Среда для определения зараженности почвы грибами fusаriuм сulмоruм (w.l.sм.) sacc

Среда для определения зараженности почвы грибами fusаriuм сulмоruм (w.l.sм.) sacc

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Союз Советск ик

Социалистических

Республик

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ iii969716 (61) Дополнительное к авт. свид-ву(22)»явлено 02 Аб. 81 (21) 3295712/30-15 (51)M. Кл.

С 12 N1Л6 с присоелинеиием заявки ¹ (23) Приоритет

Гоаударстеенный комитет

СССР оо делам нзааретеннй н аткрытнй

Опубликовано 30.10.82.Бюллетень № 40

Дата опубликования описания 01.11.82 (53) УЙК 63.576..8(088.8) (72) Авторы изобретения

А.В.Хотянович, P.M.Èëüèíà, Н.A.Бексеева и

Всесоюзный научно-исследовательский инсти сель скохозяй ст венной ми кробиологии (71) Заявитель (54) СРЕДА ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЛАРАМ(ЕННОСТИ

ПОЧВН ГРИБАМИ ГНБАКЗИ1 СОВ.МОК0М (ЦА .SM.) БАСС.

Изобретение относится к сельскохозяйственной микробиологии и фитопатологии и может быть использовано для определения зараженности почвы грибами F,culmorum (M.G.Sm.) Басс.

Известна среда для определения зараженности почвы грибами F. oxyspoгцп,Schl, F. solani Appl et Mr, представляющая собой модификацию среды Бакстона (1 ), Однако эта среда не пригодна для

F. culmorum (W. il. Sm. ) Басс., так как не обе спечи вает четкой и х дифференци ации.!

Известна также питательная среда

Малаласекера и 1 ольхума, предложенная специально для качественной оценки зараженности семян пщеницы Г. culmoro

rum. Среда составлена на основе среды

Чапека-Докса и включает сахарозу, натрий азотнокислый, сернокислый магний, калий хлористый, ортоцид, малахито-: вый зеленый, стрептомицин, пенициллин j2 ).

Однако эта среда мало пригодна для анализа полевой почвы, поскольку антимикробные добавки в рекомендуемых авторами концентрациях слабо подавляют рост сопутствующих грибов, а прН увеличении их концентрации ингибируют рост выделяемого гриба.

Цель изобретения — составление среды для количественного определения зараженности почвы F. culmorum u четкой дифференциации данного вида гриба.

Поставленная цель достигается тем, что предлагаемая среда, содержащая сернокислый магний, агар, стрептомицин, сахарозу, содержит картофельный отвар в качестве основного источника азота и дополнительного источника углерода, глицин в качестве дополнительного источника азота, калий фосйорнокислый двузамещенный, пентахлорнитро0,5-1,0

3 969716 бензол и медицинскую желчь при сле1 дующем соотношении компонентов, г/л:

Калий Фосфорнокислый двузамещенный . 3-5

Магний сернокислый 0,5-1,0

Сахароза 15-20

Стрептомицин 0,2-0,30

Агар 15 20

Глицин 0,03-0,06

Пентахлорнитробен- 16 зол

Медицинская желчь, мл 8-10

Картофельный отвар До 1 л

Замена минерального азота на орга- 1S нический в фореле картофельного отвара,,который является источником аминного.азота и дополнительным источником, углерода (крахмал ), значительно улучт шает и ускоряет вегетативный рост и 20 пигментацию.

В среду введен также глицин, отсутствующий в картофельном отваре.

Роль этой аминокислоты сводится к образованию токсичных метаболитов, ко- ру торые контрастируют влияние желчи.

В качестве антимикробных добавок введены стрептомицин, пентахлорнитробензол и медицинская желчь, которые, полностью подавляют рост бактериальной флоры и большинства видов грибов.Применение в качестве источника фосфора физиологически щелочного его соединения (калий Фосфорнокислый двузамещенный ) в повышенной концентрации в сочетании с медицинской желчью и пентахлорнитробензолом усиливает селективность среды. Характерная пигментация колоний в чистой культуре значительно облегчает идентификацию и количественный учет. Окраска воздушного мицелия - от телесно-розового (5) до розовато-лилового (ИЗ ) цвета, окраска. обратной стороны колоний - от светло-малинового (Д61 до интенсивно малинового (Г1) (по шкале цветов А. С. Бондарцева ). !

Пример 1. Мелко нарезанный картофель в количестве 140-160 r от варивают в течение 15 мин в 1 л воды, ® фильтруют через 2"3 слоя марли, доводят отвар до 1 л, прибавляют сахарову, глицин, минеральные соли, агар, авто, клавируют 20-30 мин при 0,5 ати. В охлажденную до 45-47" С среду перед раэ-,3> ливкой в чашки Петри добавляют пента:хлорнитробензол, медицинскую желчь и стрептомицин.

Навеску почвы (в пересчете на 10 г воздушно-сухой почвы ) вносят в колбу с 90 мл стерильной воды, тщательно взбалтывают и готовят последовательные разведения до 1:10ч0. 1 мл почве ной суспензии в разведении,1:1000 высевают глубинным способом на рекомендуемую среду (по 20 чашек Петри на каждый почвенный образец ). Засеянные чашки инкубируют 5-10 сут при 25-27ОС на рассеянном свету, что способствует лучшей пигментации гриба. Затем подсчитывают количество колоний и пересчит«вают íà .1 г воздушно-сухой почвы.

Определение зараженности почвы проводят на среде следующего состава, г/л:

Фосфорнокислый двузамещенный калий 3,0

Магний сернокислый 0,5

Стрептомицин 0,2

Сахароза 15,0

Агар 15,0

Глицин 0,03

Пентахлорнитробензол .0,5 желчь медицинская, мл 8

Картофельный отвар До 1 л

ll р и м е р 2. Определение зараженности почвы проводят на среде следующего состава, г/л:

Калий Фосфорнокислый двузамещенный 5,0

Магний сернокислый,1,0

Стрептомицин )0,3 Сахароза 20,0

Агар 20,0

Глицин 0,06 . Пентахлорнитробензол 1 0

Нелчь медицинская 10

Картофельный отвар До 1 л

Анализ почвенного образца, проведенный на описанных двух вариантах предлагаемой среды, дает идентичные результаты.

Формула изобретения

Среда для определения зараженности почв« грибами Ризагiиа culmorum (Ы G. ш) Б

rn.) Sacc., содержацая источник Фосфора, сернокислый магний, сахарозу, стрептомицин и агар, о т л и ч а ю - . щ.а я с я тем, что, с целью повышения селективности среды, она содержит в качестве источника 9осфора фосфорнокислый двузамещенный калий и дополнительно глицин, картофельный отвар, 1. Степанов М. 6., Сидорова С. Ф. Иетод количественного определения Fusarium oxysporum

Schel. в полевой почве. Иикология и Фотопатология, 1981, 15, в 1,60-62.

5 96971 . пентахлорнитробензол и медицинскую желчь при следующем соотношении компонентов, г/л:

Фосфорнокислый двузамещенный калий 3-5

Сернокислый. магний 0,5-1,0

Сахароза 15-20

Стрептомицин 0,2-0,30

Агар 15-20

Глицин 0,03-0,06

Пентахлорнитробензол 0,5-1,0

Медицинская желчь, мл 8-10

КартоФельный отвар До 1 л

6 6

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

2. Mololasel:ега R., Со1йошч S.

Тгап".. Rr. Иусо1. Sop., 1969, 52,2, 187 (прототип ).

Составитель И. Ииргзоев

Редактор Т. Лопатина Техред M.Êîøòóðà Корректор М, Коста

Заказ 8314/27 Тираж 505 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035 Москва И"35 Раушская наб. д. 4/5

I-- - - -- -> --- - - -- -- ---------г

Филиал ППП "Патент", г.. Ужгород, ул. Проектная, Ч