Пиразолопиримидиноны, фармацевтическая композиция и способ ингибирования фосфодиэстеразы циклического гуанозин-3',5'- монофосфата

Пиразолопиримидиноны, фармацевтическая композиция и способ ингибирования фосфодиэстеразы циклического гуанозин-3',5'- монофосфата

Реферат

 

Сущность изобретения: производные пиразоло [4,3-d] пиримидин-7-онов общей формулы I: где R¹ - (C₁ - C₃) алкильная группа; R² и R³ - (C₁ - C₆)алкильная группа; R⁴ - (C₁ - C₄)алкильная группа, необязательно монозамещенная гидрокси, карбокси, N, N-ди (C₁ - C₄)алкилкарбамоильной группой или группой NR⁵R⁶; (C₂ - C₄)алкенильная группа, необязательно замещенная циано, N, N-ди(C₁ - C₄) алкилкарбамоильной группой или группой CO₂R⁷; (C₂ - C₄)алканоильная группа, необязательно замещенная группой NR⁵R⁶; гидрокси (C₂ - C₄)алкильная группа, замещенная группой NR⁵R⁶; (C₂ - C₃)алкокси (C₁ - C₂)алкильная группа, необязательно замещенная гидрокси или морфолиногруппой; атом галогена; карбоксигруппа; 4-(C₁ - C₃)алкилпиперазинокарбонильная группа; пиридильная или имидазолильная группа, необязательно замещенная метильной группой; или группа NHSO₂R⁸; R⁵ и R⁶-независимо атом водорода или (C₁ - C₄)-алкильная группа, или взятые вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют морфолино- или пиперидиногруппу, необязательно замещенную метильной или гидроксильной группой, или 4 - R⁹ - 1 - пиперазинильную группу, или имидазолильную группу, необязательно замещенную метильной группой; R⁷ - атом водорода или (C₁ - C₄) алкильная группа; R⁸ - (C₁ - C₃)алкильная группа, необязательно замещенная морфолиногруппой, или 4 - R¹⁰-1-пиперазинильная группа; R⁹ - водород, (C₁ - C₃)алкил, 2-гидроксиэтил ацетил; R¹⁰ - (C₁ - C₃)-алкильная группа, необязательно замещенная фенильной группой, при условии, что когда R¹ представляет (C₁ - C₃)алкильную группу; R₂ - метил и R³ - (C₁ - C₆)алкильная группа, то R⁴ является отличным от (C₁ - C₄)алкила или атома галогена, или их фармацевтически приемлемые соли. Соединения формулы I являются селективными ингибиторами фосфодиэстеразы циклического гуанозин 3',5'-монофосфата (цГМФ ФДЭ), используемыми для лечения сердечно-сосудистых заболеваний, таких как, например, стенокардия, гипертензия, сердечная недостаточность и атеросклероз. Сущностью изобретения являются также фармацевтическая композиция, проявляющая активность в отношении (цГМФ ФДЭ). Она содержит соединения формулы I в количестве 1 - 400 мг в смеси с фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем. Изобретение относится и к способу ингибирования цГМФ ФДЭ с помощью указанных соединений. Формула соединения I 3 с. и 4 з.п. ф-лы, 3 табл.

Изобретение относится к ряду пиразоло[4,3-d]-пиримидин-7-онов, представляющих собой сильные и селективные ингибиторы фосфодиэстеразы циклического гуанозин 3', 5'-монофосфата (цГМФ ФДЕ) и находящих применение в различных областях терапии, включая лечение различных сердечно-сосудистых заболеваний, таких как, например, стенокардия, гипертония, сердечная недостаточность и атеросклероз..

Соединения предлагаемого изобретения селективно ингибируют цГМФ ФДЕ, а не фосфодиэстеразу циклического аденозин 3', 5' - монофосфата (цАМФ ФДЕ); вследствие этого селективного ингибирования ФДЕ увеличиваются уровни содержания цГМФ, что в свою очередь может вызвать увеличение полезной противотромбоцитной, противонейтрофильной, противовазоспазматической и сосудорасширяющей активности и усиление действия эндотелианого расслабляющего фактора (ЭРФ) и нитровазодилаторов. Таким образом эти соединения могут найти применение в лечении ряда заболеваний, включая постоянную, нестабильную и вариантную стенокардию, гипертензию, легочную гипертензию, застойную сердечную недостаточность, атеросклероз, состояния пониженной проходимости кровеносных сосудов, например, после чрескожной транслюминальной пластической операции на коронарных сосудах (пост-ЧТКА), болезнь периферических сосудов, удар, бронхит, хроническую астму, аллергическую астму, аллергический ринит, глаукому и болезни, характеризуемые расстройством сократительной способности кишок, например синдром раздраженной толстой кишки (СРТК).

В Европейской патентной заявке ЕР-А-0201188 раскрываются некоторые пиразоло[4,3-d]пиримидин-7-оны, являющиеся антагонистами аденозинового рецептора и ингибиторами ФДЭ и используемые для лечения таких сердечно-сосудистых заболеваний, как сердечная недостаточность. Однако эти соединения не являются сильными ингибиторами ФДЭ и не сообщается о том, что они являются селективными ингибиторами цГФМ ФДЭ.

Соединения предлагаемого изобретения отвечают формуле (1): , в которой R¹ представляет (C₁ - C₃)алкильную группу; R² и R³- (C₁ - C₃)алкильную группу; R⁴ представляет (C₁ - C₄)алкильную группу, необязательно монозамещенную гидрокси, карбокси, N,N-ди(C₁-C₄)алкилкарбамоильной группой или группой NR⁵R⁶; (C₂-C₄)-алкенильная группа, необязательно замещенная циано-, N,N-ди (C₁-C₄)алкилкарбамоильной группой или группой CO₂R⁷; (C₁-C₄)алканоильная группа, необязательно замещенная группой NR⁵R⁶; гидрокси (C₂-C₄)алкильная группа, замещенная группой NR⁵R⁶; (C₂-C₃)алкокси (C₁-C₂)-алкильная группа, необязательно замещенная гидрокси- или морфолиногруппой; атом галогена; карбоксигруппа; 4-(C₁-C₃)алкилпиперазинокарбонильная группа; пиридильная или имидазолильная группа, необязательно замещенная метильной группой; или группа NHSO₂R⁸; R⁵ и R⁶ независимо представляют атом водорода или (C₁-C₄ алкильную группу, или взятые вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют морфолино- или пиперидиногруппу, необязательно замещенную метильной или гидроксильной группой, или 4-R⁹-1-пиперазинильную группу, или имидазолильную группу, необязательно замещенную метильной группой; R⁷ - атом водорода или (C₁-C₄)алкильная группа; R⁸ - (C₁ - C₃)алкильная группа, необязательно замещенная морфолиногруппой, или 4-R¹⁰-1-пиперизинильная группа; R⁹ - водород, (C₁-C₃)алкил, 2-гидроксиэтил; R¹⁰ -(C₁-C₃)алкильная группа, необязательно замещенная фенильной группой; при условии, что когда R¹ представляет (C₁-C₃)алкильную группу, R² -метил и R³ -(C₁-C₆)алкильная группа, то R⁴ является отличным от (C₁-C₄)алкила или атома галогена, или их фармацевтически приемлемые соли.

В вышеприведенном определении, если не указано иное, алкильные группы, содержащие три или более атомов углерода, могут иметь как неразветвленную, так и разветвленную цепь. Кроме того, алкенильные или алкинильные группы, содержащие четыре или более атомов углерода, и алкоксигруппы, содержащие три атома углерода, могут иметь как неразветвленную, так и разветвленную цепь. Атом галогена означает атом фтора, хлора, брома или иода, а гетероциклическая группа выбирается из тиенильной, пиридильной, пиразолильной, имидазолильной, триазолильной, оксазолильной, тиазолильной или пиримидинильной групп.

Соединения формулы (1) могут содержать один или несколько асимметричных центров и, следовательно, могут существовать в виде энантиомеров или диастереоизомеров. Кроме того, некоторые соединения формулы (1), а именно те, которые содержат алкенильные группы, могут существовать в виде цис- или транс-изомеров. В каждом вышеотмеченном случае предлагаемое изобретение охватывает как смеси изомеров, так и отдельные индивидуальные изомеры.

Соединения формулы (1) могут также существовать в таутомерных формах; изобретение охватывает как смеси, так и отдельные индивидуальные таутомеры.

Изобретение, кроме того, включает в себя радиоактивномеченые производные соединений формулы (1), которые могут использоваться в биологических исследованиях.

Фармацевтически приемлемыми солями соединений формулы (1), содержащих основной центр, являются соли присоединения кислот, образованные с участием фармацевтически приемлемых кислот. Примеры включают гидрохлориды, гидробромиды, сульфаты или бисульфаты, фосфаты или гидрофосфаты, ацетаты, бензоаты, сукцинаты, фумараты, малеаты, лактаты, цитраты, тартраты, глюконаты, метансульфонаты, бензолсульфонаты и паратолуолсульфонаты. Соединения формулы (1) могут также образовывать фармацевтически приемлемые соли металлов, особенно щелочных металлов, с основаниями. Примеры включают соли натрия и калия.

Примеры предпочтительных индивидуальных соединений настоящего изобретения включают: 5-[этокси-5-(1-метил-2-имидазолил)фенил]-1-метил-3-н-пропил-1,6- дигидро-7Н-пиразоло[4,3-d]пиримидин-7-он; 5-[2-этокси-5-(4-метил-1-пиперазинилкарбонил)фенил] -1-метил-3-н-пропил-1,6-дигидро-7Н-пиразоло[4,3-d]пиримидин-7-он; 5-[5(4-ацетил-1-пиперазинил)ацетил-2-этоксифенил] -1-метил-3-н-пропил- 1,6-дигидро-7Н-пиразоло[4,3-d]-пиримидин-7-он; 5-(2-этокси-5-морфолиноацетилфенил)-1-метил-3-н-пропил-1,6-дигидро-7Н- пиразоло[4,3-d]пиримидин-7-он; и 5-(5-морфолиноацетил-2-н-пропоксифенил)-1-метил-3н-пропил-1,6-дигидро-7Н -пиразоло[4,3d]пиримидин-7-он.

В зависимости от природы группы R⁴ соединения формулы (1) можно получить из соединения формулы (II): , где R¹, R² и R³ принимают определенные выше значения различными способами. Например, если R⁴ представляет собой C₂-C₄ алканоильную группу, требуемое соединение можно получить обычным ацилированием по Фриделю-Крафтсу, при котором соединение (II) реагирует с приблизительно 2-кратным избытком ацилгалогенида формулы: (C₁-C₃ алкил) COY, где Y представляет собой атом галогена, предпочтительно хлора или брома, в присутствии приблизительно 3-кратного избытка кислоты Льюиса, такой как хлорид или бромид алюминия, в среде подходящего растворителя, например дихлорметана, при температуре от около 0^oC до температуры кипения реакционной среды. Соединения формулы (1), где R⁴ представляет собой C₂-C₄ алканоильную группу, замещенную группой NR⁵R⁶, и R⁵ и R⁶ принимают определенные выше значения, получают из соединений формулы (II) через соответствующий промежуточный галогенкетон, т.е. соединение формулы (1), где R⁴ представляет собой CO (C₁-C₃алкилен)Х, и Х представляет собой атом галогена, предпочтительно хлора или брома, реакцией соответствующего галогенокетона с требуемым амином формулы R⁵R⁶NH, в присутствии по крайней мере одного эквивалента основания для связывания побочно образующейся кислоты (HX], в среде подходящего растворителя, например ацетонитрила, при температуре приблизительно комнатной. Основанием может служить неорганическая соль, такая как безводный карбонат калия, третичный амин, такой как триэтиламин, или избыток самого аминного реагента. В тех случаях, когда R⁵ или R⁶ представляет собой атом водорода, более предпочтительным может оказаться использование защищенного амина формулы R⁵NHP или R⁶NHP, где P представляет собой совместимую защитную группу, например бензильную, которая может быть впоследствии удалена каталитическим гидрированием. Если оба R⁵ и R⁶ представляют собой атом водорода, можно с успехом использовать аммонийный эквивалент соединения формулы P'₂NH, где P' представляет собой защитную группу, такую как трет.-бутоксикарбонил. В этом случае для реакции с галогенокетоном используется калиевая соль неосновного аминирующего реагента; депротектирование осуществляют ацидолизом, используя, например, хлористый водород, что позволяет выделить целевой аминокетон в виде его гидрохлорида. Промежуточный галогенокетон также получают по реакции Фриделя-Крафтса, как это описано выше, взаимодействием соединения (II) с соответствующим галогеноацилгалогенидом формулы: X(C₁-C₃алкилен) COY, где X и Y имеют значения, определенные выше.

Вышеупомянутые кетоны общей формулы (1А): , где R¹¹ представляет собой атом водорода или группу NR⁵R⁶, а R¹, R², R³, R⁵ и R⁶ принимают значения, определенные выше, можно восстановить в соответствующие производные спирты общей формулы (1В): , где R¹, R², R³ и R¹¹ принимают значения, определенные выше.

Предпочтительным восстановителем является боргидрид натрия, а реакцию можно проводить в среде подходящего растворителя, например этанола, при температуре приблизительно комнатной.

Соединение формулы (1), в котором R⁴ представляет собой гидроксиметильную группу и R¹, R² и R³ принимают значения, определенные выше, можно получить, подвергая соединение формулы (II) обычному хлорметилированию, например, в присутствии параформальдегида и концентрированной соляной кислоты, при температуре от комнатной до около 120^oC с получением промежуточного хлорметильного производного нижеследующей формулы (III), которое затем обрабатывают гидроокисью щелочного металла, например гидроокисью натрия или калия, в среде подходящего растворителя, такого как, например, смесь этиленгликоль диметилсульфоксид, при температуре от комнатной до около 100^oC.

, Вышеупомянутые хлорметильные производные формулы (III), где R¹, R² и R³ принимают значения, определенные выше, являются ценными промежуточными соединениями при синтезе других соединений формулы (1). Например, обработка соединения формулы (III) C₂- или C₃-спиртом в присутствии примерно одного эквивалента щелочного металла, предпочтительно натрия, при температуре приблизительно комнатной, дает соответствующие C₂- или C₃-алкоксиметильные производные соответственно. Аналогично при использовании C₂- или C₃- диола образуются соответствующие гидрокси (C₂- или C₃-алкокси) метильные соединения. Последние можно далее трансформировать активацией гидроксильной группы, например, обычным мезилированием с использованием примерно 10%-ного избытка мезилхлорида в среде пиридина в качестве растворителя при температуре от около 0^oC до приблизительно комнатной, с последующей реакцией мезилата, например, с амином формулы: R⁵R⁶NH. Реакцию предпочтительно проводят при избытке амина до 5-кратного в среде подходящего растворителя, например ацетонитрила, при температуре кипения реакционной среды. Как уже указывалось выше, если одна из групп R⁵ или R⁶, или обе эти группы представляют собой атом водорода, то предпочтительно использовать защищенные амины с последующим депротектированием. Таким образом получают соединения формулы (1), в которых R⁴ представляют собой (C₂-C₃)алкоксиметильную группу, которая может быть замещена группой OH или NR⁵R⁶, а R¹, R², R³, R⁵ и R⁶ принимают значения, определенные выше.

Высшие гомологи вышеназванных соединений, т.е. те соединения формулы (1), в которых R⁴ представляет собой (C₂-C₃) алкоксиэтильную группу, которая может быть замещена группой OH- или морфолиногруппой, можно синтезировать аналогичным путем из 2-хлорэитильных, 2-бромэтильных или 2-мезилоксиэтильных аналогов соединений (III), которые в свою очередь можно получить из соответствующих 2-гидроксиэтильных предшественников с помощью стандартных методов. Такой предшественник может быть получен, например, из соединения формулы (1), в котором R⁴ представляет собой атом брома, а R¹, R² и R³ имеют значения, определенные выше (формула (IV)), заменой атома брома на атом лития с помощью н-бутиллития, с последующей реакцией ариллитиевого промежуточного (см. ниже) с окисью этилена.

.

Хлорметильные промежуточные формулы (III) можно также использовать для получения соединений формулы (I), в которых R⁴ представляет собой группу: CH₂NR⁵R⁶, а R¹, R², R³, R⁵ и R⁶ принимают значения, определенные выше, реакцией их с соответствующими аминами формулы: R⁵R⁶NH (или их замещенными модификациями - см. выше). Предпочтительно эту реакцию проводят в присутствии примерно 3-кратного избытка амина в среде подходящего растворителя, например 2-бутанона, при температуре от около 0^oC до температуры кипения реакционной среды. Аналогично соединения формулы (I), в которых R⁴ представляет собой ( C₂-C₄алкилен) NR⁵R⁶, можно легко получить из соответствующих хлор-, бром- или мезилоксипредшественников, которые в свою очередь получают из соответствующих спиртов (см. выше, для синтеза 2-гидроксиэтильных аналогов). 3-Гидроксипропильные и 4-гидроксибутильные аналоги можно получить каталитическим гидрированием алкенолов, получаемых из вышеупомянутых бромпроизводных формулы (IV) до реакции Хека (Неск) (см. ниже) с алкиловым спиртом или 3-бутен-1-оном соответственно.

Далее хлорметильные промежуточные формулы можно использовать для получения соответствующих метильных производных, т.е. соединений формулы (I), в которых R⁴ представляет собой CH₃, а R¹, R² и R³ имеют значения, определенные выше. Это можно осуществить с помощью каталитического гидрирования в присутствии катализатора "палладий на активированном угле" в среде подходящего растворителя, например этилацетата, при давлении около 50 фунтов/кв. дюйм (3,45 атм), при комнатной температуре. Аналогично, если R⁴ представляет собой этильную, н-пропильную или н-бутильную группу, то такие соединения формулы (1) также можно получить из соответствующих алкилхлоридов, получаемых в свою очередь из соответствующих упомянутых выше спиртов с помощью стандартных методов. Можно также использовать другие спиртовые производные, например соответствующие бромид или мезилат.

Вышеупомянутые бромпроизводные (IV), являющиеся ценными промежуточными производными при синтезе также и других соединений формулы (1), можно получить из соединений формулы (II) прямым бромированием в среде подходящего растворителя. Это можно осуществить, например, или используя примерно 60%-ный избыток N-бромсукцинимида в диметилформамиде при комнатной температуре, или используя такой же избыток брома в ледяной уксусной кислоте при температуре от комнатной до около 100^oC. С другой стороны (IV) и соответствующие фтор-, хлор- и иодпроизводные можно получить из первичного амина (см.ниже) классической последовательностью реакций диазотирования и галогенирования, которая включает в себя, например, реакции Шиеманна, Зандмейера и Гаттермана (Shiemann, Sandmeyer, Gatterman).

Используя метод Хека, можно превратить промежуточное бромпроизводное (IV) в соединение формулы (I), в которой R⁴ представляет собой CH=CHCN, CH= CHCONR⁵R⁶ или CH=CHCO₂R⁷ и R¹, R², R³, R⁵, R⁶ и R⁷ имеют определенные выше значения, проводя его реакцию с акрилонитрилом или с соответствующим амидом, или с соответствующим сложным эфиром акриловой кислоты. Эту реакцию, как правило, проводят при примерно 50%-ном избытке как алкенового реагента, так и третичного амина, например триэтиламина, в присутствии примерно 0,1 эквивалента третичного арилфосфина, предпочтительно три-ортотолилфосфина, и примерно 0,05 эквивалентов ацетата палладия (II), в среде подходящего растворителя, например ацетонитрила, при температуре кипения реакционной смеси. Если желательно, полученные акриловые сложные эфиры можно гидролизовать, например, используя водный раствор гидроокиси натрия и метанол в качестве сорастворителя, и получить соответствующие коричные кислоты. Более того все синтезированные таким путем алкенильные производные можно подвергнуть каталитическому гидрированию, например, используя 5% палладия на активированном угле в среде подходящего растворителя при давлении около 15 фунтов/кв.дюйм (1,0 атм) и комнатной температуре, и получить соединения формулы (I), в которых R⁴ представляет собой CH₂CH₂CN, CH₂CH₂CONR⁵R⁶ или CH₂CH₂COR⁷ и R¹, R², R³, R⁵, R⁶ и R⁷ принимают значения, определенные выше для формулы (I). Другой метод восстановления, в котором акрилонитрильное производное (аналог циннамонитрила) нацело гидрируют в присутствии никеля Ренея в среде ледяной уксусной кислоты, дает соединение формулы (I), в котором R⁴ представляет собой 3-аминопропильную группу и R¹, R² и R³ имеют значения, определенные выше.

Высшие гомологи, т.е. соединения формулы (I), в которых R⁴ представляет собой или C₃-C₄ алкильную, или C₃-C₄ алкенильную группу, замещенную группой CN, CONR⁵R⁶ или CO₂R⁷, или представляет 4-аминобутильную группу, можно получить из вышеупомянутых алкенолов, получаемых по реакции Хека между бромпроизводным формулы (IV) и/или аллиловым спиртом, или 3-бутен-1-олом. Стандартные методы, требующиеся для превращения концевой гидроксильной группы в нужные функциональные группы через подходящее реакционноспособное производное, например через соответствующий хлорид, бромид или мезилат, хорошо известны специалистам в данной области техники; они применимы также и в случае 2-гидроксиэтильного аналога (см. выше) и являются таким образом альтернативной методу Хека. Соединения формулы (I), в которых R⁴ представляет собой CH₂CN, CH₂CONR⁵R⁶, CH₂CO₂R⁷ или CH₂CH₂NH₂, можно получить из хлорметильных интермедиатов формулы (III) реакцией с цианидом щелочного металла, например цианидом натрия или калия, с последующими стандартными превращениями полученного нитрила.

Альтернативным методу Хека методом получения требуемых алкенов (и алканов, получаемых из них каталитическим гидрированием) является метод Виттинга-Хорнера (Witting-Horner), в котором альдегид формулы (I), где R⁴ представляет собой COH и R¹, R² и R³ принимают значения, определенные выше, реагирует с соответствующей фосфониевой солью и фосфонатом в присутствии подходящего основания. Сам альдегид можно получить реакцией формилирования вышеописанного ариллитиевого производного соединения (IV), например диметилформамидом; он является таким образом удобным предшественником соединений формулы (I), в которых R⁴ представляет собой C₂-C₄алкенильную или C₂-C₄ алкильную группу и R¹, R² и R³ принимают значения, определенные выше.

Ариллитиевый промежуток альдегид можно использовать также для получения соединений формулы (I), в которых R⁴ представляет собой CONR⁵R⁶ или CO₂R⁷ и R¹, R² и R³ имеют значения, определенные выше. Например, реакция соединения (IV) при -78^oC в среде сухого тетрагидрофурана с 5-кратным избытком раствора н-бутиллития в гексане, обработка полученного ариллития при -40^oC двуокисью углерода и последующее осторожное подкисление до pH 3 в водной среде при 0^oC дают соответствующее производное бензойной кислоты. Эту кислоту можно активировать в мягких условиях, например в таких, которые используются для формирования пептидной связи путем сдваивания амина и кислоты, и превратить, если требуется, в амидное или сложноэфирное производное. Например, активация бензойной кислоты системой карбодиимид/1-гидроксибензотриазол в присутствии требуемого амина формулы R⁵R⁶NH или спирта формулы R⁷OH в среде подходящего растворителя, например дихлорметана, при температуре от около 0^oC до комнатной дает соответствующий амид или сложный эфир соответственно.

Бромсодержащие промежуточные формулы (IV) используются также для синтеза соединений формулы (I), в которых R⁴ представляет собой фенильную или гетероциклическую группу, каждая из которых может быть замещена метильной группой, а R¹, R² и R³ принимают значения, определенные выше. Если R⁴ представляет собой фенильную или связанную через атом углерода гетероциклическую группу, ее можно ввести посредством катализируемого палладия сдаивания цинкпроизводного, получаемого in situ из соответствующего фениллитиевого или гетероциклиллитиевого интермедиата; последний в свою очередь можно получить или из гетероцикла, или из галогеногетероцикла обработкой его н-бутиллитием. Так, например, фениллитий или гетероциклиллитий (в присутствии 1-го дополнительного эквивалента н-бутиллития для активного атома водорода пиразолопиримидинонового субстрата) обрабатывают примерно 2-я эквивалентами безводными хлорида цинка в среде сухого тетрагидрофурана при температуре около -78^oC, а затем при комнатной температуре соединением (IV) и палладиевым катализатором, предпочтительно тетракис(трифенилфосфин) палладием (0). Если требуется, реакционную смесь можно нагреть до кипения, добавив еще около 2-х эквивалентов безводного хлорида цинка. Если R⁴ представляет собой гетероциклическую группу, связанную через атом азота, то реакцию можно проводить, используя примерно 5-кратный избыток соответствующего гетероцикла в присутствии примерно 10%-ного избытка основания, например безводного карбоната калия, для связывания побочно образующегося бромистого водорода и около 10%-ного избытка бронзы и примерно 0,25 эквивалентов иода (катализаторов) в среде подходящего растворителя, например диметилформамида, при температуре около температуры кипения реакционной среды.

Соединения формулы (I), в которых R⁴ представляет собой NHSO₂R⁸ и R¹, R², R³, R⁵, R⁶ и R⁸ принимают значения, определенные выше, можно синтезировать из соответствующих первичных аминов, которые в свою очередь получают нитрованием соединения (II) с использованием стандартной системы концентрированная азотная кислота/концентрированная серная кислота с последующим восстановлением нитроаренов каталитическим гидрированием стандартными методами. Реакцию, как правило, проводят, используя эквимолярные количества первичного амина формулы (I), где R⁴ представляет собой NH₂ и R¹, R² и R³ имеют определенные выше значения, и требуемого алкилсульфонилгалогенида (предпочтительно хлорида) формулы R⁸SO₂ (галоген) в присутствии избытка третичного амина, такого как, например, триэтиламин или пиридин, для связывания побочно образующейся кислоты в среде подходящего растворителя, например дихлорметана, при температуре от 0^oC до комнатной. Удобство использования пиридина состоит в том, что он может служить одновременно и основанием, и растворителем. Реакцию можно катализировать добавлением 0,1 - 0,2 эквивалентов 4-третаминопиридина, такого как, например, 4-диметиламинопиридин. Если и R⁵, и R⁶ представляют собой атомы водорода, то требуемое соединение можно также получить реакций первичного амина с сульфамидом в среде подходящего растворителя, например 1,4-диоксана, при температуре около 100^oC.

Если при превращениях соединений формулы (II) в соединения формулы (I) R³ представляет собой группу, которая в условиях реакций, используемых для введения R⁴, может подвергаться вовлечению в реакцию или отщеплению, то такая группа R³ может быть введена на последней стадии синтеза. Так фенол формулы (II), в котором R³ представляет собой атом водорода, а R¹ и R² имеют определенные выше значения и который можно получить, например, катализируемым Pd депротектированием O-аллильного аналога, т.е. соединением формулы (II), в котором R³ представляет собой аллильную группу, а R¹ и R² имеют определенные выше значения, служит субстратом для последующих реакций введения различных заместителей R⁴. Для получения соединения формулы (I), в котором R¹, R², R³ и R⁴ принимают значения, определенные выше, необходимо осуществить конечное 0-алкилирование фенольной группы. Это можно сделать в стандартных условиях, используя соответствующий алкилхлорид, алкилбромид или алкилсульфонат, в присутствии основания, такого как, например, безводный карбонат калия, в среде подходящего растворителя, например 2-бутинона, при температуре кипения реакционной смеси. В качестве альтернативного варианта можно осуществить алкилирование в условиях, типичных для реакции Мицунобу.

Соединение формулы (II) можно получить из соединения формулы (V): где R¹, R² и R³ имеют значения, определенные выше, используя известные методы циклизации для получения пиримидинонового ядра. Так, например, циклизацию можно осуществить, обрабатывая соединение (V) основанием, таким как, например, гидроокись натрия или карбонат калия, предпочтительно в присутствии перекиси водорода, в водно-этанольной смеси при температуре кипения. В этих условиях в качестве предшествинника для (II) может быть также использован родственный нитрил формулы (VI), где R¹, R² и R³ имеют значения, определенные выше.

В альтернативном методе циклизации соединения формулы (II) можно получить, обрабатывая (V) полифосфорной кислотой при температуре около 140^oC.

Соединения формул (V) и (VI) можно получить из соединения формул (VII) и (VIII) соответственно: где R¹ и R² имеют значения, определенные выше, реакцией с соединением формулы (IX): где R³ и Y принимают значения, определенные выше.

Обычно эту реакцию проводят, используя избыток (IX), в присутствии избытка третичного амина, такого как, например, триэтиламин, для связывания побочно образующейся кислоты (HY), возможно в присутствии катализатора, такого как, например, 4-диметиламинопиридин, в среде инертного растворителя, такого как, например, дихлорметан, при температуре от около 0^oC до комнатной.

Соединения формулы (I) можно получить более прямым путем из соединения формулы (X): где R³, R⁴ и Y принимают значения, определенные выше, если такие ацилгалогениды являются легкодоступными, их реакцией или с соединением (VII), или с соединением (VIII) с последующим замыканием цикла в полученном соединении, как это описано выше. Ясно, что этот альтернативный путь синтеза пригоден только в том случае, если R⁴ совместим с условиями реакций на обеих стадиях, т.е. если R⁴ представляет собой ацетильную группу, как это проиллюстрировано примером 17.

Те аминопиразолы формул (VII) и (VIII), ацилгалогениды формул (IX) и (X) и интермедиаты, используемые для введения в соединения формулы (II) различных заместителей R⁴, которые не являются коммерчески доступными и не описаны ниже, могут быть получены стандартными синтетическими методами, описанными в литературе, из легкодоступных исходных веществ и соответствующих реагентов в подходящих условиях.

Некоторые из соединений формулы (I), в которых R⁹ принимает определенные выше значения за исключением атома водорода, можно получить непосредственно из соответствующих 4-N-незамещенных пиперазиновых аналогов, т.е. из предшественников, в которых R⁹ представляет собой атом водорода, с помощью стандартных синтетических методов.

Все вышеуказанные реакции являются хорошо известными; реагенты и условия, необходимые для их осуществления, можно легко подобрать, обратившись к существующим справочникам и к нижеприведенным примерам. Специалистам в данной области техники без сомнения очевидны их альтернативы и варианты, позволяющие получить все соединения, определяемые формулой (I).

Биологические активности соединений предложенного изобретения были определены с помощью нижеследующих тестов: Активность в ингибировании фосфодиэстеразы.

Сродство соединений к цГМФ ФДЭ и к цАМФ ФДЭ оценивали, определяя значение показателя 1C₅₀ (концентрации ингибитора, которая требуется для 50%-ного ингибирования активности фермента). ФДЭ-ферменты выделяли из тромбоцитов кроликов и почек крыс по методу У.Дж. Томпсона и др. (Biochem., 1971, 10, 311). Из тромбоцитов кроликов были получены кальций/калмодулин (Ca/CAM)-независимая цГМФ ФДЭ и цГМФ-ингибированная цАМФ ФДЭ, а из четырех главных ФДЭ-ферментов почек крыс была выделена Ca/CAM-зависимая цГМФ ФДЭ (фракция 1). Испытания проводили, используя модифицированный периодический метод У. Дж. Томпсона и М. М. Эпилмена (Biochem., 1979, 18, 5228). Результаты этих тестов показывают, что соединения предлагаемого изобретения являются сильными и селективными ингибиторами обеих цГМФ ФДЭ.

Активность в ингибировании агрегации тромбоцитов.

Ее оценивали, определяя способность соединения ингибировать вызываемую фактором активации тромбоцитов (ФАТ) агрегацию тромбоцитов in vitro и усиливать in vitro антиагрегационное действие активаторов гуанилатциклазы, таких как нитропруссид и ЭРФ. Промытые тромбоциты приготовляли по методу Дж.Ф. Мастарда и др. (Methods in Euzymol., 1989, 169, 3), агрегацию определяли стандартным турбодиметрическим методом, как описано Г.В. Борном (I. Physiol (Лондон), 1962, 162, 67 р.).

Антигипертензивная активность.

Ее оценивали после внутривенного или перорального введения соединения крысам с не вызванной искусственно гипертензией. Кровяное давление регистрировали с помощью канюли, имплпантированной в каротидную артерию находящейся в сознании или анестезированной крысы.

При введении людям в качестве лечебного или профилактического средства против стенокардии, гипертензии или застойной сердечной недостаточности пероральные дозы соединений, как правило, составляют 4 - 800 мг в день для среднестатистического взрослого пациента (70 кг). Для типичного взрослого пациента индивидуальные таблетки или капсулы содержат 2 - 400 мг активного соединения в сочетании с фармацевтически приемлемым носителем и предназначены для однократного или многократного приема в течение дня в виде единичной дозы или нескольких дробных доз. Дозы для внутривенного, трансбуккального или подъязычного введения составляют, как правило, 1 - 400 мг на одну дозу. На практике врач самостоятельно определяет режим приема лекарственного средства, оптимальный для данного пациента этот режим меняется в зависимости от возраста пациента, веса его тела и его реакции на прием лекарства. Вышеуказанные дозировки представляют собой примеры для среднестатических случаев, вместе с тем возможны индивидуальные случаи, при которых надлежит использовать более высокие или более низкие интервалы дозировок, и такие случаи также включаются в объем предлагаемого изобретения.

При использовании соединений формулы (I) для лечения людей их можно вводить в индивидуальном виде, но, как правило, их следует вводить в смеси с фармацевтическим носителем, выбранным в зависимости от предполагаемого способа введения и в соответствии со стандартной фармацевтической практикой. Например, соединения можно вводить перорально, буккально или подъязычно в форме таблеток, содержащих такие наполнителя, как крахмал или лактоза, в форме капсул или шариков, или в индивидуальном виде, или в смеси с наполнителями, или в форме эликсиров или суспензий, содержащих ароматизирующие или красящие агенты. Соединения можно также вводить парентерально, например внутривенно, внутримышечно, подкожно или внутрикоронарно. Парентерально их лучше всего вводить в форме стерильного водного раствора, который может содержать и другие соединения, например соли, или моносахариды, такие как маннитол или глюкоза, чтобы сделать раствор изотоническим с кровью.

Таким образом предлагаемое изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию, содержащую соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый разбавитель или носитель.

Изобретение обеспечивает также соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, или фармацевтическую композицию, содержащую любое из этих действующих начал, для использования в медицине.

Изобретение обеспечивает далее использование соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, или фармацевтической композиции, содержащей любое из этих действующих начал, для получения лекарственного средства, предназначенного для лечения постоянной, нестабильной и вариантной стенокардии, гипертензии, легочной гипертензии, застойной сердечной недостаточности, атеросклероза, удара, болезни пер