Производные гликопептида или их соли, способ получения, фармацевтическая композиция

Производные гликопептида или их соли, способ получения, фармацевтическая композиция

Реферат

 

Описываются новые производные гликопептида общей формулы (I), где значения радикалов указаны в п.1 формулы изобретения, соединения являются новыми членами группы гликопептидных антибиотиков. Они проявляют широкую активность против грамположительных микроорганизмов, а также улучшенную противомикробную активность против устойчивых к ванкомицину изолятов. Описывается также способ получения вышеуказанных соединений, а также фармацевтическая композиция на основе соединений формулы (I). 7 с. и 12 з.п. ф-лы, 7 табл.

Существует постоянная потребность в новых усовершенствованных антибиотиках, в частности антибиотиков для лечения заболеваний человека. Повышенная активность, расширенный спектр ингибируемых бактерий, повышенная эффективность in vivo и улучшенные фармацевтические свойства - вот некоторые цели совершенствования антибиотиков.

В поисках новых антибиотиков, где только это было возможно, предпринимались попытки структурно модифицировать известные антибиотики. Гликопептидные антибиотики обладают столь сложным строением, что даже небольшие изменения в них затруднены. Кроме того, трудно предсказать, какой эффект окажут такие изменения на противомикробные и физиологические свойства. Таким образом, способы модификации известных антибиотиков и новые активные производные, полученные этими способами, и в настоящее время имеют большое значение.

Ранее были получены N-алкильные и N-ацильные производные таких гликопептидов, как ванкомицин, A51568A, A51568B, M43A и M43 (патенты США NN 4639433, 4643987 и 4698327). Некоторые из полученных соединений показали микробиологическую активность, в том числе активность и по отношению к устойчивым к ванкомицину изолятам. Nicas и др., Antimicrobial. Agents and Chemotherapy 33(9), 1477-1481 (1989). Кроме того, в заявке на Европейский патент, N публикации 0435503, опубликована 3 июля 1993 г. описаны определенные N-алкильные и N-ацильные производные A82846 гликопептидов, факторов A, B и C.

Соединения формулы 1 настоящего изобретения являются новыми членами группы гликопептидных антибиотиков. Эти новые соединения являются производными известных гликопептидных антибиотиков, в том числе: ванкомицина (патент США 3067099); А82846А, А82846В, А82846С (патент США 5312738, Европейская заявка, публикация 256071 A1); PA-42867 факторы A, C и D (патент США 4946941 и Европейская заявка, публикация 231,111 A2); A83850 (патент N 5187082); авопарцин (патент США 3338786 и патент США 4322343); актиноидин, известный также под шифром K288 (J. Antibiotics серия A, 14, 141 (1961)); хелевекардин (Chem. Abstracts 110, 17188 (1989) и заявка на патент Японии 89/221, 320) и M 47767 (Европейский патент, публикация 339982). Вышеперечисленные ссылки, в которых описаны указанные гликопептиды, включены в данное описание в качестве ссылок.

Enterococci относится к важным патогенам человека. Вызываемые Enterococci инфекции с трудом поддаются лечению. Гликопептиды, например: ванкомицин и тейкоплантин стали важными средствами лечения инфекций, вызванных Enterococci. Однако недавно выделены штаммы Enterococcus faecium и E. faecalis, отличающиеся устойчивостью к ванкомицину и тейкопланину. Leclercq и др., "Передаваемая плазмидой устойчивость к ванкомицину и тейкоплану у Enterococcus Faecium", The New England Journal of Medicine, 319(3), 157-161 (1988) и Uttley и др. , "Устойчивые к ванкомицину Enterococci", Lancet, 1, 57-58 (1988). Обнаружено также, что изоляты устойчивы и к другим антибиотикам. Недавними обследованиями больниц Соединенных Штатов выявлено, что в настоящее время 7,9% Enterococci обладают устойчивостью к ванкомицину. "Устойчивые к ванкомицину внутрибольничные Enterococci", Morbidity and Mortality Weekly Report, 42 (30, ), 597-598 (1993). Помимо своей широкой активности против грамположительных микроорганизмов многие гликопептидные соединения настоящего изобретения проявляют также улучшенную противомикробную активность против устойчивых к ванкомицину изолятов.

Настоящим изобретением даются соединения формулы I: или их соли, где X и Y каждый независимо представляет водород или хлор; R представляет водород, 4-эпи-ванкозаминил, R¹ представляет водород R² представляет -NHCH₃ R³ представляет -CH₂CH(CH₃)₂, R⁴ представляет -CH₂(CO)NH₂, R⁵ представляет водород, R⁶ представляет 4-эпи-ванкозаминил, R⁷ представляет (C₂-C₁₆)алкенил, (C₂-C₁₂)алкинил, (C₁-C₁₂-алкил)-R⁸, (C₁-C₁₂-алкил)галоген, (C₂-C₆)алкенил-R⁸, (C₂-C₆)-алкинил-R⁸, (C₁-C₁₂-алкил)OR⁸ и присоединен к амино-группе в R⁶; R⁸ выбирают из группы, включающей: a) полициклический арил, незамещенный или замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, включающей: (I) гидроксигруппу, (II) галоген, (III) нитрогруппу, (IV) (C₁-C₆)алкил, (V) (C₂-C₆)алкилоксигруппу, (VI) галоген (C₁-C₆)алкокси, (VII) группу формулы -S(O)n, R⁹, где n = 0 и R⁹ представляет (C₁-C₆)алкил; b) гетероарил, незамещенный или замещенный одним или несколькими заместителями, независимо выбранными из группы, включающей: (I) галоген, (II) (C₁-C₆)алкил, (III) (C₁-C₆)алкоксигруппу, (IV) фенил, (V) фенил, замещенный (C₁-C₆)алкилом, (C₂-C₆)алкокси, (VI) тиенил; с) группу формулы: где A¹ представляет -C(A²)₂ - C(A²)₂ - C(A²)₂-, и каждый A² заместитель независимо выбран из водорода, (C₁-C₆)алкила, (C₄-C₁₀)циклоалкила; d) группу формулы: где p = 1-5, и R¹¹ независимо выбран из группы, включающей: (I) нитрогруппу, (II) гидроксигруппу, (III) галоген, (IV) (C₁-C₈)алкил, (V) (C₁-C₈)алкоксигруппу, (VI) (C₂-C₉)алкинил, (VII) (C₉-C₁₂)алкоксигруппу, (VIII) (C₁-C₃)алкоксигруппу, замещенную (C₁-C₃)алкоксигруппой, гидроксигруппой или (C₁-C₄)алкилтиогруппой, (IX) (C₂-C₅)алкенилоксигруппу, (X) галоген-(C₁-C₆)алкоксигруппу, (XI) (C₂-C₆)алкилтиогруппу, (XII) (C₂-C₁₀)алканоилоксигруппу, (XIII) (C₁-C₃)алкилсульфонилоксигруппу, (XIV) карбокси-(C₁-C₃)алкил, (XV) N-/ди(C₁-C₃)алкил/амино- (C₁-C₃)алкоксигруппу, (XVI) циано-(C₁-C₆)алкоксигруппу, и (XVII) дифенил-(C₁-C₆)алкил, при условии, что когда R¹¹ представляет (C₁-C₈)алкил, (C₁-C₈)алкоксигруппу или галоген, p должно быть больше или равняться 2, или если R⁷ представляет (C₁-C₃)алкил-R⁸, тогда R¹¹ отличен от водорода, (C₁-C₈)алкила, (C₁-C₈)алкоксигруппы или галогена; e) группу формулы: где q = 0-4; R¹² независимо выбирают из группы, включающей: (I) галоген, (II) нитрогруппу, (III) (C₁-C₆)алкил, (IV) (C₁-C₆)алкоксигруппу, r = 1-5, при условии, что сумма q и r не превышает 5; Z выбирают из группы, включающей: (I) простую связь, (II) двухвалентный (C₁-C₆)алкил, незамещенный или замещенный гидроксигруппой, (C₁-C₆)алкилом, (III) двухвалентный (C₂-C₆)алкенил, (IV) группу формулы -(C(R¹⁴)₂)_s-R¹⁵, где s = 0-1, где R¹⁴ = водород, R¹⁵ выбирают из -O-, -S-, -SO-, -SO₂-, -SO₂-O-, -OC(O)- (если s = 1), R¹³ независимо выбирают из группы, включающей: (I) (C₄-C₁₀)гетероциклил, (II) гетероарил, (III) (C₄-C₁₀)циклоалкил, незамещенный или замещенный (C₁-C₆)алкилом, или (IV) фенил, незамещенный или замещенный 1-5 заместителями, независимо выбранными из галогена, гидроксигруппы, нитрогруппы, (C₁-C₁₀)алкила, (C₁-C₁₀)алкоксигруппы, галоген-(C₁-C₃)алкила, фенил-(C₁-C₃)алкила, (C₁-C₆)алкоксифенила; f) (C₄-C₁₀)циклоалкил, незамещенный или замещенный одним или несколькими заместителями, независимо выбранными из группы, включающей: (I) (C₁-C₆)алкил, (II) (C₁-C₆)алкинил, (III) (C₄-C₁₀)циклоалкил, (IV) фенил; g) группу формулы: где A³ и A⁴ каждый независимо выбирают, (I) простой связи, (II) -C(R¹⁷)₂-, где R¹⁷ = водород, (III) -N(R¹⁸)₂-, где R¹⁸ = водород, R¹⁶ = R¹² или R¹³, принимающем вышеуказанные значения; u = 0.

В другом своем аспекте изобретение относится к препаратам для лечения соответствующих бактериальных инфекций, содержащим соединение формулы I в смеси с приемлемым фармацевтическим носителем. Способы борьбы с соответствующими бактериальными инфекциями применением препаратов соединения формулы I также охватываются объемом настоящего изобретения.

Вышеупомянутые алкильные заместители относятся к незамещенным или замещенным углеводородам с нормальной или разветвленной цепью указанной длины. Термин "алкенил" относится к замещенной или незамещенной, нормальной или разветвленной алкенильной цепи указанной длины. Термин "алкинил" относится к замещенной или незамещенной, нормальной или разветвленной алкинильной цепи указанной длины.

Вышеупомянутые алкоксизаместители представлены алкильными группами, присоединенными через кислородный мостик. Термин "алкеноксигруппа" представляет алкенильную цепь указанной длины, присоединенную к атому кислорода.

Термин "полициклический арил" означает устойчивый, насыщенный или ненасыщенный, замещенный или незамещенный 9-10-членный органический конденсированный бициклический радикал; устойчивый, насыщенный или ненасыщенный, замещенный или незамещенный 12-14-членный органический трициклический конденсированный радикал или устойчивый, насыщенный или ненасыщенный, замещенный или незамещенный 14-16-членный органический конденсированный тетрациклический радикал. Бициклический радикал может иметь 0-4 заместителя, трициклический радикал может иметь 0 - 6 заместителей и тетрациклический радикал может иметь 0 - 8 заместителей. Типичные примеры полициклических арилов включают: флуоренил, нафтил, антранил, фенантранил, бифенилен и пиренил.

Термин "гетероарил" представляет устойчивый, насыщенный или ненасыщенный, замещенный или незамещенный 4-7-членный органический моноциклический радикал, содержащий гетероатом, выбранный из S, O и N; устойчивый, насыщенный или ненасыщенный, замещенный или незамещенный 9-10-членный органический конденсированный бициклический радикал, содержащий 1-2 гетероатома, выбранные из S, O и N, или устойчивый, насыщенный или ненасыщенный, замещенный или незамещенный 12-14-членный органический конденсированный трициклический радикал, содержащий гетероатом, выбранный из S, O и N. Атомы азота и серы в таких радикалах возможно окислены, а гетероатом азота возможно квотернизирован. Моноциклический радикал может иметь 0-5 заместителей. Бициклический радикал может иметь 0-7 заместителей и трициклический радикал может иметь 0-9 заместителей. Типичные примеры гетероарилов включают: хинолил, пиперидил, тиенил, пиперонил, оксафлуоренил, пиридил, бензотиенил и т.п.

Термином "(C₄-C₁₀)циклоалкил" охватываются заместители, содержащие четыре-десять атомов углерода, например: циклобутил, циклопентил, циклогексил и циклогептил, которые могут быть незамещены или замещены такими заместителями, как алкил и фенил. Этим же термином охватываются также C₅-C₁₀-циклоалкенильные группы, например: циклопентенил и циклогексенил. Термином "(C₄-C₁₀)циклоалкил" кроме того охватываются бициклические и трициклические циклоалкилы, например: бициклопентил, бициклогексил, бициклогептил и адамантил.

Термин "алканоилоксигруппа" представляет алканоил, присоединенный через кислородный мостик. Такие заместители могут быть замещены или незамещены и иметь нормальную или разветвленную цепь указанной длины.

Термин "циано-(C₁-C₆)алкоксигруппа" представляет замещенную или незамещенную, нормальную или разветвленную алкоксигруппу с одним-шестью атомами углерода и присоединенной к цепи цианогруппой.

Термин "двухвалентный (C₁-C₆)алкил" представляет замещенную или незамещенную, нормальную или разветвленную двухвалентную алкильную цепь с одним-шестью атомами углерода. Типичные примеры двухвалентных (C₁-C₆)алкильных групп включают: метилен, этилен, пропилен, изопропилен, бутилен, изобутилен, втор-бутилен, трет-бутилен, пентилен, неопентилен и гексилен. Такие двухвалентные алкильные группы могут быть замещены такими заместителями, как алкил, алкоксигруппа и гидроксигруппа.

Термин "двухвалентный(C₂-C₆)алкил" представляет замещенную или незамещенную, нормальную или разветвленную двухвалентную алкенильную цепь с двумя-шестью атомами углерода. Типичные примеры двухвалентных (C₂-C₆)алкенилов включают: этенил, 1-пропенил, 2-пропенил, 1-бутенил, 2-бутенил и т.п.

Термин "двухвалентный (C₂-C₆)алкинил" представляет нормальную или разветвленную двухвалентную алкинильную цепь с двумя-шестью атомами углерода. Типичные примеры двухвалентных (C₂-C₆)алкинилов включают: этинилен, 1-пропинилен, 2-пропинилен, 1-бутинилен, 2-бутинилен и т.п.

Термин "галоген" представляет хлор, фтор, бром или йод.

Термин "галоген-(C₁-C₆)алкил" представляет нормальную или разветвленную алкинильную цепь с одним-шестью атомами углерода, к каждому атому углерода которой присоединено 0-3 атома галогена. Типичные примеры галоген-(C₁-C₆)алкильных групп включают: хлорметил, 2-бромэтил, 1-хлоризопропил, 3-фторпропил, 2,3-дибромбутил, 3-хлоризобутил, йод-трет-бутил, трифторметил и т.п.

Термин "галоген-(C₁-C₆)алкоксигруппа" представляет нормальную или разветвленную алкокси цепь с одним-шестью атомами углерода с 0-3 атомами галогена, присоединенными к каждому атому углерода. Типичные примеры галоген-(C₁-C₆)-алкоксигрупп включают: хлорметокси-, 2-бромэтокси-, 1-хлоризопропокси-, 3-фторпропокси-, 2,3-дибромбутокси-, 3-хлоризобутокси, йод-трет-бутокси-, трифторметоксигруппу и т.п.

Термином "гетероциклил" охватываются насыщенные группы, содержащие в цикле три-семь элемента, и такие гетероциклы содержат гетероатом, выбранный из кислорода, серы и азота, например: пиперазинил, морфолиногруппа, пиперидил, метилпиперидил, азетидинил и азиридинил.

Изобретение включает соли соединений, определяемых формулой I. Хотя в целом нейтральные, соединения настоящего изобретения могут содержать достаточно кислотные, достаточно основные или те и другие функциональные группы, вследствие чего могут вступать в реакцию с целым рядом неорганических оснований и неорганических и органических кислот с образованием фармацевтически приемлемых солей.

Термин "фармацевтически приемлемая соль" в применяемом здесь значении относится к солям соединений вышеприведенной формулы I, по существу не ядовитых для живых организмов. Типичные фармацевтически приемлемые соли включают соли, приготовленные реакцией соединений настоящего изобретения с фармацевтически приемлемой минеральной или органической кислотой или неорганическим основанием. Подобные соли известны как соли с кислотами и соли с основаниями.

К кислотам, обычно применяемым для образования солей с кислотами, относятся неорганические кислоты, например: хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, йодистоводородная кислота, серная кислота, фосфорная кислота и т.п. и органические кислоты, например: п-толуолсульфокислота, метансульфоновая кислота, щавелевая кислота, п-бромфенилсульфоновая кислота, угольная кислота, янтарная кислота, лимонная кислота, бензойная кислота, уксусная кислота и т.п. Примеры таких фармацевтически приемлемых солей включают: сульфат, пиросульфат, бисульфат, сульфит, бисульфит, фосфат, моногидрофосфат, дигидрофосфат, метафосфат, пирофосфат, хлорид, бромид, йодид, ацетат, пропионат, деканоат, каприлат, акрилат, формат, изобутират, капроат, гептаноат, пропиолат, оксалат, малонат, сукцинат, суберат, себацат, фумарат, малеат, бутин-1,4-диоат, гексин-1,6-диоат, бензоат, хлорбензоат, метилбензоат, динитробензоат, гидроксибензоат, метоксибензоат, фталат, сульфонат, ксилолсульфонат, фенилацетат, фенилпропионат, фенилбутират, цитрат, лактат, гамма-гидроксибутират, гликолят, тартрат, метансульфонат, пропансульфонат, нафталин-1-сульфонат, нафталин-2-сульфонат, манделат и т.п. Рекомендуемыми фармацевтически приемлемыми солями с кислотами являются соли, образованные с минеральными кислотами, например: хлористоводородной кислотой и бромистводородной кислотой, и соли, образованные с органическими кислотами, например: малеиновой кислотой, уксусной кислотой и метансульфоновой кислотой.

Соли с основаниями включают соли, образованные неорганическими основаниями, например: гидроксидами, бикарбонатами и бикарбонатами аммония, щелочных или щелочноземельных металлов и т.п. Таким образом, основания, пригодные для получения солей настоящего изобретения, включают: гидроксид натрия, гидроксид калия, гидроксид аммония, карбонат калия, карбонат натрия, бикарбонат натрия, бикарбонат калия, гидроксид кальция, карбонат кальция и т.п. Особенно рекомендуются соли калия и натрия.

Необходимо подчеркнуть, что конкретный противоион, образующий часть любой соли настоящего изобретения, особой роли не играет при условии, что соль в целом фармакологически приемлема и что противоион не придает соли в целом нежелательных свойств.

Соединения настоящего изобретения получают из соединений формулы: Формула II Соединения формулы II определены в таблице 1.

^aПринятые для соединений формулы II сокращения: actin = актинозаминил; acos = акозаминил; 4-epi = 4-эпи-ванкозаминил; gal = галактозил; keto = 4-кетованкозаминил; man = манноза; rha = рамнозил; rha - gal = рамнозил-галактозил; risto = ристозаминил; van = ванкозаминил.

В рекомендуемом воплощении изобретения соединения формулы I получают из A82846 антибиотиков (A82846A, A82846B и A82846C) и PA-42867-A. В более предпочтительном воплощении соединения настоящего изобретения получают из A82846B ("производные A82846B"). A82846B представлен соединениями формулы I, в которой R - 4-эпи-ванкозаминил, R¹ - водород, R² - NHCH₃, R³ - CH₂CH(CH₃)₂, R⁴ - CH₂(CO)NH₂, R⁵ - водород, R⁶ - 4-эпи-ванкозаминил, X и Y - C1. Производные A82846B настоящего изобретения, имеющие заместители в положении R⁷ формулы I, обозначаются далее как "R⁷ - A82846B". К примеру, соединение "фенилбензил-A82846B" имеет фенилбензильный заместитель в положении R⁷ формулы I.

Рекомендуемые соединения формулы I включают те производные A82846B, в которых R⁷ представляет -(C₁-C₁₂-алкил)-R⁸, более предпочтительно -CH₃-R⁸, где R⁸ представляет незамещенный полициклический арил. В этой группе соединений более предпочтительны нафтилметил-A82846B, аценафтленилметил - A82846B и флуоренилметил - A82846B.

Рекомендуемые соединения формулы I кроме того включают те производные A82846B, в которых R⁷ представляет -(C₁-C₁₂)-R⁸, более предпочтительно -CH₃-R⁸, где R⁸ представляет незамещенный гетероарил или гетероарил, замещенный галогенфенил. В этой группе соединений более предпочтительны /1-окса/флуоренилметил-A82846B, хлорфенилбензоксазолметил-A82846B и фенилтиоенилметил-A82846B.

Еще одна группа рекомендуемых соединений формулы I включает те производные A82846B, в которых R⁷ представляет -(C₁-C₁₂-алкил)-R⁸, более предпочтительно -CH₃-R⁸, где R⁸ представляет группу формулы: где p = 1 и R¹¹ выбирают из (C₂-C₅)алкенилоксигруппы, галоген-(C₁-C₆)алкоксигруппы, (C₂-C₁₀)алканоилоксигруппы, (C₁-C₃)алкоксигруппы, замещенной (C₁-C₄)алкилтиогруппой, и дифенил-(C₁-C₆)алкила. В этой группе соединений более предпочтительны трифторметоксибензил-A82846B, дифенилметилбензил-A82846B, тиопропилэтоксибензил-A82846B, ацетоксибензил-A82846B, нонаноилоксибензил-A82846B, и тетрафторэтоксибензил-A82846B.

И еще одна группа рекомендуемых соединений формулы I включает те производные A82846B, в которых R⁷ представляет -(C₁-C₁₂-алкил)-R⁸, более предпочтительно -CH₃-R⁸, где R⁸ представляет группу формулы: где q = 1-4, r = 1; Z выбирают из простой связи, двухвалентного (C₁-C₆)алкила, двухвалентного (C₂-C₆)алкенила, -R¹⁵-C(R¹⁴)₂)_s-, где R¹⁵ выбирают из -O-, -S-, -SO₂ и -OC(O)-, каждый R¹⁴ заместитель представляет водород и S = 0 или 1, и R¹³ выбирают из (C₄-C₁₀)циклоалкила, фенила и фенила, замещенного нитрогруппой, галогеном (C₁-C₁₀)алкилом, (C₁-C₁₀)алкоксигруппой или галоген-(C₁-C₃)алкилом. В этой группе соединений более предпочтительны хлорфенилбензил-A82846B, фенилбензил-A82846B, бензилбензил-A82846B, метилфенилбензил-A82846B, пентилфенилбензил-A82846B, метоксифенилбензил-A82846B, пентоксифенилбензил-A82846B, нитрофеноксибензил-A82846B, фторфенилбензил-A82846B, фенилэтинилбензил-A82846B, феноксибензил-A82846B, бензилоксибензил-A82846B, нитрофенилбензил-A82846B, хлорфеноксибензил-A82846B, хлорбензилоксибензил-A82846B, бутилфеноксибензил-A82846B, трифторметилфеноксибензил-A82846B, дихлорфеноксибензил-A82846B, нитробензилоксибензил-A82846B, бензилоксибензил-A82846B, циклогексилоксибензил-A82846B, циклогексаноилоксибензил-A82846B, тиофенилбензил-A82846B, хлорфенилсульфонилбензил-A82846B, циклогексилбензил-A82846B, циклогексилэтоксибензил-A82846B, хлорфеноксинитробензил-A82846B, бензилметоксибензил-A82846B, феноксиметоксибензил-A82846B, бензоилокси-диметоксибензил-A82846B, циклогексаноилокси-диметилбензил-A82846B, трифторметилфенилбензил-A82846B, бутилфенилтиобензил-A82846B и бромфенилбензил-A82846B.

Еще одна группа рекомендуемых соединений формулы I включает производные A82846B, в которых R⁷ представляет -(C₁-C₁₂)алкил-R⁸, более предпочтительно -CH₃-R⁸, где R⁸ представляет (C₄-C₁₀)циклоалкил, замещенный (C₄-C₁₀)циклоалкилом. В этой группе соединений более предпочтительны циклогексил-циклогексилметил-A82846B, и бутилциклогексилметил-A82846B.

Для получения соединений формулы I из A83850A и A83850B могут быть использованы восстановленные формы этих соединений. Восстановленные формы соединений A83850A и A83850B могут быть получены по методике, приведенной в патенте США N 5187082, который вводится здесь в качестве ссылки.

Соединения настоящего изобретения получают реакцией соединения формулы II с альдегидом с образованием промежуточного основания Шиффа, последующим восстановлением которого боргидридом металла получают целевой N-алкиламин.

Согласно первому способу получения соединений изобретения /далее способ A (иллюстрируется примерами 1 и 2) / реакцию образования основания Шиффа проводят в инертной атмосфере, например, в азоте или аргоне в полярном растворителе, например: диметилформамиде (ДМФА) или метаноле (MeOH) или смеси полярных растворителей, например, смеси диметилформамида с метанолом при температуре 25 - 100^oC. Реакцию рекомендуют проводить при температуре 60 - 70^oC от 30 минут до 2 часов в смеси диметилформамида с метанолом или в метаноле. Промежуточное основание Шиффа затем восстанавливают, предпочтительно без выделения и получают соответствующее N-алкилпроизводное-(ые). Восстановление основания Шиффа осуществляют применением химического восстановителя, например, боргидрида металла, такого как боргидрид натрия или цианоборгидрид натрия. Реакция восстановления может быть проведена в полярном органическом растворителе, например: диметилформамиде, метаноле или смеси полярных растворителей, например, смеси диметилформамида с метанолом. Реакция восстановления может быть проведена при температуре 25 - 100^oC в течение 1 - 5 часов. Реакцию восстановления рекомендуют осуществлять применением избытка цианоборгидрида натрия в смеси диметилформамида с метанолом или метаноле при 60 - 70^oC в течение 1 - 2 часов. Способ A рекомендуется в случае применения бензиловых альдегидов.

Согласно второму способу получения соединений настоящего изобретения (далее называется способом Б, иллюстрируется примером 3) образование основания Шиффа проводят в инертной атмосфере, например, азоте или аргоне в присутствии в качестве восстановителя цианоборгидрида натрия в полярном растворителе, например: диметилформамиде, метаноле или смеси полярных растворителей, например, смеси диметилформамида с метанолом при температуре 25 - 100^oC в течение 1 - 5 часов. Реакцию рекомендуется проводить при 60 - 70^oC в течение 1 - 2 часов в смеси диметилформамида с метанолом. Способ B рекомендуется в случае применения небензиловых альдегидов.

Согласно третьему способу получения соединений настоящего изобретения (далее называется способом C, иллюстрируется примером 4) образование основания Шиффа осуществляют a) в инертной атмосфере, например: азоте или аргоне, b) в присутствии восстановителя, например, боргидрида металла, наиболее предпочтительно цианоборгидрида натрия или агента для проведения гомогенного или гетерогенного каталитического гидрирования, например: катализатора Крэбтри, катализатора Уилкинсона, палладия на угле, платины на угле или родия на угле, c) в полярном растворителе, например: диметилформамиде, метаноле или смеси полярных растворителей, например, смеси диметилформамида с метанолом и d) при температуре 25 - 100^oC. Реакцию рекомендуют проводить при температуре 60 - 70^oC в метаноле. Реакцию продолжают 20 - 28 часов с поддержанием в это время значения pH реакционной смеси в интервале 7,5 - 10, предпочтительно при 9. Регулированием pH реакцию прекращают. Поскольку продукт реакции хорошо растворим в полярных растворителях, растворитель реакции может быть заменен спиртом, например: этанолом, бутанолом или изопропанолом, из которых рекомендуется изопропанол, с осаждением продукта реакции. Способ C является предпочтительным способом настоящего изобретения, что связано с повышенным выходом продукта реакции, достигаемым данным способом. Другое преимущество данной схемы реакции состоит в повышенном отношении предпочтительного продукта реакции (продуктов, замещенных по аминогруппе сахара, соответствующего R¹ в формуле II) к другим продуктам реакции (продуктам, замещенным по аминогруппе заместителями, обозначенными R и/или R³ в формуле II). Проведением реакции в течение более длительного периода, например в течение 20 - 28 часов, продукты, монозамещенные в положениях, соответствующих R и R³ в формуле II, превращают в димезащенные формы, что облегчает выделение предпочтительных монозамещенных производных.

Продукты реакции, полученные любым из способов A, B или C, могут быть очищены препаративной ЖХВД с обращением фаз с применением колонок C-18 Нова-Пак фирмы Уотерс с детектированием в ультрафиолетовом свете (УФ 235 нм или 280 нм). Обычно применяют рассчитанную на 30 минут систему градиента растворителей, состоящую из 95% водного буфера-5% CH₃CN в момент = 0 минут до 20% водного буфера - 80% CH₃CN в момент = 30 минут. В качестве водного буфера применяют либо ТЭАФ (0,5% водного триэтиламина с установленным фосфорной кислотой pH 3), либо ТФУ (трифторуксусная кислота в общей концентрации 0,1%).

ЖХВД анализ реакционных смесей и конечных очищенных продуктов может быть осуществлен применением колонки C 18 МикроБондаПак фирмы Уотерс (обычно стальная колонка размером 3,9 х 300 нм) или Нова-Пак C 18 RCM колонки фирмы Уотерс (8 х 100 мм) с УФ детектированием (235 нм или 280 нм). Обычно применяют рассчитанную на 30 минут систему градиента растворителей, состоящую из 95% водного буфера - 5% CH₃CN в момент = 0 минут до 20% водного буфера - 80% CH₃CN в момент = 30 минутам. В качестве водного буфера применяют либо ТЭАФ (0,5% водного триэтиламина с установленным фосфорной кислотой значением pH 3), либо ТФУ (трифторуксусная кислота в общей концентрации 0,1%).

Отношение альдегида к соединению формулы II и условия реакции определяют состав продуктов реакции. Монозамещенные производные - это те производные, в которых атом водорода аминогруппы в положении R¹ в формуле II замещен одним из заместителей, перечисленных выше для формулы I. При использовании вышеописанных способов A и B образованию монозамещенных производных, замещенных по аминогруппе аминосахара в положении R¹ формулы, благоприятствуют применение небольшого избытка альдегида, более короткое время реакции и более низкая температура. Как отмечено выше, способ C благоприятствует образованию монозамещенного производного. Большой избыток альдегида способствует образованию дизамещенных и тризамещенных производных соединений формулы II. Дизамещенные производные - это производные, в которых атомы водорода в местоположениях, выбранных из аминогруппы в положении R³ и аминогруппы аминосахаров, обозначенных как R или R¹ в формуле II, замещены фрагментом восстановленного альдегида. Тризамещенные производные - это производные, в которых атомы водорода в трех местоположениях, выбранных из аминогруппы в положении R³ и аминогруппы аминосахаров, обозначенных, как R или R¹ в формуле, замещены фрагментом восстановленного альдегида.

Примеры полученных соединений, иллюстрирующих соединения формулы I, перечислены в таблице 2A и таблице 2B. В таблице 2A перечислены соединения, синтезированные реакцией альдегида с гликопептидом A82846B. В таблице 2A указаны замещающие боковые цепи по аминогруппе 4-эпи-ванкозаминильном сахаре в 4-эпи-ванкозаминил-O-гликозильном дисахариде соединения A82846B. Все перечисленные соединения относятся к монозамещенным производным.

В таблице 2B перечислены те соединения, которые были синтезированы реакцией альдегида с разнообразными гликопептидными антибиотиками, отличными от A82846B. Соединения таблицы 2B монозамещены по аминогруппе аминосахара, обозначенного, как R¹ в формуле II, указанной боковой цепью. Все перечисленные соединения относятся к монозамещенным производным.

Соединения формулы I проявляются in vitro и in vivo активность против грамположительных патогенных бактерий. Минимальные ингибирующие концентрации (МИК), при которых соединения формулы I ингибируют определенные бактерии, приведены в таблице 3. Значения МИК определены с помощью стандартного анализа с микроразбавлением бульона.

Соединения формулы I проявляют также in vivo противомикробную активность против экспериментально вызванной у лабораторных животных инфекции. Введением мыши, экспериментально инфицированной испытуемым микроорганизмом, двух доз испытуемого соединения наблюдаемую активность регистрируют в виде значений ЭД₅₀ (эффективная доза в мг/кг, необходимая для защиты 50% испытуемых животных; см. W. Wick и др., J. Bacteriol., 81, 233-235 (1961). Значения ЭД₅₀, наблюдаемые для испытуемых соединений, приведены в таблице 4.

Один из важных аспектов противомикробной активности многих соединений формулы I заключается в их активности против устойчивых к ванкомицину Enterococci. Такая активность иллюстрируется таблицей 5, в которой суммированы результаты сравнения активности испытуемых соединений против представительных устойчивых к ванкомицину и подверженных действию ванкомицина Enterococci (Enterococcus faecium и Enterococcus faecalis, средне-геометрическое значение МИК (мкг/мл)), полученные применением стандартного анализа с микроразбавлением бульона. Конечные точки получают после 24-часового инкубирования. Модифицирование аминосахара в дисахаридном фрагменте приводит к улучшению активности против устойчивых к ванкомицину штаммов по сравнению с родоначальным гликопептидным антибиотиком.

Ряд бактерий молочной кислоты, в том числе все Leuconostocs, все Pediococci и некоторые Laclobacilli изначально устойчивы к ванкомицину. При усиленном употреблении ванкомицина у больных с ослабленным иммунитетом отмечено увеличение частоты инфицирования указанными бактериями (Handwerger и др., Reviews of Infectious Disease 12, 602-610 (1990); Ruoff и др., Journal of Clinical Microbiology 26, 2064-2068 (1988)). Один из важнейших аспектов противомикробной активности соединений формулы I заключается в их активности против устойчивых к ванкомицину бактерий молочной кислоты. Соединения настоящего изобретения применимы для ингибирования роста устойчивых к ванкомицину молочных бактерий, например: Lueconostoc, Pedicocci и Lactobacilli, т. е. способны контролировать условно-патогенные инфекции, вызванные бактериями этой группы. Такого рода активность иллюстрируется таблицей 6, в которой суммированы результаты сравнения активности испытуемых соединений против представительных, устойчивых к ванкомицину бактерий молочной кислоты (Pedicoccus acidilacti, Pedicoccus pentosaceus, Lueconastoc mesenteroides, Lueconostoc pseudomesenteroides Leuconostoc lactis, Lueconostoc citreum и Laclobacillus confusus, среднегеометрические значения МИК (мкг/мл)), полученные стандартным анализом с разбавлением агара на сердечно-мозговом инфузионном агаре.

Фармацевтические препараты соединений формулы I также являются частью настоящего изобретения. Так, соединения, предпочтительно в виде фармацевтически приемлемых солей могут быть подготовлены для перорального или парентерального введения с целью терапевтического или профилактического воздействия на бактериальные инфекции.

К примеру, соединения могут быть смешаны с обычными фармацевтическими носителями или разбавителями и использованы в виде таблеток, капсул, элексиров, суспензий, сиропов, вафель и т.п. Препараты соединений формулы I содержат 0,1 - 90 мас. % активного компонента, как правило, 10 - 30мас.% Препараты могут содержать обычные носители и наполнители, например: зерновой крахмал или желатин, лактозу, сахарозу, микрокристаллическую целлюлозу, каолин, маннит, дикальцийфосфат, хлорид натрия и альгиновую кислоту.

Размельчители, обычно применяемые в препаратах настоящего изобретения, включают: кроскармелозу, микрокристаллическую целлюлозу, зерновой крахмал, натрийкрахмалгликолят и альгиновую кислоту.

Связующие для таблеток, которые могут быть введены в препараты, включают: камедь акации, метилцеллюлозу, натрийкарбоксиметилцеллюлозу, поливинилпирролидон (повидон), гидроксипропилметилцеллюлозу, сахарозу, крахмал и этилцеллюлозу.

Смазки, которые могут быть использованы, включают: стеарат магния или стеараты других металлов, стеариновую кислоту, силиконовую жидкость, тальк, воска, масла и коллоидную двуокись кремния.

Могут быть также использованы ароматизаторы, например: пепермент, винтергреновое масло, вишневые ароматизаторы и т.п.

Для придания препарату более привлекательного внешнего или для облегчения идентификации продукта может оказаться желательным добавление красителя.

Для внутривенного применения (ВВ) водорастворимая форма антибиотика может быть растворена в одной из обычно применяемых внутривенных жидкостей и введена вливанием. Могут быть использованы такие жидкости, как, например: физиологический солевой раствор, раствор Ринджера или 5%-ный раствор декстрозы.

В случае внутримышечных препаратов стерильный препарат приемлемой растворимой солевой формы соединения, например, гидрохлорида может быть растворен и введен в фармацевтическом разбавителе, например: свободной от пирогенов воде (перегнана), физиологическом солевом растворе, 5%-ном растворе глюкозы. Приемлемая нерастворимая форма соединения может быть приготовлена и введена в виде суспензии в водной основе или фармацевтически приемлемой масляной основе, например, в эфире длинноцепной жирной кислоты, такой как этилолеат.

Для перорального применения особенно рекомендуется стерильный препарат приемлемой солевой формы антибиотика, например, гидрохлорида в смеси с разбавителем, таким как деионизированная или дистиллированная вода.

Или же единичная дозированная форма антибиотика может представлять собой раствор антибиотика, предпочтительно в его солевой форме в приемлемом разбавителе, герметически запаянный в стерильную ампулу. Концентрация антибиотика может меняться, например, от 1 процента до 50 процентов в зависимости от конкретной формы антибиотика, его растворимости и дозы, назначаемой лечащим врачом.

В еще одном своем аспекте настоящего изобретения дается способ лечения у животных инфекционных заболеваний, особенно заболеваний, вызванных грамположительными микроорганизмами. Соединения настоящего изобретения особенно полезны для борьбы с инфекциями, вызванными устойчивыми к метициллину стафилококками. Соединения изобретения кроме того применимы для борьбы с инфекциями, вызванными энтерококками. Примеры подобных заболеваний включают: тяжкие инфекции стафилококками, например: стафилококковый эндокардит и стафилококковый сепсис. Живот