Имидазо[1,5-а] пиримидо[5,4-d][1] бензазепиновые производные в качестве модуляторов рецептора gaba a

Имидазо[1,5-а] пиримидо[5,4-d][1] бензазепиновые производные в качестве модуляторов рецептора gaba a

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Настоящее изобретение относится к производным замещенного имидазо[1,5-а]пиримидо[5,4-d][1]бензазепина следующей формулы

в которой R¹ обозначает атом галогена или низший алкил, соответственно (низш.)алкил;

R² обозначает водородный атом, (низш.)алкил, циклоалкил, -(CH₂)_m-фенил, у которого фенильное кольцо может быть замещено (низш.)алкокси, или обозначает -(СН₂)_m-индолил;

R³ обозначает -С(O)O-(низш.)алкил, -С(O)ОН или пятичленную гетероароматическую группу, кольца которой могут быть замещены (низш.)алкилом или циклоалкилом;

n обозначает 0, 1 или 2;

m обозначает 0, 1 или 2,

и к их фармацевтически приемлемым кислотно-аддитивным солям.

Было установлено, что соединения этого класса показывают высокое сродство и селективность к сайту связывания α5 рецептора GABA А и могут быть использованы для лечения энхансера познания или расстройств познавательной способности, подобных болезни Альцгеймера.

Рецепторы для основного ингибирующего нейротрансмиттера, гамма-аминомасляной кислоты (GABA), подразделяются на два основных класса: (1) рецепторы GABA А, которые являются членами суперсемейства, контролирующими ионные каналы прохождения лиганда, и (2) рецепторы GABA В, являющиеся членами семейства рецепторов, связанных с G-белком. Комплекс рецептора GABA А, представляющий собой мембранно-связанный гетеропентамерный белковый полимер, состоит главным образом из α-, β- и γ-субъединиц.

Недавно были клонированы и секвенированы все 21 субъединица рецептора GABA А. Для конструирования рекомбинантных рецепторов GABA А, которые наилучшим образом отвечают биохимическим, электрофизиологическим и фармакологическим функциям нативных рецепторов GABA А, полученных из клеток головного мозга млекопитающих, требуются субъединицы трех типов (α, β и γ). Это является четким доказательством того, что сайт связывания бензодиазепина находится между α- и γ-субъединицами. Среди рекомбинантных рецепторов GABA А конструкция α1β2γ2 мимитирует многие эффекты подтипов классического типа-I BzR, тогда как ионные каналы α2β2γ2, α3β2γ2 и α5β2γ2 определяют как тип-II BzR.

McNamara и Skelton в Psychobiology, 21:101-108, показали, что инверсный агонист β-ССМ рецептора бензодиазепина усиливает пространственную ориентацию по водному пути Морриса. Однако β-ССМ и другие обычные инверсные агонисты рецептора бензодиазепина являются проконвульсантами или конвульсантами, что препятствует их использованию в качестве веществ, повышающих познавательные способности человека. Кроме того, эти соединения не селективны по отношению к субъединицам рецептора GABA А, тогда как частично или полностью инверсные агонисты α5 рецептора GABA А, которые почти не проявляют активности по отношению к сайтам связывания α1 и/или α2, и/или α3 рецептора GABA А, могут быть использованы для приготовления лекарственного средства, которое может быть полезно для повышения познавательной способностии, с пониженной или безконвульсивной активностью. Возможно также применение инверсных агонистов α5 GABA А, которые проявляют некоторую активность по отношению к сайтам связывания α1 и/или α2, и/или α3 рецептора GABA А, но которые функционально селективны для субъединиц, содержащих α5. Однако предпочтительны инверсные агонисты, которые селективны для субъединиц α5 GABA А и почти не проявляют активности к сайтам связывания α1, α2 и α3 рецептора GABA А.

Объектами настоящего изобретения являются соединения формулы I и их фармацевтически приемлемые соли, получение вышеупомянутых соединений, их содержащие лекарственные средства и их приготовление, а также применение вышеупомянутых соединений при лечении или профилактике заболеваний, в частности заболеваний и расстройств вышеуказанного типа, или при приготовлении соответствующих лекарственных средств.

Наиболее предпочтительным показанием в соответствии с настоящим изобретением являются расстройства познавательной способности, подобные болезни Альцгеймера.

В настоящем описании использованы общие понятия, в отношении которых, независимо от того, встречаются ли рассматриваемые понятия самостоятельно или в сочетании, применимы следующие определения.

Использованное в настоящем описании понятие "(низш.)алкил" означает прямоцепочечную или разветвленную алкильную группу, содержащую от 1 до 7 углеродных атомов, например метил, этил, пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, трет-бутил или т.п.

Предпочтительными (низш.)алкильными группами являются группы, содержащие от 1 до 4 углеродных атомов.

Понятие "(низш.)алкокси" означает группу, в которой алкильный остаток имеет указанные выше значения и который присоединен посредством кислородного атома.

Понятием "атом галогена" обозначен атом хлора, иода, фтора или брома.

Понятием "циклоалкил" обозначено циклическое алкильное кольцо, содержащее от 3 до 7 углеродных кольцевых атомов, например циклопропил, циклопентил или циклогексил.

Понятием "пятичленная гетероароматическая группа" обозначают, например, 1,2,4-оксадиазолы, фурил, пирролил, тиенил, имидазолил, пиразолил, изотиазолил, изоксазолил и т.п. Предпочтительными являются 1,2,4-оксадиазолильные и изоксазолильные группы.

Понятие "фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли" охватывает соли с неорганическими и органическими кислотами, такими как соляная кислота, азотная кислота, серная кислота, фосфорная кислота, лимонная кислота, муравьиная кислота, фумаровая кислота, малеиновая кислота, уксусная кислота, янтарная кислота, винная кислота, метансульфоновая кислота, п-толуолсульфоновая кислота и т.п.

Предпочтительными примерами являются соединения, которые обладают активностью связывания (K_i) ниже 15 нМ и селективны к субъединицам α5 GABA А и почти не проявляют активности к сайтам связывания рецептора α1, α2 и α3 GABA А.

Предпочтительные соединения формулы I представляют собой те, у которых R³ обозначает группу -С(O)O-(низш.)алкил. Предпочтительными примерами являются соединения этого ряда, у которых R¹ обозначает водородный атом, а R² имеет указанные выше значения, например следующие соединения:

этиловый эфир 9H-имидазо[1,5-а]пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-10-карбоновой кислоты,

этиловый эфир 6-пропил-9H-имидазо[1,5-a]пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-10-карбоновой кислоты,

этиловый эфир 6-(1-метилэтил)-9H-имидазо[1,5-а]пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-10-карбоновой кислоты,

этиловый эфир 6-циклопропил-9H-имидазо[1,5-а]пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-10-карбоновой кислоты,

этиловый эфир 6-[(4-метоксифенил)метил]-9H-имидазо[1,5-а]пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-10-карбоновой кислоты и

этиловый эфир 6-метил-9H-имидазо[1,5-а]пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-10-карбоновой кислоты.

Другие предпочтительные соединения формулы I представляют собой те, у которых R³ обозначает группу -С(O)O-(низш.)алкил, R² имеет указанные выше значения, а R¹ обозначает атом галогена, например следующие соединения:

этиловый эфир 3-фтор-6-метил-9H-имидазо[1,5-а]пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-10-карбоновой кислоты,

этиловый эфир 3-фтор-6-пропил-9H-имидазо[1,5-а]пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-10-карбоновой кислоты,

этиловый эфир 3-фтор-6-(1-метилэтил)-9H-имидазо[1,5-а]пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-10-карбоновой кислоты, этиловый эфир 6-циклопропил-3-фтор-9H-имидазо[1,5-а]пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-10-карбоновой кислоты и

этиловый эфир 3-бром-6-метил-9H-имидазо[1,5-а]пиримидо[5,4-d] [1]бензазепин-10-карбоновой кислоты.

Другими предпочтительными соединениями формулы I являются те, у которых R³ обозначает группу 1,2,4-оксадиазолил или изоксазолил, R² обозначает (низш.)алкил, n обозначает 0 или 1, а R¹ обозначает атом галогена, например следующие соединения:

10-(3-циклопропил- 1,2,4-оксадиазол-5-ил)-6-метил-9H-имидазо[1,5-а]пиримидо[5.4-d][1]бензазепин и 2-бром-11-метил-7-(5-метилизоксазол-3-ил)-8Н-4b,6,10,12-тетраазадибензо[е,g]азулен.

Предлагаемые соединения формулы I и их фармацевтически приемлемые соли могут быть получены по методам, в данной области техники известным, например, по способам, которые описаны ниже:

а) реакцией соединения формулы

с оксихлоридом фосфора с получением соединения формулы

в которой заместители R¹ и R² и n имеют значения, указанные выше,

и реакцией этого соединения с

с получением соединения формулы

и циклизацией этого соединения с МеСО₂Н с получением соединения формулы

в которой R¹-R³ и n имеют значения, указанные выше, или

б) реакцией соединения формулы

в которой заместители R¹ и R² и n имеют значения, указанные в п.1 формулы изобретения, с

с получением соединения формулы I, или

в) модификацией одного или нескольких заместителей R¹-R³ в рамках приведенных выше определений и, если необходимо, превращением полученных соединений в фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли.

Солеобразование осуществляют при комнатной температуре в соответствии с методами, которые известны и которые знакомы любому специалисту в данной области техники. Возможны не только соли с неорганическими кислотами, но также соли с органическими кислотами. Примерами таких солей являются гидрохлориды, гидробромиды, сульфаты, нитраты, цитраты, ацетаты, малеаты, сукцинаты, метансульфонаты, п-толуолсульфонаты и т.п.

Способ получения соединений формулы I и/или их промежуточных продуктов более подробно представлен на следующих схемах 1, 1a, 2, 3, 4, 5 и 6. Исходные материалы формул IV, VI, XVI, XX и XXVII являются известными соединениями или могут быть получены в соответствии с методами, известными в данной области техники.

Схема 1

Заместители, приведенные на схеме 1, описаны выше.

Схема 1а

Получение соединений формулы I в соответствии со стадией 7 на схеме 1

Заместители, приведенные на схеме 1а, описаны выше.

Оксихлорид фосфора можно заменить следующими эквивалентными соединениями:

в соответствии со следующими ссылками:

J.Heterocycl. Chem., 1978, 15, 577-58

J.Org. Chem., 1976, 41, 2724-2727

J.Org. Chem., 1976, 41, 2720-2724 или

Synthesis, 1987, 162.

В соответствии со схемами 1 и 1a соединение формулы I может быть получено следующим путем. Исходя из соответствующим образом замещенной антраниловой кислоты (VI), в стандартных условиях получают эфир (VII). В результате обработки этого продукта соответствующим основанием и этилсукцинилхлоридом получают продукт (VIII), с использованием которого затем проводят реакцию внутримолекулярной циклизации Дикмана с получением бета-кетоэфирных продуктов (IX). Далее эти последние декарбэтоксилируют в кислых или основных условиях с получением соответствующим образом замещенных бензазепиндионов (X). В результате обработки этих продуктов диметилформамиддиметоксиацеталем образуются енаминоновые продукты (XI), которые затем последовательно превращают в 5,7-дигидро-6Н-пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-6-оны (II) обработкой соответствующим образом замещенными амидинами (иногда в виде солей) в присутствии метоксида натрия. Далее полученные соединения растворяют в оксихлориде фосфора и раствор нагревают, а затем выпаривают.В дальнейшем раствор этого продукта вводят в холодный раствор либо 1) этилизоцианоацетата и трет-бутоксида калия, либо 2) диизопропиламида лития и эфира (Е)-(диметиламинометиленамино)уксусной кислоты и осуществляют дополнительную стадию циклизации с добавлением уксусной кислоты с последующим нагреванием. Конечные продукты формулы I очищают обычным путем.

Схема 2

Альтернативный метод получения промежуточных продуктов формулы VII

Этот способ также описан в J.Heterocycl. Chem., 1965, 2, 459.

Схема 3

Заместители, приведенные на схеме 3, описаны выше.

Смесь α-тетралона формулы XVI, гидроксиламина, ацетата натрия и воды/этанола обрабатывают кипячением с обратным холодильником в течение примерно 20 мин и затем охлаждают до 0°С.Полученный продукт вводят в раствор полифосфорной кислоты при примерно 120°С и нагревают. Далее лактам растворяют в BuOH и воде, а затем добавляют перманганат калия, после чего гексагидрат нитрата магния. Эту реакцию проводят при комнатной температуре в течение примерно 48 ч. После этого осуществлением стадий 5, 6 и 7 на схеме 1 получают соединение формулы 1а.

Схема 4

Заместители, приведенные на схеме 4, описаны выше. Получение этих промежуточных продуктов более подробно описано в рабочих примерах.

Схема 5

В соответствии со схемой 5 получают соединение формулы IVb, которое используют для получения соединений формулы I, в которой R³ обозначает изоксазольную группу. Эта реакция представлена на схеме 6.

В соответствии со схемой 5 более подробно описаны следующие реакционные стадии.

Стадия 1: этиловый эфир 5-метилизоксазол-3-карбоновой кислоты

В раствор этил-2,4-диоксовалерата в этаноле вводят гидроксиламингидрохлорид и бикарбонат натрия. Далее реакционную смесь кипятят с обратным холодильником в течение 1 ч. После охлаждения смесь выпаривают, в результате чего остается прозрачная жидкость, которую дистиллируют с получением указанного в заглавии соединения.

Стадия 2: (5-метилизоксазол-3-ил)метанол

В раствор этилового эфира 5-метилизоксазол-3-карбоновой кислоты в этаноле при 0°С в аргоновой атмосфере в течение 30 мин порциями добавляют NaBH₄. Реакционной смеси дают нагреться до КТ. По прошествии 3 ч реакционную смесь разбавляют HCl, а затем, после охлаждения до комнатной температуры, смесь промывают диэтиловым эфиром, объединенные экстракты сушат и выпаривают.

Стадия 3: 3-бромметил-5-метилизоксазол

В раствор PBr₃ и пиридина в толуоле при -10°С вводят раствор гидроксиметил-3-метил-5-изоксазола в пиридине. Далее реакционную смесь перемешивают при -10°С в течение 1 ч и перемешивают в течение примерно 14 ч при КТ. Затем реакционную смесь разбавляют водой и экстрагируют диэтиловым эфиром. После этого объединенные экстракты сушат и выпаривают. Остаток очищают хроматографией.

Стадия 4: 3-азидометил-5-метилизоксазол

В раствор 3-бромметил-5-метилизоксазола в ацетоне при КТ вводят NaN₃. Далее реакционную смесь перемешивают в течение примерно 48 ч. Затем реакционную смесь выливают в воду и экстрагируют EtOAc, сушат и выпаривают.

Стадия 5: (5-метилизоксазол-3-ил)метиламин

В раствор 3-азидометил-5-метилизоксазола в изопропаноле при КТ с интенсивным перемешиванием вводят триэтиламин, 1,3-пропандитиол и натрийборогидрид. Далее смесь перемешивают при КТ. По прошествии примерно 19 ч добавляют еще 0,5 экв. NaBH₄ и при КТ перемешивают в течение еще 7 ч. После этого под вакуумом выпаривают растворитель и затем остаток растворяют в 10%-ной водной лимонной кислоте и промывают. Водный слой подщелачивают водным NaOH до рН 12, насыщают NaCl и экстрагируют ДХМ. Объединенные ДХМ экстракты сушат и концентрируют.

Стадия 6: N,N-диметил-N'-(5-метилизоксазол-3-илметил)формамидин

Раствор (5-метилизоксазол-3-ил)метиламина в N,N-диметилформамиддиметилацетале выдерживают при температуре кипения с обратным холодильником в течение 3 ч. После охлаждения до комнатной температуры растворитель выпаривают, в результате чего остается соединение формулы IVa.

Затем соединение формулы IVa можно присоединять к соединению формулы III в соответствии со схемами 1а и 6.

Схема 6

R¹, R² и n описаны выше.

Как сказано выше, соединения формулы I и их фармацевтически приемлемые соли обладают ценными фармакологическими свойствами. Было установлено, что соединения по настоящему изобретению являются лигандами для рецепторов GABA А, содержащих субъединицы α5 и, следовательно, эффективных в терапии, когда необходимо повысить познавательную способность.

Соединения исследовали в соответствии с методом, приведенным в настоящем описании ниже.

Приготовление мембран и опыты по связыванию

Сродство соединений к субъединицам рецептора GABA А определяли по конкуренции связывания [³Н]флумазенила ([³H]Ro 15-1788) (85 Ci/ммолей; фирмы Amersham) с клетками SF9, экспрессирующими рецепторы состава α1β3γ2, α2β3γ2, α3β3γ2 и α5β3γ2 у крыс.

Осадок клеток суспендировали в трис-буфере Кребса (4,8 мМ KCl, 1,2 мМ CaCl₂, 1,2 мМ MgCl₂, 120 мМ NaCl, 15 мМ Трис, буфер для опыта по связыванию с рН 7,5), с помощью политрона гомогенизировали в течение примерно 15 с на льду и центрифугировали при 4°С в течение 30 мин в центрифуге UZ (100000 g, ротор TFT 4594, скорость вращения 300000 об/мин). Осадок клеток вновь суспендировали в трис-буфере Кребса и с помощью политрона гомогенизировали на льду в течение примерно 15 с. Готовили аликвоты объемом 1 мл, определяли белок (метод Бредфорда) и полученные аликвоты мембран хранили при -70°С.

Опыты по связыванию радиолиганда выполняли в объеме 200 мкл (96-луночный планшет), который содержал 100 мкл клеток, [³H]Ro 15-1788 в концентрации 1 нМ для α1, α2, α3 субъединиц и 0,5 нМ для α5 субъединиц и тестируемое соединение в интервале от 10^-10 до 3×10^-6 М. С помощью 10^-5 М диазепама определяли неспецифическое связывание, которое, как правило, составляло меньше 5% от общего связывания. Опытные образцы инкубировали при 4°С в течение 1 ч до достижения равновесия и клетки собирали на монофильтре GF/C (фирмы Packard) фильтрованием с использованием харвестера Packard и промыванием охлажденным льдом буфером для промывки (50 мМ Трис, рН 7,5). После высушивания с помощью сцинцилляционного счетчика определяли сохранившуюся на фильтре радиоактивность. Значение K_i рассчитывали с использованием Excel-Fit (фирмы Micposoft) и находили среднее из двух определений.

По методике, описанной выше, тестировали соединения, представленные в примерах, и устанавливали, что значение K_i при замещении [³H]Ro 15-1788 из α5 субъединицы рецептора GABA А крыс для всех соединений составляет 100 нМ или меньше. В предпочтительном варианте соединения по изобретению связываются с α5 субъединицей более селективно, чем с α1, α2 субъединицами. Для α5 субъединицы афинность меньше, чем 15 нМ.

Для особенно предпочтительных соединений получали следующие конкретные данные.

Пример №	Ki (нМ)
1	3.7
2	5.5
3	8.9
4	7.6
6	13.8
8	4.6
9	8.0
10	11.2
11	7.8
22	12.5
29	3.8

Соединения формулы I, а также их фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли можно использовать в качестве лекарственных средств, например, в форме фармацевтических препаратов. Такие фармацевтические препараты можно вводить в организм перорально, например, в форме таблеток, таблеток с покрытием, драже, твердых и мягких желатиновых капсул, растворов, эмульсий или суспензий. Однако введение можно также осуществлять ректально, например в форме суппозиториев, или парентерально, например в форме растворов для инъекций.

Соединения формулы I и их фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли можно совмещать с фармацевтически инертными неорганическими или органическими наполнителями для изготовления таблеток, таблеток с покрытием, драже и твердых желатиновых капсул. В качестве таких наполнителей можно использовать лактозу, кукурузный крахмал или его производные, тальк, стеариновую кислоту и ее соли и т.д., например для изготовления таблеток, драже и твердых желатиновых капсул. Приемлемыми наполнителями для мягких желатиновых капсул являются, например, растительные масла, воски, жиры, полутвердые и жидкие полиолы и т.д.

Приемлемые наполнители для приготовления растворов и сиропов представляют собой, например, воду, полиолы, сахарозу, инвертный сахар, глюкозу и т.д.

Приемлемые при приготовлении растворов для инъекций наполнители представляют собой, например, воду, спирты, полиолы, глицерин, растительные масла и т.д.

Приемлемыми для изготовления суппозиториев наполнителями являются, например, природные или отвержденные масла, воски, жиры и полужидкие или жидкие полиолы и т.д.

Более того, фармацевтические препараты могут включать консерванты, солюбилизаторы, стабилизаторы, смачивающие агенты, эмульгаторы, подслащивающие вещества, красящие вещества, корригенты, соли для варьирования осмотического давления, буферы, маскирующие агенты или антиоксиданты. Тем не менее они могут также содержать другие обладающие терапевтическим действием вещества.

Дозу можно варьировать в широких интервалах, причем в каждом конкретном случае она, разумеется, должна соответствовать индивидуальным потребностям. Обычно в случае перорального введения соответствующая ежедневная доза для пациента должна составлять от примерно 10 до 1000 мг соединения общей формулы I, хотя, когда это необходимо, можно также превысить верхний предел.

Настоящее изобретение иллюстрируют, не ограничивая его объема, следующие примеры. Температура во всех случаях указана в градусах Цельсия.

Пример 1

Этиловый эфир 9Н-имидазо[1,5-а]пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-10-карбоновой кислоты

а) Этиловый эфир 2-аминобензойной кислоты (этилантранилат), соединение формулы VII

Получен в соответствии со схемой 1, стадия 1, согласно литературе (Bamberger, Goldberger, J.Liebigs Ann. Chem., 1899, 362, 305).

Этанол (500 мл) охлаждали на льду и насыщали газообразным HCl. Затем добавляли 2-аминобензойной кислоты (50 г) и образовавшуюся смесь кипятили с обратным холодильником в течение 13 ч. Далее горячий раствор выливали в 1,5 л смеси воды со льдом, а затем раствор фильтровали и нейтрализовали бикарбонатом натрия. После этого раствор выпаривали, а затем экстрагировали диэтиловым эфиром (3 порции по 200 мл) и объединенные экстракты сушили и выпаривали до жидкого остатка, который перегоняли с получением продукта (49 г, 82%-ный выход) в виде прозрачной жидкости; m/z 165 (М).

б) Этиловый эфир 2-[(4-этокси-1,4-диоксобутил)амино)]бензойной кислоты (соединение формулы VIII)

Получен в соответствии со схемой 1, стадия 2.

В перемешиваемый раствор этилантранилата (50,0 г) в сухом толуоле (250 мл) при 0°С добавляли карбоната кальция (60,6 г), а затем раствора этилсукцинилхлорида (59,8 г) в сухом толуоле (400 мл) и реакционной смеси давали нагреться до КТ в течение 30 мин. Далее образовавшуюся смесь кипятили с обратным холодильником в течение 1 ч, а затем горячую суспензию фильтровали. После этого раствор выпаривали до остатка в виде белого твердого вещества, которое перекристаллизовывали из EtOH с получением продукта (82,1 г, 93%-ный выход) в виде белых кристаллов, m/z 293 (М).

в) Этиловый эфир 2,3-дигидро-5-гидрокси-2-оксо-1H-бензазепин-4-карбоновой кислоты (соединение формулы IX)

Получен в соответствии со схемой 1, стадия 3. В суспензию КН в масле (20%-ная, 39,6 г) в аргоновой атмосфере вводили толуол (60 мл). В эту суспензию, охлажденную до 10°С, в течение 30 мин (10-20°С) добавляли продукт со стадии 2 в виде раствора в толуоле (90 мл) с последующим добавлением сухого ДМФ (12 мл). После прекращения выделения водорода образовавшуюся смесь выдерживали при 70°С в течение 2 ч. После охлаждения с перемешиванием добавляли уксусной кислоты (15 мл) с последующим добавлением воды (120 мл). Далее смесь фильтровали и полученное твердое вещество сушили в вакуумном сушильном шкафу при 60°С под давлением 10 мбар в течение 30 мин. Затем твердый продукт (7,98 г) перекристаллизовывали из этанола с получением белых игольчатых кристаллов (6,7 г, 84%-ный выход), m/z 247(М).

г) 3,4-Дигидро-1H-1-бензазепин-2,5-дион (соединение формулы X)

Получен в соответствии со схемой 1, стадия 4.

Продукт со стадии 3 (17,0 г) растворяли в ДМСО (610 мл), а затем добавляли воды (30 мл) и образовавшуюся смесь выдерживали при 150°С в течение 1 ч. Далее добавляли воды (30 мл) и продолжали выдерживать при 150°С в течение 2 ч. Затем добавляли другую аликвоту воды (30 мл) и смесь выдерживали при 150°С в течение еще 2 ч 20 мин. После охлаждения смесь выливали в воду (600 мл) и затем смесь экстрагировали ДХМ (3 порции по 250 мл), объединенные экстракты промывали водой (250 мл), затем сушили и выпаривали до остатка в виде не совсем белого, оранжевого твердого вещества. Перекристаллизацией из EtOH получали не совсем белое твердое вещество (6,0 г, 50%-ный выход), m/z 175 (М).

д) 4-[(Диметиламино)метилен]-3,4-дигидро-1H-бензазепин-2,5-дион (соединение формулы XI)

Получен в соответствии со схемой 1, стадия 5.

Смесь продукта со стадии 4 (3,1 г) и N,N-диметилформамиддиметилацеталя (21,1 мл) при 115-120°С выдерживали в течение 1 ч. После охлаждения твердое вещество отфильтровывали и промывали диэтиловым эфиром, сушили в вакуумном сушильном шкафу в течение 3 ч при 50°С под давлением 1 мм рт.ст. до остатка в виде светло-оранжевого твердого вещества (2,0 г, 58%-ный выход), m/z (ISP)231 (МН).

е) 5,7-Дигидро-6H-пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-6-он (соединение формулы II

Получен в соответствии со схемой 1, стадия 6.

В смесь продукта со стадии 5 (4,6 г) с МеОН (160 мл), содержавшую метоксид натрия (2,34 г), добавляли формамидина HCl (2,4 г) и образовавшуюся смесь при комнатной температуре перемешивали в течение 4 ч. Затем добавляли воды (80 мл), образовавшуюся смесь экстрагировали ДХМ (5 порций по 50 мл) и объединенные экстракты сушили над Na₂SO₄. После выпаривания остаток перекристаллизовывали из ДХМ/МеОН с получением не совсем белых кристаллов (2,2 г, 52%-ный выход), m/z 211 (М).

ж) Этиловый эфир 9H-имидазо[1,5-а]пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-10-карбоновой кислоты (соединение формулы I)

Получен в соответствии со схемой 1, стадия 7.

В раствор продукта со стадии 6 (2,2 г) в CHCl₃ (15 мл) вводили N,N-диметил-п-толуидин (10,3 мл) и оксихлорид фосфора (1,59 мл) и образовавшуюся смесь кипятили с обратным холодильником в течение 1 ч. После охлаждения смесь выливали в раствор МаНСО₃ (8,2 г) в воде (40 мл) и образовавшуюся смесь экстрагировали ДХМ (4 порции по 20 мл), а затем объединенные экстракты промывали водой (40 мл), сушили и выпаривали с получением иминохлорида. В раствор этилизоцианоацетата (1,19 г) в сухом ДМФ (20 мл) вводили трет-бутоксид калия (1,26 г) и полученный раствор при -50°С добавляли в раствор иминохлорида (получен по вышеизложенному) в сухом ДМФ (5 мл). По истечении 10 мин реакционной смеси давали нагреться до комнатной температуры (40 мин), а затем добавляли уксусной кислоты (0,5 мл), после чего охлажденной льдом воды (200 мл). Приготовленную смесь экстрагировали ДХМ (4 порции по 40 мл) и объединенные экстракты промывали водой (50 мл), а затем сушили над Na₂SO₄ и выпаривали. Хроматографией остатка на силикагеле, элюируя EtOAc/гексаном, продукт (770 мг, 24%-ный выход) получали в виде белых кристаллов, t_пл: 285-287°С, m/z 306 (М).

Альтернативная последовательность реакций в соответствии со схемой 1

Смесь продукта со стадии 6 (1 ммоль) и N,N-диметил-п-толуидина (2 ммоля) смешивали в толуоле (5 мл) и нагревали до 100°С.Затем по каплям добавляли оксихлорида фосфора (1,1 ммоля) и выдержку при 100°С продолжали в течение 1 ч. Далее образовавшуюся смесь дистиллировали под пониженным давлением и остаток растворяли в ТГФ (2 мл). В раствор гексаметилдисилазана (3,3 ммоля) в ТГФ (2 мл) в аргоновой атмосфере при -75°С медленно добавляли BuLi (1,6 М в гексанах, 3,3 ммоля). После перемешивания в течение 1 ч при -75°С добавляли раствор этилового эфира (Е)-(диметиламинометиленамино)уксусной кислоты (2,0 ммоля) в ТГФ (1,0 мл), а затем перемешивание продолжали при -75°С в течение 1 ч. Далее при -75°С добавляли раствор соответствующего иминохлорида (получен по вышеизложенному), после чего при -75°С перемешивали в течение 1 ч, а затем добавляли уксусной кислоты (20 ммолей), смеси давали нагреться до 0°С с последующим добавлением воды (0,5 мл) и смесь кипятили с обратным холодильником в течение 1 ч. После охлаждения смесь экстрагировали ДХМ (2 порции по 10 мл) и объединенные экстракты промывали водой (10 мл), а затем выпаривали. После этого полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле или препаративной ВЭЖХ.

Эксперименты примеров со 2 по 7 проводили в соответствии со схемой 1 и примером 1.

Пример 2

Этиловый эфир 6-пропил-9H-имидазо[1,5-а]пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-10-карбоновой кислоты

а) 5,7-Дигидро-2-пропил-6H-пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-6-он

Получен аналогично схеме 1 из 4-[(диметиламино)метилен]-3,4-дигидро-1H-бензазепин-2,5-диона и бутирамидингидрохлорида. Выход: 84%. Белое твердое вещество, m/z 253 (М).

б) Этиловый эфир 6-пропил-9H-имидазо[1,5-а]пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-10-карбоновой кислоты

Из 5,7-дигидро-2-пропил-6H-пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-6-она в соответствии со схемой 1, стадия 7.

Белое твердое вещество, t_пл: 180°С, m/z (ISP) 349 (МН).

Пример 3

Этиловый эфир 6-(1-метилэтил)-9H-имидазо[1,5-а]пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-10-карбоновой кислоты

а) 5,7-Дигидро-2-(1-метилэтил)-6H-пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-6-он

Аналогично схеме 1 - из 4-[(диметиламино)метилен]-3,4-дигидро-1H-бензазепин-2,5-диона и изобутирамидингидрохлорида. Выход: 87%. Белое твердое вещество, m/z 253 (М).

б) Этиловый эфир 6-(1-метилэтил)-9H-имидазо[1,5-а]пиримидо[5,4-d][1] бензазепин-10-карбоновой кислоты

Из 5,7-дигидро-2-(1-метилэтил)-6H-пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-6-она в соответствии со схемой 1, стадия 7.

Белое твердое вещество, t_пл: 190°С, m/z (ISP) 349 (МН).

Пример 4

Этиловый эфир 6-циклопропил-9H-имидазо[1,5-а]пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-10-карбоновой кислоты

а) 2-Циклопропил-5,7-дигидро-6H-пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-6-он

Аналогично схеме 1 - из 4-[(диметиламино)метилен]-3,4-дигидро-1H-бензазепин-2,5-диона и циклопропанкарбоксамидингидрохлорида. Выход: 62%. Белое твердое вещество, m/z (ISP) 252 (МН).

б) Этиловый эфир 6-циклопропил-9H-имидазо[1,5-а]пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-10-карбоновой кислоты

Из 2-циклопропил-5,7-дигидро-6H-пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-6-она в соответствии со схемой 1, стадия 7.

Белое твердое вещество, t_пл: 110°С, m/z (ISP) 347 (МН).

Пример 5

Этиловый эфир 6-(1,1-диметилэтил)-9H-имидазо[1,5-а]пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-10-карбоновой кислоты

а) 2-(1,1-Диметилэтил)-5,7-дигидро-6H-пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-6-он

Аналогично схеме 1 - из 4-[(диметиламино)метилен]-3,4-дигидро-1H-бензазепин-2,5-диона и 2,2-диметилпропионамидингидрохлорида. Выход: 90%. Белое твердое вещество, m/z 267(М).

б) Этиловый эфир 6-(1,1-диметилэтил)-9H-имидазо[1,5-а]пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-10-карбоновой кислоты

Из 2-(1,1-диметилэтил)-5,7-дигидро-6H-пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-6-она в соответствии со схемой 1, стадия 7.

Белое твердое вещество, t_пл: 250°C, m/z (ISP) 363 (МН).

Пример 6

Этиловый эфир 6-[(4-метоксифенил)метил]-9H-имидазо[1,5-а]пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-10-карбоновой кислоты

а) 5,7-Дигидро-2-[(4-метоксифенил)метил]-6H-пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-6-он

Аналогично схеме 1 - из 4-[(диметиламино)метилен]-3,4-дигидро-1H-бензазепин-2,5-диона и 2-(4-метоксифенил)ацетамидингидрохлорида. Выход: 31%.

Белое твердое вещество, m/z (ISP) 332 (МН).

б) Этиловый эфир 6-[(4-метоксифенил)метил]-9H-имидазо[1,5-а]пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-10-карбоновой кислоты

Из 5,7-дигидро-2-[(4-метоксифенил)метил]-6H-пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-6-она в соответствии со схемой 1, стадия 7.

Белое твердое вещество, t_пл: 200°С, m/z (ISP) 427 (М).

Пример 7

Этиловый эфир 6-(1H-индол-3-илметил)-9H-имидазо[1,5-а]пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-10-карбоновой кислоты

а) 5,7-Дигидро-2-(1H-индол-3-илметил)-6H-пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-6-он

Аналогично схеме 1 - из 4-[(диметиламино)метилен]-3,4-дигидро-1H-бензазепин-2,5-диона и 2-(1H-индол-3-ил)ацетамидина. Выход: 80%.

Белое твердое вещество, m/z 340 (М).

б) Этиловый эфир 6-(1H-индол-3-илметил)-9H-имидазо[1,5-а]пиримидо[5,4-d] [1]бензазепин-10-карбоновой кислоты

Из 5,7-дигидро-2-(1H-индол-3-илметил)-6H-пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-6-она в соответствии со схемой 1, стадия 7.

Белое твердое вещество, t_пл: 120°С, m/z (ISP) 436 (М).

Пример 8

Этиловый эфир 3-фтор-6-метил-9H-имидазо[1,5-а]пиримидо[5,4-d][1] бензазепин-10-карбоновой кислоты

а) Этиловый эфир 2-амино-5-фторбензойной кислоты (соединение формулы VII)

Получен в соответствии со схемами 1 или 2.

Светло-желтая жидкость, t_кип: 68-70°С под остаточным давлением 0,4 мбара.

б) Этиловый эфир 2-[(4-этокси-1,4-диоксобутил)амино)]-5-фторбензойной кислоты (соединение формулы VIII)

Получен из этилового эфира 2-амино-5-фторбензойной кислоты в соответствии со схемой 1, стадия 2. Выход: 100%.

Белое твердое вещество, m/z 311 (М).

в) Этиловый эфир 7-фтор-2,3-дигидро-5-гидрокси-2-оксо-1H-бензазепин-4-карбоновой кислоты (соединение формулы IX)

Получен из этилового эфира 2-[(4-этокси-1,4-диоксобутил)амино)]-5-фторбензойной кислоты в соответствии со схемой 1, стадия 3. Выход: 69%.

Белое твердое вещество, m/z 265 (М).

г) 7-Фтор-3,4-дигидро-1H-1-бензазепин-2,5-дион (соединение формулы X)

Получен из этилового эфира 7-фтор-2,3-дигидро-5-гидрокси-2-оксо-1H-бензазепин-4-карбоновой кислоты в соответствии со схемой, 1 стадия 4. Выход: 67%.

Белое твердое вещество, m/z 193 (М).

д) 4-[(Диметиламино)метилен]-7-фтор-3,4-дигидро-1H-бензазепин-2,5-дион (соединение формулы XI)

Получен из 7-фтор-3,4-дигидро-1H-1-бензазепин-2,5-диона в соответствии со схемой 1, стадия 5. Выход: 75%.

Светло-оранжевое твердое вещество, m/z 248 (М).

е) 10-Фтор-5,7-дигидро-2-метил-6H-пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-6-он (соединение формулы II)

Аналогично схеме 1 - из 4-[(диметиламино)метилен]-7-фтор-3,4-дигидро-1H-бензазепин-2,5-диона и ацетамидингидрохлорида. Выход: 50%.

Белое твердое вещество, m/z (ISP) 244 (МН).

ж) Этиловый эфир 3-фтор-6-метил-9H-имидазо[1,5-а]пиримидо[5,4-d][1]бензазепин -10-карбоновой кислоты (соединение формулы I)

Получен из 10-фтор-5,7-дигидро-2-метил-6H-пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-6-она в соответствии со схемой 1, стадия 7.

Белое твердое вещество, t_пл: 230°С, m/z 338 (М).

Пример 9

Этиловый эфир 3-фтор-6-пропил-9H-имидазо[1,5-а]пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-10-карбоновой кислоты

а) 10-Фтор-5,7-дигидро-2-пропил-6H-пиримидо[5,4-d[1]бензазепин-6-он

Аналогично схеме 1 - из 4-[(диметиламино)метилен]-7-фтор-3,4-дигидро-1H-бензазепин-2,5-дионаи бутирамидингидрохлорида. Выход: 50%.

Белое твердое вещество, m/z (ISP) 272 (МН).

б) Этиловый эфир 3-фтор-6-пропил-9H-имидазо[1,5-а]пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-10-карбоновой кислоты

Из 10-фтор-5,7-дигидро-2-пропил-6H-пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-6-она в соответствии со схемой 1, стадия 7.

Белое твердое вещество, t_пл: 200°C, m/z (ISP) 367 (МН).

Пример 10

Этиловый эфир 3-фтор-6-(1-метилэтил)-9H-имидазо[1,5-а]пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-10-карбоновой кислоты

а) 10-Фтор-5,7-дигидро-2-(1-метилэтил)-6H-пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-6-он

Аналогично схеме 1 - из 4-[(диметиламино)метилен]-7-фтор-3,4-дигидро-1H-бензазепин-2,5-диона и изобутирамидингидрохлорида. Выход: 60%.

Белое твердое вещество, m/z (ISP) 272 (МН).

б) Этиловый эфир 3-фтор-6-(1-метилэтил)-9H-имидазо[1,5-а]пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-10-карбоновой кислоты

Из 10-фтор-5,7-дигидро-2-(1-метилэтил)-6H-пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-6-она в соответствии со схемой 1, стадия 7.

Белое твердое вещество, t_пл: 185°C, m/z (ISP) 367 (МН).

Пример 11

Этиловый эфир 6-циклопропил-3-фтор-9H-имидазо[1,5-а]пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-10-карбоновой кислоты

а) 2-Циклопропил-10-фтор-5,7-дигидро-6H-пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-6-он

Аналогично схеме 1-из 4-[(диметиламино)метилен]-7-фтор-3,4-дигидро-1H-бензазепин-2,5-диона и циклопропанкарбоксамидингидрохлорида. Выход: 88%.

Белое твердое вещество, m/z (ISP) 270 (МН).

б) Этиловый эфир 6-циклопропил-3-фтор-9H-имидазо[1,5-а]пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-10-карбоновой кислоты

Из 2-циклопропил-10-фтор-5,7-дигидро-6H-пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-6-она в соответствии со схемой 1, стадия 7.

Белое твердое вещество, t_пл: 220°C, m/z (ISP) 365 (МН).

Пример 12

Этиловый эфир 3-фтор-6-(1,1-диметилэтил)-9H-имидазо[1,5-а]пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-10-карбоновой кислоты

(1,1-Диметилэтил)-10-фтор-5,7-дигидро-6H-пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-6-он

Аналогично схеме 1 - из 4-[(диметиламино)метилен]-7-фтор-3,4-дигидро-1H-бензазепин-2,5-диона и 2,2-диметилпропионамидингидрохлорида. Выход: 54%.

Белое твердое вещество, m/z (ISP) 286 (МН).

б) Этиловый эфир 3-фтор-6-(1,1-диметилэтил)-9H-имидазо[1,5-а]пиримидо[5,4-d][1]бензазепин-10-карб