Фармацевтический компонент на основе паратиреоидного гормона человека и содержащая его фармацевтическая композиция для интраназального применения

Фармацевтический компонент на основе паратиреоидного гормона человека и содержащая его фармацевтическая композиция для интраназального применения

Иллюстрации

Показать все

Реферат

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

Настоящее изобретение касается фармацевтического компонента на основе паратиреоидного гормона человека, который обладает отличной стабильностью и, будучи использованным в качестве компонента фармацевтической композиции, обеспечивает приятные ощущения при применении. Также настоящее изобретение касается фармацевтической композиции на основе паратиреоидного гормона человека, предназначенной для интраназального введения, которая пригодна для долговременного применения.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Пептиды-производные паратиреоидного гормона человека (в дальнейшем обозначаемого как "hPTH") - это биологически активные пептиды, которые отвечают за метаболизм костной ткани и обладают высокой активностью при ее формировании (Aurbach et al., Recent Progr. Horm. Res., 1972, vol.28, p.35). hPTH представляет собой пептид, который обычно состоит из 84 аминокислотных остатков (hPTH(1-84)). Происходящий из него пептид hPTH(1-34), состоящий из 34 аминокислотных остатков, соответствующих аминокислотам 1-34 hPTH(1-84), как известно, обладает такой же фармакологической активностью, как hPTH(1-84) (Tregear et al., Hoppe-Seyler's Z. Physiol Chem., 1974, vol.355, p.415). Аминокислотные последовательности hPTH(1-84) и hPTH(1-34) приведены в SEQ ID No. 1 и 2 Перечня последовательностей соответственно.

Кальцитонин, бифосфонат и лекарственные средства, применяемые для лечения остеопороза, проявляют терапевтическое действие, ингибируя резорбцию кости, тогда как hPTH(1-84) и hPTH(1-34) стимулируют формирование кости или метаболический процесс, участвующий в ее формировании. Таким образом, ожидалось, что эти пептиды могут служить в качестве новых лекарственных средств при остеопорозе (Lane et al., J. Clin. Invest, 1998, vol.102, pp.1627-1633).

Сообщалось, что при подкожном введении человеку один раз в неделю определенной дозы hPTH(1-34) наблюдается увеличение содержания минеральных веществ в кости, а если подобным образом вводить то же самое лекарственное средство в дозе, составляющей одну пятую от предыдущей, но один раз в день в течение пяти дней, также наблюдается значительное увеличение минеральной плотности кости (МПК) (Sone et al. Miner. Electrolyte Metab, 1995, vol.21, pp.232-235). В экспериментах на животных было показано, что при подкожном введении определенных доз hPTH один раз в неделю происходит меньшее увеличение МПК по сравнению с тем, что наблюдается при разделении дозы на части (Tawaragi et al., Osteoporosis International, vol 6, suppl. 1, 1996, р.235). Из этого следует, что максимальный терапевтический эффект hPTH может быть достигнут при ежедневном введении малых доз на протяжении длительного времени, а не при кратковременном использовании больших доз с длительным промежутком между отдельными введениями. Если постоянное введение небольших доз hPTH на протяжении длительного времени обеспечит терапевтический эффект, равный или превышающий тот, что достигается кратковременным периодическим использованием больших доз, то такой режим будет желательным еще и с той точки зрения, что малые дозы hPTH, вероятно, не будут вызывать нежелательных побочных эффектов на пищеварительную и сердечно-сосудистую системы, как это наблюдается при использовании высоких доз hPTH.

Кроме того, инъекции не подходят для лечения больных остеопорозом, которым обычно требуется продолжительное лечение, так как в этом случае процедура должна проводиться под контролем врача, пациент при этом будет испытывать боль и должен регулярно посещать врача, что может быть обременительно для пациента.

Ввиду этого существует потребность в препарате для интраназального применения, который позволит пациенту принимать его на дому на протяжении длительного времени без излишней боли и не будет обременительным для него.

Однако для безопасного применения интраназального препарата на протяжении длительного времени абсолютно необходимо, чтобы он хорошо всасывался через слизистую оболочку носовой полости, не оказывал на нее раздражающего действия и вызывал приятные ощущения при применении, так как слизистая оболочка носовой полости очень чувствительна к раздражающему действию лекарств или их компонентов. В частности, для таких лекарственных средств, как те, что содержат hPTH, терапевтический эффект которого достигается при продолжительном применении, приятные ощущения особенно важны в том случае, когда средство предназначается для интраназального введения. Для получения интраназального лекарственного средства, пригодного и для продолжительного применения, необходимо выбрать активный компонент в виде лекарственного препарата или его соли, а также соответствующие добавки, установить их эффективные концентрации и найти оптимальную комбинацию. К факторам, определяющим ощущения при применении интраназального препарата, относятся его запах и наличие раздражающего действия. Таким образом, выбор лекарственных препаратов и добавок для приготовления интраназальных лекарственных средств и диапазон их концентраций очень ограничены.

Имеется коммерчески доступный препарат на основе hPTH, а именно препарат для инъекций, содержащий 5-ацетат hPTH(1-34), который применяется в диагностике для определения функциональной активности околощитовидной железы (его родовое название - teriparatide acetate, он выпускается фирмой Asahi Kasei Kogyo Corp.). Однако таких интраназальных лекарственных средств на основе hPTH, которые бы давали приятные ощущения при применении в смысле запаха и отсутствия раздражающего действия, нет.

В Japanese Patent Laid-Open No. 64-16799 описано, что при очистке hPTH(1-34) его смешивают с уксусной кислотой, используемой в процессе очистки, причем содержание уксусной кислоты в препаратах сильно варьируется от партии к партии, что затрудняет получение препаратов с одинаковым содержанием уксусной кислоты, а ее попадание в препарат ведет к снижению активности.

В том же документе далее описан способ, пригодный для повышения стабильности hPTH(1-34), в котором применяется лиофилизованная композиция hPTH(1-34) с применением винно-каменной кислоты. Однако винно-каменная кислота настолько кислая, что содержащее ее средство будет непригодным для интраназального введения.

В Japanese Patent Laid-Open No. 2-111 раскрыта порошкообразная композиция для интраназального введения на основе водорастворимой органической кислоты, которая была разработана для улучшения всасывания через нос такого биологически активного пептида, как hPTH(1-34). Однако эта композиция непригодна для долговременного применения, так как она будет прямо раздражать слизистую оболочку носовой полости в зависимости от вида и количества входящей в состав композиции органической кислоты.

Как изложено выше, пока еще не разработано средство на основе hPTH для интраназального применения, которое было бы пригодно и для продолжительного применения, обеспечивало приятные ощущения при применении и обладало хорошими стабильностью и всасываемостью.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к фармацевтическому компоненту на основе hPTH, который при применении в качестве компонента фармацевтической композиции обладает высокой стабильностью и дает приятные ощущения при применении. Настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции для интраназального введения на основе hPTH, которая пригодна для продолжительного применения.

С целью получения фармацевтической композиции для интраназального введения, описанной выше, авторы настоящего изобретения провели обширные исследования и установили, что препараты hPTH, полученные общепринятым способом, неудовлетворительны, так как они издают запах кислоты и вызывают раздражение при попадании на слизистую оболочку носовой полости, и что этот недостаток объясняется присутствием уксусной кислотой, которая применяется в процессе очистки и в очень небольшом количестве находится в составе соли hPTH или в виде примеси. На основании этих данных авторы получили фармацевтический компонент, у которого содержание уксусной кислоты понижено по сравнению с предшествующим, исследовали его и неожиданно для себя обнаружили, что данный компонент обладает высокой стабильностью, в составе фармацевтической композиции дает приятные ощущения при применении и обладает способностью к безопасному сочетанию с соответствующими количествами функциональных компонентов, добавляемых для улучшения всасывания и стабильности, а также с носителями и наполнителями, обычно применяемыми при изготовлении лекарств. Таким образом авторы совершили настоящее изобретение.

Более точно, настоящее изобретение касается фармацевтического компонента, состоящего из hPTH и уксусной кислоты, которая содержится в количестве, меньшем определенного химического эквивалента относительно веса hPTH. Также настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для интраназального введения, которая содержит hPTH в качестве активного ингредиента, а также содержит уксусную кислоту, содержащуюся в количестве, меньшем определенного химического эквивалента относительно веса hPTH.

ПЕРЕЧЕНЬ ФИГУР

На фиг.1 приведена хроматограмма, полученная методом обращеннофазовой ВЭЖХ на препарате hPTH(1-34) с содержанием уксусной кислоты 9,5%, после хранения при 40°С в течение 6 месяцев.

На фиг.2 приведена хроматограмма, полученная методом обращеннофазовой ВЭЖХ на препарате hPTH(1-34) с содержанием уксусной кислоты 2,9%, после хранения при 40°С в течение 6 месяцев.

На фиг.3 показано количество продуктов разложения (побочных продуктов) В, С и D в препаратах hPTH(1-34), содержащих различные количества уксусной кислоты, после хранения при 80°С в течение 15 часов.

На фиг.4 показана степень чистоты препаратов hPTH(1-34), содержащих различные количества уксусной кислоты, после хранения при 80°С в течение 15 часов.

На фиг.5 приведена хроматограмма, полученная методом обращеннофазовой ВЭЖХ на препарате hPTH(1-84) с содержанием уксусной кислоты 12,3%, после хранения при 80°С в течение 15 часов.

На фиг.6 показано содержание продуктов разложения (побочных продуктов) в препаратах hPTH(1-84), содержащих различные количества уксусной кислоты, после хранения при 80°С в течение 15 часов.

На фиг.7 показана степень чистоты препаратов hPTH(1-84), содержащих различные количества уксусной кислоты, после хранения при 80°С в течение 15 часов.

ПОДРОБНОЕ РАСКРЫТИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В соответствии с настоящим изобретением к группе веществ, объединяемых под общим названием hPTH, относятся пептиды, участвующие в метаболизме костной ткани, обладающие сильным стимулирующим действием на формирование костей и обладающие способностью к повышению концентрации кальция в сыворотке крови, то есть природные hPTH(1-84), состоящие из 84 аминокислотных остатков, и их производные.

Например, к hPTH относятся hPTH(1-84) (Biochemistry 17, 5723 (1978); Kimura et al., Biochem. Biophys. Res. Commun., vol.114, p.493, 1983), hPTH(1-38) (Japanese Patent Laid-Open No. 57-81448), hPTH(1-34) (Japanese Patent Laid-Open No. 9-29600; Takai et al., Peptide Chemistry, p.187, 1979), hPTH(1-34)NH2 (Japanese Patent Laid-Open No. 58-96052), [Nle^8,18]hPTH(1-34) и [Nle^8,18, Tyr³⁴]hPTH(1-34) (Japanese Patent Laid-Open No. 55-113753), [Nle^8,18, Tyr³⁴]hPTH(1-34) (Japanese Patent Laid-Open No. 61-24598), [NIe^8,18, Tyr³⁴]hPTH(1-34)NH₂ (Japanese Patent Laid-Open No. 60-34996), hPTH(1-37) (Japanese Patent Presentation [Kohyo] No. 5-505594), hPTH(2-84), hPTH(3-84), hPTH(4-84), hPTH(5-84), hPTH(6-84), hPTH(7-84), hPTH(8-84) (Japanese Patent Presentation [Kohyo] No. 4-505259) и др. Способы получения этих hPTH основываются на методах генетической инженерии или химического синтеза, как описано в вышеуказанных документах, либо эквивалентных им.

Вообще говоря, для очистки физиологически активных пептидов, полученных методами генетической инженерии или химического синтеза, применяется колоночная хроматография. Однако, поскольку hPTH является щелочным пептидом, он будет адсорбироваться на смоле в колонке, если он будет неправильно нанесен на колонку. Для предупреждения адсорбции hPTH и повышения его растворимости используют кислоту в качестве элюента. Чтобы пептид мог служить материалом для фармацевтической композиции, он должен быть заключен в лиофилизованную композицию, которая послужит исходным материалом для получения фармацевтической композиции. Для того, чтобы выполнялось это требование, кислота должна быть летучей, а это сужает спектр применяемых кислот.

Для иллюстрации предположим, к примеру, что для этой цели применяется соляная кислота. Она проявляет высокую кислотность даже при низких концентрациях, легко вызывает в побочные реакции типа гидролиза и обладает сильным коррозионным действием. Таким образом, соляная кислота не подходит для этой цели. Если для этого используют органическую кислоту, то ее выбирают из трифторуксусной, муравьиной и уксусной кислот, которые имеют низкие температуры кипения. Однако введение трифторуксусной кислоты в фармацевтическую композицию нежелательно с позиции безопасности. Применение муравьиной кислоты также ограничено вследствие ее восстановительных свойств, и она несовместима с таким пептидом, как hPTH.

Напротив, уксусная кислота является наиболее подходящим материалом для фармацевтической композиции вследствие ее безопасности и химических свойств, и эта кислота незаменима на последней стадии очистки основных пептидов. Например, успешно применяются способы очистки, основанные на обращеннофазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (обращеннофазовой ВЭЖХ) или эксклюзивной хроматографии с использованием элюента, содержащего уксусную кислоту. В этом способе уксусную кислоту добавляют в концентрации, достаточной для предупреждения адсорбции hPTH на колонке, поэтому элюированный водным раствором уксусной кислоты образец, фракция целевого пептида и полученная из нее лиофилизованная композиция содержат уксусную кислоту в концентрации, превышающей тот уровень, при котором она присутствует только в виде соли, образованной остатками основных аминокислот, то есть уксусная кислота присутствует не только как составная часть соли hPTH, но и как примесь.

Так, уксусная кислота в фармацевтическом компоненте на основе hPTH находится в двух формах: как составная часть соли hPTH и как примесь. Поскольку уксусная кислота является летучим веществом, то поддерживать ее содержание в лиофилизованной композиции на постоянном уровне трудно из-за того, что содержание уксусной кислоты в лиофилизованной композиции зависит от условий лиофилизации и от концентрации уксусной кислоты в исходном растворе до лиофилизации относительно концентрации hPTH в том же исходном растворе.

Фармацевтический компонент, описываемый в настоящем изобретении, включает hPTH и уксусную кислоту, и в нем уменьшено содержание уксусной кислоты в виде составной части соли hPTH и в виде примеси. Этот компонент, вследствие пониженного содержания уксусной кислоты, улучшает стабильность hPTH и обеспечивает приятные ощущения при введении его в состав фармацевтической композиции для интраназального введения и использовании в таковом качестве.

В фармацевтическом компоненте, описываемом настоящим изобретением, под пониженным содержанием уксусной кислоты понимается уменьшение содержания уксусной кислоты ниже определенного заданного химического эквивалента.

Поскольку hPTH(1-34) содержит 9 остатков основных аминокислот (включая остаток триптофана), одна молекула его может связывать максимум 9 молекул одновалентной кислоты (уксусной кислоты и других), образуя соль. Однако hPTH(1-34) также содержит 4 остатка кислых аминокислот, которые могут связываться с основными остатками с образованием внутримолекулярной соли. Таким образом, в отношении hPTH(1-34) по настоящему изобретению остаются 5 остатков основных аминокислот, которые можно считать доступными для связывания с уксусной кислотой, и отсюда можно вывести вес уксусной кислоты, связывающейся с одной молекулой hPTH(1-34), или количество химических эквивалентов уксусной кислоты по отношению к hPTH(1-34). Содержание уксусной кислоты можно получить с помощью уравнения I:

вес уксусной кислоты × 100%/вес пептида hPTH,

исходя из веса уксусной кислоты и пептида паратиреоидного гормона человека. Химический эквивалент уксусной кислоты по отношению к hPTH(1-34) равняется 7,3% (по весу, если не указано иначе) в пересчете на содержание уксусной кислоты.

Аналогичным образом, поскольку hPTH(1-84) содержит 19 остатков основных аминокислот (включая триптофан) и 12 остатков кислотных аминокислот, при получении препарата hPTH(1-84) по настоящему изобретению принимается, что для связывания с уксусной кислотой доступны только 7 основных аминокислотных остатков в одной молекуле hPTH(1-84), что позволяет рассчитать вес уксусной кислоты, связывающейся с одной молекулой hPTH(1-34), или количество химических эквивалентов уксусной кислоты по отношению к hPTH(1-34). Содержание уксусной кислоты можно рассчитать с помощью уравнения I, при этом химический эквивалент уксусной кислоты по отношению к hPTH(1-84) равняется 4,5% в пересчете на содержание уксусной кислоты.

Так, согласно настоящему изобретению, под содержанием уксусной кислоты в количестве, меньшем ее химического эквивалента, понимается, что уксусная кислота входит не в качестве примеси, а только как составная часть соли hPTH, причем весовое содержание ее меньше этого химического эквивалента.

Настоящее изобретение предусматривает стабильный фармацевтический компонент на основе hPTH за счет контролирования в нем содержания уксусной кислоты, а также фармацевтическую композицию для интраназального введения, содержащую этот фармацевтический компонент.

Далее, настоящее изобретение предусматривает фармацевтический компонент на основе hPTH, в котором содержание уксусной кислоты контролируется таким образом, чтобы оно находилось на заданном уровне, а также лекарственную композицию для интраназального введения, содержащую этот фармацевтический компонент.

Поскольку пептиды обычно нестабильны в растворе, в качестве материала для фармацевтического компонента используется лиофилизованный препарат. Если такой пептид, как hPTH, находящийся в виде соли, содержащей уксусную кислоту или летучее вещество в составе соли, растворить в воде или в разбавленной уксусной кислоте и использовать лиофилизованный препарат из него в качестве материала для получения фармацевтического компонента, то содержание уксусной кислоты в этом компоненте не будет оставаться на одном уровне, и это представляет проблему. Настоящее изобретение дает возможность получить водный раствор hPTH с пониженным содержанием уксусной кислоты, что позволяет вырабатывать основанный на hPTH фармацевтический компонент, устойчиво содержащий заданное количество уксусной кислоты. Таким образом, настоящее изобретение дает преимущества и с точки зрения стабильности при производстве.

В фармацевтическом компоненте по настоящему изобретению содержание уксусной кислоты по отношению к весу hPTH поддерживается ниже химического эквивалента. Например, для компонента на основе hPTH(1-34) содержание уксусной кислоты должно составлять менее 7,3% по отношению к весу hPTH(1-34), более предпочтительно 6,0% или меньше, особенно 4,0% или меньше с точки зрения стабильности и практичности, либо же более предпочтительно 4,0% или меньше, особенно 3,0% или меньше с точки зрения стабильности при производстве. С точки зрения стабильности при производстве не является предпочтительным поддерживать содержание уксусной кислоты на слишком низком уровне, так как компонент, хотя он и будет обладать отличной стабильностью и давать хорошие ощущения при применении, легко становится нерастворимым при высоких значениях рН: изоэлектрическая точка hPTH(1-34) равна 8,2 (pI=8,2). Содержание уксусной кислоты предпочтительно поддерживается на уровне 0,5% или более, особенно 1,0% или больше. С другой стороны, для компонента на основе hPTH(1-84) содержание уксусной кислоты должно составлять менее 4,5%, более предпочтительно 3,0% или меньше с точки зрения стабильности и практичности, более предпочтительно 0,1% или больше с точки зрения стабильности при производстве.

Фармацевтический компонент настоящего изобретения можно получить любым общеизвестным способом или любым эквивалентным способом. Так, снижение содержания уксусной кислоты, находящейся в виде составной части соли hPTH или в виде примеси, ниже некоторого заданного уровня осуществляется путем надлежащего использования таких известных методов, как диализ, электродиализ, ионообменная хроматография, эксклюзивная колоночная хроматография, обращеннофазовая ВЭЖХ и др. в процесс очистки hPTH, полученного методом генетической инженерии или методом химического синтеза.

Когда излишек уксусной кислоты удаляют таким методом, как диализ, электродиализ, ионообменная хроматография и др., содержание уксусной кислоты можно довести до требуемого уровня непосредственно путем измерения рН раствора hPTH или концентрации уксусной кислоты в растворе с тем, чтобы получить раствор hPTH, содержащий уксусную кислоту в требуемой концентрации.

Например, содержание уксусной кислоты в водном растворе hPTH можно довести до требуемого значения на основе существующей зависимости между содержанием уксусной кислоты в растворе и значением рН этого раствора.

Диализ может проводиться следующим образом: водный раствор hPTH, полученного методом генетической инженерии или химического синтеза, или тот же водный раствор, у которого значение рН было доведено до 5-9 с помощью раствора щелочи типа водного раствора гидроокиси натрия или аммония, помещают в диализную мембрану в форме цилиндра, через который проходят низкомолекулярные компоненты, а растворенные вещества подвергаются диализу по принципу простой диффузии, при этом удаляется уксусная кислота. Например, раствор hPTH(1-34) с содержанием уксусной кислоты в 2% получают, подвергая исходный раствор диализу до тех пор, пока рН раствора снаружи от диализной мембраны не достигнет значения рН около 6,5.

Электродиализ может проводиться следующим образом: водный раствор hPTH, полученного методом генетической инженерии или химического синтеза, или тот же водный раствор, значение рН которого было доведено до 5-9 с помощью раствора щелочи типа водного раствора гидроокиси натрия или аммония, циркулирует между двумя диализными мембранами, пропускающими компоненты с молекулярным весом 300 или меньше, и подвергается воздействию электрического поля, причем ионы уксусной кислоты мигрируют к катоду и скапливаются там, тогда как ионы свободного основания hPTH мигрируют к аноду и скапливаются там; ионы уксусной кислоты с небольшим молекулярным весом при этом свободно выходят наружу через мембраны, тогда как свободные основные ионы hPTH с большим молекулярным весом остаются циркулировать в системе диализа. Это дает возможность получить раствор hPTH, содержащий требуемое постоянное количество уксусной кислоты, путем измерения рН или ионной силы диализного раствора, тем самым проверяя снижение содержания уксусной кислоты. Например, раствор hPTH(1-34) с содержанием уксусной кислоты в 2% можно получить, подвергая исходный раствор электродиализу до тех пор, пока рН диализного раствора не достигнет значения около 6,5.

При ионообменной хроматографии уксусная кислота адсорбируется и удаляется, связываясь с ионообменной смолой, находящейся в щелочной форме. Например, водный раствор hPTH, полученного методом генетической инженерии или химического синтеза, наносят на колонку с анионообменной смолой на основе четвертичного или вторичного аммониевого основания; уксусная кислота связывается со смолой посредством ион-ионных взаимодействий, а несвязавшуюся фракцию, просто проскакивающую через колонку, собирают, получая раствор hPTH с пониженным содержанием уксусной кислоты. Это дает возможность получить раствор hPTH с заданным содержанием уксусной кислоты путем варьирования количества ионообменной смолы по отношению к весу hPTH в растворе. Например, для получения раствора hPTH(1-34) с содержанием уксусной кислоты в 2% можно использовать такую навеску смолы, чтобы рН элюата достигло значения около 6,5.

Эксклюзивная колоночная хроматография может проводиться следующим образом: водный раствор hPTH, полученного методом генетической инженерии или химического синтеза, или тот же водный раствор, значение рН которого было доведено до 5-9 с помощью раствора щелочи типа водного раствора гидроокиси натрия или аммония, наносят на колонку, а для элюирования используют водный раствор, содержащий органический растворитель типа ацетонитрила, при этом происходит удаление уксусной кислоты. Это дает возможность получить раствор hPTH с заданным содержанием уксусной кислоты путем изменения рН водного раствора hPTH, наносимого на колонку. Например, для получения раствора hPTH(1-34) с содержанием уксусной кислоты в 2% на колонку наносят раствор hPTH, значение рН которого было доведено до приблизительно 6,5, и собирают фракцию элюата, содержащую hPTH.

При обращеннофазовой ВЭЖХ используется водный раствор hPTH, полученного методом генетической инженерии или химического синтеза, или тот же водный раствор, у которого значение рН было доведено до 5-9 с помощью раствора щелочи типа водного раствора гидроокиси натрия или аммония. Раствор наносят на колонку С18 или С4, уравновешенную водой, и используют, к примеру, воду для элюирования неорганических солей. Затем пропускают водный раствор, содержащий органический растворитель типа ацетонитрила, чтобы элюировать hPTH, адсорбировавшийся на колонке, получая при этом раствор hPTH с пониженным содержанием уксусной кислоты.

Раствор hPTH с заданным содержанием уксусной кислоты можно получить путем доведения рН водного раствора hPTH, наносимого на колонку. Также раствор hPTH с заданным содержанием уксусной кислоты можно получить, делая раствор hPTH с очень малым содержанием уксусной кислоты, например, настолько малым, как это позволяет метод, а затем добавляя такое количество уксусной кислоты, которое необходимо для получения раствора hPTH с заданным содержанием уксусной кислоты. Например, раствор hPTH(1-34), из которого было удалено слишком много уксусной кислоты, разбавляют водой до концентрации 10 мг/мл и добавляют в него уксусную кислоту до тех пор, пока рН раствора не достигнет значения около 6,5, при этом образуется раствор hPTH(1-34) с содержанием уксусной кислоты в 2%.

Полученный вышеописанным способом раствор hPTH лиофилизируют общепринятым методом, получая фармацевтический компонент настоящего изобретения.

Лекарственный компонент настоящего изобретения может включать водорастворимые органические кислоты либо, предпочтительно, по меньшей мере одну кислоту из числа лимонной, адипиновой и гликолевой кислот с целью улучшения всасывания этого компонента слизистой оболочкой. Фармацевтический компонент, дополнительно включающий такую органическую кислоту, обеспечит высокую стабильность, а также хорошие ощущения при введении его не парентеральным путем, а другим способом, особенно при интраназальном введении.

Соответственно, фармацевтический компонент настоящего изобретения может применяться в качестве компонента фармацевтической композиции для интраназального введения, пригодной для долговременного применения.

Кроме того, фармацевтическая композиция настоящего изобретения для интраназального введения обладает совместимостью с целым рядом функциональных компонентов, а также с носителями, наполнителями, повышающими вязкость веществами, консервантами, стабилизаторами, антиоксидантами, связующими веществами, диспергирующими веществами, увлажнителями, смазывающими веществами, красителями, ароматизаторами, корригентами (corrigent), суспендирующими веществами, эмульгаторами, солюбилизаторами, буферными и поддерживающими изотоничность веществами, детергентами, смягчающими веществами, серосодержащими восстановителями и др. Таким образом, фармацевтическая композиция настоящего изобретения обладает совместимостью с различными функциональными компонентами, которые могут быть введены в ее состав для улучшения всасывания, стабильности в сухом виде и т.д. по мере необходимости.

В качестве носителей или наполнителей могут быть использованы вещества, хорошо или умеренно растворимые в воде: сахара, полисахариды, декстрины, целлюлозы, синтетические или полусинтетические полимеры, аминокислоты, полиаминокислоты, белки и фосфолипиды.

Сахара (моносахариды, олигосахариды) могут включать, к примеру, D-маннитол, глюкозу, лактозу, фруктозу, инозитол, сахарозу, мальтозу и др., а полисахариды могут включать декстран, пуллулан, альгиновую кислоту, гиалуроновую кислоту, пектиновую кислоту, фитиновую кислоту, фитин и др. К декстринам относятся α-циклодекстрин, β-циклодекстрин, γ-циклодекстрин, декстрин, гидроксипропилкрахмал, гидроксиэтилкрахмал и др.

К целлюлозам относятся метилцеллюлоза, этилцеллюлоза, гидроксиэтилцеллюлоза, гидроксипропилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы и др.

Синтетические или полусинтетические полимеры могут включать поливиниловый спирт, карбоксивиниловые полимеры, полиэтиленгликоль, поливинилпирролидон (PVP), полиакрилат натрия, полиактовую кислоту (polyactic acid) и др.

Аминокислоты могут включать глицин, таурин, а полиаминокислоты - полиглутаминовую кислоту, полиаспарагиновую кислоту, полиглицин, полилейцин и др.

Белки могут включать желатин и другие; кроме того, хитин и хитозан.

Из числа этих носителей или наполнителей особенно предпочтительны сахароза, мальтоза, α-циклодекстрин, β-циклодекстрин, декстрин, D-маннитол, инозитол, лактоза, декстран, метилцеллюлоза, гидроксипропилцеллюлоза, поливиниловый спирт, пуллулан и др.

Помимо них, также сорбиновая кислота, бензалконийхлорид, цетилпиридинийхлорид, бензэтонийхлорид, парабены: метил-параоксибензоат, этил-параоксибензоат, пропил-параоксибензоат, бутил-параоксибензоат и др., гуммиарабик, сорбитол, стеарат магния, тальк, диоксид кремния, микрокристаллическая целлюлоза, крахмал, фосфат кальция, растительное масло, карбоксиметилцеллюлоза, лаурилсульфат натрия, вода, этанол, глицерин и сироп.

Типичные примеры поверхностно-активных веществ приведены ниже. В составы по изобретению можно добавлять один из них или комбинации из более чем двух детергентов.

В качестве неионных детергентов могут использоваться такие сложные эфиры, как эфиры ангидросорбита и жирных кислот, например, сорбитанмонокаприлат, сорбитанмонолаурат, сорбитанмонопальмитат и др.; эфиры глицерина и жирных кислот, например, глицерилмонокаприлат, глицерилмономиристат, глицерилмоностеарат и др.; эфиры полиглицерина и жирных кислот, например, декаглицерилмоностеарат, декаглицерилдистеарат, декаглицерилмонолинолеат и др.; эфиры полиоксиэтилен-производных ангидросорбита и жирных кислот, как, например, сорбитанполиоксиэтиленмонолаурат, сорбитанполиоксиэтиленмоноолеат, сорбитанполиоксиэтиленмоностеарат, сорбитанполиоксиэтиленмонопальмитат, сорбитанполиоксиэтилентриолеат, сорбитанполиоксиэтилентристеарат и др.; эфиры полиоксиэтилен-производных сорбита и жирных кислот, как, например, сорбитполиоксиэтилентетрастеарат, сорбитполиоксиэтилентетралаурат и др.; эфиры полиоксиэтилен-производных глицерина и жирных кислот типа глицеринполиоксиэтиленмоностеарата; эфиры полиэтиленглицерина и жирных кислот типа полиэтиленглицерилдистеарата; а также простые эфиры, такие как полиоксиэтиленалкиловые эфиры типа полиоксиэтиленлаурилового эфира; полиоксиэтилен-полиоксипропиленалкиловые эфиры, например, полиоксиэтилен-полиоксипропиленгликолевый эфир, полиоксиэтилен-полиоксипропиленпропиловый эфир, полиоксиэтилен-полиоксипропиленцетиловый эфир и др.; полиоксиэтилен-алкилфениловые эфиры типа полиоксиэтилен-нонилфенилового эфира; полиоксиэтилен-производные касторового масла, например, полиоксиэтилен-производное касторового масла, полиоксиэтилен-производное гидрогенизированного касторового масла; полиоксиэтилен-производные желтого пчелиного воска типа сорбитполиоксиэтилен-производного пчелиного воска; полиоксиэтилен-производные ланолина типа полиоксиэтиленланолина; и полиоксиэтилен-производные амидов жирных кислот со значением гидрофильно-липофильного баланса от 6 до 18 типа полиоксиэтиленстеариламида.

Анионные детергенты выбирают из солей алкилсульфатов (от С₁₀ до C₁₈), например цетилсульфат натрия, лаурилсульфат натрия, олеилсульфат натрия и др.; соли сульфатов полиоксиэтиленалкиловых эфиров, у которых среднее число молей этиленоксида равно 2-4, а алкильная группа содержит 10-18 атомов углерода, например натриевая соль сульфата полиоксиэтиленлаурилового эфира; и соли алкиловых эфиров сульфоянтарной кислоты, у которых алкильная группа состоит из 8-18 атомов углерода, например натриевая соль лаурилового эфира сульфоянтарной кислоты.

Природные детергенты выбирают из лецитина, фосфоглицеролипидов, сфинголипидов типа сфингомиелина и эфиры сахарозы и жирных кислот (от С₁₂ до С₁₈).

Серосодержащие восстановители выбирают из N-ацетилцистеина, N-ацетилгомоцистеина, липоевой кислоты, тиоэтанола, тиоэтаноламина, тиоглицерина, тиосорбита, тиогликолевой кислоты и ее соли, тиосульфата натрия, глутатиона, тиоалкановых кислот (от C₁ до С₇), имеющих сульфгидрильную группу.

Антиоксиданты выбирают из изоаскорбиновой кислоты (erysorbic acid), дибутилгидрокситолуола, бутилгидроксианизола, α-токоферола, токоферола ацетата, L-аскорбиновой кислоты и ее соли, L-аскорбилпальмитата, L-аскорбилстеарата, бисульфита натрия, сульфита натрия, триамилгаллата, пропилгаллата, а также хелатообразующих веществ, например, кальций-динатриевой соли ЭДТА, пирофосфата натрия, метафосфата натрия и др.

В фармацевтической композиции настоящего изобретения hPTH может находиться в количестве 0,01-20%, предпочтительно 0,05-10%, а органическую кислоту можно добавлять по необходимости. Исходное содержание органической кислоты составляет 0,05-99,5%, предпочтительно 0,1-99,0%. Носитель или наполнитель, добавляемый обычно при приготовлении лекарственных препаратов, можно добавить по необходимости, или он может находиться исходно, например, в количестве 0,01-99,5%. Различные другие функциональные компоненты можно добавлять по необходимости, или они могут находиться исходно, например, в количестве 0,05-99,5%.

Приготовление фармацевтической композиции для интраназального введения по настоящему изобретению может осуществляться любым известным способом.

Например, в качестве фармацевтической композиции может служить фармацевтический компонент на основе hPTH, в котором уменьшено содержание уксусной кислоты. С другой стороны, в фармацевтический компонент на основе hPTH с пониженным содержанием уксусной кислоты можно по мере необходимости добавить носитель или наполнитель, добавляемый обычно при приготовлении фармацевтических препаратов, а также органическую кислоту и различные другие функциональные компоненты, и полученный состав использовать в качестве фармацевтического компонента. Органическая кислота может служить для замены уксусной кислоты или просто в качестве добавки. Например, в фармацевтический компонент на основе hPTH добавляют носитель или наполнитель, обычно добавляемый при приготовлении фармацевтических препаратов, органическую кислоту и различные функциональные компоненты, получая смесь, которую растворяют в дистиллированной воде, а раствор лиофилизируют, и при этом образуется однородная композиция.

В качестве альтернативы фармацевтический компонент на основе hPTH и носитель или наполнитель, обычно добавляемый при приготовлении фармацевтических препаратов, вместе растворяют в дистиллированной воде, затем в раствор добавляют органическую кислоту и различные функциональные компоненты и раствор лиофилизируют, при этом образуется однородная композиция. В другом варианте фармацевтический компонент на основе hPTH, органическую кислоту и различные функциональные компоненты вместе растворяют в дистиллированной воде и раствор лиофилизируют, по мере необходимости нужное количество лиофилизованного соединения растворяют вместе с носителем или наполнителем, обычно используемым при приготовлении фармацевтических препаратов, и при этом образуется однородная композиция.

Фармацевтический компонент настоящего изобретения может находиться в различных лекарственных формах в зависимости от предусмотренного способа введения: он может находиться в форме, предназначенной для нанесения на слизистые оболочки прямой кишки, носовой полости, ротовой полости и т.д. Ф