Производные 5-(замещенный амино)-1,2,4-триазол-[1,5а]- пиримидина, их фармацевтически приемлемые кислотно- аддитивные соли, фармацевтическая композиция, обладающая кардиотоническим и коронарорасширяющим действием, и способ кардиотонического и/или коронарорасширяющегося воздействия на сердце

Производные 5-(замещенный амино)-1,2,4-триазол-[1,5а]- пиримидина, их фармацевтически приемлемые кислотно- аддитивные соли, фармацевтическая композиция, обладающая кардиотоническим и коронарорасширяющим действием, и способ кардиотонического и/или коронарорасширяющегося воздействия на сердце

Реферат

 

Изобретение относится к производным 5-(замещенный амино)-1,2,4-триазоло[1,5-a] пиримидина согласно настоящее изобретению соответствуют общей формуле (I): , куда относятся и их фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли, у которых - Q - пиперидинил, морфолиногруппа, пиперазиногруппа, при необходимости, замещенный C_1-4-алкилом или группа формулы S(0)pR³, где p - 0, 1 или 2, и R³ - прямой или разветвленный C_1-8 алкил, C_2-6 алкенил или фенил-(C_1-4-алкил), причем последний, возможно, несет один или более галоген- или нитро-заместителей; или группу форму NR⁴R⁵, где R⁴ и R⁵ каждый представляют водород, прямой или разветвленный C_1-10-алкил, C_2-6 алкенил, фенил-(C_1-4 алкил) или ди-(C_1-4 алкил)-амино-(C_1-6 алкил); R¹ и R² каждый представляют водород или прямой или разветвленный C_1-4 алкил, или R¹ и R² вместе образуют группу формулы (CH₂)_n-Y-(CH₂)_m, где Y - CH₂ - группа, атом серы или группа формулы NR⁶, где R⁶ обозначает фенил (C_1-4 алкил), n, и m каждый представляет O, 1, 2, 3, 4 или 5; Z - группа формулы NR⁷R⁸, где R⁷ и R⁸ каждый представляет водород, C_2-6 алкенил, C_3-8 циклоалкил, адамантил или фенил-(C_1-4 алкил), причем последний, возможно, несет один или более заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, гидрокси, C_1-4 алкила, C_1-4 алкокси, амино и нитро; (C_1-4 алкил)-амино-(C_1-6 алкил), ди-(C_1-4 алкил)-амино-(C_1-6 алкил) или C_1-6-алкил, причем последний может быть замещен гидрокси, амино, карбокси, морфолин-карбонилом, 4-(2-гэдроксиэтил)-пиперазин-1-ил-карбонилом, (C_1-4 алкокси)-карбонилом или 5- или 6-членная насыщенная или ненасыщенная гетероциклическая группа, содержащую один или более атомов азота и/или кислорода, и, возможно, сжатую в бензольное кольцо; или R⁷ к R⁸ вместе образуют группу формулы (CH₂)_j-W-(CH)₂K, где j и K каждый представляют 1, 2 или 3, и W - кислород, CH₂, CHOH или группу формулы NR¹⁰, в которой R¹⁰ - водород, C_1-4 алкоксикарбонил или C_1-4 алкил, причем последний, возможно, несет заместитель, выбранный из группы, состоящей из гидрокси и фенила; или группа формулы SR⁹, в которой R⁹ - это C_1-4 алкил, замещенный (C_1-4 алкокси)-карбонилом, при условии, что если Q - это водород или группа формулы S(0)рR³, то R¹ и R² - не водород или не C_1-4 алкил, и обладают ценными биологическими свойствами. Они проявляют первично позитивное инотропное и противоангинное действие, которое дополняется резким (которое далее становится более мягким) противовоспалительным, ингибирующим секрецию желчи и желудочной кислоты, спазмолитическим и обезболивающим свойствами. Изобретение также относится к фармацевтической композиции, способу кардиотонического и/или коронарорасширяющего воздействия на сердце. 3 с. и 11 з.п. ф-лы. 10 табл.

Изобретение касается новых производных 5-(замещенный амино)-1,2,4-триазоло[1,5-а] пиримидина, способа их получения, фармацевтических композиций, включающих эти соединения, а также использования указанных производных 5-(замещенный амино)-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидина для лечения заболеваний. Известные соединения аналогичной структуры проявляют фосфодиестеразингибирующий эффект (1).

Задачей изобретения является создание новых производных 5-(замещенный амино)-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидина, обладающих ценными фармакологическими свойствами, на основании которых могут быть созданы новые фармацевтические композиции, которые могут быть использованы в способе кардиотонического и/или коронарорасширяющего воздействия на сердце.

Поставленная задача решается новыми производными 5-(замещенный амино)-1,2,4-триазоло[1,5-a]пиримидина общей формулы (I) и их фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли, где a) R¹ и R² вместе являются группой -(CH₂)_k, где k 3 12 и в этом случае Q является пиперидинильной группой, морфолиногруппой или пиперазино-группой, при необходимости, замещенной C_1-4 алкилом, группа формулы S(O)_pR³, где p 0, 1 или 2 R₃- C_1-8 алкил, C_2-6 алкенил, 2-NO₂-4-CF₃-фенил или фенил - (C_1-4 алкил), при необходимости, замещенная галогеном или нитрогруппой, или NR₄R₅, R₄ и R₅ независимо друг от друга являются водородом, C_1-10 алкилом, C_2-6 алкенилом, фенил -C_1-4 алкилом, или ди(C_1-4 алкил) амино- (C_1-4 алкил)группой, Z-NR₇R₈ группа, где R₇ и R₈ независимо друг от друга являются водородом, C_1-7 алкилом, при необходимости, замещенным гидроксилом, аминокарбокси или C_1-4 алкоксикарбонилгруппой, C_2-6 алкенилом, C_3-8-циклоалкилом, 1-адамантилом, (C_1-4алкил)-амино или ди(C_1-4алкил)амино- (C_1-4 алкил)-группой, фенил-(C_1-4 алкил) группой, при необходимости, замещенной в фенильном кольце, одним или двумя галогенами или C_1-4 алкокси или C_1-4 алкильной группой, C_1-4 алкильной группой, замещенной пирролидино или пиперидино-группой, морфолином, пиперазином или 1-2- или 3-индомильной группой или морфолидокарбонильной группой или пиперазидокарбонильной группой, содержащей гидрокси -C_1-4 алкильной группой в 4- положении, или R₇ и R₈ вместе с соседним азотом пиперидо- или 4-гидроксипиперидино группы, морфолиногруппа или пиперазино-группа, при необходимости, замещенная в положении 4-фенил-C_1-4 алкильной группой или C_1-4 алкоксикарбонильной группой или C_1-4 алкильной группой, при необходимости, содержащей гидроксигруппу, или является R₉ группой, где R₉ является C_1-4 алкилом, при необходимости, замещенным C_1-4 алкокси-карбонилом, или в) R₁ и R₂ вместе образуют группу (CH₂)_n-S-(CH₂)_m, где n 0,1 или 2 и m 1,2 или 3 и в этом случае Q является морфолино-, SR₃ или NR₄R₅-группой, где R₃ является C_1-7 алкилом или фенил -C_1-4 алкилом, R₄ и R₅ является независимо друг от друга C_1-7, алкилом, Z является группой формулы NR⁷R⁸, где R⁷ и R⁸ независимо друг от друга является водородом, C_1-7 алкилом или C_1-4 алкилом, замещенным гидроксилом, морфолином или пиперазином, или с) R₁ и R₂ является вместе группой (CH₂)_n-N(R₆)-(CH₂)_m, где n и m независимо равны 1 или 2, и R₆ является фенил C_1-4 алкилом, и в этом случае Q является группой формулы SR₃, где R₃ является C_1-7 алкилом Z является группа формулы NR₇R₈, где R₇ и R₈ независимо друг от друга являются водородом, C_1-7 алкилом, или C_1-4 алкилом, морфолино или пиперазино-группой, или d) R₁ является водородом, и R₂ является C_1-7 алкилом, и в этом случае Q является пиперидинил-морфолин или пиперазинной группой, Z является группой формулы NR₇R₈, где R₇ и R₈ независимо друг от друга является C_1-7, алкильной группой, при необходимости, замещенной гидроксилом, или фенил (C_1-4 алкил) или R₇ и R₈ вместе с соседним азотом являются морфолино или пиперазиногруппой.

Соединения по изобретению обладают ценными биологическими свойствами. Они проявляют первично позитивное инотропное и противоангинное действие, которое дополняется резким (которое далее становится более мягким) противовоспалительным, ингибирующим секрецию желчи и желудочной кислоты, спазмолитическим и обезболивающим свойствами.

Выражение "алкил" (алкильная группа), используемое в описании, относится к прямому или разветвленному насыщенному алифатическому углеводороду, содержащему указанное количество атомов углерода (например, метил, этил, третичный бутил, н-бутил и т.д.).

Выражение "алкенил" (алкенильная группа) относится к прямому или разветвленному алифатическому углеводороду, включающему одну двойную связь (например, винил, аллил, 2-пропенил, метил-аллил, бутенил и т.д.).

Выражение "фенил-(C_1-4 алкил)" относится к C_1-4 алкилам, у которых по меньшей мере один атом водорода заменен на фенил (например, бензил, 1-фенилэтил, 2-фенилэтил и т.д.).

"Алкиламиноалкил" и "диалкиламиноалкил" означают алкилы, содержащие указанное количество атомов углерода (например, метиламинометил, метиламиноэтил, этиламиноизопропил, диметиламинопропил, диметиламиноэтил, диизопропиламиноэтил и т.д.).

Выражение "C_1-4 алкоксикарбонил" может относиться, например, к метоксикарбонилу, этоксикарбонилу, бутоксикарбонилу, и т.д.

Выражение "C_3-8 циклоалкильная группа" может относиться, например, к циклопропилу, циклобутилу, циклопентилу, циклогексилу и т.д.

Выражение "атом галогена" охватывает фтор, хлор, бром и иод.

Фармацевтически приемлемые соли соединения общей формулы (I) могут быть образованы с помощью неорганических или органических кислот. В качестве примеров фармацевтически приемлемых кислотно-аддитивных солей можно упомянуть гидрохлориды, гидробромиды, сульфаты, цитраты, малеаты, фумараты и этансульфонаты.

Предпочтительными представителями соединений общей формулы (I) являются следующие производные: 2-(метилтио)-5-[N-(3-морфолинпропил)] -амино-6,7,8,9- тетрагидро-1,2,4-триазол[1,5-b]хиназолин, 5-(диэтиламино)-7-метил-2-морфолин-1,2,4-триазол[1,5-a]пиримидин, 2-(1-метилэтилтио)-5[N-(3-морфолинпропил)] -амино-6,7,8,9- тетрагидро-1,2,4-триазол[5,1-b]хиназолин, 2-(этилтио)-5-[N-(2-морфолинэтил)] амино-6,7,8,9-тетрагидро-1,2,4-триазол[5,1-b]хиназолин, 2-(метилтио)-5[N-(2-морфолинэтил)] амино-6,7,8,9,10,11,12,13,14,15- декагидро-циклододека[d] -1,2,4-триазол-[1,5-a] -пиримидин, а также их фармацевтически приемлемые соли.

Кроме того изобретение относится к способу получения производных 5-(замещенный амино)-1,2,4-триазол[1,5-a] пиримидина общей формулы (I) и их фармацевтически приемлемых солей, который заключается во взаимодействии производного триазола общей формулы (II) в которой: Q, R₁ и R₂ такие, как указано выше, L представляет остаточную группу, предпочтительно, галоген, O-триалкилсилил, O-алкилсульфонил или O-арилсульфонил, с амином общей формулы (III) H Z, в которой Z такой как указано выше, и, если требуется, превращение соединения общей формулы (I) в его фармацевтически приемлемую кислотно-аддитивную соль, или освобождение основания общей формулы (I) из его кислотно-аддитивной соли, или превращение одной кислотно-аддитивной соли основания общей формулы (I) в другую кислотно-аддитивную соль.

Если реакцию проводят с амином, т.е. с соединением общей формулы (III), в которой Z группа формулы NR⁷R⁸, то избыток амина может служить растворителем. В этом случае используют по меньшей мере 2 моль амина на моль производного триазола общей формулы (II). При использовании амина в эквимолярных количествах, или при реакции с тиолом общей формулы (III), реакцию осуществляют в растворителе. Соединения общей формулы (II), в которой L водород, O-алкилсульфонил или O-арилсульфонил, реагируют с соединениями общей формулы (III) в протоны, полярно апротонном или неполярно апротонном растворителе, в присутствии связывающего кислоту агента. В качестве протонного растворителя предпочтительно используют алифатические спирты или диолы, в качестве полярного апротонного растворителя предпочтительно используют ацетонитрил, диметилформамид или тетрагидрофуран, и в качестве неполярного апротонного растворителя предпочтительно используют бензол или его гомолог, 1,2-дихлорэтан, хлорбензол или хлороформ. В качестве основного, связывающего кислоту, агента предпочтительно используют третичное основание, например, триэтиламин.

Когда осуществляют взаимодействие соединения общей формулы (II), в которой L-O-триалкилсилил, с эквимолярным количеством амина или с тиолом общей формулы (III), в которой Z обозначает группу формулы SR⁹, эту реакцию предпочтительно осуществляют в полярном апротонном или неполярном апротонном растворителе. В качестве полярного апротонного растворителя предпочтительно используют ацетонитрил, диметилформамид или тетрагидрофуран, а в качестве неполярного апротонного растворителя предпочтительно используют бензол или его гомолог, -1,2-дихлорэтан или хлороформ. Также можно осуществить процесс посредством реакции O-триалкилсилилового эфира общей формулы (II) in situ, т. е. непосредственно в той реакционной смеси, в которой он образовался, с амином или тиолом общей формулы (III). В этом случае избыток силилирующего агента для получения соединений общей формулы (III) может служить растворителем.

Реакцию можно проводить при любой температуре между комнатной и температурой кипения растворителя или амина, используемого в избытке. Предпочтительно, ее проводят между 30 и 80^oC.

Полученные таким образом соединения общей формулы (I) могут отделяться от реакционной смеси посредством известных методов. Они кристаллизуются из реакционной смеси либо непосредственно, либо при добавлении некоторого количества воды, и могут быть отфильтрованы. Если они отделяются в виде масла, они могут экстрагироваться несмешиваемым с водой органическим растворителем, выпариваться и очищаться посредством известных методов.

Соединения общей формулы (II), используемые в качестве исходных веществ, могут быть получены из известных соединений общей формулы (IV) путем превращения оксо-группы соединения общей формулы (IV) в остаточную группу, предпочтительно, неорганическим галогенидом, силилирующим агентом, алкилом или галогенидом арилсульфонила.

Амины и тиолы общей формулы (III) являются коммерческими продуктами.

Соединения общей формулы (I) обладают ценными, положительным инотропным и противоангинным, действиями. Эти активности дополняются резкими противовоспалительными, ингибирующими секрецию желчи и желудочной кислоты, действиями, которые далее становятся более мягкими, а также спазмолитическим и обезболивающим действием.

Активность соединений общей формулы (I) демонстрируют следующие эксперименты: 1. Позитивное инотропное действие на анестезированной кошке.

Эксперименты проводили на котах и кошках, анестезированных хлоралозоуретаном (40/300 мг/кг в объеме 1 мл/кг). Полиэтиленовый катетер вводили в левый желудочек через подключичную артерию. Инотропную активность измеряли в виде первого производного времени от кривой давления в левом желудочке (dP/dT_max). Кровяное давление измеряли с помощью другого катетера, вводившегося из левой бедренной артерии в верхнюю треть брюшной артерии. Для обоих измерений давлений использовали датчик Statham P23Db и усилитель HSE (Hugo Sachs Electronics). Полученные сигналы регистрировали полиграфом Lineacorder Mark VII типа WR 3101. Испытываемые соединения вводили через канюлю в бедренной вене.

Действие соединений характеризуется позитивной инотропной реакцией (dP/dT_max), представленной в табл. 1.

Из табл. 1 можно установить, что соединения общей формулы (I) повышают значения dP/dT_max зависимыми от дозировки образом, причем эти значения характеризуют силу мышечных сокращений. В то же время, в случае обоих ссылочных соединений эффект не превышает 50% даже в самой высокой дозе (10 мг/кг). С учетом равных доз, соединения по изобретению являются в 1,5 3,5 раз более эффективными, чем ссылочные соединения.

2. Позитивное инотропное действие на морских свинках Эксперименты проводили по методу Alousi [Alousi A.A. etal. J. Cardiovasc. Pharmacol. 5, 804-811 (1983)] Животных весом 400-600 г оглушали ударом по голове и обескровливали. Вырезали сердце, удаляли правое предсердие, которое помещали в модифицированный раствор Tyrode при 37^oC. Его загружали предварительно в количестве 2,1 г, и стимулировали электрическим разрядом частотой 2 Гц прямоугольными импульсами длительностью 5 миллисек. Полиграфом записывали первое производное силы сокращений изолированного органа от времени (dP/dT) и частота сокращения предсердия. Из полученных таким путем данных рассчитывали изменения в процентах. Результаты показаны в табл. 2 Позитивное инотропное действие соединений по изобретению значительно превышает таковое у известных соединений. Кроме того соединения по изобретению являются менее тахикардическими.

3. а) Противостенокардический эффект на крысах Эксперименты проводили по методу Leitold [Leitold, M. und Laufen, H. Arzneimittel Forschung 33, 1117-1121 (1983)] Крыс, весом 180-220 г, обездвиживали хлоралоз-уретаном (70/700 мг/кг i. p. ). ЭКГ регистрировали с помощью игольчатых электродов стандарта II. Экспериментальную сердечную недостаточность вызывали вазапрессином. (1 NE/кг i. v. ). Высота T-пика на ЭКГ измерялась до и после введения вазопрессина как в контрольной, так и обработанной группе. Испытываемые соединения вводили внутривенно за 2 мины перед обработкой вазопрессином. Значения ЕД₅₀ этих соединений показаны в табл. 3.

Из табл. 3 можно видеть, что испытываемые соединения превосходят ссылочные соединения, так они в 3 4 раза эффективнее фениламина.

3. б) Испытание по коронарному потоку у собаки.

Эксперименты проводили на беспородных собаках обоего пола весом от 10 до 26 кг. Испытываемые соединения вводили внутривенно в дозах 1-5 10 мг/кг веса.

Животных обездвиживали пентобарбиталом (Нембутал, Serva) и подключали к аппарату искусственного дыхания (тип RO-5). В открытой грудной клетке собаки, кровяной поток в левой передней нисходящей сердечной артерии измеряли непрерывно электромагнитным измерителем потока (Codard-Statham) (тип: SP 2202). Среднее артериальное кровяное давление записывали на каротисе (carotis) с эталоном Стетхэма (тип: p23Db). За изменениями силы сердечных сокращений следили изометрически с использованием микродинамометра (тип: Experimetria, 50 01), прикрепленного к передней стенке левого желудочка. Данные о силе сердечных сокращений были собраны от первого производного, чтобы следить за изменениями скорости сокращений и расслаблений. Данные записывались аппаратом Медикор типа CH-61. Изменения в тканевом потоке в левое передней сердечной стенке записывали с помощью так называемого метода термоочистки (Golenhofen 1964) с аппаратом прямой записи (Radelkis). Также наблюдали изменение частоты пульса. Рассчитывали проводимость сердечной артерии (как соотношение среднего коронарного потока и среднего кровяного давления). Средние значения оценивали статистически с использованием теста Стьюдента, а также анализом регрессии и множественным t-тестом. Данные приведены в табл. 4.

¹⁾-N,N,-диэтил-5-метил-[1,2,4]триазол[1,5-a] пиримидин-7-амин.

Из вышеприведенных данных можно видеть, что испытываемые соединения продемонстрировали усиление коронарного потока и большую эффективность, чем у известных соединений.

4. Противовоспалительное действие (ингибирование каррагенового отека) Эксперименты проводили по методу Винтера [Winter, C.A. et al. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 111, 544-547 (1962)] на крысах весом 150 180 г. По 0,1 мл 1% -ной суспензии каррагена инъецировали подкожно в подошвенную область одной из задних лап. Крыс не кормили 12 ч, и давали вволю пить. За час перед обработкой испытываемым соединением животным вводили через рот воду в количестве 30 мл водопроводной воды на кг веса. Испытуемое соединение или соединение на носителе вводили в объеме 10 мл/кг, а через 1 ч применяли карраген. Объем обработанной лапы измеряли плетизмометром за 1 ч перед и через 3 ч после инъекции таким образом, чтобы перемещение жидкости, поднимающейся вследствие изменения объема, указывалось на миллиметровой шкале. Объем обработанной лапы сравнивали с таковым у контрольной группы. С помощью линии регрессии определяли дозу, приводящую к 30%-ному ингибированию (ID₃₀). Результаты показаны в табл. 5.

Из табл. 5 можно видеть, что одно из испытываемых соединений в 3 9 раз эффективнее, чем ссылочные соединения, а три других производных в 1,5 -2,5 раз эффективнее парацетамола, и еще три соединения сравнимы по своей эффективности с парацетамолом.

5. Эффект ограничения активности Испытания осуществляли по методу Borsy и др. (Arch. Int. Pharmacodyn) 124, 1-2 (1960). Группы по три мыши в каждой орально обрабатывали различными дозами испытываемого соединения. Затем тестовые животные помещались в оборудование Dews. в этом оборудовании подсчитывали количество прерываний инфракрасного луча за 30 мин. Ингибирование подвижности выражается в процентах от значений, полученных с контрольными животными. Известное сравнительное соединение (Мепробамат) является неактивным в дозе 100 мг/кг.

Из табл. 6 может быть установлено, что эта активность испытываемых соединений превосходит таковую ссылочных соединений.

6. Наркоз-потенциирующая активность Группы, состоящие из шести мышей каждая, орально обрабатывали исследуемым соединением. Через час, внутривенно инъекцировали гексабарбитал [5-(1-циклогексенил)-1,5-диметилбарбитуровая кислота] в дозе 40 мг/кг. Контрольную группу обрабатывали только гексабарбиталом для усыпления. Длительность сна регистрировали. Если длительность сна животного превышала среднее значение у контрольной группы в 2,5 раза, то это рассматривалось как положительная реакция. Частоту положительной реакции выражают в виде процентов от значения, полученного для контрольных животных. Известное сравнительное соединение (мепробамат) неактивно в дозе 100 мг/кг.

Из данных, приведенных в табл.7, можно установить, что эта активность испытываемых соединений превосходит таковую известных соединений.

7. Спазмолитическое действие у мышей.

Исследования проводили согласно усовершенствованному методу Benzinger и Hane [Arch. Int. Pharmacodyn. 167, 245-249 (1959)] Мыши обоего пола (линии ПМР1, вес тела 20 25 г), орально обрабатывали испытываемыми соединениями. Через час после введения, пентетразол (6,7,8,9-тетрагидро-5H-тетразолоазепин) вводили внутрибрюшинно, в дозе 125 мг/кг. Тонические экстензорные спазмы задних лап регистрировали. В качестве сравнительного соединения использовали 3,5,5-три-метил-оксазолидин-2,4-дион (триметадион). Результаты представлены в табл. 8.

Из данных табл. 8 можно установить, что активность испытываемых соединений превосходит таковую у соединения-сравнения.

8. Испытание на секрецию желудочной кислоты.

Испытания проводили по методу Шей [Shay, H. и др. Gastroenterology 5, 45 (1945)] Крыс обоего пола (линии Вистар, весом 180 240 г) не кормили 48 ч. В день опыта пилорус животного перевязывали под наркозом. Испытываемые соединения вводили орально за 3 ч перед этой операцией. Через 4 ч после операции животных обезболивали и удаляли желудок, его содержимое центрифугировали и титрованием определяли содержание свободной кислоты, в присутствии реагента Тепфера (Topfer). Ингибирование рассчитывали в процентах по отношению к контролю. Результаты показаны в табл. 9.

Из данных табл. 9 можно установить, что испытываемые соединения более эффективны, чем сравнительные соединения.

9. Исследование кардиотонической активности.

Измерения проводят согласно методу Лангендорфа, описанному ниже.

Мужские особи крыс линии Sprague-Dawley весом 200 250 г предварительно обрабатывают гепарином (2500 IU в 0,5 мл) и через 10 мин. их анестезируют пентобарбиталом натрия (нембутал, 40 мг/кг, i.p.) После открытия грудной клетки быстро удаляют сердце и помещают его в охлажденный льдом (+4^oC) раствора krebs henseleit (состав: NaCl 118 мМ/л, KCl 4,7 мМ/л, MgSO₄ 1,6 мМ/л, CaCl₂ 2,5 мМ/л, NaHCO₃ 24,88 мМ/л, KH₂PO₄ 1,18 мМ/л, глюкоза 11 мМ/л, ЭДТА 0,5 мМ, pH 7,4).

Канюлю аппарата Лангендорфа (Hugo Sachs Electronik, Март, Германия) присоединяют к аорте и канюлю (с сердцем) присоединяют к аппарату.

Сердце перфузируют нагретым (37^oC) карбогенизированным (95% O₂, 5% CO₂) раствором krebs-henseleit с давлением перфузии до 60 мм рт.ст. После уравновешивания в течение 15 мин испытываемые соединения добавляют к перфузионному раствору в концентрации 10^-4 М/л и влияние соединений на сердечную функцию измеряют в течение 3 мин.

В нескольких случаях пониженные концентрации испытуемых соединений должны быть использованы для того, чтобы растворить испытуемый материал. Результаты подсчитывают как сумму процента изменений (область под кривой), измеренных в течение 3 мин в период наблюдения.

Измерены следующие параметры: LVDP левое вертрикулярное систолическое давление левое вертрикулярное диастолическое давление; +dP/dt скорость изменения левого вертрикулярного давления (первое производное левой вертрикулярной кривой давления); HR сердечная скорость; CF коронарный поток.

Данные испытаний предлагаемых соединений на кардиотоническую активность (табл. 10).

В табл. 10 представлены: сила сжатия (+dP/dt), коронарный поток (CF), частота сокращений сердца (HR), и "постоянство" силы сжатия (p³/p¹), что является соотношением значений в первую и третью минуты в течение 3 мин периода гиперфузии изолированных сердец крыс под действием трапидила и его аналогов. dP/dt, CF и HR данные показывают сумму изменений в в течение 3 мин.

Изобретение относится также к фармацевтическим композициям, включающим в качестве активного ингредиента, по меньшей мере, одно соединение общей формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль в смеси с пригодным инертным твердым или жидким фармацевтическим носителем.

Фармацевтические композиции по изобретению могут быть получены известными по себе методами путем смешивания активного ингредиента с пригодным инертным твердым или жидким носителями и приведения смеси в галеновую форму.

Фармацевтические композиции по изобретению могут быть пригодны для орального (например, таблетки, пилюли, покрытые оболочкой пилюли, драже, твердые или мягкие желатиновые капсулы, растворы, эмульсии или суспензии), парентерального (например, в виде инъекционного раствора) или ректального (например, суппозиторий) введения.

В качестве носителя для приготовления таблеток, покрытых оболочкой, драже, и твердых желатиновых капсул могут использоваться, например, лактоза, кукурузный крахмал, картофельный крахмал, тальк, карбонат магния, стеарат магния, карбонат кальция, стеариновая кислота или ее соль. В качестве носителя для мягких желатиновых капсул могут использоваться, например, растительные масла, жиры, воски, или полиолы подходящей консистенции. В качестве носителей для растворов и сиропов могут использоваться, например, вода, полиолы (полиэтилен-гликоль), сахароза или глюкоза. Растворы для инъекции могут включать, например, воду, спирты, полиолы, глицерин или растительные масла, в качестве носителей. Суппозитории могут быть приготовлены с помощью, например, масел, восков, жиров или полиолов подходящей консистенции.

В дополнение фармацевтические рецептуры могут включать побочные агенты, обычно применяемые в фармацевтической промышленности, например, увлажняющие, придающие сладкий вкус, ароматические вещества, соли для изменения осмотического давления, буферы и т. д. Фармацевтические композиции могут далее включать также и другие активные ингредиенты.

Соединения общей формулы (I) могут, предпочтительно, использоваться в терапии орально в виде таблеток или капсул. Особенно предпочтительны капсулы или таблетки, содержащие примерно 50 мг активного ингредиента.

Ежедневная доза соединений общей формулы (I) может колебаться в значительных пределах, зависящих от нескольких факторов, например, от активности активного ингредиента, состояния и возраста больного, тяжести заболевания. Оральная доза, как правило, составляет от 1 до 1000 мг в день предпочтительно, 10 200 мг/день. Следует подчеркнуть, что эти дозы имеют только информативный характер, и дозу для введения всегда определяет врач-терапевт.

Кроме того изобретение касается использования соединений общей формулы (I) или их фармацевтически приемлемых солей для приготовления фармацевтических композиций, имеющих особенно позитивный инотропный и противостенокардический эффекты.

Предлагается также способ кардиотонического и/или коронаро-расширяющего воздействия на сердце, предусматривающего введение пациенту эффективного количества соединения общей формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли.

Изобретение иллюстрируется неограничивающими примерами: Пример 1. 5-(Диэтиламино)-2-(метилтио)-6,7-дигидро-8H-циклопента[d]-1,2,4-триазоло[1,5-a]пиримидин 4,81 г (0.02 моль) 5-хлор-2-(метилтио)-6,7-дигидро-8H- циклопента-[d]-1,2,4-триазол-[1,5-a]пиримидина суспендируют в 30 мл 2-пропанола к суспензии добавляют 2,93 г (0.04 моль) диэтиламина и реакционную смесь кипятят 1,5 ч. Полученный таким образом раствор выпаривают до обезвоживания, кристаллический осадок суспендируют в 40 мл воды, фильтруют, промывают водой, сушат и перекристаллизовывают из водно-метанольного раствора.

Выход: 5,32 г (96%); Т.пл: 119 120,5^oC.

По методу согласно примера 1 следующие производные получают посредством реакции подходящего производного триазола общей формулы (II) с подходящим амином общей формулы (III).

Пример 2. 5-[N-(3-гидроксипропил)]амино-2-(метилтио)-6,7-дигидро-8H- циклопента[d]-1,2,4-триазол[1,5-a]пиримидин Выход: 5,25 г (94%); T.пл: 170 171,5^oC (перекристаллизован из ацетонитрила).

Пример 3. 5-(Аллиламино)-2-(метилтио)-6,7-дигидро-8H-циклопента [d]-1,2,4-триазол[1,5-a]пиримидин Выход: 5.07 (97%); Т.пл: 166 167,5^oC (перекристаллизован из ацетонитрила).

Пример 4. 5-(Диаллиламино)-2-(метилтио)-6,7-дигидро-8H-циклопента [d]-1,2,4-триазол[1,5-a]пиримидин Выход: 5,55 г (92%); T.пл: 110 111.5^oC (перекристаллизован из ацетонитрила).

Пример 5. 5-(Циклогексиламино)-2-(метилтио)-6,7-дигидро-8H-циклопента [d]-1,2,4-триазол[1,5-a]пиримидин Выход: 5.97 г (98%); Т.пл: 114 116^oC (перекристаллизован из ацетонитрила).

Пример 6. 5-(Бензиламино)-2-(метилтио)-6,7-дигидро-8H-циклопента [d]-1,2,4-триазол[1,5-a]пиримидин Выход: 5,95 г (95,5%); Т.пл: 158 159.5^oC (перекристаллизован из ацетонитрила).

Пример 7. 5-(4-хлорбензиламино)-2-(метилтио)-6,7-дигидро-8H-циклопента [d]-1,2,4-триазол[1,5-a]пиримидин Выход: 6.71 г (97%); Т.пл: 162 164^oC (перекристаллизован из ацетонитрила) Пример 8. 2-(Метилтио)-5-морфолино-6,7-дигидро-8H-циклопента [d] -1,2,4-триазол[1,5-a]пиримидин Выход: 5.71 г (98%); Т.пл: 162 163.5^oC (перекристаллизован из водно-метанольного раствора).

Пример 9. 5-[4-(2-гидpoкcиэтил)пиперазин]-2-(метилтио)-6,7-дигидро-8H-циклопента[d]-1,2,4-триазол[1,5-a]пиримидин Выход: 4,48 г (67%); Т.пл: 142 144^oC (перекристаллизован из метанола).

Пример 10. 2-(метилтио)-5-[N-(2-морфолинэтил)] амино-6,7-дигидро-8H- циклопента[d]-триазол[1,5-a]пиримидин Выход: 6,55 г (98%); Т.пл: 210 212^oC (перекристаллизован из метанола).

Пример 11. 5-[N-биc(2-гидpoкcиэтил)]амино-2-морфолин-6,7-дигидро-8H-циклопента-[d]-1,2,4-триазол[1,5-a]пиримидин Выход: 5,5 г (80%); Т.пл: 167 169^oC (перекристаллизован из водно-метанольного раствора.) Пример 12. 5-[N-(2-гидроксиэтил)]амино-2-морфолин-6,7-дигидро-8Н-циклопента[d]-1,2,4-триазол[1,5-a]пиримидин Выход: 4.93 г (81%); Т.пл: 216 217,5^oC (перекристаллизован из метанола).

Пример 13. 5-(аллиламино)-2-морфолин-6,7-дигидро-8H-циклопента [d] -1,2,4-триазол-[1,5-a]пиримидин Выход: 5,71 г (95%); Т.пл: 165,5 167^oC (перекристаллизован из ацетонитрила).

Пример 14. 5-(диаллиламино)-2-морфолин-6,7-дигидро-8H-циклопента [d]-1,2,4-триазол[1,5-a]пиримидин Выход: 6,60 г (97%); Т.пл: 117 120^oC (перекристаллизован из циклогексана).

Пример 15. 2,5-диморфолин-6,7-дигидро-8H-циклопента[d] -1,2,4-триазол [1,5-a]пиримидин Выход: 6,08 г (92%); Т.пл: 211 213^oC (перекристаллизован из водно-изопропанольного раствора).

Пример 16. 2-морфолин-5-пиперидин-6,7-дигидро-8H-циклопента[d]- 1,2,4-триазол-[1,5-a]пиримидин Выход: 6,30 г (96%); Т.пл: 207 208.5^oC (перекристаллизован из водно-метанольного раствора).

Пример 17. 2-морфолин-5-[N-(3-морфолинпропил)] амино-6,7-дигидро-8H- циклопента-[d]-1,2,4-триазол[l,5-a]пиримидин Выход: 5,58 г (72%); Т.пл: 167 169^oC (перекристаллизован из метанола).

Пример 18. 2-(метилтио)-5-[N-(2-морфолинэтил)]амино-6,7,8,9-тетрагидро-1,2,4-триазол[1,5-b]хиназолин Выход: 5,85 г (85%); Т.пл: 162 163^oC (перекристаллизован из изопропанола).

Пример 19. 2-(метилтио)-5-[N-(3-морфолинпропил)] амино-6,7,8,9- тетрагидро-1,2,4-триазол[5,1-b]хиназолин Выход: 6,13 г (84,5%); Т.пл: 163 164^oC (перекристаллизован из метанола).

Пример 20. 5-(4-метилпиперазин)-2-(метилтио)-6,7,8,9-тетрагидро1,2,4-триазол-[5,1-b]хиназолин Выход: 5,80 г (91%); Т.пл: 174 175^oC (перекристаллизован из изопропанола).

Пример 21. 5-(бензиламино)-2-(морфолин)-6,7,8,9-тетрагидро-1,2,4- триазол[5,1-b]-хиназолин Выход: 5,32 г (73%); Т.пл: 191 193^oC (перекристаллизован из ацетонитрила).

Пример 22. 5-[N-(3-диэтилaминoпpoпил)]амино-2-морфолин-6,7,8,9- тетрагидро-1,2,4-триазол[5,1-b]хиназолин Выход; 4,39 г (61%); Т.пл: 182 184^oC (перекристаллизован из водно-метанольного раствора.

Пример 23. 5-(Диэтиламино)-7-метил-2-морфолин-1,2,4-триазол[1,5-a]пиримидин Выход: 4,50 г (77,5%); Т.пл: 127 129^oC (перекристаллизован из этилацетата).

Пример 24. 5-[N-бензил-N-(2-гидроксиэтил)] амино-7-метил-2-морфолин 1,2,4-триазол-[1,5-a]пиримидин Выход: 5,34 г (72,5%); Т.пл: 159 160,5^oC (перекристаллизован из метанола).

Пример 25. 2,5-диморфолин-7-метил-1,2,4-триазол[1,5-a]пиримидина моногидрат Выход: 6,32 г (98%); Т.пл: 188 190^oC (перекристаллизован из водного раствора изопропанола).

Пример 26. 5-(диэтиламино)-2-(диметиламино)-7,8-дигидро-9H-тиопропан [3,2-d]-1,2,4-триазол[1,5-a]пиримидин Выход: 5,43 г (86,5%); Т.пл: 124 126^oC (перекристаллизован из этилацетата).

Пример 27. 5-[N-(2-гидроксиэтил)] амино-2-(метилтио)-6,7-дигидро-8H- циклопента[d]-1,2,4-триазол[1,5-a]пиримидин К суспензии 4,81 г (0.02 моль) 5-хлор-2-(метилтио)- 6,7-дигидро-8H-циклопента[d] -1,2,4-триазол[1,5-a] пиримидин в 20 мл 2-пропанола добавляют 2,44 г (0,04 моль) 2-аминоэтанола, и реакционную смесь кипятят полтора часа. Затем ее охлаждают, холодную суспензию разбавляют водой, кратковременно перемешивают и, наконец, отделенные кристаллы фильтруют и промывают водой.

Выход: 5,04 г (95%); T.пл: 191 192^oC (перекристаллизован из метанола).

При осуществлении способа по примеру 27 следующие производные получают посредством реакции подходящего производного триазола общей формулы (II) с подходящим амином общей формулы (III): Пример 28. 5-(диэтиламино)-2-(метилтио)-6,7,8,9-тетрагидро-1,2,4- триазол[5,1-b]-хиназолин Выход: 5,13 г (88%); Т.пл: 121 122^oC (перекристаллизован из этилацетата).

Пример 29. 2-(1-метилэтилтио)-5-[N-(2-морфолин-этил)] -амино-6,7,8,9- тетрагидро-1,2,4-триазол[5,1-b]хиназолин Выход: 7,08 г (94%); Т.пл: 190 191^o (перекристаллизован из ацетонитрила).

Пример 30. 2-(1-метилэтилтио)-5-[N-(3-мopфoлин-пpoпил)]-амино-6,7,8,9- тетрагидро-1,2,4-триазол[5,1-b]хиназолин Выход: 6,68 г (85,5); Т.пл: 140 141^oC (перекристаллизован из этилацетата).

Пример 31. 2-(Этилтио)-5-[N-(2-морфолинэтил)]амино-6,7,8,9-тетрагидро-1,2,4-триазол[5,1-b]хиназолин Выход; 6,31 г (87%); Т.пл: 156 158^oC (перекристаллизован из ацетонитрила).

Пример 32. 2-(этилтио)-5-[N-(3-мopфoлинпpoпил)] амино-6,7,8,9- тетрагидро-1,2,4-триазол[5,1-b]хиназолин Выход: 6,78 г (90%); Т.пл: 154 155^oC (перекристаллизован из этилацетата).

Пример 33. 5-(диэтиламино)-7-метил-2-морфолин-1,2,4-триазол-[1,5-a]пиримидин Выход: 4,36 г (75%); Т.пл: 127 128^oC (перекристаллизован из этилацетата).

Пример 34. 2-(метилтио)-5-[N-(3-мopфoлинпpoпил)] амино-6,7,8,9- тетрагидро-1,2,4-триазол[5,1-b]хиназолин Выход: 6,24 г (86%); T.пл: 163,5 165^oC (перекристаллизован из изопропанола).

Пример 35. 2-(метилтио)-5-[N-(2-морфолинэтил)]амино-6,7,8,9,10,11,13,14,15- декагидро-циклододека[d] -1,2,4-триазол[1,5-a]пиримидин К суспензии 3,39 г (0,01 моль) 5-хлор-2-(метилтио)-6,7,8,9,10,11,12,13,14,15-декагидроциклододека[d] -1,2,4-триазол[1,5-a] пиримидина в 10,0 мл 2-пропанола последовательно добавляют 1,11 г (0.011 моль) триэтиламина и 1,43 г (0,011 моль) 2-аминоэтилморфолина, и реакционную смесь кипятят 2 ч. Затем удаляют под вакуумом 2-пропанол, осадок суспендируют в воде, затем кристаллы фильтруют и промывают водой.

Выход: 3.80 г (87,5%); Т.пл: 134 136^oC (перекристаллизован из этилацетата).

По методу, показанному в примере 35, следующие производные были получены путем реакции подходящего производного триазола общей формулы (II) с подходящим амином общей формулы (III).

Пример 36. 2-морфолин-5-[N-(3-морфолинпропил)]амино-6,7,8,9- тетрагидро-1,2,4-триазол[1,5-б]хинозолин Выход: 3.81 г (95%); T.пл: 1б3 165^oC (перекристаллизован из ацетонитрила).

Пример 37. 2-(метилтио)-5-[N-(2-морфолинэтил)]амино-6,7,8,9- тетрагидро-10H-циклогепта[d]-1,2,4-триазол[1,5-a]пиримидин 4,84 г (0.018 моль) 5-хлор-2-(метилтио)-6,7,8,9-тетрагидро-10H- циклогепта[d] -1,2,4-триазол[1,5-a]пиримидина суспендируют в 15 мл 2-пропанола, к суспензии последовательно добавляют 2,02 г (0,02 моль) триэтиламина и 2,60 г (0,02 моль) 2-аминоэтилморфолина, и все это кипятят в течение часа. Холодную суспензию разбавляют водой, отделившиеся кристаллы фильтруют и промывают водой.

Выход: 6,28 г (96%); Т.пл: 173 174^oC (перекристаллизован из ацетонитрила).

По вышеприведенному примеру следующие производные были получены путем реакции подходящего производного триазола общей формулы (II) с подходящим амином общей формулы (III): Пример 38. 2-(метилтио)-5-[N-(3-морфолинпропил)]амино-6,7,8,9- тетрагидро-10H-циклогепта[d]-1,2,4-триазол-[1,5-a]пиримидин Выход: 6,47 г (95%); Т.пл: 150,5 151^oC (перекрист