Применение производных рапамицина при вазопатиях и ксенотрансплантации

Применение производных рапамицина при вазопатиях и ксенотрансплантации

Реферат

 

Предложено новое средство для лечения или профилактики неоинтимальных утолщений и пролиферации, а также средство для борьбы или предупреждения хронического отторжения аллотрансплантата и фармацевтическая композиция на его основе. Оно представляет собой 40-O-(2-гидроксиэтил)рапамицин, ранее известный в качестве иммунодепрессора. Изобретение расширяет арсенал средств заявленного назначения. 3 с. и 6 з.п. ф-лы.

Настоящее изобретение относится к применению по новому назначению, в частности к применению по новому назначению группы соединений, представляющих собой производные рапамицина, в свободной форме либо в форме фармацевтически приемлемой соли или в комплексной форме.

К соотвествующим производным рапамицина относятся, например, соединения формулы I где Х обозначает (Н, Н) или О; Y обозначает (Н, ОН) или О; R¹ и R² независимо друг от друга выбирают из группы, включающей Н, алкил, арилалкил, гидроксиалкил, дигидроксиалкил, гидроксиалкоксикарбонилалкил, гидроксиалкиларилалкил, дигидроксиалкиларилалкил, ацилоксиалкил, аминоалкил, алкиламиноалкил, алкоксикарбониламиноалкил, ациламиноалкил, арилсульфонамидоалкил, аллил, дигидроксиалкилаллил, диоксоланилаллил, диалкилдиоксоланилалкил, ди(алкоксикарбонил)триазолилалкил и гидроксиалкоксиалкил, где "алк-" или "алкил" обозначает разветвленный или линейный С₁-С₆алкил; "арил" обозначает фенил или толил; и "ацил" обозначает радикал, являющийся производным карбоновой кислоты; и R⁴ обозначает метил или R⁴ и R¹ вместе образуют С₂-С₆алкил; при условии, что R¹ и R² вместе не могут обозначать Н, а гидроксиалкоксиалкил не обозначает гидроксиалкоксиметил.

Такие соединения описаны в заявке WO 94/09010, содержание которой, касающееся в частности этих соединений, включено в настоящее описание в виде ссылки.

Ацил в том виде, в котором он может присутствовать в R¹ или в R², предпочтительно обозначает R_aCO-, где R_a обозначает С₁-С₆алкил, С₂-С₆алкенил, С₃-С₆циклоалкил, арил, арилС₁-С₆алкил (где арил имеет значения, указанные выше) или гетероарил, например, фрагмент, являющийся производным 5- или 6-членного гетероцикла, включающего в качестве гетероатомов N, S или О, а также необязательно один или два атома N в качестве дополнительных гетероатомов. Примерами гетероарила являются пиридил, морфолино, пиперазинил или имидазолил.

К примерам указанных соединений относятся: 1. 40-O-бензилрапамицин, 2. 40-О-(4'-гидроксиметил) бензилрапамицин, 3. 40-O-[4'-(1,2-дигидроксиэтил)] бензилрапамицин, 4. 40-O-аллилрапамицин, 5. 40-O-[3'-(2,2-диметил-1,3-диоксолан-4(S)-ил)-проп-2'-ен-1'-ил]рапамицин, 6. (2'Е,4'S)-40-O-(4',5'-дигидроксипент-2'-ен-1'-ил)рапамицин, 7. 40-O-(2-гидрокси)этоксикарбонилметилрапамицин, 8. 40-O-(2-гидрокси)этилрапамицин, 9. 40-O-(3-гидрокси)пропилрапамицин, 10. 40-O-(6-гидрокси)гексилрапамицин, 11. 40-O-[2-(2-гидрокси)этокси]этилрапамицин, 12. 40-O-[(3S)-2,2-диметилдиоксолан-3-ил]метилрапамицин, 13. 40-O-[(2S)-2,3-дигидроксипроп-1 -ил] рапамицин, 14. 40-O-(2-ацетокси) этилрапамицин, 15. 40-O-(2-никотиноилокси) этилрапамицин, 16. 40-O-[2-(N-морфолино)ацетокси] этилрапамицин, 17. 40-O-(2-N-имидазолилацетокси)этилрапамицин, 18. 40-O-[2-(N-метил-N'-пиперазинил) ацетокси] этилрапамицин, 19. 39-O-десметил-39,40-O,O-этиленрапамицин, 20. (26R)-26-дигидро-40-O-(2-гидрокси) этилрапамицин, 21. 28-O-метилрапамицин, 22. 40-O-(2-аминоэтил) рапамицин, 23. 40-O-(2-ацетаминоэтил) рапамицин, 24. 40-O-(2-никотинамидоэтил)рапамицин, 25. 40-O-(2-(N-метилимидазо-2'-илкарбоксамидо)этил)рапамицин, 26. 40-O-(2-этоксикарбониламиноэтил)рапамицин, 27. 40-O-(2-толилсульфонамидоэтил)рапамицин, 28. 40-O-[2-(4',5'-дикарбоэтокси-1',2',3'-триазол-1'-ил)этил] рапамицин.

Предпочтительным соединением является, например, 40-O-(2-гидрокси)этилрапамицин (обозначенное далее в настоящем описании как соединение А).

Было обнаружено, что соединения формулы I с учетом выявленной активности, например, способности связываться с макрофилином-12 (также известным как FK-506-связывающий протеин или FKBP-12), например, как описано в WO 94/09010, могут применяться в качестве иммунодепрессантов, например, при лечении острого отторжения аллотрансплантата.

Трансплантацию органов, например, печени, почки, легкого и сердца, в настоящее время регулярно применяют в качестве метода лечения конечной стадии заболевания органа. Вследствие дефицита в настоящее время людей-доноров для трансплантации аллотрансплантатов, особое внимание уделяется возможности использования для трансплантации ксенотрансплантатов (трансплантантов, пересаживаемых от одного вида другому). Одними из основных препятствий успешной трансплантации ксенотрансплантатов у людей являются иммунологические проблемы.

Еще одним препятствием при алло- и ксенотрансплантации является хроническое отторжение, и, таким образом, трансплантация органов еще не является широко доступным в клинической практике решением при необратимом заболевании органа.

Хроническое отторжение, которое проявляется в виде прогрессирующей и необратимой дисфункции трансплантата, приводит к потере трансплантированного органа в некоторых случаях уже всего лишь через один год после операции. Клиническая проблема хронического отторжения видна из следующих данных о времени выживания трансплантатов: около половины аллотрансплантатов почки погибает через 5 лет после трансплантации, то же самое наблюдается и у пациентов с сердечными аллотрансплантатами.

Хроническое отторжение рассматривается как многофункциональный процесс, в котором важное значение имеет не только иммунная реакция на трансплантат, но также и реакция на повреждение стенок кровеносных сосудов трансплантированного органа (реакция "ответ на повреждение"). Вариантом хронического отторжения с наиболее плохим прогнозом является напоминающее артериоклероз изменение, также называемое трансплантатной вазопатией, трансплантатным сосудистым заболеванием, трансплантатным артериосклерозом, трансплантатным сердечным заболеванием и т.д. Это патологическое изменение сосуда характеризуется миграцией и пролиферацией клеток гладкой мускулатуры, вероятно, под воздействием факторов роста, которые среди прочего синтезируются эндотелиальными клетками. Это приводит к пролиферации и утолщению интимы (внутренней оболочки), гипертрофической репарации клеток гладкой мускулатуры и, наконец, к постепенной облитерации полости (сосудистая реконструкция). Вероятно, это развивается также вследствие повторного эндотелиального повреждения, индуцированного, в частности, антителом хозяина или комплексами антиген-антитело. Кроме того, важное значение имеют так называемые неиммунологические факторы, например, гипертензия, гиперлипемия, гиперхолестеринемия и т.д.

Хроническое отторжение, вероятно, является "безжалостным" и неконтролируемым, поскольку не известен способ его эффективного лечения или предупреждения. Таким образом, продолжает существовать необходимость в разработке метода лечения, эффективного для предупреждения, контроля или реверсии симптомов хронических трансплантатных сосудистых заболеваний.

Также продолжает существовать необходимость в предупреждении или лечении рестеноза или окклюзии сосудов, являющихся результатом пролиферации и миграции клеток гладкой мускулатуры внутренней оболочки, например, вызванных сосудистой хирургией, такой, как пластическая операция на сосудах.

В соответствии с настоящим изобретением неожиданно было установлено, что соединения формулы I ингибируют вазопатии, такие как сосудистая реконструкция, и прежде всего показаны для предупреждения или уменьшения хронического отторжения трансплантированного органа.

В соответствии с конкретными полученными данными объектами настоящего изобретения являются следующие.

1. Способ предупреждения или лечения пролиферации и утолщения новой внутренней оболочки у пациента, нуждающегося в этом, включающий введение этому пациенту терапевтически эффективного количества соединения формулы I.

Некоторыми конкретными или альтернативными объектами настоящего изобретения также являются следующие.

2.1. Способ предупреждения или уменьшения у реципиента симптомов хронического отторжения трансплантированного органа или ткани, включающий стадию введения реципиенту терапевтически эффективного количества соединения формулы I.

2.2. Способ предупреждения или уменьшения интенсивности трансплантантных сосудистых заболеваний у реципиента, например, трансплантантных вазопатий, артериосклероза или атеросклероза, трансплантированного органа или ткани, включающий стадию введения реципиенту терапевтически эффективного количества соединения формулы I.

Под симптомами хронического отторжения понимают состояния, являющиеся результатом иммунной реакции по отношению к трансплантату или реакцию стенок кровеносных сосудов на трансплантированный орган или ткань, как указано выше. Соединения формулы I пригодны для уменьшения проявлений хронического отторжения или для облегчения состояний, являющихся результатом хронического отторжения.

Трансплантация органа или ткани может быть осуществлена от донора реципиенту этого же вида или других видов. Иллюстративными примерами таких трансплантируемых органов или тканей являются сердце, печень, почка, селезенка, легкое, тонкая кишка и поджелудочная железа или комбинация любых вышеуказанных органов.

Еще одним объектом изобретения является следующий.

3. Способ предупреждения или лечения пролиферации и миграции клеток гладкой мускулатуры внутренней оболочки, например, рестеноза и/или окклюзии сосуда, являющихся результатом повреждения сосуда, например, вследствие пластической операции на сосудах, у пациента, нуждающегося в этом, включающий введение этому пациенту терапевтически эффективного количества соединения формулы I.

Далее еще одним объектом изобретения является следующий.

4. Способ предупреждения или уменьшения острого или хронического отторжения у реципиента трансплантата, представляющего собой ксенотрансплантат, включающий введение этому пациенту терапевтически эффективного количества соединения формулы I.

Трансплантаты органов или тканей, представляющие собой ксенотрансплантаты, включают, например, ксенотрансплантаты сердца, печени, почки, селезенки, легкого, тонкой кишки, поджелудочной железы (всей или ее части, например, островки Лангерганса), кожи и костного мозга.

Другими объектами настоящего изобретения также являются следующие: 5. Соединение формулы I, предназначенное для применения в любом из вышеуказанных способов 1-4.

6. Соединение формулы I для приготовления фармацевтической композиции, предназначенной для применения в любом из вышеуказанных способов 1-4.

7. Фармацевтическая композиция, предназначенная для применения в любом из вышеуказанных способов 1-4, включающая соединение формулы I вместе с одним или с несколькими фармацевтически приемлемыми растворителями или носителями.

Пригодность соединений формулы I для лечения заболеваний и состояний, указанных выше в настоящем описании, может быть продемонстрирована с помощью опытов на животных, например, согласно приведенным ниже методам.

А. Хроническое отторжение аллотрансплантата Почку самца крысы линии DA (RT1^a) ортотопически трансплантируют самцу-реципиенту линии Lewis (RT1¹). Всего подвергают трансплантации 24 животных. Всем животным перорально вводят циклоспорин А из расчета 7,5 мг/кг/день, начиная за 14 дней до дня трансплантации, с целью предупреждения острого клеточного отторжения. Не проводят удаления противоположной почки. Каждая экспериментальная группа, которую обрабатывают определенной дозой соединения формулы I или плацебо, состоит из шести животных.

Начиная с 53-64 дня после трансплантации, животным-реципиентам вводят перорально в течение еще 69-72 дней соединение формулы I, или они получают плацебо. На 14-й день после трансплантации у животных проводят оценку трансплантата с помощью диагностики по магнитно-резонансному изображению (МРИ) с измерением перфузии почек (путем сравнения трансплантированной почки и собственной противоположной почки). Эту процедуру повторяют на 53-64 день после трансплантации и в конце эксперимента. Затем проводят аутопсию животных. Определяют и статистически анализируют параметры отторжения, такие как степень отторжения по данным МРИ, относительная скорость перфузии в трансплантированной почке и клеточное отторжение и изменение в сосудах аллотрансплантированной почки по данным гистологии. Введение соединения формулы I, например, соединения А, в дозе 0,5-2,5 мг/кг, на этой модели аллотрансплантата почки крысы приводит к уменьшению всех вышеуказанных параметров отторжения. В этом анализе у животных, обработанных перорально соединением А из расчета 2,5 мг/кг/день, обнаружена существенно меньшая степень отторжения по данным МРИ, существенно меньшая степень клеточного отторжения и изменений в сосудах по данным гистологии и значительное уменьшение скорости перфузии по данным МРИ по сравнению с животными из группы, которая получала плацебо.

Б. Трансплантация аорты В этой модели трансплантации аорты у крыс аллогенная реакция на трансплантат не приводит к разрушению трансплантата, но вызывает патологические изменения, напоминающие изменения, происходящие при хроническом отторжении при клинической трансплантации. Они включают инфильтрацию в адвентициальную оболочку одноядерных клеток (лимфоцитов, макрофагов, некоторых клеток плазмы) и утолщение внутренней оболочки.

Донорскую аорту, имеющую длину приблизительно 1 см, берут из участка между ветвью почечной артерии и началом каудальной брыжеечной аорты самца крысы линии DA (RT1^a) и ортотопически трансплантируют самцу-реципиенту крыс линии Lewis (RT1¹). Еженедельно после трансплантации измеряют вес тела. При аутопсии удаляют часть аорты реципиента непосредственно выше и ниже трансплантата. Его подвергают перфузии ex vivo забуференным фосфатом физиологическим раствором, дополненным 2% параформальдегида и 2,5% глутарового альдегида, в течение приблизительно 2 мин, затем в течение 24 ч фиксируют с помощью иммерсионной фиксации в этом же растворе и после этого фиксируют в 4%-ном забуференном формалине. Кусочки трансплантата заливают парафином таким образом, чтобы получить как поперечный срез, так и продольный срез трансплантированной аорты и собственной аорты реципиента.

Срезы толщиной 4 мкм окрашивают гематоксилином-эозином, модификация Гисона, и периодной кислотой по Шиффу. Кроме общепринятой световой микроскопии, изображения подвергают конфокальной лазерной сканирующей микроскопии. В каждом срезе сканируют четыре области и в пяти точках каждой области измеряют толщину внутренней оболочки и внутренней оболочки + адвентициальной оболочки. При аутопсии измеряют вес и проводят гистологическое исследование тимуса, селезенки, печени, почки, яичек и семенного пузырька.

В первом эксперименте используют 4 группы, каждая из которых состоит из 4 животных. В одной группе проводят изогенные трансплантации (Lewis в Lewis), и животные получают микроэмульсию в качестве плацебо; в других группах проводят аллогенные трансплантации и животные получают перорально либо микроэмульсию в качестве плацебо, либо соединение формулы I в микроэмульсии из расчета 2,5 мг/кг/день. Эксперимент завершается через 7 недель после трансплантации.

Во втором эксперименте используют 4 группы, каждая из которых состоит из 4 животных. Во всех случаях проводят аллогенные трансплантации, и животные получают перорально либо микроэмульсию в качестве плацебо, либо соединение формулы I в микроэмульсии из расчета 0,63, 1,25, 2,5 или 5,0 мг/кг/день. Эксперимент завершается через 11 недель после трансплантации.

В обоих экспериментах соединения формулы I, прежде всего соединение А, существенно ингибируют инфильтрацию трансплантата и образование новой внутренней оболочки.

В. Пластическая операция на сосудах Изучение в отношении пластической операции на сосудах проводят с помощью моделирования повреждения катетером-баллоном: катетеризацию баллоном проводят в день 0, в основном по описанной у Powell и др. (1989) методике. Катетер Фогарти типа 2F вводят при анестезии изофлуораном в левую общую сонную артерию через наружную сонную артерию и надувают (растяжение 10 мкл Н₂О). Надутый баллон протаскивают по всей длине общей сонной артерии трижды, причем последние два раза слегка закручивая для получения однородной деэндотелиализации. Затем катетер удаляют, вокруг наружной сонной артерии накладывают лигатуру с целью уменьшения кровотечения и животным дают восстановиться после вмешательства.

Для исследования используют 2 группы по 12 крыс линии RoRo (приблизительно 24-недельных, весом 400 г): первая группа является контрольной, а второй группе вводят соединение формулы I. Крыс совершенно случайным образом делят на группы на всех стадиях ухода за ними, экспериментальных процедур и анализов.

Подлежащее тестированию соединение вводят перорально (через желудочный зонд), начиная за 3 дня до повреждения баллоном (день -3) и до конца опыта через 14 дней после повреждения баллоном (день +14). Крыс содержат в отдельных клетках и дают им пищу и воду по желанию (ad libidum).

Затем крыс подвергают анестезии изофлуораном, перфузионный катетер вводят через левый желудочек и располагают в дуге аорты, а аспирационную канюлю вводят в правый желудочек. Животных подвергают перфузии при перфузионном давлении 150 мм рт.ст. сначала в течение 1 мин с использованием 0,1М забуференного фосфатом физиологического раствора (ЗФР, рН 7,4), а затем в течение 15 мин с использованием 2,5%-ного глутарового альдегида в фосфатном буфере (рН 7,4). Перфузионное давление составляет 150 мм рт.ст. в верхней части канюли (100 мм рт.ст. в сонной артерии), что определено в предварительном эксперименте при введении в наружную сонную артерию канюли, присоединенной к датчику давления). Затем сонные артерии отсекают, отделяют от окружающей ткани и погружают в 0,1М какодилатный буфер (рН 7,4), содержащий 7% сахарозы, и инкубируют в течение ночи при 4^oС. На следующий день сонные артерии погружают в 0,05%-ный КМnO₄ в 0,1М какодилатном буфере и встряхивают в течение 1 ч при комнатной температуре. Затем ткани обезвоживают в возрастающих концентрациях этанола: 210 мин в 75%, 210 мин в 85%, 310 мин в 95% и 310 мин в 100%-ном этаноле. Затем обезвоженные сонные артерии заливают в Technovit 7100 согласно рекомендации производителей. Среду для заливки оставляют для полимеризации в течение ночи в эксикаторе в атмосфере аргона, поскольку установлено, что кислород ингибирует правильное затвердевание блоков.

Срезы толщиной 1-2 мкм вырезают из средней части каждой сонной артерии с помощью ножа из твердого металла на роторном микротоме и окрашивают в течение 2 мин с помощью красителя Гимзе. Таким путем получают примерно 5 срезов каждой сонной артерии, и площадь поперечного сечения адвентициальной оболочки, внутренней оболочки и полости оценивают морфометрически с помощью системы анализа изображения (MCID, Toronto, Канада).

В этом анализе установлено, что соединения формулы I ингибируют пролиферацию клеток внутренней мышечной оболочки при введении перорально в суточной дозе от 0,5 до 2,5 мг/кг. Утолщение внутренней оболочки оказалось существенно меньшим в сосудах крыс, которые получали соединение А, по сравнению с контрольными животными, например, соединение А в дозе 0,5 мг/кг достоверно ингибирует образование новой внутренней оболочки на 50%, а в дозе 2,5 мг/кг достоверное ингибирование составляет 75%.

Г. Ксенотрансплантация сердца in vivo (от хомячка крысе) Ксенотрансплантатная комбинация "из хомячка в крысу" представляет собой так называемую трудно конкордантную комбинацию. Крысы не имеют естественного антитела к хомячку в достаточных количествах, чтобы дать непосредственное гиперострое отторжение, которое наблюдается при конкордантных комбинациях; однако отторжение у необработанных реципиентов происходит через 3-4 дня с помощью антител в комбинации с комплементом. Это видно при гистологическом исследовании по деструкции кровеносных сосудов, экссудации и транссудации эритроцитов и притоку многоядерных гранулоцитов; часто присутствуют признаки кровоизлияния и тромбоза. Если это отторжение преодолевалось в результате эффективного ингибирования синтеза антител либо инактивации комплемента, клеточное отторжение может произойти позднее. Это было обнаружено при гистологическом исследовании притока одноядерных клеток, включая лимфоциты, лимфобластные клетки и макрофаги, и деструкции паренхимы миоцитов. Для ингибирования клеточного отторжения необходимо большее подавление иммунной системы, чем в случае аллотрансплантатов. У крыс с врожденным отсутствием тимуса (линия rnu/rnu) отсутствует компетентная (зависящая от тимуса) клеточная иммунная система, и они обычно не способны отторгать аллотрансплантат. Такие животные отторгают ксенотрансплантат хомячка через 3-4 дня таким же образом, как и крысы с нормальным тимусом, что свидетельствует о том, что (по крайней мере частично) синтез антител к хомячку у крыс происходит после независимого от тимуса В-клеточного ответа. Такие реципиенты пригодны для ксенотрансплантации с использованием тканей хомячка с целью оценки отторжения при отторжении, опосредованном не зависящими от тимуса антителами.

Сердце сирийского хомячка гетеротопически трансплантируют в брюшной отдел самца крысы линии Lewis (RT1¹) путем соединений при помощи анастомоза аорты донора и реципиента и правой легочной артерии донора с нижней полой веной реципиента. Трансплантат ежедневно обследуют при помощи пальпации брюшного отдела. В случае прекращения биения сердца констатируют наличие отторжения. Животных взвешивают каждую неделю. Настоящие серии экспериментов заканчивают на 28 день. Животных подвергают аутопсии; кроме трансплантата взвешивают и проводят гистологическое исследование тимуса, селезенки, семенных пузырьков и яичек. Берут кровь и подвергают обработке с получением сыворотки с целью определения цитолитических эритроцитарных антител против хомячка и гемолитической активности комплемента.

В этом анализе соединения формулы I, например, соединение формулы А, приводят к более продолжительному выживанию трансплантата как у реципиентов без тимуса, так и у реципиентов с нормальным тимусом.

Суточные дозы, необходимые для практического осуществления способа по настоящему изобретению, будут варьироваться в зависимости, например, от используемого соединения формулы I, хозяина, метода введения и серьезности состояния, подлежащего лечению. Предпочтительный суточный диапазон доз составляет приблизительно от 0,25 до 25 мг в виде однократной дозы или в виде разделенных доз. Приемлемые для пациентов суточные дозы составляют примерно, например, от 0,2 до 25 мг перорально, предпочтительно от 5 до 25 мг. Соединения формулы I могут вводиться общепринятым способом, в частности энтерально, например, орально, например, в форме таблеток, капсул, растворов для питья, назально, легочным путем (при помощью ингаляции), или парентерально, например, в форме инъецируемых растворов или суспензий. Приемлемые унифицированные дозируемые формы для орального введения содержат от примерно 0,05 до 12,5 мг, обычно от 1 до 10 мг действующего вещества, например, соединения А, вместе с одним или с несколькими фармацевтически приемлемыми растворителями или носителями.

При применении для предупреждения или лечения хронического отторжения или отторжения ксенотрансплантата, как определено выше, соединения формулы I могут вводиться в качестве единственного действующего вещества или вместе с другими лекарствами в соответствии с режимами иммуномодуляции. Например, соединения формулы I могут применяться в комбинации с циклоспоринами или аскомицинами или их иммунодепрессантными аналогами, например, циклоспорином А, циклоспорином G, FK-506 и др.; с кортикостероидами; циклофосфамидами; азатиопреном; метотрексатом; бреквинаром; лефлуномидом; мизорибином; микофеноловой кислотой; микофенолятом мофетила; 15-дезоксиспергуалином, иммунодепрессантными моноклональными антителами, например, моноклональными антителами к рецепторам лейкоцитов, например, МНС, CD2, CD3, CD4, CD7, CD25, CD28, В7, CD45 или CD58, или их лигандами; или с другими иммуномодулирующими соединениями, например, с CTLA4Ig.

Когда соединения формулы I вводят в сочетании с другой иммунодепрессантной/иммуномодулирующей терапией, например, для предупреждения или лечения хронического отторжения или отторжения ксенотрансплантата, как определено выше, дозы вводимого совместно иммунодепрессанта или иммуномодулятора должны, как очевидно, варьироваться в зависимости от типа совместно используемого лекарства, например, от того, является ли оно стероидом или циклоспорином, от конкретно используемого лекарства, от состояния, полежащего лечению, и т.д. В соответствии с вышеизложенным еще одним объектом настоящего изобретения является следующий.

8. Способ совместного введения, как определено выше, например, одновременно или последовательно, терапевтически эффективного количества соединения формулы I и второго лекарственного средства, причем второе лекарственное средство является иммунодепрессантом или иммуномодулятором, например, как указано выше.

Пример композиции: Капсулы Этанол - 20,0 мг 1,2-Пропиленгликоль - 81,0 мг Очищенное масло - 121,5 мг Cremophor RH40 - 202,5 мг Соединение А - 20,0 мг Всего - 500 мг Соединения формулы I являются хорошо переносимыми в дозах, необходимых для применения в соответствии с настоящим изобретением. Например, значения NTEL для соединения А при изучении токсичности в течение 4 недель составляют для крыс 0,5 мг/кг/день, а для обезьян 1,5 мг/кг/день.

Формула изобретения

1. Применение 40-O-(2-гидроксиэтил)рапамицина в качестве фармацевтического средства для предупреждения или лечения неоинтимальной пролиферации и утолщения.

2. Применение 40-O-(2-гидроксиэтил)рапамицина по п.1 в качестве фармацевтического средства для предупреждения или борьбы с проявлениями симптомов хронического отторжения у реципиента органа или ткани, представляющих собой аллотрансплантат.

3. Применение 40-O-(2-гидроксиэтил)рапамицина по п.1 в качестве фармацевтического средства для предупреждения или лечения рестеноза и/или васкулярной окклюзии, являющейся результатом повреждения сосуда.

4. Применение 40-O-(2-гидроксиэтил)рапамицина в качестве фармацевтического средства для предупреждения или борьбы с острым или хроническим отторжением у реципиента органа или ткани, представляющих собой ксенотрансплантант.

5. Применение по пп.1-3 или 4 в комбинации с циклоспорином A, FK-506, азатиоприном, метотрексатом, микофеноловой кислотой, мофетил микофенолятом, 15-деоксиспергалином, моноклональными антителами по отношению к рецепторам лейкоцитов, или их лигандам, или CTLA4-lg.

6. Применение по п.5, где моноклональные антитела являются моноклональными антителами к МНС, CD2, CD3, CD4, CD7, CD25, CD28, В7, CD45, или CD58 или их лигандами.

7. Фармацевтическая композиция, предназначенная для предупреждения или лечения неоинтимальной пролиферации и утолщения, для предотвращения или лечения рестеноза и/или васкулярной окклюзии, вызванной повреждением стенок сосуда, для предупреждения или борьбы с проявлениями хронического отторжения у реципиента органа или ткани, представляющих собой аллотрансплантат, или для предотвращения или борьбы с проявлениями острого или хронического отторжения у реципиента органа или ткани, представляющих собой ксенотрансплантат, включающая в качестве активного ингредиента 40-O-(2-гидроксиэтил)рапамицин вместе с одним или с несколькими фармацевтически приемлемыми растворителями или носителями.

8. Композиция по п. 7 для применения в комбинации с циклоспорином А, FK-506, азатиоприном, метотрексатом, микофеноловой кислотой, мофетилмикофенолятом, 15-деоксиспергалином или моноклональными антителами по отношению к рецепторам лейкоцитов, или их лигандами, или CTLA4-lg.

9. Композиция по п.8, где моноклональные антитела являются моноклональными антителами к МНС, CD2, CD3, CD4, CD7, CD25, CD28, В7, CD45 или CD58 или их лигандами.