Серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические препараты на их основе

Серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические препараты на их основе

Реферат

Область изобретения

Настоящее изобретение относится к новым соединениям и их фармацевтически приемлемым солям, которые ингибируют основные карбоксипептидазы, более конкретно карбоксипептидазу U и, благодаря этому, могут быть использованы в предупреждении и лечении заболеваний, при которых ингибирование карбоксипептидазы U является полезным. В других аспектах изобретение относится к соединениям по изобретению для применения в терапии; к способам получения таких новых соединений; к фармацевтическим композициям, содержащим по меньшей мере одно соединение по изобретению или его фармацевтически приемлемую соль в качестве активного ингредиента; и к применению активных соединений в изготовлении лекарств для медицинского применения, указанного выше.

Предпосылки изобретения

Фибринолиз является результатом ряда ферментативных реакций, приводящих к расщеплению фибрина плазмином. Активация плазминогена является центральным процессом в фибринолизе. Расщепление плазминогена с получением плазмина осуществляют активаторы плазминогена - активатор плазминогена тканевого типа (t-PA) или активатор плазминогена урокиназного типа (u-РА). В ходе начального расщепления фибрина плазмином образуются карбоксиконцевые остатки лизина, которые служат в качестве высокоаффинных сайтов связывания плазминогена. Так как плазминоген, связанный с фибрином, активируется в плазмин намного легче, чем свободный плазминоген, этот механизм обеспечивает регулирование фибринолиза по типу положительной обратной связи.

Одним из эндогенных ингибиторов фибринолиза является карбоксипептидаза U (CPU). CPU также известна как плазменная карбоксипептидаза В, активный ингибитор тромбин-активируемого фибринолиза (TAFIa), карбоксипептидаза R и индуцируемая карбоксипептидазная активность. CPU образуется во время коагуляции и фибринолиза из своего предшественника проCPU под действием протеолитических ферментов, например тромбина, тромбин-тромбомодулинового комплекса или плазмина. CPU расщепляет основные аминокислоты на карбоксильном конце фибриновых фрагментов. Потеря карбокси-концевых лизинов и, в результате этого, лизиновых сайтов связывания плазминогена затем способствует ингибированию фибринолиза.

Ожидается, что ингибирование потери лизиновых сайтов связывания плазминогена и, в результате этого, увеличение скорости образования плазмина, эффективные ингибиторы карбоксипептидазы U будут облегчать фибринолиз.

2-Меркаптометил-3-гуанидиноэтилтиопропионовая кислота известна как ингибитор карбоксипептидазы N. Недавно было показано, что это соединение ингибирует CPU [Hendriks, D. et al., Biochimica et Biophysica Acta, 1034 (1990) 86-92].

Гуанидиноэтилмеркаптоянтарная кислота известна как ингибитор карбоксипептидазы N. Недавно было показано, что это соединение ингибирует CPU [Eaton, D.L. et al., The Journal of Biological Chemistry, 266 (1991) 21833-21838].

Описание изобретения

Неожиданно было обнаружено, что соединения формулы I особенно эффективны в качестве ингибиторов карбоксипептидазы U и, в связи с этим, пригодны в качестве лекарств для лечения или профилактики состояний, при которых ингибирование карбоксипептидазы U является полезным.

Так, в одном аспекте данное изобретение относится к соединениям общей формулы I,

или их фармацевтически приемлемым солям или сольватам, или сольватам таких солей, где

R₁ представляет собой

C₁-С₆алкил, замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

циклоалкил, замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

гетероциклил, содержащий по меньшей мере один атом азота;

гетероциклил, содержащий по меньшей мере один гетероатом, выбранный из S или О, и замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

или арил, замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

R₂ представляет собой Н, ацил, ациламино, алкил, алкилкарбамоил, алкилтио, алкокси, ароил, ароиламино, арилокси, арилтио, амидино, амино, арил, карбамоил, карбокси, циано, циклоалкил, формил, гуанидино, галоген, гетероциклил, гидрокси, оксо, нитро, тиол, группу Z₂N-CO-O-, ZO-CO-NZ- или Z₂N-CO-NZ-;

R₃ представляет собой COOR₅, SO(OR₅), SO₃R₅, Р=O(ОR₅)₂, B(OR₅)₂, P=OR₅(OR₅), или тетразол, или любой изостер карбоновой кислоты;

R₄ представляет собой SH, S-CO-C₁-С₆алкил или S-СО-арил;

R₅ представляет собой Н, С₁-С₆алкил или арил;

R₆ представляет собой Н или С₁-С₆алкил;

Х представляет собой О, S, SO, SO₂, C(Z)₂, N(Z), NR₆SO₂, SO₂NR₆, NR₆CO или CONR₆;

Y представляет собой C(Z)₂;

Z независимо представляет собой Н, С₁-С₆алкил, арил, циклоалкил или гетероциклил.

Предпочтительными соединениями по настоящему изобретению являются соединения формулы I или их фармацевтически приемлемые соли или сольваты, или сольваты таких солей, где

R₁ представляет собой

циклоалкил, замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

гетероциклил, содержащий по меньшей мере один атом азота;

гетероциклил, содержащий по меньшей мере один гетероатом, выбранный из S или О, и замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

или арил, замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

R₂ представляет собой Н, ацил, ациламино, алкил, алкилкарбамоил, алкилтио, алкокси, ароил, ароиламино, арилокси, арилтио, амидино, амино, арил, карбамоил, карбокси, циано, циклоалкил, формил, гуанидино, галоген, гетероциклил, гидрокси, оксо, нитро, тиол, группу Z₂N-CO-O-, ZO-CO-NZ- или Z₂N-CO-NZ-;

R₃ представляет собой COOR₅;

R₄ представляет собой SH, S-CO-C₁-С₆алкил или S-CO-арил;

R₅ представляет собой Н, C₁-С₆алкил или арил;

R₆ представляет собой Н или C₁-С₆алкил;

Х представляет собой О, S, SO, SO₂, C(Z)₂, N(Z), NR₆SO₂, SO₂NR₆ или CONR₆;

Y представляет собой C(Z)₂;

Z независимо представляет собой Н, С₁-С₆алкил, арил, циклоалкил или гетероциклил.

Более предпочтительными соединениями по настоящему изобретению являются соединения формулы I или их фармацевтически приемлемые соли или сольваты, или сольваты таких солей, где

R₁ представляет собой

циклоалкил, замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

гетероциклил, содержащий по меньшей мере один атом азота;

гетероциклил, содержащий по меньшей мере один гетероатом, выбранный из S или О, и замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

R₂ представляет собой Н, C₁-С₃алкил, амино, галоген или гидрокси;

R₃ представляет собой COOR₅;

R₄ представляет собой SH, S-CO-C₁-С₆алкил или S-CO-арил;

R₅ представляет собой Н, C₁-С₆алкил или арил;

Х представляет собой C(Z)₂;

Y представляет собой C(Z)₂;

Z независимо представляет собой Н или С₁-С₆алкил.

Еще более предпочтительными соединениями согласно настоящему изобретению являются соединения формулы I или их фармацевтически приемлемые соли или сольваты, или сольваты таких солей, где

R₁ представляет собой

циклоалкил, замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

гетероциклил, содержащий по меньшей мере один атом азота;

R₂ представляет собой Н, F или С₁алкил;

R₃ представляет собой COOR₅;

R₄ представляет собой SH, S-CO-C₁-С₆алкил или S-СО-арил;

R₅ представляет собой Н, C₁-С₆алкил или арил;

Х представляет собой C(Z)₂;

Y представляет собой C(Z)₂;

Z независимо представляет собой Н или С₁-С₆алкил.

Наиболее предпочтительными соединениями согласно настоящему изобретению являются соединения формулы I или их фармацевтически приемлемые соли или сольваты, или сольваты таких солей, где

R₁ представляет собой циклопентил, пиридил, пиримидинил, пиперидинил или тиазолил;

R₂ представляет собой Н, F или С₁алкил;

R₃ представляет собой COOR₅;

R₄ представляет собой SH;

R₅ представляет собой Н;

Х представляет собой CHZ;

Y представляет собой CHZ;

Z независимо представляет собой Н или С₁-С₆алкил.

В описании изобретения и прилагаемой формуле использованы следующие определения терминов.

Термин "основная группа" означает основную группу, причем сопряженная кислота указанной основной группы имеет рКа от приблизительно -5 до приблизительно 25, предпочтительно от 1 до 15.

Термин "изостер карбоновой кислоты" означает кислотную группу, имеющую рКа от приблизительно -5 до приблизительно 25, предпочтительно от 1 до 15.

Термин "С₁-С₆алкил" означает прямую или разветвленную, насыщенную или ненасыщенную, замещенную или незамещенную алкильную группу, имеющую от 1 до 6 углеродных атомов в цепи, причем эта алкильная группа может быть возможно прервана одним или более чем одним гетероатомом, выбранным из О, N или S. Примеры указанного алкила включают в себя, без ограничений, метил, этил, этенил, этинил, н-пропил, изопропил, пропенил, изопропенил, пропинил, н-бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, бутенил, изобутенил, бутинил и пентил и гексил с прямой или разветвленной цепью.

Термин "C₁-С₃алкил" означает прямую или разветвленную, насыщенную или ненасыщенную, замещенную или незамещенную алкильную группу, имеющую от 1 до 3 углеродных атомов в цепи, причем алкильная группа может быть возможно прервана одним или более чем одним гетероатомом, выбранным из О, N или S. Примеры указанного алкила включают в себя, без ограничений, метил, этил, этенил, этинил, н-пропил, изопропил, пропенил, изопропенил, пропинил.

Термин "С₁алкил" означает замещенную или незамещенную алкильную группу, имеющую 1 углеродный атом. Пример указанного алкила включает в себя, без ограничений, метил.

Термин "С₁-С₆алкокси" означает алкил-O-группу, где С₁-С₆алкил такой, как определено выше.

Термин "С₁-С₃алкокси" означает алкил-O-группу, где С₁-С₃алкил такой, как определено выше.

Термин "гетероциклил" означает замещенную или незамещенную, 4-10-членную моноциклическую или многоциклическую кольцевую систему, в которой один или более чем один атом в кольце или в кольцах является элементом, отличным от углерода, например азотом, кислородом или серой, в частности 4-, 5- или 6-членные ароматические или алифатические гетероциклические группы, и включает, без ограничений, азетидиновую, фурановую, тиофеновую, пиррольную, пирролиновую, пирролидиновую, диоксолановую, оксатиолановую, оксазолановую, оксазольную, тиазольную, имидазольную, имидазолиновую, имидазолидиновую, пиразольную, пиразолиновую, пиразолидиновую, изоксазольную, изотиазольную, оксадиазольную, фуразановую, триазольную, тиадиазольную, пирановую, пиридиновую, пиперидиновую, диоксановую, морфолиновую, дитиановую, оксатиановую, тиоморфолиновую, пиридазиновую, пиримидиновую, пиразиновую, пиперазиновую, триазиновую, тиадиазиновую, дитиазиновую, азаиндольную, азаиндолиновую, индольную, индолиновую, нафтиридиновую группы и, что очевидно, включают все изомеры вышеназванных групп. Очевидно, что например термин "азетидинил" включает в себя 2- и 3-изомеры, а термины "пиридил" и "пиперидинил" включают в себя 2-, 3- и 4-изомеры.

Термин "циклоалкил" означает насыщенное или ненасыщенное, замещенное или незамещенное, неароматическое кольцо, состоящее из 3, 4, 5, 6 или 7 углеродных атомов, и включает в себя, без ограничений, группы циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, циклобутенил, циклопентенил, циклогексенил, циклогептенил, циклопентадиенил, циклогексадиенил или циклогептадиенил.

Термин "галоген" включает в себя группы фторо, хлоро, бромо и йодо.

Термин "арил" означает замещенный или незамещенный С₆-С₁₄ ароматический углеводород и включает в себя, без ограничений, фенил, нафтил, инденил, антраценил, фенантренил и флуоренил.

Термин "арилокси" означает арил-O-группу, где арил такой, как определено выше.

Термин "ацил" означает алкил-СО-группу, где алкил такой, как определено выше.

Термин "ароил" означает арил-СО-группу, где арил такой, как определено выше.

Термин "алкилтио" означает алкил-S-группу, где алкил такой, как определено выше.

Термин "арилтио" означает арил-S-группу, где арил такой, как определено выше.

Термин "ароиламино" означает ароил-N(Z)-группу, где ароил и Z такие, как определено выше.

Термин "ациламино" означает ацил-N(Z)-группу, где ацил и Z такие, как определено выше.

Термин "карбамоил" означает H₂N-CO-rpynny.

Термин "алкилкарбамоил" означает Z₂N-CO-rpynny, где Z такой, как определено выше.

Термин "замещенный" означает группу "С₁алкил", "С₁-С₃алкил", "C₁-С₆алкил", "циклоалкил", "гетероциклил" или "арил", как определено выше, которая замещена одной или более чем одной ацильной, ациламино, алкильной, алкилкарбамоильной, алкилтио, алкокси, ароильной, ароиламино, арилокси, арилтио, амидино, амино, арильной, карбамоильной, карбокси, циано, циклоалкильной, формильной, гуанидино, галогено, гетероциклильной, гидрокси, оксо, нитро, тиольной, тио, Z₂N-CO-O-, ZO-CO-NZ- или Z₂N-CO-NZ-группой.

Кроме того, соединения формулы I, где R₄ представляет собой меркапто, могут находиться в форме димера, соединенного через -S-S-связь, который также включен в данное изобретение.

Как чистые энантиомеры, так и рацемические смеси, и неравные смеси двух энантиомеров входят в объем настоящего изобретения. Очевидно, что все возможные диастереомерные формы входят в объем настоящего изобретения. Также включены в данное изобретение производные соединений формулы I с биологической функцией соединений формулы I, такие как пролекарства.

В зависимости от условий способа получения соединения формулы I получают либо в нейтральной, либо в солевой форме или в виде сольвата, например гидрата, и все они входят в объем настоящего изобретения.

Получение

Согласно настоящему изобретению предложены также способы А-С получения соединений общей формулы I.

Способ А

Способ А получения соединений общей формулы I, где R₁, R₂, R₃, R₄ и Y такие, как определено выше, R₄ представляет собой Н, и Х представляет собой C(Z)₂, включает в себя следующие стадии:

а) соединения общей формулы II,

где R₁ такой, как определено для формулы I, a X представляет собой C(Z)₂, которые либо имеются в продаже, либо могут быть получены с использованием известных методик, могут быть превращены в соединение общей формулы III,

где L является подходящей уходящей группой, такой как хлоро, бромо, иодо, трифлат или тозил, в стандартных условиях с использованием подходящего реагента, такого как РРh₃/СВr₄, TosCl/пиридин или (СF₃SO₂)₂O/ТЕА;

б) соединения общей формулы III затем могут быть подвергнуты взаимодействию с соединениями общей формулы IV,

где R₂ и R₃ такие, как определено для формулы I, которые либо имеются в продаже, либо могут быть получены с использованием известных методик, в присутствии подходящего основания, такого как К₂СО₃ или NaH, в стандартных условиях до образования соединений общей формулы V

в) соединения общей формулы V, где R₁ и R₃ такие, как определено для формулы I, Х представляет собой C(Z)₂, и R₂ представляет собой Н, затем могут быть превращены в соединения общей формулы VI

путем обработки формальдегидом в присутствии подходящего основания, такого как Et₂NH, в стандартных условиях;

г) соединения общей формулы VI также могут быть получены путем обработки соединений общей формулы VII,

где R₃ и R₅ такие, как определено для формулы I, алкилирующим агентом общей формулы III в присутствии подходящего основания, такого как LDA или NaH, в стандартных условиях до образования соединений общей формулы VIII

д) соединения общей формулы VIII затем могут быть подвергнуты взаимодействию с соответствующим альдегидом или кетоном OC(Z)₂ в присутствии подходящего основания, такого как KOtBu, LDA или NaH, в стандартных условиях с получением соединения общей формулы VI

е) соединения общей формулы VI далее могут быть подвергнуты взаимодействию с соединениями общей формулы IX,

где R₅ является подходящей защитной группой, такой как Ac, Bz, РМВ или Вn, одни или в присутствии подходящего основания, такого как NaOMe, NaH или триэтиламин, или, альтернативно, в присутствии свободно-радикального инициатора, такого как AIBN, в стандартных условиях с получением соединений общей формулы I, где R₁, R₂, R₄ и Y такие, как определено для формулы I, a R₂ представляет собой Н, и Х является C(Z)₂.

Способ Б

Способ Б получения соединений общей формулы I, где R₁, R₂, R₃ и R₄ такие, как определено в формуле I, Y представляет собой CH₂, a X представляет собой О, S, SO, SO₂, C(Z)₂ или N(Z), включает в себя следующие стадии:

а) соединение общей формулы X,

где R₁ такой, как определено для формулы I, а Х представляет собой О, S или N(Z), подвергают взаимодействию с алкилирующим агентом общей формулы XI,

где R₂ и R₃ такие, как определено для формулы I, a L является подходящей уходящей группой, такой как хлоро, бромо, иодо, трифлатная или тозилатная группа, в стандартных условиях с использованием подходящих реагентов, таких как NaH, Аg₂СО₃ или Bu₄NHSO₄/NaOH, до образования соединений общей формулы XII

б) соединения общей формулы XII затем могут быть подвергнуты взаимодействию с диоксидом углерода в присутствии подходящего основания, такого как LDA или KHMDS, в стандартных условиях до образования соединения общей формулы XIII

в) соединения общей формулы XIII затем могут быть подвергнуты взаимодействию с алкилхлорформиатом, таким как СlCООМе, в присутствии основания, такого как триэтиламин, и после этого образовавшийся смешанный ангидрид может быть восстановлен подходящим восстанавливающим агентом, таким как NaBH₄, в стандартных условиях с образованием соединения общей формулы XIV

г) соединения общей формулы XIV затем могут быть подвергнуты взаимодействию с соединением общей формулы IX

где R₅ является подходящей защитной группой, такой как Ас или Bz, в присутствии подходящего реагента, такого как PPh₃/DIAD, в стандартных условиях с получением соединений общей формулы I, где R₁, R₂, R₃ и R₄ такие, как определено выше, Y является СН₂, и Х представляет собой О, S, C(Z)₂ или N(Z);

д) соединения общей формулы I, где R₁, R₂, R₃ и Y такие, как определено выше, а Х является S, затем могут быть подвергнуты взаимодействию с подходящим окисляющим реагентом, таким как МСРВА, в стандартных условиях с получением соединений общей формулы I, где R₁, R₂, R₃ и R₄ и Y такие, как определено выше, а Х является SO или SO₂.

Способ В

Способ В получения соединений общей формулы I, где R₁, R₂, R₃ и R₄ и Y такие, как определено выше, а Х представляет собой NR₆CO, CONR₆, SO₂NR₆ или NR₆SO₂, включает в себя следующие стадии:

а) соединение общей формулы XV,

где R₂, R₃ и R₆ и Y такие, как определено для формулы I, a R₅ является подходящей защитной группой, такой как Ac, Bz, PMB или Вп, подвергают взаимодействию с соединением общей формулы XVI

где R₁ такой, как определено для формулы I, a X представляет собой СООН или SO₂Cl, в присутствии подходящих связывающих агентов, таких как PyBOP/DIPEA, DCC/HOBt, EDC/TEA/DMAP или пиридин, в стандартных условиях с получением соединений общей формулы I, где R₁, R₂, R₃ и R₄ и Y такие, как определено выше, а Х является NR₆CO или NR₆SO₂;

б) соединение общей формулы XVII,

где R₂, R₃ и Y такие, как определено для формулы I, X представляет собой СООН или SO₂Cl, и R₅ является подходящей защитной группой, такой как Ас, Bz, PMB или Вn, подвергают взаимодействию с соединением общей формулы XVIII,

где R₆ такой, как определено для формулы I, в присутствии подходящих связывающих реагентов, таких как PyBOP/DIPEA, DCC/HOBt, EDC/TEA/DMAP или пиридин, в стандартных условиях с получением соединений общей формулы I, где R₁, R₂, R₃ и R₄ и Y такие, как определено выше, а Х представляет собой CONR₆ или SO₂NR₆.

Для специалистов в данной области техники очевидно, что в способах, описанных выше, функциональные группы промежуточных соединений могут нуждаться в защите подходящими защитными группами.

Функциональные группы, которые желательно защищать, включают гидрокси, амино, меркапто и карбоксила. Подходящие защитные группы для гидрокси включают триалкилсилил или диарилалкилсилил (например, трет-бутилдиметилсилил, трет-бутилдифенилсилил или триметилсилил), тетрагидропиранил и бензил. Подходящие защитные группы для амино, амидино или гуанидино включают трет-бутилоксикарбонил и бензилоксикарбонил. Подходящие защитные группы для меркапто включают в себя СО-С_1-6алкил, пара-метоксибензил и тритил. Подходящие защитные группы для карбоксила включают C_1-6алкиловый и бензиловый сложные эфиры.

Защитные группы могут быть удалены способами, которые известны специалистам в данной области техники и которые описаны ниже.

Некоторые защищенные производные соединений формулы I, которые могут быть получены до последней стадии удаления защиты с образованием соединений формулы I, являются новыми.

Использование защитных групп описано в "Protective Groups in Organic Synthesis", 2nd edition, T.W.Greene & P.G.M.Wutz, Wiley-lnterscience (1991). Защитной группой может быть также смола, такая как смола Ванга или 2-хлортритилхлоридная смола.

Для специалистов в данной области очевидно, что хотя сами по себе такие защищенные производные соединений формулы I могут и не обладать фармакологической активностью, их можно вводить парентерально или перорально, и после этого они метаболизируются в организме с образованием соединений по настоящему изобретению, которые фармакологически активны. Такие производные, следовательно, могут быть охарактеризованы как пролекарства. Все пролекарства соединений формулы I входят в объем данного изобретения.

Очевидно также, что все полиморфы, аморфные формы, ангидраты, гидраты, сольваты соединений по настоящему изобретению входят в объем данного изобретения.

Фармацевтические препараты

В еще одном аспекте данное изобретение относится к фармацевтическим композициям, содержащим по меньшей мере одно соединение по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемую соль в качестве активного ингредиента.

Для клинического применения соединения по настоящему изобретению вводят в состав фармацевтических препаратов для перорального, внутривенного, подкожного, трахейного, бронхиального, интраназального, легочного, чрескожного, буккального, ректального, парентерального или других способов введения. Фармацевтический препарат содержит соединение по настоящему изобретению в комбинации с одним или более чем одним фармацевтически приемлемым ингредиентом. Носитель может быть в форме твердого, полутвердого или жидкого разбавителя или капсулы. Такие фармацевтические препараты являются еще одним объектом изобретения. Обычно количество активных соединений составляет 0,1-95% от массы препарата.

В ходе приготовления фармацевтических препаратов, содержащих соединение по настоящему изобретению, выбранное соединение можно смешивать с твердыми, порошкообразными ингредиентами, такими как лактоза, сахароза, сорбит, маннит, крахмал, амилопектин, производные целлюлозы, желатин или другой подходящий ингредиент, а также с разрыхляющими агентами и смазывающими агентами, такими как стеарат магния, стеарат кальция, стеарилфумарат натрия и полиэтиленгликолевые воски. Данную смесь можно затем переработать в гранулы или спрессовать в таблетки.

Мягкие желатиновые капсулы могут быть приготовлены из капсул, содержащих смесь активного соединения или соединений по настоящему изобретению, растительного масла, жира или другого подходящего наполнителя для мягких желатиновых капсул. Твердые желатиновые капсулы могут содержать гранулы активного соединения. Твердые желатиновые капсулы могут также содержать активное соединение в комбинации с твердыми порошкообразными ингредиентами, такими как лактоза, сахароза, сорбит, маннит, картофельный крахмал, кукурузный крахмал, амилопектин, производные целлюлозы или желатин.

Лекарственные единицы для ректального введения могут быть приготовлены (1) в форме суппозиториев, которые содержат активное вещество, смешанное с нейтральной жировой основой; (2) в форме желатиновых ректальных капсул, которые содержат активное вещество в смеси с растительным маслом, парафиновым маслом или другим подходящим наполнителем для желатиновых ректальных капсул; (3) в форме готовой микроклизмы; или (4) в форме сухого препарата для микроклизмы, который нужно разводить в подходящем растворителе непосредственно перед введением.

Жидкие препараты могут быть приготовлены в форме сиропов или суспензий, например растворов или суспензий, содержащих активный ингредиент и остаток, состоящий, например, из сахара или сахарных спиртов и смеси этанола, воды, глицерина, пропиленгликоля и полиэтиленгликоля. Если требуется, такие жидкие препараты могут содержать красящие агенты, корригенты, консерванты, сахарин и карбоксиметилцеллюлозу или другие загустители. Жидкие препараты могут быть изготовлены также в форме сухого порошка, предназначенного для разведения в подходящем растворителе перед применением.

Растворы для парентерального введения могут быть приготовлены в виде раствора соединения по настоящему изобретению в фармацевтически приемлемом растворителе. Эти растворы могут также содержать стабилизирующие ингредиенты, консерванты и/или буферные ингредиенты. Растворы для парентерального введения могут быть приготовлены также в виде сухого препарата, предназначенного для разведения в подходящем растворителе перед применением.

Типичная суточная доза активного вещества варьируется в широких пределах и зависит от различных факторов, таких как, например, индивидуальная потребность каждого пациента, путь введения и заболевание. В общем случае, пероральные и парентеральные дозировки находятся в пределах от 0,1 до 1000 мг в сутки активного вещества.

Медицинское и фармацевтическое применение

Соединения по изобретению либо сами по себе являются ингибиторами карбоксипептидазы U, либо, в случае пролекарств, становятся ими после введения. Таким образом, ожидается, что соединения по изобретению будут полезны при тех состояниях, при которых ингибирование карбоксипептидазы U является полезным, например при лечении или профилактике тромбозов или гиперкоагуляции в крови и тканях млекопитающих, включая человека.

Известно, что гиперкоагуляция может приводить к тромбоэмболическим заболеваниям. Состояния, связанные с гиперкоагуляцией и тромбоэмболическими заболеваниями, которые могут быть упомянуты, включают резистентность к протеину С и наследственные или приобретенные дефициты антитромбина III, протеина С, протеина S и гепаринового кофактора II. Другие состояния, о которых известно, что они связаны с гиперкоагуляцией или тромбоэмболическим заболеванием, включают циркуляторный и септический шок, циркулирующие антифосфолипидные антитела, гомоцистеинемию, гепарин-индуцированную тромбоцитопению и дефекты фибринолиза. Таким образом, соединения по изобретению показаны как для терапевтического, так и/или профилактического лечения этих состояний. Соединения по изобретению также показаны для лечения состояний, при которых имеет место нежелательный избыток проCPU/CPU.

Конкретные болезненные состояния, которые могут быть упомянуты как предназначенные для терапевтического и/или профилактического лечения, включают венозный тромбоз и легочную эмболию, артериальный тромбоз (например, при инфаркте миокарда, неустойчивой стенокардии, удара вследствие тромбоза и периферического артериального тромбоза) и системную эмболию, обычно из предсердия во время артериальной фибрилляции или из левого желудочка после трансмурального инфаркта миокарда.

Кроме того, ожидается, что соединения по изобретению будут иметь применение для профилактики реокклюзии или рестеноза (то есть тромбоза) после тромболиза, чрескожной транслюминальной ангиопластики (РТА) и операций коронарного шунтирования; для предупреждения повторного тромбоза после микрохирургического вмешательства и сосудистой хирургии в целом.

Дополнительные показания включают терапевтическое и/или профилактическое лечение диссеминированной внутрисосудистой коагуляции, вызванной бактериями, множественной травмой, интоксикацией или любым другим механизмом, антикоагулянтное лечение, когда кровь находится в контакте с чужеродными поверхностями в организме, такими как сосудистые трансплантаты, сосудистые стенты, сосудистые катетеры, механические и биологические протезные клапаны или любое другое медицинское устройство, и антикоагулянтное лечение, когда кровь находится в контакте с медицинскими устройствами вне организма, такими как используемый во время сердечно-сосудистой хирургической операции аппарат "сердце-легкие" или устройства, используемые при гемодиализе.

Соединение по изобретению можно также объединять и/или совместно вводить с любым антитромботическим агентом с иным механизмом действия, таким как антитромбоцитные агенты ацетилсалициловая кислота, тиклопидин, клопидогрель, ингибиторы рецепторов тромбоксана и/или синтетазы, антагонисты рецепторов фибриногена, миметики простациклина и ингибиторы фосфодиэстеразы, и антагонисты ADP-рецептора (Р₂Т) (ADP - аденозин-5’-дифосфат), и ингибиторы тромбина.

Соединения по изобретению можно объединять и/или совместно вводить с тромболитиками, такими как активатор тканевого плазминогена (природный, рекомбинантный или модифицированный), стрептокиназа, урокиназа, проурокиназа, анизоилированный плазминоген-стрептокиназный активаторный комплекс (APSAC), активаторы плазминогена слюнной железы животных и тому подобное, при лечении тромботических заболеваний, в частности инфаркта миокарда и удара.

In vitro эксперименты

Ингибирующий эффект соединений по настоящему изобретению оценивали, используя анализ, описанный в Dirk Hendriks, Simon Scharpe and Marc van Sandre, Clinical Chemistry, 31, 1936-1939 (1985); и Wei Wang, Dirk F.Hendriks, Simon S.Scharpe, The Journal of Biological Chemistry, 269, 15937-15944 (1994).

Примеры

Общие методики экспериментов

Масс-спектры снимали на тройном квадрупольном масс-спектрометре Finnigan Mat TSQ 700, оснащенном интерфейсом электрораспыления (FAB-MS (ионизация бомбардировкой быстыми атомами-масс-спектрометрия)), и на масс-спектрометре VG Platform II, оснащенном интерфейсом электрораспыления (LC-MS (жидкостная хроматография-масс-спектрометрия)). ¹Н ЯМР и ¹³С ЯМР измерения выполняли на спектрометрах Varian UNITY plus 400, 500 и 600, работающих на ¹H частотах 400, 500 и 600 МГц соответственно. Химические сдвиги приведены в м.д. (миллионных долях) с растворителем в качестве внутреннего стандарта. Органические экстракты сушили, используя MgSO₄ или NaSO₄ в качестве осушающего агента. Хроматографическое разделение выполняли, используя Merck Silica gel 60 (0,063-0,200 мм). ВЭЖХ (высокоэффективная жидкостная хроматография) разделение выполняли на колонке HIGHCROM KR100-10C8.

Пример 1

2-Меркаптометил-3-пиперидин-4-ил-пропионовая кислота

а) 3-Пиперидин-4-ил-пропионовая кислота

Раствор 3-пиридин-4-ил-акриловой кислоты (4,20 г, 28,0 ммоль) в воде (50 мл) и аммиака (водный, 25%, 4 мл) гидрировали при 60 бар (60·10⁵ Па) в стальном автоклаве высокого давления в присутствии рутения (5% на оксиде алюминия, 439 мг). Когда давление водорода оставалось постоянным (3 суток), катализатор удаляли из реакционной смеси фильтрацией. Катализатор промывали этанолом и водой, и этанол удаляли из раствора на роторном испарителе, и водный раствор сушили сублимацией с получением 3-пиперидин-4-ил-пропионовой кислоты (4,30 г, 100%).

б) 4-(2-Карбокси-этил)-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутиловый эфир

Раствор 3-пиперидин-4-ил-пропионовой кислоты (4,79 г, 30,5 ммоль), ди-трет-бутилдикарбоната (6,98 г, 32,0 ммоль) и NaHCO₃ (2,69 г, 32,0 ммоль) в смеси THF/вода (1:1, 50 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 22 часов. Еще одну порцию ди-трет-бутилдикарбоната (2,00 г, 9,10 ммоль) добавляли вместе с каталитическим количеством DMAP, полученную смесь перемешивали в течение еще четырех суток. THF удаляли при пониженном давлении, и водную фазу экстрагировали CH₂Cl₂. Водную фазу затем подкисляли до рН 2 1 М HCl, а кислую фазу экстрагировали CH₂Cl₂. Объединенные органические экстракты промывали рассолом, сушили и концентрировали в вакууме с получением 4-(2-карбокси-этил)-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутилового эфира в виде белого твердого вещества (6,36 г, 81%).

в) 4-(3-Бензилсульфанил-2-карбокси-пропил)-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутиловый эфир

BuLi (1,6 M, 15,3 мл, 24,4 ммоль) добавляли к раствору диизопропиламина (3,43 мл, 24,4 ммоль) в THF (3 мл) при -78°С в атмосфере аргона. Через несколько минут раствор оставляли нагреваться до комнатной температуры в течение периода времени 15 минут. Полученный в результате раствор LDA медленно добавляли к раствору 4-(2-карбокси-этил)-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутилового эфира (3,07 г, 11,9 ммоль) в THF (7 мл) при -78°С. Полученный раствор перемешивали при -78°С в течение 10 минут. В это время добавляли THF (20 мл) для того, чтобы растворить анион, который затвердел. Дианион охлаждали до -78°С и добавляли бромметилтиобензиловый эфир (2,72 г, 12,5 ммоль) в виде раствора в THF (3 мл). Раствор перемешивали при -78°С в течение 30 минут, при 0°С в течение 30 минут, а затем оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь подкисляли 1 М HCl, разбавляли ЕtOАс, и органическую фазу промывали водой и сушили. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (МеОН/СНСl₃, 1:9) с получением 4-(3-бензилсульфанил-2-карбокси-пропил)-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутилового эфира в виде бледно-желтого масла (3,12 г, 66%).

г) 4-(2-Карбокси-3-меркапто-пропил)-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутиловый эфир

Металлический натрий (513 г, 22,5 ммоль) добавляли порциями в течение 5 минут к раствору 4-(3-бензилсульфанил-2-карбокси-пропил)-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутилового эфира (0,9 г, 2,29 ммоль) в THF и жидком аммиаке (50 мл) при -69°С в атмосфере аргона. После перемешивания в течение 15 минут порциями добавляли хлорид аммония (1,7 г, 31,5 ммоль). Охлаждающую баню удаляли, и аммиак выпаривали, используя струю аргона. Добавляли 0,5 М NaOH, и смесь промывали гептаном. Водную фазу подкисляли 2 М HCl и экстрагировали метиленхлоридом. Органическую фазу промывали рассолом, суши