Способ получения антрациклиновых гликозидов

Способ получения антрациклиновых гликозидов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение касается антрациклиновых гликозидов, в частности соединений общей ф-лы: @ где R<SB POS="POST">1</SB>=H

один из R<SB POS="POST">2</SB> и R<SB POS="POST">3</SB>=OH, другой NO<SB POS="POST">2</SB>, @ где K=-CH-CH<SB POS="POST">2</SB>-CH(NH<SB POS="POST">2</SB>)-CH(OH)--CH(CH<SB POS="POST">3</SB>)-O

R<SB POS="POST">4</SB>=H,OH. ОНИ ОБЛАДАЮТ ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТЬЮ, ЧТО МОЖЕТ БЫТЬ ИСПОЛЬЗОВАНО В МЕДИЦИНЕ. ЦЕЛЬ - СОЗДАНИЕ НОВЫХ, БОЛЕЕ АКТИВНЫХ И МЕНЕЕ ТОКСИЧНЫХ ВЕЩЕСТВ УКАЗАННОГО КЛАССА. СИНТЕЗ ВЕДУТ РЕАКЦИЕЙ АГЛИКОНА (ВМЕСТО ГРУППЫ CH<SB POS="POST">2</SB>R<SB POS="POST">4</SB> в соединении ф-лы I находится метил) с I-хлор-N, 0-ди(трифторацетил)даунозамином в среде безводного CH<SB POS="POST">2</SB>CL<SB POS="POST">2</SB> в атмосфере азота при 15°С в присутствии трифторметансульфоната серебра. Затем удаляют защитную группу: CF<SB POS="POST">3</SB>-C(O)-O, обработкой метанолом в течение ночи при комнатной температуре, проводят отделение 7 (S), 9(S), N-трифторацетильного антрациклонового гликозида от 7 (R), 9(R)-антрациклинового гликозида хроматографией на колонке с силикагелем с элюированием смесью CH<SB POS="POST">2</SB>CL<SB POS="POST">2</SB>-CH<SB POS="POST">3</SB>C(O)OC<SB POS="POST">2</SB>H<SB POS="POST">5</SB>-CH<SB POS="POST">3</SB>C(O)OH (соотношение объемов 90:10:1). Далее удаляют с NH группу CH<SB POS="POST">3</SB>-C(O)-щелочным гидролизом с помощью 0,1 N NAOH. Выделяют целевой продукт в виде хлоргидрата путем обработки основания раствором HC1 в метаноле. При необходимости полученное соединение бромируют в положение 14 с последующей обработкой водным раствором формиата натрия, получением соединения ф-лы I с R<SB POS="POST">4</SB> = OH и выделением его в виде гидрохлорида. Новые соединения более активны, чем известный даунорубицин, в отношении асцитной лейкомии Р388 и рассеянной Грос-лейкомии. 5 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК .Й ОЦЩр

"@ «ЧЕИИйН " / «С» 1» 1.1Д

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К flATEHTY

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

1 (21 ) 4028510/23-04 (22) 13. 11. 86 (31 ) 852 8440 (32) 19 ° 11. 85 (33) СВ (46) 23. 03, 90. Бюл. Ф 1 1 (71) Фармиталиа Карло 3р6а С.п.А (IT) (72) Франческо Анд>;;елуччи, Naypo Гигли, Серджио (1енко и Фернандо Джулиани (IT) (53) 547, 455. 07 (088. 8) (56) Патен т СССР Ф 11 87724, кл. С 07 Н 15/24, 1983.

Патент СССР Р 1227117, кл. С 07 Н 15/24, 1982.

Патент Швейцарии Р 649559, кл. С 07 Н 15/252, 31.05.85. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЛ АНТРАЦИКЛИНОВЫХ

ГЛИКОЗИДОВ (57) Изобретение касае тся антрациклиновых гликозидов, в частности соедине н ий об ще и ф-лы: сн-сн-с — c(01 с-сг;с-cHg — с(---он)-ciao)-cHgRq и н < сн-cR c-c(o) — с — cR)c-cHI... Ок)-cH) где R, =Н; один из R, и В =ОН, другой N0 где К=-СН-СН -СН ИН -СН ОН --СН СН« -О; г «

R« =Н, ОН. Они обладают противоопухолевой активностью, что может быть использовано в медицине. Цель — создание,новых, более активных и менее ток„„SU„„1553015 A 3 (51) 5 С 07 Н 15/24//А 61 К 31/70

2 сичных веще ств указ анно го класса. Синтез ведут реакцией агликона (вместо группы СНгR« в соединении ф-лы I находится метил) с 1-.«лор- N,О-ди(трифторацетил)даунозамином в среде безводного СН С1г н атмосфере азота при

15 С н присутствии трифторметансульфоната серебра. Затем удаляют защитную группу: CF -С(0)-О, обработкой метанолом н течение ночи при комнатной температуре,проводят отделение 7 (S), 9 (S), N-трифторацетильного антрациклононого гликозида от 7 (R), 9 (R)— антрациклинового гликозида хроматографией на колонке с силикагелем с элюиронан ием сме сью СН «Сl — СН С (0) ОС Н -СНзС(0)ОН (с отношение объемов 90:10:

: 1) . Далее удаляют с NH-группу СН

-С(О)- щелочным гидролизом с помощью

О, 1 н. NaOH. Выделяют целевой продукт н виде хлоргидрата путем обработки основания раствором НС1 н метаноле.

При необходимости полученное соединение бромируют в положение 14 с последующей обработкой водным раствором формиата натрия, получением соединения ф-лы I с К =ОН и выделением его н виде гидрохло рида. Новые соединения более активны, чем известный даунорубиции, в отношении асцитной лейкомии

РЗ88 и рассеянной Гросс-лейкемии.

5 табл.

1553()15

Изобретение относится к способу получения новых производных антрациклиновых глико эндов общей формулы 3 5

СН2РФ

З1 О 32 О сн

НО NH

< где R — водород, один из

Б и Кз — гидроксильная группа; а другой из В и К вЂ” нитрогруппа;

Š— водород или гидроксильная группа, обладающих противоопухолевой активностью, >

25

Цель изобретения — получение новых антрациклиновых гликозидов, обладающих бо пьше и противов ирусн ой активПример 1. Получение (+)4-деметокси-6-деокси-6-нитродауномицинона

3S (соединен ие 5 ) .

a) Получение 4-цеметокси-6-деокси7,9, 11-триаце тип — дауномицинона (промежуточного соединения 2) .

4 чеметокси- 6-деокси-дауномицинон 40 (соединение 1), (1,7 r 4,8 ммоль) нагревают при 90 С при пе ремешивании вме с те с ук сусным ан гидридом (25 мл) и пиридином (25 мп) . После 2-часового нагревания ре акционн ую сме сь выливают в смесь льда с водой и оставляют стоять в течение 30 с при перемешиван ии. Тле рдое веще ство отфильтровывают, промывают водои и кристалпизуют из ме— танола, получая названное соединение

2 (выход 2, 1 9 r (94>! ), т. пл. 225226 С).

ИК (KBZ), см : 1770 (ароматический сложный эфир), 1740 (алифатический сложный эфир), 1720 (апифагический кетон), 1675 (ароматический кетон), 1590 (Ar).

УФ (1еОН), х, нм: 210,258,334.

Масс-спек т роме трия гысок о го разрешен ия: m/Z 478 (100, l! ) . ностьн, чем структурные аналоги — до- . ксор бицин и даунопицин, и меньшей 30 токсичностью путем синтеза укаэанных соединений °

IL1P (200 М1ц, (.n(.1 ); д,11 и 2,01 (син гпеты, 6Н, ОСОСНЗ ), 2, 22 (син гле т, 3Н, СОСН,), 2,52 (сингиет, ЗН, Ar

ОСОСН ), 2,4-3, 3 (мупьтинпет, 4Н), 6,17 (расширенный пик, 1Н, 7-Н), 7,78,25 (мупьтиппе т, 5ll ) .

) Получен иe 4-деме ток<-и-6-деокси 7,9-диацети.t-äàóttîìèöèttîttà (coen ..

Полученное соединение 2 (2, 1 г

4,5 ммопь) растворяют в метаноле (220 мл) и метилене (110 мл) . Раствор

1 и. морфолина в метаноле (18 мл, 4 эквивалента) добагпяют и рас.вор оставляют стоять при 40 С н течение о.

5 и. IIo спе нейтрализации водным

1 и. раствором НС1 растворитепь удаляют под вакуумом и остаток кристаппизуют иэ метанола, получая наэваннное сое„ шение 3 (выход 1,7 г (90Х), т. пч.

265 С с разложением).

ИК (КВг), см : 3440 (фенольный

0H); 1745, 1720, 1670 (нехелатированный хинон), 1630 (х<патиронанный хинон), 1590.

I1acc-спектрометрия высокого разрешен ия: m/Z 436 (11 ) .

УФ и видимый сп< ктры и< г по«гения (МеОН), х „„, «и . 20> 22< 258 336

386,404.

IMP (200 МГц, CI)(1 ): d 2,09 и 2,04 (син гле ты, 6Н, ОСО:;."Н ), 2, 25 (син гле т, ЗН, COCH ), 2,54 3-40 (мультиппет, 4Н), 6,19 (двойной дублет, J=3,1 и

5, 6 Гц, 1Н, 7-Н ), 7, 77-8, 35 (му

n) Получен ие 4-деме ток си-6-деок си6-н итро-7, 9-диаце тип-даун оминцинона (промежуточное соедгв<ение 4) .

К смеси полученног о соединения 3 (1,6 г, 3,66 ммоль), >Л(4NO, (1,6 г, 20 ммоль) и (CF (:0? q 0 (18 Më) добавляют безводный СН С1 (300 мл) в атмосфере азота и при эне ргичном неремешивании при комнатной температуре. По истечении 90 с добавляют метанол (3 л), получая желтый осадок, которьггг отфильтровывают, промывают <.веже перегнанным метанолом и эти говым эфиром, После высушивания получают названное соединение 4 (выход i, 2 3 г (70i. ), т. пл. 263-264 C) .

ИК (KBt ), см : 34 it, 1745, 1720, 1675, 1635, 1585, 1540 (Ar — 110 ) .

Масс-спектрометрия ны< окого раз— решения: m/Z 481 (".1 ) .

УФ и видимый спек г ры (М< ОН), х нм: 21 6, 260, 338, 400.

5 1553(ПМР (200 МГц, (РС! э) 2 «04 и 2 00 (син глеты, 6Н, ОСОСН ), 2,24 (синглет 3Н, СОСН э),,43-3,51 (мультиплет, 4Н), 6,22 (двойной дублет, =2,3 и 5,4 Гц, 1Н, 7-Н), 7,8-8,4 (мультиплет 4Н), 13,59 (синглет, 1Н, 11-OH ) .

Получе ни ое вьппе на стадии Ь соединение 4 (1,1 г, 2 3 ммопь) растноряют в ТГФ (220 мл).

К раствору добавляют 0,1 н. NaOH (220 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота и при перемешивании. После 1 ч растнор доводят до рН 15 примерно 7 с помощью 1 и. раствора

НС1 и растворитель удаляют под вакуумом. Остаток растворяют с помощью

СН С1з, раствор промывают водой до тех пор, пока смесь не нейтрализуется,yp высушивают над Nà SO и растноритель выпаривают. После хроматографиронания на силикагеле получают названный продукт реакции — соединение 5 (выход

0,77 г (90%), т.пл, 233-234 С с раэ- 25 ложением) .

ИК (KBr), см- : 3570, 3470, 1710, 1680, 1630, 1585, 1535.

Масс-спектрометрия высокого разрешения: m/Z 398 (МН+) «397 (М ) .

УФ и нидимый спектры (МеОН), х нм: 216, 260, 341, 384, 401.

ПМР (200 МГц, CDC1 ); d 2,23-3,22 (мультиплет, 4Н), 2,41 (синглет, ЗН, СОСН э), 4,02 (дублет, J=8,4 Гц, 1Н, 7-0Н), 4«67 (сии глет, 1Н 9-OH), 5,02 (три дублета, J=2 3,4,3 и 8,4 Гц, 1Н, 7-Н), 7,8-8, 4 (мультиплет, 4Н), 13,51 (сии глет, 1Н, 11-ОН) .

Пример 2. Получение 4-деметок40 си-1 1-дезокси-11-нитродауномицинона (соединение 10) . е) Получение 4-деметокси-6,7,9триаце тил-1 1-деок сидауном ицин она (промежуточного соединения 7).

4-Деме ток с и-11 тде ок си-дауномицинон (соединение 6) . (О, 7 г, 2 ммоль) перемешивают вместе с уксусным ангидридом (10 мл) и пиридином (10 мл) при комнатной температуре, Спустя 24 ч реакционную смесь обрабатывают так

« как описано в примере 1а, получая названное выше соединение 7 (выход

0,88 r (93%), т.пл. 220-222 С).

ИК (KBr), см : 1780, 1730, 1720, 1675, 1590.

УФ (МеОН), х, нм: 210 258

334. мыкс 15 6

Масс-спектрометрия высокого разрешения: m/Z 479 (МН ), 478 (М ) .

ПМР (200 МГц, СРС1«, Т=40 С):

d 2,03 (сии глет, 6Н, ОСОСН> ), 2,23 (сии гле т, ЗН, СОСН «) «2, 44 (сии глет, ЗН, Ar — ОСОСН ), 2,44 — 3, 39 (мультиплет, 4Н ), 6,46 (уширенный пик, 1Н, 7-Н ), 7, 75-8, .3 (мультипле т, 5H) . 6) Г!олучен ие 4-деме ток с и-7, 9-диаце т ил-11-де ок с и-даун ом иц ин она (промежуточного соединения 8) .

Полученное соединение 7 (0,83 г, 1,74 ммоль) обрабатывают способом, описанным н примере 1б, получая названное соединение 8 (выход 0,67 г (881 1, т. пл. 244 С), ИК (KBr), см : 3430, 1730, 1665, 1640, 1590.

УФ и видимый спектры (МеОН), Л нм: 208, 226, 254, 334, 384, 400.

Масс-спектрометрия высокого разрешения: m/Z 436 (Г1 ).

ГГМР (200 МГц, CDC1. ): сР 2,04 (синглет, 6Н, ОСОСН ), 2,24 (синглет, ЗН, СОСН э ), 2, 40-3, 30 (муль тилле т, 4Н), 6,47 (двойной дублет, J=2,0 и 5,5 Гц, 1Н, 7-Н), 7,8-8,3 (мультиплет, 5Н), 13 06 (синглет, 1Н, 6-OH).

p,) . Получение 4-деметокси-7, 9-диаце т ил-1 1-де ок си-1 1 -н итродаун омицин она (промежуточного соединения 9) .

Полученное соединение 8 (0,62 Г«

1,42 ммоль) обрабатывают с МН ИО« (0,57 r«7,1 ммоль), (СР СО) 0 (4мл) в безводном СН CI (90 мл) . Используя ме тодику, идентичную примеру 1б, получают соединение 9, (ныход 0,5 г (73Х), т. пл. 272-274 С с разложением).

ИК (КВг), см ": 3450, 1740, 1710, 1680, 1635, 1590, 1545 (Ar — NO<).

УФ и видимый спектры (MeOH)« нм: 208, 254, 334, 400.

Масс-спектрометрня высокого разрешен ия: m/Z 481 (М ) .

ПМР (200 МГц, СРС э): d 206 и

2,04 (синглет, 6Н, ОСОСН э), 2,2 (синглет, ЗН, СОСН ), 2,42-3,03 (мультиплет, 4Н), 6,50 (двойной дублет, J 1,7 и 5,5 Ри,, !Н, 7-Н), 7,8-8,4 (мультиплет, 4Н), 13,50 (синглет, 1Н, 6-ОН).

Полученное на стадии Ь соединение 9 (0,45 г, 0,94 ммоль) обрабатывают 0,1 н. раствором NaOH так, как это описано в примере 1 ь, получая продукт реакции — названное выше сое1553015 динеиие 10 (выход 0,34 г (912), т.пл. 231-233 С).

ИК (KBr), см : 3550, 1710, 1675, 1630, 1540.

УФ и видимый спектры (МеОН), нм: 210, 214, 218, 250, 326, 336, 400.

Иасс-спектрометрия высокого разрешения: m/l. 397 (И ).

Вычислено для С, Н,р)0 397,(798, найдено 397,0808, ПИР (200 ИГц, CDC13): (Р 2,18-3,1 (мультиплет, 4Н); 2, 38 (син глет, ЗН, СОСНз), 3,85 (дублет, J=6,2 Гц, 1Н, 7-ОН), 4,55 (сии глет, 1Н, 9-ОН), 5,36 (три дублета), J=1,8, 4,8 и 6,2 Гц, 1Н, 7Н ), 7, 8-8, 4 (мультипле т, 4Н), 13 7 (син глет, 1Н, 6-ОН) .

Пример 3. Получение 4-деме20 токси-6-дезокси-6-нитро-N-трифторацетил-даунорубицина (соединение 11), К охлажденному раствору (15 С) рацем иче ско го 4-деме то кси-6-де зок си6-нитродауномицинона 5 (0,7 г, 25

1,76 ммоль) в безводном хлористом метилене (140 мл) одновременно и быстро добавляют при энергичном перемешивании и пропускании азота 1-хлор, N,Оди-(трифторацетил)-даунозамин (1,88 г, 30

5,28 ммоль) в безводном CH C1 (40 мл) и трифто рме тан суль фон ат се ре бра (1,4 г, 5, 28 ммоль) в безводном этиловом эфире (40 мл) . После 20 с добавляют насыщенный водный раствор

NaHCO> (100 мл) и смесь оставляют стоять при перемешивании в течение

10 с. Смесь фильтруют через цеолит, органический слой отделяют, промывают водой, высушивают над Иа)$0 и раство-40 ритель удаляют под вакуумом.

Желтое вещество растворяют в ЖОН (300 мл) и оставляют стоять в течение ночи при комнатной температуре, чтобы удалить О-трифторацетильную группу. 45

Остаток, получающийся при выпаривании растворителя, хроматографируют на силикггеле гчоирующей системой:

СН, С1. -EtOAC-СН, COOH (90:10: 1) v/v) получая с1-гликозиды 7(S): 9(S) с выходом 0,43 r (397.) и 7 (К): 9(R) с выходом О, 43 r (397)

Для 7 (S) 9(Б):

Т. пл. 245-246 С.

ИК (КВг), см : 34703450, 1720, 1700 (N-трифторацетил), 1680,1635, 55

1590, 15 35.

Mace-спектрометрия высокого разрешения: m/i . t 23 (ИН -) .

УФ и видимый спектры (1!О ОН ), р..„„им: 208,260,341,384,401. (, j в=+337 (с=О,()5541 в ИеОН).

К;((11еОН): 2) f 226 им=+19, 31, a p 270 им=-9.,94, 4p 292 нм=+5,67, d< 34() им=+7,68.

ПИР (200 МГц, С()С1,): 1,24 (дублет, J=6,8 Гц, ЗИ, 5 — СИ „); 1,82 (тройной дублет, J=4,1; 12,4

12,4 Гц, 1Н, 2 акс — И), 1,94 (дуб— лет, J=8,2 Гц, 1Н, 4 — ОН), 1,95 (двойной дублет, J=5,0 и 12,4 Гц, 1Н, 2 экв — Н), 2, 15 (двоииой дублет, J=4, 3 и 15, 1 Гц, 1Н, 8 акв-Н), 2,34 (син гле т, ЗН, СОСИ q), 2, 48 (тройной дублет, .)=1 8; 2 3 и 15 1 Гц, 1Н, 8 экв Н), 3,10 (дублет, 1=187 Гц, 1Н, 10 акс-Н), 3,27 (двойной дублет, J=

=1,8 и 18,7 Гц, 1Н, 10 экв Н), 3,65 (двойной дублет, J=2 7 и 8,2 Гц, 1Н, 4 -Н), 4, 1-4, 3 (мультиплет, 1Н, 3 -kl), 4, 30 (квартет, J=6,8 Гц, 1Н, 5 -Н), 5,00 (дублет, J=4 1 Гц, 1Н, 1 -Н), 5,11 (двойной дублет, J=2,3 и 4,3 Гц, 1Н, 7-Н), 6,61 (дублет, J=8 O Гц, 1Н, NHCOCF>), 7,8-7,9 (мультиплет, 2Н, 3H), 8 2-8 4 () ультиплет, 2Н, 1-Н, 4-Н), 1 3,55 (сии глет, 1Н, 11-ОН) .

Для 7 (R) 9 (R)

Т.пл, 145-146 С.

Масс-спектрометрия высокого разрешения: m/Z 623/10, (ИН ), 579(100).

КД (ИеОН): d 226 нм=-10,9, 2)

271 нм =+7,26, ЛЕ 292 нм =-0,27, 2)> 300 нм=+0,56, 2(< 340 нм =-5,1, fd 7 =-293 (c=0,0635 и Ие()И) .

IlNP (200 МГц, CDC1 ): J 5,14 (триплет, 7=3,0 Гц, 1Н, 7-Н), 5,27 (мультиплет, 1Н, 1-Н) .

Пример 4. Получение хлоргидрата 4-деметокси-6-дезокси-6-нитродаунорубицина (соединение 12).

4-Деметокси-6-дезокси-6-нитро-Nтрифторацетил-даунорубицин (0,130 г, 0,2 ммоль) растворяют в ацетоне (6 мл). При О С в атмосфере азота и перемешивании добавляют 0,1 н. раствора NaOH (60 мл). После 2 ч ацетон удаляют под вакуумом и рИ доводят до 4,5 с помощью 0,1 н. НС1.

Водный раствор экстрагируют с помОщью СН С1< дОводят рН дО примернО

6,5-7,0 с помощью 0,1 в. NaOH и экстрагируют с помощью СН,С1 . Органический слой промывают водой, высушивают над Иа 80„и раст> оритель выпаривают. Остаток раств 1ряют в МеОН (5 мл), подкисляют ве » .)ькими капляг

155 10 ми раствора НС1 в МеОН и при добавлении диэтилового эфира и н-гексана выпадает в осадок хлоргидрат. Твердое вещество фильтруют, промывают лиэтиловым эфиром до нейтрализации среды и высушивают, чтобы получить названное соединение 12 (выход 0,080 г (687), т.пл. 173 С с разложением).

ИК (КВг), см : 3400,1710,1675, 1630,1590,1540.

Масс-спектрометрия высокого разрешения: m/Z 527 (MH ), Пример 5. Получение 4-деметокси-!1-дезокси-11-нитро-N-трифгораце!

5 тил-даунорубицина (соединение 13) .

Рацемический аглюкон 11 (0,290 г, 0,73 ммоль) превращают в соответствующий гликозид, как это описано в примере 3, Названный продукт реакции

20 (7 (S): 9(S) )с выходом 0,1 г (247) и его диастереомер (7(R): 9(R)7 с выходом О, 1 г (247.) получают после хроматографиче ского разделения.

Для 7 ($): 9(S):

Т, пл. 237-240 С с разложением.

ИК (KBr), см : 3500,3400, 1720, 1675, 1640, 1540.

Масс-спектрометрия высокого разрешения: m/Z 579Г! -СООН ).

УФ и видимый спектры (МеОН), Л„„,: 207,259,335,400.

КД (МеОН): д 221 им=+11,1, i!@250 им=+4,0, Л 289 нм=-5,1, Ь 330 нм=+3,1, h 400 нм=+1,0.

Lg3 =+22 (c=0,0623 в MeOH).

ПМР (200 Г1Гц, CDC1 3): о 1,30 (дублет, J 6 5 Гц, ЗН, 5, -СН 3), 1,86 (тройной дублет, J=4,0; 13,0 и

13,0 Гц, 1Н, 2 акс-Н), 2,03 (двойной дублет, J=44 и 13,0 Гц, 1Н, 2

I 40 экв-Н), 2,13 (двойной дублет, 1=4,3 и 14,9 Гц, 1Н, 8 акс-H), 2,36 (три дублета, J=1,6, 2,2 и 14,9 Гц, 1Н, 8 экв -Н), 2,37 (синглет, ЗН, СОСНз), 2,89 (двойной дублет, 3=1,6 и18,2 Гц, 45

1Н, 10 . экв — Н), 3, 12 (дублет, J-=

=18,2 Гц, !Н, 10 акс — Н), 3,68 (двойной дублет, J=3 0 и 8,0 Гц, iH, 4 -Н), 4,15-4,30 (мультиплет, 1Н, 3 -Н), 4, 25 (квартет, J=6,5 Гц, 1Н, 5 --Н, син гле т, 1Н, 9-OH) 5, 30 (двойной дублет, J=2 2 и 4,3 Гц, 1Н, 7-Н), 5,47 (дублет, J=4,5 Гц, 1Н, 1 -Н), 6 70 (дублет, 1 =8 О Гц, 1Н, NHCOCF з), 7,8-7, 9 (мультипле т, 2Н, 2-Н, З-Н), 55

8, 2-8, 4 (мультипле т, 2Н, 1-Н, 4-Н), 13,72 (синглет, 1Н, 6-ОН).

Для 7 (R) 9 (R) 1 5

Г!зсс-c»eктpoметрия высокого разре-, шения: m/Z 579 (100, М -СОСН3).

IlMP (200 МГц, CDC1 з): S 5,35 (мульI типлет, 1Н, 1 -Н), 5,59 (двойной дублет, J=2,0 и 3,5 Гц, 1Н, 7-Н).

Пример 6. Получение хлоргидрата 4-деметокси-11-дезокси-11-нитродаунорубицина (соединение 14) .

Соединение, полученное по примеру 5 (0,090 г, 0,145 ммоль), обрабатывают так, как это описано в примере 4, получая названное соединение 14 (выход 0,061 г (75X) т. пл. 212 С с разложен ием) .

ИК (КВг), см :3400,2900,1710, 1670, 1635, 1590, 1540.

Масс-спектроме трия высокого разрешения: m/Z 527 (МН ).

УФ и видимый спектры (Г1еОН), нм: 208, 222, 256, 402 °

Пример 7. 4-Деметокси-6-деокси-6-нитро-доксорубицин (соединение 15) .

4-Деме ток си-6-деок си-6-нитро-даунорубицин гидрохлорид из примера 4 (0,86 г, 1,52 ммоль) растворяют в

50 мл метанола и 50 мл диоксана. К перемешиваемому раствору добавляют триэтилортофтормиата (1,5 мл) и О, 92 мл раствора брома в хлористом метипене (30 мас.7 объема).

После выдержинания в течение 4 ч при комнатной температуре раствор выливают в смесь диэтилового эфира (300 мл) и н-гексана (500 мл) и осажденный 4-деметокси-6-деокси-6-нитро13-диэтилкеталь-14-бром-даунорубицин собирают и промывают эфиром.

Твердый материал растворяют в

120 мл 0,25 н. бромистоводородной кислоты и 120 мл ацетона. После выдерживания в течение 16 ч при комнатной температуре добавляют 4,8 г формиата натрия, растворенного в 50 мл воды, и спустя 24 ч при 50 С раствор обрабатывают насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия до щелочного рН среды.

При встряхивании с хлористым метиленом реакционная смесь дает красноватый осадок 4-деметокси-6-деокси6-нитро-14-броми-даунорубицина, который отфильтровывают и промывают водой, Маточный раствор экстрагируют несколько раз хлористым метиленом, и растворитель удаляют в вакууме, получая вторую порцию неочищенного продукта.

40

Твердый материал растворяют в

25 мл 0,25 н. бромистоводородной кислоты и 25 мл ацетона и выдерживают в течение ночи при комнатной температуре. Добавляют 1,5 г (формиата натрия растворенного в 15 мл воды и

% о температуру повышают до 50 С в течение 24 ч.!! 15530

Эти две порции объединяют и растворяют н метаноле, содержащем 10Х уксусной кислоты, 20 г силикагеля, добавляют в этот раствор и растворитель осторожно удаляют в вакууме.

Твердый материал загружают на верх колонки (5x30), приготовленной из силикагеля и хлористого метилена, атем элюируют смесью (80: 10 об/об) хло рис тый ме тиле н — 95 X.-ный этиловый спирт. Чистые фракции собирают, и ра ство рите ль удаляют в вакууме . Остаток растворяют в метаноле, охлаждают при 0 С, подкисляют 0,5 н. раствором НС1 в метаноле до значения рН около 3, При добавлении диэтилового эфира образуется желтый осадок, который отфильтровывают и промывают эфиром.

После высушивания в вакууме получают

0,45 г (суммарный выход 51X) гидрохлорида 4-деметокси-6-деокси-6-нитродоксорубицина.

ИК-спектр (KBr) см : 3400, 1710, 25

<4 675, 1630, 1590, 1540.

ФД-масс-спектр: м/е543 (МН+).

УФ видимый спектр (MeOH) нм: 208,260,341,384,401.

Кг (пластина с кизельгелем F 254

"Мерк": дихлорметан/метанол/уксусная кислота/вада 80: 20: 7: 3)=0,37.

Пример 8. 4-Деметокси-11-деокси-1 1-н итро-док сорубицин (соединение 16) .

4-Деме ток си-1 1-деок си-1 1-нитродаунорубиц гидрохлорид из Примера 6 (0,35 г 0,62 ммоль) растворяют в

15 мл метанола и 15 мл диоксана. К перемешиваемому раствору добавляют

0,5 мл триэтилортоформиата и 0,34 мл раствора брома в хлористом метилене (30 мас.7.) .

Спустя 4 ч реакционную смесь выливают в смесь из 150 мл диэтилового эфира и 300 мл н-гексана, образовавшийся осадок 4-деметокси-11-деокси1 1-нитро-13-диэтилке таль-14-бромдаунорубицина отфильтровывают и промывают эфиром.

15 !2

Добавляют насыщенный водный раствор бикарбоната натрия до щелочной среды и смесь экстрагируют хлористъгм метиленом.

Органический слой сушат над сульфатом натрия и растворитель 4-деметокси11-деокси-11-нитро-14-бромо-даунорубицина удаляют в вакууме, Неочигц нный материал очищают на хроматографической колонке с кизельгелем, которую злюируют смесью хлористый метилен/

/метанол/уксусная кислота 160:20:8.

Чистые фракции собирают, промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и водой до нейтральности, затем продукт экстрагируют, промывая

его раствором воды и 0,1 н. соляной кислоты при рН около 3, Водный раствор подвергают лиофильной сушке, получая 0,17 г (общий выход 477.) гидрохлорида-4-деметокси11-деокси-11-нитро-доксорубицина.

ИК-спектр (КВг), см : 3400,2900, 1710,1670,1635,1590,1540.

ФД масс-спектр: м/е543 (МН ) .

УФ и видимый спектр (МеОН), Л,„,„„,: нм: 208, 2? 2, 256, 402.

R1 (пластина с кизельгелем F 254 Ме рк": хло рис тый мет иле н /ме тан ол/

/уксусная кислота/вода 80:20:7:3)=

=0,407.

Биологическая активность соединений по примерам 6 и 4.

Соединения испытывали по сравнению с даунорубицином (ДНР) против клеток Не1а u P 388 ин витро. Соединения испытывают путем растворения их в виде хлоргидратов в воде °

Ин виво действие соединения против

Р 388 асцитной лейкемии представлено в табл. 1.

Активность указанных соединений испытывают проч ив диссеминированной (распространенной) лейкемии Кросса.

Результаты представлены в табл. 2.

В этой системе два новых соединения при максимальной испытанной дозе (22,5 мг/кг и 50 мк/кг для соединений по пргакерам 6 и 4 соответственно) были более активными, чем ДНР при максимальной переносимой дозе (10 мг/кг).

Данные по токсичности, приведенные в табл. 5, для соединения 15 (пример 7) относительно лейкемии Гросса являются исключительно благоприятными. Никакой гибели от токсичности при дозировке

29,6 мг/кг по сравнению с 4/10 факта14

15 3015 ми гибели о! токсичности исходного лекарства локсорубицина при дозировке

16,9 мг/кг Т/С=200% лля обоих лекарств.

r>

Следует также отметить более высокую активно сть сое дине ния 1 6 (пример 8) относительно рассеянной Гросслейкемии: 275/233 при использовании почти эквивалентных доз испытуемого соединения и контрольного лекарства. н с

Cl (tran) сн (0 R (zv) СН2Р4

20 сос г, где R,,К,!,Р з имеют указанные значения, затем удаляют защитную 0-трифтор-ацетильную группу взаимодействием с мета-. нолом в течение: ночи при комнатной температуре, отделяют 7 (S), 9(8) трифтораце тильный ан трациклин овый гликозид от 7 (R), 9(R) антрациклинового гликозида хроматографией на колонке с силикагелем, элюируя смесью метилендихлорид — этилаце тат — уксусная кислота в соотношении 90:10:1 (v /v ), удаляю т N-т рифтораце т ильи ую защитную группу из полученного 7 (S)

9(S) антрациклинового гликозида средним щелочным гидролизом 0,1 н. гидроокисью натрия с выделением целевого продукта формулы (1 ), где R — водород, в виде его гидрохлорида путем взаимодействия свободного основания

40 с метанольным раствором хлористого водорода и в случае необходимости бромируют полученное соединение в

14 — положении с последующеД обработкой полученного таким образом 14-бром45 производного водным раствором формиата натрия) с получением целевого продукта формулы (1), где R < — гидроксильная группа, и выделением его в виде его гидрохлорида.

З! 0 >2 0 сн, НС1

НО где R< - водород;

О В 0 сн

Фо рм ула из об ре те и ия

Способ получения антрациклиновых гликоз илов общей формулы один из R и  — гидроксильная группа, а другой из R и  — нитрогруппа;

R — водород или гидроксильная группа, отличающийся тем, что агликон общей формуль! где R R u R имеют указанные зна! 2 Э чения, подвергают конденсации с 1-хлор-N,Îди (трифтораце тил) -даун оз амином формулы сг,(со

СОСГ, в безводном хлористом метилепе в атмосфере азота при 1 С в присутствии трифторметансульфоната серебра с по— лучением диастереомерной смеси 7(S), 9 (S ) и 7 (R), 9 (R) антрациклиновых гликозидов формулы

1553015

Т а б л и ц а 1

Действие против асцитной лейкемии Р 388*

Соединение Доза**, Т/С***,% мг/кг

Ток сиче ск ая сме рть****

ДНР

*Опыты были осуществлены на мышах вида СДГ, зараженных 10 клетками лейкемии внутрибрюшинно. *Лечение внутрибрюшинно один раз в день после опухолевого инокулята.

**АСреднее время выживания вылечиваемых мышей/среднее время выживания контрольных мышей х100.

****Оценивается на основе аутоптических з аключений.

Таблиц а2

Действие против лейкемии Гросса*

i Ток сиче ская смерть****

Т/С,***X

Соединение Доза**, мг/кг

ДНГ

12

*Опыты были осуществлены на мышах вида СЗН, зараженных 2х10 клетками лейкемии внутривенно.

**Ле чение внутривенно один раз в день после инокулирования опухоли.

***Средняя продолжительность выживания вылечиваемых мышей/средняя продолжительность выживан ия кон т роль ных мыше и x1 00.

****Оценивается на основе аутоптических (путем вскрытия трупа) заключений.

2,9

6

13,5

22,5

1 5 )

157

132

162

171

124

158, 150

175,225

208

1/10

5/10

О/10

О/10

1/10

9/10

О/20

3/20

О/10

0/10

О/10

О/10

О/10

1553015

Т а б л и ц а 3

Активность против клеток Йе 1а и 10 н, вне организма

Сс единение

Ц i, к г/мл

ДХ

ДХ

*Испытание ингибирования колонии проводили после 24 ч обработки ИД „— доза, вызывающая 50Х-ное ив гибироваТаблица4

Активность в организме против асцитичпой Р 388 и рассеянной Гросс-лейкемии

P 288* росс**

Соединен ие

Т/С+*",У. Такси .еская

i смерть**

**

Т/С***, 7 Ток сиче сДоза, мг/кг оза, г/к г кая сме рть****

ДХ

*Р 388 — лейкемия инокулирована внутрибрюшипно в день О. Обработка внтрибрюшинно в 1-й день.

**Гросс-лейкемию инокулировали внутривенно в день О. Обработка — внутривенно в 1-й день.

***Отношение среднего времени выживания обработанных мышей к среднему времени выживания контрольных животных х100.

****Оценена на основании данных вскрытия.

4,4 б,б

Ь,Ь

182

209

391

223

209

О/1(0/10

О/10

0/10

О/10

9/10

Hela*

19

18

10 v *

36

220

16,9

17,3

22,5

29,25

183 О/10

225 О/iО

233 О/10

275 О/!О

308 1/10

i 17 9/10

1553015

Та 6 лиц а 5

Активность в организме против Гросс-лейкемии и С Н рака молочной железы

Молочная железа (под кожей) "*

Гросс*

Сое дин е н не

Т/С»»", 7

Токсичес- Доза, кая мг/кг смерть***

Доза, мг/кг

Ин гибирояанне ро с та on - хо ли, 7

6,0

7,5

100

ДХ

96

100

8,88

11,54

*Гросс-лейкемию инокулировали внутривенно в день О. Обработка— внутривенно в 1-й день.

**Обработка внутривенно, количество 7dx4, начиная с момента, когда опухоль прощупывается пальцами.

***Отношение среднего времени выживания обработанных мышей к среднему времени выживания контрольных животных х100

****Оценена на основании данных.

Составитель Г.Коннова

Редактор Н.Рогулич Техред Л.Олийнык Корректор Н.Ревская

Заказ 343 Тираж 302 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж 35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r.ужгород, ул. Гагарина,101

13

16,9

29,6

38,5

158

242

142

О/10

О/10

4/20

О/10

О/10

О/10