Способ заполнения капиллярных кювет градиентными гелями и устройство для его реализации

Способ заполнения капиллярных кювет градиентными гелями и устройство для его реализации

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Реслублми (iii966577 (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 04.01.81 (21) 3229462/18-25 с присоединением заявки %в (23) Приоритет (5I )M. Кл.

G 01 и 27/26

3Ъиударстееиых квмитат

СССР ию делам иэеаретеиий и еткрытий

Опубликовано 15.10.82. Бюллетень М 38

Дата опубликования, описания 15.10.82 (53) УДК 543.545 (088.8) 1

1

Специальное конструкторское бюро биологического приборцстроейия

АН СССР и Институт биологической физики АН СССР (72) Авторы изобретения

В. Т. Ларин, Б. Ф. Санталов н А. М. Хохлов

{71) Заявители (54) СПОСОБ ЗАПОЛНЕНИЯ КАПИЛЛЯРНЫХ КЮВЕТ ГРАДИЕНТНЫМИ

ГЕЛЯМИ И УСТРОЙСТВО ДЛЯ ЕГО ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ

Изобретение относится к технике электро-" фореза, точнее к способу. заполнения капиллярных кювет градиентными гелями и устройству для осуществления способа, и может. быть использовано в биологии и медицине.

Известен способ заполнения капилляров градиентными гелями путем засасывания, раствора в капилляр. При этом используется устройство, состоящее из смесителя и трубки, на выходе которой устанавливается заполняемый раствором капилляр. Объем и крутизна градиента определяются соотношением скоростей засасывания в капилляр и выте- . кания раствора нз смесителя (1)

Однако способ и используемое устройство не позволяют производить одновременное заполнение нескольких кювет.

Наиболее близким техническим решением является способ заполнения капиллярных кювет градиентными гелями путем подачи раствора геля с возрастающей плотностью

1 в нижнюю часть приемной камеры, сообщающейся с вертикально установленными в ней кюветами. При этом используется устройство„ содержащее приемную камеру с, расположенным в ней держателем кювет, образующим . внутреннюю полость приемной камеры, и смеситель, соединенный с нижней частью

5 приемной камеры (2).

Однако способ и используемое устройство отличаются недостаточно хорошея воспроиэводимостью длины геля и формы градиента в, нем, особенно при приготовлении гелей с крутым градиентом плотности. Недостатки вызываются неуравновешенностью гидростати. ческого давления раствора геля в полости приемной камеры и капиллярных кюветах, . вследствие которого после отключения смесителя происходит медленный переток раствора геля нз полости приемной камеры в, капиллярные кюветы. Так как время полиме: рвзации раствора геля соизмеримо с временем выравнивания уровней раствора в ука20 занных сосудах, то наложение двух этих процессов приводит к указанным недостаткам. Воспройзводимость заполнения кювет

p õóäøàåòñÿ также от того, что для заполне.ния кювет на ту или другую длину каждый, камере

U =Ч вЂ” - Ч

Ь . ) Г Ю,где V

V1

3 966 ре» приходится. перестраивать режим работы. смесителя и регулировать объем закачиваемого в приемную камеру раствора.

Цель изобретения — повышение: юспроизводммости параметров геля.

Цель достигается тем, что согласно способу заполнения капиллярных кювет грдиентиыми гелями путем подачи раствора геля с возрастающей плотностью в нижнюю часть приемной камеры, сообщающейся с вертикально установленными в ней кюветами, подачу раствора геля проводят при уравнове. шенном гидростатическом давлении раствора геля в капиллярных кюветах и приемной камере, при этом измеряют величину устано- вившегося давления в конце подачи раствора геля и поддерживают ее постоянной до окончания его полимериэации.

Для реализации способа используют устроиство для заполнения капиллярных кювет градиентными гелями, содержащее приемную камеру с расположенными в ней держателем кювет, образующим внутреннюю полость приемной камеры, и смеситель, соединенный с нижней частью приемной камеры, в которое дополнительно введен элемент, герметизирующий в верхйей части приемную камеру,.и капиллярные кюветы, регулируемая пиевмоемкость и редуктор давления с манометром, соединенные с внутренней полостью приемной камеры в ее верхней части при этом объем регулируемой пневмоемкости рассчитывают по формуле I — объем регулируемой пневмоемкости; — объем раствора геля, закачиваемого в приемную камеру; — объем воздуха в приемной камере„ соединительных трубках и манометре; — длина капиллярной кюветы; — öëèíà геля.

С помощью герметизирующего элемента уравновешивается гидростатическое давление раствора геля в приемной камере и капиллярных кюветах и исключается его переток между ними. Регулируемая пйевмоемкость позволяет заполнять капиллярные кюветы иа различную длину без изменения каждый раз объема геля, поступающего из смесителя. Манометр и редуктор давления позволяют поддерживать установившееся в конце

° подачи раствора геля давление постоянным до окончания полимеризацин раствора геля, предотвращая искажение границы геля в капиллярной кювете и уменьшение его

577 4 длины вследствие усадки геля в приемной

На чертеже схематично показано устройство для заполнения капиллярных кювет градиентными гелями.

Устройство состоит из приемной камеры 1, с крышкой 2 и прокладкой 3, которые вместе составляют герметизирующий элемент, капиллярных кювет 4, держателя кювет 5, 10 регулируемой пневмоемкости 6, пневматически связанной с внутренней полостью приемной камеры в ее верхней части, кранов

7, 8, смесителя 9, манометра 10 и редуктора давления 11, 1s Способ заполнения кювет градиентными гелями осушествляют с помощью устройства следующим образом.

В приемную камеру 1, сняв крышку 2 и прокладку 3, устанавливают капиллярные э0 кюветы 4, фиксируя их в вертикальном положении держателем кювет 5, после чего камера и кюветы герметизируются в верхней части с помощью крышки 2 и прокладки 3. В соответствии с требуемой длиной

25 гелявкюветах4 устанавливается объем регулируемой пневмоемкости 6. Закрывается кран 7, кран 8 оставляется открытым. После этого включается подача раствора геля от смесителя 9.

З0 После окончания подачи раствора кран 8 закрывается, открывается кран 7 и с помощью редуктора давления 11 по манометру

10 устанавливается давление, соответствующее давлению в приемной камере 1 и связанной с ней регулируемой пневмоемкости 6 в

35 момент окончания подачи раствора геля, после чего открывается кран 8, приемная камера 1 и регулируемая пневмоемкость

6 оказывается связанными с редуктором давления 11, с помощью которого давление

40 в системе поддерживается неизменным до окончания полимеризации геля.

Применение данного способа и устройства позволит повысить воспроизводимость лабораторных экспериментов, что значительно сократит время их проведения вследствие уменьшения количества контрольных опытов.

Возможность получения коротких гелей с крутым градиентом, которая обеспечивается по данному:способу, позволит существенно уменышпь количество исходного. материала для электрофоретического анализа.

Формула изобретения

1. Способ заполнения капиллярных кювет градиентными гелями .путем: подачи раствора геля с возрастающей плотностью в нижнюю часть приемной камеры, сообщающейся с вертикально установленными в ней кюветами, отличающийся

996577 6 приемной камеры в ее верхней части, при этом обьем регулируемой пневмоемкости рассчитывают по формуле.

5 тем, что, с целью достижения воспроизводимости параметров геля, подачу раствора геля проводят при уравновешенном гидростатическом давлении раствора геля в капиллярных кюветах и приемной камере, при этом измеряют величину установившегося давления в конце подачи раствора геля и поддерживают ее постоянной до.окончания его полыме риз ации.

2. Устройство для заполнения капиллярных кювет градиентными гелями, содержащее приемную камеру, с расположенными в ней держателем кювет, образующим внутреннюю по:,.лость приемной камеры, и смеситель, соединенный с нижней частью приемной камеры, о т л и ч а ю щ е е с я тем, что устройство дополнительно содержит элемент, герме-тизирующнй s верхней части приемную камеру, и капиллярные кюветы, регулируемую . пневмоемкость и редуктор. давления с манометром, соединенные с внутренней полостью в где Ч вЂ” обьем регулируемой пневмоемкости;

Чг — объем раствора геля, закачиваем го в приемную камеру;

1ф Ч вЂ” обьем воздуха в приемной камере, соединительных трубках и манометре;

L — длина капиллярной кюветы;

1 — длина геля.

Источники информации

tS принятые во внимание при экспертизе

1. Ультрамикроанализ нуклеиновых кислот.

Под ред, Кнорре Д. Г; М.„"Наука" 1973, с. 80.

2. Осборы Н. Н. Микрохимический анализ эв нервной ткани. М., "Медицина", l978,с,209, 213 (прототип).

ВНИИПИ Заказ 7834/б1 Тираж 887 Йодпйсное

Филиал ППП "Патент",.r. Ужгород, ул. Проектная, 4