Перекрывающее кровоток твердофазное средство с покрытием из иммобилизованного связывающего средства

Перекрывающее кровоток твердофазное средство с покрытием из иммобилизованного связывающего средства

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Предпосылки создания изобретения

Область техники

Настоящее изобретение относится к композициям и способам получения терапевтического эффекта путем перекрытия кровотока за счет активации тромбоцитов в качестве инициирующего события.

Описание предшествующего уровня техники

Функция тромбоцитов в организме заключается в ограничении кровопотери в случае повреждения сосудов. Обычно тромбоциты циркулируют вместе с другими клеточными компонентами крови в составе смеси различных белков плазмы крови, многие из которых играют ключевую роль в процессе коагуляции. В случае обнажения субэндотелиального слоя сосуда происходит последовательность событий, ограничивающих кровопотерю из поврежденного сосуда. Циркулирующие тромбоциты, входя в контакт с компонентами обнажившегося субэндотелиального слоя, 1) связываются и сцепляются, 2) распространяются по обнажившейся поверхности, 3) активируются, что выражается в высвобождении содержащихся в них гранул, 4) группируют и привлекают другие циркулирующие тромбоциты из кровотока и 5) формируют эффективную пробку, сгусток и/или тромб, препятствующий оттоку крови из сосуда.

В отличие от каскада коагуляции, который представляет собой процесс, частично характеризующийся преобразованием фибриногена в фибрин, тромбоциты коалесцируют вокруг поврежденной области и соединяются за счет мостиковых молекул, которые связываются со специфическими рецепторами на поверхности тромбоцита. Исходное образование мостиков между тромбоцитами и субэндотелиальным слоем зависит от взаимодействия между рецептором Ib-гликопротеина (GpIb) на поверхности тромбоцита и фактором фон Виллебранда (ФФВ) в субэндотелиальном слое (т.е. иммобилизованным ФФВ). Данное взаимодействие является само по себе уникальным, поскольку обычные тромбоциты, циркулирующие в крови, часто контактируют с растворимым ФФВ, но не активируются и не связывают растворимый ФФВ. Как показали эксперименты, проводившиеся в искусственных условиях, иммобилизация растворимого ФФВ на поверхности способствует связыванию и активации тромбоцитов. После активации тромбоцитов происходит видоизменение дополнительного рецептора, IIb/IIIa-гликопротеина (GPIIb/IIIa), что способствует связыванию нескольких белков плазмы крови и тем самым связыванию тромбоцитов друг с другом. Помимо фибриногена, растворимый ФФВ связывает активизированный рецептор GPIIb/IIIa, который в очередь становится иммобилизованным и способным связывать другие тромбоциты посредством GPIb и GPIIb/IIIa.

Гиперактивные тромбоциты способны индуцировать несвоевременное тромбообразование, в результате которого сокращается снабжение кровью различных органов и тканей. Основным примером этого является тромбообразование, вызванное кровотоком, проходящим через стенотический (суженный) сосуд, питающий сердечную мышцу. Сокращение притока крови к сердечной мышце приводит к инфаркту и впоследствии параличу сердца (некрозу клеток сердечной мышцы). В том случае, если эмбол или тромб закупоривает кровеносные сосуды, питающие головной мозг, возникает ишемия головного мозга (преходящее нарушение кровообращения; инсульт).

Известны другие патологические состояния, вызванные неуместной антителоопосредуемой активацией тромбоцитов. Известна обусловленная гепарином тромбоцитопения, которая характеризуется резким сокращением числа тромбоцитов и тромбообразованием в местах ранее существовавшей патологии. У 1-5% всех пациентов, получающих нефракционированный гепарин в качестве антикоагулянта, стимулирующего кровоток, формируются антитела, связывающие гепарин в комплексе с гранулами белка тромбоцита. В результате связывания антителом гепарина и белка в комплекс, формирующийся на поверхности тромбоцитов, происходит быстрая активация тромбоцитов и локализованное тромбообразование. Это, в свою очередь, приводит к инфаркту пораженных областей.

Тромбоз является подробно описанным следствием рака. Существуют противоречивые данные относительно того, является ли состояние гиперкоагуляции предвестником рака. Было проведено множество исследований, целью которых являлось доказать протромботическую тенденцию большинства неоплазий и новообразований. Как полагают, тромбоз является наиболее часто встречающимся осложнением у пациентов, страдающих явными злокачественными заболеваниями.

Ключевым аспектом при разработке эффективных противораковых средств является возможность создать средства, которые избирательно уничтожают раковые клетки, обладая при этом относительно слабым или вообще не обладая действием на здоровые ткани. Данная задача была трудно решаемой с учетом незначительных качественных различий между новообразованиями и здоровыми тканями. Вследствие этого множество исследований, проводившихся за последнее время, имело целью установить специфические для опухолей «маркерные антигены», которые могли бы служить иммунологической мишенью при проведении химиотерапии и диагностики. Было выявлено множество специфических для опухолей или квазиспецифических для опухолей (сопутствующих опухолям) маркеров, являющихся антигенами раковых клеток, которые могут распознаваться специфическими антителами.

К сожалению, чаще всего специфические для опухолей антитела сами по себе не способны оказывать достаточное противораковое действие для того, чтобы их можно быть использовать при лечении рака. Иммунотоксины, эффективно действующие на лимфомы, относительно малоэффективны при лечении плотных опухолей, таких как карциномы. Основной причиной этого является тот факт, что плотные опухоли в целом непроницаемы для молекул, имеющих размеры, сравнимые с размерами антител; как показывают исследования на людях, часто удельное усвоение введенной дозы составляет менее 0,001% на грамм массы опухоли. Кроме того, антитела, проникающие в опухолевое образование, распределяются неравномерно, что объясняется рядом причин. Во-первых, плотно упакованные клетки опухоли и фиброзные опухолевые стромы представляют собой труднопреодолимый физический барьер для макромолекулярного переноса, что в сочетании с отсутствием лимфатического дренажа создает повышенное тканевое давление в ядре опухоли, уменьшающее экстравазацию и конвекцию тканевой жидкости. Во-вторых, распределение кровеносных сосудов в большей части опухолей является неорганизованным и неоднородным. В результате этого некоторые опухолевые клетки находятся на большом расстоянии от капилляров, в связи с чем способствующее экстравазации антитело должно диффундировать в значительном пространстве для того, чтобы достигнуть отдаленные опухолевые клетки и связать их. В-третьих, все антитела, проникающие в опухоль, поглощаются в околососудистых областях первыми опухолевыми клетками, которые им встретились, в результате чего антитела не достигают расположенные на большем удалении опухолевые клетки.

Одним из способов преодоления недостатков методики воздействия на опухоли антителами могло бы стать действие возбуждающими тромбоз средствами на сосудистую сеть опухоли, а не на саму опухоль.

Авторы настоящего изобретения предполагают, что такой подход имеет ряд преимуществ по сравнению с непосредственным действием на опухолевые клетки. Во-первых, клетки-мишени обеспечивают непосредственный доступ для сосудистого введения терапевтических средств, что позволяет быстро локализовать значительную долю введенной дозы. Во-вторых, поскольку через каждый капилляр в тысячи клеток окружающей опухоль хорды поступает кислород и питательные вещества, даже незначительное повреждение сосудистой сети опухоли способно вызвать лавинообразный некроз опухолевых клеток.

Настоящее изобретение также относится к композициям и способам лечения болезненного роста тканей, болезненного кровотечения (во время или после хирургического вмешательства, послеродового), внематочной беременности, предлежащей плаценты, приросшей плаценты и фибромы матки.

При некоторых клинических обстоятельствах желательно остановить приток крови к ткани путем перекрытия соответствующей сосудистой сети. Примерами являются геморрагический удар, наличие боковой венозной подкожной ветви при имплантации подкожного обходного сосудистого шунта, лечение аневризмы аорты, коррекция пороков развития сосудов и лечение плотных опухолей.

Для перекрытия кровотока применяются разнообразные методики и вещества, включая эмболотерапию. Примеры эмболотерапии включают использование частиц, образованных разнообразными веществами, включая поливиниловый спирт (заявка РСТ WO 0023054, Боскетти), акриламин (патент США US 5635214, Боскетти и др; патент США US 5648100, Боскетти и др.), полиметилметакрилат (патент США US 5344452, Лемперле), физические пробки из коллагена (патент США US 5456693, Констон и др.) и спирали (патент США US 5639277, Мариант и др.). Эмболотерапия предусматривает доставку таких веществ к сосудистой сети-мишени при помощи катетера. Поскольку сосудистая сеть в любой заданной области состоит из крупных артерий, артериол, метаартериол и капилляров, диаметр которых постепенно уменьшается, доставленные вещества (эмбол) продолжают перемещаться вместе с кровотоком до тех пор, пока они не окажутся в более мелком кровеносном сосуде, тем самым предотвращая приток крови к соответствующей ткани.

Настоящее изобретение отличается новизной и направлено на решение нерешенных в медицине задач за счет использования твердофазного средства, такого как микрочастицы, или спирали, или стенты, покрытые фактором фон Виллебранда (ФФВ), взятым у млекопитающих. При этом достигается терапевтический эффект путем доставки твердофазного связывающего тромбоциты средства к цели и инициирования эффективного тромбообразования, ведущего к закупориванию соответствующей сосудистой сети.

Краткое изложение сущности изобретения

Настоящее изобретение относится к способам лечения и композициям для воздействия на ткани и/или органы и соответствующую сосудистую сеть, являющиеся по своей природе гиперплазированными, или новообразованиями, или геморрагическими, для чего используются твердофазные средства, возбуждающие тромбообразование посредством локализованной активации тромбоцитов. Композиция по изобретению содержит средство для захвата тромбоцитов твердофазным средством, таким как спираль или стент, или частица. В некоторых вариантах осуществления изобретения твердофазное средство одновременно захватывает и активирует тромбоциты. В способе по изобретению используется локализация накопления тромбоцитов и активация тромбоцитов на частицах твердофазного средства с целью вызвать последующее тромбообразование и тем самым ограничить приток крови к области-мишени без индуцирования общего или системного протромботического состояния.

На первый взгляд намеренное индуцирование тромбоза у пациента алогично, поскольку хорошо известно, что тромбоз в существенной степени способствует заболеваемости и смертности. В настоящем изобретении опосредованное тромбоцитами перекрытие кровотока твердофазным средством основано на сайт-специфическом индуцировании тромбоза с использованием природной способности организма индуцировать тромбоз в ответ на действие иммобилизованного фактора фон Виллебранда (ФФВ) или иных активирующих тромбоциты средств, обладающих местным действием. Несмотря на то что ФФВ циркулирует в кровотоке в растворенном виде, он способен захватывать тромбоциты и индуцировать их активацию лишь после того, как обнажатся входящие в состав субэндотелиального слоя его молекулы или такие молекулы свяжутся с обнажившимся коллагеном субэндотелиального слоя.

Контакт твердофазного связывающего тромбоциты средства с кровью пациента (ex vivo) или кровотоком (in vivo) индуцирует связывание тромбоцитов и их локализованную активацию, ведущую к накоплению тромбоцитов вокруг твердофазного средства, что приводит к тромбозу и прекращению притока крови к ткани, которую питает закупоренный кровеносный сосуд (сосуды). Число клеток, включая опухолевые клетки или клетки гиперплазированной ткани, сокращается, либо они отмирают в результате прекращения местного притока крови. Данный подход позволяет избежать системной активации тромбоцитов и тромбоза, с учетом того факта, что иммобилизованный ФФВ (но не растворимый ФФВ) связывает и активирует циркулирующие тромбоциты. Таким образом, способы и композиции по настоящему изобретению являются косвенным средством лечения патологического состояния, такого как рак, гиперплазированные клетки, чрезмерное кровотечение или артериовенозные пороки развития.

В настоящем изобретении усовершенствованы существующие способы лечения плотных опухолей, гиперплазированных тканей, чрезмерного кровотечения и артериовенозных пороков развития, а также любых иных заболеваний или состояний, в которых лечебную роль могут играть тромбоциты (в покое и/или активированные).

Аналогично существующему патологическому состоянию (т.е. обусловленной гепарином тромбоцитопенией (ОГТ)), локализованная активация тромбоцитов может быть усилена при помощи опосредованного Fc-фрагментом процесса путем индуцирования или включения Fc-фрагмента человека в твердофазное средство либо путем направления отдельных антител в область-мишень. Активация тромбоцитов при синдроме ОГТ приводит к локализованному тромбозу и прекращению кровоснабжения пораженной области. В результате происходит некроз пораженной ткани.

Распространение или степень сайт-специфического тромбоза может контролироваться различными способами. При подавлении активации тромбоцитов с использованием антитромбоцитарных средств (например, ингибиторов GPIIb/IIIa, аспирина, дипиридамола и т.д.) происходит уменьшение предрасположенности к индуцированию тромбоза заданным, титруемым способом. В качестве средства контроля локальной активации тромбоцитов также может использоваться изменение местного кровотока, кровяного давления и температуры ткани.

Типичными васкуляризованными опухолями являются плотные опухоли, в частности карциномы, нуждающиеся в существенном кровоснабжении. Примеры плотных опухолей, к которым относится настоящее изобретение, входят, не ограничиваясь ими, первичные злокачественные опухоли легких, молочной железы, яичников, желудка, поджелудочной железы, гортани, пищевода, яичек, печени, околоушной железы, желчных путей, ободочной кишки, прямой кишки, шейки, матки, эндометрия, почек, мочевого пузыря, простаты, щитовидной железы, головы и шеи, меланомы, глиомы, нейробластомы, нейроэндокринные опухоли и тому подобные. Другие состояния, к которым относится настоящее изобретение, включают, не ограничиваясь ими, вторичные (метастатические) опухоли упомянутого выше типа, вызванные раком боли, артериовенозные пороки развития, фибромы матки, тазовую гиперемию, меноррагию, варикозные расширения вен, кровохарканье, аневризмы, аневризмы висцеральных артерий, псевдоаневризмы и внутренние истечения.

Предпочтительный способ по изобретению заключается в том, что изготавливают спираль или стент, покрытый рекомбинатным ФФВ или ФФВ млекопитающих, и вводят покрытое ФФВ средство в кровоток пациента, такого как человек, животное или подопытное животное, после чего ФФВ поступает или накапливается в заданной области-мишени. Спирали или стенты могут быть выполнены из любого приемлемого вещества, способного удерживать ФФВ внутри спирали или стента или на поверхности спирали или стента в течение неопределенного или меняющегося периода времени.

Решение проблемы неограниченного роста плотных опухолей заключается в действии на кровеносные сосуды опухоли. Данный подход имеет ряд преимуществ по сравнению со способами, в которых непосредственному действию подвергаются опухолевые клетки. Во-первых, кровеносные сосуды опухоли обеспечивают непосредственный доступ для сосудистого введения терапевтических средств, что позволяет быстро локализовать значительную долю введенной дозы. Во-вторых, поскольку через каждый капилляр в тысячи клеток окружающей опухоль хорды поступает кислород и питательные вещества, даже незначительное повреждение сосудистой сети опухоли способно вызвать обширный некроз опухолевых клеток. Наконец, кровеносные сосуды одинаковы у различных опухолей, что делает целесообразным создание единого средства для лечения многочисленных разновидностей рака.

Подробное описание изобретения

В настоящем изобретении предложены композиции и способы захвата тромбоцитов в заранее заданной области, активации тромбоцитов и использования природной функции тромбоцитов с целью достижения благоприятного терапевтического результата. Согласно настоящему изобретению тромбоциты могут представлять собой циркулирующие тромбоциты или тромбоциты, полученные из внешнего источника. Также согласно настоящему изобретению тромбоциты могут быть направлены в специфическую область, после чего с целью прервать, нарушить или сократить приток крови к такой области может быть использована природная способность тромбоцитов индуцировать тромбообразование. Сокращение притока крови сопровождается сокращением поступления питательных веществ в возбудитель заболевания или состояния, такого как опухоль, в результате чего уменьшается размер возбудителя заболевания. Очевидно, что уменьшение размера опухоли является явно благоприятным терапевтическим эффектом. В некоторых случаях сокращение кровоснабжения области-мишени облегчает боли.

В настоящем изобретение также предусмотрено целенаправленное действие тромбоцитами на определенную ткань, которая поддается избирательному целенаправленному действию, например гиперплазированную ткань, с использованием твердофазного средства, способного связывать и активировать тромбоциты. В соответствующих вариантах осуществления изобретения целенаправленное действие относится к твердой фазе, содержащей компонент, обеспечивающий направленную доставку, например лиганд или тому подобный компонент, который обладает способностью специфически связывать заданный участок или ткань. В других вариантах осуществления изобретения целенаправленное действие может заключаться в доставке композиции по настоящему изобретению к области опухоли или вблизи нее, например, при помощи катетера, стента или спирали. В результате активации тромбоцитов в предварительно выбранной области достигается благоприятный терапевтический результат за счет сокращения поступления питательных веществ в ткань или такую область.

В настоящем изобретении предложены композиции и способы индуцирования тромбообразования, в которых тромбоциты захватываются твердофазным средством, индуцируется активация тромбоцитов и происходит образование тромба. Тромбообразование в сосудистой сети-мишени приводит к сокращению кровоснабжения соответствующей ткани. Композиции и способы по настоящему изобретению, в которых содержащее ФФВ твердофазное средство (например, покрытые ФФВ частицы) захватывает тромбоциты, могут применяться для лечения рака, гиперплазии, фибром матки, тазовой гиперемии, меноррагии, артериовенозных пороков развития, нейроэмболии, варикозных расширений вен, кровохарканья, аневризм висцеральных артерий, артериальных аневризм, и внутренних истечений и тому подобного. Кроме того, композиции и способы по настоящему изобретению обеспечивают благоприятный терапевтический результат у реципиентов композиции.

В предпочтительном варианте осуществления изобретения используется ФФВ, взятый у млекопитающего. В более предпочтительном варианте осуществления изобретения ФФВ берут у человека. В наиболее предпочтительном варианте осуществления изобретения ФФВ берут у свиней.

ФФВ может иметь природное, синтетическое происхождение, являться рекомбинантным или представлять собой пептидную последовательность, соответствующую биологически активному участку ФФВ. В наиболее предпочтительном варианте осуществления изобретения ФФВ является рекомбинантным.

В настоящем изобретении также предложены композиции, которые непосредственно или косвенно через буфер связывают средство, связывающее тромбоциты (например, ФФВ), с твердофазным средством, до тех пор, пока средство, связывающее тромбоциты, сохраняет способность связывать тромбоциты. Используемый в описании термин буфер относится к группе инертных или активных молекул, которые физически разделяют средство, связывающее тромбоциты, и поверхность твердофазного средства. Ниже приведены примеры таких буферов. Непосредственное связывание может происходить ковалентно или нековалентно. Косвенное связывание происходит через буферы, которые включают, не исчерпываясь ими, пептидные «ножки», буферные антитела, буферные участки антител, буферные гибридные белки или буферные углеводы. Такие буферы обычно действуют лишь в качестве мостиков между частицей и ФФВ, тем не менее буферы могут также использоваться для изменения степени активации тромбоцитов. Например, в качестве буфера может использоваться Fc-компонент, за счет чего обеспечивается усиленная активация тромбоцитов на твердофазном средстве и вокруг твердофазного средства. Для связывания ФФВ с твердофазным средством могут использоваться способы, известные специалистам в данной области техники. Примеры связывающих средств включают, не ограничиваясь ими, глутаральдегид и карбодиимид.

В предпочтительном варианте осуществления изобретения позиционирование композиций, не имеющих целенаправленно действующего средства, внутри сосудистой системы млекопитающих осуществляется путем направленного позиционирования кровотока, которое осуществляют после доставки композиций при помощи микрокатетера сверхизбирательного действия.

Композиции по настоящему изобретению также могут включать средство или обеспечивающий направленную доставку компонент, способный связываться с антигеном-мишенью или областью-мишенью на сосудистом эндотелии или ткани-мишени, что способствует локализации твердофазного средства в выбранной области. Примеры средств или компонентов, обеспечивающих направленную доставку, хорошо известны специалистам в данной области техники и включают, не ограничиваясь ими, антитела, лиганды, рецепторы, гормоны, лектины и кадерины или их участки или фрагменты.

В предпочтительном варианте осуществления изобретения средство, обеспечивающее направленную доставку, включает молекулу антитела или подобного антителу вещества, содержащую биотиновый, биотиномиметический и/или пептидный компонент. В другом предпочтительном варианте осуществления изобретения молекулы антитела или подобного антителу вещества направлены на комплекс фактор роста-рецептор.

Композиции по изобретению также могут включать одно или несколько из следующих веществ: один или несколько модуляторов связывания тромбоцитов (например, ингибиторы или усилители), один или несколько регуляторов или модуляторов тромбообразования или один или несколько компонентов пути активации комплемента.

В ходе осуществления способов по настоящему изобретению также вводят твердофазное средство, способное связывать тромбоциты в заданной области, индуцируют активацию захваченных тромбоцитов, вводят бифунциональное связывающее средство, имеющее антигенную детерминанту и область связывания тромбоцитов, контролируют образование тромбов путем изменения температуры одной или нескольких композиций по изобретению или путем изменения температуры в заданной области.

В ходе осуществления способов по настоящему изобретению дополнительно выполняют одно или несколько из следующих действий: вводят один или несколько модуляторов связывания тромбоцитов, вводят один или несколько модуляторов тромбообразования, вводят один или несколько компонентов пути активации комплемента, вводят один или несколько лигандов и/или антилигандов для связывания твердофазного средства в заданной области и/или связывания компонента, связывающего тромбоциты, с твердофазным средством.

Настоящее изобретение также относится к комплекту, который может содержать, не ограничиваясь ими, любое или все перечисленные ниже компоненты, в том числе твердофазное средство для целенаправленного воздействия тромбоцитами на оболочку эндотелия, связывающее средство для связывания тромбоцитов, лиганд для связывания оболочки эндотелия, конъюгат лиганда, антилиганд для связывания лиганда или конъюгата лиганда, модулятор связывания тромбоцитов (усилитель и/или ингибитор), модулятор тромбообразования, компонент пути активации комплемента, индуктор компонента пути активации комплемента и связывающее средство для связывания тромбоцитов, включающее антилиганд. Комплект может также содержать бифункциональное связывающее средство и/или конъюгат связывающего средства и лиганда, и/или конъюгат связывающего тромбоциты средства и антилиганда.

Композиции и способы по настоящему изобретению включают любые механизмы доставки композиции к заданной области, включая, но не ограничиваясь ими, системный, местный, пероральный или топический.

В некоторых вариантах осуществления изобретения для захвата тромбоцитов в заданной области используются связывающие средства.

Определения

Используемый в описании термин твердофазное средство относится к любому твердому веществу, применимому для связывания, удерживания или сохранения связывающего тромбоциты средства. Связывающее тромбоциты средство может быть связано с твердофазным средством таким образом, что сохраняется его способность связывать тромбоциты, например, на или внутри области-мишени. Твердофазное средство может представлять собой спираль, стент или частицу, например гранулу или тому подобное, при этом все названные формы хорошо известны специалистам в данной области техники.

Используемый в описании термин частица относится к дискретному участку или части твердофазного средства, способной удерживать или сохранять связывающее тромбоциты средство. В предпочтительном варианте осуществления изобретения используют частицу, покрытую рекомбинатным ФФВ или ФФВ млекопитающих, и вводят покрытую ФФВ частицу в кровоток пациента, такого как человек, животное или подопытное животное. Используемый в описании термин частица относится к твердофазному средству, способному непосредственно или косвенно (например, через лиганды) связывать тромбоциты. Частицы могут быть однородными или разнородными по размеру. В частности, частицы могут иметь сферическую (включая яйцевидную) или неправильную форму. Частицы могут состоять из любого применимого вещества, способного сохранять ФФВ внутри частицы или на ее поверхности в течение неопределенного или меняющегося периода времени. В число примеров таких веществ входит поливиниловый спирт, полистирол, поликарбонат, полилактид, полигликолид, сополимеры лактида и гликолида, поликапролактон, сополимеры лактида и капролактона, полиоксибутират, полиаклилцианоакрилаты, полиангидриды, сложные полиортоэфиры, альбумин, коллаген, желатин, полисахариды, декстраны, крахмалы, метилметакрилат, метакриловая кислота, оксиалкилакрилаты, оксиалкилметакрилаты, метиленгликольдиметакрилат, бисакриламид, полимеры на основе целлюлозы, полиэтиленгликоли и их сополимеры, полиоксиэтилен и полиоксипропилен, поливинилацетат, поливинилпирролидон и поливинилпиридин, магнитные частицы, флуоресцирующие частицы, клетки животных организмов, клетки растений, макроагрегаты и микроагрегаты альбумина, агрегаты и липосомы денатурированного белка, используемые по отдельности или в сочетании. Твердофазные вещества, применимые в настоящем изобретении, хорошо известны специалистам в данной области техники и не ограничены приведенными выше примерами.

Примеры веществ, из которых изготавливают стент или спираль, включают, не ограничиваясь ими, поливиниловый спирт, полистирол, поликарбонат, полилактид, полигликолид, сополимеры лактида и гликолида, поликапролактон, сополимеры лактида и капролактона, полиоксибутират, полиалкилцианоакрилаты, полиангидриды, сложные полиортоэфиры, полисахариды, декстраны, крахмалы, метилметакрилат, метакриловую кислоту, оксиалкилакрилаты, оксиалкилметакрилаты, метиленгликольдиметакрилат, акриламид, бисакриламид, полимеры на основе целлюлозы, полиэтиленгликоли и их сополимеры, полиоксиэтилен и полиоксипропилен, поливинилацетат, поливинилпирролидон и поливинилпиридин, магнитные вещества, флуоресцирующие вещества, золото, платину, палладий, рений, родий, рутений, нержавеющую сталь, вольфрам, титан, никель и их сплавы, используемые по отдельности или в сочетании.

Предпочтительный размер твердофазного вещества зависит от типа используемого вещества. Например, специалистам в данной области техники известно, что в случае изготовления из твердофазного вещества стента или спирали они предпочтительно имеют такой диаметр, чтобы помещаться в кровеносном сосуде, таком как артерия. Обычно их диаметр составляет около 15 мм или более. Если твердофазное вещество представляет собой частицу, такую как гранула, ее диаметр может составлять до около 7 мм, предпочтительно от около 1 мкм до около 5 мм, наиболее предпочтительно от около 20 мкм до около 300 мкм. Размеры твердофазных веществ, используемых в настоящем изобретении, хорошо известны специалистам в данной области техники и не ограничены приведенными выше примерами.

Используемый в описании термин связывающее средство или компонент, обеспечивающий направленную доставку, относится к одной или нескольким молекулам или структурам твердофазного химического или биологического вещества, связывающим одно вещество с другим. В частности, связывающее средство или твердофазное средство связывает лиганд, рецептор или комплекс лиганд-рецептор на заданной популяции клеток, обычно гиперплазированной ткани и/или связанной с ней сосудистой сети, или раковой клетке, и/или связанной с ней сосудистой сети. Функция молекулы в качестве связывающего средства не ограничена структурным механизмом присоединения. Например, связывающее средство может связывать рецептор, антигенную детерминанту или эпитоп, ферментный субстрат или иную биологическую структуру, соединяющую связывающее средство с клеткой-мишенью или популяцией клеток-мишеней. Связывающее средство может представлять собой конъюгат и включает, не исчерпываясь ими, иммунологические конъюгаты, химические конъюгаты (ковалентные или нековалентные), гибридные белки и тому подобное.

Используемый в описании термин связывающее лиганд средство относится к комплементарному множеству молекул, обладающих специфической способностью связывать друг друга. Пара лиганд-антилиганд в целом обладает связывающей способностью с относительно высокой степенью сродства и благодаря этому может эффективно использоваться в настоящем изобретении. Хорошо известной парой лиганд-антилиганд является биотин и авидин. Используемый в описании термин авидин относится к авидину, стрепавидину, нейтравидину, его производным и аналогам и функциональным эквивалентам. Авидин способен многовалентно или одновалентно связывать биотин. Другие примеры пар лиганд-антилиганд включают, не ограничиваясь ими, гомофильные пептиды, гетерофильные пептиды, «лейциновые зипперы», пары цинк-фингерпринтные белки-участок двухцепочечной ДНК, пары энзим-ингибитор энзима, пары гаптен-антитело, пары лиганд-рецептор лиганда и пары фактор роста-рецептор фактора роста.

Используемые в описании термины выбранная область, заданная область, направленная доставка и предварительная направленная доставка относятся к области, в которой накопление тромбоцитов вокруг твердофазного средства обеспечивает терапевтически благоприятный результат. Обычно это связано с локализацией компонента, обеспечивающего направленную доставку, в области-мишени. Такие области включают, не ограничиваясь ими, сосудистую сеть плотных опухолей, сосудистую сеть доброкачественных опухолей, сосудистую сеть гиперплазированной ткани (тканей), артериовенозные пороки развития, аневризмы сосудов и внутренние истечения.

Упоминаемая в описании доставка твердофазного средства, содержащего связывающее тромбоциты средство, осуществляется при помощи катетера, микрокатетера или иглы и шприца. Доставка при помощи катетера или микрокатетера чаще всего осуществляется через артериальную сеть, однако также возможна доставка твердого вещества через венечную сеть. Например, твердофазное средство в виде частиц, спиралей или стентов может быть доставлено к мишени при помощи катетера через артериальную или венозную сеть. Доставка твердофазного средства через артериальную сеть является предпочтительной, поскольку капиллярное ложе, находящееся ниже по потоку введенного в ткань-мишень вещества, действует в качестве средства улавливания такого средства, за счет чего предотвращается попадание введенного средства в большой круг кровообращения. Твердофазное средство может быть также локализовано в артериальном кровообращении при помощи обеспечивающего направленную доставку средства, объединенного с твердофазным средством. Также возможна доставка твердофазного средства через венозную систему. Локализованная доставка твердофазного средства в венозную систему может осуществляться путем связывания твердофазного средства с областью-мишенью при помощи обеспечивающего направленную доставку средства, объединенного с твердофазным средством. Твердофазное средство также может быть доставлено к области-мишени в ходе хирургического вмешательства. Например, твердофазное средство в виде частиц может доставляться к области-мишени при помощи шприца и иглы. Дополнительно твердофазное средство в виде спирали или стента может быть помещено в область-мишень вручную в ходе хирургического вмешательства.

Используемый в описании термин тромб относится к любому полутвердому агрегату кровяных клеток, опутанных фибрином и слипшимися массами тромбоцитов, образованными тромбоцитами, активно связывающими твердофазное средство. Согласно изобретению образование тромба является непосредственным результатом накопления активированных тромбоцитов в заданной области. Термин тромбоз относится к тромбообразованию, обычно происходящему внутри кровеносного сосуда. Термин тромбогенный относится к веществам, склонным вызывать тромбоз или тромбообразование.

Используемый в описании термин эмбол относится к интраваскулярной массе, перемещающейся по кровотоку и впоследствие застревающей в кровеносном сосуде или капилляре, удаленном от места образования такой интраваскулярной массы. Термин эмболизация подразумевает не активный процесс, а относится к пассивному процессу, в результате которого происходит закупоривание кровеносных сосудов интраваскулярными массами, перемещающимися по кровотоку, в том месте, где они застревают в мелких кровеносных сосудах и капиллярах.

В отличие от этого, в настоящем изобретении осуществляется доставка твердофазного вещества к сосудистой сети-мишени, после чего под действием связывающего тромбоциты средства происходит активный приток тромбоцитов к поверхности твердофазного вещества. В отличие от эмболизующих веществ, описанных в противопоставленных патентах, включенных в настоящее описание в качестве ссылочных материалов, средства по настоящему изобретению должны доставляться к сосудистой сети-мишени в непосредственную близость от нее с учетом быстрого накопления тромбоцитов вокруг твердофазного вещества.

В качестве эмболизующего средства визуализации могут использоваться, например, макроагрегаты альбумина (МАА), поставляемые компанией Драксимадж (Киркланд, Квебек, Канада). МАА состоят из частиц размером от 10 мкм до 70 мкм, с максимальным размером 150 мкм с радиоактивной меткой из пертехнетата натрия Тс 99 м, обеспечивающего сцинтиграфическую визуализацию. Частицы МАА вводятся внутривенно и в виде эмбол перемещаются через кровоток, где их улавливает легочное альвеолярное капиллярное ложе. В результате иммобилизации ФФВ на МАА способом по настоящему изобретению с последующим введением частиц в сосудистую сист