Способ получения антрациклиновых гликозидов

Способ получения антрациклиновых гликозидов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение касается гликозидов, в частности получения антрациклиновых гликозидов, обладающих противоопухолевой активностью, что может быть использовано в медицине. Цель - создание нового более активного соединения указанного класса. Синтез ведут удалением 7-гидроксигруппы в карминомициноне, растворенном в смеси диоксана и этанола (1:1), с помощью гидрогенолиза в присутствии 5% PD/BASO<SB POS="POST">4</SB> при комнатной температуре в течение 3 ч с последующей обработкой полученного 4-диметил-7-дезоксидауномицинона в безводном метиленхлориде 4-фторбензолсульфонилхлоридом в присутствии N, N-диизопропилэтиламина и каталитического количества 4-диметил-аминопиридина. Далее ведут реакцию полученного продукта в тетрагидрофуране с бензиламином при 40°С в течение 36 ч с последующим удалением бензильной группы с помощью каталитического гидрирования в присутствии 5% PD/BASO<SB POS="POST">4</SB> при 1 атм и комнатной температуре в течение 1 ч с использованием в качестве растворителя смеси этанола с уксусной кислотой и каталитического количества 37%-ной водной HCL, защитной NH<SB POS="POST">2</SB>-группы в полученном 4-деметокси-4-амино-7-дезокси-дауномициноне с помощью трифторуксусного ангидрида в безводном метиленхлориде при 0°С, защитой 13-кетогруппы кетализацией этиленгликолем при температуре дефлегмации в присутствии N-толуолсульфокислоты, бромированием в метиленхлориде бромом при 40°С в присутствии 2,2Ъ-азобисизобутиронитрила в течение 3 ч, обработкой водной трифторуксусной кислотой при 0°С в течение 1 ч. Затем полученный 4-деметокси-4-N-трифторацетамидо-дауномицин подвергают реакции с хлорсахаром (защищенным) в безводном метиленхлориде при 5-10°С в присутствии трифторметансульфоната серебра с последующей обработкой при 0°С в течение 3 ч 0,1 н. водным раствором NAOH. Целевой продукт выделяют в свободном виде или в виде гидрохлорида обработкой метанольным раствором HCL. Новые вещества обладают активностью на уровне даунорубицина в клетках аденокарциномы толстой кишки человека. 2 табл.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (11) (51) С 07 Н 15/252

OllHGAHHE ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

1 (21) 4355593/23-04 . (22) 20.04.88 (31) 8709353 (32) 21,04.87 (33) GB (46} 15 12.90. Бюл. № 46 (71) Фармиталиа Карло Эрба С.р.л. (ХТ) (72) Микеле Карузо, Антонио Суарато, Франческо Анджелуччи и федерико

Аркамоне (?Т) (53) 547.455.6.07(088.8) (56) Патент Швеицарии ¹ 657622, кл. С 07 Н 15/252, 1986.

Патент Швейцарии № 652131, кл. С 07 Н 15/252, 1985.

С.M. Mong. Can. — J. Chem. 51, 446, 1973. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТРАЦИКЛИНОВЫХ

ГЛИКОЗИДОВ (57} Изобретение касается-гликозидов, в частности получения антрациклиновых гликозидов, обладающих противоопухолевой активностью, что может быть использовано в медицине. Цель изобретения — создание нового более активного соединения указанного класса.

Синтез ведут удалением 7-гидрокси,-группы в карминомициноне, растворенном в смеси диоксана и этанола (1: 1), с помощью гидрогенолиза в присутствии

5Х Pd/BaSO при комнатной температуре в течение 3 ч с последующей обработкой полученного 4-диметил-7-деоксидауномицинона в безводном метилен- хлориде 4-фторбензолсульфонилхлоридом в присутствии N,N-диизопропилзтил- .

2 амина и каталитического количества ч-диметил-аминопиридина, Далее ведут реакцию полученного продукта в тетрао гидрофуране с бензиламйном при 40 С в течение 36 ч с последующим удалением бензильной группы с помощью каталитического гидрирования в присутствии 5Х Pd/BaSO при 1 атм и комнатной температуре в течение 1 ч с использованием в качестве растворителя смеси этанола с уксусной кислотой и каталитического количества 37X"ной водной НС1, защитой NH -группы в полученном 4-деметокси-4-амино-7-деокси-дауномициноне с помощью трифторук" сусного ангидрида в .безводном метиленхлориде при 0 С, защитой 13-кето" о, Cl группы котализацией этиленгликолем при температуре дефлегмации в присут ствии и толуолсульфокислоты, броми- ( рованием в метиленхлориде бромом при . (»

40 С в присутствии 2,2 -азобисизобутиронитрила в течение 3 ч, обработкои водной трифторуксусной KHcJIOTofl при 0 C в течение 1 ч. Затем полученныи 4-деметокси-4-N òðèôòîðàöåòàìèäo-дауномицинон подвергают реакции с хлорсахаром (защищенным) в безводном „р метиленхлориде при 5-10 С в присутст- вии трифторметансульфоната серебра с последующей обработкой при 0 С в течение 3 ч 0 1 н. водным раствором

Na0H. Целевой продукт выделяют в сво.бодном виде или в виде гидрохлорида ,обработкои метанольным раствором HCl, фЭ

:Новые вещества обладают активностью. на .уровне даунорубицина в клетках аденокарциномы толстой кишки человека.

2 табл.

1614764

О

0Н

Изобретение относится к способу получения новых гликозидов антрациклина общей формулы

О ОН О () обладающих противоопухолевой активностью, Цель изобретения — разработка спо- " соба получения нового антрациклиново го гликозида, обладающего преимущест- 25 вами в биологической активности.

II р и м е р 1. 4-Диметил-7-деоксидауномиципон, 1,5 г 4-диметилдауномицинона, раст-, воренного в смеси 100 мл диоксана и 100 мл этанола, гидрируют в присутствии 0,3 г 5% Pd/Ba80< при комнатной температуре в течение 3 ч. После фильтрования растворитель удаляют в ваку,уме и 4-деметокси-7-деоксидауномици нон выделяют с почти количественным

35 выходом, ТСХ на Кизельгеле F254 (Merck) с использованием смеси толуола и ацетона (9: 1 по объему), Rf = О, 30, 40

Пример 2. 4- Диметил-4-0-(4 -фторбензолсульфонил)-7-деоксидауномицинон.

К перемешиваемому раствору 1,0 r

4-диметил-7-деоксидауномицинона в

200 мл безводного метилендихлорида, 45 содержащего 0 52 мл N N-диизопропиламина и каталитическое количество

4-диметиламинопиридина, при комнатной температуре добавляют 0,52 r 4-фторбензолсульфонилхлорида. Спустя 30 мин

50 превращение завершается, и реакционную, смесь промывают О, 1 н. водной соляной кислотой, а затем водой, Органический раствор сушат над безводным сульфатом натрия, растворитель отфильтровывают и удаляют в вакууме.

Неочищен.ый продукт помещают в небольшое количество толуола и кристаллизуют до получе ия О,б г чистого производного 4-диметил-4-0-сульфоната, Другие 0,3 г продукта выделяют очисткой

Маточного раствора на хроматогоайиче кой колонке, используя в качестве злюента смесь толуопа и ацетона, Выход 80%. ТСХ на Кизельгеле F254 (Merck) с использованием смеси тол;ола. и ацетона (9:1 по объему), Rf = 0,26.

Полевая масс-спектрометрия (M )

526.

Уе,?\ щц,с (MeOH): 524, 490 нм, "Н ЯМР (200 МГц, С?)С1 ),8: 13,43, 13 36 (с, 2Н, 11-ОН, б-ÎH) 8,38 (дд, J = 1,3, 7,9 Гц, 1Н, 1-Н); 8,02 (м, 2Н,О&.),Q ); 7,80 (дд, J

7,9, 8,1 Гц, 1Н, 2-Н); 7, 62 (дд,.

3 = 1,3, 8 1 Гц, 1Н, 3-Н); 7,23 (м, 9-ОН); 3, 1-2,8 (м, 4Н, 7-СН

СНг); 2, 38 (с, ЗН, СОСН3 ); 2, 0-1, 9 (м, 2Н, 8-СН ).

Пример 3. 4-Деметокси-4=бензиламино-7-деоксидауномицинон.

0,8 r соединения примера 2 растворяют в 100 мл тетрагидрофурана и добавляют 0,5 мл бензиламина, Полученную смесь выдерживают при 40 С в течение 36 ч при перемешивании, затем, добавляют 50 мл 1 н. водной соляной кислоты и 100 мл метилендихлорида.

Органическую фазу промывают дважды водой и сушат над безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляют в вакууме. Неочищенный продукт хроматографируют с мгновенным испарением, используя в качестве элюирующего растворителя смесь толуола и ацетона до получения 0,48 r 4-деметокси-4-бензиламино-7-деоксидауномицинона. Выход 69%.

ТСХ на пластине Кизельгеля F254 (Merck) с использованием смеси толуола и ацетона (9: 1 по объему), Rf = О, 28.

Полевая масс-спектров;етрия (M )

457.

У 9, макс (MeOH): 548 нм, Н ЯМР (200 МГц, CDC1 ),E: 13,58 (с, 2Н, 6-ОН, 11-ОН); 9, 86 (т, J

= 5, 7 Гц, 1H, NH-CH

73, 83 Гц, 1Н, 2Н, ; 74-72 (м, 5H, NHCH Ph) 7, 00 (д, 1 = 8, 3 Гц, 1Н,.

3-Н); 4,60 (д, J = 5,7 Гц, 2Н, NHCH Ph); 3, 1-2,9 (и, 4Н, 10-СН, 16147

7-СЙ,); 2,37, (с, ЗН, СОСН ); 2,0-1,9 (м, 2н, 8-сн7).

Пример 4. 4-Деметокси-4-амико-7-деоксидауномицинон.

0,45 г 4-деметокси-4-бензиламино-7-деоксидауномицинона растворяют в смеси 40 мл этанола, 20 мл уксусной кислоты и 0,4 мл 37Х-ной водной соляной кислоты, добавляют 0,2 г Pd/ÂaS04. (катализатора) и полученную смесь гидрируют при 1 атм в течение 1 ч при комнатной температуре, После этого катализатор отфильтровывают, и растворит ь вйаривают в вакуу е Неочищен- 15 ный продукт хроматографируют с мгновенным испарением, используя в качестве элюента смесь толуола и ацетона до получения 0,2 г 4-деметокси-4-амино-7-деоксидауномицинона. Выход 757. ТСХ 20 на пластине Кизельгеля F254 (Мегс1с.); использованием смеси толуола и ацетона (9:1 по объему), Rf = О, 17.

Полевая масс-спектрометрия (М )

367. 25

УФ,Я „,„(МеОН): 536, 508 нм.

"Н ЯМР. (200 МГц, CDClg) 3: 13,62, 13,55 (с, 2Н, 11-ОН, 6-ОН); 7,64 (д, J = 7,7 Гц, 1-Й); 7,46 ярд, J = ?,7, 8,3 Гц, .1Н, 2-Н); 6,93 (д, J = 8,3 Гцн 30

1Н, 3-Н), 6,8-7,0 (широкий сигнал), 2Н, NH ); 3,83 (с, 1Н, 9-ОН); 3;1-2,8 (м 7- Hz 10-СНд) 2 37 (с ЗН

СОСН9); 2,0- Г,9 7м, 2Н, Н-CHg).

° Пример 5. 4-Деметокси-4-N-три35 фторацетамидо-7-деоксидауномицинон.

О;2 г 4-деметокси-4-амико-7-деоксидауномицинона растворяют в 20 мп безводного метилендихлорида, охлаждают до О С и добавляют 0,3 мл трифтор- 40 уксусного ангидрида. Спустя 10 мин добавляют бикарбонат натрия. Органическую фазу дважды промывают водой и вьщеляют, сушат над безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляют в ва- 45 кууме до получения соединения с количественным выходом. ТСХ на Кизельгеле, F254 (Merck7) с использованием смеси „ толуола и ацетона (9:1 по объему), .СМ = 0,32.. . 50

Пример 6. 2-Деметокси-4-N-трифторацетамидодауномицинон, Суспензию 0,2 г соединения примера

5- в 15 мл бензола и 0,5 мл этиленгликоля кипятят с обратным холодильником в течение 4 ч в присутствии

0,015 r п-толуолсульфокислоты, используя аппарат Дина-Старка, Полученную.:4

6 смесь охлаждают, промывают водным бикарбонатом натрия и водой, затем выпаривают досуха до получения 0,2 r целевого кеталя.

Полученный кеталь растворяют в

1.25 мл метилендихлорида при 40 С и обрабатывают бромом (1,7 мл 0,6 М раствор в метилендихлориде) в присутствии

0,25 г 2,2 -азобисизобутиронитрила.

Спустя 3 ч полученную смесь охлаждают и экстрагируют водным раствором бикарбоната натрия, затем дважды промывают метилендихлоридом и растворитель удаляют в вакууме.

Остаток растворяют в 3 мп трифторо уксусной кислоты и 0,3 мл воды при 0 С и перемешивают в течение 1 ч, затем экстрагируют метилендихлоридом, Органическую фазу промывают водным бикарбонатом натрия и водой. Растворитель отфильтровывают, сушат над безводным сульфатом натрия и выпаривают в вакууме до получения О,1 r 4-деметокси-4-N-трифторацетамидодауномицина. Выход 483. ТСХ на пластине Кизельгеля F254 (Nerck)7ñ использованием

СН Cl и ацетона (95:5 по объему), Rf = 0,23.

Полевая масс-спектрометрия (М )

479.

Пример 7. 4-Деметокси-4-аминодаунорубицин (Ia).

0,08 r 4-деметокси-4-N-трифторацетамидодауномицинона, полученного по примеру 6, растворяют в безводном метилендихлориде, и полученный расто вор охлаждают до 5-10 С. Одновременно и быстро добавляют раствор 0,024 r

1-хлор-N,О-дитрифторацетилдаунозамина полученного по известному способу в диэтиловом эфире, и раствор 0,150 г трифторметансульфоната серебра в мети" лендихлориде при интенсивном перемешивании.

Спустя 5 мин добавляют еще 0,970 г трифторметансульфоната серебра и спустя 5 мин реакцию гасят коллидином.

Полученную смесь фильтруют, промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и водой, сушат и концентрируют. в вакууме.

Остаток хроматографируют на колонке с силикагелем, элюируя метилендихлоридом до получения 4-деметокси-4-N-трифторацетамидо-N-трифторацетилдаунорубицина (Ia). Полученное сое-. динение растворяют в 10 мл ацетона и

1614764 обрабатывают 30 мл О, 1 н. водного гидроксида натрия при О С в течение

3 ч. Затем к раствору добавляют 0,1 н, водную соляную кислоту до установле 5 ния рН 4,5 и исключают агликон экстракцией метилендихлоридом. Затем рН водного раствора устанавливают 8,6 и ! экстрагируют метилендихлоридом, сушат над безводным сульфатом натрия, концентрируют до небольшого объема и подкисляют. до рН 4,5 0,1 н, метанольным раствором хлористого водорода до получения указанного в заглавии соединения в виде гидрохлорида, 15

1 6 183

1,9 192

2, 29 200

О/10

О/10

i /10

Гликозиды по изобретению являются противоопухолевыми агентами. Активность представительного соединения формулы (I) 4-деметокси-4-аминодауно-f

20 рубицина (Ia) определяли, сравнивая его цитотоксичность ин витро с цитотоксичностью даунорубицина (DNR) в клетках аденокарциномы толстой кишки

:человека, чувствительных (Lovo) или устойчивых (3.ovo /DX) к доксорубици: ну.

О ОН

В табл. 1 приведен тест на ингибирование колонии спустя 4 ч после об- >р работки.

Та блица 1

/Ыу 35 Н

HP p, мкг/мп

Ia DNR отличающийся тем, что удаляют 7-гидроксильную группу карми"

40 номицинона формулы II

99

1805

0,7

50,3

О OH

Определяли также активности ин виво (Ia) и DNR против рассеянной лейкемии Гросса.

Н0 О ОН OH

Результаты приведены в табл, 2 (обработка внутривенно +1 ч).

Таблица 2 мг/кг Т/С, % ТОКС

00H О ° з

О/10

О/10

1/10

10 133

15 167

22,5 200

OHO ОН

Соединение Lovo

HP Sptt p./мп

П р и м е ч а ни е, Т/С(%) — среднее время выживания обработанных мьппей/среднее время выживания контрольных животных

Х 100.

ТОКС вЂ” смертность от токсикоза, Формула изобретения

Способ получения антрациклинбвых гликозидов формулы Х растворенного в смеси 1:1 диоксана и этанола, с помощью гидрогенолиза в присутствии 5% Pd/BaS0< при комнатной температуре в течение 3 ч, полученный

4-деметил-7-деоксидауномицинон формулы III

1614764 с помощью реакции при 0 С с трифтор-. о, уксусным ангидридом н безводном метилендихлориде, вводят заново 7-гидроксигруппу в полученное защищенное соединение формулы VII подвергают взаимодействию в безводном

Метиленхлориде с 4-фторбензолсульфо илхлоридом в присутствии N N -диизо .т

У пропиЛэтиламина и каталитического ко.личества 4-диметил-аминопиридина, полученный ч-деметокси-4-(4-фторбензолсульфонил)-7-деоксидауномицинон формулы IV

0 ОН

О ОН

СОСГ3 Н О ОН

О О ОН

so

О ОН О

СОСГ,МН О ОН ОН

NH О OH

I которое подвергают взаимодействию с защищенным галоидсахаром формулы IX

На1

СН2 ф

35 с помощью каталитического гидрирова1 ния в присутствии 57. Pd/BaSO при

1 атм при комнатной температуре в те40 н чение 1 ч, с использованием в качест- 3 ве растворителя смеси этанол-уксусная ® Ос 3 кислота и каталитического количества где На1 представляет собой атом хло372-ной водной соляной кислоты, за- ра, щищают 4-.аминогруппу полученного- 4-де- ..в безводном метиленхлориде при метокси-4-амино-7-деокси-дауномицино- . 5 — 10 С в присутствии трифторметан45 - о, на формулы VI сульфоната серебра с получением

4-N-3,4 -N, 0-антрациклинтрифторацетил — защищенного гликозида, из ко торого после обработки при 0 С в тео чение 3 ч 0,1 н. водной гидроокисью натрия при необходимости выделяют

О О, соединение формулы I в виде гидрохлорида с помощью обработки метанольным . хлористым водородом, о он о

ЫН,О ОН

°

Г

20 в тетрагидрофуране подвергают взаимодействию с бензиламином при 40 С в тео чение 36 ч, удаляют бензильную группу из полученного 4-деметокси-4-бензил- 25 амино-7-деокси-дауномицинона формулы V

I с помощью сначала защиты 13"кетогруппы кетализацией этиленгликолем при темйературе дефлегмации в присутствии п-толуолсульфокислоты, взаимодействия полученного кеталя при 40 С .с бромом в метилендихлориде в присутствии ., ..

2,2 -азобисизобутиронитрила в течение 3 ч и последукщей обработки

7-бромированного промежуточного соединения водной трифторуксусной кислотой при О С в течение 1 ч с получением 4-деметокси-4-N-трифторацетамидо-дауномицинона формулы VIII

0 OH О