Способ получения производных n-гидроксимочевин в виде r- или s-энантиомерных форм или их смеси, или их фармацевтически приемлемых солей с щелочным металлом

Способ получения производных n-гидроксимочевин в виде r- или s-энантиомерных форм или их смеси, или их фармацевтически приемлемых солей с щелочным металлом

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Использование: в медицине, так как продукты обладают фармакологической активность.о Сущность: способ получения новых N-производных мочевинобщейформулы Ar-OAr1-Y-CH(CH bN(OH)(CONHR1). где Ar - 3, 4-галоидфенил; Аг - 1.3-или 1,4-фенилен, Y - /Е/ - СН СН, R - водороя алкил С -С в виде R- или S-энантиомерных форм, или их смеси, или их фармацевтически приемлемых солей с щелочнымметаноломРеагентV Ar-QAr -Y-CHfCH NHOH, где Ar, Ar1, Y имеют вышеуказанные значения Реагент 2 цинат щелочного металла Условия реакции в растворителе при О ° С, в присутствии HCI Зтабл.

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Комитет Российской Федерации по патентам и товарным знакам

1 (21) 4743073/04 (22) 02.02.90 (31) 89 2472 (32) 0302.89 (33) GB (46) 15.11.93 Ьол. Na 41-42 (71) Дзе Веллкам Фаундейшн Лимитед (GB) (72) Уильям Пол Джексон(ОВ); Джон Энтони Сэлмон(4Щ (73) Дзе Веллкам Фаундейшн Лимитед (GB) (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ й-ГИДРОКСИМОЧЕВИН 8 ВИДЕ В- ИЛИ S-ЭНАНТИОМЕРНЫХ ФОРМ ИЛИ ИХ СМЕСИ, ИЛИ ИХ ФАРМАЦДВТИЧЕСКИ ПРИЕМЛЕМЫХ

СОЛЕЙ С ЩЕЛОЧНЫМ МЕТАЛЛОМ (S7) Использование: в медицине, так как продукты (в) RU (») 2О02738 Cl (51) 5 C07C273 18 C07C275 34 обладают фармакологической активность,о. Сущность: способ получения новых М-производных мочевин общей формулы

Ar-ОАг -Y-CH(CH }-N(OH}(CONHR }. где Ar з

4-галоидфенил; Ar — 1.3-или 1,4-фенилен; Y —.

1"

/E/ — СН = СН, Я вЂ” водород, алкил С -С в виде

1 4

R- или S-энантиомерных форм, или их смеси, или их фармацевтически приемлемых солей с щелочным метанолом. Ре агент 1:

Ar-OAr -Y-CH(CH }NHOH, где Аг, Ar, Y имеют вы—

1 1 э шеуказанные значения. Реагент 2: цинат щелочного металла. Условия реакции: в растворителе при

0 С, в присутствии HQ. 3 табл

2002738. Изобретение относится к новым производным N-гидроксимочевин общей формулы

H QH

I Ю

А>-О-М- Т-С- и

C0NHR Ъ где Аг; галоидфенил;

Ar — 1.3- или 1,4-фенилвн; It — (E)-СН СН;

R Означает водород или С1-С4-алкил, в

1 виде й- или 8-энантиомерных форм, или их смеси, или их фармацевтически приемлемым солям с щелочным металлом, обладающим свойствами ингибитировать

5-липоксипенаэу и антиоксидантными свойствами с длительным сроком действия.

Указанные соединения могут найти применение при профилактике или лечении клинических заболеваний, при которых показан ингибитор метаболического действия арахидоновой кислоты, посредником которой является мигоксигеназа.

Известны производные, гидроксамовой кислоты — a -алкилированные Й-алканоилгидроксамовые кислоты (1}, которые являются ингибиторами 5-липоксигеназного фермента. Недостатком является неустойчивость R-изомера. Вследствие этого необходимо использовать только чистый

S-изомер, что снижает экономичность использования;

Целью данного изобретения является разработка способа. получения производных N-гидроксимочевин общей формулы 1 .или их фармацевтически приемлемых солей с щелочным металлом в виде R- или S-aeseтиомерных форм. или их смеси, заключающийся в том, что соединение общей формулы

l

А1 -О-At — У- С- NH0H Щ)

Ф

CHg где Ar, Ar имеют вышеуказанные значения, 1 подвергают взаимодействию с цианатом щелочного металла в условиях, обеспечивающих превращение N-А-группы в

-CONHR -группу с последующим, при необходимости, превращением соединения формулы 1 в соль щелочного металла.

Данное изобретение иллюстрируется нижеприведенными примерами.

Пример 1. Получение (Ц-Ы-ЩЗ-(4фторфенокси)фенил)-1(R,S)-uewnnpon-2-е н-1-ил}-й-гидро ксимоче вины. (а) 3-(4-Фторфенокси)толуол. . Раствор 4-фторфенола (112,0 г, Aldrich) в анизоле (250 мл) добавляли по каплям в течение 1 ч к перемешиваемой суспенэии

5 NaH (26,4 г) в аниэоле (250 мл). Когда добавление заканчивали, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч.

Затем последовательно, в течение 30 мин, добавляли 3-бромтолуол (188,1 г, Aldrich), 10 хлорид меди (l) (50,0 г) и ТДА-1 (трис(2-{2-метоксиэтокси(этил)амин в количестве 158 мл.

Когда добавление заканчивалось. смесь нагревалась с обратным холодильником в течение 22 ч, затем охлаждалась до комнатной

15 темперагуры, и к ней добавляли (2000 мл)

- эфира. Смесь фильтровали через Гифло и фильтрат промывали 2М водным HCl, 1М водным йаОН и водой, затем сушили и выпаривали в вакууме. Остающееся масло пе20 регоняли и получали целевой продукт(101,9

r) с т.кип. 129-134ОС (9 мм рт.ст.). (b) 1-Дибромметил-3-(4-фторфенокси)бен зол.

Раствор продукта иэ стадии (а) (101,9 г)

25 и NBS (266,7 r) в СС14 (500 мл) нагревали до температуры кипения с обратным холодильником, Затем добавляли AlBN (100 мг) и смесь подвергали облучению лампой среднего давления при 254 нм при нагревании с за обратным холодильником в течение 7 ч. Спустя 0,5; 1; 2; 4 и 6 ч добавляли дополнительные порции А!Вй. Смесь .охлаждали до комнатной температуры, фильтровали и фильтрат выпаривали в вакууме, получая це35 левой продукт в виде оранжевого масла (195,3 r). (с) 3-(4-©торфенокси)бензальдегид.

Смесь продукта из стадии (Ь) (181,8 r)

СаСОз(151,7 г) и ЕДТА 2Na .2Н20 (37,7 г) в

40 смеси этанол/вода (1140 мл/284 мл) нагревали с обратным холодильником в течение

20 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали и фильтрат выпаривали в вакууме. Остающееся масло брали в эфир (500 мл), промывали 2М водным рас45 твором НС1, насыщенным водным раствором ИаНСОз и водой, сушили и выпаривали. в вакууме, давая вязкое оранжевое масло, которое подвергали хроматографии дважды

50 через силикагель с использованием смеси эфира (40-60 6) петролейного эфира (1:9), . получая целевой. продукт (69,6 г). (d) 1-(3-(4-Фторфенокси)фенил|бут-1-енЗ-он.

55 Смесь продукта из стадии (с) (69,6 г), диметилацетилметилфосфоната (56,2 r) и безводного К2СОз (88,9 г) в ТГФ (500 мл} нагревали с обратным холодильником в течение 24 ч, Смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали и фильтрат вы2002738 паривали в вакууме, Остающееся масло брали в эфир (500 мл) промывали в вакууме.

Остающееся масло брали в эфир (500 мй), промывали водой, насыщенным водным раствором йаНСОз и водой. сушили и выпаривали в вакууме, получая целевой продукт (83;4 г). (е) Щ1-(3-(4-Фторфенокси)фенил)бут-2ен-3-ил-гидроксиламин.

Пиридин (63,6 г) по каплям добавляли в течение 1 ч к перемешиваемому раствору продукта иэ стадии (d) (82,5 г) и хлоргидрата гидроксиламина (33,6 r) в метаноле (1000 мл). Когда добавление заканчивали, смесь перемешивали в течение 1,5 ч. затем охлаждали в смеси лед/вода и добавлялась безводную щавелевую кислоту (289,8 г). Далее добавляли метанол (750 мл) и к перемешиваемой смеси в течение 3;5 ч добавляли пианоборгидрид натрия (101,2 г). Когда добавление заканчивали, смесь перемешивали в течение 2 ч при 0-50С и затем в течеwe 20 ч при комнатной температуре. Смесь фильтровали, фильтрат выпаривали в вакууме и остающееся масло брали в эфир(1000 мл), промывали водой и охлаждали смесью . лед/вода, С помощью добавления 10М водного раствора NaOH рН смеси доводили примерно до 9 и органическую фазу удаляли. Водную фазу экстрагировали эфиром и органическую фазу и экстракт обьединяли, промывали водой,,сушили и выпаривали в вакууме, получая целевой продукт в виде рыжевато-коричневого масла (92,7 r), которое кристаллизовалось при стоянии. (f) (E)-N-(3-(3-(4-фторфенокси)фейил)1(R $) метил и роп-2-ен-1-ил)-N-гидро ксимо

- чевина.

2М водный раствор НС1 (645 мл) добавляли при 0 С в течение 1,5 ч к перемешиваемому раствору продукта из стадии (е) (88,0 г) и цианата калия (79,2 г) в ТГФ (750 мл), Когда добавление заканчивали, смесь перемешивали при 0 С в течение 2 ч, затем давали возмо>кность разделиться.

Органическую фазу удаляли, водную фазу экстрагировали эфиром, и органическую фазу и экстракты объединяли, промывали насыщенным водным раствором МаНСОз и водой, сушили и выпаривали в вакууме, давая бесцветное клейкое твердое вещество.

Последнее растирали со смесью эфир(40-60 петролейный эфир (3:2), затем перекристаллизовывали из смеси этилацетата (40-60 С) петролейного эфира (2:1), давая бесцветное твердое вещество (67,8 г) с т,пл, 133,5-135 С (разл).

Анализ: С 64Я1%; 64,55%; Н 5,43%, 5,42%, N 8,52%; 8.66%.

10 (55,0 т) трифенилфесфина (258,0 г) и N,О i 5 бис(трет-бутоксикарбоксил) гидроксиламина (183,0 г, fuka) в толуоле (1500 мл). Когда

20 2 ч, К смеси добавляли (40-600С) петролейный эфир (1500 мл), смесь фильтровали через фильтр Гифло и фильтрат выпаривали в мл). Когда добавление заканчивали, смесь выпаривали в вакууме и оставшееся твердое

45 вещество растирали и брали в 1-метил-250

Пример 2. Получение (Е)-М-(3-(3-(4фто рфенокси)фен ил)-1{R)-метил ирои-2-ен1-ил)-N-гид роксимочевин ы. (а) Бут-3-ин-2-(S)on.

Бут-3-ин-2Я-ол получали с помощью разложения на составные части (+ )-бут-3ин-2-ола (Albrich) в соответствии с методикой, описанной в АМеб. Chem. 31, 156, 1988, (в) N,O-бис(трет-бутоксикарбонил)-N(бут-3-и н-2(R)-ил)гидроксилами н.

ДЕАД (180,0 r) добавляли по каплям при (-) 78 С в течение 1 ч к перемешиваемому раствору бут-3-ин-2-(R)-ола из стадии (а) добавление заканчивали, смеси давали возможность нагревания до комнатной температуры и затем ее перемешивали в течение вакууме, давая целевой продукт в виде масла, которое кристаллизовалось при стоянии. (с) N,Î-бис(трет-бутоксикарбоксид)-N(бут-3-ен-2(R)-ил)гидро ксиламин.

Перемешиваемую смесь продукта иэ стадии (b) (200,0 г) и 5%-ный раствор масса/масса Pd/8aSO< (8,8 r) в пиридине (1000 мл) подвергали гидрированию при атмосферном давлении до тех пор, пока поглощение водорода не прекращалось. Смесь фильтровали, через фильтр Гифло, фильтрат выпаривали в вакууме и остающееся масло брали в эфир (1000 мл), промывали 20 мас.% водного раствора лимонной кислоты и воды, сушили и выпаривали в вакууме, по целевой продукт (192,0 г). (d} 1-бром-3-(4-фторфенокси)бензол.

Водный раствор КОН (49,0 г в 100 мл воды) добавляли в перемешиваемый раствор 4-фторфенола (84.,0 г в метаноле (250 пирролидинон (300 мл). К смеси добавляли

3-фторбромбензол (131,3 г, Albrtch) и смесь нагревали с обратным холодильником в течение 24 ч, затем охлаждали до комнатной температуры, вливали в воду (1500 мл) и экстрагировали эфиром. Объединенные экстракты промывали 2М водным раствором

Na0H, 2М водным раствором НС1 и водой, сушили и выпаривали в вакууме. Остающееся масло перегоняли, получая целевой продукт (103,0 г) с т.кип. 85-100 С (0,25 мм рт.ст.). (е) (Е)-М-(3-(3-(4-фторфе нокс и) фе н ил)1(R)-метил проп-2-ен-1-ил)гидро ксила мин. .с

2002738

20

40

Смесь продукта из стадии (с) (100,7 r), продукта из стадии (d) (103,0 г) три(о-толил)фосфина {10,0 г) и ацетата палладия (II) (4,0 r) в три (н-бутил)амине (300 мл) перемешивали при 115 C в течение 3 ч. Смесь охлаждали примерно до 90 С, выпаривали в вакууме. и остаток брали в эфир (1000 мл), промывали 33 мас.$ водного раствора лимонной кислоты и фильтровали через фильтр Гифло, Фильтрат промывали 10 мас.$ водного раствора лимонной кислоты и водой сушили и выпаривали в вакууме, получая вязкое рыжевато-коричневое мас ло. Последнее брали в метанол (1000 мл) и конц. HO (100 мл) и смесь нагревали с обратным холодильником s течение 1 ч, затем охлаждали до комнатной температуры и выпаривали в вакууме. Остаток брали в воду (1000 мл) и 10М водный раствор NaOH (125 . мл), экстрагировали эфиром и объединенные экстракты промывали водой, сушили и выпаривали в вакууме. Остающееся рыжевато-коричневое масло подвергали хроматогра. фии через силикагель с использованием смеси эфира (40-6ООС) петролейного эфира (9:1) с последующим использованием эфира, давая целевой продукт в виде желтого масла (21,9 r). (f) (Е)-¹(3$3-{4-фторфенокси)фенил11(й)-метил п роп-2-ен-1-ил)-й-гидроксимоче вина.

2М водный раствор HCI (160 мл) добавляли по каплям при ООC в течение 1 ч к перемешиваемому раствору гродукта из стадии (e) (21,9 r) и цианата калия (19,7 r) в

ТГФ (1 90 мл). Когда добавление заканчивали, смесь перемешивали при О С в течение

1,5 ч, затем к смеси добавляли насыщенный водный раствор NaCI и органическую фазу удаляли. Водную фазу экстрагировали эфиром и органическую фазу и экстракты объединяли, промывали 2М водным раствором

HÑI, насыщенным водным раствором

ЙаНСОЗ, водой и насыщенным водным раствором ИаС! сушили и выпаривали в вакууме, получая кремневое твердое вещество, которое перекристаллиэовывали из смеси этилацетата (40-60 С) петролейного эфира (2:1), получая бесцветные пластины (17,7 r) с т,пл, 133-135ОС (разл.) 200 МГц Н ЯМР и ИК согласовывались с целевым продуктом.

Анализ: С 64,1ОЯ; 64,54$; Н 5,47 ;

5,42: N 8.78 6, 8,86 . j à) P - 40.81 (с-1,0, Е ОН).

П р и и е р 3. Получение.(F)-ЩЗ-(3-(4фторфенокси)фенил)-1(8)-метилпроп-2-ен1-ил)-N-гидроксимочевина. (А) Бут-З-ин-2®-ол.

Бут-3-ин-2(R)-on получали с помощью разложения на составные части (+ ) бут-3ин-2-ола (Aldrich) в соответствии с методикой, описанной в J.Med.Chem. 31,156, 1988. (b) N,Î-бис(трет-бутоксикарбонил)-N(бут-3-ин-2{Я)ил)гидроксил амин.

ДЕАД (81,8 г) добавляли по.каплям при (-) 70 С в течение 1 ч к перемешиваемому раствору бут-3-ин-2(й)ола из стадии (а) (25,0

r), трифенилфосфина (117.,0 г) и N,O-(бис)трет-(бутоксикарбонил) гидроксиламина. (83,2 г Fluka) в толуоле (760 мл). Когда добавление заканчивали, смеси давали возможность нагревания до . комнатной температуры, затем фильтровали и Фильтрат выпаривали в вакууме. Остающееся масло очищали с помощью хроматографии дважды через силикагель с использованием

ДСМ и смеси эфир (40-60 С) петролейный эфир (1:4) соответственно, получая целевой продукт в виде бледно-желтого масла (98,6 г). (c) N,О-бис(трет-бутоксикарбонил)-N(бут-3-ен-2($}-ил)гидро ксиламин.

Перемешиваемую смесь продукта из стадии (b) (98,6 г) и 10 Д-ного раствора масса/масса Pd/Ва504 в пиридине (500 мл) подвергали гидрированию при атмосферном давлении до тех пор, пока водород не переставал поглощаться. Смесь фил ьтровали через фильтр Гифло, фильтрат выпаривали в вакууме и остающееся масло брали в эфир (500 мл), промывали 20 мас.7; водного раствора.лимоннои кислоты и водой, сушили и упаривали в вакууме, получая желаемый продукт в виде светЛо-оранжевого

„масла (90,0 r).

{d) 1-Бром-3-(4-фторфенокси)бензол. . 1-Бром-3-(4-фторфенокси)бензол приготавливали по способу, описанному в стадии (d) примера синтеза 2. (е) (Е)-й-(3-(3-(4-фто рфе накс и)фен ил11(фметилпроп-2-ен-1-ил}-гидроксиламин, Смесь продукта из стадии(с)(57,4 r) продукта из стадии {d) (58,7 г), три (О-тол ил)фосфина (5,0 г) и палладия (Н) ацетата (2,0 г) в три (н-6ymn) амине {150 мл) перемешивали при 110-120 С в течение 3,5 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, упаривали .в вакууме и остаток брали в простой эфир (500 мл) и фильтровали через фильтр Гифто.

Фильтрат промывали 10 мас. обьем водного раствора лимонной кислоты и водой, сушили и упаривали в вакууме, давая рыжевато-коричневое масло. Последнее брали в метанол (500 мл) и HCI(50 мл) и смесь нагревали с обратным холодильником в течение 1 ч, затем охлаждали до комнатной температуры и упаривали в вакууме. Остаток брали в воду(500 мл) и 10 M водный раствор Na0H

2002738 «0 (60 мл), экстрагировали простым эфиром и объединенные экстракты промывали до нейтральной реакции водой, сушили и упаривали в вакууме; Остаток подвергали мгновенной хроматографии через силикагель с. 5 использованием смеси простого эфира (4060 С) петролейного эфира (1-1),.отбрасывали, затем испольэовали смесь в соотношении 9:1), в результате чего получали желаемый продукт в виде вязкого светло- 10 желтого масла (32,5 г). (1) (Е)-N-{3-(4-фторфенокси(фенил)-1(S)метилпроп-2-ен-1-ил}-N-гидроксимочевина.

2М водный раствор соляной кислоты (71,1 мл) добавляли по каплям при О С в I5 течение 45 мин к перемешиваемому раствору продукта из стадии (е) (32,5 г) и цианату калия (29,3 г) в тетрагидрофуране (282 мл), По завершении добавления смесь перемешивали при 0 С в течение 45 мин, затем 20 добавляли насыщенный водный раствор йаС! и органическую фазу удаляли. Водную фазу экстрагировали простым эфиром и органическую фазу и экстракт обьединяли, промывали 2М водным раствором HCf и во- 25 дой, сушили и упаривали в вакууме, давая клейкое твердое вещество, которое перекристаллизовывали из этилацетата; давая. бесцветные пластинки (25Я г) с т.пл. 131132,5ОС. 200 МГц. Н, ЯМР и ИК идентифи- 30 цированы с желаемым продуктом.

Анализ: С 64,7 ; 64,54 ; Н 5,42Я, 5,52 ; N8,79 ;8,86 (а) Ь -41,61 (c-1.0; ЕВОН).

Пример 4. Приготовление (Е)-й-{3-(3- 35 (4-хлорфеноксил)фенил)-1(R,S)-метил проп2-ен-1-ил)-N-гидроксимочевины. (a) (4Е)-Т-(3-(4-хлорфенокси)фенил)бутен-3-он 10 н, водный раствор Na0H (2 мл) добавляли к раствору 3-(4-хлорфенокси)бензальдегида (23,3 r) Afdrich в ацетоне(150 мл), и смесь энергично перемешивали. После нескольких минут перемешивания температуру повышали до 32 С. Смесь оставляли стоять в течение.5 мин и затем выливали в 45

2М водный раствор соляной кислоты (600 мл) и экстрагировали смесью простого эфира и петролейного эфира (1:1. 400 мл). Экстракт промывался водой и насыщенным водным раствором NaOH сушили над суль- 50 фатом магния и десорбировали, получая альдольный продукт. Последний брали в толуол (300 мл), добавляли и-толуолсульфоновую кислоту(1 г} и смесь нагревали в течение

1 ч. Смесь затем охлаждали, промывали на- 55 сыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором

NaCI, сушили над сульфатом магния и де-, сорбировали. Остаток элюировали через силикагельную колонку с использованием смеси метиленхлорида (40-60 С} петролейного эфира (1;1, с последующим изменением соотношения на 3:1), и элюат десорбировался, давая желаемый продукт (19,0 г). (Ь) (Е)-1-(3-(4-хл арфе нокс и)фе нил бутенЗ-оноксим.

Продукт стадии (а) (19,0 r} и хлоргидрат гидроксиламина(6,9 г) брали в метанол (100 мл), добавляли пиридин (200 мл) и смесь перемешивали в течение 1 ч, Смесь затем десорбировалась, вновь растворялась в простЬм эфире (200 мл), ее промывали 2М водным раствором соляной кислоты и насыщенным водным раствором NaCI, сушили над сульфатом магния и десорбировали, дачая желаемый продукт (20,3 r), (с) (Е)-N-(1-метил.3-(3-(4-хлорфенокси)фенил)про п-2-енил) гидроксиламин, Продукт из стадии (Ь) (20 г) брали в метанол (100 мл) и добавляли щавелевую кислоту (31;3 г). Смесь охлаждали в ледяной бане и добавляли порциями цианборгидрид натрия (22 г) в атмосфере азота в течение 3 ч. Смесь перемешивали в течение 1,5 ч, затем добавляли дополнительное количество цианборгидрида натрия (2 г) и перемешивание продолжали еще в течение 0,5 ч. Затем смесь десорбировалась, и остаток распределялся между зтилацетатом (300 мл) и водой (300 мл). Органический слой отделяли, промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором NaCI, затем подвергали десорбции, давая желаемый продукт в виде неочищенного гидроксиламина. (d) (Е)-N-(1-метил-3-(3-(4-хлорфе н о кси)фенил)прап-2-ен- f-ил}-N-гидроксимоче вина.

Порциа продукта из стадии (с) (6.0 г) брали в ТГФ (60 мл) и при 0ОС добавляли цианат калия (4,9.г). Через 15 мин, по каплям добавляли 5М водный раствор HCI (20 мл) и смесь перемешивали в течение f O мин.

Затем к смеси добавляли насыщенный водный раствор NaCI.(100 мл) и эфир (100 мл) и органический слой отделяли, промывали 2М водным раствором НО (100 мл) и насыщенным водный раствором NaCI (100 мл), сушили над MgS04 и подвергали десорбции, давая целевой продукт, который перекристаллизовывался из:смеси этилацетат/петролейный эфир, Выход4,4 г; т,пл. I32- I35 Ñ.

П р и и е р 5. Получение (Е)-N-(3-(3-(4хлорфенокси)фенил)-1-($)-метилп роп-2-ен1-ил}-N-гидроксимочевины. (а) (Е)-1-(3-(4-хлорфенокси)фенил)бут-1ен-3-он.

2002738

Смесь 3-(4-хлорфенокси)бензальдегида (50,0 г, Aldrich) диметилацетилфосфоната (35,7 r. Lancaster) и безводного Х2СОз (59,4

r) в ТГФ (300 мл) перемешивали в атмосфере

Nz при 55-55 С в течение 20ч. Охлаждаемую 5 смесь фильтровали, остаток промывали

ТГФ, и объединенные фильтрвты выпаривали в вакууме, давая оранжевое масло, которое подвергали м-;овенной хроматографии на силикагельной, .олонке с использовани- 10 ем смеси эфир (40-60 С, петролейный эфир) I;1 по объему в качестве элюента, давая целевой продукт в виде вязкого бледно-желтого масла (52 8 г), (Ь) (Е)-1(Й)метил-3-(3-(4-хлорфенокси)фе- 15 нил)проп-2- ен-1-ол.

ВН3 ТГФ (1,0 М, 96 мл) и раствор продукта Из стадии (а) (52,7 r) в ТГФ (общий обьем 96 мл) одновременно добавляли в ат. мосфере азота к перемешиваемому раствоу 20 (S) 3,3-дифенил-пирроло(1,2-с)(1,3,2)оксазаб орилидина в ТГФ (0.3 М, 33 мл., приготовленного по методу, описанному в ЖОХ 53, 2861 (1988)), Когда добавление закончили„смесь перемешивали при комнатной температуре 25 в15 мин, затем вливали в смесь лед (2 M водный раствор HG 300 r/300 мл), перемешивали в течение 30 мин и экстрагировалась эфиром (3x300 мл). Объединенные экстракты промывали 2 М водным раство- 30 ром HCI (200 мл), насыщенным водным раствором йаНСОз (200 мл) и водой (200 мл), сушили над Ма2304 и выпаривали в вакууме, давая целевой продукт в виде вязкого желтого масла (55,3 r), которое частично кри- 35 сталлизовалось из смеси эфир (40-600С, петролейный эфир (1:1) па объему). Маточную жидкость декантировали и подвергали мгновенной хроматографии на силикагельной колонке, давая целевой продукт в виде 40 бледно-желтого масла (25,7 r), (а) P + 8,7 (с=3,0, Et0H).200 МГц Н, ЯЫР и ИК согласуются с предлагаемой структурой. (с) (Е)-N,O-бис(трет-бутоксикарбонил)Щ1(3)-метил-3-(3-(4-хлорфенокси)фен ил)45 про п-2-ен-1-ил)гидроксилами н, Раствор ДЕАД (24,5 r) в толуоле (50 мл) добавляли к перемешиваемой смеси продукта из стадии (b) (25,7 г) N,o-бис(трет-бутоксикарбонил)гидроксиламина (22,9 г, 50

FIuka) и трифенилфосфнна(36,8 r) a толуоле (375 мл) при (-)65-(-)70 С., Когда добавление закончили, смесь перемешивалась в течение 4 ч при (-)65+)70 С, затем дополнительно добавляли трифенилфосфин (5.0 r) с 55 последующим дополнительным добавлением ДЕАД (3,3 г) и смесь перемешивали в. течение еще 1 ч при -)65+)70 С. Подогретую смесь выпаривали ввакууме,,получая коричневое масло, которое последоватеьл=. но подвергали мгновенной хроматографии через две силикагельные колонки с использованием ДСМ и смеси ДСМ (40-60 С петролейный эфир) эфир (3:6:0,25 объем/объем/объем) соответственно в качестве элюентов. давая целевой продукт в аиде вязкого желтого масла (20,3 г). (d) (Е)-N-1($)-метил-3-(3-(4-хлорфенокси)фенил)проп-2-ен-1-ил)гидроксил амин.

Трифторуксусная кислота (28 мл) добавляли в атмосфере Nz при 0 С к перемешиваемому раствору продукта иэ стадии (с) 20,3 г в ДСМ (112 мл). Когда добавление заканчивали, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3. ч, затем к смеси добавляли эфир(100 мл) и воду(100 мль rtpin

0 С к энергично перемешиваемой смеси добавляли 10М водный раствор NaOH (32 мл), Смесь подщелачивали избытком насыщенного водного раствора МаНСОз, экстрагировали эфиром (200 мл) и экстракт промывали насыщенным водным раствором ИаНСОЗ (100 мл и водой.(2х100 мл), сушили над

NazS04 и выпаривали в вакууме, получая вязкое желтое масло, которое подвергали мгновенной хроматографии на силикагельной колонке с использованием смеси эфир/петролейный эфир (4:1), после чего получили целевой продукт, т.пл. 83-84 С (а)) 31,1 (с + 1,2; СНС13). (е) (Е)-N-(1-(S)-метил-3-(3-(4-хлорфенокси)фенил)проп-2-ен-1-ил}-N-гидроксимоче вина.

Порция продукта иэ стадии (d) (0,29 г) брали в ТГФ (10 мл) и при 0 С добавляли цианат калия (0,25 r). Через % мин, по каплям добавляли 2М водный раствор HCI u смесь перемешивали в течение 2 ч. Затем к смеси добавляли насыщенный водный раствор NaCI (50 мл) и эфир (50 мл) и органический слой отделяли, промывали насыщенным водным раствором ИаНСОз (50 мл), сушили над MgS04 и десорбировали, давая целевой продукт, который перекристаллизовывался из смеси этилацетат/петролейный эфир. Выход 0,26 г: т,пл.

119-120 С, (а) -40,0 (с=1,0; EtOH).

Пример 6. Получение натриевой соли (Е)-й-ЯЗ-(4-фторфенокси)фен ил)-1-(R, Я)-м етилпроп-2-ен-1-ил)-N-гидроксимочевины.

Соединения примера синтеза 1 (1,0 г) растворяли в смеси водного гидроксида натрия (0„11 r в 25 мл воды) и метанола (30 мл), Метанол выпаривали в вакууме и оставшийся раствор подвергали сушке вымораживанием, давая желаемый продукт в виде кремового твердого вещества.

200 УГц Н ЯМР (ДМСО-ds, млн.дол.):

1,10-1,21(ЗН,д.,-СНз),4,75-4,92(1Н, м., >СН-/, 2002738

2,0

5,27-6,14 (2Н, шир.с. NH2), 6,22-6,51 (2Н, с„

НС=СН) и 6,69-7,37) (9Н, м., ароматика), отсутствие -ОН си гиала.

Примеры фармацевтических препаративных форм.

Активным ингредиентом в следующих препаратинных формах является любое соединение изобретения (как определено выше, например, любое из соединений примеров синтеза от 1 до 5).

Пример А. Состав таблетки, мг:

Активный ингредиент 5,0

Лактоза 82,0

Крахмал 10,0

Повидон 2,0

Стеарат магния 1,0

Смешивают вместе активный ингредиент, лактозу и крахмал. Гранулируют порошки с использованием раствора повидона в очищенной воде. Сушат гракулы, добавляют стеарат магния и прессуют для получения таблеток (100 мг на таблетку).

Пример В: Состав мази:

Активный ингредиент, мг 1,0

Белый мягкий парафин, г до 100,0

Диспергируют активный ингредиент в небольшом обьеме носителя. Постепенно вводят его в массу для получения гладкого, гомогенного продукта. Наполняют сминаемые металлические тюбики.

Пример С. Крем для местного использования, г;

Активный ингредиент 1,0

Полавакс 20,0

Безводный ланолин

Белый пчелиный воск 2,5

Метилгидроксибензоат 0,1

Дистиллированная вода До 100,0

Нагревают полавакс, пчелиный воск и ланолин вместе при 60 С. Добавляют раствор метилгидроксибензоата. Гомогенизируют с использованием высокоскоростного перемешивания. Температуре дается возможность понизиться до 50 С. Добавляют и диспергируют активный ингредиент. Дается возможность охладиться при перемешивании при медленной скорости.

Пример Д. Лосьон для местного использования, г:

Активный ингредиент 1,0

Сорбитан монолаурат 0,6

Полисорбат 20 0,6

0,5

0,04

4,0

ПорОшки перемешивали до тех пор, пока не становились гомогенкыми и заполнялся в капсулы подходящих размеров из твердаго желатина (50 мг на капсулу), Кетостеарилоный спирт 1,2

Глицерин 6,0

Метилгидрокси5 бензоат 0,2

Очищенная вода

В,P., мл Да 100;0

Метилгидроксибензоат и глицерин растворяли в 70 мл воды при 75 С, Сорбитан

10 монолаурат, Полисорбат20 и кетостеариловый спирт расплавляли вместе при 75 С и добавляли в водный раствор. Получающуюся в результате эмульсию гомогенизиравали, давали возможность охладиться при

15 непрерывном перемешивании и добавляли активный ингредиент в виде суспензии и оставшейся воде. Смесь перемешивали до тех пор, пока она не становилась гомогенной.

20 Пример Е. Глазные капли, г:

Активный ингредиент

Метилгидроксибензоат 0,01

25 Пропилгидроксибензоат

Очищенная вода

В.P., мл До 100,0

Метил- и пропилгидроксибензоаты рас30 творяли в 70 мл очищенной воды при 75ОС и получающемуся раСтвору давали возможность охладиться. Затем добавляли активный ингредиент и раствор донодили до 100 мл очищенной водой. Раствор стерилизова35 ли путем фильтрации через мембранный фильтр с размером пор 0,22 мкм и асептически заполняли в подходящие стерильные контейнеры.

Пример Г. Иньецируемый раствор:

40 Активный .ингредиент,мг 10,0 мг

Вода для инъекций

В.P., мл До 1,0

Активный ингредиент растворялся в по45 лавине количества воды длч иньекций и затем раствор доводили до объема и стерилизовали с помощью фильтрации.

Получающийся раствор распределяли по ампулам в асептических условиях:

50 Пример С. Капсулы с порошком для ингаляций, мг:

Активный ингредиент (порошок 0,5-7,0мкм)

Лактоза (порошок

55 30-90 мкм) 46,0

2002738

4,2

45

Пример И. Аэрозоль для ингаляции, Активный ингредиент (0,5-7,0 мкм) порошок 200

Сорбитан триолеат 100

Сахарин натрий (порошок 0,5-7,0 мкм) 6

Метанол 2

Трихлорфторметан, г

Дихлордифторметан, мл До 100

Сорбитан триолеат и ментол растворяли в трихлорфторметане. Сахарин натрий и активный ингредиент диспергировали в смеси, которую затем помещали в подходящие взроэольные канистры и через систему клапанов пропускали дихлорфторметан.

Данная композиция содержала 2 мг активного ингредиента на каждые 100 мкл дозы, Биологические данные.

Экс виво ингибирование 5-липоксигеназы.

Предварительное изучение на крысах и кроликах показало, что рацемат примера 1 синтеза и соответствующие знантиомеры примеров 2 и 3 синтеза. эффективно ингибируют стимулируемый синтез лейкотриена

В4 (LTB4), соединения, образуемого из арахидоновой кислоты через 6-липоксигеиазу, После назначения испытываемого соединения в плазме периодически измеряли концентрацию LTB4 и выражали как процент среднего контрольного значения. Используемая процедура описана в

АPharmaaf 94,628(1988) и может быть кратко охарактеризована следующим образом.

За 2 мин сбора повторные образцы (0,5 мл) крови стимулировались кальциевым ионофором А23187(конечная концентрация

15 мкг/мл) на протяжении 30 мин при 37 С.

Когда инкубирование завершалось. образцы центрифугировали (12 тыс,/ С в течение

2 мин) и свободную от клеток плазму удалялась. Затем с помощью специального радиоиммуноанализа определяли концентрацию

LTB4 в плазме.

Соединения по примерам синтеза 1-3 все ингибировали стимулированный зкс виво синтез ОВ4 в течение нескольких часов после их назначения. Соединение по примеру синтеза 1, например, когда оно вводилось кроликам орально в дозе 2 мг/кг, ингибировало синтез LTB4 более, чем на

50 . в течение периода более, чем 16 ч. То же самое соединение. когда оно назначалось орально крысам в дозе 10 мг/кг ингибировало синтез LTB4 более, чем на 607, в течение более, чем 10 ч. Энантиомеры примеров синтеза 2 и 3 давали аналогичные результаты.

Ингибирование 5-липоксигенаэы ин витра.

Кровь от обычных свободных от аспирина добровольцев центрифугировали для отделения лейкоцитов от эритроцитов и тромбоцитов. Раствор испытываемого соединения в ДМСО (10 мкл, конечная концентрация в интервале 0,01-100 мкМ) добавляли к гомогенату клето (470 мкл}, и смесь инкубировалась при 37 С в течение 5 мин. Затем добавляли одновременно растворы арахидоновой кислоты в метаноле (250 мкМ, 10 мкМ, конечная концентрация 6 мкМ) и хлористый кальций в воде (100 мМ, 10 мкл, конечная концентрация 2 мМ), и смесь инкубировалась при 37 С еще в течение 5 мин. Реакцию прекращали с помощью кипячения, Проводили радиоиммуноанализ на лейкотриен 84.

Эксперимент повторяли с использованием цельной человеческой крови, стимулированной ионофором..

Для соединений примеров синтеза 1-5 результаты представлены в табл.1 (ICso, мкМ}.

Антиоксидантная активность.

B качестве меры антиоксидантной активности определяли способности предлагаемых соединений захватывать пероксильный радикал с помощью испытания способности каждого соединения ингибировать пероксилениелиноленовой кислоты с испольэованием метода, описанного в Blochem. Pharm

38, 1465 (1989).

Соединение по примеру синтеза 1 имело константу кажущейся скорости (Кдн) захвата пероксильных радикалов 0,408.

Эффекты сочетания с ЙЯАДД.

Самцы новозеландских белых кроликов (2,5-3 кг) иммунизировали с помощью интрадермальных иньекций 4 мг овалбумина в 1 мл полного адьюванта Freunda, Спустя 14 дней животных повторно иммунизировали таким же образом, Через 5 дней после второй иммунизации индуцировали артрит в правом коленном суставе с помощью иньецирования 1 мл стерильного раствора овал50 бумина (5 мг/мл) в полость сустава

Измеряли диаметры сустава (на рзндомизированной слепой основе) циркулем с частыми интервалами после провокацион55 ного введения антигена. Спустя 14 дней животных умерщвляли и суставное пространство промывалось 1 мл физиологического раствора и получающуюся в результате жидкость брали для общего и дифференциального подсчета лейкоцитов.

2002738

5

40 хряща, на наибольшее уменьшение было в группе, получающей как соединение Я, так

50 тных, получающей как соединение А, так и

55 Приведенные выше данные демонстри руют цитазащитный эффект саединения А

Сенсилизированных животных беспорядочно распределяли на группы 5-8. Соединение по примера синтеза (Е)-N-(1-метил-3-(3-(4-фтарфенокси)фенил)п роп-2-ен-1-ил)-N-гидроксимочевина (соединение А), вводили в суспензии после 18 ч измельчения на шаровой мельнице в 0,25%ном целаколе, а в качестве носителя нестероидный противовоспалительный индометацин растворяли в небольшом объеме 1М Трис буфера с рН 8. а затем доводил и до нужного объема 0,25%-ным целакалом. Контрольные животные получали 0,25%-ный целакал. Каждое животное получало оральную дозу (приблизительно 5 мл) носителя или лекарства 3 раза каждые

24 ч. Дозы веществ назначали в 8,0 ч утра, 4,0ч вечера и 12 ч ночи в течение 16-17 дней, начиная с момента за 1 ч до введения антигена в нулевой день. Все дозы давали орально с помощью желудочного зонда. Группы были следующими:

1-7: контрольные (5 мл 0,25%-ного целакола, х 3/24 ч)

8-14: 1 мг/кг индометацина, растворен- 2 ного в 0,25 -нам целакопе х 3/24 ч

15-21: 2 мг/кг соединения А, суспендированного в 0,25%-ном целакале х 3/24 ч

22-28: 2 мг/кг соединения А, суспендированного в 0,25 -ном цепаколе плюс 1 мг/кг индометацина, растворенного в

0,25%-ном целаколе.

Опухание сустава

У контрольных животных введение антигена вызывало увеличение диаметра сустава на 6-7 мм, которое достигало пика через 2 дня после введения провокацион.ной дозы антигена. Припухлость сустава сохранялась в контрольной группе в течение периода эксперимента (14 дней) и к тому времени, когда животных убивали, диаметры артритных суставов были приблизитель- но на 5 мм больше. Лечение ни одним из лекарстве не снижали опухоль суставов в течение первых двух дней после выделения 4 провокационной дозы вещества, но, начиная с третьего дня и далее, соединение А снижало припухлость на величину да 26%, а индометацин íà 53, по сравнению с контрольными животными, обработанными носителем. Самое большое и наиболее постоянное уменьшение припухлости (до

72%) наблюдалось в группе, получающей сочетание соединения А и индаметацина.

Результаты приведены в табл.2. . Исследование синовиальнай жидкости.

Синовиальная и выстилочная ткани удаляли из сустава, фиксировали, обрабатывали, разрезали и окрашивали дпя исследования под микроскопом. Гистологические показатели выводили для общей массы воспаленной синовиальнай выстилки, инфильтрации лимфацитов и папиморфного содержимого, Микроскопические препараты на предметных стеклах исследовали на рэндомизированной слепой основе, Синовиальные жидкости из артритных суставов контрольных животных содержали приблизительно 10 лейкоцитов, из которых примерно 80% были палиморфами. Соединение А или один индометацин оба слегка уменьшали средний показатель лейкоцитного инфильтрата в синовиальнай жидкости, но наибольшее уменьшение получалось в результате применения соединения А с индометацином. Количества лейкоцитов (число клеток х106) представлено ниже.

Соединение А Индометацин А+Индаметацин Контроль

6 1 7,3 0,9 7,9

Анализ хрящевого протеогликана

Соединительный хрящ вскрывался с концов бедренных костей, и вываривался с попаином перед измерением концентрации сульфираванных гликозаминогликанов (СаСов). Содержание протеагликана выражали в мкг САС/мг влажной массы хряща и сравнивали с величинами, полученными в случае хряща из противоположного контрольного сустава.

Соединительньгй хрящ, иссеченный из артритных суставов животных, обработанных носителем, через 14 дней после введения провокационной дозы антигена, содержал на 43% меньше протеогпикана, чем хрящ из противоположных суставов тех же животных.

Соединение А или адин индаметацин оба .уменьшали потери протеогликана из и индаметацин. Результаты показаны ниже, Потеря протеогликана, % ..

Соединение А Индометацин А+Индометацин Контроль

34 38 ?6 43

Гистологическая оценка синовиальной

Выстип ки

В синовиапьнай выстилке группы живоиндометацин, число как лимфоцитов, так и общих клеток, значительно уменьшалось.

Результаты показаны в табл.3. при артрите; особенно, в присутствии нестероидного пративоваспалительнога лекарства индометацина.

Данные токсичности

2002738

Таблица 1

Гомо генат

П име ельная к овь

0,15

0,08

0,08

0,20

0,20

0,20

Таблица 2

Опухание сустава / мм/

Таблица 3

Сое инение.А+ Ин омета ин

Конт аль

Ин омета ин

68.

435

51

365

Соединение по примеру синтеза 1 назначали мышам перорально в дозах до 300 мг/кг и интраперитонально в дозах вплоть до 100 мг/кг, Не наблюдалось ни случаев гибели, ни серьезных вредных эффектов.

Преимущество полученных соединений состоит в том, что (й)-форма энантиомера известных гидроксаматов разлагается быстрее, чем (8)-форма, в то время как в случае энантиомеров производных N-oxc o es формулы t данного изобретения и (Я)- и ($)форма обладает увеличенным сроком жизни.

Увеличение устойчивости (R)-знантиомера приводит к экономическому эффекту, вытекающему из возможности получать не индивидуальный энантиомер, и использовать не индивидуальный энантиомер, а рацемат, который содержит 50 реактивного энантиомера.

Соединение формулы I относится к группе" соединений с низкой токсичностью, (56) EP l4 0299761, кл. С 07 С 259/06, 1979.

2002738 срормула изобретения

Составитель М.Меркулова

Редактор Т;Никольская Техред M.Mîðãåíòàë Корректор М. Ткач. Тираж Подписное

НПО "Поиск" Роспатента

113035, Москва, Ж-36, Рауеская наб., 4/S

Заказ 32