Способ моделирования деструктивного туберкулеза легких
Иллюстрации
Показать всеРеферат
ОП ИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Союз Советсиик
Социвпистичесиик
Реапубпии
G 09 В 23/28
3Ьеударетееняый комитет
СССР яо делам изобретений и открытий
Опубликовано 15.11.82. Бюллетень М 42
Дата опубликования описания 18.11.82 (53) УДК 615. .475(088.8) (72) Авторы изороетеиня
А.Г. Хоменко, Т.И. Козулицына, О.А. Уварова, В.И. Голышевская и М.П. Ельшанская
Центральный научно-исследовательский институт туберкулеза (71) Заявитель (54) СПОСОБ МОдЕЛИРОВАНИя дЕСтРУКтИВНОГО
ТУБЕРКУЛЕЗА ЛЕГКИХ
Изобретение относится к медицине и может быть использовано в экспериментальной фтизиатрии.
Известен способ моделирования деструктивного туберкулеза легких путем иммунизации животных с последующим введением микобактерий туберкулеза 11).
Однако известный способ не обеспечивает получение туберкулезной каверны, близкой к клиническому течению и пригодной для проведения длительных химиотерапевтических экспериментов, а также характеризуется ограниченной воспроиэводимостью кавернозного процесса.
Целью изобретения является приближение к клиническому течению заболевания.
Поставленная цель достигается тем, что согласно способу моделирования деструктивного туберкулеза легких путем иммунизации животных с последую2 щим введением микобактерий туберкуле за иммунизацию проводят введением подкожно живых микобактерий бычьего типа (БЦЖ) в дозе 0,14-0,2 мг/кг веса через 1,5-2 месяца, далее внутрикожно вводят туберкулин, и при наличии папулы размером 15л17 мм производят внутрилегочную инъекцию микобактерий человеческого типа H RV в дозе 1,5-2 мг/кг веса, затем вводят сульфадиметоксин в дозе 4080 мг/кг веса в течение 10-12 дней.
Способ осуществляют следующим образом.
Морских свинок предварительно вакцинируют путем введения культуры БЦЖ подкожно а правую паховую область е дозе 0,2 мг/кг веса в 0,5 мм физиологического раствора. Через 1,5 мес после вакцинации при наличии чувствительности к туберкулину (размер папулы 15к17 см) производят внутрилегочное заражение путем введения мико3 97439 бактерий туберкулеза человеческого типа НВ1ВН в диафрагмальную долю правого легкого в, дозе 2 мг/кг веса в
0,2 мл вазелин-ланолиновой взвеси.
Соотношение ланолина и вазелина 1:2.
Прокол производят с помощью шприца в
VI межреберье, по верхнему краю вниз лежащего ребра, на 1 см правее позвоночника, длина иглы 2 см, положение шприца перпендикулярно к туловищу So животного. Иглу вводят во всю длину, вес каждого животного не менее 400 r.
На следующий день после внутрилегочного заражения, утром натощак перорально животным вводят сульфадиметок-. 1э син в дозе 80 мг/кг веса животного, препарат разводят в дистиллированной воде с добавлением сахара (20 г .на литр воды).
В последующие 9 дней препарат вводят в дозе 40 мг/кг веса животного.
Эта доза. является достаточной, чтобы сохранить уровень создавшейся БАК (бактериостатической концентрации).
Всего продолжительность курса лечения 10-12 дней.
П р и м. е р. Морской свинке весом
320 r проводят вакцинация культурной
ВЦЖ в дозе 0,14 мг/кг сухого веса в
0,5 мг физиологического раствора.
Указанную дозу вакцины вводят подкожно в npasye паховую область.
Через месяц определяют кожную чувствительность на введение альттуберкулина в разведении 1:10. С этой целью предварительно в левой паховой области стригут волосяной покров на участке площадью 9 см . Альттурберъ кулин вводят внутрикожно в количестве 0,1 мл приготовленного раствора.
В результате внутрикожного введения туберкулина в центре обнаженного от волосяного покрова участка кожи образовывается папула - "пуговка".
На следующий день чувствительность кожи определяют измерением гиперемированного участка. По горизонтали это расстояние 15 мм, по вертикали 18 мм.
Через неделю животному вводят мик- ЭВ робактерии туберкулеза человеческого типа Н ЙЧ в правое легкое в дозе
1 мг.
Приготовление суспенэии для заражения. 5$
Микобактерии туберкулеза человеческого типа H RV выращивают на картофельной среде с глицерином в тече9 4 ние 3-х недель. Перед взвешиванием культуру тщательно подсушивают между полосками стерильного бумажного фильт ра. 1 мг навески суспензируют в
0,2.мл вазелин-ланолиновой взвеси, соотношение вазелинового масла и ланолина равняется 2:1 соответственно.
Приготовленную суспензию, предварительно подогрев до температуры не более 40 С, набирают в обычный туберкулиновый шприц, размер иглы 2 см.
Весь процесс приготовления суспензии проводится в стерильных условиях. Ланолин и вазелиновое масло предварительно кипятят.
Перед проведением прокола морскую свинку фиксируют на деревянном столике, положив на живот, направив передние и задние лапы таким образом, чтобы линия позвоночника была прямая, а лопатки подтянуты кверху.
Справа от позвоночника в области б-7 межреберья стригут волосяной покров и обнаженный участок кожи протирают спиртом. Прокол производят в 6-м межреберье на расстоянии 1 см справа от позвоночника по горизонтали и
0,8 см ниже угла лопатки. Иглу вводят на всю длину (2 см) перпендикулярно к кожной поверхности. Во избежание шока инфект вводится медленно.
Вес животного к этому периоду 500 г.
На следующий день после заражения, утром до кормления, морской свинке вводят per os 80 мг/кг сульфадиметоксина, суспензированного в
0,5 мл дистиллированной воды с добавлением 1 r сахара. На следующий день препарат вводят в дозе 40 мг/кг однократно в сутки в одно и то же время в течение 7 дней. Контроль эа развитием патологического процесса в легочной ткани осуществляют рентгенологически через 1,5 мес после заражения в легочной ткани справа, при рентгенологическом обследовании отмечают очаг затемнения (фокус пневмонии).
Через .4 мес морскую свинку убивают путем декапитаци. В легких, справа, обнаружена каверна с плотной фиброзной стенкой. В остальных отделах правого легкого рассеяны немногочисленные туберкулезные бугорки, Левое легкое воздушно. В печени и селезенке туберкулезных изменений не обнаружено.
При микроскопическом исследовании каверны обнарумено типичное строеСоставитель Т. Иуравкина
Редактор Т. Веселова Техред M.Ãåðãåëü Корректор Г. Огар
Тираж 472 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Н-35, Раушская наб., д. 4/5
Заказ 8709/68
Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4
S 9743 ние ее стенки, состоящей из кавеоэнонекротического внутреннего слоя, неши. рокого слоя специфических грануляций и узкого слоя фиброзной ткани, ин" фильтрованной лимфоидной клетками и сегментоядерными лейкоцитами.
Окружающая каверну легочная ткань воздушна, междолевые перегородки утолщены.
Предлагаемый способ применен íà 1р
60 морских свинках.
В результате применения предлагаемого способа получен 1004 результат выживаемости.
Предлагаемый способ моделирования з деструктивного туберкулеза легких позволяет получить близкую к клиничес. кому течению туберкулезную каверну в легких в эксперименте.
Предложенная модель обладает луч- рр шей воспроиэводимостью и приводит к уменьшению экономических затрат на исследование., формула изобретения
Способ моделирования деструктивного туберкулеза легких путем иммуни99 4 эации животных с последующим введени.ем микобактерий туберкулеза, о тл и ч а ю шийся тем, что, с целью приближения к клиническому течению заболевания, иммунизацию проводят введением подкожно живых бактерий бычьего типа (БЦЖ) в дозе
0,14-0,2 мг/кг веса через 1,5-2 месяца, далее внутрикожно вводят туберкулин, и при наличии папулы размером 15xl7 мм производят внутрилегочную инъекцию микобактерий человеческого типа H RV в дозе 1 52 мг/кг веса, затем вводят сульфадиметоксин в дозе 40-80 мг/кг веса в течение. 10" "12 дней.
Источники информации, принятые во внимание при экспертизе
1. Бондарев И.М. и др. Способ моделирования туберкулеза легких у морских свинок. - В кн,: Патогенез и саногенез очаговых деструктивных форм туберкулеза. М., 1967, с. 33-38.