Комплексы включения производных 1,2,5-оксадиазол-2-оксида с полициклическими производными глюкопиранозы, способ их получения, фармацевтическая композиция

Комплексы включения производных 1,2,5-оксадиазол-2-оксида с полициклическими производными глюкопиранозы, способ их получения, фармацевтическая композиция

Реферат

 

Изобретение относится к новым комплексам включения производных 1,2,5-оксадиазол-2-оксида общей формулы I, где ¹=R²=CN или вместе с соседними атомами углерода образуют аннелированный 3,6-бис(низший алкил)пиридазин-1,2-диоксидный цикл, с полициклическими производными глюкопиранозы общей формулы II, где если n= 1, то R³ - фрагмент 11-оксо-18, 20-олеан-12-ен-29-овой кислоты формулы III, R⁴=H, R⁵ --D-глюкуронопиранозил, R⁶=R⁷=H и R⁸= C(O)OH или, если n= 7, то R³=Н, R⁴ и R⁷ - простые связи, R⁵ и R⁶ = H или (CH₂CH(CH₃)O)_mH, где m=1-14, и R⁸=CH₂OH или СН₂О(CH₂CH(CH₃)O)_mH, где m=1-14, генерирующим оксид азота и активирующим растворимую форму гуанилатциклазы (рГЦ), как спазмолитическим, сосудорасширяющим и гипотензивным средствам быстрого действия и ингибиторам агрегации тромбоцитов, способу их получения и фармацевтическим композициям на их основе. Продукты настоящего изобретения получают способом, заключающимся во взаимодействии исходного производного 1,2,5-оксадиазол-2-оксида вышеприведенной общей формулы I, где R¹ и R² имеют указанные значения с соответствующим полициклическим производным глюкопиранозы вышеприведенной общей формулы II, где R³-R⁸ имеют указанные значения в водно-органической среде (например, в водном растворе диоксана, низшего алканола, в частности этанола, или смеси органических растворителей) при повышенной температуре (30-60^oС) с последующим выделением целевого продукта упариванием при пониженном давлении, его промыванием малополярным инертным органическим растворителем (диэтиловым эфиром или его смесью с гексаном) и высушиванием при пониженном давлении. Новые инклюзионные комплексы настоящего изобретения являются эффективными донорами NO, а также генерируют его редоксформу (нитроксил), образуют нитрозотиолы и активируют рГЦ, а также обладают сильным спазмолитическим, сосудорасширяющим и быстрым гипотенсивным действием. Описанные продукты проявляют выраженные антиагрегантные свойства. 3 с. и 1 з.п. ф-лы, 4 ил., 6 табл.

Изобретение относится к новым комплексам включения производных 1,2,5-оксадиазол-2-оксида (фуроксана) общей формулы I: где R¹= R²= CN или вместе с соседними атомами углерода образуют аннелированный 3,6-бис(низший алкил)пиридазин-1,2-диоксидный цикл, с полициклическими производными глюкопиранозы общей формулы II: где, если n= l, то R³- фрагмент 11-оксо-18, 20-олеан-12-ен-29-овой кислоты формулы III: R⁴= H, R⁵--D-глюкуронопиранозил, R⁶=R⁷=H и R⁸=C(O)OH, или, если n-7, то R³=H, R⁴ и R⁷- простые связи, R⁵ и R⁶= H или (СН₂-СН(СН₃)O)_mН, где m=1-14. и R⁸= CH₂OH или СН₂О(СН₂-СН(СН₃)O)_mН, где m=1-14, генерирующим оксид азота и активирующим растворимую форму гуанилатциклазы (рГЦ), как спазмолитическим, сосудорасширяющим и гипотензивным средствам быстрого действия и ингибиторам агрегации тромбоцитов, способу их получения и фармацевтическим композициям на их основе.

Данное изобретение может быть использовано в биохимии, физиологии, фармакологии и медицине.

Оксид азота (NO), синтезируемый эндотелиальными клетками и другими типами клеток и тканей, играет одну из ключевых ролей в поддержании нормального тонуса гладких мышц сосудов, влияющего на системное давление крови. Кроме того, NO оказывает спазмолитическое действие на мышцы желудочно-кишечного тракта, желчных путей, мочеточников, матки, бронхов и других органов (Машковский, М.Д. "Лекарственные средства", т.1, "Торсинг", Харьков, 1998 г. , стр. 385). Механизм молекулярного действия эндогенного оксида азота, синтезируемого NO-синтазой из аминокислоты L-аргинина в эндотелии кровеносных сосудов, включает его диффузию через плазматические мембраны в полость кровеносного сосуда и в гладкомышечные клетки сосуда, где происходит связывание с гемовой группой рГЦ. Гуанилатциклаза /КФ 4.6.1.2; гуанозин-5'-трифосфат-пирофосфатлиаза (циклизующая)/ является ферментом, катализирующим биосинтез гуанозин-3', 5'-циклофосфата (цГМФ) - вторичного мессенджера, выполняющего роль универсального регулятора внутриклеточного метаболизма (F. Murad "Regulation of cytosolic guanylyl cyclase by nitric oxide: The NO-cGMP signal transduction system" Adv. Pharmacol. 1994, v,26, p. 19-33). ГЦ существует в двух формах - мембранной и растворимой. В настоящее время установлено, что в результате взаимодействия NO с атомом железа гема, входящего в состав фермента, и образования комплекса нитрозил-гем возникают конформационные изменения активного центра фермента, которые приводят к активации рГЦ и повышению синтеза цГМФ. Возрастание внутриклеточной концентрации данного вторичного мессенджера в гладкомышечных клетках сосуда вызывает активацию цГМФ-зависимых протеинкиназ, что индуцирует дефосфорилирование молекулы миозина, а следовательно, и расслабление гладких мышц коронарных и других кровеносных сосудов (сосудов мозга, брюшной полости, периферических сосудов), снижение сосудистого тонуса и сопротивления, то есть приводит к расширению просвета кровеносного сосуда. Таким образом, NO снижает давление крови, повышает кровоток и способствует восстановлению сосудистой функции (см. фиг.1).

Нарушения, связанные с нормальным протеканием вышеуказанных реакций, лежат в основе патофизиологических процессов, характерных для развития различных заболеваний сердечно-сосудистой системы (гипертонии, инфаркта миокарда, сердечной недостаточности) и других органов. При таких заболеваниях наблюдаются множественные нарушения синтеза эндогенного NO, его рецепции рГЦ, а также регуляции уровня циклических нуклеотидов и ионов кальция.

К настоящему времени доказано образование оксида азота в результате биотрансформации тринитроглицерина (глицерилтринитрата, ГТН) и других нитратов, которые используются для лечения сердечно-сосудистых заболеваний в качестве антиишемических и антиангинальных препаратов (Машковский, М.Д. "Лекарственные средства", т. 1, "Торсинг", Харьков, 1998 г., стр. 385-392). Однако их существенным недостатком является возникновение толерантности и других побочных эффектов при длительном применении. В связи с этим, проводится поиск новых соединений, способных образовывать NO в живом организме неэнзиматическим путем (напр., спонтанно или тиолзависимо), что рассматривается как актуальный и перспективный подход для создания новых, более эффективных антигипертензивных фармпрепаратов, обладающих антиангинальной и антиишемической активностью.

Среди NO-генерирующих лекарственных средств, применяемых в терапии сердечно-сосудистых заболеваний, особое место занимают гипотензивные препараты быстрого действия, основными представителями которых являются ГТН и нитропруссид натрия (ННП). Показано, что период полужизни (_1/2) ГТН в плазме крови составляет 2-4 мин. В последнее время в литературе появились данные о физиологической активности нового донора NO сверхбыстрого действия (_1/2= 1,8 с)-N-диазенийдиолата l-пролина (PROLI/NO) (Saavedra I.E., Southan G. J. , et al. "Localizing antithrombotic and vasodilatory activity with a novel, ultrafast nitric oxide donor" J. Med. Chem. 1996, v. 39, p. 4361-4365). Данное соединение, в отличие от ННП и других доноров оксида азота, при локальном внутривенном введении в низких дозах вызывало селективную вазодилатацию гладких мышц легочной артерии (Andrie, С., Hirani, W.M., et al. "Selective pulmonary vasodilation by intravenous infusion of an ultrashort half-life nucleophile/nitric oxide adduct" Anesthesiology 1998, v. 88, 1, р. 190-195), значительно снижало пролиферацию клеток гладких мышц (Chen, С. , Hanson, S.R., et al. "Boundary layer infusion of nitric oxide reduces early smooth musle cell prolifertion in the endarterectomized canine artery" J. Surg. Res. 1997, v. 67, 1, р. 26-32), а также оказывало высокоэффективное действие при защите от вазоспазма и его купировании в условиях церебральной ишемии (Pluta, R.M., et al. "Reversal and prevention of cerebral vasospasm by intracarotid infusion of nitric oxide donors in a primate model of subarachnoid hemorrage" J. Neurosurg. 1997, v. 87, 5, р. 746-51) и при восстановлении эректильной дисфункции (Сhampion, Н.С., Bivalacqua, T.J., et al. "Induction of penile erection by intracavernosal and transurethral administration of novel nitric oxide donors in the cat" J. Urol. 1999, v. 161, 6, р. 2013-2019), не вызывая во всех случаях системной гипотензии.

Известен 4,7-диметил-1,2,5-оксадиазоло[3,4-d] пиридазин-1,5,6-триоксид (ДОПТО) вышеуказанной общей формулы I, где R¹ и R² вместе с соседними атомами углерода образуют аннелированный 3,6-диметилпиридазин-1,2-диоксидный цикл, тиолзависимо генерирующий оксид азота и его активные формы - нитроксил и нитрозотилы, активирующий рГЦ и обладающий вазорелаксантным, спазмолитическим и антиагрегантным действием (A.Ya.Kots, M.A.Grafov et. al. "Vasorelaxant and antiplatelet activity of 4,7-dimethyl-l,2,5-oxadiazolo[3,4-d] pyridazine 1,5,6-trioxide: role of soluble guanylate cyclase, nitric oxide and thiols" Brit. J. Pharm, 2000, v.129, p. 1163-1177).

Известен также другой представитель класса фуроксанов - 3,4-дициано-1,2,5-оксадиазол-2-оксид (3,4-дицианофуроксан, ДЦФ) вышеуказанной общей формулы I, где R¹=R²=CN, генерирующий NO в присутствии тиолов, активирующий рГЦ и обладающий вазорелаксантным, спазмолитическим и антиагрегантным действием (Ferioli R., Folco G.C., Ferretti С., Gasco A.M., Medana C., Fruttero R. , Civelli M., Gasco A. "A new class of furoxan derivatives as NO-donors: mechanism of action and biological activity." Brit. J. Pharmacol. 1995, v. 144, 3, p. 816-820).

Существенным недостатком ДОПТО и ДЦФ являются не растворимость в воде и сравнительно невысокая растворимость ДОПТО в водно-органической среде, что затрудняет их применение.

Один из подходов к созданию новых лекарственных средств или биологически-активных соединений (БАС) с улучшенными физико-химическими свойствами основан на использовании веществ, способных образовывать комплексы включения (или инклюзионные комплексы) типа "хозяин - гость". В соответствии с принятым обозначением "хозяином" называют молекулу с внутренней полостью, а "гостем" - молекулу другого соединения, которая входит в эту полость и задерживается там за счет целой совокупности межмолекулярных взаимодействий. В случае образования комплекса физические и химические свойства "гостя" значительно меняются, что в ряде случаев позволяет модифицировать (улучшать) фармакологические свойства включаемого БАС.

В настоящее время в качестве комплексообразователей нашли широкое применение циклический гептамер -D-глюкозы--циклодекстрин (-ЦД) вышеуказанной формулы II, где n= 7, R³= Н, R⁴ и R⁷- простые связи, R⁵=R⁶=Н и R⁸=СН₂ОН (Saenger, W., "Cyclodextrin-Einschlussverbindungen in Forschung und Industrie" Angew. Chem. 1980, v.92, p.343-361) и его производные, в частности 2-гидроксипропилированный -циклодекстрин (-ГПЦД) вышеуказанной общей формулы II, где n=7, R³= Н, R⁴ и R⁷- простые связи, R⁵ и R⁶=(СН₂-СН(СН₃)O)_mН, где m= 1-14, и R⁸=СН₂O(СН₂-СН(СН₃)O)_mН, где m=1-14 (Pitha J., Szabo L,, Fales H.M. "Reaction of cyclodextrins with propylene oxide or with glycidol: analysis of product distribution" Carbohydrate Res. 1987, v.168, 1, p. 191-198). Кроме вышеуказанных веществ с аналогичной целью использовалась также 3-[2'-O-(-D-глюкуронопиранозил)--D-глюкуронопиранозилокси]-11 -оксо-18, 20-олеан-12-ен-29-овая кислота (глицирризиновая кислота, ГК) вышеуказанной формулы II, где n= l, R³ - фрагмент 11-оксо-18, 20-олеан-12-ен-29-овой кислоты вышеуказанной формулы III, R⁴=Н, R⁵--D-глюкуронопиранозил, R⁶= R⁷= Н и R⁸=С(O)ОН (Толстиков Г. А., Балтина Л. А., и др. "Глицирризиновая кислота" Биоорг. химия, 1997, т. 23, 9, с. 691-709).

Известны многочисленные комплексы включения различных БАС и лекарственных средств с вышеуказанными комплексообразующими соединениями (напр., Папель, К.Э., Дихтярев, С.И., Сугробова, Н.П., "Циклодекстрин" в сер. "Итоги науки и техники. Микробиология", ВИНИТИ, М., 1988 г., т. 21, ч. 2; Дихтярев С. И., Штейнгарт М.В., и др. "Перспективы применения соединений включения на основе циклодекстринов в фармации" в сб. "Науковi основы розробки лiкарьских препаратiв", изд. "Основа", Харкiв, 1998 г., с. 225-228; Толстиков Г.А., Муринов Ю.И., и др. "Комплексы -глицирризиновой кислоты с простагландинами - новый класс утеротонически активных веществ" Хим.-фарм. ж. 1991, т. 25, 3, с. 42-44). Полученные продукты обладают более низкой токсичностью, повышенными растворимостью, устойчивостью и биодоступностью по сравнению с исходными БАС и фармпрепаратами, а также, в ряде случаев, проявляют улучшенное фармакологическое действие.

Так, известен инклюзионный комплекс дипиридамола (2,6-бис[бис(2-гидроксиэтил)амино] -4,8-ди(пиперидин-1-ил)пиримидо[5,4-d] пиримидина) формулы IV: с -ЦД, проявляющий антиагрегантное и сосудорасширяющее действие (Fregnan G.B., Berte F. "Enhancement of specific biological activity of dipyridamole by complexation with -cyclodextrin" Pharmacology 1990, v. 40, p. 96-102). Данный комплекс обладает более высокой растворимостью (в 4,5 раза) в фосфатном буфере (рН 5.5) и улучшенной биодоступностью при пероральном введении в виде капсул по сравнению с исходным дипиридамолом. Кроме этого, было показано, что комплекс -ЦД-дипиридамол вызывает более сильную и продолжительную коронарную вазодилатацию в опытах in vivo по сравнению с эффектом исходного препарата.

Данный комплекс, как и исходный лиганд, не обладает способностью генерировать NO, его влияние на рГЦ не изучено, а фармакологические свойства проявляются в сравнительно высоких дозах (1-8 мг/кг в пересчете на активный лиганд).

Известны комплексы включения нестероидных противовоспалительных средств (ортофена, аспирина, индометацина) с ГК (авторские свидетельства СССР 1566699, 1566700, C 07 J 63/00, А 61 К 31/705, 1988 г.; 1616925, C 07 J 63/00, А 61 К 31/705, 1989 г.). Указанные продукты были получены при взаимодействии исходных компонентов, взятых в стехиометрическом соотношении, в водно-органической среде (водном этаноле) при повышенной температуре (50^oС).

Данные комплексы, как и исходные лиганды, не обладают способностью генерировать NO, а их фармакологические свойства (противовоспалительное действие) не связаны с влиянием на рГЦ.

Известна стабилизация водных растворов донора NO - N-ацетил-S-нитрозопеницилламина формулы V: различными циклодекстринами и их производными, в частности -ЦД и -ГПЦД (Bauer, J. A., Fung, H.L., "Chemical stabilisation of a vasoactive S-nitrosothiol with cyclodextrins without loss of pharmacologic activity" Pharm. Res. 1991, v. 8, 10, p. 1329-1334]. Предполагается, что данный эффект обусловлен образованием комплексов включения. N-Ацетил-S-нитрозопеницилламин в присутствии указанных комплексообразователей обладал более высокой стабильностью и по своим фармакологическим (вазорелаксантным) свойствам был биоэквивалентен исходному нитрозотиолу. Выделение полученных продуктов и изучение их состава не проводились.

Общим недостатком соединений, содержащих в составе молекулы нитрозотиольную группу, является их выраженная токсичность, в частности канцерогенные и мутагенные свойства.

Известно, что различные моно- и бициклические N-оксиды способны образовывать инклюзионные комплексы с -ЦД (Uno, В., Kaida, N. et al. "Spectroscopic study of hydrophobic interaction of heterocyclic amine N-oxides with cyclodextrins" Chem. Pharm. Bull. 1988, v. 36, 10, p. 3753-3759), В группу таких соединений входит 4-нитрохинолин-1-оксид формулы VI: оказывающий активирующее действие на рГЦ (Craven, P.A., De Rubertis, F. R. , "Inhibition by retinol and butylated hydroxyanisol of carcinogen-mediated increases in guanylate cyclase activity and guanosine 3',5'-monophosphate accumulation" Cancer Res., 1977, v. 37, p. 4083-4097).

Вышеуказанный комплекс включения не был выделен, а его биохимические свойства и физиологическая активность не исследовались.

Известен инклюзионный комплекс [(морфолин-4-ил)нитрозоамино]ацетонитрила (SIN-1A) формулы VII: с различными циклодекстринами (Vicmon, M., Szente, L.,. et al. "SIN-1A /cyclodextrin complexes. Novel, stable and biologically active NO releasing agents" Portland Press Proc. 1996, v. 10, part 5, p. 188 - прототип). Строение полученных продуктов не исследовалось. Комплексы, получаемые данным способом, проявляли повышенную стабильность, спонтанно генерировали NO и по своим фармакологическим свойствам были биоэквивалентны исходному SIN-1A, который вызывал вазодилятацию на изолированных кольцах торакальной аорты кролика, сокращенных под действием норадреналина (Muramatsu, I., Fujii, К., et al. "Vasorelaxing actions of molsidomine and its metabolites, in comparison with nitroglycerin" Can. J. Physiol. Pharmacol. 1983, v. 61, p. 1071-1078), и обладал гипотензивным действием в течение 2,5 часов (Европейский патент 324408, C 07 D 211/98, oп. 1991 г.). Кроме этого, SIN-1A эффективно ингибировал агрегацию тромбоцитов в условиях in vitro (Darius, H., Ahland, В., et al. "The effect of molsidomine and its metabolite SIN-1A on coronary vessel tone, platelet aggregation, and eicosanoid formation in vitro - inhibition of 12-HPETE biosynthesis" J. Cardiovasc. Pharmacol. 1984, v. 6, p. 115-121).

Токсичность полученных комплексов не исследовалась. Согласно данным литературы трансформация SIN-1A так же, как и соответствующего циклического сиднонимина (SIN-1), в аэробных условиях сопровождается генерацией супероксиданион-радикала (Feelisch, M., Ostrovski, J., Noack, E., "On the mechanism of NO release from sydnonimines" J. Cardiovasc. Pharmacol. 1989, v. l4, Suppl. 11, p. S13-S22), который, взаимодействуя с выделяющимся NO, может приводить к образованию высокотоксичного пероксинитрита.

Известен инклюзионный комплекс антиангинального органического нитрата-1,4,3,6-диангидро-D-сорбит-2,5-динитрата (изосорбиддинитрата) формулы VIII: с -ЦД (Патент Японии 63135402 (С 08 В 37/16) oп. 1988 г.). Строение полученного продукта и его фармакологические свойства не исследованы. Способ получения данного комплекса заключается в том, что к водному раствору -ЦД добавляли изосорбиддинитрат и реакционную смесь встряхивали при комнатной температуре или слабом нагревании в течение 48 часов, после чего целевой продует отделяли центрифугированием.

Существенным недостатком данного способа является продолжительность процесса.

Наиболее близким к описываемым является известный комплекс включения стехиометрического состава (1:1) известного органического нитрата быстрого действия - тринитроглицерина (ГТН) формулы IX: с -ЦД (Stadler-Szoke, A., Szejtii, J., "The inclusion complex of nitroglycerol--cyclodextrin" Acta Pharm. Hung. 1979, v. 49, p. 30-34 - прототип). Способ получения данного продукта включает смешивание водного раствора -ЦД, предварительно нагретого до температуры 60^oС, с 20%-ным раствором ГТН в этаноле при мольном соотношении реагентов, равном ~1:1,04, с последующим выдерживанием при данной температуре, охлаждением до 4^oС, фильтрованием выпавшего осадка, его промыванием диэтиловым эфиром и высушиванием.

Аналогичный продукт был получен другими авторами в условиях, близких к вышеописанным (Tomono, К., Goton, H., et al. "Interaction of nitroglicerin with 6-О--maltosylcyclomaltoheptaose" Carbohydrate Res. 1989, v. 192, p. 351-356). Было показано, что ГТН в составе данного комплекса обладал повышенной стабильностью (сохранялось 80% лиганда в течение 6 дней) по сравнению с иходным ГТН, который в тех же условиях полностью распадался за 1,5 дня. Согласно известным данным таблетки для сублингвального применения, полученные на основе этого продукта, по своим фармакологическим показателям (пульсовому давлению у анестезированных собак, систолическому давлению крови и содержанию ГТН в плазме у здоровых людей) были биоэквивалентны обычным таблеткам с таким же содержанием ГТН (0,3 мг) (Idzu, G., Terada, Т., et al. "Stability and bioequivalence of sublingual tablets of nitroglycerin--cyclodextrin complex" Byoin Yakugaku 1989, v. l5, 1, p. 36-42, Chem. Abstr. 1989, v. lll, 28417а). Таким образом, рассматриваемый комплекс включения так же, как и сам лиганд, проявлял высокоэффективное непродолжительное гипотензивное действие в результате биотрансформации ГТН с образованием NO и последующей активации рГЦ.

Данный комплекс так же, как и исходный лиганд (ГТН), по-видимому, способен вызывать толерантность при его длительном применении и проявляет слабовыраженные антиагрегантные свойства.

Цель изобретения - создание новых комплексов включения, обладающих улучшенными биохимическими и фармакологическими свойствами, разработка способа их получения и создание фармацевтических композиций на их основе.

Указанная цель достигается описываемыми новыми комплексами включения производных 1,2,5-оксадиазол-2-оксида вышеприведенной общей формулы I, где R¹ и R² имеют указанные значения, с полициклическими производными глюкопиранозы вышеприведенной общей формулы II, где R³-R⁸ имеют указанные значения, генерирующими NO, активирующими рГЦ и являющимися спазмолитическими, сосудорасширяющими, гипотензивными средствами быстрого действия и ингибиторами агрегации тромбоцитов, способом их получения и фармацевтическими композициями на их основе.

Предпочтительно, настоящее изобретение относится к следующим новым инклюзионным комплексам: - 4,7-диметил-1,2,5-оксадиазоло[3,4-d] пиридазин-1,5,6-триоксида с -ЦД (1:3) (1), - 4,7-диметил-1,2,5-оксадиазоло[3,4-d] пиридазин-1,5,6-триоксида с -ЦД (1:2) (2), - 4,7-диметил-1,2,5-оксадиазоло[3,4-d]пиридазин-1,5,6-триоксида с -ГПЦД (3), - 4,7-диметил-1,2,5-оксадиазоло[3,4-d] пиридазин-1,5,6-триоксида с ГК (4), - 3,4-дициано-1,2,5-оксадиазол-2-оксида с -ЦД (2:3) (5), - 3,4-дициано-1,2,5-оксадиазол-2-оксида с -ГПЦД (6).

Продукты настоящего изобретения получают способом, заключающимся во взаимодействии исходного производного 1,2,5-оксадиазол-2-оксида вышеприведенной общей формулы I, где R¹ и R² имеют указанные значения с соответствующим полициклическим производным глюкопиранозы вышеприведенной общей формулы II, где R³-R⁸ имеют указанные значения, в водно-органической среде (напр., в водном растворе диоксана, низшего алканола, в частности этанола, или смеси органических растворителей) при повышенной температуре (30-60^oС) с последующей отгонкой растворителей при пониженном давлении, повторным упариванием остатка с этанолом, промыванием целевого продукта малополярным органическим растворителем (напр. , диэтиловым эфиром или его смесью с гексаном) и тщательным высушиванием при пониженном давлении в присутствии фосфорного ангидрида. Существенность отличий настоящего способа определяется совокупностью его отличительных признаков (включая строение исходных реагентов - производных 1,2,5-оксадиазол-2-оксида вышеприведенной общей формулы I и условия выделения целевых продуктов), при которых достигается указанная цель изобретения (см. сравнительный пример 7).

Согласно данному изобретению новые инклюзионные комплексы можно применять для лечения заболеваний сердечно-сосудистой системы, включая лечение гипертонических кризов, острого инфаркта миокарда, стенокардии, ишемической болезни сердца, легочной гипертонии, острой недостаточности левого желудочка, токсикогенных спазмов сосудов, для профилактики и купирования приступов стенокардии и спазмов коронарных артерий при использовании сердечных катетеров, ангиографии и ангиопластике, а также других заболеваний сердечно-сосудистой системы, при которых положительный лечебный эффект достигается при снижении сосудистого сопротивления, нормализации сократительной способности миокарда и/или ингибировании активности тромбоцитов, за исключением тех заболеваний, при которых противопоказано снижение кровяного давления и/или ингибирование агрегации тромбоцитов (например, артериальной гипотонии, кардиогенного шока, острого инфаркта миокарда с пониженным давлением наполнения левого желудочка, общего снижения функции левого желудочка с низким давлением наполнения, гипертрофической обструктивной кардиомиопатии, сосудистого коллапса, токсического отека легких, геморрагического инсульта, гемофилии, геморрагического диатеза, гипотромбинемии).

Предпочтительно применение новых соединений вышеуказанной общей формулы I для профилактики и купирования приступов стенокардии, нарушений, вызванных спазмом гладких мышц, и лечения острого инфаркта миокарда.

Настоящее изобретение относится также к фармацевтическим композициям, генерирующим оксид азота, активирующим растворимую форму гуанилатциклазы и обладающим спазмолитическим, сосудорасширяющим, гипотензивным и антиагрегантным действием, содержащим активный компонент и добавки в необходимом соотношении, при этом в качестве активного компонента используются комплексы включения производных 1,2,5-оксадиазол-2-оксида вышеприведенной общей формулы I, где R¹ и R² имеют указанные значения, с полициклическими производными глюкопиранозы вышеприведенной общей формулы II, где R³-R⁸ имеют указанные значения, полученные описанным способом.

В качестве добавок используются компоненты, общепринятые для приготовления лекарственных форм спазмолитических, сосудорасширяющих и гипотензивных средств. В зависимости от вида введения препарата и цели его применения лекарственные формы могут быть выполнены в виде растворов для инъекций или инфузий, капсул, гранул, драже или пилюль для постепенного дозирования (при необходимости из полимерного материала, например из ацетилфталоилцеллюлозы, или другого пригодного для данной цели материала, например желатина), а также в качестве порошков для аэрозолей.

Твердая форма для приема внутрь может содержать в качестве добавок инертный наполнитель (например, лактозу, сахарозу, сорбит, крахмал, маннит), поверхностно-активные вещества (например, стеарат магния или кальция, поливинилпирролидон, полиэтиленгликоль, полипропиленгликоль) и фармакологически приемлемые неорганические соли (например, хлорид натрия).

Жидкие композиции могут быть получены при растворении или диспергировании активного компонента в водном или неводном растворителе (например, этаноле, растительном масле) в присутствии стабилизирующих добавок (например, компонентов буферных смесей, поверхностно-активных веществ, пищевых углеводов), консервантов, пищевых красителей. Жидкие композиции могут быть использованы для различных способов введения, в частности в форме капель или аэрозолей, а также в ампульной форме для внутривенного или внутримышечного введения.

Вышеуказанные фармацевтические композиции на основе соединений вышеуказанной общей формулы I могут быть получены комбинированием комплексов включения настоящего изобретения с активными компонентами других известных фармпрепаратов, в частности, используемых для лечения заболеваний сердечно-сосудистой системы. Например, с этой целью можно использовать блокаторы ₁-адренергических рецепторов (празозин), агонисты центральных ₂-адренергических и I₁ имидазолиновых рецепторов (клофелин, моксонидин), блокаторы (₁)-адренергических рецепторов (пропранолол, атенолол, метопролол), блокаторы кальциевых каналов (нифедипин, дилтиазем), ингибиторы ангиотензинпревращающего фермента (лизиноприл, фозиноприл), коронарорасширяющие препараты (карбокромен), диуретики (дихлортиазид), сердечные гликозиды (дигитоксин), антигипертензивные средства (безафибрат, гемфиброзил).

Описание данного изобретения содержит 23 примера, 6 таблиц и 4 чертежа, иллюстрирующих экспериментальный материал.

Примеры 1-6 содержат описание синтеза новых инклюзионных комплексов с помощью описываемого способа, а также физико-химические характеристики полученных продуктов.

Сравнительный пример 7 подтверждает существенность отличий описываемого способа.

Пример 8 содержит результаты изучения полученных продуктов с помощью дифференциальной сканирующей калориметрии, подтверждающие образование новых комплексов включения.

Примеры 9-11 и табл.1 показывают химические основы молекулярного механизма фармакологического действия новых инклюзионных комплексов, заключающиеся в генерации NO и его редоксформы (нитроксила), а также образовании нитрозотиолов.

Пример 12 и табл.2 подтверждает образование NO новыми инклюзионными комплексами в тесте с оксигемоглобином.

Пример 13 и табл. 3 содержат результаты исследования скорости реакции новых инклюзионных комплексов с низкомолекулярными тиолами, способствующей образованию NO и его активных форм.

Пример 14 иллюстрируют биохимический эффект новых инклюзионных комплексов, опосредованный генерацией оксида азота, - активацию рГЦ из легких крысы.

Пример 15 и табл.4 иллюстрируют фармакологические свойства новых инклюзионных комплексов - спазмолитическую и сосудорасширяющую активности в условиях in vitro.

Пример 16 и табл.5 демонстрируют наличие у новых инклюзионных комплексов гипотензивной активности в условиях in vivo.

Пример 17 показывает способность новых инклюзионных комплексов ингибировать агрегацию тромбоцитов в условиях in vitro.

Пример 18 иллюстрирует изучение острой токсичности новых инклюзионных комплексов.

Пример 19 содержит описание некоторых физико-химических свойств новых инклюзионных комплексов (растворимость, стабильность).

Примеры 20-23 включают описание состава различных фармацевтических композиций на основе новых инклюзионных комплексов.

Пример 1. Комплекс включения 4,7-диметил-1,2,5-оксадиазоло[3,4-d]пиридазин-1,5,6-триоксида с -ЦД (1:3) (1).

К нагретому до температуры 50^oС раствору 59 мг (0,3 ммоль) ДОПТО в смеси, содержащей 70 мл 60%-ного водного раствора этанола и 42 мл диоксана, по каплям и при интенсивном перемешивании добавляли нагретый до температуры 50^oС раствор 324 мг (0,25 ммоль) -ЦД в 30 мл 40%-ного водного раствора этанола. Полученный раствор выдерживали в течение 2 ч при температуре 50^oС, упаривали досуха при пониженном давлении, повторно упаривали с этанолом (35 мл), остаток промывали диэтиловым эфиром (10 мл) и тщательно высушивали при пониженном давлении в присутствии фосфорного ангидрида. Получили 318 мг целевого продукта (выход 98,6%). Т. пл. 149-151^oС (разл.).

УФ-спектр (_max, нм): 256 (lg 4,09), 359 (lg 3,35). ИК спектр (KBr, см^-1): 3550-3200 (ОН), 2800-3000 (СН), 1710, 1625, 1550, 1520 (C=N-O), 1415, 1360 (N-N-O), 1320, 1160, 1080, 1030 (С-O), 950. 860 (C=N-O),760.

Найдено, %: С 41,06; Н 6,70; N 1,50. C₁₃₂H₂₁₆N₄O₁₀₉15Н₂О Вычислено, %: С 40,93; Н 6,40; N 1,45.

Полученный комплекс содержит исходные компоненты (ДОПТО и -ЦД) в мольном сотношении, равном 1:3, соответственно.

Пример 2. Комплекс включения 4,7-диметил-1,2,5-оксадиазоло[3,4-d]пиридазин-1,5,6-триоксида с -ЦД (1:2) (2).

В условиях примера 1 смешивали нагретые до температуры 60^oС растворы 60 мг (0,3 ммоль) ДОПТО в 10 мл диоксана и 324 мг (0,25 ммоль) -ЦД в 30 мл 40%-ного водного раствора этанола и выдерживали при температуре 60^oС в течение 2 ч. После этого полученный раствор упаривали при пониженном давлении, повторно упаривали с этанолом, остаток промывали смесью (4 мл) гексан-диэтиловый эфир (1:2) и высушивали при пониженном давлении в присутствии фосфорного ангидрида. Получили 314 мг целевого продукта (выход 97,7%). Т. пл. 147-149^oС (разл.).

УФ-спектр (_max, нм): 256 (lg 6,07), 359 (lg 4,98). ИК спектр (KBr, см^-1): 3380 (ОН), 1520 (C=N-O), 1360 (N=N-O), 860 (C=N-O).

Найдено, %: С 41,86; Н 6,40; N 2,20. C₉₀H₁₄₆O₇₄6H₂O Вычислено, %:С41,96; Н 6,18; N 2,17.

Полученный комплекс содержит исходные компоненты (ДОПТО и -ЦД) в мольном сотношении, равном 1:2, соответственно.

Пример 3. Комплекс включения 4,7-диметил-1,2,5-оксадиазоло[3,4-d]пиридазин-1,5,6-триоксида с -ГПЦД (3).

В условиях примера 1 из 60 мг (0,3 ммоль) ДОПТО и 355 мг (0,25 ммоль) -ГПЦД (средняя мол. масса 1420) после упаривания при пониженном давлении, повторного упаривания с этанолом, промывания диэтиловым эфиром (10 мл) и высушивания получили 357 мг целевого продукта. Т. пл. 164-167^oС (разл.).

УФ-спектр (_max, нм): 257 (lg 7,36), 360 (lg 6,61).

Полученный комплекс содержит исходный активный компонент (ДОПТО) в количестве, равном 9,4 мас.% (средняя мол. масса продукта в пересчете на 1 моль связавшегося ДОПТО ~2100).

Анализ ¹Н-ЯМР-спектров растворов комплексов ДОПТО, полученных в примерах 1-3, в ДМСО-D₆ показывает, что данные продукты не содержат заметных количеств (не более 0,4 мас.%) использованных при их синтезе органических растворителей (диоксана, этанола, гексана или диэтилового эфира).

Пример 4. Комплекс включения 4,7-диметил-1,2,5-оксадиазоло[3,4-d]пиридазин-1,5,6-триоксида с ГК (4).

В условиях примера 1 из 60 мг (0,3 ммоль) ДОПТО и 246 мг (0,3 ммоль) ГК после упаривания при пониженном давлении, повторного упаривания с этанолом, промывания 10 мл смеси гексан-диэтиловый эфир (1:1) и высушивания получили 258 мг целевого продукта. Т. пл. 142-145^oС (разл.). ИК спектр (KBr, см^-1): 3550-3200 (ОН), 2800-3000 (CH), 1732 (СО), 1680 (СО в СООН), 1524 (фуроксановый цикл), 1456, 1444 (фуроксановый цикл), 1376 (N=N-O).

Полученный комплекс содержит исходный активный компонент (ДОПТО) в количестве, равном 18,7 мас.% (условная мол. масса продукта в пересчете на 1 моль связавшегося ДОПТО ~ 1060).

Пример 5. Комплекс включения 3,4-дициано-1,2,5-оксадиазол-2-оксида с -ПД (2:3) (5).

В условиях примера 1 смешивали нагретые до температуры 30^oС растворы 16 мг (0,12 ммоль) ДЦФ в 10 мл этанола и 130 мг (0,1 ммоль) -ЦД в 30 мл 40%-ного водного раствора этанола и выдерживали при температуре 30^oС в течение 2 ч. После этого полученный раствор упаривали при пониженном давлении, остаток промывали 10 мл смеси гексан-диэтиловый эфир (1:1) и высушивали при пониженном давлении в присутствии фосфорного ангидрида. Получили 129 мг целевого продукта (выход 94,7%). Данный комплекс не имеет выраженной температуры плавления (разложения) в интервале температур 0-250^oС.

УФ-спектр (_max, нм): 272 (lg 5,49) ИК спектр (KBr, см^-1): 3550-3200 (ОН), 2800-3000 (СН), 22,08 (CN), 1628, 1454 (фуроксановый цикл).

Найдено, %: С 39,28; Н 6,52; N 2.74. C₁₃₄H₂₁₀N₈O₁₀₉24Н₂О Вычислено, %: С 39,16; Н 6,33; N 2,73.

Пример 6. Комплекс включения 3,4-дициано-1,2,5-оксадиазол-2-оксида с -ГПЦД (6).

В условиях примера 1 из 41 мг (0,3 ммоль) ДЦФ и 355 мг (0,25 ммоль) -ГПЦД (средняя мол. масса 1420) после упаривания при пониженном давлении, повторного упаривания с этанолом, промывания 10 мл смеси гексан-диэтиловый эфир (1: 1) и высушивания получили 344 мг целевого продукта. Т. пл. 118-120^oС. УФ-спектр (_max, нм): 273 (lg 3.62). ИК спектр (KBr, , см^-1): 3550-3200 (ОН), 2800-3000 (СН), 2208 (CN), 1636, 1454 (фуроксановый цикл).

Полученный комплекс содержит исходный активный компонент (ДЦФ) в количестве, равном 9,2 мас.% (средняя мол. масса продукта в пересчете на 1 моль связавшегося ДЦФ ~1470).

Анализ ¹Н-ЯМР-с