Способ анализа активности спермы

Способ анализа активности спермы

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Союз Советских

Социалистических

Респубпик

O ll N C A H N g (iii974>7()

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВМДЕТЕЛЬСТВУ (6l ) Дополнительное к авт. свид-ву (22)Заявлено 30,09 76 (21) 2408840/30-15 с присоединением заявки М (23) Приоритет (5l)NL. Кл.

G 01 N 33/48

А 61 0 7/02

ВоударетееииЫ1 комитет

СССР оо делам изобретеиий и открытий

Опубликовано 1). 11. 82. Бюллетень М 42

Дата опубликования описания 15. 11. 82 (53) УД К 591. 463.. 1(088;8) И.М. Арефьев, А.ll. Еськов и Г.Г. Козлов (72) Авторы изобретения

Всесоюзный научно-исследовательский и испытательный институт медицинской техники (71) Заявитель (54) СПОСОБ АНАЛИЗА АктИВНОСтИ СПЕРМЫ

Изобретение относится к биологии, медицине, животноводству и может быть использовано для диагностИки бесплодия, повышения эффективности искусственного осеменения и изучения поведения спермиев в изменяющихся условиях.

Известен способ визуального балль" ного анализа активности спермы под микроскопом, включающий отбор спермы, разбавление, нанесение капли спермы на подложку и визуальный анализ под микроскопом по десятибалльной системе !» и (2):

Однако длл получения воспроизводимых результатов капля спермы должна быть строго onределенного одинакового объема. Сама методика нанесения капли спермы вызывает гибель части спермиев, что вносит дополнительную погревность. При реализации способа возникают сложности в стабилизации и контролируемом изменении условий нахождения спермиев (температура, давление, рН, среды и т. д.). Балльная оценка является субъективной и требует при влечения высококвалифицированных операторов. Кроме того, известный способ не дает возможности сделать заключение о распределении спермиев по скоростям.

Цель изобретения - повышение точности анализа активности спермы.

Цель достигается тем, что согласно

1о способу анализа активности спермы, включающему отбор, разбавление спермы и последующую оценку жизнеспособности спермиев, после разбавления сперму подвергают облучению лу .ом лазера при длине волны 633 нм, а оценку жизнеспособности спермиев определяют по величине полуширины спектра.

Облучение спермы лучом лазера проводят при 39,0 0,5 С. о Il р и м е р. Измерения проводили на сперме быков, замороженной в гранулах при †1 С. Оттаивание гранул осуществляли при 40 С в подогретом о ,29ь-ном растворе лимоннокислого натФормула изобретения

Составитель А. Макаров

Техред E.ÕàðèòîH÷èê Корректор Г.Огар

Редактор Н. Киштулинец

Тираж 887 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб.. 4/5

Заказ 8687/62

Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Пр:i нтнэя, 4

3 97427 рия трехзамещенного пятиводного. Б качестве разбавителя использовали раствор: 100 мл дистиллированной воды, 11,5 г лактозы, 20,0 мл желтка куриных яиц и 5,0 мл глицерина. Активность g спермиев после оттаивания замороженной спермы ro визуальной балльной оценке была 5 баллов, что было подтверждено подсчетом процента живых и мертвых спермиев (50/ живых, 503 мерт-10 вых). На протяжении всего эксперимента поддерживали температуру 39+0 5 С.

Спектр рассеянного спермой света получали на экспериментальной установ1ке методом спектроскопии оптического 15 смешения в гомогенном варианте. «При работе использовали мощность излучения лазера, не вызывающую изменение активности спермы за время эксперимента, что было подтверждено визуальной балльной оценкой подвижности спермиев до и после облучения.

Активность спермы определяли по полуширине Г усредненного спектра. Значения полуширины спектра Г характери- 25 зуют среднюю подвижность спермиев.

Большие значения Г соответствуют большей активности спермы. Ширина регистрируемого спектра может быть сопоставлена с результатами визуальной оценки.30

Способ анализа активности спермы отличается объективностью, точностью, гибкостью и позволяет получить дополнительную информацию о свойствах спермы. Зто обеспечивается следующими пре-з имуществами предлагаемого способа: в рассеивающем объеме находится 10 спер4 миев (в способе, принятом за прототип, оценку обычно производят по 10 спермиям); в кювете спермии не подвергают-40 ся воздействию краевых эффектов, искажающих истинную активность спермы; изменение полуширины спектра Г обеспе0 ф чивает количественный анализ активности спермы, из измеренного спектра можно получить распределение спермиев по скоростям, что является важной ха" рактеристикой активности спермы; способ позволяет производить анализ спермы в различных условиях (температура, рН среды и т. д.), а также стабилизировать эти условия.

Предлагаемый способ предполагает возможность полной автоматизации анализа активности спермы и создание простых и надежных приборов, а также позволяет расширить возможности диаг.ностики бесплодия и повысить эффективность искусственного осеменения.

1. Способ анализа активности спермы, включающий отбор, разбавление спермы. и последующую оценку жизнеспособности спермиев, о т л и ч а ю щ .и йс я тем, что, с целью повышения точности анализа, после разбавления сперму подвергают облучению лучом лазера при длине волны 633 нм, а оценку жизнеспособности спермиев определяют по величине полуширины спектра.

2. Способ по и. 1, о т л и ч а юшийся тем, что облучение спермы о лучом лазера проводят при 39,0 0,5 С.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Иванов И. И. Основные директивы по проведению искусственного осеменения в совхозах. Изд-во "Скотовод", "930.

2. Справочник по искусственному осеменению сельскохозяйственных. животных. 2 Изд. М, Россельхозиэдат, 1977, с. 88-90.