Ингибиторы тромбина, фармацевтическая композиция на их основе, способ лечения, способ их получения (варианты) и защищенное производное

Ингибиторы тромбина, фармацевтическая композиция на их основе, способ лечения, способ их получения (варианты) и защищенное производное

Реферат

 

Описываются новые соединения формулы (I), где р и q независимо равны 0, 1, 2, 3 или 4; R представляет собой Н, 2,3-эпоксипропил, C_1-6алкил (последний возможно замещен или оканчивается одной или более чем одной гидроксигруппой), структурный фрагмент формулы Iа, где А¹ представляет собой С_1-4алкилен, и R^х представляет собой Н, или, когда р = 0, вместе с R² представляет собой структурный фрагмент формулы Iб, где R^у представляет собой Н; R² представляет собой Н, нафтил, индолил, С_1-4алкил (последняя группа возможно замещена или оканчивается одной или более чем одной гидроксигруппой), С_3-8циклоалкил, фенил (последние две группы возможно замещены одним или более чем одним С_1-4алкилом, С_1-4алкокси, галогено, гидрокси, нитро, метилендиокси, трифторметилом, N(H)R²³ или C(О)OR²⁴), или, когда р = 0, вместе с R¹ представляет собой структурный фрагмент формулы 1б; R³ представляет собой Н, нафтил, индолил, С_1-6алкил (последняя группа возможно замещена или оканчивается одной или более чем одной гидроксигруппой), С_3-8циклоалкил или фенил (последние две группы возможно замещены одним или более чем одним С_1-4алкилом, С_1-4алкокси, галогено, гидрокси, нитро, метилендиокси, трифторметилом, N(H)R²⁷ или C(О)OR²⁸); R²³ и R²⁷ независимо представляют собой Н, C_1-4алкил или C(О)R²⁹; R²⁴, R²⁸ и R²⁹ независимо представляют собой Н или С_1-4алкил; R⁴ представляет собой Н или С_1-4алкил; Y представляет собой C_1-4алкилен, возможно замещенный С_1-4алкилом, метиленом или оксо; n = 1 или 2; и В представляет собой структурный фрагмент формулы IVa, IVб или IVв, где R⁵ представляет собой Н; и Х' и X² независимо представляют собой простую связь или СН₂; при условии, что когда R¹, R² и R⁴ все представляют собой Н, р = 0, Y представляет собой (СН₂)₂, n = 1 и (а) R³ представляет собой незамещенный фенил и (1) В является структурным фрагментом формулы IVa, и R⁵ представляет собой Н, тогда q не равно 0 или 1; и (2) В является структурным фрагментом формулы IVб, и X' и X² оба представляют собой СН₂, тогда q 0; и (б) R³ представляет собой незамещенный циклогексил, В представляет собой структурный фрагмент формулы IVa, и R⁵ представляет собой Н, тогда q 0; или его фармацевтически приемлемая соль. Новые соединения полезны в качестве конкурирующих ингибиторов трипсин-подобных протеаз, таких как тромбин, и, в особенности, при лечении состояний, при которых требуется ингибирование тромбина (например, тромбоз), или в качестве антикоагулянтов. Описывается также фармацевтическая композиция на их основе, способ лечения, способ их получения (варианты) и защищенное производное. 7 с. и 37 з.п. ф-лы.

Изобретение относится к новым соединениям, обладающим активностью ингибиторов тромбина, способам их получения и их использованию в медицине.

Коагуляция крови представляет собой ключевой процесс, который включает в себя как гомеостаз (то есть предотвращение потери крови из поврежденных сосудов), так и тромбоз (то есть образование сгустка крови в кровеносном сосуде или в сердце, что иногда приводит к закупорке сосудов).

Коагуляция является результатом сложной серии ферментативных реакций. Одной из основных стадий в этой серии реакций является превращение профермента протромбина в активный фермент тромбин.

Известно, что тромбин играет центральную роль в коагуляции. Он активирует тромбоциты, что приводит к их агрегации, превращает фибриноген в фибриновые мономеры, которые спонтанно полимеризуются в фибриновые полимеры, активирует фактор XIII, который, в свою очередь, сшивает эти полимеры с образованием нерастворимого фибрина. Далее, тромбин активирует фактор V и фактор VIII, что приводит к генерации тромбина из протромбина по методу "положительной обратной связи".

Поэтому следует ожидать, что эффективные ингибиторы тромбина будут проявлять антитромботическую активность путем ингибирования агрегации тромбоцитов и образования и сшивки фибрина. Кроме того, можно ожидать, что антитромботическая активность может быть повышена эффективным ингибированием механизма положительной обратной связи.

Разработка низкомолекулярных ингибиторов тромбина описана [Claesson, Blood Coagul.Fibrinol.(1994) 5, 411].

Известны [Blombaeck et al., J. Clin. Lab. Invest. 24., suppl. 107, 59, (1969)] ингибиторы тромбина на основе аминокислотной последовательности, расположенной вокруг сайта расщепления цепи A фибриногена. Как полагали авторы, из рассмотренных аминокислотных последовательностей наиболее эффективным ингибитором может быть последовательность Phe-Val-Arg (P9-P2-P1, на которую здесь и далее ссылаются как на последовательность P3-P2-P1) [классификация субстратной специфичности дана в Schechten and Bergen, Biophys. Res. Commun. (1967) 27, 157 и (1968) 32, 898].

Известны [патент США N 4346078, Международная заявка WO 93/11152] ингибиторы тромбина на основе дипептидильных производных C,- аминоалкилгуанидином в положении P1. Аналогично, сообщалось о родственных по структуре дипептидильных производных. Например, известны [Международная заявка WO 94/29336] соединения с, например, аминометилбензамидинами, циклическими аминоалкиламидинами и циклическими аминоалкилгуанидинами в положении P1; известны [Заявка на Европейский патент 0648780] соединения с, например, циклическими аминоалкилгуанидинами в положении P1.

Известны [Заявки на Европейский патент 0468231, 0559046 и 0641779] ингибиторы тромбина на основе пептидильных производных, также имеющие циклические аминоалкилгуанидины (например, либо 3-, либо 4-аминометил-1-амидинопиперидин) в положении P1.

Известны [Заявка на Европейский патент 0185390] ингибиторы тромбина на основе трипептидильных производных с аргининальдегидом в положении P1.

Совсем недавно были описаны пептидильные производные на основе аргининальдегида, модифицированные в положении P3, например гидроксикислотами [Международная заявка WO 93/18060], дезаминокислотами [Заявка на Европейский патент 0526877], О-метилминдальными кислотами [Заявка на Европейский патент 0542525] в положении P3.

Известны также ингибиторы сериновых протеаз (например, тромбина) на основе электрофильных кетонов в положении P1, например пептидил -кетоэфиры и амиды [Заявка на Европейский патент 0195212], фторалкиламидкетоны [Заявка на Европейский патент 0362002], ,,-трикетосоединения [Заявка на Европейский патент 0364344] и -алкоксикетонные производные аргинина [Заявка на Европейский патент 0530167).

Известны [Заявка на Европейский патент 0293881] и другие, отличные по структуре, ингибиторы трипсиноподобных сериновых протеаз на основе производных аргинина с C-концевыми бороновыми кислотами и их изотиоурониевых аналогов.

Совсем недавно были раскрыты [Заявки на Европейский патент 0669317, 0686642, 0648780 и Международные заявки WO 95/35309, WO 95/23609 и WO 94/29336] ингибиторы тромбина на основе трипептидильных производных.

Тем не менее потребность в эффективных, доступных при пероральном введении ингибиторах трипсиноподобных сериновых протеаз, таких как тромбин, по-прежнему сохраняется.

Таким образом, в задачу изобретения входило создание новых соединений, способных селективно ингибировать тромбин, которые могут быть использованы в качестве лекарственных средств для лечения заболеваний, при которых требуется ингибирование тромбина, а также разработка фармацевтических композиций на их основе и способов лечения указанных заболеваний с использованием этих соединений. В задачу изобретения также входила разработка способов получения соединений по изобретению.

Поставленная задача решается тем, что предложено соединение формулы , где p и q независимо равны 0, 1, 2, 3 или 4; R¹ представляет собой H, 2,3-эпоксипропил, C_1-6алкил (последняя группа возможно замещена или оканчивается одной или более чем одной гидроксигруппой), структурный фрагмент формулы Ia , где A¹ представляет собой C_1-4алкилен, и R^x представляет собой H, или, когда p равно 0, вместе с R² представляет собой структурный фрагмент формулы Iб , где R^y представляет собой H, R² представляет собой H, нафтил, индолил, C_1-4алкил (последняя группа возможно замещена или оканчивается одной или более чем одной гидроксигруппой), C_3-8циклоалкил, фенил (последние две группы возможно замещены одним или более чем одним C_1-4алкилом, C_1-4алкокси, галогено, гидрокси, нитро, метилендиокси, трифторметилом, N(H)R²³ или C(O)OR²⁴), или, когда p равно 0, вместе с R¹ представляет собой структурный фрагмент формулы Iб; R³ представляет собой H, нафтил, индолил, C_1-6алкил (последняя группа возможно замещена или оканчивается одной или более чем одной гидроксигруппой), C_3-8циклоалкил или фенил (последние две группы возможно замещены одним или более чем одним C_1-4алкилом, C_1-4алкокси, галогено, гидрокси, нитро, метилендиокси, трифторметилом, N(H)R²⁷ или C(O)OR²⁸); R²³ и R²⁷ независимо представляют собой H, C_1-4алкил или C(O)R²⁹; R²⁴, R²⁸ и R²⁹ независимо представляют собой H или C_1-4алкил; R⁴ представляет собой H или C_1-4алкил; Y представляет собой C_1-3алкилен, возможно замещенный C_1-4алкилом, метиленом или оксо; n равно 1 или 2; и В представляет собой структурный фрагмент формулы IVa, IVб или IVв , где R⁵ представляет собой H; и X¹ и X² независимо представляют собой простую связь или CH₂; при условии, что когда: (а) B представляет собой структурный фрагмент формулы IVa, в котором R⁵ представляет собой H, структурный фрагмент формулы IVб, в котором X¹ и X² оба представляют собой CH₂, или структурный фрагмент формулы IVв; n равно 1; Y представляет собой незамещенный C_1-3алкилен; R⁴ представляет собой H; и R¹ представляет собой H или C_1-6алкил; тогда (I) когда q равно 0, a R³ представляет собой H:- (1) R² не представляет собой незамещенный С_1-4алкил, нафтил, индолил или C_3-8ациклоалкил или фенил (последние две группы возможно замещены одним или более чем одним C_1-4алкилом, C_1-4алкокси, галогено, гидрокси, метилендиокси, трифторметилом и C(O)OR²⁴): и (2) группа -(CH₂)_p-R² не представляет собой C_1-6алкил, замещенный OH: или (II) когда p равно 0, a R² представляет собой H:- (1) R³ не представляет собой незамещенный C_1-6алкил, нафтил, индолил или C_3-8циклоалкил или фенил (последние две группы возможно замещены одним или более чем одним C_1-4алкилом, C_1-4алкокси, галогено, гидрокси, метилендиокси, трифторметилом и C(O)OR²⁸); и (2) группа -(CH₂)_q-R³ не представляет собой C_1-6алкил, замещенный OH; (III) R² не представляет собой H или незамещенный C_1-4алкил, когда R³ представляет собой H или незамещенный C_1-6алкил, а общее количество атомов углерода в структурном фрагменте - C((CH₂)_pR²)((CH₂)_qR³)- равно шести или менее; (б) B представляет собой структурный фрагмент формулы IVa, в котором R⁵ представляет собой H, структурный фрагмент формулы IVб, в котором X¹ представляет собой CH₂, а X² представляет собой простую связь или CH₂, или структурный фрагмент формулы IVв; Y представляет собой незамещенный C₁алкилен или C₂алкилен, возможно замещенный (в 4-положении относительно N-атома) C_1-4алкилом; R⁴ представляет собой H; и R¹ представляет собой H или C_1-4алкил; тогда (I) когда группа -(CH₂)_q-R³ представляет собой H или C_1-4алкил:- (1) группа -(CH₂)_q-R² не представляет собой C_1-8алкил; и (2) p не равно 0, 1 или 2, когда R² представляет собой нафтил, незамещенный C_3-8циклоалкил или фенил (последняя группа возможно замещена C_1-4алкилом, C_1-4алкокси, галогено и гидрокси); или (II) когда группа -(CH₂)_p-R² представляет собой H или C_1-4алкил:- (1) группа -(CH₂)_q-R³ не представляет собой C_1-8алкил, и (2) q не равно 0, 1 или 2, когда R³ представляет собой нафтил, незамещенный C_3-8циклоалкил или фенил (последняя группа возможно замещена C_1-4алкилом, C_1-4алкокси, галогено и гидрокси); и (в) B представляет собой структурный фрагмент формулы IVa, структурный фрагмент формулы IVб, в котором X¹ и X² оба представляют собой CH₂, или структурный фрагмент формулы IVв: Y представляет собой незамещенный C_1-3алкилен или C₃алкилен, замещенный (в 4-положении относительно N-атома) C_1-4алкилом; R⁴ представляет собой H; и R¹ представляет собой H, тогда (I) когда q равно 0, R³ представляет собой H, и p равно 0 или 1, то R² не представляет собой фенил, возможно замещенный:- (1) заместителями в количестве от одного до пяти, выбранными из фторо и хлоро; (2) заместителями в количестве от одного до трех, выбранными из бромо, C_1-4алкила, C_1-4алкокси и гидрокси: (3) одной или двумя C(O)OR²⁴ группами; и/или (4) одной трифторметильной или нитрогруппой; и (II) когда p равно 0, R² представляет собой H, и q равно 0 или 1, то R³ не представляет собой фенил, возможно замещенный:- (1) заместителями в количестве от одного до пяти, выбранными из фторо и хлоро; (2) заместителями в количестве от одного до трех, выбранными из бромо, C_1-4алкила, C_1-4алкокси и гидрокси; (3) одной или двумя C(O)OR²⁸ группами; и/или (4) одной трифторметильной или нитрогруппой; или его фармацевтически приемлемая соль (далее соединение по изобретению).

Когда B представляет собой структурный фрагмент формулы IVa, IVв или IVб, в последнем из которых X¹ и X² оба представляют собой CH₂, предпочтительные соединения по изобретению включают в себя те, в которых n равно 1.

Когда B представляет собой структурный фрагмент формулы IVб, где X¹ представляет собой простую связь, а X² представляет собой либо простую связь, либо CH₂, предпочтительными соединениями по изобретению являются те, в которых n равно 2.

Когда B представляет собой структурный фрагмент формулы IVa, предпочтительными являются соединения по изобретению, в которых R⁵ представляет собой H.

Наиболее предпочтительными из указанных выше соединений формулы I являются те, в которых: R⁴ представляет собой H, p равно 0; Y представляет собой CH₂, (CH₂)₂, (CH₂)₃, CH₂CН(CH₃)CH₂, CH₂C(=O)CH₂ или CH₂C(=CH₂)CH₂, более предпочтительно, когда Y представляет собой CH₂, (CH₂)₂ или CH₂C(=O)CH₂; R¹ представляет собой H, метил, 2,3-дигидроксипропил или (2,2-диметил-1,3-диоксалан-4-ил)метил, более предпочтительно, когда R¹ представляет собой H; q равно 0, 1 или 2, более предпочтительно, когда q равно 0, R² представляет собой H, возможно замещенный C_1-4алкил или возможно замещенный фенил, более предпочтительно, когда R² представляет собой возможно замещенный C_1-4алкил, а возможным заместителем является гидроксигруппа; при этом наиболее целесообразно, чтобы гидроксигруппа была присоединена к атому углерода, который является - атомом по отношению к атому углерода, к которому присоединен OR¹; предпочтительно также, когда R² представляет собой H, метил, гидроксиметил или этил; R³ представляет собой C_1-6алкил, нафтил, индолил, возможно замещенный циклогексил или возможно замещенный фенил, более предпочтительно - возможно замещенный фенил или возможно замещенный циклогексил.

Особо предпочтительны те из описанных выше соединений по изобретению, в которых Y представляет собой CH₂ или CH₂C(= CH₂)CH₂, когда R¹ и R² оба представляют собой H, R³ представляет собой незамещенный фенил или незамещенный циклогексил, и q равно 0 или 1, а также те из них, в которых R² представляет собой метил, гидроксиметил или этил, когда R¹ представляет собой H, R³ представляет собой незамещенный фенил или незамещенный циклогексил, и q равно 0 или 1.

Особо предпочтительны те из указанных соединений, в которых R³ замещен одной или более чем одной гидрокси, фтор, хлор, метил, метокси, амино, нитро, трифторметил, метилендиокси, этокси или пропоксигруппой, когда он представляет собой возможно замещенный фенил или возможно замещенный циклогексил.

Наиболее предпочтительны соединения, в которых R³ замещен одной или более чем одной гидрокси, моно- или дифтор, хлор, метил, метокси или метилендиоксигруппой.

Особенно предпочтительными соединениями по изобретению являются те, в которых: Y представляет собой CH₂; B представляет собой структурный фрагмент формулы IVa.

Предпочтительными также являются соединения по изобретению, в которых - -аминокислотный углерод фрагмента находится в S-конфигурации. Волнистые линии у атомов азота и углерода в вышеуказанном фрагменте обозначают положение связи фрагмента.

Когда R¹ и R² оба представляют собой H, и p равно 0, предпочтительными соединениями по изобретению являются те, в которых - углерод фрагмента находится в R-конфигурации. Волнистая линия у атома углерода вышеуказанного фрагмента обозначает положение связи этого фрагмента.

Особо предпочтительными также являются соединения по изобретению, где R³ представляет собой фенил, замещенный одним или более чем одним заместителем, выбранным из группы, состоящей из N(H)R²⁷ и галогено.

Еще более предпочтительны соединения, где R³ представляет собой фенил, замещенный N(H)R²⁷ и галогено, из них наиболее предпочтительны те, где R³ представляет собой фенил, замещенный N(H)R²⁷ и хлоро.

Особо предпочтительными соединениями по изобретению являются: Ch-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab; Ch-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab; Ph-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab; Ph(3-Me)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab; Ph(3-OMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab, Ph(3,5-диOMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab; Ph(3-OMe,4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab; Ph-(R,S)C(Et)(OH)-C(O)-Aze-Pab; Ph-(R,S)C(Et)(OH)-C(O)-Pro-Pab; (Ph)₂C(OH)-C(O)-Aze-Pab; Ph(3-OMe,4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab; Ph-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pac; Ph-(R)CH(OH)-C(O)-(R,S)Pic(cis-4-Me)-Pab; Ph(3,4-(-O-CH₂-O-))-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab; Ph(3-OMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab; Ph(3,5-диОМе)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab; Ph-(R,S)C(Me)(OH)-C(O)-Aze-Pab; Ph(3,5-диMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab; Ph(3-NH₂)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab; Ph(3-NH₂)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab; Ph(3-NO₂)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab; Ph(3,4-(-O-CH₂-O-))-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab, Ph(3,5-диF)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab; Ph-(R)CH(O-CH₂-(R,S)CH(-O-C(CH₃)₂-O-CH₂-))-C(O)-Aze-Pab; Ph-(R)C(Me)(OH)-C(O)-Pro-Pab; Ph-(S)C(Me)(OH)-C(O)-Pro-Pab; Ph(3,4-диF)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab, Ph-(R)CH(OH)-C(O)-(R,S)Pic(4-метилен)-Pab, Ph(3-Cl)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab; Ph-(R,S)C(-O-C(CH₃)₂-O-CH₂-)-C(O)-Aze-Pab; Ph-(R,S)C(-O-C(CH₃)₂-O-CH₂-))-C(O)-Pro-Pab, Ph-(R,S)C(CH₂OH)(OH)-C(O)-Aze-Pab или Ph-(R,S)C(CH₂OH)(OH)-C(O)-Pro-Pab.

Для решения поставленной задачи также предложена фармацевтическая композиция, обладающая активностью ингибитора тромбина, содержащая соединение по изобретению, как оно определено выше, или его фармацевтически приемлемую соль, в смеси с фармацевтически приемлемым адъювантом, разбавителем или носителем.

Поставленная задача решается также тем, что предложено соединение по изобретению или его фармацевтически приемлемая соль для применения в качестве фармацевтического средства, для применения при лечении состояния, где требуется ингибирование тромбина, более конкретно, для применения при лечении тромбоза и в качестве антикоагулянта.

Предложено также соединение по изобретению или его фармацевтически приемлемая соль для применения в качестве активного ингредиента при производстве лекарства для лечения состояния, где требуется ингибирование тромбина, в частности при производстве лекарства для лечения тромбоза и при производстве антикоагулянта.

Задача изобретения решается также тем, что предложен способ лечения состояния, где требуется ингибирование тромбина, при котором воздействуют терапевтически эффективным количеством соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли, на лицо, страдающее от такого состояния или склонное к такому состоянию, предпочтительно таким состоянием является тромбоз и гиперкоагуляция в крови и тканях.

Для решения поставленной задачи предложен способ получения соединения по изобретению, при котором сочетают соединение формулы V , где p, q, R¹, R² и R³ такие, как определено выше, с соединением формулы VI , где R⁴, Y, n и B такие, как определено выше.

Предложен также способ получения соединения по изобретению, при котором сочетают соединение формулы VII, , где p, q, R¹, R², R³, R⁴ и Y такие, как определено выше, с соединением формулы VIII H₂N-(CH₂)_n-B, VIII где n и B такие, как определено выше.

И наконец, предложено соединение формулы XIV , где B¹ представляет собой структурный фрагмент формулы IVг, IVд или IVe D¹ и D² независимо представляют собой H или бензилоксикарбонил и p, q, R¹, R², R³, R⁴, Y, n, R⁵, X¹ и X² такие, как определено выше, при условии, что D¹ и D² не оба представляют собой H.

Соединения по изобретению могут проявлять таутомерию. Все таутомерные формы и их смеси включены в рамки данного изобретения.

Соединения по изобретению могут также содержать один или более чем один асимметричный атом углерода и, следовательно, могут проявлять оптическую изомерию и/или диастереоизомерию. Все диастереоизомеры могут быть разделены с использованием традиционных методик, например хроматографией или фракционной кристаллизацией. Разные стереоизомеры могут быть выделены путем разделения рацемической или другой смеси соединений с использованием традиционных методик, например фракционной кристаллизации или HPLC (жидкостная хроматография высокого разрешения). Альтернативно, желаемые оптические изомеры могут быть получены взаимодействием подходящих оптически активных исходных материалов в условиях, не допускающих рацемизации или эпимеризации, или путем получения производных, например с гомохиральной кислотой, с последующим отделением диастереомерных эфиров традиционными способами (например, HPLC или хроматографией на диоксиде кремния). Все стереоизомеры включены в рамки данного изобретения.

Алкильные группы, которыми могут быть представлены R¹, R^x, R^y, R², R³, R⁴, R⁵, R²³, R²⁴, R²⁷, R²⁸ и R²⁹ либо которыми могут быть замещены R², R³ и Y; циклоалкильные группы, которыми могут быть представлены R², R³ и алкоксигруппы, которыми могут быть замещены R² и R³, могут быть линейными или разветвленными, насыщенными или ненасыщенными. Алкиленовые группы, которыми могут быть представлены A¹ и Y, могут быть насыщенными или ненасыщенными.

Галогеновые группы, которыми может быть представлен R⁵ и которыми могут быть замещены R² и R³, включают в себя фтор, хлор, бром и йод.

Волнистые линии у атомов углерода на фрагментах формул Iа, Iб, IVa, IVб и IVв обозначают положение связи фрагмента.

Аббревиатуры перечислены в конце описания изобретения.

Получение соединений по изобретению предложенными способами можно осуществлять, например, в присутствии системы сочетания (например, оксалилхлорида в DMF, EDC, DCC или TBTU), соответствующего основания (например, пиридина, DMAP или DIPEA) и подходящего органического растворителя (например, дихлорметана, ацетонитрила или DMF).

Соединения формулы V являются либо коммерчески доступными, хорошо известными из литературы, либо их можно получить с помощью известных методик.

Например, соединения формулы V, где R¹ и R² оба представляют собой H, p и q равны 0, и R³ представляет собой нафтил или фенил, возможно замещенный одним или более чем одним C_1-4алкилом, C_1-4алкокси, галогеном, гидрокси, метилендиокси, нитро, трифторметилом, N(H)R²⁷ или C(O)R²⁸, могут быть получены путем взаимодействия альдегида формулы IX R^3aCHO, IX где R^3a представляет собой нафтил или фенил, возможно замещенный одним или более чем одним C_1-4алкилом, C_1-4алкокси, галогеном, гидрокси, метилендиокси, нитро, трифторметилом, N(H)R²⁷ или C(O)OR²⁸, и R²⁷ и R²⁸ такие, как определено выше, с: (1) соединением формулы X R''CN, X где R'' представляет собой H или (CH₃)₃Si, например при повышенной температуре (например, выше комнатной, но ниже 100^oC) в присутствии подходящего органического растворителя (например, хлороформа) и, при необходимости, в присутствии подходящей каталитической системы (например, хлорида бензиламмония) с последующим гидролизом в присутствии соответствующего основания (например, NaOH); (2) хлороформом, например при повышенной температуре (например, выше комнатной, но ниже 100^oC) в присутствии подходящего органического растворителя (например, хлороформа) и, при необходимости, в присутствии подходящей каталитической системы (например, хлорида бензиламмония) с последующим гидролизом в присутствии соответствующего основания (например, NaOH); (3) соединением формулы XI , где M представляет собой Mg или Li, с последующим окислительным расщеплением (например, озонолизом или катализируемым осмием или рутением) в условиях, хорошо известных специалистам, или (4) трис(метилтио)метаном при условиях, хорошо известных специалистам, с последующим гидролизом в присутствии соответствующего основания.

Соединения формулы V, где R¹ представляет собой H, R² представляет собой CH₂OH, p и q оба равны 0, и R³ представляет собой нафтил или фенил, возможно замещенный одним или более чем одним C_1-4алкилом, C_1-4алкокси, галогеном, гидрокси, метилендиокси, нитро, трифторметилом, N(H)R²⁷ или C(O)OR²⁸, могут быть получены путем взаимодействия соединения формулы XII R^3aC(O)C₂H₅, XII где R^3a такой, как определено выше, с гипохлоритом натрия, например при комнатной температуре в присутствии подходящего растворителя (например, воды).

Соединения формулы VI и VII являются либо коммерчески доступными, хорошо известными из литературы, либо могут быть получены с использованием известных методик. Например, соединения формулы VI могут быть получены стандартным пептидным сочетанием соединения формулы XIII , где R⁴ и Y такие, как определено выше, с соединением формулы VIII, как определено выше, например в условиях, таких как описано выше для синтеза соединения формулы I. Аналогично, соединение формулы VII может быть также получено стандартным пептидным сочетанием соединения формулы XIII, как оно определено выше, с соединением формулы V, как оно определено выше, например в условиях, таких как описано выше для синтеза соединения формулы I.

Соединения формулы VIII, IX, X, XI. XII и XIII являются либо коммерчески доступными, хорошо известными из литературы, либо могут быть получены с использованием известных методик. Заместители на фенильной группе в соединениях формулы V, VII, IX и XII могут быть подвергнуты взаимопревращению с помощью хорошо известных специалистам методик.

Соединения по изобретению могут быть выделены из их реакционных смесей с использованием традиционных методик.

Специалисту очевидно, что в описанном выше способе может возникнуть необходимость в защите функциональных групп промежуточных соединений защитными группами.

Функциональные группы, которые желательно защитить, включают в себя гидрокси, амино, амидино, гуанидиногруппы и карбоновую кислоту. Подходящие защитные группы для гидроксила включают в себя триалкилсилил и диарилалкилсилилгруппы (например, трет-бутилдиметилсилил, трет-бутилдифенилсилил или триметилсилил) и тетрагидропиранил. Подходящие защитные группы для гидроксигрупп, присоединенных к соседнему атому углерода, включают в себя O,O'-изопропилиден. Подходящие защитные группы для амино, амидино и гуaнидинoгрупп включают в себя трет-бутилоксикарбонил или бензилоксикарбонил. Атомы азота амидино и гуанидиногрупп могут быть либо моно-, либо дизащищенными. Подходящие защитные группы для карбоновой кислоты включают в себя C_1-6алкиловые или бензиловые эфиры.

Введение и снятие защиты с функциональных групп могут иметь место до или после реакции сочетания.

В частности, соединения по изобретению могут быть получены способом, включающим сочетание N-ацилированных аминокислот или N-защищенных аминокислот. Когда используют N-защищенные аминокислоты, тогда ацильная группа может быть введена после сочетания, а снятие защиты с атома азота может быть затем осуществлено с использованием стандартных способов.

Защитные группы могут быть удалены согласно известным специалистам методикам и как описано ниже.

Некоторые защищенные промежуточные соединения формулы I, в которых атомы азота амидино и гуанидиногрупп в B защищены и которые могут быть получены до стадии окончательного снятия защиты с образованием соединений по изобретению, являются новыми.

Применение защитных групп в полной мере описано в "Protective Groups in Organic Chemistry" под ред. J. W. F. McOmie, Plenum Press (1973), и в "Protective Groups in Organic Synthesis", 2-е издание, T.W. Greene and P.G. M. Wutz, Wiley-Interscience (1991).

Специалисту также очевидно, что хотя такие защищенные производные соединений формулы I сами по себе могут не обладать фармакологической активностью, однако они могут быть введены парентерально или перорально и с этого времени могут подвергаться метаболизму в организме с образованием соединений по изобретению, которые являются фармакологически активными. Такие производные, следовательно, могут быть определены как "пролекарства". Все пролекарства соединений формулы I включены в рамки данного изобретения.

Защищенные производные соединений формулы I, которые являются особенно полезными в качестве пролекарств, включают в себя соединения формулы XIV.

Как уже упоминалось выше, соединения по изобретению могут быть использованы для лечения состояний, где требуется ингибирование тромбина, в частности тромбоза.

Соединения по изобретению также показаны при лечении состояний, при которых имеется нежелательный избыток тромбина без признаков гиперкоагуляции, например при нейродегенеративных заболеваниях, таких как болезнь Альцгеймера.

Конкретные болезненные состояниями, которые следует упомянуть, включают в себя лечение и/или профилактику тромбоза вен и эмболию легких, тромбоза артерий (например, при нестабильной стенокардии инфаркта миокарда, при ударе в результате тромбоза и при периферическом артериальном тромбозе) и системной эмболии обычно из предсердия при артериальной фибрилляции или из левого желудочка после трансмурального инфаркта миокарда.

Более того, ожидается, что соединения по изобретению найдут применение при профилактике повторной закупорки (то есть тромбоза) после тромболиза, чрескожной внутрипросветной ангиопластики (РСТА), операций коронарного шунтирования, микрохирургии и сосудистой хирургии в целом.

Далее, показания включают в себя лечение и профилактику диссеминированной внутрисосудистой коагуляции, вызываемой бактериями, множественными травмами, интоксикацией или любым другим механизмом; лечение антикоагулянтами, когда кровь находится в контакте с чужеродными поверхностями в организме, такими как сосудистые трансплантаты, сосудистые стенты, сосудистые катетеры, механические и биологические протезы клапанов или любые другие медицинские устройства: лечение антикоагулянтами, когда кровь находится в контакте с медицинскими устройствами вне организма, такими как во время сердечно-сосудистой хирургии с использованием аппарата "сердце-легкое" или при гемодиализе.

Известно, что, кроме его влияния на процесс коагуляции, тромбин активирует большое число клеток (таких как нейтрофилы, фибробласты, эндотелиальные клетки и клетки гладкой мускулатуры). Следовательно, соединения по изобретению можно также использовать для лечения или профилактики идиопатического или респираторного дистресс-синдрома взрослых, легочного фиброза вследствие лечения радиацией или химиотерапией, септического шока, септицемии, воспалительных реакций, которые включают в себя, но не ограниченно, отек, острый или хронический атеросклероз, такой как коронарное артериальное заболевание, церебральное артериальное заболевание, периферическое артериальное заболевание, реперфузионное повреждение и рестеноз после чрескожной внутрипросветной ангиопластики (РТСА).

Соединения по изобретению, которые ингибирует трипсин и/или тромбин, могут быть также полезными при лечении панкреатита.

Соединения по изобретению обычно следует вводить перорально, подкожно, трансбуккально, ректально, трансдермально, назально, через трахею, через бронхи или любым другим парентеральным путем или с помощью ингаляции, в форме фармацевтических препаратов, содержащих активный ингредиент, либо в виде свободного основания, либо в виде фармацевтически приемлемой нетоксичной соли присоединения органической или неорганической кислоты, в фармацевтически приемлемой форме стандартной дозы. В зависимости от заболевания и пациента, которого должно лечить, и способа введения, эти композиции могут вводиться в различных дозах.

Соединения по изобретению можно также комбинировать с любым антитромботическим агентом любого механизма действия, таким как противотромбоцитные агенты, ацетилсалициловая кислота, тиклопидин, клопидогрель, ингибиторы тромбоксанового рецептора и/или синтетазы, антагонисты рецептора фибриногена, миметики простациклина и ингибиторы фосфодиэстеразы.

Соединения по изобретению далее можно комбинировать с тромболитиками, такими как тканевый плазминогенный активатор (природный или рекомбинантный), стрептокиназа, урокиназа, проурокиназа, анизолированный комплекс стрептокиназы и активатора плазминогена (ASPAC), активаторы плазминогена слюнных желез живтоных и т.п., при лечении тромботических заболеваний, в частности инфаркта миокарда.

Подходящими суточными дозами соединений по изобретению при терапевтическом лечении человека являются дозы приблизительно 0,001-100 мг/кг веса тела при пероральном введении и 0,001-50 мг/кг веса тела при парентеральном введении.

Соединения по изобретению обладают преимуществом, которое заключается в том, что они могут быть более эффективными, менее токсичными, могут действовать продолжительнее, иметь более широкий спектр активности, быть более сильными, давать меньше побочных эффектов, легче абсорбироваться или иметь другие полезные фармакологические свойства по сравнению с известными соединениями.

Биологические испытания Тест А Определение тромбинового времени свертывания (ТТ) Человеческий тромбин (Т 6769, Sigma Chem Co) в буферном растворе, pH 7,4, 100 мкл, и раствор ингибитора, 100 мкл, инкубировали в течение 1 мин. Затем добавляли пулированную нормальную цитратную человеческую плазму, 100 мкл, и измеряли время образования сгустка в автоматическом устройстве (КС 10, Amelung).

Строили зависимость времени свертывания в секундах от концентрации ингибитора, и путем интерполяции определяли IC₅₀TT.

IC₅₀TT представляет собой концентрацию ингибитора, которая удваивает тромбиновое время свертывания для человеческой плазмы.

Тест Б Определение парциального активированного тромбопластинового времени (АРТТ) АРТТ определяли в пулированной нормальной цитратной человеческой плазме с помощью реагента РТТ Automated 5, выпускаемого фирмой Stago. К плазме добавляли ингибиторы (10 мкл раствора ингибитора на 90 мкл плазмы), затем реагент и раств