1-этил-1,3,4,9-тетрагидро-4-(фенилметил)-пирано(3,4-b-индол- 1-уксусная кислота, обладающая противовоспалительной и анальгетической активностью

1-этил-1,3,4,9-тетрагидро-4-(фенилметил)-пирано(3,4-b-индол- 1-уксусная кислота, обладающая противовоспалительной и анальгетической активностью

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Использование: в качестве противовоспалительного и анальгетического средства в медицине. Сущность изобретения, продукт. 1 - этил - 1,3.4. 9 - тетрагидро - 4 - (фенилметил) - пирано (3.4 - в индол - 1 - уксусная кислота - полидолэк, C22H23N°03 ВЫХ°Д Ш 994МГ/КГ мг/кг при обезболивании ED § мг/кг 1,9 мг/кг и на 37% снижает отек в противовоспалительных испытаниях при дозе 25 мг/кг. Реагент 1 : изатин реагент 2 енолят сложного эфира 3-фенилпропионат, реагент 3 : алюмогидрид лития реагент 4: трилтофод реагент 5:3 - метокси - 2 - алкановая кислота Условия реакции в присутствии кислотного катализатора. 1 таба

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ

К ПАТЕНТУ

Комитет Российской Федерации по патентам и товарным знакам (21) 4202972/04 (22) 2407.87 (46) 301093 Бюп Ne 39-40 (71) Американ Хоум Продактс Корпорейшн (US) (72) Алан Ховард Кац(03); Кристофер Апександр

Демерсон(Ю); Лесли Джордж Хамбер(03) (73) Американ Хоум Продактс Корпорейшн (US) (54) 1-ЭТИЛ-1,3,4,3 — ТЕТРАГИДРО-4- (ФЕНИЛМЕТИЛ)- ПИРАНО(3,4-сВ: ИНДОЛ-1УКСУСНАЯ КИСЛОТА, ОБЛАДАЮЩАЯ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОЙ И АНАЛЬГЕТИЧЕС=

КОЙ АКТИВНОСТЬЮ (57) Использование: в качестве противовоспалительного и анальгетического средства в медицине. (в) RU (и) 2001916 1 (51) 1 1 !

Сущность изобретения: продукт: 1 — этил — 1, 3, 4, 9 — тетрагидро — 4 — (фенилметил) — пирано (3,4 — в) индол — 1 — уксусная кислота — попидолак

С Н NO . Выход 80%. LD 994 мг/кг 994

23 23 03 мг/кг при обезболивании ЕО =1.9 мг/кг 19 мг/кг и на 37% снижает отек в противовоспапитеаных испытаниях при дозе 25 мг/кг. Реагент 1: изатиц реагент 2: енолят сложного эфира 3-фенип1зопионат, реагент 3: алюмогидрид липщ реагент 4: триптофоп, реагент 5: 3 — метокси — 2 — апановая кислота Условия реакции в присутствии кислотного катализатора. 1 таба

2001916

Изобретение относится к новому химическому соединению — 1-этил-1,3,4,9-тетрагидро-4-(фен илметил)-пира но(3,4-Ь)индол1-уксусной кислоте, которая обладает противовоспалительной и энальгетической активностью.

Укаэанное свойство дает воэможность предположить его использование в медицине.

Известны производные 1,3,4,9-тетрагйдропирано (3,4-Ь)индол-1-уксусной кислоты, обладающие противовоспалительной и знзльгетической активностью.

Целью изобретения являются новые производные 1,3,4,9-тетрагидропирано(3,4Ь)индол-1-уксусной кислоты, обладающие более высокой противовоспалительной активностью.

Способ получения соединения I включает конденсацию изатина с фенолятом сложного эфира 3-фенилнропионовой кислоты, получая оксисложноэфирное промежуточное соединение, которое не выделяя восстанавливают гидридом, например злюмогидридом лития, получая триптофол.

Взаимодействием триптофолэ с 3-метокси2-злкзновзя кислота или со сложным метиловым эфиром, в присутствии кислоты

Льюиса, например эфи рата борт рифто рида. и последующего щелочного гидролизэ получзют соединение l.

П р и и е р 1, 1-атил-1,3,4,9-тетрагидро4-(фенилиетил)-пи рано(3,4-Ь)и н дол-1-уксусная кислотз (изомер А).

Стадия 1, Получение метилового сложного эфира 3-фенил-пропионовой кислоты.

В течение 8 ч кипятят с обратным холодильником смесь 118,2 г (778 ммоль) 3-фенилпропионовой кислоты, 5,9 г серной кислоты и 100 мл метанола, Тонкослойная хроматография показывает отсутствие исходного мзтериалэ. Реакционную массу упзриззют в вакууме. Остаток растворяют в

200 мл серного эфира, промывают бикарбонатом натрия (100 мл), сушат над сульфатом магния, фильтруют и концентрируют, получая 124,4 г (96,3 ) сложного эфира в виде рыжевзто-коричневого масла.

ИК-спектр (неразбавленный) 3020, 2940, 1730 см

Стадия 2. ПолучениеЯфенилметил)-1Ниндол-этан ола.

К раствору литийдиизопропиламина в тетрэгидрофуране/циклогексане (2.2 моль, 136,4 мл, 300 ммоль), охлажденному до

-78 С, в атмосфере азота, добавляют раствор 44,6 г (272 ммоль) метилового эфира

3-фенилпропионовой кислоты (приготовленного нэ стадии 1) в 150 мл сухого тетрэгидрофурана. Смесь перемешивают в течение получаса. По каплям добавляют раствор 20,0 г (138 ммоль) изатина в 300 мл тетрагидрофурана, смесь выдерживают при комнатной температуре без охлаждения в течение 3 ч. Смесь гасят 500 мл насыщенного раствора хлорида аммония и разделяют слои; водный слой промывают эфиром (2 х 150 мл). Объединенные органические экстракты сушат над сульфатом магния, фильт"0 руют и концентрируют, получая 71,8 г коричневого масла. Перегонкой удаляют сложный метиловый эфир 3-фенилпропионовой кислоты (95 С, 1,5 мм), остаток(50,6 г) растворяют в 300 мл сухого тетрагидрофурана и медленно добавляют к охлажденной до

0"С смеси алюмогидрида лития (18,56 г, 489 ммоль) в 225 мл тетрагидрофурана. Смесь самопроизвольно нагревается до комнат но 1емпературы и затем ее выдерживают при кипячении с обратным холодильником ., ». Смесь охлаждают в ледяной бане и медленно добавляют 250 мл воды. Соли отфильтровывают и промывают серным эфиром (трижды по 400 мл). Органический слой отделяют от фильтрэта, сушат над сульфатом магния, фильтруют и концентрируют, получая 35.5 r красно-коричневого масла. Этот материал очищают хроматографически на силикагеле, используя в качестве элюата

30 смесь 30 этилацетата и гексана, В результате получают триптофол в виде коричневого масла (16,02 r, 46,970).

Н ЯМР-спектр (в СООэ): д 8,06 (синглет, 1Н), 7,65 (дуплет, 1Н, J =- 7,5 Гц), 7,36(дуплет, 1Н, 3 = 7,5 Гц), 7,18 (мультиплет, 7Н), 7,01 (дуплст, 1H, J = 2,0 Гц), 3,84 (дуплет, 2Н, J ==5,0 Гц), 3,43 (двойной триплет, 1Н, J =

=-7,5 Гц), 3,10 (дуплет, 2Н, J = 8,0 Гц), 1,79 (синглет, 1Н).

ИК-спектр (неразбавленный) 3420, 3020 см

Стадия 3. Получение метилового эфира

1-метил-1,3,4,9-тетра гидро-4-(фен илметил)пиран(3,4-Ь)индол-1-уксусной кислоты, В течение 3 ч кипятят с обратным холодильником раствор 15,97 r (63,6 ммоль) Р(фенилметил)-1Н-индол-этанолэ (со стадии

2), 9,95 г (76 ммоль) метилпропионилацетата и 1,60 г паратолуолсульфокислоты в 500 мл бензола, воду собирают в приемник Дина и

Старка. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и промывают 200 мл 5%-ного водного раствора бикарбоната натрия, 200 мл воды, суц ат над сульфатом магния, фильтруют и концентрируют, получая 21,37 г сырого продукта. Диастереоизомеры разделяют хроматографически на силикагеле, используя в качестве элюирующего растворителя 137ь этилацетата, ос2001916 тальное — гексан, Получали изомер А (выше

Rg, 2,26 г, 9,8 ) и изомер В (ниже Вг 2,23.

9,8 ) в виде желтых масел.

Изомер А.

Н ЯМР (СОС!з) д 9,17 (синглет, 1Н), 7,42 — 7,00 (мультиплет, 9Н), 3,80 (мультиплет, 2Н), 3,72 (синглет, ЭН), 3,20 (мультиплет, 2Н), 3,01 (дуплет, 1Н, J - 17 Гц), 2,80 (дуплет, 1Н, J =17 Гц), 2,85 (мультиплет, 1Н), 2,05 (квартет, 2Н, J - 7,5 Гц), 0,90 (триплет, 3H, J -75 Гц), ИК (КВг) 3420, 1725 см

Изомер В. Н ЯМР (СОС!з) д 8,88 (синглет, 1Н), 7,38-7,00 (мультиплет. 9Н), 3,84 (мультиплет, 2Н), 3,70 (синглет, ЗН), 3,04 (дуплет, 1Н, J - 17,5 Гц), 2,78 (дуплет, 1Н, J - 17,5 Гц), 3,15 (мультиплет, 2Н), 2,82 (мультиплет, 1Н), 2,20 (квартет, 2Н, J - 7,5 Гц), (0,82 (триплет, ЗН, J -7,5 Гц).

ИК-спектр (КВг) 3440, 1725 см .

Стадия 4, Получение 1-этил-1,3,4,9-тетрагидро-4-(фенилметил)-пира но(3,4-Ь)индол-1-уксусной кислоты.

В 100 мл этанола растворяют 3,0 г (8,25 ммоль) изомера А метилового сложного эфира 1-этил-4-(фенилметил)-1,3,4,9-тетрагидропирано(3,4-Ь)индол-1-уксусной кислоты (со стадии 3) и добавляют 100 мл 10 водного гидроксида натрия. Смесь 2 ч кипятят с обратным холодильником и концентрируют затем до получения мутного водного раствора. Добавляют концентрированную соляную кислоту до тех пор, пока не получают кислую среду. Затем промывают эфиром (дважды по 100 мл), объединенные эфирные экстракты сушат над сульфатом магния, фильтруют и концентрируют, получая 2,8 г не совсем белой пены. Полученный материал подвергают перекристаллизации из бензола/петролейного эфира, получая 2,30 г (807ь) чистой кислоты в виде белого твердого вещества с точкой плавления 144-1460С.

Н ЯМР-спектр (СООз) д 8,70 (синглет, 1Н), 7,43-7,03 (мультиплет, 9Н), 3,87 (дуплет, 2Н, J 2,5 Гц), 3,23 (мультиплет, 2И), 2,97 (дуплет, 2Н, J 3,0 Гц), 2,85(мультиплет, 1Н), 2,04 (мультиплет. 2Н), 0,93 (триплет, 3H, J7,5 Гц).

ИК-спектр (КВг) 3380, 1740 см 1, Элементный состав для соединения формулы СаНззМОз:

Найдено, 7; углерод 75,96; водород

6,43; азот 3,99.

Рассчитано, 7(,; углерод 75,62; водород

6,63; азот 4,01.

Получение соли натрия 1-этил-1,3,4, 9-тетрагидро-4-(фенилметил)-пирано(3,4Ь)индол-1-уксусной кислоты (изомера А).

55

ИК-спектр (неразбавленный) 3400, 1720 см, ЯМР (СОС!з) д 8,17 (синглет, 1Н), 7,62 (дуплет, 1Н, J - 6,7 Гц), 7,32-7,07 (мультиплет, 4Н), 3,79 (синглет, ЗН), 3,70 (синглет, ЗН).

К перемешиваемому раствору 0,965 г (2,76 ммоль) 1-этил-1,3,4,9-тетрагидро-4-(фенилметил)-пирано(3,4-Ь)индол-1-уксусной кислоты в 50 мл метанола добавляют вод5 ный едкий натр (2.6 мл однонормального раствора). рН доводят до 7,75 введением порций 1-атил-1,3,4,9-тетрагидро-4-(фенилметил}пирано(3,4-Ь)индол-1-уксусной кислоты. Полученный раствор упаривают

10 досуха и затем растворяют в бензоле и дважды выпаривают. Остаток растворяют в этилацетате (8 мл), перемешивают и медленно добавляют 30 мл петролейного эфира с пределами выкипания 30-60 С. Образую15 щийся осадок перемешивают I ч, фильтруют, промывают петролейным эфиром и сушат, получают 1,0 г (98 ) соли в виде белого твердого вещества с точкой плавления 180-190 С (с разложением).

20 ЯМР (ДМСО-ds):

М протона Тип Хим. сдвиг (д)

3 СНз 0,84 (триплет, J-8 Гц)

2 СН2 2,0 (2о, J =8 Гц)

7 ЗСН2,СН 2,2 — 3,9 (мульти плет)

9 аромат 6,9-7,2 (мультиплет)

30 Рассчитано, $: углерод 71,14; водород

5,97; азот 3,77.

Найдено, : углерод 70,41; водород

6,03; азот 3,64, Пример 2. Метиловый эфир 1-этил35 1.3,4,9-тетрагидро-4(фенилметил)-пирано(3,4-Ь)индол-1-уксусной кислоты (изомер А).

Стадия 1. Получение метилового сложного эфира индол-3-уксусной кислоты.

В 500 мл метанола растворяют 25 г (143

40 ммоль) индол-3-уксусной кислоты и добааляют 5 мл концентрированной серной кислоты. Полученный раствор в течение 8 ч кипятят с обратным холодильником. Методом тонкослойной хроматографии установ45 лено отсутствие в реакционной смеси исходного материала, Реакционную массу концентрируют в вакууме, остаток растворяют в 300 мл этилового эфира, промывают

5 -ным водным бикэрбонатом натрия

50 (дважды по 150 мл), сушат над сульфатом магния, фильтруют и концентрируют до

24,09 г (89,17) сложного эфира в виде кроваво-красного масла.

2001916

Стадия 2. Получение и-(фенилметил)1Н-индол-3-уксусной кислоты, метилового сложного эфира, В двухлитровую трехгорлую круглодонную колбу, снабженнуюдополнительной воронкой, в атмосфере азота добавляют 300 мл сухого тетрагидрофурана (ТГФ) и 68.75 мл литийдиизопропиламида(1,92 M в циклогексане/ТГФ, 132 ммоль). Смесь охлаждают,до-78 С, и по каплямдобавляют раствор

11,36 г (60 ммоль) метилового сложного эфира индол-3-уксусной кислоты в ЗОО мл сухого тетрагидрофурана. Смесь затем выдерживают при -78 С в течение 15 мин и раствор

7,59 г (60 ммоль) бензилхлорида в 300 мл тетрагидрофурана добавляют по каплям.

Реакционную смесь энергично перемешивают, так что реакция полностью протекает между выпавшим в осадок дианионом сложного эфира индол-3-уксусной кислоты и бензилхлоридом, Спустя 3 ч тонкослойная хроматография показала полное отсутствие в продуктах исходного материала. Добавляют 200 мл водного ненасыщенного хлорида аммония. Водный слой отделяют и промывают эфиром (дважды по 100 мл), Объединенные эфирные экстракты добавляют к органическому слою, который сушат над сульфатом магния, фильтруют и концентрируют до получения с количественным выходом 15,0 г красно-коричневого масла. Это вещество восстанавливают до соответству.ощего триптофола без дополнительной очистки.

Н ЯМР(СОС!з) д8,09(синглет, 1Н), 7,75

{дуплет, 1H, J = 7 Гц), 7,40 — 7,09 (мул ьтиплет, 9Н), 4,19 (двойной дуплет, 1H), 3,59 (синглет, ЗН), 3,47 (двойной дуплет, 1Н), 3,20 (двойной дуплет, 1Н).

ИК-спектр (неразбавленный) 3400, 1750 см 1.

Стадия 3. Получение Р-(фенил летил)1Н-индол-этанола.

В 100 мл сухого тетрагидрофурана растворяют 15 г (60 ммоля) а -(фенилметил)-1Ниндол-3-уксусной кислоты, метилового сложного эфира, приготовленного на стадии 2, раствор по каплям добавляют к охлажденной суспензии алюмогидрата лития (2,73 г, 72 ммоль) в 300 мл тетрагидрофуране. Смесь самопроизвольно нагревается до комнатной температуры, затем ее кипятят с обратным холодильником полтора часа (обычно для этой реакции нагрев не требуется). Смесь охлаждают в ледяной бане и по каплям добавляют 150 мл однонормальной соляной кислоты, Водный слой отделяют и органический слой промывают насыщенным водным бикарбонатом натрия (дважды по 100 мл), сушат над сульфатом магния, фильтруют и упаривают, получая те же физические свойства, что и продукт, получаемый в примере 1, на стадии 2, Этот материал циклизуют в пираноиндол на стадии 4 без дополнительной очистки, Стадия 4. Синтез метилового эфира 1атил-1,3,4,9-тетра гидро-4-(фен ил метил)-пирано(3,4-Ь)индол-1-уксусной кислоты, В 250 мл хлористого метилена растворяют 15,06 г (60 ммоль) сырого /3-(фенилметил)-1Н-индол-этаиола со стадии 3, Добавляют 10,68 г (72 ммоль) метилового эфира 3-метокси-2-пентеновой кислоты, а затем 2,5 мл бортрифторидэфирата, смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи, Тонклослойный анализ показал полное завершение реакции, и добавляют 200 мл насыщенного водного бикарбоната натрия. Органический слой отделяют и дважды промывают водой (по 100 мл), сушат над сульфатом магния, фильтруют и концентрируют, в результате чего получают сырой продукт, Последний подвергают хроматографической очистке на силикагеле, используя в качестве элюирующего растворителя смесь 13% этилацетата и гексана, Получают 2,5 г (11,5% в расчете на три стадии) почти чистого изомера А.

Протонный анализ этого соединения показал, что образец соответствует примеру 1 стадии 3.

Пример 3. 1-этил- 1,3,4,9-тетрагидро4-(фенил метил)-и ирано(3,4-Ь)индол-1-уксусная кислота (изомер В).

К смеси 65 мл 10%-ного водного раствора едкого натра и 65 мл этанола добавляют метиловый сложный эфир 1-атил-1,3.4,9-тетрагидро-4-(фенилметил)-пирано(3,4-Ь)индол-уксусной кислоты, изомера В, (приготовленного в примере 1 на стадии 3) 2,19 г (6,0 ммоль). Реакционную смесь нагревают при кипячении с обратным холодильником

2 ч. Затем смесь концентрируют досуха и к остатку добавляют смесь 10% гидроокиси натрия и эфира (1:1). Отделяли водный слой, подкисляют концентрированной соляной кислотой л несколько раз экстрагируют эфиром. Объединенные эфирные экстракты сушат над сульфатом магния, фильтруют и концентрируют, получая 1,68 r (80%) рыжевато-коричнево-желтого твердого вещества. Материал очищают хроматографически на силикагеле, элюируя 30% этилацетата/гексаном, Получают 410 мг материала, перекристаллизацией которого из бензола/петролейного эфира получают 315 мг (15%) кислоты в виде белого твердого вещества с точкой плавления 171-1730С, 2001916

Н AMP (СОС!з) д 8,48 (синглет, 1Н), 7,39-7,01 (мультиплет, 9Н), 3,90 (двойной дуплет, 2Н, J = 7,5 Гц, J = 2,5 Гц), 3 19 (мультиплет, 2Н), 3,02 (дуплет, 2Н, J = 3 Гц), 2,88 (мультиплет, 1Н), 2,15 (мультиплет, 2Н), 0,89 (триплет, ЗН, J = 7,5 Гц).

ИК-спектр (KBr) 3390, 1722 см 1

Элементный анализ для соединения

С22НгзйОз:

Рассчитано, %: углерод 75,62; водород

663; азот 401.

Найдено, %; углерод 75,7; водород 6,35, азот 3,95.

Пример 4. Расщепление (+/+1-этил1,3,4,9-тетрагидро-4-(фен ил метил)-пирано(3,4-Ь)индол-1-уксусной кислоты.

Стадия 1. Синтез (+)-1-этил-1,3,4,9-тетра гидро-4-(фен ил этил)-пи ран о(3,4-Ь)и н дол

-1-уксусной кислоты, 1,20 г (2,5 MMoll ь) ((! Я)-эндо)-1.7,7-триметил-бицикло(2,2,1)гептил-2-oro сложного эфира 1-этил-1,3,4,9-тетрагидро-4-(фенилметил)-пирано(3.4-Ь)индол-1-уксусной кислоты растворяют в смеси 65 мл этанола и 65 мл 10%-ной гидроокиси натрия, смесь нагревают с обратным холодильником в течение 5 ч, Затем смесь концентрируют до мутного водного раствора, охлаждают в ледяной водяной бане и подкисляют концентрированной соляной кислотой. Затем осуществляют экстракцию эфиром (дважды до 50 мл) и обьединенные эфирные экстракты сушат над сульфатом магния, фильтруют и концентрируют, получая 900 мг желтого масла. Масло подвергают перекристаллизации из толуола и получают 397 мг (46%) чистой кислоты в виде белого твердого вещества с точкой плавления 170 †1;5 C.

Элементный состав для соединения формулыы С22Н 2З" 4ОЗ.

Рассчитано, % углерод 75 62 водород

6,63; азот 4,01 .

Найдено, %: углерод 75,63; водород

6,44; азот 4,17. (а)з = +62,9О.

Пример 5. Синтез (-)-1-атил-1,3,4,9тетрагидро-4-(фенилметил)-пирано(3.4-Ь)индол-1-уксусной кислоты.

Омылением сложного /(IS)-эндо/-1,7,7триметил-бицикло/2,2.1/гептил-2-свого эфира 1-этил-1,3,4,9-тетрагидро-4-(фенилметил)-пирано(3,4-Ь)индол-1-уксусной кислоты, изомера В, причем это омыление осуществляют в соответствии с примером 2 стадией 2, получают 327 мг (41,3% выход) чистой кислоты в виде белого твердого вещества с точкой плавления 171-172 С, Элементный состав для соединения

ФОрмулы С22Н2ЗЙОЗ.

10

20

30 перорально в объеме 0,5 мл/100 г массы животного, используя группу из 10 животных, Методика испытаний.

35 Группе крыс вводили внутрикожно в ле55

Рассчитано, %: углерод 75,62; водород

6,63; азот 4,01.

Найдено, %: углерод 75,55; водсрод

6.42; азот 4,31. (а)о - -60,3О.

Противовоспалительная активность.

Противовоспалительная активность соединения! установлена в ходе стандартных фармакологических испытаний, например, так называемая профилактика стимулированного отека.

Целью испытания на крысах является определение способности испытуемых препаратов проявлять сильное противовоспалительное действие. Этот тест является первичной проверкой для противовоспалительных лекарств, Особи; эксперименты проводили на самцах крыс Доули (массой 180-200 г), Животные имели свободный доступ к воде, но их лишали пищи эа 18 ч до эксперимента.

Готовили полный стимулятор Фрейнда. суспензируя 5 мг убитых и высушенных

Mycobacterlum butyrlcum (ОИсо) в 1 мл минерального масла. Испытуемые соединения растворяли или суспендировали в дистиллированной воде с 0,5% Твин 80, что определяется их растворимостью. Для первичной проверки все лекарства вводили в желудок с помощью зонда при дозировке 25 мг/кг, вую заднюю лапу 0,1 мл полного стимулятора Фрейнда. Испытуемое соединение или носитель вводили непосредственно перед вводом стимулятора, 24 и 48 ч после стимулятора (дни 0,1 и 2). Измеряли обьвм инъектируемой лапы до инъекции стимулятора и

24 ч после последнего введения лекарства (день 3), используя для этого плефисмометр фирмы Буксо Электроникс. Разница объемов задней лапы в нулевой день и на 3-й день соответствует объему отека. Этодолак (25 мг/кг перорально) вводили как положительный регулятор.

Представление результатов:

Средний объем отека (выраженный в мл

+SEM) рассчитывали для каждой группы и определяли процент защиты, обусловленной лекарством: с где с — средний обьем отека у носителей обработанных животных (0,5% Твин 80 в дистиллированной воде) контрольной группы, t — средний объем отека у животных, 2001916

12 подвергнутых лечению лекарственным препаратом.

Анальгетическая активность.

Проведены дополнительные испытания по определению области применения соединения I. Испытания именуются: лекарственные эффекты в отношении болевого синдрома, вызванного у мышей фенилбенэохиноном.

Цель эксперимента на мышах — определить способность испытуемых лекарственных препаратов подавлять ноцицептивную (болевую) реакцию, вызванную химическим раздражителем. Такой тест является первичной проверкой анальгетиков периферического и центрального действия.

Особи. Эксперименты проведены на белых мышах-самцах (массой 15-25 r). Животных запирали за 18 ч до теста, но они имели свободный доступ к воде, Лекарства растворяли или суспендировали, что определяется их растворимостью, в дистиллированной воде с 0,5 (» Таина 80.

Лекарства вводили через желудочный зонд в объеме 5 мл/кг. Для первичной проверки все лекарства вводили в дозе 25 мг/кг перорально. Исследования проведены на группе из 10 особей.

Методика эксперимента.

Применение модификации метода

Сигмунда. Группам иэ пяти мышей вводили испытуемое соединение или носитель.

Спустя 60 мин животным внутрибрюшинно вводили 0,3 мл/20 r массы животного 0,02 раствор фенилбензохинона (P BQ:2-фенил1,4-бенэохинон) и их помещали в отдельные боксы для наблюдения. У каждой мыши подсчитывали число конвульсий или абдоминальных непроизвольных сокращений в течение последующих 15 мин, Эксперимент повторяли с другой rpynnoA из пяти мышей и подсчитывали среднее число конвульсий у мыши для группы иэ 10 мышей.

Представление результатов.

Сравнивали группы животных, которым вводили лекарство, с животными контрольной группы, которым вводили носитель, и подсчитывали процент защиты, вызываемой лекарством:

1» „,. .) с где c — среднее число конвульсий в контрольной группе;

t-среднее число конвульсий в экспериментальной группе.

Дополнительный тест для определения области применения соединения! имеет название: Тест Ренделла-Селитто на крысах.

Цель эксперимента — определение эффективности лекарства центрального и пе5

ЗО

50 риферического действия в подавлении реакции крыс на болевую стимуляцию воспаленной лапы.

Особи, Эксперименты проводили на крысах — самцах Доули (массой 180-200 г).

Животных запирали на ночь перед введением лекарства.

Готовили полный стимулятор Фрейнда (FCA), суспензируя 5 мг сухих убитых

Mycobacterlum Butyilcum (Дифко) в 1 мл минерального масла. Испытуемые соединения растворяли или суспензировали в дистиллированной воде с 0,5 Таина 80. Лекарства вводили в желудок через зонд в объеме 0,5 мл/100 г массы животного, используя группы из десяти животных, Методика, Группа включала 10 животных. Методика аналогична описанной Ренделом и Селитто, Аппаратура, которая используется для создания давления на лапу (Болеметр для крысиных лап, Уго Базиль, Комери, Италия), изменена в соответствии с разработкой Гифойло. Прибор представляет собой устройство, которое создает усилие, меняющееся с постоянной скоростью. Сила постоянно записывается кареткой, движущейся вдоль линейной шкалы, и измеряется в граммах. Воспалительную реакцию вызывали у крыс в задней левой ноге введением внутрикожно 0,1 мл стимулятора Фрейнда.

Испытуемое соединение и носитель вводили спустя 24 ч после введения стимулятора, Час спустя определяли болевой порог для воспаленной лапы в группу подвергнутых лечению и в контрольной группе животных, Представление данных и критерии активности.

Каждое животное, которое имело показатель в 1,5 раза выше среднего для контрольной группы, рассматривали как чувствительное к лечению (проявляется свойство анальгетика). В каждой группе определяли число животных, для которых эффект анальгетика обнаружен.

Затем определяли ЕДэо (дозу, которая обусловливает обезболивающее действие у

50 животных) при, по меньшей мере, трех дозировках, следуя при этом методике Литчфилда и Вилкоксона.

В результате проведения описанных выше тестов, используя в качестве препаратов соединения I, получены следующие данные.

Отсутствие побочных эффектов при применении соединения 1 установлено в ходе стандартных экспериментов на острую токсичность, проводимых в соответствии с

Тернером и путем длительного введения этих препаратов теплокровным животным.

2001916

Когда соединение I используется квк анальгетик или противовоспалительный препарат для лечения теплокровных живоri ых, соединение вводят перорально как индивидуальные вещества или вдозироввнных формах, например в виде капсул или таблеток, вместе с фармацевтически приемлемыми наполнителями, такими как крахмал, молочный сахар и так далее, или это соединение вводится перорально в форме растворов в приемлемом носителе, таком как растительное масло или вода. Соединение I может вводиться перорально в форме дозировок длительного выделения или наноситься на кожу в виде мазей или пластырей. Соединение пригодно для применения в виде свечей.

Дозировки соединения I зависят от природы конкретного соединения и формы лечения. Более того, они зависят от конкретного пациента, Обычно, соединение

I вводят в количестве, которое является эффективным и в то же время при котором отсутствуют какие-либо нежелательные побочные эффекты, Обычно эти эффективные противовоспалительные и обезболивающие концентрационные уровни достигаются в пределах терапевтического диапазона от

1,0 мкг до 500 мкг/кг в день, причем предпочтителен диапазон 1,0 — 100 мкг/кг день.

Предпочтительный диапазон противовоспалительных доз ограничен значениями 120 мг/кг внутрикожно. Предпочтительный диапазон обезболивающих доз находится в пределах от 1 мкг до 4 мг/кг внутрикожно, Соединение I могут вводиться в сочетании с нестероидными противовоспалительными лекарствами, такими как ацетаминофен, ибупрофен и аспирин и/или с наркотическими анальгетиками, такими как кодеин, оксикодон и морфин вместе с обычными дозами кофеина. При применении вместе с другими лекарствами дозировку соединений меняют соответствующим образом.

Соединение I также обладает жаропонижающим действием.

В таблице представлены данные сравнительных испытаний соединение I и известного соединения — Э Тодолака {!).

В целом, введение ненасыщенного заместителя в 4- положение привело к нескольким соединениям, проявившими активность в качестве обезболивающих

25

35 а нал ь гетичес кую активность

10 l5

50 средств, но которые обладают слабым противовоспалительным действием. Как показано в таблице соединения I

1 8,12,18,19,22,23,25,29 и 34 являются мощным обезболивающим средством в испытании на вызванную фенилбенэохиноном боль при ЭДю в интервале между 1,9 и 9,5 мг/кг перорально, но проявляют слабую противовоспалительную активность в испытании не превентивное лечение отека.

Уровни дозировок подобраны таким образом, чтобы можно было выявить соединения с необходимыми проявлениями активности, B некоторых случаях ЭДщ определялись как в испытании с вызванной фенилбензохиноном болью, так и в испытании на превентивное лечение отека.

Соединение имеет ЭД1о 1,9 мг/кг перорально в обезболивающем испытании, но только на 37 снижает отек в противовоспалительном испытании. Таким образом, соединение имеет желаемое различие между обезболивающим и противовоспалительным действием, Сравнением ЭДэо на мышах в испытании с вызванной фенилбензохиноном болью с ЛД о на мышах пояучают лечебный индекс 497. Точно также сравнением ЭД о на крысах в испытании

Рэнделла-Селлито с ЛДво на крысах получают лечебный индекс 105666 (см. таблицу).

Данные испытаний соединения (пвмедолака) и аналога по структуре и действию— этодолака на противовоспалительную и

Все значения представляют ЭДво или

ЛД о перорально, если нет особых указаний.

Представленные в таблице данные дают сравнение противовоспалительиых и обезболивающих свойств структурного аналога — зтодолака и соединения I — пемедолака. Данные показывают, что в испытании с вызванной фенилбензохиноном болью и в испытании Рэнделла-Селлито пемедоиак соответственно в 84 и 1333 раза более активен в качестве обезболивающего, чем этодолак. Напротив в испытании на лечебный артрит — модели воспалительного заболевания активность этодолака более чем в 10 раэ превышает активность пемедолака. (56) С,А.Demerson et at, I.Med.Chem, 1976г„

33. с.391, 2001916

16

Редактор Т. Пилипенко

Заказ 3154

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101

1-Эти ил)-пиран формулы обладающая противовоспалительной и анальгетической активностью.

Составитель И. Дьяченко

Техред М. Моргентал Корректор М. Самборская

Тираж Подписное

НПО "Поиск" Роспатента

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5