Пиримидотриазины, способ их получения, фармацевтическая композиция на их основе и применение

Пиримидотриазины, способ их получения, фармацевтическая композиция на их основе и применение

Реферат

Изобретение относится к производным пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина, которые применяются для ингибирования протеинтирозинфосфатаз, прежде всего РТР1В.

Изобретение относится прежде всего к соединениям формулы

где R¹ и R² каждый выбирают из группы, включающей водород, или

R¹ и R² вместе означают химическую связь, -CH₂-, -O-, -NH- или -N-R³,

R³ означает (низш.)алкил или -СН₂-Ar, а

Ar выбирают из группы, включающей незамещенный фенил, незамещенный нафтил, фенил, моно- или дизамещенный группой (низш.)алкил, (низш.)алкокси, арил, циклоалкил, (низш.)алкиларил, (низш.)алкоксиарил, (низш.)алкилциклоалкил, (низш.)алкоксициклоалкил, галоген, циано или трифторметил; и нафтил, моно- или дизамещенный группой (низш.)алкил, (низш.)алкокси, арил, циклоалкил, (низш.)алкиларил, (низш.)алкоксиарил, (низш.)алкилциклоалкил, (низш.)алкоксициклоалкил или галоген, или к их фармацевтически приемлемым солям.

Протеинтирозинфосфатазы (РТР) являются ключевыми ферментами в процессах роста и дифференциации клетки. Ингибирование этих ферментов может влиять на модуляцию многостадийных сигнальных путей, в которых определенную роль играет процесс фосфорилирования/дефосфорилирования тирозина. РТР1В является той конкретной протеинтирозинфосфатазой, которая часто используется в качестве прототипа этого класса ферментов.

Ингибиторы РТРаз считаются потенциальными терапевтическими агентами для лечения диабета. См., например, работы Moeller и др., Current Opinion in Drug Discovery and Development, 3(5), 527-540 (2000) или Zhang, Zhong-Yin, Current Opinion in Chemical Biology, 5, 416-423 (2001).

Установлено, что соединения формулы

и их фармацевтически приемлемые соли, где R¹ и R² имеют значения, указанные ниже, ингибируют протеинтирозинфосфатазы, прежде всего РТР1В, и, следовательно, могут использоваться для снижения концентрации глюкозы в плазме (крови) у млекопитающих.

Термин "(низш.)алкил", используемый в описании заявки отдельно или в комбинации, означает линейную или разветвленную алкильную группу, содержащую максимум шесть атомов углерода, такую, как метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, втор-бутил, изобутил, трет-бутил, н-пентил, н-гексил и т.п. (Низш.)алкильные группы незамещены или замещены одной или более группами, независимо выбранными из ряда циклоалкил, нитро, арилокси, арил, гидрокси, галоген, циано, (низш.)алкокси, (низш.)алканоил, (низш.)алкилтио, (низш.)алкилсульфинил, (низш.)алкилсульфонил и замещенная аминогруппа. Примеры замещенных (низш.)алкильных групп включают 2-гидроксиэтил, 3-оксобутил, цианометил и 2-нитропропил.

Термин "циклоалкил" означает незамещенный или замещенный 3-7-членный циклический углеводородный радикал. Заместители, используемые по настоящему изобретению, включают гидрокси, галоген, циано, (низш.)алкокси, (низш.)алканоил, (низш.)алкил, ароил, (низш.)алкилтио, (низш.)алкилсульфинил, (низш.)алкилсульфонил, арил, гетероарил и замещенная аминогруппа.

Термин "(низш.)алкокси" означает алкоксигруппу с прямой или разветвленной цепью, содержащей максимум 6 атомов углерода, такую, как метокси, этокси, н-пропокси, изопропокси, н-бутокси, трет-бутокси и т.п.

Термин "(низш.)алкилтио" означает (низш.)алкильную группу, присоединенную через двухвалентный атом серы, например метилмеркапто- или изопропилмеркаптогруппа.

Термин "арил" означает моно- или бициклическую ароматическую группу, такую, как фенил или нафтил, незамещенную или замещенную соответствующими заместителями. Предпочтительные заместители включают (низш.)алкил, (низш.)алкокси, гидрокси(низш.)алкил, гидрокси, гидроксиалкокси, галоген, (низш.)алкилтио, (низш.)алкилсульфинил, (низш.)алкилсульфонил, циано, нитро, перфторалкил, алканоил, ароил, арилалкинил, (низш.)алкинил и (низш.)алканоиламино. Более предпочтительными заместителями являются (низш.)алкил, (низш.)алкокси, гидрокси, галоген, циано и перфтор(низш.)алкил. Примерами арильных групп, которые используются по настоящему изобретению, являются фенил, пара-толил, пара-метоксифенил, пара-хлорфенил, мета-гидроксифенил, мета-метилтиофенил, 2-метил-5-нитрофенил, 2,6-дихлорфенил, 1-нафтил и т.п.

Термин "(низш.)алкиларил" означает (низш.)алкильную группу, указанную выше, в которой один или более атомов водорода замещены арильной группой, указанной выше. По настоящему изобретению может использоваться любой (низш.)алкиларил, такой, как бензил и т.п.

Термин "(низш.)алкоксиарил" означает (низш.)алкоксигруппу, указанную выше, в которой один или более атомов водорода замещены арильной группой, указанной выше. По настоящему изобретению может использоваться любой (низш.)алкоксиарил, такой, как бензилокси.

Термин "(низш.)алкоксикарбонил" означает (низш.)алкоксигруппу, присоединенную через карбонильную группу. Примеры алкоксикарбонильных групп включают этоксикарбонил и т.п.

Термин "фармацевтически приемлемые соли" означает соответствующие кислотно-аддитивные соли или основно-аддитивные соли, которые обладают биологическим действием и свойствами соединений формулы (I) и образуются с использованием пригодных нетоксичных органических или неорганических кислот или органических или неорганических оснований. Примеры кислотно-аддитивных солей включают соли неорганических кислот, таких, как хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, иодистоводородная кислота, серная кислота, сульфаминовая кислота, фосфорная кислота и азотная кислота, и соли органических кислот, таких, как пара-толуолсульфоновая кислота, салициловая кислота, метансульфоновая кислота, щавелевая кислота, янтарная кислота, лимонная кислота, яблочная кислота, молочная кислота, фумаровая кислота и т.п. Примеры основно-аддитивных солей включают соли аммония, калия, натрия и гидроксида четвертичного аммония, такого, как гидроксид тетраметиламмония. Химическая модификация фармацевтического соединения (т.е. лекарственного средства) с образованием соли является известной методикой для специалиста в данной области, которая позволяет получать соединения с улучшенной физической и химической стабильностью, гигроскопичностью, текучестью и растворимостью. См., например, H.Ansel и др., Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, 6^th Ed., 196 и 1456-1457 (1995).

Настоящее изобретение относится к соединениям формулы I

и к их фармацевтически приемлемым солям, где

R¹ и R² каждый выбирают из группы, включающей водород, или

R¹ и R² вместе означают химическую связь, -СН₂-, -O-, -NH- или -N-R³,

R³ означает (низш.)алкил или -CH₂-Ar, a

Ar выбирают из группы, включающей незамещенный фенил, незамещенный нафтил, фенил, моно- или дизамещенный группой (низш.)алкил, (низш.)алкокси, арил, циклоалкил, (низш.)алкиларил, (низш.)алкоксиарил, (низш.)алкилциклоалкил, (низш.)алкоксициклоалкил, галоген, циано или трифторметил; и нафтил, моно- или дизамещенный группой (низш.)алкил, (низш.)алкокси, арил, циклоалкил, (низш.)алкиларил, (низш.)алкоксиарил, (низш.)алкилциклоалкил, (низш.)алкоксициклоалкил или галоген.

Среди соединений формулы I предпочтительны соединения формулы II

где Ar выбирают из группы, включающей незамещенный фенил, незамещенный нафтил, фенил, моно- или дизамещенный группой (низш.)алкил, (низш.)алкокси, арил, циклоалкил, (низш.)алкиларил, (низш.)алкоксиарил, (низш.)алкилциклоалкил, (низш.)алкоксициклоалкил, галоген, циано или трифторметил; и нафтил, моно- или дизамещенный группой (низш.)алкил, (низш.)алкокси, арил, циклоалкил, (низш.)алкиларил, (низш.)алкоксиарил, (низш.)алкилциклоалкил, (низш.)алкоксициклоалкил или галоген.

В одном предпочтительном варианте соединений формулы II, Ar означает незамещенный фенил или незамещенный нафтил.

В другом предпочтительном варианте соединений формулы II, Ar означает фенил, монозамещенный группой (низш.)алкил, (низш.)алкокси, арил, циклоалкил, (низш.)алкиларил, (низш.)алкоксиарил, галоген, циано или трифторметил.

В еще одном предпочтительном варианте соединений формулы II, Ar означает фенил, монозамещенный группой (низш.)алкил, (низш.)алкокси, галоген, циано или трифторметил.

В еще одном предпочтительном варианте соединений формулы II, Ar означает фенил, дизамещенный группой (низш.)алкил, (низш.)алкокси, галоген или циано.

В другом предпочтительном варианте соединений формулы II, Ar означает нафтил, монозамещенный группой (низш.)алкил, (низш.)алкокси, (низш.)алкиларил, (низш.)алкоксиарил или галоген.

В еще одном предпочтительном варианте соединений формулы II, Ar означает нафтил, монозамещенный группой (низш.)алкил, (низш.)алкокси или галоген.

В другом предпочтительном варианте соединений формулы II, Ar означает нафтил, дизамещенный группой (низш.)алкил, (низш.)алкокси или галоген.

Соединения по изобретению могут существовать в виде стереоизомеров, прежде всего энантиомеров и диастереомеров, каждый из которых включен в объем настоящего изобретения.

Предпочтительные соединения по изобретению выбирают из ряда

1. 3-пиперазин-1-илметилпиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин,

2. 3-диэтиламинометилпиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин,

3. 3-пирролидин-1-илметилпиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин,

4. 3-пиперидин-1-илметилпиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин,

5. 3-морфолин-4-илметилпиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин,

6. 3-(4-метилпиперазин-1-илметил)пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин,

7. 3-(4-бензилпиперазин-1-илметил)пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин,

8. 3-(4-нафталин-2-илметилпиперазин-1-илметил)пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин,

9. 3-(4-нафталин-1-илметилпиперазин-1-илметил)пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин,

10. 3-(4-бифенил-4-илметилпиперазин-1-илметил)пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин,

11. 3-[4-(2-хлорбензил)пиперазин-1-илметил]пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин,

12. 3-[4-(3-хлорбензил)пиперазин-1-илметил]пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин,

13. 3-[4-(4-хлорбензил)пиперазин-1-илметил]пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин,

14. 3-[4-(3-метоксибензил)пиперазин-1-илметил]пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин,

15. 3-[4-(3-фторбензил)пиперазин-1-илметил]пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин,

16. 3-[4-(3-трифторметилбензил)пиперазин-1-илметил]пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин,

17. 3-[4-(4-трифторметилбензил)пиперазин-1-илметил]пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин,

18. 3-[4-(3-бромбензил)пиперазин-1-илметил]пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин,

19. 3-[4-(3-цианобензил)пиперазин-1-илметил]пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин,

20. 3-[4-(2,4-диметилбензил)пиперазин-1-илметил]пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин,

21. 3-[4-(4-этил-2-метилнафталин-1-илметил)пиперазин-1-илметил]пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин и

22. 3-[4-(4-бензилоксибензил)пиперазин-1-илметил]пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин.

Более предпочтительные соединения по изобретению выбирают из ряда

3-диэтиламинометилпиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин,

3-(4-бензилпиперазин-1-илметил)пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин,

3-(4-нафталин-2-илметилпиперазин-1-илметил)пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин,

3-(4-нафталин-1-илметилпиперазин-1-илметил)пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин,

3-(4-бифенил-4-илметилпиперазин-1-илметил)пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин,

3-[4-(2,4-диметилбензил)пиперазин-1-илметил]пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин,

3-[4-(4-этил-2-метилнафталин-1-илметил)пиперазин-1-илметил]пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин и

3-[4-(4-бензилоксибензил)пиперазин-1-илметил]пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин.

Кроме того, предпочтительным является способ получения соединений формулы I, включающий взаимодействие соединения формулы 3

с соединением формулы R₄NHR₅, где R⁴ означает -СН₂СН₂R₁, a R⁵ означает -СН₂СН₂R₂, где R¹ и R² имеют значения, указанные выше.

Кроме того, предпочтительны соединения формулы I для применения в качестве терапевтически активных веществ.

Кроме того, предпочтительны соединения формулы I для получения лекарственных средств, предназначенных для профилактики и/или лечения диабета.

Другим предпочтительным объектом изобретения является фармацевтическая композиция, включающая соединение формулы I и терапевтически инертный носитель.

Кроме того, предпочтительным вариантом изобретения является соединение формулы I, полученное способом, указанным выше.

Кроме того, предпочтительным является способ лечения и/или профилактики заболеваний, ассоциированных с уровнем глюкозы в плазме (крови), причем способ включает введение эффективного количества соединения формулы I. Указанный способ представлен как применение соединения формулы I для производства лекарственного средства, предназначенного для лечения или профилактики диабета.

Соединения по изобретению ингибируют РТР1В in vitro и снижают уровень глюкозы в плазме (крови) in vivo. Следовательно, соединения по изобретению можно использовать для лечения диабета.

Соединения по изобретению можно вводить пероральным, ректальным или парентеральным способом, например, внутривенным, внутримышечным, подкожным, подоболочечным или чрескожным способом, или сублингвально, или в виде офтальмологических препаратов. Примеры лекарственных форм включают капсулы, таблетки, суспензии или растворы для перорального введения, суппозитории, инъекционные растворы, глазные капли, мази или распыляемые растворы.

Предпочтительными способами введения являются внутривенный, внутримышечный, пероральный или ингаляционный способы.

Дозы, при которых соединения по изобретению вводятся в эффективном количестве, зависят от природы конкретного активного ингредиента, возраста и требований пациента и способа введения. Дозы определяют любыми обычными методами, например, клиническими испытаниями для определения предельных доз. В общем случае, предпочтительными являются дозы от приблизительно 0,1 до 100 мг/кг массы тела в сутки, более предпочтительно 1-25 мг/кг массы тела в сутки.

Изобретение также включает фармацевтические композиции, которые содержат фармацевтически эффективное количество соединения по изобретению и фармацевтически приемлемый носитель. Такие композиции получают обычными методами. Таблетки или гранулы могут содержать связующие агенты, наполнители, носители или разбавители. Жидкие композиции можно получать, например, в форме стерильного смешивающегося с водой раствора. Кроме активного ингредиенты капсулы могут содержать наполнитель. Кроме того, композиции могут включать ароматизирующие добавки, а также вещества, которые обычно используются в качестве консервирующих, стабилизирующих, влагоудерживающих и эмульгирующих агентов, а также соли для регуляции осмотического давления, буферные вещества и прочие добавки.

Вышеуказанные носители и разбавители могут включать соответствующие фармацевтически приемлемые органические или неорганические вещества, например воду, желатин, лактозу, крахмал, стеарат магния, тальк, аравийскую камедь, полиалкиленовые гликоли и т.п.

Стандартные дозы для перорального введения, такие, как таблетки и капсулы, предпочтительно содержат от 25 мг до 1000 мг соединения по изобретению. Соединения по изобретению получают обычными методами. Конкретный метод показан на схемах 1-3.

Промежуточное соединение 3, содержащее хлорметильную группу, получают, как показано на схеме 1, из гемисульфата 2,4-диамино-2-меркаптопиридина 1, который является коммерческим препаратом. Соединение 1 S-метилируют (например, метилиодидом в присутствии гидроксида натрия), а затем нитрозилируют в стандартных условиях (например, нитратом натрия в уксусной кислоте при приблизительно 50°С), при этом получают промежуточное арилнитрозильное соединение 2. При замене тиометильной группы в соединении 2 гидразином в пригодном растворителе, таком, как диметилформамид, при комнатной температуре, с последующей конденсацией с диэтилацеталем хлорметилацетальдегида, который является коммерческим продуктом, при нагревании (например, при 85°С) в кислой среде (например, в присутствии HCl) получают соединение 3, содержащее хлорметильную группу.

Затем хлорметильное производное 3 вводят в реакцию с различными известными аминами в пригодном растворителе, таком, как этанол, при нагревании (например, при приблизительно 80-100°С) с образованием соответствующих аминометилпроизводных 4, как показано на схеме 2. В аминах формулы R⁴NR⁵ на схеме 2 R⁴ означает -CH₂CH₂R₁, a R⁵ означает -CH₂CH₂R₂, где R¹ и R² имеют значения, указанные выше.

Производное пиперазина 5 (например, соединение 4, где R⁴ и R⁵ вместе образуют фрагмент -СН₂СН₂NHCH₂СН₂-) получают из хлорметильного производного 3 и пиперазина, как показано на схеме 2. Алкилирование соединения 5 различными известными алкилгалогенидами (например, R³Br или R³I, где R³ имеет значения, указанные выше) проводят в пригодном растворителе, таком, как диметилформамид, в присутствии пригодного основания, такого, как карбонат калия, при комнатной температуре, при этом получают производные диалкилированного пиперазина 6, как показано на схеме 3.

Примеры

Пример 1

6-Метилтио-5-нитрозопиримидин-2,4-диамин

Стадия 1

К раствору 105 г КОН в 1 л воды при перемешивании добавляли гемисульфат 2,4-диамино-6-меркаптопиримидина 1 (70,0 г), а затем йодистый метил (91 мл) и полученную смесь интенсивно перемешивали в течение 4 ч. Твердое вещество отделяли фильтрованием, промывали водой и сушили на воздухе в течение ночи, при этом получали 54,0 г 6-метилтиопиримидин-2,4-диамина в виде твердого вещества желтовато-коричневого цвета.

¹Н ЯМР (ДМСО-d₆): 6,20 (s, 2Н), 5,90 (s, 2Н), 5,55 (s, 1H), 2,30 (s, 3H).

Стадия 2

К суспензии 6-метилтиопиримидин-2,4-диамина (50,0 г, 321 ммоль) в воде (1000 мл) при перемешивании добавляли 500 мл 2 н. уксусной кислоты, смесь нагревали до 50°С, быстро добавляли раствор NaNO₂ (24,0 г, 353 ммоля в 200 мл Н₂О) и смесь нагревали при 50°С в течение 1 ч. Затем смесь темно-синего/пурпурного цвета охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Твердое вещество синего/пурпурного цвета несколько раз промывали водой, а затем эфиром, и высушивали на воздухе, при этом получали 51,0 г 6-метилтио-5-нитрозопиримидин-2,4-диамина 2 в виде твердого вещества синего/пурпурного цвета.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 9,70 (s, 1H), 8,10 (s, 1H), 7,95 (m, 2Н), 2,43 (s, 3H).

Пример 2

6-Гидразино-5-нитрозопиримидин-2,4-диамин

К суспензии (12,0 г, 64,9 ммоля) 6-метилтио-5-нитрозопиримидин-2,4-диамина 2 в ДМФА при комнатной температуре быстро добавляли гидразингидрат (55% раствор, 14,5 мл). Смесь перемешивали в течение ночи, затем смесь ярко-розового цвета фильтровали, твердое вещество несколько раз промывали ДМФА, затем эфиром и сушили на воздухе, при этом получали 9,53 г 6-гидразино-5-нитрозопиримидин-2,4-диамина в виде твердого вещества ярко-розового цвета.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 8,00 (s, 1Н), 7,40 (s, 1H), 7,05 (m, 2H), 5,35 (m, 2H).

Пример 3

3-Хлорметилпиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин

К охлаждаемому на ледяной бане ДМФА (350 мл) при перемешивании добавляли конц. HCl (14 мл) и 7,14 г 6-гидразино-5-нитрозопиримидин-2,4-диамина. Через 5 мин в течение приблизительно 2 мин добавляли диэтилацеталь хлорацетальдегида (15,4 мл). Охлаждающую баню удаляли, смесь нагревали до комнатной температуры и выдерживали в течение 1 ч, затем смесь нагревали при 85°С в течение 1,5 ч и охлаждали до комнатной температуры в течение приблизительно 2,5 ч. Смесь фильтровали для удаления небольшого количества нерастворимого материала коричневого цвета, фильтрат подщелачивали конц. раствором NH₄OH и разбавляли равным количеством воды. Смесь выдерживали в течение 1 ч, твердое вещество оранжево-коричневого цвета отделяли фильтрованием и высушивали в вакууме над Р₂O₅, при этом получали 3,50 г 3-хлорметилпиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина 3.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 8,25 (s, 2H), 7,95 (s, 1H), 7,30 (ушир.s, 1H), 5,02 (s, 2H).

Пример 4

3-Пиперазин-1-илметилпиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин

Смесь 3-хлорметилпиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина 3 (2,00 г, 9,5 ммоля) и пиперазина (2,50 г, 29 ммолей) в абсолютном этаноле нагревали при 100°С в закрытой пробирке в течение 4 ч. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры и упаривали. Неочищенный продукт очищали обращенно-фазовой ЖХВР (Rainin C₁₈, элюент: градиент от 0% до 30% СН₃СН/Н₂O/0,1% ТФУ), фракции ярко-желтого цвета, содержащие продукт, объединяли, CH₃CN удаляли в вакууме, остаток высушивали лиофильно, при этом получали 1,44 г трифторацетата 3-пиперазин-1-илметилпиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина 5 желтого цвета.

¹Н ЯМР (ДМСО-d₆): 9,55 (s, 1Н), 9,40 (s, 1H), 8,80 (s, 2H), 8,45 (s, 1H), 4,15 (s, 2H), 3,10 (m, 4H), 2,80 (m, 4H).

Пример 5

3-Диэтиламинометилпиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин

Смесь 3-хлорметилпиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина 3 (200 мг, 0,95 ммоля) и диэтиламина (2,00 мл) в абсолютном этаноле (2,0 мл) нагревали при 100°С в закрытой пробирке в течение 5 ч. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт очищали обращенно-фазовой ЖХВР (Rainin C₁₈, элюент: градиент от 0% до 30% СН₃CN/Н₂O/0,1% ТФУ), фракции ярко-желтого цвета, содержащие продукт, объединяли, СН₃CN удаляли в вакууме, остаток высушивали лиофильно, при этом получали 65 мг трифторацетата 3-диэтиламинометилпиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина 4 желтого цвета.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 9,10 (ушир.s, 1Н), 8,90 (ушир.s, 1Н), 8,15 (ушир.s, 2H), 4,80 (s, 2H), 3,25 (q, 4H), 1,30 (t, 6H).

Пример 6

3-Пирролидин-1-илметилпиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин

Смесь 3-хлорметилпиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина 3 (70 мг, 0,33 ммоля) и 1,0 мл пирролидина нагревали при 80°С в закрытой пробирке в течение 7 ч. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт очищали обращенно-фазной ЖХВР (Rainin C₁₈, элюент: градиент от 0% до 30% CH₃CN/H₂O/0,1% ТФУ), фракции ярко-желтого цвета, содержащие продукт, объединяли, CH₃CN упаривали в вакууме, остаток лиофилизовали, при этом получали 50 мг трифторацетата 3-пирролидин-1-илметилпиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина желтого цвета.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 9,15 (ушир.s, 1Н), 8,88 (ушир.s, 1Н), 8,20 (ушир.s, 2H), 3,67 (s, 2H), 3,20 (ушир.m, 2H), 1,85-2,10 (m, 4Н).

Пример 7

3-Пиперидин-1-илметилпиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5.7-диамин

Смесь 3-хлорметилпиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина 3 (70 мг, 0,33 ммоля) и 1,0 мл пиперидина в закрытой пробирке нагревали при 80°С в течение 7 ч. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт очищали обращенно-фазной ЖХВР (Rainin C₁₈, элюент: градиент от 0% до 30% СН₃CN/Н₂O/0,1% ТФУ), фракции ярко-желтого цвета, содержащие продукт, объединяли, CH₃CN удаляли в вакууме, остаток лиофилизовали, при этом получали 111 мг трифторацетата 3-пиперидин-1-илметилпиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина желтого цвета.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 9,18 (ушир.s, 1Н), 8,95 (ушир.s, 1Н), 8,30 (ушир.s, 2H), 4,80 (s, 2H), 3,50 (ушир.m, 2H), 3,10 (ушир.m, 2H), 1,35-1,90 (m, 6Н).

Пример 8

3-Морфолин-4-илметилпиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин

Смесь 3-хлорметилпиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина 3 (200 мг, 0,95 ммоля) и 2,0 мл морфолина нагревали при 80°С в закрытой пробирке в течение 7 ч. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт очищали обращенно-фазной ЖХВР (Rainin C₁₈, элюент: градиент от 0% до 30% СН₃CN/Н₂O/0,1% ТФУ), фракции ярко-желтого цвета, содержащие продукт, объединяли, СН₃CN удаляли в вакууме, остаток лиофилизовали, при этом получали 261 мг трифторацетата 3-морфолин-4-илметилпиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина желтого цвета.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 9,25 (ушир.s, 1Н), 9,00 (ушир.s, 1Н), 8,30 (ушир. s, 2H), 4,80 (s, 2H), 3,85 (m, 4H), 3,30 (m, 4H).

Пример 9

3-(4-Метилпиперазин-1-илметил)пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин

Смесь 3-хлорметилпиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина 3 (200 мг, 0,95 ммоля) и N-метилпиперазина (2,00 мл) нагревали при 80°С в закрытой пробирке в течение 7 ч. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт очищали обращенно-фазной ЖХВР (Rainin C₁₈, элюент: градиент от 0% до 30% СН₃CN/Н₂O/0,1% ТФУ) и фракции ярко-желтого цвета, содержащие продукт, после удаления CH₃CN в вакууме, лиофилизовали, при этом получали 178 мг трифторацетата 3-(4-метилпиперазин-1-илметил)пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина желтого цвета.

¹H ЯМР (D₂O): 4,45 (s, 2H), 3,10-3,60 (m, 8H), 2,90 (s, 3H).

Пример 10

3-(4-Бензилпиперазин-1-илметил)пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин

Смесь 3-хлорметилпиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина 3 (48 мг, 0,23 ммоля) и N-бензилпиперазина (0,12 мл) в этаноле (0,1 мл) нагревали при 90°С в закрытой пробирке в течение 2 ч. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт очищали обращенно-фазной ЖХВР (Rainin C₁₈, элюент: градиент от 0% до 50% СН₃CN/Н₂O/0,1% ТФУ), фракции ярко-желтого цвета, содержащие продукт, объединяли, СН₃CN удаляли в вакууме, остаток лиофилизовали, при этом получали 26 мг трифторацетата 3-(4-бензилпиперазин-1-илметил)пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина желтого цвета.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 7,50 (m, 5Н), 4,34 (s, 2H), 4,25 (s, 2H), 2,90-3,40 (m, 8H).

Пример 11

3-(4-Нафталин-2-илметилпиперазин-1-илметил)пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин

К раствору трифторацетата 3-пиперазин-1-илметилпиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина 5 (30 мг, 0,05 ммоля) (полученного, как описано в примере 4) в сухом ДМФА (1,0 мл) при перемешивании добавляли 2-бромметилнафталин (17 мг, 0,075 ммоля), а затем карбонат калия (28 мг, 0,20 ммоля). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч, затем переносили в СН₃CN/Н₂О/0,1% ТФУ и обращенно-фазной ЖХВР (Rainin C₁₈, элюент: градиент от 0% до 30% CH₃CN/H₂O/0,1% ТФУ), фракции ярко-желтого цвета, содержащие продукт, объединяли, CH₃CN удаляли в вакууме, остаток лиофилизовали, при этом получали 19 мг трифторацетата 3-(4-нафталин-2-илметилпиперазин-1-илметил)пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина желтого цвета.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 9,37 (ушир.s, 1Н), 9,23 (ушир.s, 1Н), 8,20 (ушир.s, 1Н), 7,98 (m, 5Н), 7,57 (m, 3Н), 4,45 (ушир.s, 2H), 4,15 (ушир.s, 2H), 2,60-3,35 (m, 8H).

Пример 12

3-(4-Нафталин-1-илметилпиперазин-1-илметил)пиримидо[5,4-е][1,2,4]]триазин-5,7-диамин

К раствору трифторацетата 3-пиперазин-1-илметилпиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина 5 (70 мг, 0,12 ммоля) (полученного, как описано в примере 4) в сухом ДМФА (1,0 мл) при перемешивании добавляли 1-хлорметилнафталин (0,023 мл; 0,18 ммоля), а затем карбонат калия (65 мг, 0,470 ммоля). Смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение 24 ч, затем переносили в CH₃CN/H₂O/0,1% ТФУ и очищали обращенно-фазной ЖХВР (Rainin C₁₈, элюент: градиент от 0% до 30% СН₃CN/Н₂O/0,1% ТФУ), фракции ярко-желтого цвета, содержащие продукт, объединяли, СН₃CN удаляли в вакууме, остаток лиофилизовали, при этом получали 35 мг трифторацетата 3-(4-нафталин-1-илметилпиперазин-1-илметил)пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина желтого цвета.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 9,36 (ушир.s, 1Н), 9,23 (ушир.s, 1Н), 8,53 (ушир.s, 1Н), 8,32 (m, 1Н), 8,23 (ушир.s, 1Н), 8,00 (m, 2H), 7,60 (m, 4H), 4,68 (ушир.s, 2H), 4,23 (ушир.s, 2H), 2,80-3,40 (m, 8H).

Пример 13

3-(4-Дифенил-4-илметилпиперазин-1-илметил)пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин

К раствору трифторацетата 3-пиперазин-1-илметилпиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина 5 (30 мг, 0,05 ммоля) (полученного, как описано в примере 4) в сухом ДМФА (1,0 мл) при перемешивании добавляли 4-хлорметилдифенил (15 мг, 0,08 ммоля), а затем карбонат калия (28 мг, 0,20 ммоля). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч, затем переносили в СН₃CN/Н₂O/0,1% ТФУ и очищали обращенно-фазной ЖХВР (Rainin C₁₈, элюент: градиент от 0% до 30% СН₃CN/H₂О/0,1% ТФУ), фракции ярко-желтого цвета, содержащие продукт, объединяли, СН₃CN удаляли в вакууме, остаток лиофилизовали, при этом получали 20 мг трифторацетата 3-(4-дифенил-4-илметилпиперазин-1-илметил)пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина желтого цвета.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆): 9,60 (s, 1Н), 9,43 (s, 1H), 8,83 (ушир.s, 1H), 8,53 (ушир.s, 1H), 7,35-7,82 (m, 9H), 4,33 (s, 2H), 4,15 (s, 2H), 2,70-3,40 (m, 8H).

Пример 14

3-[4-(2-Хлорбензил)пиперазин-1-илметил]пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин

К раствору трифторацетата 3-пиперазин-1-илметилпиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина 5 (50 мг, 0,08 ммоля) (полученного, как описано в примере 4) в сухом ДМФА (1,0 мл) при перемешивании добавляли орто-хлорбензилхлорид (0,015 мл, 0,12 ммоля), а затем карбонат калия (55 мг, 0,40 ммоля). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч, затем переносили в СН₃CN/Н₂O/0,1% ТФУ и очищали обращенно-фазной ЖХВР (Rainin C₁₈, элюент: градиент от 0% до 50% СН₃CN/Н₂O/0,1% ТФУ), фракции ярко-желтого цвета, содержащие продукт, объединяли, СН₃CN удаляли в вакууме, остаток лиофилизовали, при этом получали 17 мг трифторацетата 3-[4-(2-хлорбензил)пиперазин-1-илметил]пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина желтого цвета.

¹H ЯМР (MeOH-d₄): 7,40-7,70 (m, 4H), 4,44 (s, 2H), 4,36 (s, 2H), 2,80-3,40 (m, 8H).

Пример 15

3-[4-(3-Хлорбензил)пиперазин-1-илметил]пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин

К раствору трифторацетата 3-пиперазин-1-илметилпиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина 5 (50 мг, 0,08 ммоля) (полученного, как описано в примере 4) в сухом ДМФА (1,0 мл) при перемешивании добавляли мета-хлорбензилхлорид (0,015 мл, 0,12 ммоля), а затем карбонат калия (55 мг, 0,40 ммоля). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч, затем переносили в СН₃CN/Н₂O/0,1% ТФУ и очищали обращенно-фазной ЖХВР (Rainin C₁₈, элюент: градиент от 0% до 50% CH₃CN/H₂O/0,1% ТФУ), фракции ярко-желтого цвета, содержащие продукт, объединяли, CH₃CN удаляли в вакууме, остаток лиофилизовали, при этом получали 9 мг трифторацетата 3-[4-(3-хлорбензил)пиперазин-1-илметил]пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина желтого цвета.

¹H ЯМР (MeOH-d₄): 7,40-7,58 (m, 4H), 4,32 (s, 4H), 2,80-3,40 (m, 8H).

Пример 16

3-[4-(4-Хлорбензил)пиперазин-1-илметил]пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин

К раствору трифторацетата 3-пиперазин-1-илметилпиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина 5 (50 мг, 0,08 ммоля) (полученного, как описано в примере 4) в сухом ДМФА (1,0 мл) при перемешивании добавляли пара-хлорбензилхлорид (29 мг, 0,18 ммоля), а затем карбонат калия (55 мг, 0,40 ммоля). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч, затем переносили в СН₃CN/Н₂O/0,1% ТФУ и очищали обращенно-фазной ЖХВР (Rainin C₁₈, элюент: градиент от 0% до 50% СН₃CN/Н₂О/0,1% ТФУ), фракции ярко-желтого цвета, содержащие продукт, объединяли, CH₂CN удаляли в вакууме, остаток лиофилизовали, при этом получали 21 мг трифторацетата 3-[4-(4-хлорбензил)пиперазин-1-илметил]пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина желтого цвета.

¹H ЯМР (MeOH-d₄): 8,20 (m, 4Н), 4,30 (s, 4H), 2,88-3,40 (m, 8H).

Пример 17

3-[4-(3-Метоксибензил)пиперазин-1-илметил]пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин

К раствору трифторацетата 3-пиперазин-1-илметилпиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина 5 (50 мг, 0,08 ммоля) (полученного, как описано в примере 4) в сухом ДМФА (1,0 мл) при перемешивании добавляли мета-метоксибензилхлорид (19 мг, 0,12 ммоля), а затем карбонат калия (55 мг, 0,40 ммоля). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч, затем переносили в CH₃CN/H₂O/0,1% ТФУ и очищали обращенно-фазной ЖХВР (Rainin C₁₈, элюент: градиент от 0% до 50% СН₃CN/Н₂О/0,1% ТФУ), фракции ярко-желтого цвета, содержащие продукт, объединяли, CH₃CN удаляли в вакууме, остаток лиофилизовали, при этом получали 30 мг трифторацетата 3-[4-(3-метоксибензил)пиперазин-1-илметил]пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина желтого цвета.

¹H ЯМР (MeOH-d₄): 7,40 (m, 1Н), 7,06 (m, 3Н), 4,30 (s, 2H), 4,23 (s, 2H), 3,81 (s, 3Н), 2,80-3,40 (m, 8H).

Пример 18

3-[4-(3-Фторбензил)пиперазин-1-илметил]пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин

К раствору трифторацетата 3-пиперазин-1-илметилпиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина 5 (50 мг, 0,08 ммоля) (полученного, как описано в примере 4) в сухом ДМФА (1,0 мл) при перемешивании добавляли мета-фторбензилхлорид (0,0143 мл, 0,12 ммоля), а затем карбонат калия (55 мг, 0,40 ммоля). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч, затем переносили в СН₃CN/Н₂О/0,1% ТФУ и очищали обращенно-фазной ЖХВР (Rainin C₁₈, элюент: градиент от 0% до 50% СН₃CN/Н₂O/0,1% ТФУ), фракции ярко-желтого цвета, содержащие продукт, объединяли, CH₃CN удаляли в вакууме, остаток лиофилизовали, при этом получали 11 мг трифторацетата 3-[4-(3-фторбензил)пиперазин-1-илметил]пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина желтого цвета.

¹H ЯМР (MeOH-d₄): 7,18-7,60 (m, 4H), 4,33 (s, 2H), 4,27 (s, 2H), 2,83-3,38 (m, 8H).

Пример 19

3-[4-(3-Трифторметилбензил)пиперазин-1-илметил]пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин

К раствору трифторацетата 3-пиперазин-1-илметилпиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина 5 (50 мг, 0,08 ммоля) (полученного, как указано в примере 4) в сухом ДМФА (1,0 мл) при перемешивании добавляли мета-трифторметилбензилбромид (0,021 мл, 0,14 ммоля), а затем карбонат калия (55 мг, 0,40 ммоля). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч, затем переносили в СН₃CN/Н₂O/0,1% ТФУ и очищали обращенно-фазной ЖХВР (Rainin C₁₈, элюент: градиент от 0% до 50% СН₃CN/Н₂O/0,1% ТФУ), фракции ярко-желтого цвета, содержащие продукт, объединяли, СН₃CN удаляли в вакууме, остаток лиофилизовали, при этом получали 13 мг трифторацетата 3-[4-(3-трифторметилбензил)пиперазин-1-илметил]пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина желтого цвета.

¹H ЯМР (MeOH-d₄): 7,63-7,92 (m, 4Н), 4,38 (s, 2H), 4,32 (s, 2H), 2,85-3,38 (m, 8H).

Пример 20

3-[4-(4-Трифторметилбензил)пиперазин-1-илметил]пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин

К раствору трифторацетата 3-пиперазин-1-илметилпиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина 5 (50 мг, 0,08 ммоля) (полученного, как описано в примере 4) в сухом ДМФА (1,0 мл) при перемешивании добавляли пара-трифторметилбензилбромид (0,021 мл, 0,14 ммоля), а затем карбонат калия (55 мг, 0,40 ммоля). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч, затем переносили в СН₃CN/Н₂О/0,1% ТФУ и очищали обращенно-фазной ЖХВР (Rainin C₁₈, элюент: градиент от 0% до 50% СН₃CN/Н₂O/0,1% ТФУ), фракции ярко-желтого цвета, содержащие продукт, объединяли, CH₃CN удаляли в вакууме, остаток лиофилизовали, при этом получали 22 мг трифторацетата 3-[4-(4-трифторметилбензил)пиперазин-1-илметил]пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина желтого цвета.

¹H ЯМР (MeOH-d₄): 7,77 (m, 4Н), 4,37 (s, 2H), 4,33 (s, 2H), 2,90-3,38 (m, 8H).

Пример 21

3-[4-(3-Бромбензил)пиперазин-1-илметил]пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5-7-диамин

К раствору трифторацетата 3-пиперазин-1-илметилпиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина 5 (50 мг, 0,08 ммоля) (полученного, как описано в примере 4) в сухом ДМФА (1,0 мл) при перемешивании добавляли мета-бромбензилбромид (34 мг, 0,14 ммоля), а затем карбонат калия (55 мг, 0,40 ммоля). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч, затем переносили в СН₃CN/Н₂O/0,1% ТФУ и очищали обращенно-фазной ЖХВР (Rainin C_18, элюент: градиент от 0% до 50% CH₃CN/H₂O/0,1% ТФУ), фракции ярко-желтого цвета, содержащие продукт, объединяли, СН₃CN удаляли в вакууме, остаток лиофилизовали, при этом получали 15 мг трифторацетата 3-[4-(3-бромбензил)пиперазин-1-илметил]пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамина желтого цвета.

¹H ЯМР (MeOH-d₄): 7,38-7,80 (m, 4Н), 4,30 (s, 4H), 2,85-3,38 (m, 8H).

Пример 22

3-[4-(3-Цианобензил)пиперазин-1-илметил]пиримидо[5,4-е][1,2,4]триазин-5,7-диамин