Способ получения 7-амино-5-имино-2,3-дигидро-5н-тиазоло[3,2- а]пиримидина, или его фармацевтически приемлемых кислотно- аддитивных солей, или гидратов

Способ получения 7-амино-5-имино-2,3-дигидро-5н-тиазоло[3,2- а]пиримидина, или его фармацевтически приемлемых кислотно- аддитивных солей, или гидратов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение касается гетероциклических веществ, в частности получения 7-амино-5-имино-2,3-дигидро-5Н-тиазоло(3,2-а) пиримидина или его кислотно-аддитивных солей, или гидратов, обладающих иммуностимулирующей активностью, что может быть использовано в медицине. Цель - создание новых более активных веществ указанного класса. Синтез ведут реакцией 2-аминотиазолина с динитрилом малеиновой кислоты с последующим выделением целевого продукта в виде основания, нужной соли или гидрата. Новые вещества способны регулировать функции Т-клеток и восстанавливать субпопуляции супрессоров Т-клеток, что может быть использовано для лечения ревматоидного артрита, системной красной волчанки, а также для повышения эффективности некоторых вирусных вакцин, обладающих слабым иммуногенным действием - вакцин вируса лишая или аденовируса. 4 табл. fe

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕ ННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ (21) 46.13153/04 (62) 4203951/04 (22) 26.12.88 (23) 30.12,87 (31) 5512/86 (32) 30.12,86 (33) HU (46) 07,07.92, Бюл. N 25 (71) Эгиш Дьедьсердьяр (HU) (72) Даниель Божинг, Дьердьи Кованьи, Эдит Береньи, Карой Мадьяр. Шандор Туболи и Аттила Манди (HU) (53) 547.859,07 (088,8) (56) Патент США М 4302585, кл. С 07 0 513/04, С 07 0 513/04, 1981.. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 7-АМИНО-.5ИМИНО-2,3-ДИГИДРО-5Н-ТИАЗОЛО (3, 2-а)

ПИРИМИДИНА ИЛИ ЕГО ФАРМАЦЕВТИ.ЧЕСКИ ПРИЕМЛЕМЫХ КИСЛОТНО-АДД(г1ТИВНЫХ СОЛЕЙ, ИЛИ ГИДРАТОВ

Изобретение относится к способу пол учения новых производных тиазоло(3,2а)пиримидина. обладающих ценными фармакологическими свойствами и которые могут найти применение в медицине.

Цель изобретения — получение новых производных тиазоло (3,2-а)пиримидина, обладающих более высокой иммуностимулирующей активностью.

Поставленная цель достигается способом получения 7-амино-5-имино-2,3-дигидро-5Н-тиазоло(3.2-а) пи римидина формулы

„„Ж„„1746885 А3

ni>s С 07 0 513/04//А 61 К 31/505 (57) Изобретение касается гетероциклических веществ, в частности получения 7-амина-5-ими но-2.3-ди гидро-5Н-тиаэоло(3,2-а) пиримидина или его кислотно-аддитивных солей, или гидратов, обладающих иммуностимулирующей активностью, что может быть использовано в медицине. Цель — создание новых более активных веществ укаэанного класса. Синтез ведут реакцией

2-аминотиазолина с динитрилом малеиновой кислоты с посг едующим выделением целевого продукта в виде основания, нужной соли или гидрата. Новые вещества способны регулировать функции Т-клеток и восстанавливать субпопуляции супрессоров Т-клеток, что может быть использовано для лечения ревмагоидного артрита, сис- Я темной красной волчанки, а также для повышения эффективности некоторых вирусных вакцин, обладающих слабым иммуногенным действием — вакцин вируса лишая или аденовируса, 4 табл.

I или их фармацевтически приемлемых кис- фЬ лотно-аддитивных солей, или их гидратов, () заключающимся в том, что 2-аминотиазолин Q() подвергают взаимодействию с динитрилом малоновой кислоты с последующим выделе- у нием целевого продукта в виде основания или соли, или гидрата, или переведением соли в основание.

Пример 1. 7-Амино-5-имино-2,3-ди- . И гидро-5Н-тиазоло(3,2-а) и и римиди н гидробромид.

Смесь 10,21 г (0.1 моль) 2-аминотиазолина, 6 61 r (0,1 моль) динитрила малоновой кислоты, 125 мл этанола и 10,12 г (0,1 моль) триэтиламина.выдерживают при комнатной температуре 2 дня, Реакционную смесь ос1746885 ветляют и устанавливают величину рН 6 добавлением 48%-ного раствора бромистого водорода при охлаждении ледяной водой, Получают 18 г названного соединения, Выход 72, т.пл. выше 300 С, 5

Вычислено, : С 28,93; Н 3,64; N 22,49;

S 12,87; Br 32,07.

С6НОВ гй48

Найдено, : С 28,23; Н 3,70; N 22.46; $

12,85; Br 32,80. 10

Пример 2. 7-Амино-5-имино-2,3-ди- . гидро-5Н-тиаэоло(3,2-а)пиримиди н.

Смесь 10,21 r(0,,1 моль) 2-аминотиазолина, 6,61 r (0,1 моль) динитрила малоновой кислоты и 200 мл диметилформамида нагре- 15 вают в течение 20 мин при 155ОС. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, осветляют и сгущают. Полученный маслянистый остаток кристаллизуют из ацетонитрила и сушат. Получают 5,1 г 20 названного соединения. Выход 30, т,пл. выше 300 С.

Вычислено, %: С 42,84; H 4,79; N 33,31;

$ 19,06.

Найдено, : С 42,81; Н 4,69; N 33,29; S 25

19,03.

Пример 3. 7-Амино-5-имино-2,3-дигидро-5Н-тиазол о(2,3-а) и и римидин гидро к « арбонатдигидрат.

К раствору 224 г бикарбоната натрия в 30

2500 мл воды добавляют 24,9 г (0,1 моль)

7-амино-5-имино-2,3-дигидро-5Н-тиазоло(3,2-а)пиримидингидробромида, Реакционную смесь перемешивают 8 ч при комнатной температуре, затем отфильтровывают. 35

Продукт промывают водой и сушат. Получают 17,2 r названного соединения. Выход

75, т..пл..146 — 148ОС, Вычислено, : С 31,70; Н 4,94; N 21,12;

S 12,09, . 40

С7Н >aN40sS.

Найдено, : С 32,68; Н 4,70; и 20;69; $

12,18.

Пример 4, 7-Амино-5-имино-2.3-ди- . гидро-5Н-тиаэоло(3,2-а)пиримидин, 45

Смесь 5,3 г(0,02 моль) 7-амина-5-имино2, З-дигидро-5Н-тиазоло(3,2-а)пиридингидрокарбонатадигидрата и 30 мл уксусной кислоты перемешивают 6 ч. Раствор упаривают, образующиеся кристаллы кристалли- 50 .зуют из этанола, фильтруют и сушат.

Получают 3,6 г названного соединения; Выход 59,5, т.пл. 158 — 160 С.

Вычислено, $: C 43;70; Н 6,00; N Щ53;

$10,60. 55

С11H 18N404S.

Найдено, : С 43,68: Н 5,97; N l8,17: 5

10,56.

Установлено, что предлагаемое соединение и его соли обладают иммуностимулирующей активностью, в частности в модели повышения иммуногенного действия некоторых вакцин вируса герпеса со слабым иммуногенным действием.

Результаты модельных опытов на мышах и свиньях иммуностимулирующих свойств приведены в табл.1 и 2 дозы 0,1 мг соединения на 1 мышь и 5 мг соединения на

1 свинью).

В модели с периферическими лимфоцитами использу1от следующий метод испытания.

Отделение лимфоцитов.

Иэ обработанных гепарином (для предотвращения свертывания) проб крови выделяют лимфоциты диференциальным центрифугированием на фиколлпаке, Концентрацию клеток в растворе Хенкса, содержащем сыворотку коровьего эмбриона, доводят до 10 млн. клеток/мл. Клеточные суспензии переносят по 1,5 мл в лейтоновские пробирки и добавляют соответствующие антигены.

Образование иммунных розеток.

3%-ный раствор зритроцитов Шафена после соответствующей предварительной обработки адсорбируют антигеном Бойдена., 0,1 мл обработанных таким образом эритгроцитов добавляют в пробирки. Через

16 ч подсчитывают долю (процент) клеток, образующих розетки, в окрашенных препаратах, используя микроскоп, Цитотоксические реакции (СТ).

Исследования проводят в аллогенной системе. В суспензию красных клеток крови

Шафена, которую делают "чувствительной" при помощи антигена, вводят 0,1-мл суспензии лимфоцитов с плотностью клеток 10 мл. Величины цитотоксической способйости определяют на основании проведенного после 16-часового инкубационного периода гемолиза, который измеряют на приборе

Спекола при 540 нм, Размер реакции, отнесенный к контрольным. препаратам, выражают в процентах

Как вытекает иэ данных таблиц, испытуемые соединения, в эсновном, не влияют на бластогенез лимфоцитов, однако они повышают эффективность клеточных иммунных реакций, применение их в иммуноиндуктивном отрезке ведет к 8-11 -ному повышению RCF-величин и 10-12 -ному повышению СТ-величин.

Данные о фармакологических результатах испытаний 7-амина-5-имино-2,3-дигидро-5Н-тиазоло(3 2-а)пиримидингидробромь да следующие.

Стимуллирующее действие различных доз соединения на иммунитет вирусных вакцин IBR, Merck, New Casfle, далее 8oven

1746885

Таблица 1 абепо и Toga (BVD) испытывалось частично в модельных опытах на мышах, частично в модельных опытах на курочках. У подопытных животных отбирали в указанные в таблицах сроки пробы крови, и определяли реакции ин витро отделенных лимфоцитов (L, ST, RCF, СТ, PHA), а также концентрацию обнаруживаемых в сыворотке крови антител (Vll, НА).

Полученные с вакцинами I BR (Bovlphyl

I BR), Bivalenter Bavinetdenovirus, а также

Vedevac Ь$Т RCF- и СТ-значения указаны в табл.3.

Результаты, касающиеся вакцин Mayek;

Phylavac (против куриной мумы), представлены в табл.4.

Соединение примера 2 имеет LDw

20000 мг/кг (суспензия в карбоксиметилцеллюлозе).

Сравнение иммуностимулирующей активности соединений, получаемых по изобретению (соединение примера 2), и известного соединения 6-(и-хлорбенэил)2,3,6,7-тетрагидро-5Н-тиазоло(3,2-а)пиримидин-5,7-диона на мышах, крупном рогатом скоте, свиньях.и домашней птице показывает, что соединение примера 2 оказывает положительное действие на имуноответ, который может быть вызван с помощью вакцины Вщ, а также различных вирусных вакцин (вакцины Аужешки, вакци.ны ВР; аденовакцины, вакцины Нью . Кастль), Их стимулирующее действие проявляется главным образом при выработке иммуноответа на клеточном уровне, что выражается в значительно более высоких значениях титров, получаемых в процессе исследований In vitro на клеточном уровне (цитотоксические реакции, образование

"иммунной розетки", испытание стимулирующего действия лимфоцитов), которые проводят на лимфоцитах иммунизированных животных, взятых в различное время, но при этом имеется также возможность с помощью этого соединения параллельно (вероятно, косвенным путем) повысить также гуморальный иммуноответ, что проявляется в появлении антител более высокого титра, нейтрализующих или агглютинирующих вирусы, 5 Известное соединение обладает способностью регулировать функции Т-клеток и восстановления активности субпопуляции супрессоров Т-клеток. В отношении определенных антигенов оно способно усиливать:

10 так называемую гиперсенситивную реакцию более позднего типа. В результате это . соединение может быть применено при лечении определенных аутоиммуннах заболеваний, например ревматоидного артрирта

15 или системной красной волчанки.

Действие соединения примера 2 проявляется в том, что оно повышает активность лимфоцитов Т-подавителей и других так называемых лимфоидных К- клеток, благодаря

20 . чему достигается клеточная защищенность более высокого уровня и косвенным йутем улучшается формирование гуморального иммуноответа. В соответствии с укаэанным зто соединение может быть успешно ис25 пользовано для повышения эффективности некоторых вирусных вакцин,. обладающих слабым иммуногенным действием (напри мер, вакцин вируса лишая, вакцин аденовируса, вирусных вакцин Нью Кастль).

30 . Формула изобретения

Способ получения 7-амино-5-имино-2,3дигидро-5Н-тиазоло(3,2-а)пиримидина форNH

S N 2 или его фармацевтически приемлемых кис40 лотно-аддитивных солей, или гидратов, о т.л и ч а ю шийся тем, что 2-аминотиазолин подвергают взаимодействию с динитрилом малоновой кислоты с последующим выделением целевого продукта в виде основания

45 или соли, или гидрата, или переведением соли в основание.

1746885

Таблица 2

Число животных

RCF

СТ

Вак ина 14 †/6 — 14

5-26/4-15

18-13/5 — 11

5 — 21/4-11

Ослабленная

Неактивная таблица3 ст ()оза соединения, мг/мышь

RCF

Группа

Число мышей вакцина

1- 1 г-я

5-я

7-20

5-17 5

50 0,1

IBR а инактивиро" вано б (0,2 мл/мышь) в

18

6

6 26

8-16

1l-26

5-15

50 0,5

14

6-16

5-17

50 0,1

Et ceno а инактивировано б (0,2 мл/мышь) в

3

4-я

7-26

9-16

50 0,5

9-23

5 16

8-я

2-я

12-я

Ф /

Vede vac a

attenuiert б (0,2 мл/мыаь) в

6-21

9-27

6-17

50 05

50 05

7

1l

9-19

11-26

5" 18

П р и м е u a н н е. Значения LS1 и RCF отличаются в результатах, полученных в первую к пятую недели.

Число Доза со" LST курочек единения, мг

13 таблица4

Вакцина

Группа

RCF

1-я 2 "я 3-. я 4" я 5-я

3" 16 4- t 7

5-22 5-25

2-1 4 4-15

0 6 0

5 27 10

0 9

Mave1t

0

0 а б

5-19 3-18

5-23 .5"25

4" 15 2-15

Phylavac

1

0 9 9

11 11

3 3 2 а б

Составитель А.Орлов

Техред M.Моргентал Корректор О.Кундрик

Редактор И.Горная

Заказ 2406 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035. Москва, Ж-35, Раушская наб„4/S

Производственно-издательский комбинат "Патент". r, Ужгород. ул.Гагарина, 101