Способы модулирования функции серин/треонин протеинкиназы соединениями на основе 5-азахиноксалина, способ идентификации соединений, модулирующих функцию серин/треонин протеинкиназы, способ профилактики или лечения патологического состояния организма, фармацевтическая композиция, соединение на основе 5- азахиноксалина и способ его синтеза

Способы модулирования функции серин/треонин протеинкиназы соединениями на основе 5-азахиноксалина, способ идентификации соединений, модулирующих функцию серин/треонин протеинкиназы, способ профилактики или лечения патологического состояния организма, фармацевтическая композиция, соединение на основе 5- азахиноксалина и способ его синтеза

Реферат

 

Изобретение относится к медицинской химии, точнее к способам модулирования функции серин/треонин протеинкиназ соединениями на основе 5-азахиноксалина. Способы включают использование клеток, экспрессирующих серин/треонин протеинкиназу, такую как RAF. Кроме того, в изобретении описаны способы профилактики и лечения, связанные с нарушением метаболизма серин/треонин протеинкиназы при патологических состояний в организме с помощью соединения, определенного в изобретении. Изобретение относится также к соединениям на основе 5-азахиноксалина и фармацевтическим композициям, содержащим эти соединения. Техническим результатом изобретения является расширение арсенала средств, регулирующих функцию серин/треонин протеинкиназу. 4 с. и 36 с.п. ф-лы, 4 табл.

Текст описания в факсимильном виде (см. графическую часть)л

Формула изобретения

1. Способ модулирования функции серин/треонин протеинкиназы, включающий контактирование клеток, экспрессирующих названный фермент, с соединением на основе 5-азахиноксалина.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что упомянутой серин/треонин протеинкиназой является RAF.

3. Способ идентификации соединений, модулирующих функцию серин/треонин протеинкиназы, отличающийся тем, что включает контактирование клеток, экспрессирующих упомянутую серин/треонин протеинкиназу, с упомянутым соединением и мониторинг эффекта на упомянутые клетки.

4. Способ по п.3, отличающийся тем, что упомянутым эффектом является изменение или отсутствие изменения клеточного фенотипа.

5. Способ по п.3, отличающийся тем, что упомянутым эффектом является изменение или отсутствие изменения клеточной пролиферации.

6. Способ по п.3, отличающийся тем, что упомянутым эффектом является изменение или отсутствие изменения каталитической активности упомянутой серин/треонин протеинкиназы.

7. Способ по п.3, отличающийся тем, что упомянутым эффектом является изменение или отсутствие изменения взаимодействия между упомянутой серин/треонин протеинкиназой и природным связывающим партнером.

8. Способ по п.3, отличающийся тем, что лизируют упомянутые клетки с получением лизата, содержащего серин/треонин протеинкиназу, адсорбируют упомянутую серин/треонин протеинкиназу на антителе, инкубируют адсорбированную серин/треонин протеинкиназу с субстратом или субстратами и адсорбируют упомянутый субстрат или субстраты на твердом носителе или антителе, причем мониторинг упомянутого эффекта на упомянутые клетки включает измерение концентрации фосфата в упомянутом субстрате или субстратах.

9. Способ по п.3, отличающийся тем, что упомянутой серин/треонин протеинкиназой является RAF, при этом проводят лизирование упомянутых клеток с получением лизата, содержащего RAF, адсорбцию упомянутой RAF на антителе, инкубирование упомянутой адсорбированной RAF с МЕК и МАРК и адсорбцию упомянутых МЕК и МАРК на твердом носителе или антителах, причем упомянутая стадия измерения эффекта на упомянутые клетки включает мониторинг концентрации фосфата в упомянутых МЕК и МАРК.

10. Способ по п.1, отличающийся тем, что упомянутое соединение на основе 5-азахиноксалина имеет структуру, представленную формулой I

где (a) R₁, R₂, R₃, R₄ и R₆ независимо выбирают из группы, включающей (i) водород; (ii) насыщенный или ненасыщенный алкил, замещенный по выбору пяти- или шестичленным арильным или гетероарильным остатками, в которых кольцо пo выбopу зaмeщенo одним, двумя или тремя заместителями, независимо выбранными из группы, включающей алкил, галоген, тригалогенметил, карбоксилат, нитро и сложноэфирные остатки; (iii) амин формулы NX₂X₃, где Х₂ и Х₃ независимо выбирают из группы, включающей водород, насыщенный или ненасыщенный алкил и пяти- или шестичленные арильные или гетероарильные остатки; (iv) галоген или тригалогенметил; (v) кетон формулы -СО-Х₄, где Х₄ выбирают из группы, включающей водород, алкил и пяти- или шестичленные арильные или гетероарильные остатки; (vi) карбоновую кислоту формулы -(X₅)_n-COOH или сложный эфир формулы -(Х₆)_n-СОО-Х₇, где X₅, X₆ и Х₇ независимо выбирают из группы, включающей алкил и пяти- или шестичленные арильные или гетероарильные остатки, а n равно 0 или 1; (vii) спирт формулы (X₈)_n-OH или алкоксиостаток формулы - (X₈)_n-O-Х₉, где X₈ и X₉ независимо выбирают из группы, включающей водород, насыщенный или ненасыщенный алкил и пяти- или шестичленные арильные или гетероарильные остатки, в кольце которых по выбору имеется один или более заместителей, которые независимо выбирают из группы, включающей алкил, галоген, тригалогенметил, карбоксилат, нитро и сложноэфирные остатки, а n равно 0 или 1; (viii) амид формулы -NНСОХ₁₀, где Х₁₀ выбирают из группы, включающей алкил, гидроксил и пяти- или шестичленные арильные или гетероарильные остатки, в кольце которых по выбору имеется один или более заместителей, которые независимо выбирают из группы, включающей алкил, галоген, тригалогенметил, карбокислат, нитро или сложноэфирные остатки; (ix) -SO₂NX₁₁X₁₂, где Х₁₁ и Х₁₂ независимо выбирают из группы, включающей водород, алкил и пяти- или шестичленные арильные или гетероарильные остатки; (х) пяти- или шестичленный арильный или гетероарильный остаток, по выбору замещенный одним, двумя или тремя заместителями, независимо выбранными из группы, включающей алкил, галоген, тригалогенметил, карбоксилат, нитро и сложноэфирные остатки; (xi) альдегид формулы -СО-Н и (xii) сульфон формулы -SO₂-X₁₃, где Х₁₃ выбирают из группы, включающей насыщенный или ненасыщенный алкил и пяти- или шестичленные арильные или гетероарильные остатки; и

(б) Х₁ выбирают из группы, включающей азот, серу и кислород.

11. Способ по п.10, отличающийся тем, что упомянутые R₁, R₂, R₃, R₄ и R₅ независимо выбирают из группы, включающей (i) водород; (ii) насыщенный или ненасыщенный алкил, замещенный по выбору пяти- или шестичленным арильным или гетероарильным остатками, в которых кольцо по выбору замещено одним, двумя или тремя заместителями, независимо выбранными из группы, включающей алкил, галоген, тригалогенметил, гидрокси, алкокси, карбоксилат, нитро и сложноэфирные остатки и (iii) пяти- или шестичленные арильные или гетероарильные остатки, замещенные по выбору одним, двумя или тремя заместителями, независимо выбранными из группы, включающей алкил, галоген, тригалогенметил, гидрокси, алкокси, карбоксилат, нитро и сложноэфирные остатки.

12. Способ по п.11, отличающийся тем, что упомянутые R₁ и R₂ независимо выбирают из группы, включающей (i) водород; (ii) фенил, по выбору замещенный заместителем, выбранным из группы, включающей алкил, галоген, тригалогенметил, нитро, карбоксилат, гидрокси и алкокси остатки.

13. Способ по п.12, отличающийся тем, что упомянутый Х₁ является азотом или кислородом.

14. Способ по п.12, отличающийся тем, что упомянутые заместители R₆ и X₁ объединены с образованием остатка R₆X₁, а R₁ и R₂ выбирают из группы, включающей заместители, представленные в таблице:

15. Способ по п.14, отличающийся тем, что упомянутое соединение на основе 5-азахиноксалина выбирают из группы, включающей соединения SAQAR, представленные в таблице по п.14.

16. Способ профилактики или лечения патологического состояния организма, отличающийся тем, что в упомянутый организм вводят соединения на основе 5-азахиноксалина формулы I

где (a) R₁, R₂, R₃, R₄ и R₅ независимо выбирают из группы, включающей (i) водород; (ii) насыщенный или ненасыщенный алкил, замещенный по выбору пяти- или шестичленным арильным или гетероарильным остатками, в которых кольцо по выбору замещено одним, двумя или тремя заместителями, независимо выбранными из группы, включающей алкил, галоген, тригалогенметил, карбоксилат, нитро и сложноэфирные остатки; (iii) амин формулы NX₂X₃, где X₂ и X₃ независимо выбирают из группы, включающей водород, насыщенный или ненасыщенный алкил и пяти- или шестичленные арильные или гетероарильные остатки; (iv) галоген или тригалогенметил; (v) кетон формулы -СО-Х₄, где Х₄ выбирают из группы, включающей водород, алкил и пяти- или шестичленные арильные или гетероарильные остатки; (vi) карбоновая кислота формулы -(Х₅)_n-СООН или сложный эфир формулы -(X₆)_n-COO-X₇, где X₅, X₆ и Х₇ независимо выбирают из группы, включающей алкил и пяти- или шестичленные арильные или гетероарильные остатки, а n равно 0 или 1; (vii) спирт формулы (Х₈)_n-ОН или алкоксиостаток формулы - (X₈)_n-O-Х₉, где X₈ и Х₉ независимо выбирают из группы, включающей водород, насыщенный или ненасыщенный алкил и пяти- или шестичленные арильные или гетероарильные остатки, в кольце которых по выбору имеется один или более заместителей, которые независимо выбирают из группы, включающей алкил, галоген, тригалогенметил, карбоксилат, нитро и сложноэфирные остатки, а n равно 0 или 1; (viii) амид формулы -NНСОХ₁₀, где Х₁₀ выбирают из группы, включающей алкил, гидроксил и пяти- или шестичленные арильные или гетероарильные остатки, в кольце которых по выбору имеется один или более заместителей, которые независимо выбирают из группы, включающей алкил, галоген, тригалогенметил, карбокислат, нитро или сложноэфирные остатки; (ix) -SO₂NX₁₁X₁₂, где Х₁₁ и Х₁₂ независимо выбирают из группы, включающей водород, алкил и пяти- или шестичленные арильные или гетероарильные остатки; (х) пяти- или шестичленный арильный или гетероарильный остаток, по выбору замещенный одним, двумя или тремя заместителями, независимо выбранными из группы, включающей алкил, галоген, тригалогенметил, карбоксилат, нитро и сложноэфирные остатки; (xi) альдегид формулы -СО-Н и (xii) сульфон формулы -SO₂-X₁₃, где Х₁₃ выбирают из группы, включающей насыщенный или ненасыщенный алкил и пяти- или шестичленные арильные или гетероарильные остатки; и

(б) Х₁ выбирают из группы, включающей азот, серу и кислород.

17. Способ по п.16, отличающийся тем, что упомянутые R₁, R₂, R₃, R₄ и R₆ независимо выбирают из группы, включающей (i) водород; (ii) насыщенный или ненасыщенный алкил, замещенный по выбору пяти- или шестичленным арильным или гетероарильным остатками, в которых кольцо по выбору замещено одним, двумя или тремя заместителями, независимо выбранными из группы, включающей алкил, галоген, тригалогенметил, карбоксилат, нитро и сложноэфирные остатки; (iii) пяти- или шестичленные арильные или гетероарильные остатки, замещенные по выбору одним, двумя или тремя заместителями, независимо выбранными из группы, включающей алкил, галоген, тригалогенметил, гидрокси, алкокси, карбоксилат, нитро и сложноэфирные остатки.

18. Способ по п.17, отличающийся тем, что упомянутые R₁ и R₂ независимо выбирают из группы, включающей (i) метил, по выбору замещенный фенильной группой, которая по выбору замещена заместителем, выбранным из группы, включающей алкил, галоген, гидрокси и алкокси остатки и (ii) фенил, по выбору замещенный заместителями, выбранными из группы, включающей алкил, галоген, гидрокси и алкокси остатки.

19. Способ по п.18, отличающийся тем, что упомянутый X₁ является азотом или кислородом.

20. Способ по п.19, отличающийся тем, что упомянутые заместители R₆ и Х₁ объединены с образованием остатка, который выбирают из группы, включающей заместители SAQAR, представленные в таблице по п.14.

21. Способ по п.20, отличающийся тем, что упомянутое соединение на основе 5-азахиноксалина выбирают из группы, включающей соединения SAQAR, представленные в таблице по п.14.

22. Способ по п.16, отличающийся тем, что упомянутым организмом является млекопитающее.

23. Способ по п.16, отличающийся тем, что упомянутым патологическим состоянием является онкологическое заболевание или фиброзное нарушение.

24. Способ по п.23, отличающийся тем, что упомянутым патологическим состоянием является онкологическое заболевание, выбираемое из группы, включающей рак легких, рак яичников, рак молочной железы, рак мозга, рак внутриаксиального мозга, рак ободочной кишки, рак предстательной железы, саркома, саркома ксеродермы, меланома и глиома.

25. Способ по п.16, отличающийся тем, что упомянутое патологическое состояние связано с отклонением от нормы пути трансдукции сигнала, характеризующегося взаимодействием междусерин/треонинпротеинкиназой и природным связывающим партнером.

26. Способ по п.25, отличающийся тем, что упомянутой серин/треонин протеинкиназой является RAF.

27. Соединение на основе 5-азахиноксалина, имеющее структуру, представленную формулой I

где (a) R₁, R₂, R₃, R₄ и R₆ независимо выбирают из группы, включающей (i) водород; (ii) насыщенный или ненасыщенный алкил, замещенный по выбору пяти- или шестичленным арильным или гетероарильным остатками, в которых кольцо по выбору замещено одним, двумя или тремя заместителями, независимо выбранными из группы, включающей алкил, галоген, тригалогенметил, карбоксилат, нитро и сложноэфирные остатки; (iii) амин формулы NX₂X₃, где X₂ и Х₃ независимо выбирают из группы, включающей водород, насыщенный или ненасыщенный алкил и пяти- или шестичленные арильные или гетероарильные остатки; (iv) галоген или тригалогенметил; (v) кетон формулы -СО-Х₄, где Х₄ выбирают из группы, включающей водород, алкил и пяти- или шестичленные арильные или гетероарильные остатки; (vi) карбоновую кислоту формулы -(X₅)_n-COOH или сложный эфир формулы -(Х₆)_n-СОО-Х₇, где X₅, X₆ и Х₇ независимо выбирают из группы, включающей алкил и пяти- или шестичленные арильные или гетероарильные остатки, а n равно 0 или 1; (vii) спирт формулы (X₈)_n-OH или алкоксиостаток формулы -(X₈)_n-O-Х₉, где X₈ и Х₉ независимо выбирают из группы, включающей водород, насыщенный или ненасыщенный алкил и пяти- или шестичленные арильные или гетероарильные остатки, в кольце которых по выбору имеется один или более заместителей, которые независимо выбирают из группы, включающей алкил, галоген, тригалогенметил, карбоксилат, нитро и сложноэфирные остатки, а n равно 0 или 1; (viii) амид формулы -NНСОХ₁₀, где Х₁₀ выбирают из группы, включающей алкил, гидроксил и пяти- или шестичленные арильные или гетероарильные остатки, в кольце которых по выбору имеется один или более заместителей, которые независимо выбирают из группы, включающей алкил, галоген, тригалогенметил, карбокислат, нитро или сложноэфирные остатки; (ix) -SO₂NX₁₁X₁₂, где Х₁₁ и X₁₂ независимо выбирают из группы, включающей водород, алкил и пяти- или шестичленные арильные или гетероарильные остатки; (х) пяти- или шестичленный арильный или гетероарильный остаток, по выбору замещенный одним, двумя или тремя заместителями, независимо выбранными из группы, включающей алкил, галоген, тригалогенметил, карбоксилат, нитро и сложноэфирные остатки; (xi) альдегид формулы -СО-Н и (xii) сульфон формулы -SО₂-Х₁₃, где Х₁₃ выбирают из группы, включающей насыщенный или ненасыщенный алкил и пяти- или шестичленные арильные или гетероарильные остатки; и

(б) Х₁ выбирают из группы, включающей азот, серу и кислород.

28. Соединение по п.27, отличающееся тем, что упомянутые R₁, R₂, R₃, R₄ и R₆ независимо выбирают из группы, включающей (i) водород; (ii) насыщенный или ненасыщенный алкил, замещенный по выбору пяти- или шестичленным арильным или гетероарильным остатками, в которых кольцо по выбору замещено одним, двумя или тремя заместителями, независимо выбранными из группы, включающей алкил, галоген, тригалогенметил, гидрокси, алкокси, карбоксилат, нитро и сложноэфирные остатки; (iii) пяти- или шестичленные арильные или гетероарильные остатки, замещенные по выбору одним, двумя или тремя заместителями, независимо выбранными из группы, включающей алкил, галоген, тригалогенметил, гидрокси, алкокси, нитро и сложноэфирные остатки.

29. Соединение по п.28, отличающееся тем, что упомянутые R₃ и R₄ являются водородом.

30. Соединение по п.29, отличающееся тем, что упомянутые R₁ и R₂ независимо выбирают из группы, включающей (i) метил, по выбору замещенный фенильной группой, по выбору земещенной заместителями, выбранными из группы, включающей алкил, галоген, гидрокси и алкокси остатки и (ii) фенил, по выбору замещенный заместителями, выбранными из группы, включающей алкил, галоген, гидрокси и алкокси остатки.

31. Соединение по п.29, отличающееся тем, что упомянутые R₁ и R₂ независимо выбирают из группы, включающей водород, метил, фенил и 4-гидроксифенил.

32. Соединение по п.30, отличающееся тем, что Х₁ является азотом или кислородом.

33. Соединение по п.32, отличающееся тем, что упомянутые заместители R₆ и Х₁ объединены с образованием остатка, который выбирают из группы, включающей заместители SAQAR, представленные в таблице по п.14.

34. Соединение по п.33, отличающееся тем, что упомянутое соединение на основе 5-азахиноксалина выбирают из группы, включающей соединения SAQAR, представленные в таблице по п.14.

35. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение на основе 5-азахиноксалина, охарактеризованное в пп.27-34, или его соль и физиологически приемлемый носитель или разбавитель.

36. Способ синтеза соединения по п.27, отличающийся тем, что первый реагент взаимодействует со вторым реагентом в растворителе и в присутствии основания с образованием первого промежуточного производного, причем первым реагентом является 2-амино-6-хлор-3-нитропиридин, а вторым реагентом является спирт или амин, упомянутое первое промежуточное производное вводят в реакцию с третьим реагентом в присутствии катализатора и восстанавливающего реагента, причем третьим реагентом является 1,2-дион, и очищают продукт.

37. Способ по п.36, отличающийся тем, что упомянутый второй реагент выбирают из группы, включающей соединения SAQAR, представленные в таблице по п.14.

38. Способ по п.36, отличающийся тем, что упомянутый третий реагент выбирают из группы, включающей 4-гидроксифенилглиоксаль, 1-фенил-1,2-пропандион и бензил.

39. Способ по п.36, отличающийся тем, что упомянутым восстанавливающим реагентом является водород.

40. Способ по п.36, отличающийся тем, что упомянутым катализатором является никель Ренея.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5, Рисунок 6, Рисунок 7, Рисунок 8, Рисунок 9, Рисунок 10, Рисунок 11, Рисунок 12, Рисунок 13, Рисунок 14, Рисунок 15, Рисунок 16, Рисунок 17, Рисунок 18, Рисунок 19, Рисунок 20, Рисунок 21, Рисунок 22, Рисунок 23, Рисунок 24, Рисунок 25, Рисунок 26, Рисунок 27, Рисунок 28, Рисунок 29, Рисунок 30, Рисунок 31, Рисунок 32, Рисунок 33, Рисунок 34, Рисунок 35, Рисунок 36, Рисунок 37, Рисунок 38, Рисунок 39,