Биологически активный кисломолочный продукт "ацидолакт- наринэ" и способ его получения

Биологически активный кисломолочный продукт "ацидолакт- наринэ" и способ его получения

Реферат

 

Использование: в молочной промышленности при производстве кисломолочных продуктов. Сущность изобретения: биологически активный кисломолочный продукт содержит, мас. %: белки 0,35 - 34,0; жиры 0,05 - 36,00; углеводы 1,5 - 70,0; органические кислоты ( в пересчете на молочную кислоту ) 0,6 -56,0; витамины 0,95 - 15,90 мг на 100 мг продукта; вода 4,0-94,6; в 1 г продукта 10⁶-10⁹ симбиозных микроорганизмов вида Lactobacterium acidorhilum по меньшей мере одного штамма группы Ер-2 со штаммом N. V. Ep - 317/402, при этом соотношение указанных штаммов составляет 1:(1 - 4) соответственно. Кислотность продукта составляет 60-280°T. Биологически активный кисломолочный продукт получают путем термообработки при температуре молока 95 -140°С, после чего его охлаждают до температуры заквашивания, вносят микроорганизмы вида L. acidophilum, в качестве которых используют по меньшей мере один штамм группы Ер-2 и штамм N. V. Ер 317/402, при этом штаммы группы Ер-2 берут в количестве, обеспечивающем соотношение к количеству штамма N. V. Ер 317/402, равное 1:(1 - 4) соответственно. После внесения в молоко указанных микроорганизмов осуществляют сквашивание до кислотности, равной от 60 до 280° Т. 2 с. и 10 з.п. ф-лы.

Изобретение относится к молочной промышленности, а именно к биологически активному кисломолочному продукту "Ацидолакт-Наринэ" и способу его получения, и может быть также применено в медицинской и ветеринарной практике в качестве лечебно-профилактического препарата.

Во всех странах мира из молока различных животных готовят кисломолочные продукты, которые различаются не только происхождением молока (коровье, овечье, кобылье, козье и другое), но и способами изготовления, органолептическими свойствами, химическим составом и спонтанной микрофлорой.

Возбудителями молочнокислого брожения является в основном симбиоз молочнокислых бактерией (таких как (Lactobacterium bulgaricum, Streptococcus thermophilus, thermobacterium bulfaricum) и, возможно, дрожжей. Общим и характерным для всех кисломолочных продуктов является их приятный вкус и легкая удобоваримость. Кисломолочные продукты способствуют лучшему перевариванию и усвоению составных частей пищи. Эти продукты обладают высокой калорийностью, диетическими и лечебными свойствами при различных заболеваниях неинфекционной и инфекционной природы.

Известно, что ацидофильный тип молочнокислых бактерий сравнительно с другими молочнокислыми бактериями лучше на более длительный срок приживаются в толстом кишечнике человека. При этом высокая биологическая активность ацидофильной молочнокислой палочки связана с ее способностью продуцировать значительное количество антимикробных веществ, являющихся безвредными для человека и детей грудного возраста.

Молочнокислый продукт, приготовленный на ацидофильной молочнокислой палочке, обладает высокими питательными, лечебными свойствами и, кроме того, является стимулятором не только желудочной секреции, но и вообще моторно-секреторной функции всего желудочно-кишечного тракта.

Сквашенный продукт содержит микроорганизмы вида Lactobacretium acidophilum в количестве 10⁷-10⁸ бактерий в 1 г продукта, белок 2,8 мас.%, жиры 3,5 мас.%, воду 88,5%, незаменимые аминокислоты в количестве 1173 мг в 1 л (при коэффициенте пересчета 6,38), например валик (157), изолейцин (156), лейцин (267), лизин (215), метионин (71), треонин (126), триптофан (41), фенилаланин (140), заменимые аминокислоты, например аланин (80), аргинин (100), аспарагиновая кислота (179), гистидин (74), глицин (38), глутаминовая кислота (492), пролин (248), серин (153), тирозин (151), цистин (20), Известны ацидофильные бактерии, являющиеся продуцентами флавинов, объединенные в группу, названную Eр-2, и относящиеся к виду Lactobacterium acidophilum, например штамм N 317/381, 317/393,317/401 или 317/389 (Ерзинкян Л. А. Биологические особенности некоторых рас молочнокислых бактерий. Ереван: АН Армянской республики, 1971, с.79-96, 172).

Бактерии группы Lactobacterium acidophilum - микроаэрофильны, грамположительны, гомоферментативны, неподвижны, это зернистые и незернистые аспорогенные бактерии размерами (2-10) х x(0,7-0,8) мкм.

Клетки расположены одиночно в короткие или длинные цепочки, нитратов не редуцируют, индол и скатол не образуют, желатину не разжижают. Гемолитической активностью не обладают. Сбраживают лактозу, глюкозу, сахарозу, фруктозу, маннозу, левулезу, галактозу, мальтозу, рафинозу, крахмал, декстрин, сорбит, маннит, дульцит. Не сбраживают инозит. На элективных агаризованных питательных средах в трубках Бурри и чашках Петри они образуют глубинные колонии, мелкие, редко гладкие (S-формы), чаще всего в виде клубка перепутанных нитей (R-формы). Минимальная температура роста свыше 20^оС, оптимальная - 35-39^оС, летальная - 68-70^оС. Максимум кислотообразования в молоке 300-360^оT, фенолоустойчивость в молоке 0,5%, фталазоустойчивость 0,9-1,0%, синтомициноустойчивость 0,003%.

Микроорганизмы вида Lactobacterium acidophilum штаммы группы Ер-2 способы продуцировать значительное количество безвредных для человека и особенно для детского организма антимикробных веществ, подавляющих рост и развитие грамположительных (Staphilococcus aureus) и грамотрицательных (Escherigia coli 113) бактерий, в том числе всех без исключения бактерий возбудителей дизентерии и дизентериеподобных заболеваний. В зависимости от температуры сквашивания и количества вносимой закваски время свертывания молока колеблется в пределах 4-8 ч.

На основе указанного ацидофильного сквашивания молока созданы специальные продукты для смешанного и искусственного вскармливания здоровых детей, а также недоношенных детей с явлениями гипотрофии, при заболеваниях желудочно-кишечного тракта. Для изготовления таких продуктов используют штаммы Lactobacilum acidophilum К₁, К₅, К₁₀, коровье молоко, растительное масло, рафинированный сахар. Полученные продукты обогащают витаминами А, D₂, Е, С, В₆, РР.

Используемые штаммы К₁, К₅, К₁₀ устойчивы к фенолу, имеют повышенную антибиотическую активность по отношению к бактериям группы кишечной палочки, в том числе к патогенным микроорганизмам. Большое значение имеет их физиологичность к детскому организму (Производство детских молочных продуктов. Легкая и пищевая промышленность, 1982, с.67).

Такой известный кисломолочный продукт характеризуется содержанием следующих компонентов, мас.%: белок 1,8-1,9; жиры 3,5; углеводы 7,0; минеральные вещества 0,5; вода 87,1-87,2; витамины, мг %: А 0,06; D₂0,001; Е 10; С 5; В₁ 0,05; В₂ 0,07; В₆ 0,04; РР 0,4. Кислотность известного продукта составляет 50-70^оС, в 1 г такого продукта содержится 10⁷-10⁸ бактерий ацидофильных палочек. Энергетическая ценность продукта составляет 65 ккал (в 100 г продукта).

В процессе жизнедеятельности микроорганизмов вида Lactobacilum acidophilum К₁, К₅, К₁₀ происходит частичное расщепление белков молока до пептидов и свободных аминокислот. Содержание незаменимых аминокислот в белке кисломолочного продукта следующее, %: лизин 7,0; треонин 2,6; метионин 0,9; валин 5,5; фенилаланин 4,4; лейцин 14,8; изолейцин 3,2; гистидин 2,5; триптофан 2,1 (Использование ацидофильных смесей для вскармливания здоровых и больных детей 1-го жизни. М., 1980, с.4-7).

Несмотря на то, что указанным кисломолочный продукт сбалансирован по белковому, жирнокислотному, углеводному, витаминному и минеральному составам, что положительно влияет на биоциноз кишечника и иммунную реактивность ребенка, витамины, входящие в состав продукта, не продуцированы используемыми микроорганизмами в процессе кисломолочного брожения молока, а внесены, т.е. являются искусственными веществами.

Известно получение кисломолочных продуктов, обладающих высокими диетическими свойствами, легкой усвояемостью, лечебными свойствами, высокой калорийностью с помощью штамма бактерий Lactobacterium acidophilum N.V. Уп, 317/402. При получении кисломолочного продукта в цельное молоко при 28-40^oС вносят 1 мас. % названного штамма, при этом свертывание молока наступает через 5-8 ч (SU, А, 163573). Используемый штамм обладает медленной кислотообразующей способностью. Максимальное кислотообразование доходит до 360^оТ. Бактерии такого штамма способны продуцировать значительное количество безвредных для человека и особенно для детей антибиотических веществ, подавляющих рост и развитие как грамположительных, так и грамотрицательных бактерий, в том числе всех бактерий возбудителей острых форм желудочно-кишечных заболеваний. Зона подавления роста: Staphylococcus aureus (30-35 мм), Eschericgia cili (20-25 мм), Salmonella typhimyrium (20-23 мм), Klebsiella (20-22 мм).

Многолетние (36 лет) наблюдения показали отсутствие фаголизиса у указанных штаммов.

Штамм Lactobacterium acidophilum N. V. 317/402 получен путем направленной селекции в г. Ереване в 1949 г. Исходная культура выделена из организма здорового человека - фекалий новорожденного ребенка.

Методы хранения штамма: На жидкой питатель- ной среде при 5-8^оС Диофилизированная куль- тура при 5-8^оС На жидком азоте при -193^оС Условия роста: факультативный анаэроб.

Частота пересевов: каждые 1-1,5 мес.

Культурально-морфологические признаки Гомоферментативные, неподвижные грамположительные, микроаэрофильные, аспорогенные палочки (2-2) х (0,8-0,9) мкм. Клетки расположены одиночно или в виде коротких цепочек. Колонии на элективных агаризованных питательных средах - глубинные мелкие, чаще образуют клубки в виде перепутанных нитей (R-формы).

Физиологические, биохимические, генетические признаки.

Нитраты не редуцирует. Индол и скатол не образует. Желатин не разжижает. Не обладает гемолитической способностью. Сбраживает лактозу, глюкозу, сахарозу, фруктозу, маннозу, левулезу, галактозу, мальтозу, раффинозу, крахмал, декстрин, сорбит, маннит, дульцит. Не сбраживает инозит.

Устойчивость к фенолу в молоке - 0,5-0,6%; устойчивость к синтомицину - 0,001-0,003%.

В процессе культивирования штамм повышает содержание витаминов в молоке: фолиевой кислоты на 60-66%, тиамина на 50-72%, рибофлавина на 11-32%.

Продукт, получаемый путем сквашивания молока в присутствии микроорганизмов - штамма Lactobacterium acidophilum N,V, Ер 317/402 при кислотности 60-90^оТ, не обеспечивает получение человеком при употреблении продукта всего комплекса аминокислот, которые необходимы, поэтому он не может быть использован как полноценный заменитель грудного молока.

Известен способ получения кисломолочного продукта, заключающийся в обработке молока при 120^оС для его стерилизации, охлаждении молока до 30-34^оС и внесении в него 0,2-0,4 мас.% (в массе молока) микроорганизмов вида Lactobacterium acidophilum штаммы К₁, К₃Ш₂₄, 100 АШ, взятые в соотношении 2:2: 1 соответственно. Культивирование осуществляют при 30-34^оС в течение 18-34 ч до сквашивания молока до кислотности 180-210^оТ (SU, В, 1004471).

Полученный продукт может быть использован в качестве бактериального препарата - закваски с высокими селекционными свойствами для получения диетических и лечебных продуктов питания. Кроме того, получаемый кисломолочный продукт может непосредственно употребляться в пищу.

Полученный кисломолочный продукт характеризуется антогонистической активностью в отношении Шигелл Зонне 99,9%, Флекснера 100%, Сальмонелл 99,3%, Протеев 99,9%, а также обладает протеолитической активностью, составляющей 62,5% . Продукт устойчив к моноциклину, неомицину, канамицину, полимиксину, пенициллину, эритромицину, стрептомицину и тетрациклину. Кроме того, продукт обладает устойчивостью к высушиванию в пределах 45-58% живых клеток при сублимационной сушке и устойчивостью при хранении в пределах 80-90% живых клеток при хранении в сухом виде при комнатной температуре.

Однако этот способ не обеспечивает получения продуктов, используемых для лечения острых тяжелых форм желудочно-кишечных заболеваний, недоношенных детей и больных всех возрастов.

В основу предлагаемого изобретения положена задача путем создания условий для образования комплекса витаминов групп В, РР, Е и антибиотических веществ широкого спектра действия, физиологичных для организма человека, в процессе получения биологически активного "Ацидолакт - Наринэ" создать способ, обеспечивающий придание целевому продукту свойств лечебного и питательного продукта.

Для этого биологически активный кисломолочный продукт "Ацидолакт - Наринэ", включающий белки, жиры, углеводы, органические кислоты, витамины, воду и микроорганизмы молочнокислого брожения вида Lactobacterium acudophilum, содержат в качестве микроорганизмов молочнокислого брожения вида Lactibacterium acidophilum симбиозные микроорганизмы по меньшей мере одного из штаммов группы Eр-2 со штаммом N.V. Ep 317/402, взятые в соотношении 1: (1-4) соответственно, в количестве 10⁶-10⁹ симбиозных микроорганизмов в 1 г продукта, указанные компоненты имеют следующее соотношение, мас.%: Белки 0,35-34,0 Жиры 0,05-36,00 Углеводы 1,5-70 Органические кислоты (в пересчете на молоч- ную кислоту) 0,6-56,0 Витамины в 100 г 0,95-15,9 Вода 3,7-94,6 имеет кислотность 60-28^оТ, энергетическую ценность 20-540 ккал на 100 г продукта.

Указанный продукт как продукт питания пригоден для вскармливания детей с первых дней жизни вместо женского молока и, кроме того, может использоваться как лекарственное средство при острых, тяжелых формах заболевания желудочно-кишечного тракта, вызванных кишечной палочкой, Enterobacter 133, сальмонеллезной группами инфекций, протеями, гемолитической желтухе, при заболеваниях, вызванных золотистым стафилококком и условно-патогенной группой бактерий (Klebsiella, Psevdomonos aeroginosoc).

Ацидолакт приобретает более усиленные бактерицидные свойства, если он дополнительно содержит микроорганизмы вида Lactobacillus salivarius, например штамм 1588.

Кисломолочный продукт "Ацидолакт-Наринэ" содержит, мас.%: белки 1,8-4,0; жиры 0,005-6,00; углеводы 1,5-6,4, органические кислоты (в пересчете на молочную кислоту) 0,6-3,2; витамины 0,95-1,59 мг в 100 г; вода 84,2-91,90.

Кисломолочный продукт "Ацидолакт-Наринэ" указанного состава имеет кислотность 60-280^оТ и может быть пригоден в качестве продукта питания для детей старше 3-х месяцев и взрослых. Кроме того, продукт такого состава может быть использован в качестве закваски, а также лечебно-профилактического средства при заболеваниях желудочно-кишечного тракта.

Вариант выполнения предлагаемого изобретения состоит в том, что кисломолочный продукт "Ацитолакт-Наринэ" содержит, мас.%: белки 0,35-0,8; жиры 0,05-0,20; углеводы 1,5-3,8; органические кислоты (в пересчете на молочную кислоту) 0,70-3,15; витамины 1,18-1,545 мг в 100 г; вода 93,20-94,6, что позволяет его использовать для кормления больных недоношенных детей и лечения острых тяжелых форм заболеваний желудочно-кишечного тракта.

Целесообразно, чтобы кисломолочный продукт "Ацидолакт-Наринэ" содержал в составе белков следующие незаменимые аминокислоты, процентное отношение от суммы аминокислот в продукте: валин 10,4-10,77; изолейцин 9,6-9,7; лейцин 13,6-14,1; лизин 3,6-5,0; метионин 2,7-3,1; треонин 0,9-1,1; триптофан 0,5-0,7; фенилаланин 8,4-8,5.

"Ацидолакт-Наринэ" может содержать в качестве витаминов в 100 г продукта, мг: Витамин А Следы (0,050) Пантотеновая кислота 0,10-0,190 Витамин С 0,5-0,90 Биотин 0,002 Витамин Е (токоферол) Следы (0,2) Никотиновая кислота 0,040 Витамин РР (ниацин) 0,09-0,14 Витамины группы В, 0,218-0,315 в том числе: Витамин В₁ (тиамин) 0,04-0,07 Витамин В₂ (рибофлавин) 0,15-0,20 Витамин В₆ (пиридоксин) 0,25-0,04 Витамин В_с (фолиевая кислота) 0,003-0,005 Состав "Ацидолакт-Наринэ" может быть следующий, мас.%: Белки 24-34 Жиры 0,6-36 Углеводы 20,8-50,5 Органические кислоты (в пересчете на молоч- ную кислоту) 4,4-36,4 Вода 3,7-4,0 Витамины в 100 г продукта 9,5-15,9 мг Продукт указанного состав подлежит длительному хранению без изменения качества.

Состав кисломолочного продукта "Ацидолакт-Наринэ" может быть следующим, мас.%: Белки 6,0-12,9 Жиры 0,9-3,3 Углеводы 26,7-70,2 Органические кислоты (в пересчете на молоч- ную кислоту) 15,4-56 Витамины в 100 г 11,8-15,4 Вода 4,0 Кисломолочный продукт "Ацидолакт-Наринэ" получают способом, включающим термообработку молока при 95-140^оС, охлаждение его до температуры заквашивания, внесение микроорганизмов вида Lactobacterium acidophilum и сквашивание молока до получения целевого продукта, в качестве микроорганизмов вида Lactobacterium acidophilum используют по меньшей мере один известный штамм группы Eр-2 и штамм N.V. Ep 317/402, при этом штаммы группы Ер-2 используют в количестве, обеспечивающем соотношение 1:(1-4) к количеству штамма N. V. Ep 317/402, а сквашивание осуществляют до кислотности, равной 60-280^оТ.

Благодаря предлагаемому изобретению стало возможным получить продукт, обладающий питательными, профилактическими и лечебными свойствами, обусловленными наличием в готовом продукте витаминов группы В₁, В₂, В₃, В₆, В_с, РР и Е, а также антимикробных веществ стероидного типа, физиологичными для детей раннего возраста.

Целесообразно в сквашиваемое молоко дополнительно вводить микроорганизмы вида Lactobacillus salivarius, взятые в количестве, обеспечивающем соотношение к количеству микроорганизмов виды Lactobacterium acidophilum, равное 1: 1, что позволяет усиливать бактерицидные свойства получаемого продукта, расширяющие спектр его дополнительного использования в ветеринарии.

Вариант выполнения заявляемого изобретения состоит в том, что сквашенный продукт с кислотностью 60-280^oТ дополнительно сушат путем его сублимации до влажности не более 4 мас.%. что позволяет получить продукт, пригодный для хранения в условиях повышенных температур без изменения его биохимических свойств.

В соответствии с настоящим изобретение биологически активный кисломолочный продукт "Ацидолакт-Наринэ" содержит в основном следующие компоненты, мас.%: Белки 0,35-34,0 Жиры 0,05-36,00 Углеводы 1,5-70,0 Органические кислоты (в пересчете на молоч ную кислоту) 0,6-56 Вода 4,0-94,6 витамины группы В, витамин С, пантатеновая кислота, биотин, витамин Е (токоферол), никотиновая кислота, витамин РР 0,95-15,9 мг в 100 г, а также симбиозные микроорганизмы вида Lactibacterium acidophilum по меньшей мере одного из штаммов группу Eр-2 со штаммом N.V.Ер 317/402 в количестве 10⁶-10⁹ в 1 г предлагаемого продукта.

Жидкий продукт содержит также минеральные вещества, входящие в состав 100 г исходного продукта, мг: натрий 50; калий 146; кальций 121; магний 14; фосфор 90, железо 0,1.

"Ацидолакт-Наринэ", получаемый в соответствии с заявляемым изобретением, может быть образован из молока, например коровьего, козьего, молока буйволицы, которое подвергают термообработке, выбор значения температуры при этом зависит от климатических условий переработки молока, назначения вырабатываемого продукта и возраста потребителя, получающего продукт. Так, например при выработке ацидолакта, предназначенного в качестве заменителя грудного молока, термообработку осуществляют при 136-140^оС в течение 5-6 с; при выработке ацидолакта, ориентированных на людей остальных возрастных категорий, молоко подвергают обработке при 80-95^оС в течение 5-7 мин; при выработке кисломолочного продукта, используемого в качестве закваски или в медицинских целях, температуру обработки исходного молока выбирают в интервале 120-121^оС с выдержкой при этой температуре в течение 19-20 мин. Затем термообработанное, т. е. обеззараженное молоко, охлаждают до температуры, при которой возможна направленная жизнедеятельность носимых молочнокислых культур, например до 28-40^оС.

В качестве молочнокислых культур микроорганизмов используют симбиоз известных штаммов Lactobacterium acidophilum группы Ер-2, взятых порознь или в любом сочетании друг с другом, с известным штаммом Lactobacterim acidophilum N.V. Ep 317/402. При этом штаммы группы Ер-2 используют в количестве, обеспечивающем соотношение к количеству штамма N.V. Ep 317/402, равное 1: (1-4) соответственно. При нарушении данного соотношения получаемый продукт имеет жидковатую консистенцию и отклонения в химическом составе, что отражается на его питательных и лечебных свойствах.

Благодаря осуществлению брожения в присутствии указанных микроорганизмов стало возможным получить продукт с богатым аминокислотным составом с превалированием их состава в сторону увеличения содержания незаменимых аминокислот как в процентном отношении к белку, так и в абсолютном их количестве.

Предлагаемый симбиоз известных микроорганизмов способен хорошо приживаться в желудочно-кишечном тракте человека и животных. Он адаптирован к высоким концентрациям фенола в молоке, ядохимикатам, химиотерапевтическим препаратам, антибиотикам, кроме того, этот симбиоз микроорганизмов способствует лечению заболеваний, вызванных грамположительными и грамотрицательными бактериями, возбудителями острых форм желудочно-кишечных заболеваний, так как они являются активными антагонистами условно-патогенных и патогенных микроорганизмов, Благодаря осуществлению молочнокислого брожения молока в присутствии симбиоза микроорганизмов подобранных штаммов получают продукт, способный подавлять рост и развитие в желудочно-кишечном тракте гнилостных болезнетворных микроорганизмов, при этом разрушаются токсичные продукты обмена веществ, синтезируются витамины B₁, В₂, В₃, В₆, В_с, РР и Е, а также безвредные нетоксичные антибиотические вещества широкого спектра действия, физиологичные для детского организма.

Кисломолочный продукт "Ацидолакт-Наринэ", содержащий заявляемый симбиоз микроорганизмов, как показали исследования, является индуктором интерферона типа и , а также способен повысить активность системы интеферон-NK.

По предлагаемому изобретению целесообразно вводить известные микроорганизмы вида Lactobscterium salivarius, например штамм 1588, в количестве, обеспечивающем соотношение к количеству микроорганизмов вида Lactobacterium acidophilum, равное 1: 1, что позволяет усиливать бактерицидные свойства получаемого продукта.

Бактерии этого вида грамположительны, гомоферментативны, неподвижны, зернистые и незернистые аспорогенные бактерии. Клетки расположены одиночно короткими или длинными цепочками, нитратов не редуцируют, индол, скатол не образуют, желатин не разжижают, гемолитической активностью не обладают. Сбраживает: галактозу, лактозу, мальтозу, маннит, сахарозу, эскулин, мелибиозу, рафинозу, рамнозу, сорбит. Предельное кислотообразование 230-260^оТ. Не образует газа из глюкозы, не растет при 15^оС. Оптимальная температура культивирования 39-40^оС.

Кисломолочный продукт "Ацидолакт-Наринэ", получаемый в указанных условиях, имеет кислотность, равную 60-280^оС. Для того, чтобы иметь возможность получать продукт, пригодный для питания и лечения детей грудного возраста при острых тяжелых формах заболевания желудочно-кишечного тракта, сквашивание осуществляют до кислотности равной 60-165^оС.

В целях получения концентрированного продукта, пригодного для использования в медицинских целях: in vitro и in vivo, сквашивание осуществляют до кислотности, равно 270-280^оС.

Ацидолакт, полученный в результате осуществления данного способа, содержит симбиозные микроорганизмы вида Lactobacterium acidophilum по меньшей мере одного штамма из группы Еp-2 со штаммом N.V. Ep 317/402 и, возможно, микроорганизмы вида Lactobacillus salivarius штамма 1588. Указанные микроорганизмы содержатся в количестве 10⁶-10⁹ на 1 г продукта.

По составу кисломолочный продукт "Ацидолакт-Наринэ", полученный в результате брожения в указанных условиях, содержит белки 1,8-4,0 мас.%, жиры 0,05-6,00 мас.%, углеводы 1,5-6,4 мас.%, органические кислоты (в пересчете на молочную кислоту) 0,6-3,2 мас.%. В 100 г продукта содержится витамин А в количестве от следов до 0,05 мг, витамины группы В 0,2180-0,3150 мг, а именно: витамин В₁ (тиамин (0,04-0,14 мг, витамин В₂ (рибофлавин) 0,15-0,2 мг, витамин В₆ (пиридоксин) 0,025-0,40 мг, витамин В_с (фолиевая кислота) 0,003-0,005 мг, витамин С 0,5-1,0 мг, пантотеновая кислота 0,100-0,2 мг, биотин 0,002 мг, витамин Е (токоферол) в количестве от следов до 0,2 мг, никотиновая кислота 0,040-0,047 мг, витамин РР 0,09-0,14 мкг, вода 84,2-91,9 мас.%, при этом содержание незаменимых аминокислот следующее, процентное отношение от суммы аминокислот в продукте: Валин 10,4-10,77 Изолейцин 9,6-9,7 Лейцин 13,6-14,1 Лизин 3,6-5,0 Метионин 2,7-3,1 Треонин 0,9-1,1 Триптофан 0,5-0,7 Фенилаланин 8,4-8,5 Содержание заменимых аминокислот может быть следующее, в зависимости от состава молока в процентном отношении от суммы аминокислот в продукте: Аланин 4,10-4,15 Аргинин 6,1-6,6 Аспарагиновая кислота 2,4-2,9 Гистидин 1,4-2,8 Цистин 0,2 Глутаминовая кислота 5,7-6,2 Пролин 11,2-11,8 Серин 2,7-2,9 Тирозин 11,0-11,1 Глицин 1,04-2,1 Предлагаемое изобретение предусматривает возможность дополнительной сушки сквашенного продукта с кислотностью 60-280^оТ путем сублимации до влажности не более 4 мас.%, что позволяет получить продукт, пригодный для продолжительного хранения в условиях повышенных температур без изменения его биохимических свойств, при этом продукт имеет следующий состав, мас.%: Белки 24-34 Жиры 0,6-36 Углеводы 20,6-50 Органические кислоты (в пересчете на молоч- ную кислоту) 4,4-36,4 Витамины в 100 г 9,5-15,9 Вода 3,7-4,0 Повышение влажности высушенного продукта (более 4 мас.%) не обеспечивает сохранности качества готового продукта.

Целесообразно перед высушиванием сквашенный продукт подвергать разделению в асептических условиях на жидкую и белковую фракции, каждую из которых возможно затем сушить порознь, что позволяет получать высокоантибактериальный концентр, пригодный к использованию в лечебных целях.

Для получения "Ацидолакт-Наринэ", пригодного для питания и лечения недоношенных и детей всех возрастов, необходимо сквашенный продукт подвергать разделению в асептических условиях с получением жидкой фракции, представляющей собой кисломолочный продукт состава, мас.%: Белки 0,35-0,8 Жиры 0,05-0,20 Углеводы 1,5-3,8 Органические кислоты (в пересчете на молоч- ную кислоту) 0,70-3,15 Витамины 1,18-1,54 мг/100 г Вода 93,2-94,6 Белковая фракция, остающаяся после отделения жидкой фракции, в основном имеет следующий состав, мас.%: Белки 5,5-11,0 Жиры 0,1-6,0 Углеводы 1,6-2,0 Органические кислоты (в пересчете на молоч- ную кислоту) 1,0-2,0 Витамины 1,2-1,56 мг/100 Вода 83,4-86,6 Таким образом, возможно получить продукт, предназначенный для использования в лечебных целях - в гинекологии, педиатрии и для лечения больных с заболеваниями желудочно-кишечного тракта. Для этого отделенную в асептических условиях жидкую фракцию подвергают сушке путем сублимации до влажности не более 4 мас.%. При этом получают порошкообразное вещество следующего состава, мас.%: Белки 7,7-12,9 Жиры 0,8-3,3 Углеводы 26,7-70,2 Органические кислоты (в пересчете на молоч- ную кислоту) 15,4-56,0 Витамины в 100 г 11,80-15,4 мг Вода 4 Полученный кисломолочный продукт "Ацидолакт-Наринэ" нетоксичен, не оказывает канцерогенного, мутагенного, аллергизирующего действия, является индуктором увеличения интерферонов и в организме и стимулирует систему интерферон-NK. Получаемый жидкий кисломолочный продукт "Ацидолакт-Наринэ" представляет собой в меру густую, слегка тягучую массу, имеющую чистый кисломолочный запах и вкус.

Состав получаемого продукта показан с помощью химического и микробиологического анализов.

Предлагаемый кисломолочный продукт "Ацидолакт-Наринэ" проявляет свойства, позволяющие использовать его для лечения острых тяжелых форм желудочно-кишечных заболеваний (дисбактериозов, сальмоноллезов, дизентерии, вульгарных поносов), гемолитической желтухи, омфалитов у новорожденных, в акушерско-гинекологической практике при лечении вульвовагинитов, гнойно-воспалительных заболеваний, для лечения уретритов, аллергии, заболеваний крови, печени, почек, атрофии и дистрофии у детей.

Продукт "Ацидолакт-Наринэ" содержит повышенное количество белка, поэтому рекомендуется для применения в рационе людей подвергающихся радиационному облучению, так как белки способствуют более быстрому выведению из организма радиоактивных нуклидов.

Лечебные свойства предлагаемого продукта обусловлены накоплением в нем продуктов метаболизма молочнокислых продуктов. Кроме выработки антибиотических веществ стероидного типа, продуцируются витамины группы В₁, В₂, В₃, В₆, В_с, РР и Е, физиологичные для детского организма. В процессе хранения происходит дальнейшее накопление антиботических веществ, что способствует повышению стойкости заявляемого продукта при хранении.

Многолетние испытания способа получения кисломолочного продукта "Ацидолакт-Наринэ" показали его стабильность в отношении производства продукта с неизменными качественными показателями по кислотности, составу аминокислот, содержанию витаминов.

Данный кисломолочный продукт был испытан на животных и применялся в клинике для испытания его активности в отношении лечения указанных заболеваний. Было проведено изучение влияния продукта на течение раневого процесса при местном его применении. Исследовали 24 кролика, породы шиншилла. Всем кроликам в области спинки наносили стандартные кожно-фасциальные раны размерами около 2 х 2,5 см (500 мм²), иссекали кожный лоскут с подлежащей клетчаткой и фасцией до мышечного слоя, зажимом Кохера раздавливали края раны с подлежащей мышцей. После гемостаза производили заражение кроликов внесением в рану 1 мл микробной взвеси, содержащей 1,5 млрд. микробных тел полирезистентного госпитального штамма золотистого стафилококка. Через 48 ч после заражения у животных развивались признаки выраженного гнойного воспаления. Все животные были разделены на три группы по 8 кроликов в каждой В первой (опытной) группе лечение животных проводилось предлагаемым кисломолочным продуктом. Для сравнения по второй группе кроликов лечение проводилось риванолом. Третью группу составили контрольные животные, которых не лечили. Лечение начинали на 3-ьи сутки после заражения кроликов. Указанные препараты применялись местно в виде обильно смоченных, рыхло уложенных тампонов и аппликаций на рану с последующим наложением асептических повязок. Животные контрольной группы содержали в идентичных условиях и подвергались ежедневным перевязкам с санацией раны и наложением асептических повязок.

Клинически течение раневого процесса контролировали на основании ряда критериев: характер и количество отделяемого, сроки купирования перифокальной воспалительной реакции, сроки некролиза, проявление грануляцией, эпителизации, сроки заживления ран. Параллельно проводились измерения площади раневой поверхности, цитологические, морфологические исследования биоптатов края и дна раны, бактериологическое исследование раневого отделяемого в динамике (до начала и по ходу лечения). Для определения наличия микробов в срезах окраску препаратов осуществляли по Грам-Вейгерту. Бактериологические исследования проводили с учетом степени и длительности высеваемости стафилококков из очага поражения. Пользовались следующей количественной характеристикой высеваемости указанных микроорганизмов: до 25 колоний на чашке Петри - единичный рост, до 70 колоний - скудный рост; до 200 колоний - обильный рост, больше 200 колоний - сплошной рост. Материал из гнойной раны брали прокаленной и остуженной стандартной петлей диаметром 3 мм, эмульгировали в 1 мл физиологического раствора, а затем высевали по 0,05 мл на чашки Петри с мясопептонным агаром. Посев инкубировали в термостате при 37^оС в течение 18-20 ч, после чего проводили подсчет выросших колоний стафилококка.

При сравнительном анализе течения раневого процесса во всех трех группах животных по основным клиническим показателям (см.таблицу) установлено, что в первой группе кроликов процессы некролиза, появления первых грануляций и эпителизации, купирование воспалительной реакции в ране наступает значительно раньше, чем в других группах, полное заживление ран в отмеченной группе наблюдается сравнительно быстрее (в среднем в 2 раза по сравнению с контролем).

Анализ результатов бактериологического исследования отделяемого гнойных ран у кроликов контрольной и двух опытных групп, леченных риванолом и заявляемым кисломолочным продуктом, показал высокую антибактериальную эффективность предлагаемого продукта.

Гистологические и гистохимические исследования динамики заживления ран показали, что у животных контрольной группы на пятые сутки в ране наблюдается выраженная бактериальная загрязненность на фоне резких воспалительных изменений в глубоких слоях. К 10 суткам воспалительные изменения с наличием обильной микрофлоры определяются в поверхностных и глубоких слоях раны. Встречаются очаги некроза, микроабсцессы в подкожной клетчатке, гнойная инфильтрация кожи с охватом участков сохранившегося эпидермиса и подкожной клетчатки краев раны. К 15 суткам по сравнению с предыдущим сроком имеет место сравнительное ослабление интенсивности воспалительного процесса и утончение зернисто-фибринозного слоя на поверхности раны. Новообразованный эпителий из краев раны тонким слоем наползает на грануляционную ткань. В поверхностных слоях грануляционной ткани, а также в подлежащих тканях определяется выраженная гнойная инфильтрация с наличие некротических изменений и возникновением очагов гнойного расплавления (микроабсцессы). Вокрруг выраженной капиллярной сети находятся круглоклеточные инфильтраты в основном лимфоплазмоцитарного характера, единичные макрофаги, фагоцитирующие лейкоциты.

Использование данного кисломолочного продукта значительно ускоряет репаративные процессы в ранах: так, на 5 сутки лечения отмечается заметное истончение зернисто-фибринозного слоя с уменьшением числа палочкоядерных лейкоцитов, купирование воспалительного процесса в предлежащих к ране тканях. Наблюдается сравнительное очищение полости раны от некротических участков и фибринозно-гнойных наложений с преобладанием серозного компонента в массе гноя. Наблюдается значительное разрастание грануляционной ткани.

На 10-15 сутки репаративные процессы в ране по сравнению с контролем выражены значительно сильнее. Так, к 15 суткам в большинстве случаев наблюдалось полное восстановление эпителиального покрова на поверхности раны с тенденцией утолщения и восстановления всех ее слоев. Поверхностный слой грануляционной ткани представлен тонковолокнистой соединительной тканью с сосочковыми выростами, а глубокий слой - грубоволокнистой фиброзной тканью. Имеет место дифференциация сосудов в артериолы и венулы.

Изучение рубцов всех трех групп животных показало, что последние в первой группе отличаются ровной эпителиальной выстилкой с восстановлением всех ее слоев, а в глубоких слоях - упорядоченным расположением тонких, нежных коллагеновых волокон, пучки которых имели горизонтальное расположение. У животных второй группы преобладает более грубая рубцовая ткань, местами с отсутствием эпителиального покрова и более хаотичным расположением коллагеновых волокон в фиброзной соединительной ткани. В третьей группе кроликов рубец представлен грубой фиброзной тканью, на поверхности которой отсутствуют элементы кожи, в более глубоких слоях соединительно-тканевые волокна имеют беспорядочное расположение, наблюдаются явления склероза, единичные очаги хронического воспаления в виде гранулем с наличием единичных стафилококков.

Таким образом, метаболиты молочнокислых бактерий заявленного симбиоза при местном их применении на модели гнойных ран в условиях эксперимента у кроликов способствуют быстрому очищению ран от некротических тканей и гноеродной микрофлоры, стимулируют процессы регенерации в ранах, сокращают сроки заживления ран, способствуя заживлению ран мягким эластическим рубцом.

Полученные данные показали целесообразность клинической апробации заявляемого кисломолочного продукта.

Предлагаемый продукт был применен в 1427 больных и здоровых носителей патогенных микроорганизмов. Каких-либо осложнений, связанных с их применением, не наблюдалось, что косвенно говорит о том, что создание искусственных биоценозов с участием молочно-кислых бактерий не приводит к появлению их вирулентных мутантов, способных вызвать гнойную патологию.

Больные, страдающие гнойно-воспалительными заболеваниями мочевого пузыря и уретры, получали лечение данным кисломолочным продуктом, имеющим кислотность 165^оТ.

Методика лечения заключалась в следующем: молочнокислый продукт "Ацидолакт-Наринэ", содержащий не более 0,1 мас.% жира, вводили в полость мочевого пузыря (через катетер Петцера или Нелайона), а также непосредственно в уретру. Время экспозиции составляло 60-120 мин, температура продукта 37-40^оС. Больным с надлобковы