мин, затем упаривают н вакууме досуха. Остаток растворяют н
40 мл хлороформа, раствор дважды встряхивают в делительной воронке с
10 мл 1 н. соляной кислоты,. трижды с 10 мл 1 н. раствора бикарбоната натрия и, наконец, с 10 мл воды, затем сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают в вакууме. Полученное н остатке масло кристаллизуют из эфира, полученный сырой продукт (1,52 г) перекристаллизонывают из
8 мл этилацетата. Получают 1,36 г
Z-Г1р-Nleu-Pro-%1 (723 от теоретического, т.пл.146-148 С); R о, (4)
О, 32 0/. = -79, 8 (c=1 н уксусной кислоте) .
Вычислено, В: С 61,00 Н 6, 83
N 11,86
С 4 Н О И4
Найдено,%: С 60,90; Н 7,04;
N 11, 87.
Мол.вес.472,55.
3-я стадия: L-пироглутамил-L-Норлейцил-L-пролинамид.
Раствор 1,16 r (2,46 ммоль) Z-.
-Glp-Nleu-Pro-NH< н 25 мл метанола смешивают с 0,2 r 10%-ного катализатора палладий/актинированный уголь и через раствор в течение 30 мин пропускают газообразный водород. Затем катализатор отфильтровывают, фильтрат упаривают ° Твердый аморфный остаток растирают с эфиром, фильтруют. Полученный сырой продукт (0,.72 r) растворяют в воде, раствор осветляют активиронанным углем и прозрачный водный раствор лиофилизуют. Получают
0,66 г Glp-Nleu-Pry-NH (79,5Ъ от теоретического); R $ = 0,43,fg =
-77,1" (c=1, в уксусной кислоте).
Аминокислотный анализ: Glp 0,96 (1,0), Nleu 1,00 (1,0), Pro 1,00 (1,0) .
Пример 2. L-Пироглутамил-Ь-норвалил-1.-пролинамид.
1-я стадия: гидрохлорид Ь-норвалил- L- пр оли н амид .
Раствор 2,2 r (20 ммоль) HPro-NQ и 3,83 r (10 ммоль) BOC-Nval-OPFP н
40 мл диметилформамида, оставляют на 5 мин, затем упаринают в вакууме.
Полученное н остатке масло растворяют в 50 мл хлороформа, раствор трижды встряхивают в делительной воронке с
10 мл 1 н. соляной кислоты, трижды с 10 мл 1 н. раствора бикарбоната натрия и, наконец, один раз с 10 мл ноды, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают. Остаток растворяют в 5 мп этилацетата и раствор смешивают с 10 мл 5 н. раствора соляной кислоты в этилацетате. Через. 30 мин реакционную смесь разбавляют эфиром, выпавший в осадок продукт отфильтровывают и сушат в вакууме над
963463 безводной гидроокисью натрия. Получают 1, 83 r Н-Nval-Pro-ИН<- НС1 (73% от .теоретического выхода, рассчитанного на Вос-Nval-ОРГР); 11(4 = 0,10. 2-я стадия: бензилоксикарбонил-L-пироглутамил-Ь-норвалил-1.-пролинамид.
Взвесь 1, 25 г (5 ммоль) Н-Nva l-Рго-ИН -НС1 в 15 мл диметилформамида при охлаждении льдом и непрерывном перемешивании смешивают с 0,7 мл (5 ммоль| 0 триэтиламина и 2, 15 г (5 ммоль) Z-Glp-ОРГР. Через 5 мин добавляют 0,7 мп (5 ммоль) триэтиламина, смесь перемешивают еще 20 мин и затем упаривают .в вакууме. Остаток растворяют в 50 мл 15 хлороформа, раствор трижды встряхивают в делительной воронке с 10 мл
1 н. соляной кислоты, трижды — с
10 мл 1 н. раствора бикарбоната натрия и, наконец, с 10 мл воды, сушат 2р над безводным сульфатом натрия.и упаривают. Получающееся в остатке масло обрабатывают эфиром, выпавший в осадок продукт 1,8 г отфильтровывают и перекристаллизовывают из смеси этанола и эфира. Получают 1,66 г
Z-Glp-Nval-Pro-NH (72% от теоретического), т.пл.166-167 C,IZ + = 0,29, (ф -87,5 (c=1, в уксусной кислоте).
Вычислено,%: С 60,25; Н 6,59
N 12, 22.
С„Н,.О, Х
Найдено, %.: С 60,08; Н 6,70;
N 12, 15.
Мол. вес. 458, 52. 35
3-я стадия: L-пироглутамил-1-норвалил-L-пролинамид.
Раствор 1,42 r (3,1 ммоль) Z-Glp-Nval-Pro-NHq в 30 мл метанола смешивают с 0,2 г 10%-ного катализатора <0 ????????????????>
Твердый аморфный остаток растирают с эфиром и отфильтровывают. Полученный продукт растворяют в воде, растВор обесцвечивают, обрабатывая активированным углем, и прозрачный водный раствор лиофилизуют. Получают
0.,95 r Glp-Nval-Pro-NH (94% от теоретического), Ry = 0,36,Ц) — -87,0 (c=1, в уксусной кислоте) .
Аминокислотный анализ: Glu 0,97, (1,0), Nval 1,09 (1,0), Pro 1,00 (1 P) 55
Пример 3. L-Пироглутамил-1-пролил-Ь-проли намид.
1-я стадия: гидрохлорид 1.-пролил— L-пролинамид.
2,28 г (0 ммоль) Н-Pro-МН р. и
3,81 r (10 ммоль) BOC-Pro- OPFP растворяют в 40 мл диметилформамида, раствор трижды встряхивают в делительной воронке с 10 ил 1 н. соляной кислоты, трижды с 10 мл 1 н. . 65 раствора бикарбоната натрия и один ( раз с 10 мл воды, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают.
Остаток растворяют в 5 мл этилацетата и смешивают с 10 мл 5 н. раствора соляной кислоты. Через 30 мин реакционную смесь разбавляют эфиром, выпавший в осадок продукт отфильтровывают и сушат в вакууме над безводной гидроокисью натрия . Получают
2,06 r H-Pro-Pro-NH>- HCl (83% от теоретического выхода, считая на
Boo Pro OPFP); 11(4>
2-я стадия: взвесь бензилоксикарбонил-L-пироглутамил-L-пролил-Ь-пролинамид.
0,75 г (3 ммоль) H-Pro-Pro-ИН
НС1 в 10 мл диметилформамида при охлаждении льдом и постоянном перемешивании смешивают с.0,42 мл (3 ммоль) триэтиламина и 1,35 (3,15 ммоль) Z-Glp-OPFP. ×åðåç 5 мин добавляют
0,42 мл (3 ммоль) триэтиламина и после 10 мин перемешивания образовавшуюся густую суспензию упаривают в вакууме. Кристаллический остаток растирают с 8 мл этанола и оставляют в холодильнике на 3 ч. Полученный осадок отфильтровывают и сушат. Получают 1,0 r Z-Glp-Pro-Pro-Nff (73% от теоретического), т.пл.
247-248" i(c разложением), R =0,19; (4 ) = -82,8 (c=1 в уксусной кислоте) .
Вычислено,%: С 60,52 Н 6,18, И 12, 27.
Q4 Og g 4
Найдено, % : С 60,03; Н 6,30, N" 12,20.
Мол.вес 456,50..
3-я стадия: L-пироглутамил-L-пролил-Ь-пролинамид.
К раствору 1,0 r (2,2 ммоль)
Z-G1p-Pro-Pro-NH< в 50 мл уксусной кислоты добавляют 0,2 r 10%-ный катализатор палладий/активированный уголь и через смесь пропускают газообразный водород в течение часа. Катализатор отфильтровывают, фильтрат упаривают и остаток растирают с эфиром.
Полученный аморфный сырой продукт (0,60 r) растворяют в воде, обесцвечивают активированны углем и прозрачный водный раствор лиофилизуют.
Получают 0,50 r Г1р-Pro-Pro-NH (70% от теоретического); R <4> = О, 10;93 =
= -223, 1 (с=1, в уксусной кислоте) .
Пример 4. L-Пироглутамил-L-валил-L-пролинамид.
1-я стадия: гидрохлорид L-валил-L-пролинамид.
Раствор 0,49 r (4,2 ммоль) Н-Рго-ИН и 0,82 r (2,14 ммоль) Boc-Val-OPFP в 10 мл диметилформамида после
30 мин стояния упаривают в вакууме.
Полученное в остатке масло растворяют в 10 мл хлороформа, раствор дважны
963463 промывают в делительнои воронке 3 мл
1 н. соляной кислоты, трижды — 3 мл 1
1 н. раствора бикарбоната натрия и, наконец, с 3 мп воды, сушат над безводным сульфатоМ натрия и упаривают.
Остаток растворяют в 3 мп этилацетаTB. и смешивают с 3 мл 5 н. раствора соляной кислоты в этилацетате. После 1 ч стояния реакционную смесь разбавляют эфиром, осадок отфильтровывают и сушат в вакууме над безвод- 10 ным едким натром. Получают 0,51 r
Н Val-Pro-ИН (95Ъ от теоретического выхода, считая на Вос-Val-OPFP);
R 4 = 0,10.
Х
2-я стадия: бензилоксикарбонил- 15 — Ь-пир оглутамил- L-валил-L-проли намид.
Взвесь 0,38 r (1,52 ммоль)Н-Val-Pro-NH 10 мп диметилформамида при охлаждении льдом и перемешивании 20 смешивают с 0,22 мл (1,52 ммоль) триэтиламина и 0,69 г (1,6 ммоль)
Z-Glp-ОРГР. Через 10 мин к смеси добавляют 0,22 мл (1,52 ммоль) триэтиламина и после дополнительного
30 мин перемешивания реакционную смесь упаривают в вакууме. Остаток растворяют в 15 мл хлороформа, раствор дважды промывают в делительной воронке 5 мл 1 н. соляной кислоты, трижды 5 мл 1 н. раствора бикарбоната натрия и, наконец, 5 мл воды, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают в вакууме. Масляный остаток кристаллизуют, из эфира получают 0,54 г Z-Glp-Val-Pro-NH< (77Ъ от теоретического), т.пл.116118 С, R = 0,30 ild3+ = -100,5 (c=1, в уксусной кислоте) .
3-я стадия: L-пироглутамил-Ь-валил-Ь-пролинамид. 40
Через раствор 9,65 г (21,2 ммоль)
Z-Glp-Val-Pro-NH< в 300 мл воды после добавления 2 г 10Ъ-ного катализатора палладий/активированный уголь.. в течение 5 ч пропускают газообразный 45 . водород. Катализатор отфильтровывают, фильтрат упаривают. ПОлученное в остатке масло растворяют в этаноле.
Раствор упаривают. Эту операцию повторяют дважды. Полученный аморфный твердый остаток растирают с эфиром, получают 4,47 r Glp-Val-Pro-ХНд (65Ъ от теоретического), R g = О, 34,,(ф п = -104,9 (с=1, в уксусной киф оте) .
Аминокислотный анализ.: Glu 1,03 (1,01); Val 1,00 (1,0); Pro 0,94 (1,0).
Пример 5. L-Пироглутамил-L-изолейцил-L-пролинамид. 60
1-я стадия:бензилоксикарбонил— L-изолейцил-L-пролинамид.
51,4 r (0,1 моль) Z-Ile-OPFP u
12,5 г (0,11 моль) Н-Pro-ИН растворяют в 250 мл диметилформамида и раствор смешивают с 14,0 мл 0,1 моль) триэтиламина. Реакционную смесь оставляют на ночь при комнатной температуре, затем упаривают в вакууме. Полученное в остатке масло.растворяют в 500 мл хлороформа, раствор последовательно промывают в делительной воронке дважды 100 мл 1 н. соляной кислоты, дважды 100 мл 1 н. раствора бикарбоната натрия и один раз 100 мл воды, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают. Масляный остаток кристаллизуют из смеси
100 мл эфира и 100 мл н-гексана. Сырой продукт (31,7 г) перекристаллизовывают из смеси 60 мл этилацетата и 60 мл н-гексана. Получают 30,32 r
Z-Ileu-Pro-NH (84Ъ от теоретического), т.пл.127-128 С, R P= 0,54.
2-я стадия: гидрохлорид L-изолейцил-L-пролинамид.
К раствору 24,0 r (66,5 ммоль)
Z-Ileu-Pro-11Ц в 470 мл метанола добавляют. 30 мл 2,4 н. метанольного раствора соляной кислоты и 4 г
10Ъ-ного катализатора палладий/активированный уголь и через смесь в течение часа пропускают газообразный водород. Катализатор отфильтровывают, фильтрат упарнвают. Остаток растирают с эфиром, сырой продукт (20 г) перекристаллизовывают из смеси метанола и эфира. Получают 16,05 г ,Н-Ileu-Pro-ИИ ° HCl (81Ъ от теоретического), т.пл. 135-140 С, R< = О, 15.
3-я стадия: бензилоксикарбонил-L-пироглутамил-L-изолейцил-L-проли намид.
Взвесь 0,90 r (3, 5 ммоль) Н-I leu-Pro-NH HC1 в 20 мл диметилформамида при охлаждении льдом и перемешивании смешивают с 0,49 мл (3,5 ммоль) тризтиламина и 1,57 r (3,7 ммоль)
Z-Glp-0PFP. Спустя 5 мин добавляют
0,49 мл (3,5 ммоль) триэтиламина, смесь перемешивают еше 20 мин и упаривают в вакууме. Остаток растворяют в 30 мл хлороформа, раствор последовательно промывают в делительной воронке трижды 7 мл 1 н. соляной кислоты, трижды 7 мл 1 н. раствора бикарбоната натрия и, наконец,.один раз
7 мл воды, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают. Полученное в остатке масло несколько-раз обрабатывают эфиром,эфир декантируют, закристаллизовавшийся продукт отфильтровывают, растворяют в этилацетате и вновь осаждают добавлением, эфира. Получают 1,18 r Z-Glp-Ileu-Pro.-МН (71,5Ъ от теоретического), т.пл. 87-89 С, RLP = О, 36, . = -91,4 (c=1, в уксусной кислоте, .
Вычислено, Ъ: С 61,00. Н 6,83
N 11,6.
СздзРь 4
Найдено, Ъ: С 59,19, Н 6,88
11,15.
963463
Мол.вес 427,55.
4-я стадия: I.-пироглутамил-I,—
-изолейцил-l.-пролинамид.
К раствору 4,72 r (10 ммоль)
7.-Оlр-11еп-Pro-Я1 в 100 мл метанола добавляют 1 r 103-ного катали5 затора палладий/активированный уголь, через смесь в течение часа пропускают га з ообраз ный водород. Катали з атор отфильтровывают, фильтрат упаривают и остаток растирают с эфиром.
Полученный сырой продукт (3,22 r) растворяют в воде и раствор осветляют активированным углем. Прозрачный водный раствор лиофилизуют, получают 3,3 г Glp-Ileu-Рro-NII< (98Ъ IS от теоретического), R 4 = О, 45,Q)> =
-100, 7 (с=1, в уксусной кислоте) .
AMHHOKHCJIOTHbIA анализ: О l и 95 (1 О), Ile 1 00 (1 О), Pro 1 02 (1 О).
Пример 6. L-Пироглутамил- 2О
-L-с -аминобутилил-L-пролинаЫ д.
1-я стадия: пентафторфениловый эфир трет.-бутилоксикарбонил-!.- -аминомасляной кислоты.
Взвесь 7,7 г (20 ммоль) ВОС-Abu- 2S
-ОН.IICIIA .в 60 мл эфира смешивают с
20 мл 2 н. серной кислоты и встряхивают до растворения суспендированного вещества. Эфирную фазу отделяют, промывают в делительной воронке 20 ру30
2 н . серной кислоты и затем 20 мл воды, сушат над безводным сульфатом
:натрия и упаривают. Полученное в остатке масло (4, 14 г) и 3, 7 r (20 ммоль) пентафторфенола растворяют в 25 мл этилацетата, раствор ох-. лаждают ниже 5ОС и при перемешивании смешивают с 3,,92 г (19 ммоль) ди— циклогексилкарбодиимида. Реакционную смесь перемешивают в течение часа, охлаждая на ледяной бане, отфильтро- 4О вывают выпавшую в осадок дициклогексилмочевину, фильтрат упарйвают. Полученное в остатке. масло растворяют в н-гексане и раствор оставляют на час в холодильнике. Выпавшую в осадок 45 дициклогексилмочевину отфильтровывают и фильтрат концентрируют до объема 20 мл, с началом кристаллизации суспензию оставляют в холодильнике на ночь, затем кристаллы отфильтровывают. Получают 5,57 г Boc-Abu-0PFP (76Ъ от теоретического), т.гл. 83-84"С, И в 0,86,(13 = -32,8 (с=1, в этилацетате).
Вычислено,Ъ: С 48,79 Н 4,37
N 3,79; Г 25,7. 5Г (604 1 Г
Найдено, Ъ: С 48,55, Н 4,28;
N 3,70; I= 25,44.
Мол. вес 369, 29 .
2-я стадия: гидрохлорид- L -аминобутирил-l,-пролинамид.
Раствор 3, 2 г (28 ммоль) Н-Pr о-NH> и 5,16 г (14 ммоль) Вос-Abu-OPFP в
60 мл диметилформамида выдерживают
5 мин и затем упаривают в вакууме.
Полученное в остатке масло растворяют в 100 мл хлороформа, раствор промывают в делительной воронке дважды 20 мл 1 н. раствора бикарбоната натрия, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают. Полученное в остатке масло растворяют в 20 мп этилацетата и смешивают .с 20 мп
6 и. раствора соляной кислоты в этилацетате. Через час реакционную смесь разбавляют эфиром, выпавший в осадок продукт отфильтровывают, сушат в вакууме над безводным едким натром.
Полученный сырой продукт (3,86 r) растирают с 20 мл холодного (диметилформамида}. Получают 2,40 г H-Abu-Pro-NII (73% от теоретического выхода, считая на Вос-Abu-ОРГР), R <4 >
3 — я стадия: бензилоксикарбонил-L-пироглутамил-1,- -аминобутирил-L
-пролинамид.
2,13 r (9 ммоль) Н-Abu-Pro-NIQ взмучивают в 30 мл диметилформаиида и при охлаждении льдом и перемешивании смешивают с 1,26 мп (9 ммоль) триэтиламина и 3,95 r (9,2 имоль)
2-Glp-О! FP. Через 5 мин к смеси добавляют еще 1,26 мл (9 ммоль) триэтиламина и после 20 мин перемешивания реакционную смесь упаривают в вакууме. Кристаллический осадок растирают с 20 мл этанола, оставляют в холодильнике на ночь и фильтруют.
Получают 3, 30 г -Glp-Abu-Pro-NH (82% от теоретического), т.пл.175176О C, R = 0,28,1Ц = -99,6 (с=1, 1 в уксусной кислоте) .
4- я с тади я: 1- пирогл у тамил-L <-аминобутирил-I.-пролинамид.
Раствор 2,67 r (6 ммоль) Z-Glp-Abu-.Pro-Nl-l> в 100 мл уксуснол кислоты смешивают с 0,5 г 10Ъ-ног катализатора палладий/активированный уголь, через смесь в течение часа пропускают газообразный водор:д. Катализатор отфильтрован.ьают, фильтрат упаривают и остаток растирают с эфиром.
Полученный продукт (1,82 r) растворяют в воде, раствор обесцвечивают активированным углем и прозрачный водный раствор лиофилизуют.Получают 1,70 r Glp-Abu-Pro-NH<(91% от теоретического),R = 0,24, )Я=(4)
-102,5" (c=1, в уксусной кислоте).
Пример 7. L-Пироглутамил-L-< .— ами иоде к аноил- L-п роли н амид.
1-я стадия: гидрохлорйд L-oL-аминодеканоил-L-пролинамид.
Раствор 1„37 r (12 ммоль) H-Pro-NHg и 2,72 r (6 ммоль) Вос-Ada-ОРГР в 20 мл диметилформамида выдерживают
5 мин,затем упаривают в вакууме.Полученное в остатке масло растворяют в 50 мл хлороформа, раствор промывают в делительной воронке трижды
963463
10 мл 1 н. соляной кислоты, трижды
20;m 1 н. раствора бикарбоната натрия и, наконец, дважды 10 мп воды, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают. Полученное в остатке масло растворяют в 3 мл этилацета- 5 та и раствор смешивают с 5 мп б н. раствора соляной кислоты в этилацетате. После 1 ч стояния. реакционную смесь разбавляют эфиром, выпавший в осадок продукт отфильтровывают и 10 сушат в вакууме над безводной гидроокисью натрия. Получают 1, 75 r Н-Ada"Pro-ИН - HCl (91Ъ от теоретического выхода, считая на Вос-Ada-0PFP).
2-я стадия: бензилоксикарбонил-L-пироглутамил-L -аминодеканоил-L-пролинамид.
Раствор 1,75 г (5,5 ммоль) Н-AdaPro-NH и 2,58 r (б ммоль) Z-Glp-.
-OPFP в 30 мп диметилформамида смешивают с 0,77мл (5,5 ммоль) триэтиламина. Спустя 5 мин к смеси добавляют еще 0,77 мл (5,5 ммоль) тризтиламина и после 20 мин перемешивания реакционную смесь упаривают в вакууме. Остаток растворяют в 50 мл хлороформа, раствор промывают в делительной воронке трижды 20 мл 1 н. раствора соляной кислоты, трижды 20 мп 1 н. раствора бикарбоната натрия и, наконец, дважды 20 мл воды, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают.
Полученное в остатке вспененное масло растирают с эфиром, образовавшуюся при этом желатинового типа суспензию оставляют стоять в течение 35
2 ч в холодильнике, затем осадок отфильтровывают и сушат. Сырой продукт (2,61 r) перекристаллизовывают из
20 мл этилацетата. Получают 2,45 г
Z-Glp-Ada-Pro-NH» (843 от теоретичес-4п
103 105ОC, Rg 0,19, Ы = -63,7 (с=1, в уксусной кислоте .
Вычислено, Ъ: С 63,62; Н 7,63, Ы 10,60 45
С29Н4С06 N4
Найдено, Ъ: С 63,24 Н 7,81;
N 19, 47.
Мол.вес 528,65.
3-я стадия: L-пироглутамил-L-c(-аминодеканоил-Ь-пролинамид.
° Раствор 1,9 г (3,6 ммоль) Z-Glp-Ada-Pro-ИН в 40 мп уксусной кислоты смешивают с 0,2 г 10%-ного катализатора палладий/активированный уголь и через смесь в течение часа пропускают газообразный водород. Затем катализатор отфильтровывают, фильтрат упаривают и остаток растворяют в воде. Водный раствор обесцвечивают 60 активированным углем и упаривают. Полученное в остатке масло растворяют в 30 мл хлороформа, раствор сушат над безводным сульфатом натрия и упа. ривают. Вспененный, аморфный, твердый остаток растирают с эфиром, отфильтровывают и сушат. Получают 1,20 г
Glp-Ada-Pro-%1 (02Ъ от теоретического),R = 0,55,f/ = -66,2 (c=1, в уксусной кислоте).
Пример 8. L-ПироглутамиЛ-1.—
-циклогексилаланил-L-пролинамид.
1-я стадия: пентафторфениловый эфир трет-бутилоксикарбонил-L-циклогексилаланин.
Суспензию 9,04 r (20 ммоль) Boc-Cha-0H ° DCHA в 80 мл эфира смешивают с 20 мп 2 н. серной кислоты.
Смесь встряхивают. до полного растворения твердого вещества, затем отделяют эфирную фазу, промывают 20 мп
2 н. серной кислоты 20 мп воды, сушат над сульфатом натрия и упаривают.
Полученное в остатке масло (5,7 r) растворяют в 30 мл зтилацетата, смешивают с 3,7 r (20 ммоль) PFPOH, смесь охлаждают до 5ОС и смешивают с 4,12 r (20 ммоль) дициклогексилкарбодиимида. Реакционную смесь перемешивают в течение часа при этой температуре, затем выпавшую в осадок дициклогексилмочевину, фильтрат упаривают и полученное в остатке масло растворяют в 30 мп н-гексана. Раствор оставляют в холодильнике на час, при этом вновь высадившуюся дициклогексилмочевину отфильтровывают и фильтрат разбавляют 70 мл н-гексана. Разбавленный раствор промывают,в делительной воронке пять раз 40 мп 1 н. раствора бикарбоната натрия дважды
40 мп воды, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают. Полученное в остатке масло кристаллизуют. Получают 8,48 r Boc-Cha-OPFP (97% от теоретического), т.пл.75-77 С,R " =
0,88, Вычислено,Ъ: С 54,92; Н 5,53
N 3,201F ".1, 72, СЫ404 Ч6Найдено, % : С 54,67;. Н 5,66
N 3,11 F 21,4
Мол. вес 437,41.
2-я стадия: гидрохлорид L-циклогексилаланил-L-пролинамид.
Раствор 2,28 r (20 ммоль) Н-Pro-NH< и 4,37 (10 ммоль) Вос-Cha-OPFP в 40 мл диметилформамида после
5 мин стояния упаривают в вакууме, Полученное в остатке масло растворяют в 80 мп хлороформа„ раствор промывают в делительной воронке трижды 20 мл 1 н. соляной кислоты, трижды 20 мл 1 н. раствора бикарбоната натрия и, наконец, один раз 20 мп воды, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают. Полученное в остатке масло растворяют в 8 мп этилацетата, смешивают с 10 мл 5 н. раствора соляной кислоты в этилацетате г ерез час реакционную смесь разб.-: †яют эфиром. Выпавший в осадок г. зс, кт отфильтровывают и сушат в
1.3
963463 вакууме над безводным едким натром.
Получают 2,98 г Н-! ha-1 го-Nll. ° !IC1 (97% от теоретического выхода, считая на 13ос-Сha-O» 1 Р) .
3-я стадия: бензилоксикарбонил.—
-I.-пироглутамил- I.-цикло гексилаланилпролинамид.
Раствор 2,43 г (8 ммоль) II-Cha-Pro †NI НГ1 и 3,60 г (8,4 ммоль)
Z-Glp-ОР»:Р в 25 мл диметилформамида смешивают с1,,12 мл (8 ммоль) три- 10 этиламина. Спустя 5 мин добавляют еще 1,12 мл (8 ммоль) триэтиламина и реакционную смесь перемешивают
20 мин и упаривают в вакууме. Остаток растворяют в 80 мл хлороформа, 15 раствор промывают в делительной воронке трижды 20 мл 1 н. соляной кислоты, трижды 20 мп 1 н. раствора бикарбоната натрия и, наконец, один раз 20 мл воды, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают Полученное в остатке масло кристаллизуют из эфира, полученный сырой продукт (3,88 г) перекристаллизовывают из 30 мп этилацетата. Получают 3,32 г25
Z-Glp-Cha-Pro-Я» (81% от теоретического), т.пл .165-166 С, R<ь 0,17, (сЫ = -67,3О (с=1, в уксусной кислоте).
Вычислено,%: С 63,26; Н 7,08;
N 10,93.
ГНО»
Найдено, o-: С 63, 1,- H 7, О 4;
N 10,91
Мол.вес 512,61.
4-я стадия: L-пироглутамил-1,— 35
-циклогексилаланил-L-проли намид.
Раствор 3, 07 r (6 ммоль):-Г1Р-Cha-Pro-NHg 60 мл этанола, смешивают с 0,6 г 10%-ного катализатора палладий/активированный уголь и че- 40 рез смесь в течение 2 ч пропускают газообразный водород. Катали. атор отфильтровывают, фильтрат упаривают и остаток растирают с эфиром. Получают 2,15 г аморфного твердого Glp- 45
-Cha-Pro-Х»» (95% от теоретического), Й 4 = 0,50,$- -70,9О le=1, в уксусной кислоте) .
Пример 9 1-Пироглута л-»- 50
-треонил-l.-проли намид.
1-я стадия: гидрохлорид О-бензил-Ь-треонил-Ь-пролинамид.
Раствор 1,43 г (12,5 ммоль) Н-Рго-ИН и 2,98 r (6,27 ммоль) Вос-Thr(Bzl
-0PI:Ð растворяют в 20 мл диметилформ- 55 амида, выдерживают 5 мин и упаривают в вакууме. Полученное в остатке масло растворяют в 30 мл хлороформа, раствор промывают в делительной воронке дважды 10 мл 1 н. соляной кислоты, триж- 60 ды 10 мл 1 н. раствора бикарбоната натрия, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают. Полученное в остатке масло растворяют в 4 мл этилацетата и смешивают с 5 мл 5 н. рас- 65 твора соляной кислоты в этилацетате.
Реакционную смесь выдерживают 1 ч при комнатной температуре и раз бавляв ют эфиром, отфильтровывают осадок и сушат в вакууме над безводным едким натром. Получают 2,05 г Н-ТЬг(13-..1;1-Гго-NI» . НГ1 (95% от теоретического), К 4 = 0,40.
2-я стадия: бензилоксикарбонил-i,—
-пироглутамил-l,-О-бензилтреонил-l.-пролинамид.
К раствору 2,05 г (6 ммоль) ll-Thr (Bz1 ) -Рго-МН . »Н.3 и 2,69 r (6,27 ммоль):-Glp-ОРРР в 21 мп диметилформамида по каплям прибавляют
0,84 мл (6 ммоль) триэтиламина и после 5 ми н стоя ни я добавляют еще
О, 84 мп (6 ммоль) триэтиламина.
20 мин реакционную смесь перемешивают, а затем упаривают в вакууме, остаток растворяют в 50 мл хлороформа, раствор промывают в делительной воронке дважды 10 мл 1 н. соляной ки- слоты и трижды 10 мл 1 н. раствора бикарбоната натрия, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают.
Полученное в остатке масло обрабатывают эфиром и охлаждают, продукт застывает в аморфном состоянии. Полученный продукт (2,76 r) растворяют в этилацетате и раствор обесцвечивают активированным углем. Уголь отфильтровывают, фильтрат упаривают и твердый, аморфный, вспененный остаток рас7 .ирают с эфиром. Получают
2,47 r -Glp-Thr(В=1)-рго-NII, (75% от теоретического).
3-я стадия: I.-пироглутамил-Ь-треонил-L-пролинамид.
Раствор 2,04 г (3,7 ммоль) Z-Glp-Thr(Bzl)-Pro-Х11 в 40 мл уксусной кислоты смешивают с 0,4 г 10%-ного катализатора палладий/активированный уголь и через смесь в течение 4 ч пропускают газообразный водород.
Катализатор отфильтровывают, фильтрат упаривают и остаток растирают с эфиром. Полученный аморфный продукт (1, 31 r) помещают в колонку, содержащую 30 г силикагеля (размер частиц:
0,063-0,2 мм) и элюируют продукт смесью растворителей (3). Фракции элюатов, содержащие чистый продукт, объединяют и упаривают, полученный в остатке сырой продукт обрабатывают эфиром. Получают 0,72 г (1р-Thr.-Рго-NI1Ä (59,5% от теоретического), R 4 = 0,16
PoQ> -90,0О (c=1, в уксусной кислоте).
Аминокислотный анализ: (lu 1, 00 (1,0), Thr 0,99 (1,0), Pro 1,03 (1,0).
Пример 10. I.-Пироглутамил— О-трет-бутил-l,-серил-»,-проли намид.
1-я стадия: О-трет-бутил-»,-cåðèë-проли намид-полуок салат.
96346 3
8,0 r (70 ммоль) Н-Pro-ИНр и
16,0 г (34, 7 ммоль) Z-Ser (Bu+) -ÎPFP растворяют в 120 мл диметилформамида и раствор после 5 мин стояния упаривают в вакууме. Полученное в остатке масло растворяют в 300 мп хлороформа, раствор промывают в де. лительной воронке трижды 80 мл 1 н. соляной кислоты, трижды .80 мл 1 н, раствора бикарбоната натрия и, наконец, один раз 80 мп воды сушат над безводным сульфатом натрия .и упаривают. Полученное в остатке масло (18 г) и 4,37 r (34,7 ммоль) дигидрата щавелевой кйслоты растворяют в
300 мл метанола, раствор смешивают 15 с 3 г 10Ъ-ного катализатора палладий/ активированный уголь и через смесь в течение часа пропускают газообразный водород. Катализатор отфильтровывают, фильтрат упаривают, остаток 2О растирают с этилацетатом и сушат в вакууме.
Получают 10,8 r H-Ser(Bu )-Pro-NHg (СООН)g (90Ъ от теоретического выхода, считая на Z-Ser(Bu )-OPFP 2c; в форме аморфного гироскопичного вещества), R = 0,22.
4)
2-я стадия: бензилоксикарбонил-L-пироглутамил-О-трет-бутил-L-серил -L-пролинамид. 30
Раствор б, 43 r (18, 5 ьмоль) H-Ser (Bu+) -Pro-NH (СООН) и 3,97 (18,5 ммоль) Z-Glp-OPFP в 80 мл дй.метилформамида смешивают с 5,18 мл (37 ммоль) триэтиламина. После 5 мин
3 > стояния реакционную смесь упаривают в вакууме и кристаллический остаток растирают с эфиром. Полученный сырой продукт (9,53 r) перекристаллизовывают из 120 мп метанола. Получают 7,70 r Z-Glp-Бег(Вц )-Pro-ХН (83Ъ от теоретического), т.пл., 226-229 С. R(= 0 46,93 <= 71 6 (с=1, в уксусной кислоте) .
Вычислено, Ъ: С 59,75> Н 6,82; ! ,N 11, 15
55 ЗА 4 айдено, Ъ: С 59,55 Н 6,95"
N 11,09.
Мол. вес 502,57.
3-я стадия: L-пироглутамил-О-трет-бутил-Ь-серил-L-пролинамид.
4,02 r (8 ммоль) Z-Glp-Ser(Bu+)-Рro-NH< растворяют в 160 мл метаЖ ла и раств ор смешивают с 0,8 г
Ъ-ного катализатора палладий/ак- . тивированный уголь, через смесь в течение 30 мин пропускают газообразный водород. Катализатор отфильтровывают, фильтрат упаривают. Полученное в остатке масло кристаллизуют ® из эфира, кристаллы отфильтровывают и сушат. Получают 2,50 r Glp-Ser(Bv )
-Pro-NHg (85% от теоретического), т.пл. 186-187 С Rô= О, 45,Я)Я=
- -60,8 (с=1, в уксусной кислоте) . 63
Аминокислотный анализ: Сlu 1,03 (1,0), Ser 1,00 (1,0), Pro 1,00 (1,0).
Вычислено, Ъ: С 55, 42; H 7, бб;
N 15,21
Сл Н зО Ng
Найдено, % : С 55,07;; Н 7,61;
N 14,94.
Мол. вес 368,44. .Пример 11. Ь-Пироглутамил-D-лейцил-Ь-пролинамид.
1-я стадия: пентафторфениловый эфир трет-бутилоксикарбонил-D-лейцил э
Раствор 4,62 г (20 ммоль) Boc-D-Leu-0H и 4,23 г (22 ммоль)
PFP0H в 50 мп этилацетата при îõлаждении льдом и перемешивании смешивают с 4,12 г (20 ммоль) дициклогексилкарбодиимида. Реакционную смесь перемешивают, охлаждая в ледяной бане, отфильтровывают выпавшую в осадок дициклогексилмочевину, фильтрат упаривают. Полученное в остатке масло растворяют в 100 мл н-гексана, раствор оставляют на час в холодильнике и выпавшую в осадок дициклогексилмочевину отфильтрбвывают. Фильтрат промывают в делительной воронке пять раз 50 мл 1 н. раствора бикарбоната натрия и.дважды 50 мл воды, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают. Полученное в остатке масло кристаллизуют в течение ночи..
Получают 7,0 r Boc-D-Leu-OPFP (88% от теоретического), т.пл.53-55 С, ЯЯ= +31,7 (c=1, в этилацетате) .
Вычислено,%: С 51,39; H 5,07;
И 3,53, F 23,91С О, NF
Найдено, Ъ: С 51,51; Н 4,68,.
N Зубб;; F 23г65.
Мол.вес 397,35.
2-я стадия: гидрохлорид 9-лейцил.-L-пролинамид.
Раствор 3,42 r (30 ммоль) Н-Pro-МНу и 60,0 г (15 ммоль) Вос-D-Leu-OPFP в 60 мп диметилформамида после 5 мин стояния упаривают в вакууме. Остаток растворяют в 100 мл хло-. роформа,раствор промывают в делительной воронке дважды 20 мл 1 н. раствора соляной кислоты, трижды 20 мл
1 н. раствора бикарбоната натрия и, наконец, один раз 20 мл воды, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают. Полученное в остатке масло растворяют в 10 мл этилацетата, раствор смешивают с 15 мл 4 н. раствора соляной кислоты в этилацетате, через час реакционную смесь разбавляют эфиром, осадок отфильтровывают и сушат в вакууме над безводным едким натром. Получают 3,66 r Н-D-Leu-Pro-NHg НС1 (92,5% от теоретического выхода, считая на Boc-D-Leu-OPFP), 963463
17
3-я стадия: бензилоксикарбонил-L-пироглутамил-0-лейцил-L-пролинамид.
Раствор 3,66 г (13,9 ммоль) H-D-Leu.-Pro-NH>" НС1 и 6,43 r (15 ммоль)
Z-Glp-OPFP a 50 мп диметилформамида при охлаждении льдом и перемешивании смешивают с 1,95 мп (13,9 ммоль) триэтиламина. Смесь перемешивают 5 мин затем добавляют к ней дополнительно
1,95 мл (13,9 ммоль) триэтиламина, реакционную смесь перемешивают еще
20 мин и упаривают в вакууме. Остаток растворяют.в 120 мл хлороформа, раствор промывают в делительной воронке трижды 30 мл 1 н. раствора соляной кислоты, трижды 30 мл 1 н. раствора бикарбоната натрия и, наконец, 30 мл воды один раз, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают.
Полученное в остатке масло кристаллизуют после обработки эфиром. Полученный сырой продукт (б г) перекристаллизовывают из 30 мл этанола. Получают 5,48 г Z-Glp-D-Leu-Pro-NHq (77% от теоретического), т.пл.189194 С R< = 0,48 АД -33,2 (с=1, в уксусной кислоте).
4-я стадия: L-пироглутамил-D-лейцил-L-пролинамид.
Раствор 3,78 г (8 ммоль) Z-Glp-D-Leu-Pro-ХН в 150 мл метанола, смешивают с 0,8 г 10%-ного катализатора палладий на активированном угле и через смесь в течение часа пропускают газообразный водород. Катализатор отфильтровывают, фильтрат упаривают и остаток растирают с эфиром. Полученный сырой продукт (2,5 г) растворяют в воде, обесцвечивают активированным углем и прозрачный водный раствор лиофилизуют. Получают
2,35 г С1р-D-Leu-Pro-NH (87% от теоретического, R(4 = 0,48Да Я =-83,3 (с=1, в уксусной кислоте) °
Пример 12. L-Пироглутамил— Ь-лейцил- Ь-проли н-э тил амид.
1-я стадия: гидрохлорид L-лейцил- L-проли н- этил амид.
Суспензию 1, 67 г (7, 2 ммоль) Н-Pro-NH-E t ° (COOH)g в 20 мл этилацетата смешивают с 2,0 мл (14,4 ммоль) триэтиламина и 2,38 г (б ммоль) Boc-Leu-ОРГР. Через 5 мин реакционную
-смесь проьывают в делительной воронке дважды 5 мл 1 н. раствора соляной кислоты, трижды 5 мл 1 н. раствора бикарбоната натрия и, наконец, один раз 5 мл воды, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают. Полученное в остатке масло обрабатывают—
10 мп 5 н. раствора соляной кислоты в этилацетате, через 20 мин смесь разбавляют эфиром, осадок отфильтровывают и сушат в вакууме над безводным едким натрием. Получают 1,46 r гигроскопического Н-Leu-Pro-NH-Et HC1
40 (83% от теоретического выхода, считая на Boo-Leu-OPFP) R$4 = 0,43.
2-я стадия: бензилоксикарбонил-Ь-пироглутамил-Ь-лейцил-L-пролин.
1,17 г (4 ммоль) H-Leu-Pro-NH-Et. НС1 и 1,72 r (4 ммоль) Z-Glp-OPFP растворяют в 15 мл диметилформамида и раствор смешивают с 0,56 мп (4 ммоль) триэтиламина. Через 5 мин добавляют оставшиеся 0,56 мл (4 ммоль) триэтиламина и смесь упаривают в вакууме.Полученное в остатке масло растворяют в 40 мл хлороформа, раствор промывают в делительной воронке дважды
10 мл 1 н. раствора соляной кислоты, трижды 10 мл 1 н. раствора бикарбоната натрия и, наконец, один раз
10 мл воды, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают. Остаток растирают с н-гексаном и отфильтровывают. Получают 1,61 г аморфного
Z-Glp-Leu-Pro-NM-Ft (80,5% от теоретического), Rg = 0,50 Ц3 =-89;0 (с=1, в уксусйой кислоте).
3-я стадия: L-пироглутамил-1-лейцил-L-пролин-этиламид.
Раствор 1,07 г (2,14 ммоль) Z-Glp-Leu-Pro-NH-Et в 30 мл воды, смешивают с 0,25 г 10%-ного катализатора палладий/активированный уголь и через смесь в течение получаса пропускают газообразный водород. Катализатор отфильтровывают, фильтрат упаривают, масляный остаток растворяют в
20 мл хлороформа, раствор сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают. Отверждающийся после вспенивания остаток растирают смесью эфира и н-гексана. Получают 0,52 r
Glp-Leu-Pro-NH-Et (66% от теоретического) . R<4 >
Пример 13. L-Пироглутамил-L-лейцил-Ь-пропил-н-дециламид.
1-я стадия: бензилоксикарбонил-L-пропин-н-дециламид.
Раствор 5,0 r (20 ммоль) Z-Pro-OH в 50 ил диметилформамида смешивают с 2,8 мл (20 ммоль)триэтиламина и охлаждают до -10 С. При этой температуре не прекращая перемешивание по каплям добавляют сначала 2,8 мл (21,5 мколь) изобутилового эфира хлоругольной кислоты и через 10 мин
4,4 мп (22 ммоль) н-дециламина. По окончании добавления смесь в течение
30 мин перемешивают при 0 С и затем
2 ч при комнатной температуре. Полученную суспензию фильтруют, фильтрат упаривают и остаток растворяют в
100 мл этилацетата. Раствор промывают в делительной воронке четырежды
50 мп 1 н. раствора соляной кислоты, дважды 50 мл воды, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают.
Получейное в остатке масло кристаллизуют при обработке н-гекса963463
19
20 лом. Получают 5, 43 r Г,-Pro-NH- I 112 (70 Ъ от теоретического), т. пл. 7880 С,, Ф = 0,75.
2-я стадия: I,-проли и-н-дециламид— полу ок салат .
Раствор 5,0 г (12,9 ммоль) Z-Pro-NI1-Г, Н „ и 2,02 г (16 ммоль)дигидрата щавелевой кислоты в 100 мл метанола смешивают с 0,8 г 10Ъ вЂ но катализатора палладий/активированный уголь и через смесь в течение 2 ч . 10 пропускают газообоазный водород. По окончании .гидрирования реакционную смесь нагревают, катализатор отфильтровывают и фильтрат упаривают. Кристаллический остаток рас