Производные азотистого иприта, связанные с аминокислотами, которые являются пролекарственными субстратами для ферментов карбоксипептидазы, способ их получения, фармацевтическая композиция и двухкомпонентная система для доставки цитотоксического лекарства

Реферат

 

Изобретение касается новых соединений формулы I, где R1 и R2 каждый независимо представляет хлор, бром, иод или OSO2Me; R1a и R2b - водород; R3 и R4 - водород; R5a и R5b -водород, C1-4-алкил, галоид; R5a и R5b вместе -СН= СН-СН= СН-; R5c и R5d - водород, циано, галоид; Х представляет O, NH, -СН2-; Y представляет O; Z представляет -V-W, где V представляет -СН2Т-, в которой Т представляет -CH2- или -S-; W представляет СООН, -(С=O)NR7R8, где R7 - водород, C1-6-алкил и др.; R8- водород, и их соли. Способ получения соединений формулы I заключается в удалении защиты у соединения формулы Iа. Предложены фармацевтическая композиция, содержащая эффективное количество соединения формулы I, а также двухкомпонентная система доставки цитотоксического лекарства, содержащая антитело или его фрагмент, способные связывать определенный антиген, причем антитело или его фрагмент конъюгированы с энзимом СРG, способным превращать соединение формулы I или его соль в цитотоксическое лекарство, и содержит дополнительно соединение формулы I или его соль, превращаемые под действием энзима СРG в цитотоксическое лекарство. 4 c. и 12 з.п ф-лы, 18 табл., 1 ил.

Изобретение относится к соединениям, которые можно использовать в пролекарственной терапии под действием ферментов, направляемых антителами, так называемой ADEPT - терапии, способам их получения, содержащим их фармацевтическим композициям и способам их применения, а также к двухкомпонентным системам, содержащим 1) конъюгат энзима и антитела или фрагмента антитела и 2) соединение настоящего изобретения. Эти соединения представляют особый интерес как пролекарства для использования вместе с энзимами карбоксипептидазы G, особенно карбоксипептидазы G2 (CPG2).

Были раскрыты многие цитотоксические соединения, которые находят эффективное применение в химиотерапии раковых заболеваний.

Азотистые иприты представляют одно важное семейство таких цитотоксических соединений. Клинические применение цитотоксических соединений, в целом, и азотистых ипритов, в частности, было ограничено из-за малой селективности цитотоксического действия на опухолевые и нормальные клетки.

Один из подходов к решению этой проблемы состоит в разработке так называемых пролекарств, которые представляют собой производные этих цитотоксических лекарств, и часто весьма простые производные, цитотоксические свойства которых значительно ниже, чем у исходных лекарств. Было предложено введение таких пролекарств пациентам в определенных режимах за счет чего пролекарство превращается в цитотоксическое лекарство только в участке, где оно должно действовать.

Один из подходов включает связывание исходного цитотоксического азотистого иприта с аминокислотой с образованием пролекарства, которое можно превратить в исходный азотистый иприт в участке, где он должен действовать, под действием энзима. Этот подход можно внедрить в практику за счет использования конъюгата антитело/энзим в ассоциации с пролекарством. Конъюгат-антитело/ энзим образуется из антител, селективных к опухолям, и энзима, который впоследствии превращает пролекарство в цитотоксическое лекарство. В клинической практике конъюгат антитело/энзим вначале вводят пациенту и предоставляют ему связываться с опухолью. После соответствующего промежутка времени, в течение которого конъюгат антитело/энзим выводится из остальных частей организма, пролекарство вводят пациенту. Превращение пролекарства под влиянием локализованного энзима в цитотоксическое лекарство происходит, главным образом, в области опухоли. Такая система описана в международной заявке PCT/GB88/00181, опубликованной как WO88/07378 и как патент США N 4975278.

Известные пролекарства для ADEPT-терапии, расщепленные под действием CPG приводят к образованию ароматических производных азотистого иприта в виде их активных лекарственных форм. Однако существует необходимость в более активных лекарствах, получаемых при CPG расщеплении для повышения терапевтической эффективности против опухолевых клеток. Необходимо также повысить селективность ADEPT терапии с CPG, то есть, степень токсичности по отношению к опузолевым клеткам по сравнению со здоровыми клетками.

Настоящее изобретение основано на обнаружении новых пролекарств для применения в ADEPT терапии, которые расщепляются под действием CPG, и которые приводят к получению гораздо более активных цитотоксических лекарств, нежели известные продукты реакций, катализируемых CPG. CPG в природе действует как фолат-разлагающий энзим, который специфически гидролизует глутаминовую и аспарагиновую кислоты в производные фолата /Sherwood, P.F. et al., Eur. J. Biochem. /1085/, 148, 447-453/. Энзимы карбоксипептидазы G не распознают неклассические аналоги фолатов /Kalghatgi, K.K.et.al., Cancer Research /1979/, 39, 3441-3445/, и поэтому считаются консервативными в специфичности субстратов. Неожиданно оказалось, что пролекарства настоящего изобретения представляют собой субстраты для CPG энзимов, таких как CPG1, но особенно для CPG2 энзимов. CPG2 представляет собой экзопептидазу, которая специфична для L - глутамата. Известно, что она гидролизует фрагмент глутаминовой кислоты из фолиевой кислоты и ее аналогов, и глутамил-р-аминобензойной кислоты за счет расщепления по -CO-NH- части структуры - ароматическое кольцо -CO-NH-Glu. В настоящем изобретении этой частью структуры для сравнительных целей является -ароматическое кольцо -X-CO-NH-Glu, где X представляет -NH-, -O- или -CH2-; изменяя, тем самым, расстояние между точкой расщепления и ароматическим кольцом, а также изменяя распределение электронной плотности по связи -CO-NH-, особенно, если X представляет NH или O. При этом нельзя предсказать, как CPG2 распределит эти пространственные и электронные различия. Соединения, в которых X представляет -CH2-, раскрыты в Chemical Abstracts 75/5/ 2 августа 1971, абстр.N 36603 м, и у Карпавикус с сотр. Изв. Академии Наук СССР, сер. хим.N 91970, 2150-2153 /см.соединения VI, VIII, IX и XI в таблице 1/.

В соответствии с одной из особенностей настоящего изобретения предложены соединения формулы I, которые являются пролекарственными субстратами для CPG энзимов.

где R1 и R2 каждый независимо представляет хлор, бром, иод, OSO2Me, или OSO2 фенил, где фенил необязательно замещен 1, 2, 3, 4 или 5 заместителями, независимо выбранными из C1-4- алкила галоида, -CN или -NO2/; R1a и R2a каждый независимо представляет водород, C1-4-алкил или C1-4-галоидалкил; R3 и R4 каждый независимо представляет водород, C1-4-алкил или C1-4- галоидалкил; R5a, R5b и R5d каждый независимо представляет водород, C1-4-алкил, необязательно содержащий одну двойную или одну тройную связь, C1-4-алкокси, галоид, циано, -NH2, -CONR7R8/ где R7 и R8 имеют указанные ранее значения/, -NH/C1-4- алкил/, -N/C1-4-алкил/2 и C2-5- алканоил; или R5a и R5b вместе представляют a/ C4-алкилен, необязательно содержащий одну двойную связь; b/ C3 алкилен; или c/ -CH= CH-CH=CH-, -CH=CH-CH2- или -CH2-CH=CH- каждый необязательно замещенный 1,2,3 или 4 заместителями, причем каждый из указанных заместителей выбирают из группы, состоящей из C1-4-алкила, C1-4-алкокси, галоида, циано, нитро, C2-5-алканоила и -CONR7R8/ где R7 и R8 имеют указанные ранее значения/; X представляет O, NH или -CH2-; Y представляет O; Z представляет -V-W, где V представляет -CH2-T-, где T представляет -CH2-, -O-, -S-, -/SO/- или -/SO2/- при условии, что если V содержит серу или кислород в качестве второго атома, W отличается от -COOH/, а указанная группа необязательно содержит, кроме того один или два заместителя Q1 и/или Q2 у атома углерода, где Q1 и Q2 каждый независимо представляет C1-4-алкил или галоид; или, если Q1 и Q2 связаны с соседними атомами углерода, Q1 и Q2 вместе могут дополнительно представлять C3-C4-алкиленовый радикал, необязательно замещенный 1,2,3 или 4 заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из C1-4 алкила и галоида; а W представляет /1/ COOH, /2/-/C=O/-O-R6, где R6 представляет C1-6-алкил, C3-6-циклоалкил или арил /как указано в пункте 3 далее/; /3/ -/C=O/-NR7R8, где R7 и R8 каждый независимо представляет водород или C1-6-алкил, C3-6-циклоалкил, арил, гетероарил, связанные с атомом азота через углерод, или C7-9-аралкильную группу, где арил представляет фенил; гетероарил является 5 или 6 членным кольцом, содержащим 1-3 гетероатома, выбранные из группы, состоящей из атома и серы; арильный фрагмент per se, гетероарильный фрагмент и арильный фрагмент арильной группы могут быть замещены по углероду 1-4 заместителями, выбранными из группы, состоящей из -COOH, OH, -NH2, -CH2-NH2, -/CH2/1-4-COOH, тетразол-5-ил и -SO3H, и алкильный фрагмент может необязательно содержать метильную группу; /4/ - SO2NHR9, где R9 имеет значения, указанные для R7, но может дополнительно представлять -CF3, -CH2CF3 или арил, как указано ранее; /5/ SO3R10, где R10 представляет H, C1-6-алкил или C3-6-циклоалкил, /6/ PO3R10, R10, где радикалы R10, которые могут быть одинаковы или различны, имеют указанные ранее значения, /7/ группу тетразолил-5-ила; /8/ -CONH-SO2R11, где R11представляет /a/ C3-7 циклоалкил; /b/ C1-6-алкил, необязательно замещенный заместителями, выбранными из группы, состоящей из арила в соответствии с приведенными ранее определениями, C1-4-алкила, CF3 или галоида; и /c/ перфтор-C1-6-алкил; где арил представляет фенил, или фенил с 1-5 заместителями, где эти заместители выбирают из группы, состоящей из галоида, -NO2, -CF3, C1-4-алкила, C1-4-алкокси, -NH2, -NHCOCH3, -CONH2, -OCH2COOH, -NH/C1-4-алкила/, -N/C1-4-алкила/2, -NHCOOC1-4-алкила, -OH, -COOH, -CN и -COOC1-4-алкила; и /9/ -M-Неt, где M представляет S, SO или SO2, а Нет представляет 5-6-членное гетероциклическое ароматическое кольцо, связанное с M через атом углерода ароматического кольца, причем указанное ароматическое кольцо содержит 1,2,3 или 4 гетероатама, выбранные из группы, состоящей из O, N и S, причем указанное ароматическое кольцо необязательно замещено по атомам углерода кольца 1, 2, 3 или 4 заместителями, выбранными из группы, состоящей из -OH, -SH, -N, -CF3, NH2 и галоида; и соли указанных соединений формулы I.

Соединения формулы I содержат по крайней мере один асимметричный атом углерода, то есть атом углерода с заместителем -COOH в формуле I. Более того, в зависимости от значений R1, R2, R3, R4, Q1 и Q2, соединения формулы I могут иметь дополнительные асимметричные атомы углерода. Следует учитывать, что настоящее изобретение включает все такие формы соединений формулы I, включая рацемические формы, а также отдельные оптические изомеры, которые обладают полезными физиологическими свойствами указанных ранее композиций настоящего изобретения; причем специалистам известно, как можно разделить такие изомеры и как можно определить их физиологические свойства. Соединения настоящего изобретения, предпочтительно, имеют L-конфигурацию у атома углерода, который замещен -COOH в формуле I.

Настоящее изобретение включает соли соединений формулы I. Следует, однако, учитывать, что для фармацевтического использования указанные соли должны быть фармацевтически приемлемыми, но и другие соли могут найти применение, например, при получении соединений формулы I и их фармацевтически приемлемых солей. Можно получить полиморфные формы соединений настоящего изобретения, и эти формы также включены в объем изобретения.

Если относительно какого-либо заместителя указано, что он представляет или содержит алкильную группу, то такая группа может быть разветвленной или неразветвленной. Если относительно какого-либо заместителя указано, что он представляет или содержит C1-6-алкильную группу, то желательно, чтобы такая группа содержала 1 - 4 атома углерода, и была, например, метилом, этилом, н-пропилом или изопропилом, предпочтительно метилом или этилом, но наиболее предпочтительно метилом. Если относительно какого-либо заместителя указано, что он представляет или содержит C1-4-алкильную группу, то такая группа может быть, например, метилом, этилом, н-пропилом или изопропилом, предпочтительно метилом или этилом, но наиболее предпочтительно метилом.

Предпочтительными значениями для R1 и R2 являются I, Br, Cl, OSO2Me и OSO2фенил, где фенил замещен 1 или 2 /особенно 1/ заместителями /определенными ранее/ в 2- или 4-положениях. Наиболее предпочтительными значениями для R1 и R2 являются I, Br, Cl и -OSO2Me. Предпочтительными значениями для R1a и R2a являются -CH3 или водород, но предпочтительно водород.

Предпочтительными значениями для R3 и R4 являются водород, метил и CF3, но особенно водород.

Предпочтительными значениями для R5a-d являются водород, фтор, хлор, метил, -CONH2 и CN. Если фенильное кольцо замещено так, что, по крайней мере один из R5a, R5b, R5c и R5d отличен от водорода, тогда предпочтительно, чтобы только один или два из R5a, R5b, R5c и R5d были отличны от водорода. В таких случаях предпочтительно далее, чтобы R5b и R5d были водородами, и, чтобы R5a и/или R5c отличались от водорода. Однако наиболее предпочтительно, чтобы R5a-b были водородами.

Предпочтительно чтобы X представлял O или N, особенно O. В другом варианте изобретения наиболее предпочтительно, чтобы X представлял N.

Предпочтительное значение для V составляет -CH2-CH2-. В другом варианте изобретения предпочтительное значение для V, если W представляет тетразол-5-ил, составляет -CH2-S-.

Если W представляет группу, определенную в пункте 3, арил, предпочтительно, представляет замещенный фенил, и гетероарил, предпочтительно, представляет 5 или 6-членное кольцо, содержащее 1 или 2 гетероатома, причем предпочтительно чтобы этими гетероатомами был азот, а гетероарил представлял бы пиридил или пиримидил. Предпочтительными заместителями на арильном фрагменте per se, гетероарильном фрагменте или аралкильном фрагменте аралкильной группы являются -COOH, -CH2-COOH, или тетразол-5-ил.

Если W представляет группу, определенную в пункте 8/b/, где W представляет C1-6-алкильную группу, необязательно замещенную арилом, необязательно замещенная арильная группа, предпочтительно, представляет фенил, замещенный -CONH2, -CH2-COOH и/или -COOH, но наиболее предпочтителен незамещенный фенил.

Если W представляет группу, определенную в пункте /9/, предпочтительно, чтобы Het представлял 5- или 6-членное ароматическое кольцо, содержащее 1, 2, 3 или 4 атома азота. Предпочтительно, чтобы азот был единственным гетероатомом в кольце. Таким образом конкретные группы включают пиридил, пирролил, 1,2,3-триазинил и 1,2,4-триазинил.

Конкретные значения для W представлены в определениях 1, 2, 3, 7, 5, 6 и 9 и предпочтительные в пунктах 1, 2, 3, 7 и 9. Более конкретные значения для W представлены: -COOH, -CONH2, -CONHR8 /где R8 имеет указанные ранее значения, и особенно, если R8 представляет фенил/, тетразол-5-ил, -CONH-SO2R11 /где R11 представляет определения /b/ и /c/, как указано ранее/ и группой -M-Het /где M представляет S, а Het представляет 5-членное гетероциклическое ароматическое кольцо с 3 или 4 гетероатомами, необязательно замещенными по углероду, где гетероциклическое кольцо содержит 3 гетероатома, атомом галоида или цианогруппой/.

Если W представляет -CONH-SO2R11, где R11 представляет перфтор-C1-6-алкильную группу, перфторалкильная группа, предпочтительно, содержит 1 - 4 атома углерода, особенно 1 или 2 атома углерода.

Более конкретные значения для W представляют -COOH, тетразол-5-ил или -CONH/арил/ /при этом арил определен в п. 3 ранее/. В рассматриваемом контексте арил представляет, предпочтительно, замещенный фенил, а предпочтительными заместителями являются -COOH, -CH2-COOH или тетразол-5-ил.

Предпочтительные конкретные соединения настоящего изобретения с точки зрения их применимости в АДЕРТ, включают: /S/-2-/4-бис/-2-хлорэтил/амино/феноксикарбониламино/-4-/1Н- 1,2,3,4-тетразол-5-ил/масляную кислоту и ее соли; N-/4-бис/2-хлорэтил/амино/-3-фторфенилкарбамоил/-L-глутаминовую кислоту и ее соли; N-/4-/бис/2-хлорэтил/амино/фенилкарбамоил/-L-глутаминовую кислоту и ее соли; но наиболее предпочтительным соединением изобретения является N-/4-/бис/2-хлорэтил/амино/феноксикарбонил/-L-глутаминовая кислота и ее соли.

Другим предпочтительным соединением, которое, как было показано, обладает высокой активностью в тестах, является N-4-/бис/-2-иодоэтил/амино/феноксикарбонил/-L-глутаминовая кислота и ее соли.

Конкретные подгруппы соединений настоящего изобретения, представляющих интерес, можно получить, выбирая любое из вышеуказанных конкретных или общих определений для R1-R4, R5a-d, X, Y, W, Q1 или Q2, либо отдельно, либо в сочетании с любым другим конкретным или общим определением для R1-R4, R5a-d, X, Y, W, Q1 или Q2.

Кроме того, лекарства, полученные в результате CPG расщепления тестовых соединений настоящего изобретения для осуществления АДЕРТ, менее стабильны в физиологических условиях, нежели известные лекарственные продукты CPG2 катализируемых реакций. Уменьшение стабильности приводит к снижению токсичности по отношению к здоровым клеткам, нежели в том случае, когда лекарство стабилизируется аналогично известным продуктам CPG катализируемых реакций для АДЕРТ, если часть активного лекарства, полученного в области опухоли, перемещается в общую циркуляцию. Так проведенные тесты продемонстрировали, что даже после внутривенного введения лекарства /то есть, активного лекарства, не пролекарства/, через 15 мин лекарство не обнаруживается в плазме.

Соединения настоящего изобретения образуют соли с различными органическими и неорганическими кислотами и основаниями, и такие соли входят в объем настоящего изобретения. Эти соли включают аммонийные соли, такие соли щелочных металлов, как соли натрия и калия, такие соли щелочноземельных металлов, как соли кальция и магния, соли органических оснований; например, соли дициклогексиламина, N-метил-D-глюкамина, соли таких аминокислот как аргинин, лизин, и т.п. Можно также получить соли органических и неорганических кислот, например, HCl, HBr, H2SO4, H3PO4, метансульфоновой, толуолсульфоновой и камфорсульфоновой кислот. Предпочтительными кислотами являются сильные кислоты со значениями pKa, менее или равными 2, и, особенно, со значениями pKa, менее или равными 1. Предпочтительны физиологически приемлемые соли, хотя могут быть полезны и другие соли; например при выделении или очистке продукта.

Соли можно получать обычными способами, например, осуществляя взаимодействие форм свободной кислоты или свободного основания продукта с одним или более эквивалентами соответствующего основания или кислоты в растворителе, или в такой среде, в которой эта соль не растворяется, или в таком растворителе, как вода, которую затем удаляют в вакууме или сушкой вымораживанием, или заменяя катионы имеющейся соли на другой катион на подходящей ионообменной смоле.

В соответствии с еще одной отличительной особенностью изобретения предложен способ получения соединений формулы I и их солей, который включает удаление защиты у соединения формулы Ia /где R1, R2, R1a, R3, R4, R5a, R5b, R5c, R5d; X, Y, Q1 и Q2 имеют указанные ранее значения, а Z1 представляет указанные ранее для Z значения, при условии, что если W представляет карбоксильную группу, она представлена в защищенной форме /обозначается Pr2/, и Pr1 также представляет карбоксильную группу в защищенной форме /которая может быть одинакова или может отличаться от Pr2/, и при желании, превращение с полученного таким образом соединения формулы I в его соль.

Pr1 и Pr2 могут быть представлены, например, бензилоксикарбонильными группами, трет-бутоксикарбонильными группами, 2-/триметилсилил/этиловым сложным эфиром, диметил-трет-бутилсилиловым сложным эфиром, тетрагидропирановым сложным эфиром, тетрагидрофурановым сложным эфиром, метоксиметиловым сложным эфиром или бензилоксиметиловым сложным эфиром или другими общеизвестными карбоксизащитными группами, например, группами, образующими сложные эфиры, для удаления защиты галогенолизом или в результате кислотного катализа (Greene, T.W. и Wuts. P.G.M. в Protective Groups in Organic Synthesis, 2nd. Edition, Wiley-Ynterscience, 1990).

Если Pr1 и/или Pr2 представляют бензилоксикарбонильную группу, удаление защиты предпочтительно осуществлять гидрированием. Такое гидрирование можно осуществить любым удобным способом, например, в присутствии платины или никеля Рэнея, но предпочтительно использовать палладий на угле. Гидрирование удобно вести в присутствии инертного растворителя, предпочтительно, непротонного растворителя, особенно этилацетата, тетрагидрофурана, или такого полярного апротонного растворителя, как диметилформамид, предпочтительно, при температуре 0-100oC, более предпочтительно при температуре 15 - 50oC, и наиболее предпочтительно при комнатной температуре; и предпочтительно в течение 1 - 24 ч.

Если Pr1 и/или Pr2 представляет трет-бутоксикарбонильную группу, реакцию удаления защиты удобно вести в присутствии кислоты, особенно такой сильной кислоты, как трифторуксусная кислота, HCl, HBr, HJ или муравьиная кислота. Если нужно использовать растворитель, предпочтительны такие инертные непротонные растворители, как CH2Cl2 или диэтиловый эфир. Обычно реакцию ведут при температуре 0 - 100oC, обычно при 0 - 30oC, и обычно при комнатной температуре.

Соединения формулы Ia /как было указано ранее/ и их соли являются новыми, и, таким образом, составляют следующую отличительную черту изобретения.

Следующей отличительной чертой изобретения является создание способа получения соединений формулы Ia, где X = 0, и Y = 0, и их солей, который включает осуществление взаимодействия соединения формулы II: (где R1, R2, R1a, R2a, R3, R4, R5a, R5b, R5c и R5d имеют указанные ранее значения, X = 0, Y = 0, а Z представляет отщепляемый атом или группу) с соединением формулы (где Pr1 и Z1 имеют указанные ранее значения), в результате чего получают соединение формулы Ia, и, при желании, превращение соединения формулы Ia в его соль. Желательно, чтобы L представлял Cl, Br, J, 4-нитрофенокси или пентафторфенокси. Реакцию удобно вести в присутствии растворителя при температуре от -10 до 100oC, и, предпочтительно, при температуре 20 - 50oC.

Предпочтительно вести реакцию в органическом растворителе /особенно хлороформе, этилацетате, толуоле, диметилформамиде и CH2Cl2/, предпочтительно при 5 - 50oC, предпочтительно в течение 1 - 24 ч. Соединения формулы /II/ составляют следующий аспект изобретения, причем эти соединения можно получить, например, осуществляя взаимодействие соответствующего фенола, содержащего группу хлорэтиланилина, либо с арилхлорформатом, например нитрофенилхлорформатом /особенно, 4-нитрофенилхлорформатом/ или с фосгеном, в результате чего получают соединение формулы /II/.

Предпочтительно вести реакцию в присутствии органического растворителя /особенно этилацетата или хлороформа/, предпочтительно при 15 - 50oC /особенно при комнатной температуре/, предпочтительно в течение 1 - 10 ч.

Соединения формулы /III/, где W представляет группу /3/, как было указано ранее, можно получить из соединений формулы /III/, где W представляет группу /2/, как указано ранее, используя стандартные условия. Предпочтительные стандартные условия включают реакцию с азотсодержащими нуклеофильными соединениями /особенно с аммиаком или первичным или вторичным амином/, предпочтительно, при 25 - 30oC, предпочтительно в течение 24 ч.

Соединения формулы /III/, где W представляет тетразол-5-ильную группу, можно получить из соответствующего нитрила известными способами, например, по способу Finnegan, W.G. et al., JAC5 80, 1978, 3909 с последующим удалением защиты у амина /Pr3/, в результате чего получают соединения формулы /III/, где W представляет тетразол-5-ил.

Соединения формулы /III/, где W представляет группу /9/, как было указано ранее, можно получить, восстанавливая соединения формулы /XV/, как указано ранее, до соответствующего первичного спирта в стандартных условиях /особенно с использованием диборана, или реакции смешанного ангидрида с последующим восстановлением боргидридом натрия/. Соответствующий первичный спирт превращают стандартными способами, например, используя метансульфонилхлорид и триметиламин при 0oC в присутствии CH2Cl2 в такую отщепляемую группу, как Br, J или мезилат; причем эту отщепляемую группу замещают группой формулы /XVI/: HS - Het, (XVI) (где Het имеет указанные ранее значения для W = /9/), в результате чего после обработки в окислительных условиях получают соединения формулы: где ZIII представляет Z, как определено ранее, при условии, что W представляет -S-Het, -/S = O/-Het или -SO2-Het, а Pr1 и Pr3 представляют защищенные карбоксильные и -NH2 группы соответственно, как было определено ранее). Подходящие окислительные условия включают обработку окислительным агентом /особенно 3-хлорпербензойной кислоты/. Удаление защиты у -NH2 группы соединений формулы /XVII/ в стандартных условиях, как указано ранее, осуществляют с образованием соединения формулы /III/, где W представляет группу /9/, как определено ранее.

Следующей отличительной чертой настоящего изобретения является предложенный способ получения соединений формулы Ia, где X представляет N, а Y = 0, и их солей, который включает осуществление взаимодействия соединения формулы /IV/ (где R1, R2, R1a, R2a, R3, R4 и R5a-d имеют указанные ранее значения) или их солей с соединением формулы /III/, как определено ранее, в результате чего получают соединение формулы Ia, и, при необходимости, превращение соединения формулы Ia в его соль. Реакцию можно вести, например, в органическом растворителе/предпочтительно, полярном апротонном, особенно CH2Cl2 или этилацетате/, предпочтительно, при комнатной температуре, предпочтительно, в течение 1 - 5 ч.

В соответствии со следующей отличительной чертой изобретения предложен способ получения соединений формулы /IV/ и их солей, который включает осуществление взаимодействия соединения формулы /V/, где R1, R2, R1a, R2a, R3, R4 и R5a-d имеют указанные ранее значения/ с соединением формулы L1 - /C=O/ - L2/ где L1 и L2 представляют отщепляемые группы/, в результате чего получают соединение формулы /IV/. Значения для L1 и L2 включают Cl, CCl3, имидазолил и арилокси /особенно фенокси/. Предпочтительные условия реакции включают проведение реакции в органическом растворителе /предпочтительно, полярном апротонном растворителе, особенно в этилацетате/ при 5 - 25oC в течение 15 мин.

В особенности со следующей отличительной особенностью настоящего изобретения предложен способ получения соединений формулы /Ia/, как определено ранее, где X представляет -CH2-, а Y = O, и их солей, который включает: осуществление взаимодействия соединения формулы /II/ или его соли, как указано ранее, при условии, что X представляет -CH2-, Y = O, а L желательно представляет пентафторфенокси, Cl, -O-/CO/-C1-6-алкил, предпочтительно, разветвленный алкил, особенно C1-4-алкил, а продукт соответствующего фенилуксусную кислоту содержащего анилинового производного иприта, прореагировашего с карбодиимидом /особенно с дициклогексилкарбодиимидом/; с соединением формулы /III/ как определено ранее, используя стандартные условия реакции /например, осуществляя реакцию в присутствии полярного апротонного растворителя, такого как диметилформамид, этилацетат или тетрагидрофуран, в течение 1 - 24 ч при 20 - 50oC/ в результате чего получают соединение формулы /Ia/, и при необходимости превращения соединения формулы /Ia/ в его соль. Соединения формулы /II/ можно получить, используя стандартные способы, из соответствующих фенилуксусных кислот, содержащих анилино-ипритные группы.

В соответствии со следующим аспектом изобретения предложен способ соединения формулы /Ia/, как определено ранее, где W представляет группу /8//, то есть, -CONH-SO2R11/, или его соли, который включает: осуществление взаимодействия соединения формулы /III/, как определено ранее, при условии, что W представляет только группу /8/; с соединением формулы /II/, как определено ранее, в условиях реакции известных per se, за счет чего получают соединение формулы /Ia/, где W представляет группу /8/, и, при желании, превращение соединения формулы /Ia/ в его соль. Предпочтительные условия реакции включают проведение реакции в присутствии органического растворителя /предпочтительно, полярного апротонного растворителя, особенно этилацетата или дихлорметана/, предпочтительно, при 5 - 50oC /особенно при комнатной температуре/, предпочтительно, в течение 1 - 5 ч.

Соединения формулы /III/ составляют следующий аспект настоящего изобретения, и эти соединения можно получить, удаляя защитную группу амина соединения формулы /где Pr1 представляет карбоксильную группу в защищенной форме, как определено ранее, Pr3 представляет -NH2 группу в защищенной форме, особенно бензилоксикарбонильное произвольное или фталимидо производное, а Z1 представляет Z, как определено ранее, при условии, что W представляет группу /8/ в условиях реакции, известных per se, в результате чего получают соединение формулы /III/, где W представляет группу /8/, и, при необходимости, превращение соединения формулы /III/ в его соль. Предпочтительные условия включают гидрирование в присутствии палладия на угле в органическом растворителе /предпочтительно, полярном апротонном, особенно в этилацетате или тетрагидрофуране/, предпочтительно, при комнатной температуре, и предпочтительно в течение 1 - 24 ч. Остальные предпочтительные условия реакции включают удаление защиты в присутствии HBr в уксусной кислоте, предпочтительно при комнатной температуре, предпочтительно, в течение 1 - 24 ч.

Соединения формулы /XI/ можно получить, осуществляя взаимодействие соединения формулы (где Pr1 и Pr3 имеют указанные ранее значения, а Z11 представляет Z, как указано ранее, при условии, что W представляет только COOH/; с соединением формулы R11SO2NH2, где R11 имеет указанные ранее значения в W = /8/, в результате чего получают соединение формулы /XI/ в стандартных реакционных условиях. Стандартные условия включают проведение реакции в инертном растворителе /особенно в дихлорметане/ в присутствии карбодиимида /особенно дициклогексилкарбодиимида/, и основания /особенно 4//N,N-диметиламино/пиперидина.

В соответствии со следующим аспектом настоящего изобретения предложен способ получения соединений формулы /I/, где W представляет следующие группы /определенные ранее/: /4/ /то есть, -SO2NHR9/, /5/, /то есть, -SO3R10/ и /6/ /то есть -PO3R10R10/ причем способ этот включает осуществление взаимодействия соединения формулы: (где ZIII представляет Z, как определено ранее, при условии, что W представляет следующие группы /определенные ранее/: /4/ /то есть = SO2NHR9, /5/ /то есть - SO3R10/ и /6/ /то есть -PO3R10R10//; с соединениями формулы /II/ /как определено ранее, в стандартных условиях; или с соединениями формулы /Y/ /как определено ранее/ в стандартных условиях; в результате чего получают соединение формулы /I/, где W представляет группу /4/, /5/ и /6/, и, при необходимости, превращение соединения формулы I в его соль. Стандартные условия включают проведение реакции с основанием /особенно с триэтиламином/ в присутствии органического растворителя /предпочтительно, апротонного, полярного, особенно дихлорметана/, предпочтительно при комнатной температуре. Соединения формулы /XVIII/ известны /доступны от Sigma Chemical Co/ или их можно получить из известных соединений стандартными способами.

В соответствии с еще одной отличительной особенностью настоящего изобретения предложен способ получения соединения формулы /Ia/ /определенной ранее/, где X представляет N или O, Y представляет O, R1 и R2 представляют Cl, Br, J или OSO2Me /особенно Cl/, R1a представляет H, R2a представляет H, R3= H, а R4 = H, и их солей, который включает осуществление взаимодействия соединений соединения формулы /XIX/ (где R5a-d, Pr1 и Z1 имеют указанные ранее значения, а X = O или NH), либо с фосфорсодержащим галоидирующим агентом /особенно пентахлоридом фосфора/ или тионилхлоридом в присутствии органического растворителя/ предпочтительно неполярного апротонного, особенно CH2Cl предпочтительно, с нагреванием при кипении с обратным холодильником в течение 1 - 2 ч/ и особенно 90 мин/; или метилсульфонилхлоридом в присутствии органического растворителя /предпочтительно, полярного апротонного, особенно пиридина/, в результате чего получают соединение формулы /Ia/, где X = O или NH, Y представляет O, R1 и R2 представляет Br, I, OSO2Me или Cl, R1a = H, R2a = H, R3 = H и R4 = H, и, при необходимости превращение соединений формулы /Ia/ в их соли. Если используют метилсульфонилхлорид, гидроксильные группы в соединении формулы /XIX/ можно превратить либо в Cl либо / и OSO2Me в зависимости от используемой температуры реакции. Дихлорсоединения /то есть, R1 = R2 = Cl/ можно получить, проводя реакцию при 70oC в течение 15 мин; и соответствующее соединение, в котором R1 = Cl, R2 = OSO2Me можно получить, проводя реакцию при 50oC в течение 10 мин.

Если R1 и R2 представляют Br, а и R1 и R2 представляют J, метансульфонилангидрид предпочтительно, заменяют метансульфонил хлоридом, так как это снимает все проблемы конкуренции галоида в реакции. Соединение формулы XIX /0,002 М/ растворяют в CHCl3 /30 мл/. Триэтиламин /1,12 мл/ и метилсульфонилангидрид /0,008 М/ добавляют при комнатной температуре, полученную смесь перемешивают в течение 2 ч, а затем промывают водой. Полученный таким образом продукт сушат над сульфатом магния, фильтруют и выпаривают до масла. Это масло растворяют в сухом ДМФ и добавляют литийиодид /или бромид; 0,005/, перемешивают при 80oC в течение 2 ч, охлаждают, выливают в воду и экстрагируют эфиром. Полученный при этом продукт сушат над сульфатом магния, фильтруют, выпаривают досуха и очищают на хроматографической колонке с мгновенным испарением.

Соединения формулы /XIX/ можно получить при взаимодействии соединения формулы /XX/: (где R5a-d имеет определенные ранее значения, а R* поедставляет -N = C = O или -O-CO-Z, где Z представляет отщепляемую группу, как определено ранее) с соединением формулы /III/ /как определено ранее) до получения соединения формулы XXI: (где R5a-d, Pr1 и Z1 имеют указанные ранее значения, а X = O или NH/. Полученные таким образом соединения гидрируют /предпочтительно в присутствии палладия на угле/ до окончания соединения, соответствующего формуле /XXI/, но с -NH2 вместо -NO2.

Полученное таким образом соединение подвергают взаимодействию с этиленоксидом в водной кислоте /предпочтительно в смеси уксусная кислота /вода 1: 1/, предпочтительно в течение 1 - 2 дней, предпочтительно, при комнатной температуре, в результате чего получают соединение формулы /XIX/. Пример такого способа представлен на схеме 5.

Способ получения соединений формулы /I/, где W представляет группу тетразол-5-ила, включает осуществление взаимодействия соединения формулы XVIII (где ZIII представляет Z как определено р