Способ определения активности полиеновых антибиотиков

Способ определения активности полиеновых антибиотиков

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Союз Советсмик

Соцмалмстмчесммк

Респубпмм

ОП ИСАНИЕ.

ИЗОБРЕТЕНИЯ пц972400

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (6l ) Дополнительное к авт. сеид-ву (22)Заявлено 27. 04.81 (2I) 3265130/28- 13 с присоедмненмем заявки М (23) Приоритет

Опубликовано 07.11.82. Бюллетень № 41 (5! )М. Кл.

33/48

3Ьеударотекнный комнтет.СССР ао делам нзооретеннй н открытий (53) УДК 612.07 (088. 8) Дата опубликования описания 07. 11. 82

H. X. Мехтиев, Х. M.-А. Касумов и О., К. фаррфриев (72) Авторы изобретения

Научный центр биологических исследований

АН Азербайджанской ССР (71) Заявитель (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ ПОЛИЕНОВЫХ

АНТИБИОТИКОВ

Изобретение относится к медицине, в частности к тест-методам определения биологической активности антибиотиков.

Известен способ определения активности полиеновых антибиотиков путем их прямого воздействия на колонии микробов (1).

Однако известный способ является длительным.

Цель изобретения - ускорение спо" соба.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу предварительно формируют бислойную липидную мембрану на отверстии тефлоновой ячейки, далее на мембрану наносят раствор исследуемого антибиотика, измеряют проводимость мембраны и по ее уровню определяют активность полиенового. антибиотика.

Способ осуществляется следующим образом.

Для формирования мембраны готовят раствор 20 мг/мл фосфолипидов

+ 10 мг холестерина в гептане. Мембрану формируют на отверстии тефлоно5 вой ячейки площадью 10 см в растворе 100 мМ KCL, pH 7,0, и = 23оС.

Готовят раствор стандартного амфотерицина В с концентрацией 0,1 мг/мл в диметилсульфоксиде. Иикрошприцом на 1 мкл вводят раствор стандарта с обеих сторон мембраны для получения концентрации 1 ° 10 мг/мл. Растворы перемешивают магнитной мешалкой и измеряют проводимость мембраны. Затем последовательно доводят концентрацию стандарта до 2 ° 10, 3 ° 10 6

5 l0 6.10 5 ° 10 10 2-10

2,5-10 тамг/мл и каждый раз измеряют проводимость мембраны электрометри20 ческим усилителем У5-9.

Результаты измерений приведены в таблице, где обозначено : д„„- проводимость мембраны, С - концентрация стандарта.

3 972400 ф

По данным таблицы строят калибро- С> с,„-концентрация стандарта; вочную кривую. ™ - концентрация исследуемого А

Приготовляют раствор в диметил- "со"в образца. сульфоксице исследуемого образца ам- Подставляют в эту формулу САсд„*=

Фотерицина В концентрации 0,1 мг/мл. з =1,4 ° 10 мг/мл, CA ccn =2 10 мг/мл

-5

Формируют мембрану в тех же услови- и определяют С ях. Вводят исследуемый амфотерицин В до концентрации 2 10 мг/мл. Измеря- С- -100Ф = 703. ют проводимость мембраны. Она была

2 ° 10 равна 1,58.10 Ом ".см 2 По калибро» 10 Предлагаемый способ может быть ис пользован для экспресс-определения активности антибиотиков на заводах щую концентрацию стандарта, равную

ычисляют содержание медпрепаратов и в лабораториях, так активного вещества в исследуемом об- ак о пРоще и осУществлЯетсЯ за вРеразце амфотерицина В по формуле Is мЯ менее 1 ч, что пРимеРно в 20 Раз быстрее известного способа.Обработ А стон ка результатов также предельно упрощена, так как однократно строят где С универсальную калибровочную кривую для каждого антибиотика.

С = ° 1004, СА исслед

-содержание активного вещества, Ф;

КонцентраЦия, с та ндарта САА. мг/.мл

Проводимость мембраны 9

Ом-. с -г м

Концентрация стандарта С, мг/мл

Проводимость. мембраны 9

Ом см-

2 10»9

5-10-б

10 6

10-6

5 10 6

6 10-6

1,0- 10

10

2109

1,5.10

2 -10-5

2,25 ° 10 5. 2,10 -lg

3,35.10 l, 70-10

2,82 10

2,5 ° 10

5,6-10

Формула изобретения следуемого антибиотика, измеряют проводимость мембраны и по ее уровню определяют активность полиенового антибиотика.

Способ определения активности полиеновых антибиотиков, о т л и ч а юшийся тем, что, с целью ускорения способа, предварительно фор мируют бислойную липидную мембрану на отверстии тефлоновой ячейки, далее на мембрану наносят раствор исИсточники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Микогептин и его клиническое применение. М., 1973, с. 61-64.

Составитель Н. Хрусталева

Техред Е.Харитончик Корректор Q. Билак.

Редактор 8. Пилипенко

Заказ 8507/35 Тираж 887

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

1l3035, Москва, И-35, Раушская наб., д. 4/5

Подписное филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4