Замещенные 1,2-дигидро[2,7]-нафтиридины, фармацевтическая композиция, способ ее получения и применение

Замещенные 1,2-дигидро[2,7]-нафтиридины, фармацевтическая композиция, способ ее получения и применение

Реферат

 

Изобретение относится к новым высокоэффективным лигандам (агонистов, антагонистов, модуляторов и т.п.) никотиновых рецепторов - новым замещенные 1,2-дигидро[2,7]нафтиридинам общей формулы 1 в виде отдельных стереоизомеров, их рацемических или аддитивных смесей, или их фармацевтически приемлемым солям, N-оксидам или гидратам

в которой: R¹ и R² независимо друг от друга представляют атом водорода, инертный заместитель, необязательно замещенный С₁-С₅алкил, или R¹ и R² вместе представляют полиметиленовую цепочку, включающую 2-5 необязательно замещенных метиленовых группы; R ³ и R⁴ независимо друг от друга представляют атом водорода, инертный заместитель, необязательно замещенный С₁-С₅алкил, необязательно замещенную C _1-6алкилоксикарбонильную группу, необязательно замещенную карбамоильную группу; R⁵, находящийся при атомах углерода пиридинового фрагмента, представляет: атом водорода, инертный заместитель, необязательно замещенный гидроксиС_1-5 алкил, необязательно замещенную аминогруппу, необязательно замещенную гидроксильную группу, необязательно замещенную C_1-6 алкилоксикарбонильную группу, необязательно замещенную карбамоильную группу; или R⁵, если он находится при атоме азота пиридинового фрагмента, образует пиридиниевую соль с фармакологически приемлемым анионом и представляет инертный заместитель. Изобретение также относится к фармацевтической композиции в форме таблеток, капсул или инъекций, способу ее получения и применению. 5 н. и 9 з.п. ф-лы, 1 табл.

Изобретение относится к синтезу новых химических веществ, поиску новых физиологически активных веществ, соединений-лидеров и лекарственных кандидатов (drug-candidates), а также к фармацевтическим композициям, способам их получения и применения.

Более конкретно настоящее изобретение относится к новым замещенным 1,2-дигидро[2,7]нафтиридинам и фармацевтическим композициям, включающим новые замещенные [2,7]нафтиридины, способам их полученения и применения.

Существует большое количество физиологически активных соединений-лидеров и лекарств, молекулы которых включают конденсированный пиридиновый фрагмент. Достаточно сослаться на базу "Ensemble^R" фирмы Prous Science (www.prous.com), включающую более 130 000 биологически активных соединений, из которых более тысячи соединений представляют собой различные замещенные конденсированные гетероциклы, включающие пиридиновый фрагмент и обладающие широким спектром биологической активности.

В этом ряду биологически активных гетероциклов представлены и замещенные [2,7]нафтиридины. Так, например, 2-[4-[4-(2,7-нафтиридин-1-ил)-пиперазин-1-ил]бутил]-1,2-бензизотиазол-3(2Н)-он 1,1-диоксид является селективным агонистом 5-НТ1А рецептора [Failli, А.А. Пат. США 216922, 1988], а N-[2-(4-хлорфенил)-1(R)-[5-фтор-1-(метансульфонил)спиро[2,3-дигидро-1H-индол-3,4'-пиперидин]-1'-илкарбонил]этил]-1,2,3,4-тетрагидро[2,7]нафтиридин-3(S)-карбоксамид является

агонистом меланокортинового рецептора [Patchett, А.А., Ye, Z., Palucki, B.L., Van der Ploeg.L.H.T., Nargund, R.P., Bakshi, R.K. Пат. США 123260, 1999; Пат. GB 17179, 1998].

Известно лишь несколько замещенных 1,2-дигидро[2,7]нафтиридинов [Skaltsounis, A.-L.; Tillequin, F.; Koch, M.; Pusset, J.; Chauviere, G. Heterocycles, 1987, 26 (3), 599-605], а именно метиловый эфир 1-метил-1,2-дигидро-[2,7]нафтиридин-4-карбоновой кислоты полученный из природных алкалоидов 1-метил-1,2-дигидро-[2,7]нафтиридин-4-карбоновой кислоты 4-метоксикарбонил-7-метил-2,4а,5,6,7,7а-гексагидро-1H-[2]пириндин-6-илового эфира (scaevodimerine А) и 1-метил-1,2-дигидро-[2,7]нафтиридин-4-карбоновой кислоты 4-метоксикарбонил-7-метил-2,4а,5,б,7,7а-гексагидро-1H-[2]пириндин-6-иловый эфир (sceavodimerine С), выделенных из Scaevola racemigera daniker (Goodeniaceae) [Delaude, С. et al. Bull. Soc. Royale Sc. Liege, 1992, 61 (6), 429-440].

Известно также, что замещенные 1-оксо-1,2-дигидро[2,7]нафтиридинов, такие как метиловые эфиры 2-(2-метилпиридин-4-метил)-1-оксо-8-(2-гетарилметокси)-4-(3,4,5-триметоксифенил)-1,2-дигидро[2,7]нафтиридин-3-карбоновой кислоты

являются ингибиторами фосфодиастеразы V [Omori, К., Kikkawa, К., Ukita, Т. Яп.пат. 139701, 1999; 338301, 1998; 240838, 1998; 1031679, 2001; WO 0012503].

Учитывая высокий потенциал физиологической активности замещенных 1,2-дигидро[2,7]нафтиридинов, актуальным является разработка новых соединений этого типа, фармацевтических композиций, включающих эти соединения, способов их получения и применения.

В результате проведенных исследований, направленных на поиск новых физиологически активных веществ, соединений-лидеров, изобретатели получили неизвестные ранее замещенные 1,2-дигидро[2,7]нафтиридины, фармацевтические композиции, включающие новые 1,2-дигидро[2,7]нафтиридины, разработали способы их получения и применения.

Ниже приведены определения терминов, которые использованы в описании этого изобретения.

“Комбинаторная библиотека” означает коллекцию соединений, полученных параллельным синтезом, предназначенную для поиска соединения-хита или соединения-лидера, а также для оптимизации физиологической активности хита или лидера, причем каждое соединение библиотеки соответствует общему скэффолду и библиотека является коллекцией родственных гомологов или аналогов.

“Фокусированная библиотека” означает комбинаторную библиотеку или совокупность нескольких комбинаторных библиотек, или совокупность библиотек и веществ, специальным образом организованную с целью увеличения вероятности нахождения хитов и лидеров или с целью повышения эффективности их оптимизации. Дизайн фокусированных библиотек, как правило, связан с направленным поиском эффекторов (ингибиторов, активаторов, агонистов, антагонистов и т.п.) определенных биомишеней (ферментов, рецепторов, ионных каналов и т.п.).

“Соединение-хит” (“хит”) означает соединение, проявившее в процессе первичного скрининга искомую физиологическую активность.

“Соединение-лидер” (“лидер”) означает соединение с выдающейся (максимальной) физиологической активностью, связанной с конкретной биомишенью, относящейся к определенной (или нескольким) патологиям или болезням.

“Скэффолд” означает общую структурную формулу, или молекулярный каркас, или инвариантную область соединений, характерную для всех соединений, входящих в комбинаторную библиотеку.

“Аддитивная смесь” означает смесь стереоизомеров (антиподов) любого произвольно заданного состава (1:9, 8:2 и т.п.), получаемую в результате синтеза или путем прямого смешения стереоизомеров.

“Заместитель” означает химический радикал, который присоединяется к скэффолду или полупродукту синтеза в процессе их синтеза.

“Инертный заместитель” (или “не мешающий”, "Non-interfering substituent") означает низко- или нереакционоспособный радикал включая, но не ограничивая C₁-C₇ алкил, С₂ -С₇ алкенил, С₂-C₇ алкинил, C₁-C₇ алкокси, С₇-C₁₂ аралкил, замещенный аралкил, С₇-C₁₂ гетероциклилалкил, замещенный гетероциклилалкил, С₇-С₁₂ алкарил, С₃-С₁₀ циклоалкил, С₃-С ₁₀ циклоалкенил, фенил, замещенный фенил, толуил, ксиленил, бифенил, С₂-С₁₂ акоксиалкил, С₂ -С₁₀ алкилсульфинил, С₂-С₁₀ алкилсульфонил, (CH₂)_m-O-(C₁ -С₇ алкил), -(CH₂)_m-N(C ₁-С₇ алкил)_n, арил, замещенный арил, замещенный алкокси, фторалкил, арилоксиалкил, гетероциклил, замещенный гетероциклил и нитроалкил; где m и n имеют значение от 1 до 7. Предпочтительными “инертными заместителями” являются C₁ -С₇ алкил, С₂-С₇ алкенил, C ₂-С₇ алкинил, C₁ -С₇ алкокси, С₇-C₁₂ аралкил, С₇-C₁₂ алкарил, С₃-С₁₀ циклоалкил, С₃ -С₁₀ циклоалкенил, фенил, замещенный фенил, (СН ₂)_m-O-(C₁-c₇ алкил), -(CH ₂)_m-N(C₁-С₇ алкил) _n, арил, замещенный арил, гетероциклил и замещенный гетероциклил.

“Замещенная группа, замещенный радикал или скэфолд” означают, соответственно группу, радикал или скэфолд, у которых имеется заместитель, включая но не ограничивая: инертный заместитель, атом галогена, нитро группа, циано группа, сульфо группа, гидроксильная группа, амино группа, карбоксиалкильная группа, карбоксильная группа, карбамоильная группа. Например: замещенный алкил означает алкил, у которого один или несколько заместителей, например, гидроксиалкил или метилоксикарбонилалкил, амино-метоксикарбонил-метил, диметиламиноалкил, 2-гидрокси-2-метоксикарбонил-этил и др.; замещенная амино группа означает амино группу, у которой имеется один или два заместителя, например, ациламино группа, N,N-диалкиламино группа, N-ацил-N-арил-амино группа, ацетил-метоксикарбонилметил-амино группа и др.; замещенный фенил означает фенил, у которого имеется один или несколько заместителей, например 2-метоксикарбонилфенил, 4-амино-3-метоксикарбонилфенил, 3,4-диаминофенил и др.

“Необязательно замещенная группа, необязательно замещенный радикал или скэфолд” означают, соответственно группу, радикал или скэфолд, включающие группы, радикалы или скэфолды с заместителями и без заместителей. Например, понятие необязательно замещенная аминогруппа включает: незамещенную аминогруппу и аминогруппы, содержащие любые, не противоречащие химии заместители, включая но не ограничивая ациламино группы, N,N-диалкиламино группы, N-ацил-N-арил-амино группы, ацил-метоксикарбонилметил-амино группы и др.

“Арил” означает один или более ароматических циклов, каждый из которых включает 5 или 6 атомов углерода. “Арил” может быть конденсированным полициклом, например как нафталин, или неконденсированным, например как бифенил. “Замещенный арил” имеет один или несколько “не мешающих” заместителей.

“Галоген” означает атом фтора, хлора, брома или йода.

“Гетероцикл” означает один или несколько насыщенных, ненасыщенных или ароматических циклов с 5, 6 или 7 атомами, по крайней мере один из которых является гетероатомом. Преимущественными гетероатомами являются азот, сера и кислород. “Гетероцикл” может быть конденсированным полициклом, например, как бензимидазол, хинолин, бензотиазол, бензоксазол, или неконденсированным, например, как бипиридил.

“Азогетероцикл” означает гетероцикл, включающий, по крайней мере, один атом азота, например, как пиперидин, морфолин, пиррол, бензимидазол, бензоксазол, бензотиазол, хинолин.

Целью настоящего изобретения являются новые замещенные 1,2-дигидро[2,7]нафтиридины общей формулы 1 в виде отдельных стереоизомеров, их рацемических или аддитивных смесей или их фармацевтически приемлемые соли, N-оксиды или гидраты

в которой:

R¹ и R² независимо друг от друга представляют атом водорода, инертный заместитель, необязательно замещенный С₁-С₅алкил, или

R¹ и R² вместе представляют полиметиленовую цепочку, включающую 2-5 необязательно замещенных метиленовых групп;

R³ и R⁴, независимо друг от друга, представляют атом водорода, инертный заместитель, необязательно замещенный C₁-C₅ алкил, необязательно замещенную C_1-6алкилоксикарбонильную группу, необязательно замещенную карбамоильную группу;

R⁵, находящийся при атомах углерода пиридинового фрагмента, представляет атом водорода, инертный заместитель, необязательно замещенный гидрокси C _1-5 алкил, необязательно замещенную амино группу, необязательно замещенную гидроксильную группу, необязательно замещенную C _1-6алкилоксикарбонильную группу, необязательно замещенную карбамоильную группу, или

R⁵, находящийся при атоме азота пиридинового фрагмента, образует пиридиниевую соль с фармакологически приемлемым анионом и представляет инертный заместитель;

исключая: метиловый эфир 1-метил-1,2-дигидро-[2,7]нафтиридин-4-карбоновой кислоты, 1-метил-1,2-дигидро-[2,7]нафтиридин-4-карбоновой кислоты 4-метоксикарбонил-7-метил-2,4а,5,6,7,7а-гексагидро-1H-[2]пириндин-6-иловый эфир и 1-метил-1,2-дигидро-[2,7]нафтиридин-4-карбоновой кислоты 4-метоксикарбонил-7-метил-2,4а,5,6,7,7а-гексагидро-1H-[2]пириндин-6-иловый эфир.

Целью настоящего изобретения является также создание новых фармацевтических композиций в форме таблеток, капсул или инъекций, помещенных в фармацевтически приемлемую упаковку, для лечения и предупреждения развития различных заболеваний теплокровных животных и людей.

Поставленная цель достигается фармацевтической композицией, в отношении действия никотинового рецептора, в форме таблеток, капсул или инъекций, помещенных в фармацевтически приемлемую упаковку, содержащей в качестве активной субстанции фармацевтически эффективное количество замещенного 1,2-дигидро[2,7]нафтиридина общей формулы 1 в виде отдельных стереоизомеров, их рацемических или аддитивных смесей, или их фармацевтически приемлемой соли, N-оксида или гидрата.

Целью настоящего изобретения является также создание способа получения новой фармацевтической композиции в отношении действия никотинового рецептора.

Поставленная цель достигается смешиванием фармацевтически эффективного количества активной субстанции, а именно замещенного 1,2-дигидро[2,7]нафтиридина общей формулы 1 в виде отдельных стереоизомеров, их рацемических или аддитивных смесей, или их фармацевтически приемлемой соли, N-оксида или гидрата с инертыми по отношению к субстанции наполнителями и/или разбавителями, с последующим таблетированием, капсулированием или разбавлением или помещением в пригодную упаковку.

Целью настоящего изобретения также является способ лечения и предупреждения развития различных заболеваний теплокровных животных и людей.

Поставленная цель достигается применением новой фармацевтической композиции, содержащей замещенный 1,2-дигидро[2,7]нафтиридин общей формулы 1 в виде отдельных стереоизомеров, их рацемических или аддитивных смесей, или их фармацевтически приемлемой соли, N-оксида или гидрата.

Целью настоящего изобретения является также создание новых лигандов никотиновых рецепторов для экспериментального исследования физиологических процессов.

Поставленная цель достигается применением физиологически активных 1,2-дигидро[2,7]нафтиридинов общей формулы 1 в виде отдельных стереоизомеров, их рацемических или аддитивных смесей, или их фармацевтически приемлемых солей, N-оксидов или гидратов, в качестве лигандов никотиновых рецепторов для экспериментального исследования физиологических процессов.

Среди замещенных 1,2-дигидро[2,7]нафтиридинов общей формулы 1, составляющих один из объектов настоящего изобретения, предпочтительными являются:

замещенные 1,2-дигидро[2,7]нафтиридин-3,4-дикарбоновые кислоты, их эфиры или их амиды общей формулы 1.1 в виде отдельных стереоизомеров, их рацемических или аддитивных смесей, или их фармацевтически приемлемые соли, N-оксиды или гидраты

в которой: R¹, R² и R⁵ имеют вышеуказанное значение;

R⁶ и R⁷ независимо друг от друга представляют необязательно замещенную гидроксильную группу или необязательно замещенную аминогруппу;

замещенные 1,2-дигидро[2,7]-нафтиридин-3,4-дикарбоновые кислоты, их эфиры или их амиды общей формулы 1.1.1 в виде отдельных стереоизомеров, их рацемических или аддитивных смесей, или их фармацевтически приемлемые соли, N-оксиды или гидраты

в которой: R¹, R⁵, R⁶ , R⁷ имеют вышеуказанное значение;

R⁸ представляет необязательно замещенную гидроксильную группу, необязательно замещенную аминогруппу, карбоксильную группу, необязательно замещенную карбоксиалкильную группу или необязательно замещенную карбамидную группу;

m имеет значение от 1 до 4;

замещенные 1,2-дигидро[2,7]нафтиридин-3,4-дикарбоновые кислоты, их эфиры или их амиды общей формулы 1.1.2 в виде отдельных стереоизомеров, их рацемических или аддитивных смесей, или их фармацевтически приемлемые соли, N-оксиды или гидраты

в которой: R⁶ и R⁷ имеют вышеуказанное значение; n имеет значение от 1 до 3;

замещенные 1,2-дигидро[2,7]нафтиридин-4-карбоновые кислоты, их эфиры или их амиды общей формулы 1.2 в виде отдельных стереоизомеров, их рацемических или аддитивных смесей, или их фармацевтически приемлемые соли, N-оксиды или гидраты

в которой: R¹, R², R⁵ и R⁷ имеют вышеуказанное значение;

замещенные 1,2-дигидро[2,7]-нафтиридин-4-карбоновые кислоты, их эфиры или их амиды общей формулы 1.2.1 в виде отдельных стереоизомеров, их рацемических или аддитивных смесей, или их фармацевтически приемлемые соли, N-оксиды или гидраты

в которой: R¹, R⁵, R⁶ , R⁸ и m имеют вышеуказанное значение;

замещенные 1,2-дигидро[2,7]-нафтиридин-4-карбоновые кислоты, их эфиры или их амиды общей формулы 1.2.2 в виде отдельных стереоизомеров, их рацемических или аддитивных смесей, или их фармацевтически приемлемые соли, N-оксиды или гидраты

в которой R⁷ и n имеют вышеуказанное значение;

замещенные 1,2-дигидро[2,7]нафтиридин-3-карбоновые кислоты, их эфиры или их амиды общей формулы 1.3 в виде отдельных стереоизомеров, их рацемических или аддитивных смесей, или их фармацевтически приемлемые соли, N-оксиды или гидраты

в которой: R¹, R², R⁵ и R⁶ имеют вышеуказанное значение;

замещенные 1,2-дигидро[2,7]-нафтиридин-3-карбоновые кислоты, их эфиры или их амиды общей формулы 1.3.1 в виде отдельных стереоизомеров, их рацемических или аддитивных смесей, или их фармацевтически приемлемые соли, N-оксиды или гидраты

в которой: R¹, R⁵, R⁶ , R⁸ и m имеют вышеуказанное значение;

замещенные 1,2-дигидро[2,7]нафтиридин-3-карбоновые кислоты, их эфиры или их амиды общей формулы 1.3.2 в виде отдельных стереоизомеров, их рацемических или аддитивных смесей, или их фармацевтически приемлемые соли, N-оксиды или гидраты

в которой R⁶ и n имеют вышеуказанное значение.

Способы получения замещенных 1,2-дигидро[2,7]нафтиридинов общей формулы 1 основаны на обнаруженных нами реакциях 3-аминометилпиридинов 2 с диалкилацетилендикарбоксилатами 3, приводящих к 1,2-дигидро[2,7]нафтаридинам 1.1, 1.2 и 1.3, представленных на нижеследующей схеме:

и известных реакциях модификации функциональных групп.

Все растворители и реагенты были получены из коммерческих источников, таких как Акрос (Асrоs) (Бельгия), Сигма-Олдрич (Sigma-Aldrich) (CШA), Ланкастер (Lancaster) (Англия) и КемДив (ChemDiv) (CШA). Точки плавления (т.пл.) были получены на приборе фирмы Бюхи (Buchi) (Швейцария) модель В-520. ¹Н и ¹³С ЯМР спектры были получены на спектрометрах фирмы Вариан (Varian) Gemini-300 (300 MHz) в CDCl₃, химические сдвиги приведены в шкале (м.д.). Внутренний стандарт тетраметилсилан.

Содержание основного вещества контролировали с помощью HPLC на приборе Шимадзу (Shimadzu) 10-AV (колонка Luna-CIS, Phenomenex, 25 см × 4.6 мм, UV детектирование при 215 и 254 нм) и LC-MS на приборе Applied Biosystems (Shimadzu 10-AV LC, Gilson-215 автоматическая подача образца, масс-спектрометр API 150EX, детекторы UV (215 и 254 нм) и ELS, колонка Luna-C18, Phenomenex, 5 см × 2 мм).

Аналитическую ТСХ проводили на силикагеле на алюминевых пластинках Silufol UV254 (5 см × 15 см) (Kavalier, Czech Republic) или на стеклянных пластинках с 0.25-мм слоем силикагеля 60 F₂₅₄ (Merck, Germany). Визуализация осуществлялась с помощью УФ-света на длине волны 254 нм. Для хроматографической очистки использовали силикагель 5-40 pm (Chemapol, Czech Republic) и 63 m (ЕМ Science, USA). В соответствии с данными LC/MS все синтезированные соединения имели содержание основного вещества выше 95%.

Биологическая активность синтезированных соединений определялась на клетках рабдомиосаркомы и феохромоцитомы, в которых никотиновый рецептор контролирует натриевую проницаемость и, как результат, клеточный трансмембранный электрический потенциал. Последний измерялся с помощью пары анионных флуоресцентных зондов (DiBAC4(5) и DiBAC4(3)) по изменению ФРЕТ при клеточной деполяризации, как описано в [Okun, I., Okun, A., Kaler, G. Pat. US 6287758, 2001]. Измерения ФРЕТ производились с помощью флуоресцентного параллельного считывателя VICTOR²V (PerkinElmer, USA) путем возбуждения флуоресцентного донора (DiBAC4(3)) светом с длиной волны 485 нм и измерения интенсивности флуоресценции акцептора (DiBAC4(5)) при длине волны 615 нм. При деполяризации клеточной мембраны в результате активации никотинового рецептора эффективность ФРЕТ возрастает, что проявляется в увеличении интенсивности флуоресценции акцептора.

Ниже изобретение описывается с помощью примеров, которые иллюстрируют, но не ограничивают данное изобретение

Пример 1. Общий способ получения диэтил 1-2-дигидро[2,7]нафтаридин-3,4-дикарбоксилатов 1.1. К раствору 0.5 ммоль 3-аминометилпиридина 2 в 4 мл безводного этилового спирта добавляли 0.5 ммоль концентрированной соляной или трифторуксусной кислоты. К полученному раствору при 0°С и сильном перемешивании медленно (в течение 15-30 мин) добавляли по каплям раствор 1 ммоль соответствующего ацетилендиалкилдикарбоксилата 3 в 1 мл этанола. Через 20-30 мин прекращали охлаждение реакционной смеси и оставляли ее при перемешивании на 12-18 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь нагревали в течение 20 мин при 150°С в микроволновом реакторе, после чего подвергали флэш-хроматографии на силикагеле (СНСl₃/МеОН/Еt₃N=100:6:1) и получали 1.1.

Диэтил 9,10,11,11а-тетрадигидро-8Н-пиридо[2,1-а][2,7]нафтиридин-5,6-дикарбоксилат 1.1.2 {1}: выход 49%; см. характеристики в Примере 1.

Диметил 9,10,11,11а-тетрадигидро-8Н-пиридо[2,1-а][2,7]нафтиридин-5,6-дикарбоксилат 1.1.2 {2}: выход 70%; гигроскопичные кристаллы, ¹Н ЯМР (СDСl₃) 8.24 (d, J=5.5 Hz, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.78 (d, J=5.5 Hz, 1H), 4.58 (dd, J=11.8, 2.3 Hz, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.74 (s, 3Н), 3.42-3.51 (m, 1H), 3.00-3.12 (m, 1H), 2.05-2.2 (m, 1H), 1.87-2.00 (m, 1H), 1.65-1.82 (m, 3Н), 1.47-1.56 (m, 1H); ¹³С ЯМР (СDСl ₃) 166.1, 164.7, 151.9, 148.9, 146.1, 136.3, 123.4, 117.6, 60.5, 52.8, 52.2, 51.1, 50.2, 34.9, 26.6, 24.5; LC-MS m/z 303 (M+1), r.t. 2.96.

Диэтил 8,9,10,10а-тетрагидро-пирроло[2,1-а] [2,7]нафтаридин-5,6-дикарбоксилат 1.1.2 {3}: LC-MS m/z 317 (M ⁺+l), r.t. 3.29.

Диэтил 2-(3-метоксипропил)-1-метил-1,2-дигидро[2,7]нафтиридин-3,4-дикарбоксилат 1.1.1 {1}: выход 43%; ¹Н ЯМР (СDСl₃) 8.38 (d, J=5.5 Hz, 1H), 8.15 (s, 1H), 8.00 (d, J=5.5 Hz, 1H), 4.56 (q, J=6.6 Hz, 1H), 4.20-4.45 (m, 4H), 3.35-3.55 (m, 2H), 3.25-3.32 (m, 2H), 3.28 (s, 3H), 1.79-1.90 (m, 2H), 1.38 (t, J=7.3 Hz, 3H), 1.35 (t, J=7.0 Hz, 3H), 1.29 (d, J=6.6 Hz, 3Н); ¹³С ЯМР (CDCl₃) 165.7, 164.6, 150.9, 148.7, 145.4, 136.9, 125.1, 118.1, 96.5, 68.7, 62.3, 60.2, 58.6, 55.7, 49.1, 30.1, 19.9, 14.3, 13.9; LC-MS m/z 363 (M+1), r.t. 3.34.

Диэтил 2-(2-диметиламиноэтил)-1-метил-1,2-дигидро[2,7]нафтиридин-3,4-дикарбоксилат 1.1.1 {2}: выход 45%; LC-MS m/z 362 (M+1), r.t. 2.84.

Диэтил 2-бензил-1,2-дигидро[2,7]нафтиридин-3,4-дикарбоксилат 1.1.1 {3}: выход 67%; ¹Н ЯМР (CDCl₃) 8.34 (d, J=5.0 Hz, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.93 (d, J=5.0 Hz, 1H), 7.20-7.40 (m, 5H), 4.44 (s, 2H), 4.38 и 4.33 (AB, J=7.5 Hz, 2H), 4.25-4.31 (m, 4H), 1.35 (t, J=7.1 Hz, 3H), 1.30 (t, J=7.1 Hz, 3Н); ¹³С ЯМР (СDСl₃) 166.3, 165.1, 153.6, 149.8, 146.1, 139.0, 134.9, 129.2, 128.5, 128.4, 128.0, 120.5, 118.5, 63.0, 61.0, 57.2, 49.4, 14.9,14.4; LC-MS m/z 367 (M+1), r.t. 3.96.

Диэтил 2-(4-фторбензил)-1,2-дигидро[2,7]нафтиридин-3,4-дикарбоксилат 1.1.1 {4}: выход 60; LC-MS m/z 385 (M+1), r.t. 4.00.

Пример 2. Общий способ получения диэтил 1-2-дигидро[2,7] нафтаридин-3,4-дикарбоксилатов 1.1.2 и этил 1-2-дигидро[2,7] нафтаридин-4-карбоксилатов 1.2.2. К раствору 0,07 мол 3-аминометилпиридина 2 в 250 мл этанола при 0°С в течение 30 мин добавляли по каплям раствор 0,14 мол соответствующего ацетилендикарбоксилата 3 в 50 мл этанола. Смесь выдерживали при охлаждении еще 30 мин и оставляли при комнатной температуре на 12 ч. Затем смесь переносили в стальной автоклав и нагревали 3 ч при 150°С, концентрировали в вакууме, растворяли в небольшом объеме смеси хлороформ/метанол (95:5) и фильтровали через тонкий слой силикагеля. После удаления растворителя в вакууме получали смесь продуктов 1.1 и 1.2. Полученную смесь разделяли хроматографией на силикагеле (хлороформ/метанол 95: 5) на индивидуальные продукты 1.1.1 и 1.2.2.

Диэтил 9,10,11,11а-тетрагидро-8Н-пиридо [2,1-а] [2,7] нафтаридин-5,6-дикарбоксилат 1.1.2{7}: выход 34%; желтые гигроскопичные кристаллы, т. пл. 132-135°С, R_f 0.5; ¹H ЯМР (CDCl₃) 8.30 (d, J=5.5 Hz, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.87 (d, J=5.5 Hz, 1H), 4.62 (dd, J=11.6. 2.3 Hz, 1H), 4.32-4.45 (m, 2H), 4.20-4.31 (m, 2H), 3.57 (d, J=12.0 Hz, 1H), 3.02-3.16 (m, 1H), 2.13-2.29 (m, 1H), 1.92-2.06 (m, 1H), 1.66-1.92 (m, 3H), 1.56 (d, J=11.6, 1H); ¹³C ЯМР (CDCl₃) 165.7, 164.3, 151.9, 149.0. 146.2, 136.6, 123.5, 117.7, 93.1, 62.2, 60.6, 60.2, 52.1, 34.9, 26.7, 24.7,14.3, 13.8; LC-MS m/z 331 (M⁺+1), r.t. 3.72.

Этил-9,10,11,11а-тетрагидро-8Н-пиридо [2,1-а][2,7] нафтаридин -5-карбоксилат 1.2.2{1}: выход 10%, желтые кристаллы, т.пл. 216-218°С (с разложением), R_f 0.4; ¹H ЯМР (СDСl₃) 8.45 (d, J=6.7 Hz, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.03 (d, J=6.6 Hz, 1H), 7.82 (s, 1H), 5.23 (dd, J=11.7, 2.6 Hz, 1H), 4.21 (q, J=7.2 Hz, 2H), 3.57-3.67 (m, 1H), 3.38-3.49 (m, 1H), 2.10-2.25 (m, 1H), 1.70-2.05 (m, 5H), 1.30 (t, J=7.2 Hz, 3H); ¹³С ЯМР (СDСl₃) 165.4, 154.1, 147.7, 138.8, 136.8, 126.3, 117.4, 92.6, 60.6, 59.0, 56.8, 37.5, 28.3, 24.5, 15.1; LC-MS m/z 259 (M⁺ +1), r.t. 3.08. Структура соединения 1.2.2 {1} была подтверждена также данными NOESY эксперимента. Так, в спектре наблюдается отчетливый кросс-пик между сигналами протона N- = в положении 6 (7.82 м.д.) и сигналом экваториального протона CH₂-CH₂-N группы в положении 8 (3.59 м.д.)

Пример 3. Способ получения замещенных 1,2-дигидро[2,7]-нафтаридинов 1.1.2 и 1.3.2. Нагревали 1 ммоль диэфира 1.1.2 {2} в 5 мл 40% водного метиламина или концентрированного водного аммиака в микроволновом реакторе 30 мин при 150°С. Реакционную смесь концентрировали в вакууме и хроматографировали на силикагеле (хлорформ/метанол 95: 5). Получали соединения 1.1.2 и 1.3.2:

5-Этоксикарбонил-9,10,11,11а-тетрадигидро-8Н-пиридо[2,1-а][2,7]нафтиридин-6-карбоновая кислота 1.1.2 {2}: выход 85%, коричневое масло, ¹Н ЯМР (DMSO-d₆) 8.40 (br.s 1H), 8.12 (d, J=5.5 Hz, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.73 (d, J=5.5 Hz, 1H), 5.01 (d, J=11.4, 1H), 4.02-4.10 (m, 2H), 3.75 (d, J=12.0 Hz, 1H), 3.10-3.25 (m, 1H), 2.03-2.20 (m, 1H), 1.60-1.90 (m, 4H), 1.52 (d, J=11.6, 1H), 1.20 (t, J=7.2 Hz, 3H); ¹³ С ЯМР (DMSO-d₆) 172.2, 166.2, 161.8, 147.9, 146.1, 139.4, 123.6, 116.4, 87.2, 59.0, 58.8, 52.0, 35.3, 26.9, 24.8, 14,5; LC-MS m/z 303 (M ⁺+1), r.t. 2.28.

9,10,11,11а-Тетрагидро-8Н-пиридо[2,1-а][2,7]нафтаридин-5-карбоновой кислоты метиламид 1.3.2{1}: выход 10%, коричневое масло, LC-MS m/z 245 (M⁺+1).

Пример 7. Биологическая активность 1,2-дигидро[2,7] нафтаридинов. Фокусированную библиотеку составляли из 80 соединений, в том числе 6 соединений, представляющих различные 1,2-дигидро[2,7]нафтаридины общей формулы 1, подвергли испытанию на способность активировать никотиновый рецептор на клетках рабдомиосаркомы и феохромоцитомы. В качестве стандарта использовали грамицидин. Клетки рабдомиосаркомы выращивались в среде Дулбеко при 37°С во влажной атмосфере с содержанием СО₂ 5% до примерно 100% конфлуентности в лунках 96 луночных тарелок. Среда удалялась из лунок и замещалась свежей средой (250 L), содержащей смесь красителей в соотношении 1:1 в конечной концентрации 1 мкМ по каждому красителю. Клетки инкубировались в течение 30 минут для того, чтобы концентрации красителей уравновесились между внутри- и внеклеточной средами в соответствии с клеточным трансмембранным потенциалом. После 30-минутного уравновешивания красителей производилось первое измерение флуоресценции клеток в состоянии покоя (I₀), после чего изучаемые соединения общей формулы (1) или (2), растворенные в диметилсульфоксиде, добавлялись в каждую лунку. Концентрация доводилась до 30 M и измерялась флуоресценция при нулевом времени (⁰I _i). Клетки выдерживались 10 минут вместе с соединениями общей формулы (1) или (2), после чего производилось повторное измерение флуоресценции (¹⁰I_i). Прирост интенсивности (I _i=¹⁰I_i-⁰I_i ) характеризовал деполяризацию клеток, которая выражалась в процентах относительно деполяризации, вызванной грамицидином Д (I _ГрД=¹⁰I_ГрД-⁰I _ГрД): I _i/I _ГрД · 100%. Эффект каждого соединения измерялся в четырех повторах и достоверность эффекта оценивалась по коэффициенту Стьюдента с доверительным интервалом 95%. В таблице представлены результаты скрининга билологической активности на никотиновый рецептор.

Как видно из представленных в таблице результатов, соединения 1.1.2 {1}, 1.1.1 {2}, 1.1.1 {1} и 1.1.1 {2} повышают интенсивность флуоресценции более чем на 5%, что убедительно свидетельствует об активации ими никотинового рецептора.

Пример 8. Пример, иллюстрирующий приготовление таблеток, содержащих 50 мг активного ингредиента. Смешивают 800 мг крахмала, 800 мг измельченной лактозы, 200 мг талька и 500 мг диэтил 2-(2-диметиламиноэтил)-1-метил-1,2-дигидро[2,7]нафтиридин-3,4-дикарбоксилата 1.1.1 {2} и спрессовывают в брусок. Полученный брусок измельчают в гранулы и просеивают через сита, собирая гранулы размером 14-16 меш. Полученные гранулы таблетируют в таблетки подходящей формы весом 280 мг каждая. Согласно изобретению аналогичным образом получают фармацевтические композиции в виде таблеток, содержащих в качестве активного ингредиента другие соединения общей формулы 1.2.

Пример 9. Капсулы, содержащие 200 мг диэтил 2-(2-диметиламиноэтил)-1-метил-1,2-дигидро[2,7]нафтиридин-3,4-дикарбоксилата 1.1.1 {2} согласно изобретению могут быть получены тщательным смешиванием соединения 1.1.1 {2} с порошком лактозы в соотношении 2:1. Полученную порошкоообразную смесь упаковывают по 300 мг в желатиновые капсулы подходящего размера.

Пример 10. Инъекционные композиции для внутримышечных, внутрибрюшинных или подкожных инъекций могут быть приготовлены смешиванием 500 мг активного ингредиента с подходящей растворимостью, например, гидрохлорида соединения 1.1.1 {2} с 300 мг хлорбутанола, 2 мл пропиленгликоля и 100 мл инъекционной воды. Полученный раствор фильтруют и помещают по 1 мл в ампулы, которые запаивают и стерилизуют в автоклаве.

Формула изобретения

1. Замещенные 1,2-дигидро[2,7]нафтиридины общей формулы 1 в виде отдельных стереоизомеров, их рацемических или аддитивных смесей или их фармацевтически приемлемые соли, N-оксиды или гидраты:

в которой R¹ и R² независимо друг от друга представляют атом водорода, инертный заместитель, необязательно замещенный С₁-С₅алкил или R¹ и R² вместе представляют полиметиленовую цепочку, включающую 2-5 необязательно замещенных метиленовых групп;

R³ и R⁴ независимо друг от друга представляют атом водорода, инертный заместитель, необязательно замещенный С₁-С₅алкил, необязательно замещенную C _1-6алкилоксикарбонильную группу, необязательно замещенную карбамоильную группу;

R⁵, находящийся при атомах углерода пиридинового фрагмента, представляет атом водорода, инертный заместитель, необязательно замещенный гидроксиС _1-5алкил, необязательно замещенную аминогруппу, необязательно замещенную гидроксильную группу, необязательно замещенную C _1-6алкилоксикарбонильную группу, необязательно замещенную карбамоильную группу или R⁵, находящийся при атоме азота пиридинового фрагмента, образует пиридиниевую соль с фармакологически приемлемым анионом и представляет инертный заместитель, исключая метиловый эфир 1-метил-1,2-дигидро[2,7]нафтиридин-4-карбоновой кислоты, 1-метил-1,2-дигидро[2,7]нафтиридин-4-карбоновой кислоты 4-метоксикарбонил-7-метил-2,4а,5,6,7,7а-гексагидро-1Н[2]пириндин-6-иловый эфир и 1-метил-1,2-дигидро[2,7]нафтиридин-4-карбоновой кислоты 4-метоксикарбонил-5Н-7-метил-6,7-дигидропириндин-6-иловый эфир.

2. Соединения по п.1 представляющие замещенные 1,2-дигидро[2,7]нафтиридин-3,4-дикарбоновые кислоты, их эфиры или их амиды общей формулы 1.1 в виде отдельных стереоизомеров, их рацемических или аддитивных смесей или их фармацевтически приемлемые соли, N-оксиды или гидраты

в которой R¹, R² и R⁵ имеют вышеуказанные значения;

R⁶ и R⁷ независимо друг от друга представляет необязательно замещенную гидроксильную группу или необязательно замещенную аминогруппу.

3. Соединения по п.2, представляющие замещенные 1,2-дигидро[2,7]-нафтиридин-3,4-дикарбоновые кислоты, их эфиры или их амиды общей формулы 1.1.1 в виде отдельных стереоизомеров, их рацемических или аддитивных смесей или их фармацевтически приемлемые соли, N-оксиды или гидраты

в которой R¹, R⁵, R⁶ , R⁷ имеют вышеуказанные значения;

R⁸ представляет необязательно замещенную гидроксильную группу, необязательно замещенную аминогруппу, карбоксильную группу, необязательно замещенную карбоксиалкильную группу или необязательно замещенную карбамидную группу;

m = 1 - 4.

4. Соединения по п.2, представляющие замещенные 1-метил-1,2-дигидро[2,7]нафтиридин-3,4-дикарбоновые кислоты, их эфиры или их амиды общей формулы 1.1.2 в виде отдельных стереоизомеров, их рацемических или аддитивных смесей или их фармацевтически приемлемые соли, N-оксиды или гидраты

в которой R⁶, R⁷ имеют вышеуказанные значения;

n = 1 - 3.

5. Соединения по п.1, представляющие замещенные 1,2-дигидро[2,7]нафтиридин-4-карбоновые кислоты, их эфиры или их амиды общей формулы 1.2 в виде отдельных стереоизомеров, их рацемических или аддитивных смесей или их фармацевтически приемлемые соли, N-оксиды или гидраты

в которой R¹, R², R⁵ и R⁷ имеют вышеуказанные значения.

6. Соединения по п.5 представляющие замещенные 1,2-дигидро[2,7]-нафтиридин-4-карбоновые кислоты, их эфиры или их амиды общей формулы 1.2.1 в виде отдельных стереоизомеров, их рацемических или аддитивных смесей, или их фармацевтически приемлемые соли, N-оксиды или гидраты

в которой R⁵, R⁶, R⁸ и m имеют вышеуказанные значения.

7. Соединения по п.5, представляющие замещенные 1,2-дигидро[2,7]-нафтиридин-4-карбоновые кислоты, их эфиры или их амиды общей формулы 1.2.2 в виде отдельных стереоизомеров, их рацемических или аддитивных смесей или их фармацевтически приемлемые соли, N-оксиды или гидраты

в которой R⁷ и n имеют вышеуказанные значения.

8. Соединения по п.1, представляющие замещенные 1,2-дигидро[2,7]нафтиридин-3-карбоновые кислоты, их эфиры или их амиды общей формулы 1.3 в виде отдельных стереоизомеров, их рацемических или аддитивных смесей или их фармацевтически приемлемые соли, N-оксиды или гидраты

в которой R¹, R², R⁵ и R⁶ имеют вышеуказанные значения.

9. Соединения по п.8, представляющие замещенные 1,2-дигидро[2,7]-нафтиридин-3-карбоновые кислоты, их эфиры или их амиды общей формулы 1.3.1 в виде отдельных стереоизомеров, их рацемических или аддитивны