Имиды как ингибиторы tnf-альфа

Имиды как ингибиторы tnf-альфа

Реферат

 

Описываются новые соединения - циклические имиды общей формулы I, где R¹ означает двухвалентный остаток 3,4-пиридина, пирролидина, имидазола, нафталина или линейного или разветвленного алкана с 3 - 6 атомами углерода, незамещенного или замещенного фенилом или фенилом с заместителями нитро, циано, трифторметил, карбэтокси, карбметокси, карбпропокси, ацетил, карбамоил, ацетокси, карбокси, гидрокси, амино, алкил с 1 - 4 атомами углерода, алкокси с 1 - 4 атомами углерода, или гало, в которых валентные связи указанного остатка находятся у вицинальных атомов углерода в кольце, R² означает -CO- и n означает 1, 2 или 3. Соединения I могут наути применение как ингибиторы TNF-альфа. Описываются также фармацевтические композиции, обладающие свойствами ингибирования TNF-альфа. 8 с. и 35 з.п.ф-лы, 3 табл.

Изобретение относится к методам уменьшения уровня TNF у млекопитающих и к соединениям, применимым для этой цели.

TNF , или фактор, вызывающий некроз опухолевых клеток, это цитокин, который выделяется первоначально моноядерными фагоцитами как реакция на различные иммуностимуляторы. При введении в организм животных или человека он вызывает воспаление, лихорадку, сердечно-сосудистые нарушения, кровотечения, свертывание крови и острые реакции, подобные тем, которые бывают при острых инфекциях и шоковых состояниях.

Избыточное или нерегулируемое выделение TNF наблюдается при различных болезненных состояниях. К ним относятся эндотоксемия и/или синдром токсического шока (Tracey et al., Nature 330, 662-664 (1987), Hinshaw et al., Cirk. Shock 30, 279-292 (1990); истощение (Dezube et al., Lancet, 335, (8690), 662 (1990); и в случае респираторного дистресс-синдрома взрослых (РДСВ), где, как было найдено, концентрация TNF в легочном выдохе РДСВ - пациентов была более 12000 пг/мл. (Millar et al., Lancet 2 (8665), 712-714 (1989). Систематические внутривенные вливания рекомбинантного TNF также приводило к изменениям, типичным для РДСВ (Ferrai-Baliviera et al., Arch. Surg. 124 (12), 1400-1405 (1989).

TNF, по-видимому, ответственен за нарушение всасывания в костных тканях, включая артриты, где, как было найдено, лейкоциты, будучи активированы, проявляют активность в отношении всасывающей способности костных тканей, причем данные указывают, что TNF вносит вклад в эту активность (Bertolini et al. , Nature 319, 516-518 (1986) Johnson et al., Endocrinology 124 (3), 1421-1427 (1989). Было найдено, что TNF стимулирует резорбцию кости и ингибирует ее образование in vitro и in vivo путем стимулирования образования клетки, рассасывающей кость (остеокласта), и активации, комбинированной с ингибированием остеобластической функции. Хотя TNF может участвовать во многих нарушениях костного всасывания, включая артриты, самая неопровержимая связь с заболеванием - это связь между образованием TNF тканями опухоли или хозяина и не поддающимся лечению повышенным содержанием кальция в крови (Calci. Tissue Int (US) 46 (Suppl), S3-10 (1990). При реакции отторжения пересаженной ткани повышенный уровень TNF в сыворотке связывается с главным осложнением, следующим за пересадкой чужеродного костного мозга (Holler et al., Blood, 75 (4), 1011-1016 (1990).

Церебральная малярия - это летательный сверхтяжелый неврологический синдром, ассоциирующийся с высоким уровнем TNF в крови и с самыми тяжелыми осложнениями у больных малярией. Содержание TNF в сыворотке непосредственно коррелируется с тяжестью заболевания и прогнозом у больных тяжелой формой малярии (Grau et al., N.Eng. J.Med. 230 (24), 1586-1591 (1989).

TNF также играет роль при хронических воспалениях легких. Осаждение частиц кремнезема ведет к силикозу, прогрессивной респираторной недостаточности, вызванной фиброзной реакцией. Антитела TNF полностью блокируют вызываемый кремнеземом фиброз легких у мышей (Pignet et al., Nature, 344: 245-247 (1990). Высокие уровни выделения TNF (в сыворотке и в выделенных макрофагах) были продемонстрированы на животных, у которых был фиброз, вызванный кремнеземом и асбестом (Bissonnette et al., Inflammation 13 (3), 329-339 (1989)). Также было найдено, что альвеолярные макрофаги больных легочным саркоидозом спонтанно выделяют очень большие количества TNF по сравнению с макрофагами нормальных доноров (Baughman et al., J.Lab. Clin. Med. 115(1), 36-42 (1990).

TNF также причастен к воспалительной реакции после реперфузии, называемой реперфузионной травмой, и является главной причиной повреждения ткани после большой потери крови (Vedder et al., PNAS 87, 2643-2646 (1990).

TNF также меняет свойства эндотелиальных клеток и проявляет различную пред-коагулярную активность, такую как способствование увеличению клеточного фактора пред-коагулянтной активности и подавление антикоагулянтного пути протеина C, а также уменьшение регулирования экспрессии тромбомодулина (Sherry et al. , J.Cell Biol, 107, 1269-1277 (1988). TNF имеет предвоспалительную активность, которая наряду с фактом его раннего образования (на начальной стадии воспаления) делает его вероятным медиатором повреждения ткани в ряде важных нарушений, включающих, но не ограничивающихся этим, инфаркт миокарда, внезапные приступы (припадки) и циркуляторный шок. Особую важность может представлять экспрессия адгезии молекул, такая как межклеточная адгезия молекул (JCAM) или адгезия молекул эндотелиальных лейкоцитов (ELAM) на эндотелиальных клетках (Munro et al., Am.J.Path. 135 (1), 121-132 (1989).

Более того, сейчас известно, что TNF - сильный активатор репликации ретровируса, включающий активацию ВИЧ-1 (Duh et al., Proc. Nat. Acad. Sci. 86, 5974-5978 (1989); Poll et al., Proc. Nat. Acad. Sci, 87, 782-785 (1990); Monto et al., Blood 79, 2670 (1990); Clouse et al., J. Immunol, 142, 431-438 (1989); Poll et al., AIDS Res. Hum. Retrovirus, 191-197 (1992). СПИД возникает в результате заражения Т-лимфоцитов вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ). По крайней мере три типа или штамма ВИЧ было идентифицировано, а именно ВИЧ-1, ВИЧ-2 и ВИЧ-3 как следствие ВИЧ-инфекции, иммунитет, опосредованный Т-клетками, ослабляется, и инфицирование у пациентов проявляется в виде совершенно различных инфекций и/или необычных новообразований. Внедрение ВИЧ в Т-лимфоцит требует активации Т-лимфоцита. Другие вирусы, такие как ВИЧ-1, ВИЧ-2, инфицируют Т-лимфоциты после активации Т-клетки и экспрессия и/или репликация вирусного белка опосредуется или поддерживается такой активацией Т-клетки. Будучи инфицированным ВИЧ, активированный Т-лимфоцит должен и дальше находиться в активированном состоянии, чтобы обеспечить экспрессию ВИЧ-гена и/или ВИЧ репликацию. Цитокины, особенно будучи вовлеченными в активированную Т-клетку, опосредуют экспрессию ВИЧ белка и/или репликацию вируса, играя роль при поддержании Т-лимфоцита в активированном состоянии. Следовательно, вмешательство в цитокиновую активность, такое как предотвращение или ингибирование продуцирования цитокина, особенно TNF, у ВИЧ-инфицированных помогает ограничить содержание Т-лимфоцитов, вызванных ВИЧ-инфекцией.

Моноциты, макрофаги и родственные клетки, такие как Купферовские и глиальные клетки, также рассматривались при ВИЧ-инфекции. Клетки, подобные Т-клеткам - это мишени вирусной репликации, а уровень вирусной репликации зависит от активированного состояния клетки (Rosenberg et al., The Immunogenesis of HIV Infection Advances in Immunology, 57 (1989). Было показано, что цитокины, такие как TNF, активируют ВИЧ-репликацию в моноцитах и/или макрофагах (Poli et al., Proc. Natl. Acad, Sci. 87, 782-784 (1990)), следовательно, подтверждение или ингибирование продуцирования или активирования цитокина помогает ограничить развитие ВИЧ, как указано выше для Т-клеток. Дополнительные исследования показали, что TNF является общим фактором при возбуждении ВИЧ in vitro и обеспечивает четкий механизм действия через регуляторный ядерный белок, найденный в протоплазме клеток (Osborn, et al., PNAS 86, 2336-2340).

Это доказательство подтверждает, что уменьшение синтеза TNF может иметь антивирусный эффект при ВИЧ-инфицировании, уменьшая транскрипцию и, таким образом, продуцирование вируса.

Репликация вируса СПИД латентного ВИЧ в Т-клетке и в макрофагальных линиях может быть вызвана TNF (Folke et. al., PNAS, 86, 2365-2368 (1989)). Молекулярный механизм индуцирования вирусной активности определяется способностью TNF активировать ген регуляторного белка (NFKB), обнаруженный в цитоплазме, который усиливает репликацию ВИЧ связыванием с последовательностью гена регуляторного белка (LTR) (Osborn et.al., PNAS 86, 2336-2340 (1989)). Кахексию (истощение), вызванную СПИД'ом, связывают с повышенным содержанием TNF в сыворотке и высоким уровнем самопроизвольного продуцирования TNF в моноцитах периферической крови пациентов (Wright et al., I. Jmmuhol 141 (1), 99-104 (1988)). TNF играет различную роль в других вирусных инфекциях, таких как цитомегалловирус (CMV), вирус гриппа, аденовирус, семейство вирусов герпеса - по причинам, сходным с вышеуказанными.

Предотвращение или ингибирование продуцирования или действия TNF, как можно предсказать, является потенциальной стратегией терапии многих воспалительных инфекционных, иммунологических заболеваний или злокачественных опухолей. Они включают в себя, но не ограничивается этим, септический шок, сепсис, эндотоксический шок, гемодинамический шок и синдром сепсиса, постишемическое поражение перфузии, малярия, грибково-бактериальная инфекция, менингит, псориаз, застойная сердечная недостаточность, фиброзные нарушения, истощение, отторжение пересаженной ткани, рак, аутоиммунные нарушения, оппортунистические инфекции при СПИД'е, ревматоидный артрит, ревматоидный спондилит, остеоартрит, другие артериальные проявления, болезнь Крона (илесит), язвенный колит, рассеянный склероз, систематическая эритрематозная волчанка, узловатая эритема при лепре (ENL), радиационные повреждения, гипероксидные альвеомерные поражения. Попытки, направленные на подавление действия TNF, включают как использование стероидов, таких как дексаметазон и преднизолон, так и применение как поликлональных, так и моноклональных антител (Beutler et al., Science 234, 470-474 (1985); WO 92/11383).

Ядерный фактор КВ (NFKB) - это плейкотропный транскрипционный активатор (Leonardo, et al. , Cell 1989, 58, 227-29). NFKB участвует как активатор транскрипции в ряде болезней и воспалительных процессов и, как полагают, регулирует уровень цитокина, включающий, но не ограничивающийся этим, TNF, а также является активатором транскрипции ВИЧ (Dbaibo, et al., J.Biol. Chem. 1993, 17762-66; Duh et al., Proc. Natl. Acad. Sci.1989, 86, 59 74-78; Bachelerie et al., Nature 1991, 350, 709-12; Boswas et al., J. Acquired Immune Deficiency Syndrome 1993, 6, 778-786; Suzuki et al., Biochem. And Biophys. Res. Comm. 1993 193, 277-83; Suzuki et al., Biochem. And Biophys. Res.Comm. 1992, 189, 1709-15; Suzuki et al. , Biochem. Mol Bio. Int. 1993, 31(4), 693-700; Shakhov et al., 1990, 171, 35-47; и Staal et al., Proc. Natl. Acad. Sci USA 1990, 87, 9943-47). Так, ингибирование связывания NFKB может регулировать транскрипцию гена (генов) цитокина и, с помощью такой модуляции и других механизмов, может быть полезным при ингибировании множества болезненных состояний. Соединения, заявленные в этом патенте, могут ингибировать действие NFKB в ядрах и, таким образом, могут применяться при лечении различных заболеваний, включающих, но не ограничивающихся этим, ревматоидный артрит, ревматоидный спондилит, остеоартрит, другие артериальные состояния, септический шок, сепсис, эндотоксический шок, отторжение ткани, атрофия, болезнь Крона, язвенный колит, рассеянный склероз, систематическая эритрематозная волчанка при ВИЧ, СПИД и оппортунистические инфекции при СПИДе. Количества TNF и NFKB взаимно влияют друг на друга. Как сказано выше, соединения настоящего изобретения действуют как на содержание TNF, так и на содержание NFKB. Однако, в настоящее время неизвестно, как соединения настоящего изобретения регулируют содержания TNF, NFKB или обоих.

Подробное описание изобретения Настоящее изобретение основано на открытии, что класс не-полипептидных имидов, более подробно описанных ниже, ингибирует действие TNF, NFKB.

Первый аспект настоящего изобретения относится к соединениям формулы в которой Z или R⁴-NH R¹ представляет собой бирадикал, являющийся остатком (I) 3,4-пиридина, (II) пирролидина, (III) имидазола, (IV) нафталина или (V) линейных или разветвленных алканов с 2-6 атомами углерода, замещенных или незамещенных с заместителями фенилом или замещенным фенилом с заместителями нитро, циано, трифторметил, карбэтокси, карбметокси, карбпропокси, ацетил, карбамоил, ацетокси, карбокси, гидрокси, амино, алкил с 1-4 атомами углерода, алкоксим с 1-4 атомами углерода или гало, при этом две свободные связи указанного бирадикала находятся у вицинальных углеродных атомов цикла; R² представляет собой -CO-; R³ представляет собой (I) фенил с 1-3 заместителями, каждый из которых выбран независимо из ряда: нитро, циано, трифторметил, карбэтокси, карбметокси, карбпропокси, ацетил, карбамоил, ацетокси, карбокси, гидрокси, амино, алкил с 1-4 атомами углерода, алкокси с 1-4 атомами углерода или гало, (II) пиридил, (III) пирролил, (IV) имидазолил, (V) нафтил, (VI) хинолил, (VII) фурил или (VIII) индолил; R⁴ является аланил, аргинил, глицил, фенилглицил, гистидил, лейцил, изолейцил, лизил, пролил, саркозил, серил, гомосерил, треонил, тиронил, валил, бензимидол-2-ил, бензоксазол-2-ил или фенилкарбамоил; и n имеет значения 1, 2 или 3.

Если разбирать более детально, то к первому предпочтительному подклассу относятся соединения формулы в которых R¹ представляет собой бирадикал, являющийся остатком (I) 3,4-пиридина, (II) пирролидина, (III) имидазола, (IV) нафталина или (VI) линейного или разветвленного алкана с 2-6 атомами углерода, незамещенного или замещенного с заместителем фенилом или замещенным фенилом с заместителями нитро, циано, трифторметил, карбэтокси, карбметокси, карбпропокси, ацетил, карбамоил, ацетокси, карбокси, гидрокси, амино, алкил с 1-4 атомами C, алкокси с 1-4 атомами C, или гало, где две свободные связи указанного бирадикала находятся у вицинальных атомов C; R² представляет собой -CO-, а n имеет значение 1, 2 или 3.

Предпочтительные соединения формулы IA включают такие, в которых R¹ является бирадикалом, представляющим собой остаток пиридина, нафталина или имидазола, R² является -CO-, а n соответствует 2.

Второй предпочтительный подкласс относится к соединениям формулы: в которой R³ представляет собой (I) фенил, содержащий заместители нитро, циано, трифторметил, карбэтокси, карбметокси, карбпропокси, ацетил, карбамоил, ацетокси, карбокси, гидрокси, амино, алкил с 1-4 атомами C, алкокси с 1-4 атомами C, или гало, (II) пиридил (III), пиролил, (IV) имидазолил, (V) нафтил, (VI) хинолил, (VII) фурил или (VIII) индолил; и n имеет значения 1, 2 или 3.

Предпочтительные соединения формулы IB - это те, в которых ³ является трифторметилфенил, цианофенил, метоксифенил, фторфенил или фурил, а n равно 2.

К третьему предпочтительному подклассу относятся соединения формулы: в которой E является аланил, аргинил, глицил, фенилглицил, гистидил, лейцил, изолейцил, лизил, пролил, саркозил, серил, гомосерил, треонил, тиронил, тирозил, валил, бензимидазол-2-ил, бензоксазол-2-ил или фенилкарбамоил, а n имеет значение 1, 2 или 3.

Предпочтительные соединения формулы IC таковы, в которых R⁴ представляет собой фенилсульфонил или 2-амино-3-фенилпропионил и n равно 2.

Второй аспект настоящего изобретения относится к соединениям формулы: в которой R⁵ представляет собой (I), o-фенилен, незамещенный или замещенный с 1-3 заместителями, выбранными независимо из ряда: нитро, циано, трифторметил, карбэтокси, карбметокси, карбпропокси, ацетил, карбамоил, ацетокси, карбокси, гидрокси, амино, алкил с 1-4 атомами C, алкокси с 1-4 атомами C, или гало, или (II) бирадикал, являющийся остатком пиридина, пирролидина, имидазола, нафталина, в котором две свободные связи находятся у вицинальных атомов углерода; R⁶ является -CO- или CH₂-; R⁷ является (I) H, (II) линейный, разветвленный или циклический алкил с 1-12 атомами C, (III) пиридил, (IV) фенил или замещенный фенил с одним или двумя заместителями, каждый из которых выбирается независимо от другого из ряда нитро, циано, трифторметил, карбэтокси, карбметокси, карбпропокси, ацетил, карбамоил, ацетокси, карбокси, гидрокси, амино, алкил с 1-10 атомами C, алкокси с 1-10 атомами C, или гало, (V) алкил с 1-4 атомами C, (VI) бензил, незамещенный или замещенный с 1-3 заместителями, выбранными из группы, состоящей из нитро, циано, трифторметил; карбэтокси, карбметокси, карбпропокси, ацетил, карбамоил, ацетокси, карбокси, гидрокси, амино, алкил с 1-4 атомами C; алкокси с 1-4 атомами C, (VII) нафтил, (VIII) бензилокси или (IX) имидазол-4-ил; R¹² представляет собой - OH, алкокси с 1-12 атомами C, или n имеет значение 0, 1, 2 или 3; R^8' является H или алкил с 1-4 атомами C и R^9' является H, алкил с 1-4 атомами C, -COR¹⁰, в котором R¹⁰ является H, алкил, с 1-4 атомами C или фенил.

К первому предпочтительному подклассу соединений формулы II относятся соединения формулы в которой R⁵ представляет собой (1) - o-фенилен, незамещенный или замещенный с 1-3 заместителями, каждый из которых выбран независимо из ряда: нитро, циано, трифторметил, карбэтокси, карбметокси, карбпропокси, ацетил, карбамоил, ацетокси, карбокси, гидрокси, амино, алкил с 1-4 атомами C, алкокси с 1-4 атомами C или гало, или (II) бирадикал - остаток пиридина, пирролидина, имидазола, нафталина, у которого две свободные связи находятся у вицинальных атомов C цикла; R⁶ является -CO- или -CH₂-; R⁷ представляет собой (I) H, (II) линейный, разветвленный или циклический алкил с 1-12 атомами C, (III) пиридин, (IV) фенил или замещенный фенил с одним или более заместителем, каждый из которых независимо от других выбран из ряда нитро, циано, трифторметил, карбэтокси, карбметокси, карбпропокси, ацетил, карбамоил, ацетокси, карбокси, гидрокси, амино, алкил с 1-10 атомами углерода, алкокси с 1-10 атомами углерода, или гало, (V) алкил с 1-4 атомами C, (VI) бензил, незамещенный или замещенный с 1-3 заместителями, выбранными из группы, состоящей из нитро, циано, трифторметил, карбоэтокси, карбметокси, карбпропокси, ацетил, карбамоил, ацетокси, карбокси, гидрокси, амино, алкил из 1-4 атомов C, алкокси из 1-4 атомов C, или гало; (VII) нафтил, (VIII) бензилокси или (IX) имидазол-4-ил; n имеет значение 0, 1, 2 или 3; R⁸ является H или алкил с 1-4 атомами C, R⁹ представляет собой водород, алкил с 1-4 атомами C, -COR¹⁰, где R¹⁰ является водородом, алкилом с 1-4 атомами C или фенилом.

Предпочтительные соединения формулы IIA это такие, в которых R⁵ представляет собой o-фенилен, R⁶ является -CO-; R⁷ - фенил, замещенный фенил или пиридин; n равен 0 или 1, а R⁸ и R⁹ представляют собой водород.

Ко второму предпочтительному подклассу соединений формулы II относятся соединения формулы: в которой R⁵ представляет собой (I) -o-фенилен, незамещенный или замещенный с 1-3 заместителями, каждый из которых выбран независимо из ряда нитро, циано, трифторметил, карбэтокси, карбметокси, карбпропокси, ацетил, карбамоил, ацетокси, карбокси, гидрокси, амино, алкил с 1-4 атомами C, алкокси с 1-4 атомами C, или гало, или (II) бирадикал, являющийся остатком пиридина, пирролидина, имидазола, нафталина, у которого две свободные связи находятся у вицинальных атомов углерода в цикле; R⁶ является -CO- или CH₂-; R⁷ представляет собой (I) водород, (II) линейный, разветвленный или циклический алкил с 1-12 атомами углерода, (III) пиридил, (IV) фенил или фенил, замещенный одним или более заместителей, каждый из которых выбран независимо от других из ряда: нитро, циано, трифторметил, карбэтокси, карбметокси, карбпропокси, ацетил, карбамоил, ацетокси, карбокси, гидрокси, амино, алкил с 1-10 атомами углерода, алкокси с 1-10 атомами углерода, или гало; (V) алкил с 1-4 атомами C, (VI) бензил, незамещенный или замещенный 1-3 заместителями, выбранными из группы, состоящей из нитро, циано, трифторметил, карбэтокси, карбметокси, карбпропокси, ацетил, карбамоил, ацетокси, карбокси, гидрокси, амино, алкил с 1-4 атомами C, или гало, (VII) нафтил, (VIII) бензилокси или (IX) имидазол-4-ил и n имеет значения 0, 1, 2 или 3.

Предпочтительные соединения формулы IIB - это такие, в которых R⁵ является o-фенилен, R⁶ есть -CO-; R⁷ представляет собой фенил, замещенный фенил или пиридин; n равен 0 или 1.

К третьему предпочтительному подклассу соединений формулы II относятся соединения формулы: в которой R⁵ представляет собой (1) o-фенилен, незамещенный или замещенный с 1-3 заместителями, каждый из которых выбирается независимо от других из ряда: нитро, циано, трифторметил, карбэтокси, карбметокси, карбпропокси, ацетил, карбамоил, ацетокси, карбокси, гидрокси, амино, алкил с 1-4 атомами C, алкокси 1-4 атомами C, или гало, или (II) бирадикал, являющийся остатком пиридина, пирролидина, имидазола, нафталина, в котором две свободные связи находятся у вицинальных атомов углерода в кольце; R⁶ является -CO- или -CH₂-, R⁷ представляет собой (I) водород, (II) линейный, разветвленный или циклический алкил из 1-12 атомов углерода, (III) пиридил, (IV) фенил или замещенный фенил с 1 или более заместителей, каждый из которых выбран независимо от других из ряда: нитро, циано, трифторметил, карбэтокси, карбметокси, карбпропокси, ацетил, карбамоил, ацетокси, карбокси, гидрокси, амино, алкил с 1-10 атомами C, алкокси с 1-10 атомами C, или гало, (V) алкил с 1-4 атомами C, (VI) бензил, незамещенный или замещенный с 1-3 заместителями, выбранными из группы, состоящей из нитро, циано, трифтор-метил, карбэтокси, карбметокси, карбпропокси, ацетил, карбамоил, ацетокси, карбокси, гидрокси, амино, алкил с 1-4 атомами углерода или гало, (VII) нафтил (VIII), бензил-окси или (IX) имидазол-4-ил; R¹² является -OH или алкокси с 1-12 атомами углерода; и n имеет значение 0, 1, 2 или 3.

Предпочтительными соединениями формулы IIC являются такие, в которых R⁵ представляет собой фенилен или аминозамещенный о-фенилен, R⁶ есть -CO-; R⁷ является фенил, замещенный фенил или пиридил; R¹² является метокси; а n равно 0 или 1.

Третий аспект настоящего изобретения относится к соединениям формулы в которой R⁷ представляет собой (I) линейный, разветвленный или циклический алкил с 1-12 атомами углерода, (II) пиридил, (III) фенил или замещенный фенил с одним или более заместителей, каждый из которых выбран независимо от других из ряда: нитро, циано, трифторметил, карбэтокси, карбметокси, карбпропокси, ацетил, карбамоил, ацетокси, карбокси, гидрокси, амино, алкил с 1-10 атомами улерода, алкокси с 1-10 атомами углерода или гало, (IV) бензил, незамещенный или замещенный с 1-3 заместителями, выбранными из группы, состоящей из нитро, циано, трифторметил, карбэтокси, карбметокси, карбпропокси, ацетил, карбамоил, ацетокси, карбокси, гидрокси, амино, алкил с 1-4 атомами углерода или гало, (V) нафтил, (VI) бензилокси или (VII) имидазол-4-илметил; OH, алкокси с 1-12 атомами углерода -O-CH₂-пиридил, -О-бензил или где n имеет значение 0, 1, 2 или 3; R⁸ представляет собой водород или алкил с 1-10 атомами углерода и R⁹ представляет собой водород, алкил с 1-10 атомами C, -CH₂-пиридил, бензил, -COR¹⁰ или -SO₂R¹⁰, в которых R¹⁰ является H или алкил с 1-4 атомами C, или фенил.

Типичные соединения этого изобретения включают 2-(2,6-диоксо-3-пиперидинил)-4-азаизоиндолин-1,3-дион; 2-(2,6-диоксо-3-пиперидинил)-бензо[e]изоиндолин-1,3-дион; 5-(2,6-диоксо-3-пиперидинил)-пирроло[3,4-d]имидазол-4,6-дион; 3-(трифторметилфенилкарбоксамидо)пиперидин-2,6-дион; 3(цианофенилкарбоксамидо)пиперидин-2,6-дион; 3-(метоксифенилкарбоксамидо)-пиперидин-2,6-дион; 3- (3-пиридилкарбоксамидо)- пиперидин-2,6-дион; 3-(2-фурилкарбоксамидо)пиперидин-2,6-дион; 3-фенилсульфонамидопиперидин-2,6-дион; 3-(2-амино-3-фенилпропанамидо)-пиперидин-2,6-дион; 2-фталимидо-2-фенилацетамид; 3-фталимидо-3-фенилпропанамид; 2-фталимидо-3-фенилпропанамид; 2-фталимидо-3-(4-гидрокси) фенилпропанамид; 3-фталимидо-3-фенилпропионовая кислота; 2-фталимидо-2-фенилуксусная кислота; 2-фталимидо-2-(4-фторфенил)-уксусная кислота, 2-фталимидо-2-(2-фторфенил)-уксусная кислота; 2-фталимидо-2-(4-фторфенил)ацетамид; 2-фталимидо-4-метилпентановая кислота, 3-фенилкарбоксамидопиперидин-2,6-дион; 2-фталимидоацетамид; 3-фталимидопропанамид; 3-фталимидоимидазолин-2,5-дион; 3-фенилкарбоксипропандиамид; 2-фталимидо-3-карбамоилпропионовая кислота; 2-(1,3-диоксо-4-азаизоиндолинил)-3-карбамоилпропионовая кислота; 3-(1,3-диоксо-4-азаизоиндолинил)пиперидин-2,6-дион; 2-(1,3-диоксо-4-азаизоиндолинил)ацетамид; 3-фталимидо-3-карбамоилпропионовая кислота; 4-фталимидобутирамид; 4-фталимидомасляная кислота; метил-3-фталимидо-3-(4-метоксифенил)пропионат; этил-3-фталимидо-3-(4-метоксифенил)пропионат; метил-3-фталимидо-3-фенилпропионат и пропил-3-фталимидо-3-(4-метоксифенил)пропионат; 2-(1'-оксо-изоиндолин)-2-фенилуксусная кислота; 2-(1'-оксо-изоиндолин)-2-фенилацетамид; 3-фенил-2-(1'-оксо-изоиндолин) пропионовая кислота; 3-фенил-2-(1'-оксо-изоиндолин)пропионамид; 3-фенил-3-(1'-оксо-изоиндолин)пропионовая кислота; 3-фенил-3-(1'-оксо-изоиндолин)пропанамид; 3-(4'-метоксифенил)-3-(1'-оксо-изоиндолин) пропионовая кислота; 3-(4'-метоксифенил)-3-(1'-оксо-изоиндолин)пропионамид; (3', 4'-диметоксифенил)-3-(1'-оксо-изоиндолин) пропионовая кислота; 3-(3',4'-диметоксифенил)-3-(1'-оксо-изоиндолин)пропионамид); 3-(3', 4'-диметоксифенил)-3-(1'-оксоизоиндолин) пропионовая кислота; 3-(3',4'-диэтоксифенил)-3-фталимидопропионамид; 3-фталимидо-3-(4'-пропоксифенил)пропионовая кислота; 3-фталимидо-3- (4'-пропоксифенил)-пропионамид; этил-3-амино-3-(3'-пиридил)-пропионат гидрохлорид; этил-3-фталимидо-3-(3'-пиридил)пропионат; 3-фталимидо-3-(3', 4'-диметоксифенил) пропионовая кислота; 3-фталимидо-3-(3',4'-диметилоксифенил)пропионамид; этил-3-амино-(3',4'-диметоксифенил)пропионат; этил-3-фталимидо-3-(3',4'-диметоксифенил) пропионат; 3-фталимидо-3-(3',4'-диметоксифенил)пропионовой кислоты амиламид; 3-фталимидо-3-(3',4'-диметоксифенил) пропионовой кислоты бензиламид; 3-фталимидо-3-(3',4'-диметоксифенил-3)-пропионовой кислоты этиламид; 3-фталимидо-3-(4'-этоксифенил) пропионовая кислота; 3-фталимидо-3-(4'-этоксифенил) пропионамид; 3-(цис-гексагидрофталимидо)-3- фенилпропионовая кислота; 3-(цис-гексагидрофталимидо)-3-фенилпропионамид; 3-(4-метилфталимидо)-3-фенилпропионовая кислота; 3-(цис-5-норборнен-эндо-2,3-дикарбоксимид) фенилпропионовая кислота; 3-(2,3,4,5-тетрахлорфталимидо)- 3-(4'-метоксифенил) пропионовая кислота; 3-(4'-нитрофталимидо)-3-(4'-метоксифенил)-пропионовая кислота; 3-фталимидо-3-(2'-нафтил)пропионовая кислота; 3-фталимидо-3-(2'-нафтил)пропиоамид; метил-3-(1,3-диоксо-5-азаизоиндол-2-ил)-3-(3', 4'-диметоксифенил)- пропионат; 3-фталимидо-3-(4'-бензилокси-3'-метоксифенил) пропионовая кислота; 3-фталимидо-3-(4'-бензилокси-3'-метоксифенил) пропиоамид; 3-фталимидо-3-(4'-бутокси-3'-метоксифенил)пропионовая кислота; 3-фталимидо-3-(4'-бутокси-3'-метоксифенил)пропиоамид; 2-(3,4,5,6-тетрахлорфталимидо)-2-фенилуксусная кислота; 2-(4', 5'-дихлорфталимидо)-2-фенилуксусная кислота; 2-фенил-2-(3'-нитрофталимидо)уксусная кислота; 3-(4'-метоксифенил)-3-(3'-нитрофталимидо)пропионовая кислота; 3-(4',5'- дихлорфталимидо)-3-(4'-метоксифенил пропионовая кислота; 3-пиридинметил 3-фталимидо-3- (3',4'-диметоксифенил) пропионат; N-3-метилпиридиламид 3-фталимидо-3-(3',4'-диметоксифенил)пропионовой кислоты; 3-фталимидо-3-(3',4'-дихлорфенил)пропиоамид; метил-3-амино-3-(3', 4'-диметоксифенил)-пропионат гидрохлорид; метил-3-фталимидо-3-(3',4'-диметоксифенил)пропионат; метил-(S)-N-бензил-N-(R)-метилбензил-3-(3',4'-диметоксифенил)пропионат: метил-(S)-3-амино-3-(3,4-диметоксифенил)пропионат гидрохлорид; метил (S)-3-фталимидо-2-(3', 4'-диметоксифенил)пропионат; метил (R)-3-(N-бензил-N-(S)-a-метилбензиламино)-3-(3',4'-диметоксифенил)пропионат; метил (R)-3-амино-3-(3', 4'-диметоксифенил)пропионат гидрохлорид; метил (3R)-3-фталимидо-3-(3',4,-диметоксифенил)пропионат.

Термин алкил, примененный здесь, обозначает остаток насыщенной линейной или разветвленной углеводородной цепи с одной свободной связью. Если не указано иначе, такие цепи могут содержать от 1 до 18 атомов C. Представителями таких алкильных групп являются метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор-бутил, трет.бутил, пентил, изопентил, неопентил, трет-пентил, гексил, изогексил, гептил, октил, нонил, децил, ундецил, додецил, тридецил, тетрадецил, пентадецил, гексадецил, гептадецил, октадецил и т.п. Термин "низшие" обозначает алкильные группы, которые содержат от 1 до 6 атомов C. То же самое относительно количества атомов C применимо к исходному термину "алкан" и к терминам производных, таких как "алкокси". Эти соединения могут быть использованы, под наблюдением квалифицированных профессионалов, для ингибирования нежелательных эффектов TNF. Соединения могут назначаться перорально, ректально (в прямую кишку) или парентерально, одно или в комбинации с другими терапевтическими агентами, включая антибиотики, стероиды и т. д. , млекопитающим с целью лечения. Дозировки для перорального приема включают таблетки, капсулы, драже и подобные прессованные фармацевтические формы. Изотонические солевые растворы, содержащие 20-100 мг/л, могут применяться при парентеральном лечении, которое включает внутримышечный, внутривенный, внутриартериальный и внутриспинномозговой пути введения. Введение в прямую кишку можно осуществлять в виде свечей, приготовляемых с помощью соответствующих наполнителей, таких как масло какао.

Применяемая дозировка определяется индивидуальными показателями, возрастом, весом, общим физическим состоянием пациента и желаемым результатом, но обычно дозы составляют от 10 до примерно 500 мг/день при одноразовом или многократном ежедневном приеме. В общем, первоначальный порядок лечения может быть копией такого, который, как уже известно, является эффективным при регулировании активности TNF для других, вызванных TNF, болезненных состояний соединениями настоящего изобретения. У подвергаемых лечению пациентов должны проверяться регулярно количество Т-клеток и соотношения Т4/Т8 и/или проводиться измерения содержания вируса, такие как количество обратной транскриптазы или вирусных белков, и/или наблюдаться различные осложнения, связанные с вызываемыми цитокинами заболеваниями, такие как истощение и мышечная дегенерация. Если в результате обычного режима лечения не наблюдается быстрого эффекта, количество агента, регулирующего активность цитокина, увеличивается, например, на 50 процентов в неделю.

Соединения настоящего изобретения также могут применяться для местного лечения или профилактики местных заболеваний, вызывающихся или обостряющихся избыточным продуцированием TNF, соответственно, таких вирусных инфекций, как вирусы герпеса или вирусный конъюнктивит и т.п.

Соединения могут также использоваться в ветеринарии для лечения иных млекопитающих, нежели человек, с целью предотвращения или ингибирования продуцирования TNF. Вызванные TNF заболевания, которые можно лечить терапевтически или профилактически, у животных включают болезненные состояния, такие, как указано выше, но, в особенности вирусные инфекции. Примеры включают кошачий вирус иммунодефицита, вирус инфекционной анемии лошадей, вирус артрита коз, вирусы ВИСНА и МАЕДИ, а также другие лентивируса.

Некоторые из этих соединений имеют оптический центр и могут существовать в виде оптических изомеров. Как рацематы, так и сами оптические изомеры, а также диастереомеры, в которых два хиральных центра являются предметом настоящего изобретения. Рацематы могут использоваться как таковые, а также могут быть разделены на индивидуальные изомеры механически или хроматографически с помощью хирального адсорбента. Кроме того, индивидуальные изомеры можно приготовить в оптически активной форме или выделить химически из смеси через соли с хиральными кислотами, как например, индивидуальные энантиомеры 10-камфорсульфоновой кислоты, камфорной кислоты, альфа-бромкамфорной кислоты, метоксиуксусной кислоты, винной кислоты, диацетилвинной кислоты, гидроксиянтарная кислота, пирролидон-5-карбоновая кислота и им подобные; а затем выделяют один или оба изомера из растворенного основания, повторяя процесс так, чтобы получить практически чистые друг от друга, т.е. в форме, имеющей > 95% оптической чистоты, один или оба изомера.

Соединения могут быть получены обычными известными методами синтеза имидов. Однако, настоящее изобретение также относится к улучшению способа получения конечных продуктов, как более подробно обсуждается ниже.

N-Алкоксикарбонилимид и амин реагируют в присутствии основания, такого как карбонат натрия или бикарбонат натрия, как описано у Shealy et al., Chem. and Ind., (1965) 1030-1031 и Shealy et al., J. Pharm. Sci. 57, 757 - 764 (1968), давая N-замещенный имид. С другой стороны, ангидрид циклической кислоты может реагировать с соответствующим амином, давая имид. Образование циклического имида может быть усовершенствовано так, что раствор соответствующего моноамида дикарбоновой кислоты кипятят в безводном тетрагидрофуране с N,N'-карбонилдиимидазолом. В отличие от ранее известных методов, выход в которых был менее 50%, в данной реакции выход более 60%, в ряде случаев более 90%. Эта реакция имеет более широкие возможности применения; так можно получать не только соединения настоящего изобретения, но также известные соединения, такие как талидомид.

Предотвращение или ингибирование продуцирования TNF этими соединениями удобно изучать, используя антитела к TNF. Например, планшеты (Nunc Immunoplates, Roskilde, ДК) обрабатывались 5 мг/мл очищенных кроличьих антител к TNF при 4^oC в течение 12-14 часов. Планшеты затем обрабатывали 2 часа при 25^o РВ/0,05% Твин., содержащим 5 мг/мл BSA. После отмывания наносили 100 мл исследуемого материала, а также контрольные образцы, и планшеты выдерживали при 4^oС в течение 12-14 часов. Планшеты отмывали и добавляли конъюгат пероксидазы хрена и мышиные моноклональные антитела к TNF, и развитие цветовой окраски с o-фенилендиамином в фосфатцитратном буфере с 0,012% перекиси водорода считали при 492 нм.

Следующие примеры послужат для дальнейшего уяснения сущности изобретения, но никоим образом не ограничивают объема предмета изобретения, который можно оценить только из прилагаемой формулы изобретения.

Пример 1.

Перемешиваемую суспензию (S)-глутамина (14.6 г, 100 ммол) и 2,3-пиридинкарбонового ангидрида (14,9 г, 100 мол) в 100 мл уксусной кислоты нагревали и кипятили 1 час. Реакционную смесь охлаждали до затвердевания. Твердое вещество фильтровали и промывали уксусной кислотой. Получили 7,11 г (26%) 2-(1,3-диоксо-4-азаизоиндолин-2-ил) глутара