Производные сульфонамида, фармацевтическая композиция на их основе, способ блокирования действия фибриногена и способ лечения тромбозов у млекопитающих

Производные сульфонамида, фармацевтическая композиция на их основе, способ блокирования действия фибриногена и способ лечения тромбозов у млекопитающих

Реферат

 

Производные сульфонамида формулы I, где R - шестичленный гетероцикл с атомом азота или NR⁶R⁷, R - водород, R⁷ - водород или группа формулы Ph- = NH, H₂N- - NH, CH₃ - = NH; R² = R³ = H; m = 4-6, n = 1; P=0 или 1, R⁴ - C_1-10-алкил, бензил, стирил, фенил, тиенил или замещенный нафтил; R⁵-COOR¹¹, R¹¹ - H или метил, которые представляют собой антагонисты 11b/111a рецептора фибриногена, препятствуют агрегации тромбоцитов и полезны для профилактики и лечения заболеваний, вызываемых образованием тромба. 4 с. и 9 з.п. ф-лы, 5 табл., 8 схем.

Соединение I:

Изобретением даются новые соединения, новые препараты, способы их применения и способы получения, причем такие соединения, как правило, фармакологически применимы в качестве средств, препятствующих агрегации тромбоцитов при разнообразной сосудистой патологии. Указанная фармакологическая активность может быть использована для лечения млекопитающих. Более конкретно, сульфонамидные соединения изобретения действуют путем блокирования молекулярного участка рецептора белка фибриногена. Фибриноген представляет собой гликопротеин, циркулирующий в плазме крови, участок тромбоцитного рецептора которого представлен гликопротеином 11b/111a. Блокированием действия фибриногена у рецептора (гликопротеин 11b/111a) соединения изобретения влияют на агрегацию тромбоцитов, являющуюся причиной многочисленных сосудистых патологий. В настоящее время существует необходимость в области сосудистой терапии в таких блокирующих рецептор фибриногена средствах. Влиянием на гемостаз подобный вид лечения мог бы уменьшить заболеваемость и смертность от тромботических болезней.

Гемостаз - это спонтанный процесс прекращения кровотечения из поврежденного кровеносного сосуда. Предкапиллярные сосуды сжимаются сразу же при их разрезе. В течение секунд тромбоциты или кровяные пластинки связываются с обнаженной матрицей поврежденного сосуда в процессе, называемом адгезией тромбоцитов. Кроме того, тромбоциты слипаются друг с другом в процессе, известном как агрегация тромбоцитов, с образованием пробки тромбоцитов. Такая пробка тромбоцитов способна быстро остановить кровотечение, но она должна усиливаться белковым фибрином для длительной эффективности, пока разрыв в кровеносном сосуде не будет устойчиво восстановлен за счет фибробластов, являющихся специализированными клетками восстановления ткани.

Внутрисосудистый тромб (сгусток) возникает в результате патологического нарушения гемостаза. Тромб может вырасти до размера, достаточного для закупорки артериальных кровеносных сосудов. Тромбы могут также образоваться в областях стасиса или замедленного кровотока в венах. От венозных тромбов легко отрываются их кусочки, называемые эмболями, движение которых в системе кровообращения может привести к закупорке других сосудов, например легочных артерий. Таким образом, артериальные тромбы вызывают серьезные заболевания за счет местной блокады, в то время как венозные тромбы вызывают заболевания за счет дистанционной блокады или эмболизации. Такие заболевания включают венозный тромбоз, тромбофлебит, артериальную эмболию, коронарный и церебральный артериальный тромбоз и инфаркт миокарда, шок, церебральную эмболию, эмболию почек и легочную эмболию.

В области сердечно-сосудистых и церебрально-сосудистых заболеваний существует необходимость в средстве, которое может быть использовано для профилактики и лечения тромбоза с минимальными побочными эффектами, включая нежелательное длительное кровотечение в других частях системы кровообращения во время профилактики или ликвидации целевого тромба. Соединения изобретения отвечают такой необходимости, представляя собой лечебные средства для профилактики и лечения тромбоза.

Соединения изобретения проявляют активность в качестве противотромбозных средств за счет своей способности блокировать действие фибриногена в его участке (сайте) рецептора тромбоцитов с предотвращением тем самым агрегации тромбоцитов.

Изобретение относится к новым соединениям общей структурной формулы и их фармацевтически приемлемым солям, где R¹ представляет четырех-восьмичленный гетероцикл, содержащий 1, 2, 3 или 4 гетероатома, выбранных из N, O или S, и гетероцикл необязательно замещен по любому атому водородом, R⁶ или R⁷, NR⁶R⁷, где R⁶ и R⁷ независимо представляют водород и незамещенный или замещенный C_0-10-алкил и циклоалкил, где заместители включают C₁-C₁₀-алкокси, C₁-C₁₀-алкоксиалкил, C₁-C₁₀-алкоксиалкилокси, C₁-C₁₀-алкоксикарбонил, C₁-C₁₀-алкилкарбонил, C₄-C₁₀-аралкилкарбонил, C₁-C₁₀-алкилтиокарбонил, C₁-C₁₀-аралкилтиокарбонил, тиокарбонил, C₁-C₁₀-алкокситиокарбонил, арил, пяти-шестичленное насыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее 1, 2, 3 или 4 гетероатома, выбранных из группы, включающей N, O и S, C₁-C₁₀-алканоиламино, C₁-C₆-алкоксикарбонил-C₀-C₆-алкиламино, C₁-C₁₀-алкилсульфониламино, C₄-C₁₀-аралкилсульфониламино, C₄-C₁₀-аралкил, C₁-C₁₀-алкарил, C₁-C₁₀-алкилтио, C₄-C₁₀-аралкилтио, C₁-C₁₀-алкилсульфинил, C₄-C₁₀-аралкилсульфинил, C₁-C₁₀-алкильсульфонил, C₄-C₁₀-аралкилсульфонил, аминосульфонил, C₁-C₁₀-алкиламиносульфонил, C₄-C₁₀-аралкилсульфониламино, оксо, тио, незамещенный или моно- или дизамещенный 1-этенил, 2-этенил, 3-пропенил, заместители которых выбирают из группы, включающей водород, C₁-C₁₀-алкил и C₄-C₁₀-аралкил, карбокси, гидрокси, амино, C₁-C₆-алкиламино, C₁-С₆-диалкиламино, галоген, где галоген определяется как F, Cl, Br или J, нитро и циано, и, кроме того, N может быть дополнительно замещен с образованием иона четвертичного аммония заместителем, определенным ранее для R⁶ и R⁷; R² и R³ независимо представляют водород арил и незамещенный или замещенный C₀-С₁₀-алкил или циклоалкил, где заместителем является C₁-C₁₀-алкоксиалкил, четырех-восьмичленную насыщенную гетероциклическую систему, содержащую 1, 2, 3 или 4 гетероатома, выбранных из группы, включающей N, O и S, C₄-C₁₀-аралкил, C₁-C₁₀-алкарил, C₁-C₁₀-алкилтио, C₄-C₁₀-аралкилтио, C₁-C₁₀-алкилсульфинил, C₄-C₁₀-аралкилсульфинил, C₁-C₁₀-алкилсульфонил, C₄-C₁₀-аралкилсульфонил, карбокси, C₁-C₁₀-алкилкарбонил, C₁-C₁₀-алкилтиокарбонил, C₄-C₁₀-аралкилкарбонил, C₄-C₁₀-аралкилтиокарбонил, C₁-C₆-алкоксикарбонил, C₄-C₁₀-аралкоксикарбонил, C₁-C₆-алкокси, C₁-C₆-алкоксикарбонил-C₁-C₄-алкил, C₄-C₁₀-аралкоксикарбонил-C₁-C₄-алкил, C₄-C₁₀-аралалкокси, C₁-C₆-алкиламино, C₁-C₁₂-диалкиламино, C₁-C₆-алканоиламино, C₄-C₁₀-аралканоиламино, C₄-C₁₀-аралкиламино; R⁴ представляет арил, C₁-C₁₀-алкил или циклоалкил, C₄-C₁₀-аралкил, C₁-C₁₀-алкоксиалкил, C₁-C₁₀-алкарил, C₁-C₁₀-алкилтиоалкил, C₁-C₁₀-алкокситиоалкил, C₁-C₁₀-алкиламино, C₄-C₁₀-аралкиламино, C₁-C₁₀-алканоиламино, C₄-C₁₀-аралканоиламино, C₁-C₁₀-алканоил, C₄-C₁₀-аралканоил и незамещенный или замещенный C₁-C₁₀-карбоксиалкил, где заместитель представлен арилом или C₁-C₁₀-аралкилом, кроме того, любой из заместителей для R⁴ может быть замещен заместителями, выбранными из группы, определенной для R⁶; R⁵ представляет четырех-восьмичленный насыщенный или ненасыщенный гетероцикл, содержащий 1, 2, 3 и 4 гетероатома, выбранных из N, O или S, и , , где R⁸ представляет гидрокси, C₁-C₁₀-алкилокси, C₁-C₁₀-алкарилокси, C₄-C₁₀-аралкилокси, C₄-C₁₀-аралкилкарбонилокси, C₁-C₁₀-алкоксиалкилокси, C₁-C₁₀-алкоксиалкилкарбонилокси, C₁-C₁₀-алкоксикарбонилалкил, C₁-C₁₀-алкилкарбонилоксиалкилокси, L- или D-аминокислоту, присоединенную амидной связью, или L- или D-аминокислоту, присоединенную амидной связью и в которой карбоксильная группа аминокислоты этерифицирована C₁-C₆-алкилом или C₄-C₁₀-аралкилом, , , где R⁹ и R¹⁰ выбраны из группы, включающей водород, C₁-C₁₀ - алкил и C₄-C₁₀-аралкил; X и Y независимо представляют NR⁶, O, S, SO, , , -CC- , четырех-восьмичленный цикл, содержащий 0, 1, 2, 3 или 4 гетероатома, выбранных из N, O и S, причем цикл независимо замещен при любом атоме группой R⁶ , арил, представляет возможный заместитель, который в случае присутствия имеет значения, независимо выбранные и приведенные для X и Y; m представляет целое число от нуля до десяти; n представляет целое число от нуля до десяти; p представляет целое число от нуля до трех.

Предпочтительная группа соединений изобретения включает соединения, определяемые общей структурной формулой где R¹ представляет пяти-шестичленный гетероцикл, в котором гетероатомы выбраны из N, O и S, и где гетероцикл необязательно замещен C₁-C₅-алкилом, или NR⁶R⁷, где R⁶ и R⁷ независимо представляют водород, незамещенный или замещенный C₁-C₁₀-алкил, заместители для которого выбраны из C₁-C₁₀-алкоксикарбонила, арила, C₀-C₅-алкиламино-С₁-С₁₀-алкила, C₄-C₁₀-аралкила, и, кроме того, атом N может быть дополнительно замещен с образованием иона четвертичного аммония, в котором дополнительный заместитель имеет значения, указанные для R⁶ и R⁷; R² и R³ представляют водород, C₁-C₄-алкил, C₄-C₁₀-аралкил; R⁴ представляет арил, C₁-C₁₀-алкил или циклоалкил, C₄-C₁₀-аралкил, C₁-C₁₀-алкоксиалкил, C₁-C₁₀-алкарил, незамещенный или замещенный C₁-C₁₀-карбоксиалкил, где заместитель выбран из арила, C₁-C₆-алкила или C₄-C₁₀-аралкила; R¹¹ представляет водород или C₁-C₁₀-алкил; X и Y независимо представляют арил, O, SO₂, -CH=CH-, , -SO₂NR⁶- или -NR⁶SO₂, пяти-шестичленный цикл, содержащий 0, 1 или 2 гетероатома, выбранных из N или O; Z представляет возможный заместитель, который в случае присутствия представляет O, SO₂ , -NR⁶CO-, -CONR⁶-, прямой или разветвленный C₁-C₁₀-алкил; m представляет целое число от нуля до восьми; n представляет целое число от нуля до двух; p представляет целое число от нуля до двух.

Более предпочтительная группа соединений изобретения включает соединения, определяемые общей структурной формулой где R¹ представляет пяти-шестичленный гетероцикл с гетероатомами, выбранными из N и O, причем гетероцикл необязательно замещен C₁-C₅-алкилом, NR⁶R⁷, где R⁶ и R⁷ независимо представляют C₁-C₁₀-алкил или C₄-C₁₀-аралкил, и далее атом N может быть дополнительно замещен с образованием иона четвертичного аммония, в котором дополнительный заместитель имеет значения, указанные ранее для R⁶ и R⁷; R⁴ представляет арил, C₁-C₁₀-алкил или циклоалкил, или C₄-C₁₀-аралкил; X и Y независимо представляют фенил, O, SO₂, или пяти-шестичленный цикл, содержащий 0 или 1 гетероатом, выбранный из N или O; Z представляет возможный заместитель, который в случае присутствия представляет O, SO₂ , -NR⁶CO-, -CONR⁶- или -CH₂-; m представляет целое число от нуля до шести.

Термин "фармацевтически приемлемые соли" означает неядовитые соли соединений изобретения, которые обычно получают реакцией свободного основания с приемлемой органической или неорганической кислотой. Примеры характерных представителей солей включают ацетат, бензолсульфонат, бензоат, бикарбонат, бисульфат, битартрат, борат, бромид, эдетат кальция, камзилат, карбонат, хлорид, клавуланат, цитрат, дигидрохлорид, эдетат, эдизилат, эстолат, эзилат, фумарат, глюцептат, глюконат, глутамат, гликоллиларзанилат, гексилрезорцинат, гидрабамин, гидробромид, гидрохлорид, гидроксинафтоат, йодид, изотионат, лактат, лактобионат, лаурат, малат, малеат, манделат, мезилат, метилбромид, метилнитрат, метилсульфат, мукат, напсилат, нитрат, олеат, оксалат, памеат, пальмитат, пантотенат, фосфат/дифосфат, полигалактуронат, салицилат, стеарат, субацетат, сукцинат, таннат, тартрат, теоклат, тозилат, триэтиодид, валерат.

Термин "физиологически эффективное количество" означает такое количество лекарственного или фармацевтического средства, которое будет создавать медицинскую или биологическую реакцию ткани, системы или животного, ожидаемую исследователем или клиницистом. Термин "противокоагулирующее средство" включает аспирин, гепарин и варфарин. Термин "фибринолитическое средство" выключает стрептокиназу и активатор тканевого плазминогена.

Термин "арил" означает моно- или полициклическую систему, состоящую из пяти- шестичленных ароматических циклов, содержащих 0, 1, 2, 3 и 4 гетероатома, выбранных из N, O и S, и которые незамещены или замещены группой R⁶.

Термин "алкил" означает нормальный или разветвленный алкан, алкен или алкин.

Термин "алкоксигруппа" будет рассматриваться как включающий алкильную часть, где алкил имеет вышеуказанные значения.

Термины "аралкил" и "алкарил" следует рассматривать как включающие алкильную часть, где алкил имеет вышеуказанные значения, и арильную часть, где арил имеет вышеуказанные значения.

Термин "галоген" включает фтор, хлор, йод и бром.

Термин "оксо" означает радикал = 0.

Термин "тио" означает радикал = S.

Соединения изобретения могут быть введены больным, если хотят предотвратить тромбоз ингибированием связывания фибриногена с рецептором гликопротеинового комплекса 11b/111a мембраны тромбоцита. Соединения применимы в хирургии на периферийных артериях (артериальные трансплантаты, каротидная эндартерэктомия) и в сердечно-сосудистой хирургии в случаях, когда операции на сосудах и органах и/или контактирование тромбоцитов с искусственными поверхностями приводит к агрегации тромбоцитов и их расходу. Агрегированные тромбоциты могут образовывать тромбы и тромбоэмболии. Соединения могут быть введены таким послеоперационным больным для предотвращения образования тромбов и тромбоэмболий.

Экстракорпоральная система кровообращения обычно применяется в сердечно-сосудистой хирургии для насыщения крови кислородом. При этом происходит прилипание тромбоцитов к поверхностям экстракорпоральной цепи. Налипание зависит от взаимодействия между GP 11b/111a на мембранах тромбоцитов и фибриногеном, адсорбированным поверхностью цепи (Gluszko и др. , Amer. J. Physiol. , 1987, 252:H, с. 615-621). Отделившиеся от искусственных поверхностей тромбоциты характеризуются ухудшенным функционированием. Для предотвращения налипания могут быть введены соединения изобретения.

Другие области применения данных соединений включают предотвращение тромбоза кровяных пластинок, тромбоэмболии и реокклюзии в ходе и после тромболитической терапии, а также предотвращение тромбоза кровяных пластинок, тромбоэмболии и реокклюзии после пластических операций на коронарных и других артериях и после процедур обхода коронарной артерии. Соединения могут быть также использованы для профилактики инфаркта миокарда.

Соединения изобретения могут быть введены в таких пероральных дозированных формах, как таблетки, капсулы, пилюли, порошки, гранулы, эликсиры, тинктуры, суспензии, сиропы, эмульсии. Точно также соединения могут быть введены в виде внутривенной, внутрибрюшинной, подкожной или внутримышечной инъекции, и каждая такая применяемая форма хорошо известна специалисту в фармацевтической области. Эффективное, но нетоксичное количество целевого соединения может быть использовано в качестве противоагрегационного средства.

Режим дозировок с применением соединений изобретения подбирают с учетом разнообразных факторов, в том числе типа, вида, возраста, веса, пола и медицинского состояния больного, тяжести подлежащих лечению симптомов, пути введения, функционирования почек и печени пациента и конкретного применяемого соединения или его соли. Любой опытный лечащий врач или ветеринар способен легко определить и прописать эффективное количество лекарственного средства, необходимое для профилактики, лечения или приостановки развития симптомов.

Пероральные дозировки изобретения при их использовании для достижения целевого эффекта будут находиться в интервале от 0,01 мг кг массы тела в день (мг/кг/день) до 100 мг/кг/день, предпочтительно 1-100 мг/кг/день и наиболее предпочтительно 1-50 мг/кг/день. Внутривенные, наиболее предпочтительные дозировки находятся в интервале 1-10 мг/кг мин при вливании с постоянной скоростью. Соединения изобретения могут с успехом назначаться в виде единственной ежедневной дозы или общая дневная доза может быть введена дробными дозами один, два, три или четыре раза ежедневно. Кроме того, предпочтительные соединения изобретения могут назначаться через нос с применением приемлемых интраназальных носителей или могут назначаться трансдермальным путем с применением хорошо известных специалистам в данной области кожных пластырей. При введении в виде трансдермальной системы доставки дозированное введение, разумеется, будет скорее непрерывным, чем прерывистым во всем дозировочном режиме.

В способах изобретения подробно охарактеризованные здесь соединения являются активными компонентами, которые обычно вводят в смеси с фармацевтически приемлемыми разбавителями, наполнителями или носителями (обобщенно называемые здесь "носителями"), которые подбирают соответствующим образом в зависимости от намеченной формы введения, т.е. пероральных таблеток, капсул, эликсиров, сиропов и т.п. в соответствии с обычной фармацевтической практикой.

К примеру, для перорального введения в форме таблетки или капсулы активный лекарственный компонент может быть смешан с пероральным неядовитым фармацевтически приемлемым инертным носителем, например лактозой, крахмалом, сахарозой, глюкозой, метилцеллюлозой, стеаратом магния, дикальцийфосфатом, сульфатом кальция, маннитом, сорбитом и т.п.; для перорального введения в жидкой форме лекарственный компонент может быть смешан с любым пероральным неядовитым инертным фармацевтически приемлемым носителем, например этанолом, глицерином, водой и т.п. Кроме того, при желании или необходимости в смесь могут быть введены приемлемые связующие средства, смазки, рыхлители и красители. Приемлемые связующие средства включают крахмал, желатин, природные сахара, например глюкозу или бета-лактозу, кукурузные подслащивающие вещества, природные и синтетические камеди, например камедь акации, трагакант или альгинат натрия, карбоксиметилцеллюлозу, полиэтиленгликоль, воски и т.п. Применяемые в дозированных формах смазки включают олеат натрия, стеарат натрия, стеарат магния, бензоат натрия, ацетат натрия, хлорид натрия и т.п. Рыхлители или раздробляющие агенты включают (но без ограничения только ими) крахмал, метилцеллюлозу, агар, бентонит, ксантановую камедь и т.п.

Соединения изобретения могут быть также введены в форме липосомной системы доставки, например, в виде небольших однослойных пузырьков, крупных однослойных пузырьков и многослойных пузырьков. Липосомы могут быть получены из самых разнообразных фосфолипидов, таких как холестерин, стеариламин или фосфатидилхолин.

Соединения изобретения могут быть также поставлены с использованием моноклональных антител в качестве индивидуальных носителей, к которым присоединены молекулы соединения. Соединения изобретения могут быть также присоединены к растворимым полимерам в качестве целевых носителей лекарственного средства. Подобные полимеры могут включать поливинилпирролидон, сополимеры пирана, полигидроксипропилметакриламин-фенол, полигидроксиэтиласпартамид-фенол или полиэтиленоксидполилизин, замещенный пальмитоильными остатками. Кроме того, соединения изобретения могут быть присоединены к ряду биоразлагаемых полимеров, полезных при достижении регулируемого выделения лекарственного средства, например полимолочной кислоты, полигликолевой кислоты, сополимеров полимолочной кислоты и полигликолевой кислоты, поли-эпсилон-капролактона, полигидроксимасляной кислоты, полиортоэфиров, полиацеталей, полидигидропиранов, полицианоакрилатов и сшитых или амфипатических блок-сополимеров гидрогелей.

Соединения изобретения могут быть также введены совместно с приемлемыми противокоагулятными средствами или тромболитическими средствами с получением синергических эффектов при лечении разнообразной сосудистой патологии.

Соединения формулы (I) могут быть легко получены согласно нижеследующим схемам реакций и примерам или их модификаций с применением легко доступных исходных продуктов, реактивов и обычных методик синтеза. В таких реакциях возможно применение вариантов, которые сами по себе известны специалисту, но которые не были упомянуты с большими подробностями.

К наиболее предпочтительным соединениям изобретения относятся любое соединение или все соединения, конкретно описанные в примерах. Однако эти соединения не следует рассматривать как образующие единственный род соединений, считающихся изобретением, и любые сочетания соединений или их фрагментов могут сами образовать род или группу соединений. Нижеследующие примеры дополнительно иллюстрируют подробности получения соединений изобретения. Специалисту понятно, что при получении этих соединений возможны известные вариации условий и способов осуществления приемов получения этих соединений. Все температуры даны в градусах Цельсия, если нет особых указаний.

Условные обозначения реагентов имеют следующие значения: Boc - трет-бутоксикарбонил, Pd-C - палладий на активированном угле в качестве катализатора, ДМФА или DMF - диметилформамид, ДМСО - диметилсульфоксид, CBZ - карбобензилокси, CH₂Cl₂ - хлористый метилен, CHCl₃ - хлороформ, EtOH - этанол, MeOH - метанол, EtOAc - этилацетат, HOAc - уксусная кислота, ТГФ - тетрагидрофуран.

Ниже указаны источники следующих соединений: описан ниже, 2-(4-N-трет-бутилоксикарбонилпиперидинил)этанол.

В 700 мл диоксана растворяют 4-пиперидин-2-этанол (производство фирмы Олдрич) (130 г, 1 моль), охлаждают до 0^oC и обрабатывают 3 н. NaOH (336 мл, 1 моль) и ди-трет-бутил-карбонатом(221,8 г, 1 моль). Ледяную баню удаляют и реакционную смесь перемешивают в течение ночи. Затем реакционную смесь концентрируют, разбавляют водой и экстрагируют эфиром. Эфирные слои объединяют, промывают рассолом, сушат над MgSO₄, фильтруют и после испарения получают 225,8 г (98%) продукта.

R_f=0,37 в смеси EtOAc-гексан (1:1), окрашивание нингидрином.

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) : 4,07 (ш.с, 2H), 3,7 (ш.с, 2H), 2,7 (т, J = 12,5 Гц, 2H), 1,8-1,6 (м, 6H), 1,51 (c, 9H), 1,1 (ддд, J= 4,3, 12,5 и 12 Гц, 2H).

Метиловый эфир 4-(4-N-трет-бутилоксикарбонилпиперидинил)-бут-2-еновой кислоты.

В 1 л CH₂Cl₂ растворяют оксалилхлорид (55,8 мл, 0,64 моля) и в атмосфере N₂ охлаждают до -78^oC. Затем по каплям прибавляют ДМСО (54,2 мл, 0,76 моля). После прекращения выделения газа в течение 20 мин прибавляют 2-(4-N-трет-бутилоксикарбонилпиперидинил)этанол (102,5 г, 0,45 моля), растворенный в 200 мл CH₂Cl₂. После перемешивания еще 20 мин по каплям прибавляют триэтиламин (213 мл, 1,53 моля) и охлаждающую баню удаляют. Спустя 1,5 ч, ТСХ показывает отсутствие исходных продуктов. Добавляют карбометокситрифенилфосфаран (179 г, 0,536 моля) и реакционную смесь перемешивают в течение ночи. Раствор разбавляют 300 мл Et₂O, экстрагируют один раз 800 мл H₂O, дважды 300 мл 10%-го раствора KHSO₄, затем один раз рассолом. Органический слой сушат над MgSO₄, фильтруют и испаряют. Колоночной хроматографией (SiO₂, 5% EtOAc в гексане) получают 78,4 г (62%) чистого метилового эфира 4-(4-N-трет-бутилоксикарбонилпиперидинил)бут-2-еновой кислоты.

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) : 6,9 (ддд, J=15,6, 7,6 и 7,6 Гц, 1H), 5,8 (д, J= 15,6 Гц, 1H), 4 (ш.с, 2H), 3,7 (с, 3H), 2,6 (т, J = 12,6 Гц, 2H), 2,1 (т, J = 7,4 Гц, 2H): 1,7-1,4 (с, 9H), 1,1 (м, 2H).

4-(4-N-трет-бутилоксикарбонилпиперидинил)бутилбромид.

В 500 мл EtOAc растворяют метиловый эфир 4-(4-N-трет-бутилоксикарбонилпиперидинил)бут-2-еновой кислоты. К раствору добавляют 10% палладия на угле (10 г) в виде взвеси в EtOAc и реакционную смесь выдерживают в течение ночи в атмосфере H₂ (из баллона). Затем реакционную смесь фильтруют через Солкафлок, фильтровальный пирог промывают EtOAc и после испарения этилацетата получают 34,7 г (90%) метилового эфира 4-(4-N-трет-бутилоксикарбонилпиперидин-4-ил)бутановой кислоты. ТСХ R_f = 0,69 в 30% EtOAc в гексане.

¹H-ЯМР (300 Мгц, CDCl₃) : 4 (ш.с, 2H), 3,6 (с, 3H), 2,6 (т, J = 12,3 Гц, 2H), 2,2 (т, J = 7,4 Гц, 2H), 1,6 (м, 4H), 1,4 (с, 9H), 1,4 (м, 1H), 1,2 (м, 2H), 1 (м, 2H).

Эфир бутановой кислоты (45,3 г, 0,159 моля) растворяют в CH₃OH и выдерживают в течение ночи с 1 н. NaOH (500 мл, 0,5 моля). Растворитель удаляют в вакууме, добавляют воду и раствор промывают эфиром, после чего подкисляют 10%-ным раствором KHSO₄. Водный слой промывают эфиром, эфирные слои объединяют, промывают рассолом, сушат над MgSO₄ и концентрированием получают в виде прозрачного масла соответствующую кислоту (41,85 г, выход 97%).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) : 4 (ш.с, 2H), 2,6 (м, 2H), 2,25 (м, 2H), 1,6 (ш.с, 4H), 1,4 (с, 9H), 1,3-0,9 (9H).

Полученную кислоту (20,4 г, 0,077 моля) выдерживают 1 ч с бораном (BF₃-ТГФ, 235 мл, 235 ммоля) при 0^oC в ТГФ, по каплям прибавляют NaOH (1 н., 250 мл) и раствор перемешивают в течение ночи. Образовавшуюся реакционную смесь концентрируют с удалением ТГФ и экстрагируют эфиром. Эфирные экстракты объединяют, сушат над MgSO₄, фильтруют и после испарения получают в виде бесцветного масла (19,7 г) соответствующего спирта.

R_f = 0,7 в смеси этилацетат-гексан (2:1).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) : 4,1 (ш.с, 2H), 3,6 (т, 2H), 2,65 (т, 2H), 2,1 (ш.с, 1H), 1,65 (ш.с, 2H), 1,55 (м, 2H), 1,4 (с, 9H), 1,35 (м, 3H), 1,25 (м, 2H), 1,1 (м, 2H).

Полученный спирт (19,7 г, 76,5 ммоля) растворяют в ТГФ, обрабатывают трифенилфосфином (23,1 г, 88 ммолей) и охлаждают до 0^oC. Одной порцией добавляют четырехбромистый углерод (29,8 г, 89,9 ммоля), охлаждающую баню удаляют и реакционную смесь перемешивают в течение ночи. Для завершения реакции добавляют дополнительное количество трифенилфосфина (11,71 г) и четырехбромистого углерода (14,9 г). Смесь фильтруют, жидкость разбавляют эфиром и снова фильтруют. После удаления растворителя полученную жидкость адсорбируют на SiO₂ и алюированием 5% EtOAc в гексане получают в виде прозрачного бесцветного масла 4-(4-N-трет-бутилоксикарбонилпиперидин-4-ил)бутилбромид (20,7 г, 85% выход).

R_f = 0,6 в смеси этилацетат-гексан (1:4).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) : 4,1 (ш.с, 2H), 3,4 (т, 2H), 2,65 (т, 2H), 1,85 (м, 2H), 1,65 (ш.д, 2H), 1,4 (с, 9H), 1,35 (м, 2H), 1,3 (м, 3H), 1,1 (м, 2H).

2. BocNH(CH₂)₆Br.

По стандартной методике промышленный H₂N(CH₂)₅CH₂OH защищался в виде N-Boc производного и с помощью Ph₃P-CBr₄ в ТГФ превращался в бромид. Использование исходных аминоспиртов с различной длиной цепи дает по схеме 1, приведенной в конце описания, аналогичные галогениды: 2-s-(бензилоксикарбониламино)-3-/4-(N-трет-бутилоксикарбонил-пиперидин- 4-ил)бутилоксифенил/пропионовая кислота (1-2).

В ДМФА (75 мл) растворяют N-CBZ-L-тирозин (1-1) (17,58 г, 0,055 моля), охлаждают до 0-10^oC и обрабатывают гидридом натрия (2,88 г, 0,12 моля). Полученную суспензию перемешивают 1 ч при 0-10^oC и затем по каплям в течение 15 мин прибавляют N-трет-бутилоксикарбонилпиперидин-4-илбромид (17,7 г, 0,055 моля) в 25 мл ДМФА. После этого реакционную смесь перемешивают 16 ч при комнатной температуре. Растворитель удаляют в вакууме, а остаток переносят в смесь 500 мл EtOAc и 100 мл 10% KHSO₄. Органическую фазу промывают рассолом, сушат (Na₂SO₄) и после отгонки растворителя получают вязкое масло. Очисткой полученного масла вытеснительной хроматографией на силикагеле с элюированием смесью CHCl₃-CH₃-OH-HOAc (98:2:0,5) получают чистое соединение 1-2 (23,75 г), R_f = 0,35, в виде бледно-желтого масла.

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) : 1-1,15 (2H, м), 1,2-1,8 (16H, м), 2,62 (2H, т), 3,1 (2H, м), 3,91 (2H, т), 4,04 (2H, м), 5,1 (2H, м), 5,22 (1H, д), 6,78 (2H, д), 7,04 (2H, д), 7,35 (5H, м).

Пример 2.

Метиловый эфир 2-s-(бензилоксикарбониламино)-3-/4-(N-трет- бутилоксикарбонилпиперидин-4-ил)бутилоксифенил/пропионовой кислоты (1-3).

В 150 мл CH₃OH растворяют при комнатной температуре соединение 1-2 (10,05 г, 18,1 ммоля), добавляют карбонат цезия (2,95 г, 9,06 ммоля) и после перемешивания полученной смеси 15 мин получают прозрачный раствор. Метанол удаляют при пониженном давлении, остаток растворяют в ДМФА (150 мл) и обрабатывают прибавлением по каплям йодистого метила (2,57 мл, 18,1 ммоля). Полученный раствор перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Растворитель удаляют в вакууме, остаток переносят в 400 мл эфира, промывают порциями 3 x 50 мл H₂O, 50 мл рассола и сушат (Na₂SO₄). Удалением растворителя получают в виде масла соединение 1-3.

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) : 1-1,15 (2H, м), 1,3-1,7 (16H, м), 2,68 (2H, дт), 3,05 (2H, м), 3,72 (3H, с), 3,91 (2H, т), 4,08 (2H, д), 4,61 (1H, м), 5,1 (2H, м), 5,18 (1H, м), 6,79 (2H, д), 6,98 (2H, д), 7,35 (5H, м).

Пример 3.

Метиловый эфир 2-s-амино-3-/4-(N-трет-бутилоксикарбонил-пиперидин- 4-ил)бутилоксифенил/пропионовой кислоты (1-4).

К соединению 1-3 (5 г, 8,79 ммоля), растворенному в абсолютном этаноле (150 мл), добавляют 10% Pd-C (0,5 г) и образовавшуюся суспензию гидрируют 12 ч под давлением водорода из баллона. Катализатор отфильтровывают и удалением растворителя в вакууме получают в виде масла соединение 1-4 (3,6 г).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) : 1-1,2 (2H, м), 1,22-1,55 (12H, м), 1,6-1,75 (4H, м), 2 (2H, ш.с), 2,68 (2H, т), 2,87 (1H, дд), 3,05 (1H, дд), 3,72 (3H, с), 3,93 (2H, т), 4,09 (2H, м), 6,82 (2H, д), 7,1 (2H, д).

Пример 4.

Метиловый эфир 2-s-(н-бутилсульфониламино)-3-/4-(N-трет- бутилоксикарбонилпиперидин-4-ил)-бутилоксифенил/пропионовой кислоты (1-8).

В 10 мл этилацетата растворяют соединение 1-4 (0,59 г, 1,36 ммоля), добавляют NaHCO₃(0,7 г, 8,68 ммоля) при перемешивании и при комнатной температуре с последующим прибавлением бутансульфонилхлорида (0,36 мл, 2,76 ммоля) и полученную смесь кипятят 26 ч. Охлажденную реакционную смесь фильтруют, концентрируют и очисткой остатка вытеснительной хроматографией на силикагеле с элюированием смесью гексан-EtOAc (4: 1) получают чистое соединение 1-8 (0,305 г).

R_f = 0,7 в смеси гексан-EtOAc (1:1), окрашивание нингидрином.

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) : 0,82 (3H, т), 1,05 (2H, ддд), 1,45 (9H,с), 1,1-1,6 (1H, м), 1,7 (4H, м), 2,6 (2H,т), 2,6-2,8 (2H, м), 2,78 (1H, дд), 3,05 (1H, дд), 3,7 (3H, с), 3,93 (2H, т), 4,05 (2H, ш.д.), 4,15 (1H, дд), 6,85 (2H, д), 7,15 (2H, д).

Пример 5.

Гидрохлорид 2-s-(н-бутилсульфониламино)3-/4-(пиперидин-4-ил) бутилоксифенил/пропионовой кислоты (1-9).

В смеси CH₃OH-H₂O-ТГФ (1:1:1) растворяют соединение 1:8 (0,325 г, 0,59 ммоля) и к раствору добавляют LiOHH₂O(0,157 г, 3,76 ммоля). Полученный раствор перемешивают 3 ч при комнатной температуре, затем концентрируют, разбавляют 10% KHSO₄ и экстрагируют EtOAc. В результате получают 2-s-(н-бутилсульфониламино)-3-/4-(N-трет-бутилоксикарбонилпиперидин -4-ил)бутилоксифенил/пропионовую кислоту. Полученную кислоту (0,315 г, 0,59 ммоля) растворяют в EtOAc (20 мл) и обрабатывают 15 мин при -20^oC газообразным HCl. Затем реакционную смесь перемешивают 1 ч при -5^oC, и за это время происходит полное исчезновение исходного продукта. Через реакционную смесь пробулькивают аргон и после удаления растворителя получают остаток, переосаждением которого из эфира получают в виде бледно-желтого твердого вещества соединение 1-9.

¹H-ЯМР (300 МГц, CD₃OD) : 0,85 (3H, т), 1,2 (2H, дд), 1,2-1,7 (9H, м), 1,7 (2H, м), 1,95 (2H, ш.с.), 2,65 (2H, т), 2,8 (1H, дд), 2,95 (2H, ш.т.), 3,1 (1H, дд), 3,83, (2H, ш.с.), 3,95 (2H, т), 4,1 (1H, дд), 6,85 (2H, д), 7,2 (2H, д).

Анализ для C₂₂ H₃₆N₂O₅SHCl0,8H₂O.

Вычислено: C 53,76; H 7,92; N 5,70.

Найдено: C 53,76; H 7,66; N 5,44.

Пример 6.

Метиловый эфир 2-s-(бензилсульфониламино)-3-/4-(N-трет-бутилоксикарбонилпиперидин -4-ил)бутилоксифенил/пропионовой кислоты (1-10).

Соединение 1-4 (0,59 г, 1,36 ммоля) обрабатывают бензилсульфонилхлоридом (0,263 г, 1,38 ммоля) по вышеприведенной методике получения соединения 1-8. Сырой продукт реакции очищают вытеснительной хроматографией на силикагеле с элюированием смесью гексан-EtOAc (3: 1) и получением в виде масла чистого соединения 1-10 (0,35 г).

¹H-ЯМР (300 МГц, CD₃OD) : 0,85-1,1 (2H, м), 1,1-1,23 (2H, м), 1,35-1,52 (11H, м), 1,61-1,8 (4H, м), 2,65-3 (4H, м), 3,65 (3H,c), 3,9-4,14 (5H, м), 6,85 (2H, д), 7,08 (2H, д), 7,22 (2H, м), 7,3 (3H, м).

Пример 7.

Гидрохлорид 2-s-(бензилсульфониламино)-3-/4-(пиперидин-4-ил)бутилоксифенил/пропионовой кислоты (1-11).

Обработкой соединения 1-10 (0,354 г, 0,6 ммоля) LiOH (0,15 г, 3,7 ммоля) по методике, приведенной для получения соединения 1-8, получают в виде вязкого масла 2-s-(бензилсульфониламино)-3-/4-(N-трет-бутилоксикарбонилпиперидин-4-ил) бутилоксифенил/пропионовую кислоту (0,35 г).

¹H-ЯМР (300 МГц, CD₃OD) : 0,84-1,06 (3H, м), 1,23 (4H, м), 1,34-1,5 (11H, м), 1,6-1,78 (5H, м), 2,65 (2H, ш. т. ), 2,82 (1H, м), 3,02 (1H, м), 3,91 (2H, м), 3,96-4,12 (5H, м), 6,83 (2H, д), 7,15 (2H, д), 7,22 (2H, м), 7,29 (3H, м).

Полученную кислоту (0,35 г, 0,6 ммоля) растворяют в 20 мл EtOAc и обрабатывают газообразным HCl по методике, приведенной для синтеза соединения 1-9, с получением чистого соединения 1-11 (0,3 г) в виде белого твердого вещества.

¹H-ЯМР (300 МГц, CD₃OD) : 1,32 (4H, м), 1,4-1,65 (3H, м), 1,72 (2H, м), 1,92 (2H, д), 2,77-3,08 (4H, м), 3,33 (3H, м), 3,95-4,14 (5H, м), 6,86 (2H, д), 7,17 (2H, д), 7,28 (2H, м), 7,31 (3H, м).

Метиловый эфир 2-s-(2-стирилсульфониламино)-3-/4-(N-трет-бутилоксикарбонилпиперидин-4-ил) бутилоксифенил/пропионовой кислоты (1-12).

Соединение 1-4 (0,647 г, 15 ммолей) растворяют в этилацетате (20 мл), добавляют NaHCO₃ (0,454 г, 5,4 ммоля) с последующим прибавлением -стиролсульфонилхлорида (0,365 г, 18 ммолей) и полученную реакционную смесь кипятят с перемешиванием 16 ч. Охлажденную реакционную смесь фильтруют, растворитель удаляют и очисткой остатка вытеснительной хроматографией на силикагеле с элюированием смесью гексан-этилацетат (3:1) получают чистое соединение 1-12.

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) : 1,1 (2H, м), 1,3-1,55 (14H, м), 1,65-1,8 (4H, м), 2,68 (2H, т), 3,01 (2H, дт), 3,62 (3H, с), 3,88 (2H, т), 4,09 (2H, м), 4,22 (1H, м), 4,98 (1H, д), 6,45 (1H, д), 6,8 (2H, д), 7,06 (2H, д), 7,4 (4H, с).

Гидрохлорид 2-s-(2-стирилсульфониламино)-3-/4-(пиперидин-4-ил) бутилоксифенил/пропионовой кислоты (1-13).

Соединение 1-12 (0,58 г, 0,97 ммоля) растворяют в 15 мл смеси ТГФ-H₂O-МeOH (1:1:1), добавляют гидроксид лития (0,12 г, 5 ммолей) и полученный прозрачный раствор перемешивают в течение ночи при комнатной температуре.

Реакционную смесь разбавляют 75 мл H₂O, подкисляют до pH 2-3 добавлением 10%-ного раствора KHSO₄ и затем экстрагируют EtOAc (350 мл). Органический экстракт сушат, растворитель удаляют и очисткой остатка вытеснительной хроматографией на силикагеле с элюированием смесью CHCl₃-MeOH-HOAc (97:3:1) получают целевую кислоту (R_f = 0,2).

Полученную кислоту растворяют