(r)-5-бром-n-(1-этил-4-метилгексагидро-1h-1,4-диазепин-6-ил) -2-метокси-6-м етиламино-3-пиридинкарбоксамид, способ его получения, фармацевтическая композиция и противорвотное средство, содержащее указанное соединение, и его промежуточное соединение

(r)-5-бром-n-(1-этил-4-метилгексагидро-1h-1,4-диазепин-6-ил) -2-метокси-6-м етиламино-3-пиридинкарбоксамид, способ его получения, фармацевтическая композиция и противорвотное средство, содержащее указанное соединение, и его промежуточное соединение

Реферат

 

Описывается новое соединение, а именно (R)-Бром-N-(1-этил-4-метилгексагидро-1н-1,4-диазепин-6-ил)-2-метокси-6-метиламино-3-пиридинкарбоксамид формулы (1) или его физиологически приемлемые кислотно-аддитивные соли. Соединение проявляет сильные антагонистические активности к рецептору серотонина S₃ и допамина D₂. Описывается также способ его получения, фармацевтическое и противорвотное средство на основе указанного соединения и его промежуточного соединения. 6 c. и 1 з.п. ф-лы, 4 табл.

Настоящее изобретение относится к новому соединению - (R)-5- бром-N-(1-этил-4-метилгексагидро-1H-1,4-диазепин-6-ил)-2- метокси-6-метиламино-3-пиридинкарбоксамиду, которое проявляет сильные антагонистические активности к рецептору серотонина S₃ (который может далее называться как 5-HT₃) и допамина D₂; способу его получения и фармацевтической композиции, содержащей указанное соединение.

Уровень техники Японская выложенная (KOKAI) патентная заявка KOKAI N 92959/1993 широко раскрывает класс соединений, представленный ниже формулой (A): [в которой R₁ и R₂ могут быть одинаковыми или различными и каждый обозначает атом водорода, низшую алкильную или замещенную низшую алкильную группу и так далее; R₃ могут быть одинаковыми или различными и каждый обозначает атом водорода или низший алкил и так далее; R₅ могут быть одинаковыми или различными и каждый обозначает атом водорода, атом галогена, низший алкокси, амино, моно- или ди-замещенную амино группу и так далее; Het означает моноциклический гетероарил или дициклический гетероарил, отличный от 1H-индазолильной группы; q равняется 0, 1 или 2; s равняется 1, 2 или 3; B обозначает -CXNR₆(CH₂)_r- и так далее, в котором R₆ обозначает атом водорода или низший алкил и так далее, X обозначает атом кислорода или серы и r равняется 0, 1, 2 или 3; m равняется 1, 2, 3 или 4; и n равняется 1, 2 или 3], и также раскрывает, что Het может представлять пиридил.

В то же время единственным конкретным соединением, в котором Het представляет собой 3-пиридильную группу и которое раскрыто в описании, является соединение Примера 37, представленное ниже формулой: Это соединение Примера 37 явно отличается по структуре от соединения по настоящему изобретению, которое представлено приведенной далее формулой (I). В первом соединении 3-пиридильная группа незамещена, а 4-положение гексагидро-1H-1,4-диазепина замещено метилом.

Вышеуказанная публикация в KOKAI Gazette, кроме того, указывает, что соединения вышеприведенной формулы (A) являются антагонистами рецептора серотонина S₃ (5-HT₃) и пригодны для терапевтического и профилактического лечения анорексии (отсутствие аппетита), тошноты, рвоты, вздутия живота (abdominal fullness) и подобных состояний, сопутствующих острому и хроническому гастриту, и таким болезням как язва желудка и двенадцатиперстной кишки; или тошноты или рвоты, вызванных применением антиопухолевых агентов, радиоактивным облучением, и болезнью движения. Gazette, однако, ничего не сообщает об их антагонизме рецептору допамина D₂.

Далее, заявка WO93/08186 описывает группу соединений, представленных ниже формулой (B): [в которой R₁ обозначает C_1-6 алкокси, C_3-8 циклоалкокси или C_3-8 циклоалкил C_1-4 алкокси; R₂ обозначает водород, галоген, C_1-6 алкил, C_1-6 алкокси или амино, которые могут быть замещены одним или двумя C_1-6 алкилами; R₃ обозначает водород, галоген или C_1-6 алкил; L представляет O или NH; и Z обозначает диазациклическую или азадициклическую боковую цепь], указывая, что названные соединения пригодны для терапевтического или профилактического лечения болей, рвоты, нарушений центральной нервной системы и желудочно-кишечных заболеваний в качестве антагонистов 5-HT₃.

В вышеуказанной заявке WO 93/08186 ссылаются как на один из адекватных примеров диазациклической боковой цепи Z на заявку ЕР-A-358903, которая принадлежит к семейству патентов вышеназванной KOKAI Patent Application, KOKAI N 92959/93, но не содержит конкретного описания соединения, имеющего диазациклическую боковую цепь, которое охватывается вышеприведенной общей формулой (A). Таким образом, заявка WO 93/08186 вовсе не предлагает соединение по настоящему изобретению.

С другой стороны, домперидон [химическое название: 5-хлор-1- {1-[3-(2,3-дигидро-2-оксо-1H-бензимидазол-1-ил)пропил] -4- пиперидинил} -1,3-дигидро-2H-бензимидазол-2-он; см. , например, Merck Index, 11th ed. 3412 (1989)] , который является антагонистическим агентом рецептора допамина D₂, эффективен для облегчения рвоты, сопутствующей различным беспокойствам (заболеваниям) пищеварительной системы, и рвоты, которая сопутствует синдрому детской простуды, но проявляет лишь незначительный эффект на рвоту, вызванную введением антиопухолевых агентов, таких как цисплатин.

Недавно в качестве лекарства, которое может селективно и сильно подавлять рвоту, вызванную применением антиопухолевых агентов, был разработан агент, антагонистичный к рецептору серотонина S₃, и в настоящее время такие антирвотные агенты как гранисетрон гидрохлорид [химическое название: эндо-1-метил-N-(9-метил-9-азобицикло-[3.3.1] нон-3-ил)-1H-индазол-3-карбоксамид гидрохлорид; см., например, Merck Index, 12th ed. 4443 (1989)]; ондансетрон гидрохлорид [химическое название: 1,2,3,9-тетрагидро-9-метил-3-[(2-метил-1H-имидазол-1-ил)метил] -4H-карбазол-4-он гидрохлорид; см., например, Merck Index, 11th ed. 6802 (1989)] и азасетрон гидрохлорид [химическое название: ()-H-1-азабицикло-[2.2.2] окт-3-ил-6- хлор-3,4-дигидро-4-метил-3-оксо-2H-1,4-бензоксазин-8-карбоксамид гидрохлорид; см., например. Drugs of the Future, 18 (3), 206-211 (1993)] используются клинически. Однако клиническое применение этих антагонистов рецептора серотонина S₃ ограничено, главным образом, рвотой, вызываемой приемом антиопухолевых агентов. Кроме того, указывается, что они проявляют лишь незначительный эффект при затяжной рвоте.

Таким образом, хотя и существуют лекарства, эффективные для специфических видов рвоты, еще не разработан антирвотный агент широкого интервала применения, который мог бы сильно подавлять рвоту, вызванную различными причинами. Следовательно, требуется разработка антирвотного агента широкого спектра.

Описание изобретения В ходе ряда исследовательских работ над сильным и селективным антагонистом рецептора серотонина S₃ заявители пришли к мысли о том, что вещество, которое проявляет антагонистическую активность к рецептору допамина D₂ в добавление к антагонистической активности к рецептору серотонина S₃, должно быть эффективным по отношению к рвоте, вызванной различными причинами, и синтезировали ряд производных гексагидро-1H-1,4-диазепина с целью добавить антагонистическую активность к рецептору допамина D₂ к антагонистической активности к рецептору серотонина S₃, которой обладают производные гексагидро-1H-1,4-диазепина, и провели их проверку. В результате было установлено, что (R)-5-бром-N-(1-этил- 4-метилгексагидро-1H-1,4-диазепин-6-ил)-2-метокси-6-метиламино- 3-пиридинкарбоксамид, который представлен ниже формулой (I): отвечает цели и обладает антирвотным действием широкого спектра.

Таким образом, настоящее изобретение обеспечивает (R)-5- бром-N-(1-этил-4-метилгексагидро-1H-1,4-диазепин-6-ил)-2- метокси-6-метиламино-3-пиридинкарбоксамид вышеприведенной формулы (I) и его физиологически приемлемые кислотно-аддитивные соли. Изобретение, кроме того, обеспечивает способ получения указанного соединения. Изобретение также обеспечивает фармацевтические препараты, содержащие указанное соединение. Дополнительно изобретение обеспечивает промежуточный продукт для получения указанного соединения.

В качестве физиологически приемлемых кислотно-аддитивных солей соединения формулы (I) могут быть названы, например, соли неорганических кислот, такие как гидрохлорид, гидробромид, гидроиодид, сульфат и фосфат; и соли органических кислот, такие как оксалат, малеат, фумарат, малонат, лактат, малат, цитрат, тартрат, бензоат и метансульфонат.

Соединение формулы (I) и его физиологически приемлемые кислотно-аддитивные соли могут быть представлены в форме гидратов и/или сольватов, которые также включены в соединения по настоящему изобретению.

Соединение по настоящему изобретению может быть получено, например, реакцией соединения нижеприведенной формулы (II): или его реакционноспособного производного с соединением формулы (III), приведенной ниже: В качестве реакционноспособных производных соединения формулы (II) могут быть названы, например, сложные эфиры низших алкилов (в частности, метиловый эфир), активные сложные эфиры, ангидриды кислот, галогенангидриды (в частности, хлорангидрид) и так далее. Конкретные примеры активных сложных эфиров включают п-нитрофениловый эфир, 2,4,5-трихлорфениловый эфир и N-гидроксисукцинимидный эфир. В качестве ангидридов кислот могут быть использованы любые из симметричных ангидридов кислот и смешанных ангидридов кислот. Конкретные примеры смешанных ангидридов кислот включают ангидриды с алкилхлорформатами, такие как этилхлорформат, изобутилхлорформат и тому подобные; ангидриды с аралкилхлорформатами, такие как бензилхлорформат; ангидриды с арилхлорформатами, такие как фенилхлорформат; и ангидриды с алкановыми кислотами, такие как изовалериановая кислота, пивалиновая кислота и тому подобные.

Когда в качестве исходного материала используется соединение формулы (II) как таковое, реакция может быть проведена в присутствии конденсирующего агента, такого как N,N'-дициклогексилкарбодиимид, 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид гидрохлорид, N,N'-карбонилдиимидазол, N,N'-карбонилдисукцинимид, 1-этоксикарбонил-2-этокси-1,2-дигидрохинолин, дифенилфосфорилазид, пропанфосфониевый ангидрид, бензотриазол-1-ил-окси-трис (диметиламино) фосфоний-гексафторфосфат и тому подобные.

Реакцию соединения формулы (II) или его реакционноспособного производного с соединением формулы (III) проводят в присутствии или отсутствии растворителя. Примеры полезного растворителя включают ароматические углеводороды, такие как бензол, толуол и ксилол; эфиры, такие как диэтиловый эфир, тетрагидрофуран и диоксан; галоидированные углеводороды, такие как метиленхлорид и хлороформ; спирты, такие как этанол и изопропанол; этилацетат, ацетон, ацетонитрил, диметилформамид, диметилсульфоксид, этиленгликоль, воду и тому подобное. Эти растворители могут быть использованы по одному или в комбинации из более чем одного вещества. Если необходимо, реакцию можно проводить в присутствии основания. Примеры полезных в таком случае оснований включают гидроокись щелочного металла, подобную гидроокиси натрия и гидроокиси калия; карбонат щелочного металла, подобный карбонату натрия и карбонату калия; бикарбонат щелочного металла, подобный бикарбонату натрия и бикарбонату калия; и органическое основание, подобное триэтиламину, трибутиламину, диизопропилэтиламину и N-метилморфолину. Подходящие температуры реакции обычно находятся в интервале от примерно -30^oC до примерно 200^oC, предпочтительно от примерно -10^oC до примерно 150^oC. Соединение формулы (III) может быть введено в реакционную систему при соотношении обычно 1-3 моля, предпочтительно 1-1,5 моля на 1 моль соединения формулы (II) или его реакционноспособного производного. В то же время возможно также использовать его в большом избытке, если этого требует частный случай, оставляя его действовать так же, как свободное основание.

Соединение формулы (II) для использования в качестве исходного материала может быть получено, например, через стадии, показанные ниже на Схеме 1. Конкретные условия для каждой стадии указаны в приводимом далее Ссылочном Примере 1.

В приведенных в Схеме 1 (см. в конце описания) формулах R₁ обозначает линейную или разветвленную C₁-C₆ алкильную группу.

Соединение формулы (III), которое также используется в качестве исходного материала, является новым соединением, не описанным прежде в доступной литературе, и может быть получено, например, через стадии, показанные ниже на Схеме 2. Конкретные условия для каждой стадии указаны в приводимом далее Примере 2.

В приведенных в Схеме 2 (см. в конце описания) формулах Et означает этильную группу; Z₁ означает амино-защитную группу, такую как: трет-бутокси- карбонильная группа, трифенилметильная группа и ацетильная группа; Z₂ означает бензилокси-карбонильную группу, которая необязательно замещена атомом хлора, брома, метокси или нитро группой; R₂ означает атом водорода, атом галогена, C_1-3 алкил или C_1-3 алкокси; и R₁ имеет ранее указанное значение.

Соединение вышеприведенной формулы (III) может быть получено как кислотно-аддитивная соль в зависимости от способа получения, применяемого в конкретных случаях. В качестве таковых, например, могут быть названы ранее перечисленные физиологически приемлемые кислотно-аддитивные соли. Более конкретно, могут быть названы соли неорганических кислот, такие как гидрохлорид, гидробромид, гидройодид, сульфат и фосфат; и соли органических кислот, такие как оксалат, малеат, фумарат, малонат, лактат, малат, цитрат, тартрат, бензоат и метансульфонат.

В соответствии с вышеназванным способом получения соединения формулы (I) конфигурация соединения формулы (III), одного из исходных материалов, остается неизмененной в полученном таким образом соединении формулы (I).

Соединение формулы (I), как образовано вышеназванным способом получения, может быть выделено и очищено обычными способами, такими как хроматография, перекристаллизация, переосаждение или тому подобное.

Соединение формулы (I) и соединение формулы (III) могут быть получены в форме свободного основания или кислотно-аддитивной соли в зависимости от применяемых реакции и условий процесса. Кислотно- аддитивная соль может быть превращена в свободное основание обычными методами, например путем обработки основанием, таким как карбонат и гидроокись щелочного металла. В то же время, свободное основание может быть переведено в кислотно-аддитивную соль путем обработки желаемой кислотой согласно известным способам.

Далее представлены результаты фармакологических испытаний соединения по изобретению и нижеперечисленных контрольных соединений для объяснения фармакологических активностей, характерных соединениям по этому изобретению: (1) домперидон избирательный антагонист рецептора допамина D₂, который использовался клинически как антирвотный агент или агент, улучшающий желудочно-кишечную подвижность; (2) ондансетрон гидрохлорид избирательный антагонист рецептора серотонина S₃, который использовался клинически как антирвотное во время приема антиопухолевых лекарств; (3) гранисетрон гидрохлорид избирательный антагонист рецептора серотонина S₃, который использовался клинически как антирвотное во время приема антиопухолевых лекарств; (4) метоклопрамид гидрохлорид лекарство, которое широко используется во всем мире как антирвотный агент или агент, улучшающий желудочно-кишечную подвижность [химическое название: 4-амино-5-хлор-N-[2-(диэтиламино)этил] -2-метоксибензамид дигидрохлоридмоногидрат; см., например, Merck Index, 11th ed. 6063 (1989)].

A. Aнтaгoниcтичеcкие активности к рецептору допамина D₂ и рецептору серотонина S₃ Испытательный Пример 1: Активности связывания рецепторов допамина D₂ и серотонина S₃ (испытание связывания рецептора in vitro) Испытания по связыванию рецептора допамина D₂ и серотонина S₃ были проведены, следуя методикам I. Creese, et al. [Eur. J. Pharmacol., 46, 337 (1977)] и S. J.Peroutka and A. Hamik [Eur. J. Pharmacol., 148, 297 (1988)] соответственно. Сырые фракции синаптосомы, полученной из головного мозга крысы, использовали как образцы рецептора и [³H] спиперон (D₂) и [³H] хипазин (S₃) использовали как меченые лиганды. Буферный раствор, содержащий каждый из образцов рецептора и меченый лиганд (конечный объем 1 мл), инкубировали в течение предписанного периода в присутствии одного из испытываемых соединений при различных уровнях концентрации, после чего радиоактивный лиганд, связанный с рецептором выделяли на фильтре, используя сборник клеток (Brandel Co.) и измеряли радиоактивность на каждом фильтре с помощью жидкостного сцинтилляционного счетчика, чтобы определить общее количество, связанное рецептором. Специфически связанное количество рассчитывали вычитанием неспецифически связанного количества из общего связанного количества, указанное неспецифически связанное количество было тем, которое связывалось в присутствии избыточного количества немеченого лиганда [спиперон (D₂) и хипазин (S₃)] , которое измерялось одновременно. Уровень концентрации испытываемого соединения, при котором специфическое связывание меченого лиганда ингибировалось на 50% (величина IC₅₀), подсчитывался методом пробит-анализа (probit analysis). Результаты приведены в Таблице 1.

Испытательный Пример 2: Эффект подавления рефлекса von Bezold-Jarisch (анти-серотонин S₃ активность) Этот тест проводили по методике Fozard et al., [Arch. Pharmacology, 326, 36-44 (1984)] . Самцов крыс Уистера (Wister), весящих 250-350 г, анестезировали уретаном (1,5 г/кг, внутрибрюшинно) и клали на спину. Электрокардиограмму (вывод II) и частоту сердечных сокращений животных регистрировали на самопишущем осциллографе через биофизический усилитель и пульсотахометр соответственно. При внутривенном введении 2-метилсеротонина (5-HT₃ агониста) в дозе 10-30 мкг/кг частота сердечных сокращений временно уменьшалась (по рефлексу von Bezold- Jarisch). Фиксированное количество 2-метилсеротонина повторно вводили через 15-минутные интервалы до тех пор, пока не получали стабильную реакцию, и затем вводили внутривенно испытываемое соединение за 3 минуты до введения 2-метилсеротонина. Подсчитывали коэффициент подавления рефлекса von Bezold-Jarisch после введения испытываемого соединения на реакцию перед введением, и эффективная доза испытываемого соединения, вызывающая 50% ингибирование (величина ED₅₀), определялась методом пробит-анализа (probit analysis). Результаты приведены в Таблице 1.

Как ясно из результатов, приведенных в таблице 1, соединение Примера 1 проявило более чем эквивалентную связывающую активность рецептора допамина D₂ к активности домперидона, являющегося известным избирательным антагонистом рецептора допамина D₂, а также сильную связывающую активность рецептора серотонина S₃, превосходящую активность ондансетрон гидрохлорида и гранисетрон гидрохлорида, которые являются известными избирательными антагонистами рецептора серотонина S₃. Также для подавления рефлекса von Bezold-Jarisch соединение настоящего изобретения имеет превосходный эффект, сравнимый с эффектом ондансетрон гидрохлорида. Метоклопрамид гидрохлорид известен как антирвотный агент, имеющий связывающую активность по отношению как к рецептору серотонина S₃, так и рецептору допамина C₂. Однако его связывающая активность по отношению к двум рецепторам намного слабее, чем у соединения Примера 1.

Таким образом, соединение по изобретению имеет сильные антагонистические активности по отношению к рецепторам как серотонина S₃, так и допамина D₂ и является многообещающим антирвотным агентом широкого спектра для подавления рвоты, вызванной различными причинами.

B. Антирвотные эффекты Испытательный Пример 3: Эффект подавления рвоты, вызванной апоморфином Три-четыре собаки породы Beagle (вес тела: 8-15 кг) в группе использовались для проверки подавляющего эффекта испытываемых соединений на рвоту, вызванную апоморфином. Этот тест обычно проводится как метод выявления блокатора допамина. Каждому из подопытных животных перорально вводилась предписанная доза испытываемого соединения в виде растворенного или суспендированного в 0,5% растворе трагаканта и спустя два часа вводился гидрохлорид апоморфина (0,3 мг/кг) подкожной инъекцией в спину. Число вызванных рвотных эпизодов в течение последующего 1 часа подсчитывали и коэффициент подавления рассчитывали сравнением числа рвотных эпизодов у испытуемой группы собак по сравнению с контрольной группой, и эффективную дозу каждого испытываемого соединения для подавления рвоты на 50% (ED₅₀) определяли методом пробит-анализа. Результаты приведены в Таблице 2.

Испытательный Пример 4: Влияние на рвоту, вызванную цисплатином у хорьков Использовались самцы хорьков (Marshall Lab., USA), весящие примерно 1 кг. Для внутривенной инъекции канюля имплантировалась в шейную вену под анестезией пентобарбиталом за 3-4 дня до начала эксперимента. Каждой испытуемой группе вводили перорально каждую предписанную дозу испытываемого соединения в виде растворенного или суспендированного в 0,5% растворе трагаканта и спустя 30 минут вводили внутривенно через канюлю цисплатин (Sigma), 10 мг/кг (физиологический раствор соли, 3 мл/кг). Количество вызванных рвотных эпизодов в течение следующих 3 часов записывали и рассчитывали коэффициент подавления испытываемого соединения. Эффективные дозы испытываемых соединений для подавления рвоты на 50% (величины ED₅₀), определенные пробит-анализом, приведены в Таблице 2.

Испытательный Пример 5: Влияние на рвоту, вызванную цисплатином у собак От четырех до пяти собак: породы Beagle (вес тела: 10-12 кг) в группе использовались для проверки подавляющего действия испытываемых соединений на рвоту, вызванную цисплатином. Каждой испытуемой группе вводили перорально каждую предписанную дозу испытываемого соединения в виде растворенного или суспендированного в 0,5% растворе трагаканта и спустя 30 минут вводили внутривенно цисплатин (Sigma), 3 мг/кг (физиологический раствор соли, 3 мл/кг). Число рвотных эпизодов в течение 5 часов, последовавших за введением цисплатина, регистрировали для того, чтобы подсчитать коэффициент подавления каждого из испытываемых соединений, и эффективную дозу (величину ED₅₀) для подавления рвоты на 50% определяли путем пробит-анализа. Результаты приведены в Таблице 2.

Как ясно из результатов, приведенных в Таблице 2, соединение Примера 1 проявляет превосходный эффект подавления рвоты, вызванной апоморфином, что определенно основывается на его антагонизме к рецептору допамина D₂, хотя этот эффект и не равен эффекту домперидона, который является избирательным антагонистом рецептора допамина D₂. Кроме того, как особенно удивительный эффект, соединение проявляет сильный эффект подавления рвоты, вызванной цисплатином, основывающийся на его антагонизме к рецептору серотонина S₃ на уровне, примерно эквивалентном уровню ондансетрон гидрохлорида, который является избирательным антагонистом рецептора серотонина S₃. Эти результаты убеждают в том, что соединение Примера 1 обладает антирвотным действием широкого спектра благодаря его превосходному свойству проявлять одновременно сильную антагонистическую активность к рецепторам серотонина S₃ и допамина D₂ в хорошем балансе.

Соединение Примера 1, кроме того, проявляет более сильный антирвотный эффект, чем метоклопрамид гидрохлорид, который имеет слабую связывающую активность к рецепторам как серотонина S₃, так и допамина D₂. В частности, оно проявляет намного более сильный эффект подавления рвоты, вызванной цисплатином, ясно показывая значительную разницу в эффекте по сравнению с метоклопрамид гидрохлоридом.

Ингибирующее действие на рвоту, вызываемую морфином Пять-пятнадцать собак Beagle (вес тела: 10-13 кг) на группу использовали для испытания ингибирующего действия тестируемого соединения на вызываемую морфином рвоту. Каждому из тест-животных вводили внутривенно или перорально предписанную дозу тест-соединения, растворенного или суспендированного в 0,5% растворе трагаканта, и через 15 минут в случае внутривенного введения или через 1 час в случае перорального введения соответственно вводили гидрохлорид морфина (3 мг/кг) подкожной инъекцией в спину. Число приступов рвоты, вызванных в пределах следующего 1 часа, считали и степень ингибирования рассчитывали сравнением числа приступов рвоты тестируемой группы собак с числом приступов рвоты в контрольной группе, и эффективную дозу каждого тест-соединения для ингибирования рвоты на 50% (величину ED₅₀) определяли пробит-анализом.

Результаты теста: Ингибирующее действие противорвотных агентов на вызываемую морфином рвоту (см. табл. 3).

Как ясно видно из вышеупомянутых результатов, соединение данного изобретения проявляет ингибирующее действие на вызываемую морфином рвоту, которое является более сильным, чем ингибирующее действие галопериодола, являющегося селективным антагонистом рецептора допамина D₂.

C. Влияние на центральную систему Испытательный Пример 6: Ингибирующее влияние на исследовательскую активность Самцы мышей (5 на группу, линия Std-ddy, весящие 20-25 г) были использованы как подопытные животные, каждому из которых перорально вводили испытываемое соединение, которое было растворено или суспендировано в 0,5% растворе трагаканта, и после 2 часов после введения они помещались в испытуемую клетку (23 х 35 х 30 см) измерителя активности Animex (Farad Co.). Исследовательская активность каждой мыши подсчитывалась в течение следующих 3 минут. Средние подсчеты исследовательских активностей (подсчет/3 мин) на группу испытуемых мышей сравнивались с таковым для контрольной группы для расчета коэффициента подавления, и эффективная доза (значение ED₅₀) каждого испытываемого соединения для 50%-ного подавления определялось пробит-анализом (probit analysis).

Значения ED₅₀ для соединения по Примеру 1 и гидрохлорида метоклопрамида были соответственно 48,5 мг/кг и 22,4 мг/кг, что показывает, что первое имеет более слабый подавляющий эффект на центральную систему.

Как ясно из вышеприведенных результатов испытаний, соединение формулы (I) и его физиологически приемлемые кислотно-аддитивные соли проявляют превосходные антирвотные эффекты, основанные на их сильной антагонистической активности к рецептору допамина D₂ и серотонина S₃, и являются полезными для лечения или профилактики различных желудочно-кишечных симптомов, связанных с различными заболеваниями и приемом лекарств, как антирвотные агенты широкого спектра действия. Более конкретно, они являются полезными для лечения или профилактики тошноты, рвоты, анорексии, вздутия живота (abdominal fullness), дискомфорта в верхней части живота, болей живота, изжоги, отрыжки и тому подобного, которые способны сопровождать такие заболевания как острые и хронические гастриты, гастроэзофагеальный рефлюкс, язва желудка и двенадцатиперстной кишки, гастроневрозы, опущение желудка, синдром сбрасывания, склеродермия, диабет, заболевания пищевода и желчных протоков, детская периодическая рвота и инфекции верхних дыхательных путей. Они также полезны при лечении и профилактике, например, синдрома раздраженной толстой кишки, запора и детского поноса. Кроме того, они могут использоваться для лечения или профилактики тошноты или рвоты, вызванных приемом антиопухолевых агентов или леводопных препаратов или морфина, являющегося наркотическим обезболивающим, или во время радиоактивного облучения. Более того, они могут использоваться для лечения или профилактики отравлений лекарствами привыкания (морфином, никотином, амфетамином и т.п.) как антипсихотические или анксиолитические агенты.

Соединение формулы (I) и его физиологически приемлемые кислотно-аддитивные соли могут вводиться перорально, непарентерально или интраректально. Хотя клиническая доза варьируется в зависимости от таких факторов, как вид соединения, способ введения, тяжесть болезни и возраст пациента, при их использовании, например в качестве антирвотного, адекватный диапазон дозы обычно составляет 0,01-10 мг/кг/день, предпочтительно 0,1-3 мг/кг/день. При их использовании в качестве антипсихотического агента адекватный диапазон дозы обычно составляет 3-50 мг/кг/день, предпочтительно 5-30 мг/кг/день.

При использовании соединения формулы (I) и его физиологически приемлемых кислотно-аддитивных солей в медицинских целях, как описано выше, они обычно вводятся в форме препаратов, полученных смешением с известными носителями для фармацевтических препаратов. В качестве носителей применяются те из обычно используемых в области медицинских препаратов, которые являются не реакционноспособными с соединением по настоящему изобретению и нетоксичными. Конкретные примеры таких носителей включают лимонную кислоту, глутаминовую кислоту, глицин, лактозу, инозитол, глюкозу, маннит, декстран, сорбит, циклодекстрин, крахмал, частично желатинизированный крахмал, сахарозу, метил-п-гидроксибензоат, пропил-п-гидроксибензоат, алюмометасиликат магния, синтетический алюмосиликат, кристаллическую целлюлозу, натрийкарбоксиметилцеллюлозу, гидроксипропилкрахмал, кальцийкарбоксиметилцеллюлозу, ионообменные смолы, метилцеллюлозу, желатин, гуммиарабик, пуллулан, гидроксипропилцеллюлозу, малозамещенную гидроксипропилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, поливинилпирролидон, поливиниловый спирт, альгиновую кислоту, альгинат натрия, маловязкий кремневый ангидрид, стеарат магния, тальк, трагакант, бентонит, смола вее (veegum), полимер карбоксивинила, двуокись титана, сорбитоловый эфир жирной кислоты, лаурилсульфат натрия, глицерин, глицериды жирных кислот, очищенный ланолин, глицерожелатин, полисорбат, макрогол (macrogol), растительное масло, воск, пропиленгликоль, этанол, бензиловый спирт, хлористый натрий, гидроокись натрия, соляную кислоту и воду.

В качестве применяемых препаративных форм могут быть названы таблетки, капсулы, гранулы, порошки, сиропы, суспензии, инъекции и свечи. Эти препараты могут быть приготовлены известными и общепринятыми методами. Жидкие препараты могут принимать форму, которая растворяется или суспендируется в воде или другой подходящей среде сразу же перед введением. Таблетки и гранулы могут покрываться оболочкой по методу, который сам по себе хорошо известен.

Эти препараты могут содержать, по меньшей мере, 0,01%, предпочтительно 0,1-70% соединения формулы (I) или его физиологически приемлемых кислотно-аддитивных солей. Эти препараты могут дополнительно содержать терапевтически полезный другой компонент(ы).

Что касается токсичности заявленного соединения, Таблица 4 показывает результаты измерения острой токсичности (величины LD₅₀) соединения Примера 1 вместе с данными острой токсичности типичных противорвотных агентов, имеющихся в продаже (ондансетрона и гранисетрона).

Эксперимент: Острая токсичность Использовали группу из 5 самцов мышей (линия Std-ddy, 25-30 г) или крыс (линия Std-Wistar, 180-200 г). Тест-соединение вводили перорально тестируемому животному в форме 0,5% раствора или суспензии в трагаканте и через 7 дней после введения тест-соединений наблюдали летальность животных и определяли 50% летальную дозу (LD₅₀). Результаты показаны в Таблице 4.

Как ясно видно из данных по токсичности, приведенных в таблице 4, соединение данного изобретения обнаруживает более низкую токсичность (т.е. большую величину LD₅₀) при пероральном введении, чем антагонисты рецептора серотонина S₃, имеющиеся в продаже, и, следовательно, считается полностью безопасным: в качестве лекарственного препарата.

Далее настоящее изобретение разъясняется более конкретно ссылками на Ссылочные Примеры и рабочие Примеры. Следует понимать, что изобретение никоим образом не ограничивается этими примерами. Идентификация получаемых соединений проводилась такими способами, как элементный анализ, масс спектры, ИК спектры и ЯМР спектры.

В следующих Ссылочных Примерах и рабочих Примерах для упрощения описания могут использоваться следующие аббревиатуры: J: константа сочетания s: синглет d: дублет t: триплет m: мультиплет br-s: широкий синглет ee: энантиомерный избыток Ссылочный Пример 1. Получение 5-бром-2-метокси-6-метил- амино-3-пиридинкарбоновой кислоты (1) Пятьдесят (50) г 2,6-дифторпиридина растворяют в 200 мл тетрагидрофурана и добавляют по каплям в 326 мл 1,6М раствора н-бутиллития в тетрагидрофуране при -70^oC, после чего перемешивают в течение часа при этой температуре. К реакционной смеси добавляют постепенно 29 г кусочков сухого льда, после чего 30 минут перемешивают смесь при той же температуре. Поднимая температуру до примерно 5^oC, добавляют 500 мл ледяной воды. Реакционную смесь дважды промывают этилацетатом и затем водный слой доводят до pH 3 концентрированной соляной кислотой. Водный слой затем экстрагируют хлороформом. Экстракт промывают насыщенной соленой водой, сушат над безводным сульфатом магния и концентрируют растворитель при пониженном давлении. Кристаллический осадок отбирают фильтрацией и перекристаллизовывают из смеси диэтиловый эфир-н-гексан, получая 63 г 2,6-дифтор-3-пиридинкарбоновой кислоты (т.пл. 170-171^oC).

(2) Смесь 63 г вышеуказанного продукта, 700 мл метанола и 5 мл концентрированной серной кислоты нагревают при кипячении с обратным холодильником в течение 20 часов. После выпаривания растворителя под пониженным давлением остаток разбавляют ледяной водой и экстрагируют хлороформом. Экстракт промывают водой, сушат над безводным сульфатом магния, и растворитель выпаривают при пониженном давлении. Остаток подвергают колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании хлороформом, получая 64 г метил-2,6-дифтор-3-пиридинкарбоксилата в виде масла.

(3) К 500 мл этанольного раствора, содержащего 38 г вышеуказанного продукта, добавляют по каплям 72 г 20% раствора метиламина в этаноле при температуре от -20^oC до -25^oC. Смесь перемешивают в течение 5 часов при этой температуре, и затем поднимают температуру до комнатной. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении. К конденсату добавляют ледяную воду и осадок отбирают фильтрацией, промывают водой, сушат и перекристаллизовывают из смеси диэтиловый эфир-н-гексан (2:3). Таким образом получают 15,7 г метил-2-фтор-6-метиламино-3-пиридинкарбоксилата (т.пл. 156-159^oC).

(4) К 400 мл метанольного раствора, содержащего 15,7 г вышеуказанного продукта, добавляют 19,1 г трет-бутилата калия и нагревают с обратным холодильником в течение 3 часов. После охлаждения реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении и водный раствор бикарбоната натрия добавляют к остатку. Затем осадок отбирают фильтрацией, промывают водой и сушат, получая 16,3 г метил-2-метокси-6-метиламино-3-пиридин-карбоксилата (т.пл. 120- 122^oC, когда перекристаллизован из смеси н-гексан-диэтиловый эфир).

(5) К 70 мл диметилформамидного раствора, содержащего 7,3 г вышеуказанного продукта, добавляют 7,0 г N-бромсукцинимида и нагревают смесь при 80^oC в течение 4 часов. К реакционной жидкости добавляют ледяную воду и образующийся в результате осадок отбирают фильтрацией, промывают водой и сушат, получая 9,8 г метил-5-бром- 2-метокси-6-метиламино-3-пиридинкарбоксилата (т. пл. 136-138^oC, когда перекристаллизован из смеси н-гексан-диэтиловый эфир).

(6) К 100 мл метанольного раствора, содержащего 20 г вышеуказанного продукта, добавляют 200 мл водного раствора, содержащего 3,1 г гидроокиси натрия, после чего 1,5 часа нагревают с обратным холодильником. После охлаждения метанол выпаривают при пониженном давлении и остаток подкисляют концентрированной соляной кислотой. Осажденное таким образом твердое вещество отбирают фильтрацией, промывают водой и сушат, получая 18,9 г целевого продукта (т.пл. 224-225^oC).

¹H-ЯМР спектр (ДМСО-d₆, ppm): 2.92 (3H, d, J=5 Гц), 3.88 (3H, s), 7.08 (1H, d, J=5 Гц), 7.98 (1H, s), 12.08 (1H, s).

Пример 1. Получение (R)-5-бром-N-(1-этил-4-метилгексагидро- 1H-1,4-диазепин-6-ил)-2-метокси-6-метиламино-3-пиридинкарбоксамид дифумарата (1) Жидкую смесь 18,0 г 5-бром-2-метокси-6-метиламино-3- пиридинкарбоновой кислоты, 11,7 г N,N'-карбонилдиимидазола и 50 мл диметилформамида перемешивают при комнатной температуре в течение 8 часов. К реакционной смеси затем добавляют 13,0 г (R)-6- амино-1-этил-4-метилгексагидро-1H-1,4-диазепина с последующим 15- часовым перемешиванием при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении и к ней добавляют 2N водный раствор гидроокиси н