Амиды антраниловой кислоты, способ их получения и их применение, способ лечения заболевания новообразованием и фармацевтический препарат, обладающий ингибирующей активностью в отношении тирозинкиназного рецептора vegf

Амиды антраниловой кислоты, способ их получения и их применение, способ лечения заболевания новообразованием и фармацевтический препарат, обладающий ингибирующей активностью в отношении тирозинкиназного рецептора vegf

Реферат

Изобретение относится к новым производным амидов антраниловой кислоты, методикам их получения, применению их в способе лечения человеческого или животного организма, применению их по отдельности или в комбинации с одним или несколькими фармацевтически активными соединениями, в особенности для терапии новообразования, такого как опухолевое заболевание, ретинопатии и возрастной дегенерации роговицы с появлением пятен; к способу лечения таких заболеваний у млекопитающих, особенно у человека, и к применению таких соединений по отдельности или в комбинации с одним или несколькими другими фармацевтически активными соединениями при получении фармацевтического препарата (лекарственного средства) для лечения новообразования, ретинопатии или возрастной дегенерации роговицы с появлением пятен.

Известно, что некоторые заболевания ассоциированы с разрегулированным ангиогенезом, например заболевания, вызванные образованием новых сосудов глаза, такие как ретинопатии (включая диабетическую ретинопатию), возрастная дегенерация роговицы с появлением пятен, псориаз, гемангиобластома, гемангиома, артериосклероз, воспалительные заболевания, такие как ревматоидные или ревматические воспалительные болезни, особенно артриты, такие как ревматоидный артрит, или другие хронические воспалительные нарушения, такие как хроническая астма, артериальный или посттрансплантационный атеросклероз, эндометриоз и особенно новообразования, например так называемые солидные опухоли и "текучие" опухоли (такие, как лейкозы).

В центре сети, регулирующей рост и дифференцировку сосудистой системы и ее компонентов в ходе эмбрионального развития, нормального роста и при огромном количестве патологических аномалий и болезней лежит ангиогенный фактор, известный как фактор роста сосудистого эндотелия (VGEF), димерный, связанный дисульфидным мостиком гликопротеин с массой 46 кДа вместе с его клеточными рецепторами (смотри Breier G. и др., Trends in Cell Biology, 6, 454-6 [1996]).

Рецепторы VEGF представляют собой трансмембранные рецепторные тирозинкиназы. Известны различные типы рецепторов VEGF, например VEGFR-1, VEGFR-2 и VEGFR-3.

Большое количество человеческих опухолей, особенно глиомы и карциномы, экспрессируют высокие уровни VEGF и его рецепторов. Это привело к гипотезе о том, что VEGF, высвобождаемый опухолевыми клетками, мог бы стимулировать рост капиллярных кровеносных сосудов и пролиферацию опухолевого эндотелия паракринным способом и, таким образом, через улучшенное кровоснабжение ускорять рост опухоли. Прямое доказательство роли VEGF как фактора опухолевого ангиогенеза in vivo получено из исследований, в которых активность VEGF была ингибирована антителами.

Ангиогенез считается абсолютно необходимым условием для тех опухолей, которые вырастают за пределы максимального диаметра 1-2 мм; до этого предела кислород и питательные вещества попадают в опухоль путем диффузии.

Три основных механизма играют важную роль в активности ингибиторов ангиогенеза, направленной против опухолей: (1) ингибирование роста сосудов, особенно капилляров, в опухолях с покоящимися сосудами, в результате чего нет общего опухолевого роста благодаря балансу, который достигается между апоптозом и пролиферацией; (2) предотвращение миграции опухолевых клеток из-за отсутствия тока крови в опухоли и из них и (3) ингибирование пролиферации эндотелиальных клеток, избегая таким образом паракринного стимулирующего рост воздействия, распространяемого на окружающую ткань с помощью эндотелиальных клеток, которые в норме разделяют сосуды.

В заявке WO 00/27820 описаны соединения, принадлежащие к классу амидов антраниловой кислоты, соединения, которые, как сообщается, ингибируют активность тирозинкиназного рецептора VEGF, рост опухолей и VEGF-зависимую клеточную пролиферацию.

Неожиданно было обнаружено, что производные амида антраниловой кислоты формулы I, описанные ниже, обладают благоприятными фармакологическими свойствами и ингибируют, например, активность тирозинкиназного рецептора VEGF, рост опухолей и VEGF-зависимую клеточную пролиферацию.

Производные амида антраниловой кислоты формулы I пригодны, например, для применения в терапии заболеваний, особенно заболеваний, в лечении и также в предупреждении которых проявляются благотворные эффекты ингибирования ангиогенеза и/или тирозинкиназного рецептора VEGF.

Изобретение относится к амидам антраниловой кислоты формулы I

где

R₁ означает водород или (низш.)алкил,

R₂ означает водород или (низш.)алкил,

R₃ означает перфтор(низш.)алкил и

Х означает кислород или серу,

их N-оксидам либо их таутомерам и

солям таких амидов антраниловой кислоты, их N-оксидам и их таутомерам.

Общие термины, использованные выше и впредь, в контексте данного раскрытия предпочтительно имеют следующие значения, если не указано иначе.

Термин "низший" означает радикал, содержащий до и включающий самое большее 7, особенно до и включающий самое большее 4 атома углерода, причем рассматриваемые радикалы являются или линейными, или разветвленными, с одним или несколькими разветвлениями.

Если используется множественная форма для соединений, солей и тому подобного, это относится также к одному соединению, соли и тому подобному.

Любые асимметрические атомы углерода (например, в соединениях формулы I, где R₃ означает (низш.)алкил, могут находиться в (R)-, (S)- или (R,S)-конфигурации, предпочтительно в (R)- или (S)-конфигурации. Таким образом, соединения могут присутствовать как смеси изомеров или как чистые изомеры, предпочтительно как энантиомерно чистые диастереомеры.

Изобретение относится также к возможным таутомерам соединений формулы I. Термин "таутомеры", как он использован в контексте, относится в частности к соединениям формулы I, где R₁ означает водород, а Х означает кислород или серу, к соединениям, которые должны также существовать в некоторой степени, если не полностью, в таутомерной форме, показанной ниже (I-таутомер), где другие радикалы и символы имеют значение, определенное в контексте.

В предпочтительном варианте воплощения изобретения алкил содержит самое большее до 12 атомов углерода и означает главным образом (низш.)алкил.

Заместитель (низш.)алкил означает предпочтительно алкил от и включая 1, до и включая 7, предпочтительно от и включая 1, до и включая 4, и является линейным или разветвленным; предпочтительно (низш.)алкил означает бутил, такой как н-бутил, втор-бутил, изобутил, трет-бутил, пропил, такой, как н-пропил или изопропил, этил или предпочтительно метил.

Термин "перфтор(низш.)алкил", как он использован в контексте, означает (низш.)алкильный радикал, где все атомы водорода замещены атомами фтора.

Галоид означает в основном фтор, хлор, бром или йод, особенно фтор, хлор или бром.

Из соединений формулы I с основным атомом азота образуются такие соли, как, например, кислотно-аддитивные соли с органическими или неорганическими кислотами, особенно фармацевтически приемлемые соли. Соответствующими неорганическими кислотами являются, например, галоидсодержащие кислоты, такие как хлористоводородная кислота; серная кислота или фосфорная кислота. Соответствующими органическими кислотами являются, например, карбоновые, фосфоновые, сульфоновые или сульфаминовые кислоты, например уксусная кислота, пропионовая кислота, октановая кислота, декановая кислота, додекановая кислота, гликолевая кислота, молочная кислота, фумаровая кислота, янтарная кислота, адипиновая кислота, пимелиновая кислота, пробковая кислота, азелаиновая кислота, яблочная кислота, винная кислота, лимонная кислота, аминокислоты, такие как глутаминовая кислота или аспарагиновая кислота, малеиновая кислота, гидроксималеиновая кислота, метилмалеиновая кислота, циклогексанкарбоновая кислота, адамантанкарбоновая кислота, бензойная кислота, салициловая кислота, 4-аминосалициловая кислота, фталевая кислота, фенилуксусная кислота, миндальная кислота, коричная кислота, метан- или этансульфоновая кислота, 2-гидроксиэтансульфоновая кислота, этан-1,2-дисульфоновая кислота, бензолсульфоновая кислота, 2-нафталинсульфоновая кислота, 1,5-нафталиндисульфоновая кислота, 2-, 3- или 4-метилбензолсульфоновая кислота, метилсерная кислота, этилсерная кислота, додецилсерная кислота, N-циклогексилсульфаминовая кислота, N-метил-, N-этил- или N-пропилсульфаминовая кислота или другие, содержащие протон органические кислоты, такие как аскорбиновая кислота.

С целью выделения или очистки возможно также использовать фармацевтически неприемлемые соли, например пикраты или перхлораты. Для терапевтических целей используют только фармацевтически приемлемые соли или свободные соединения (где применимо в лекарственной форме), и поэтому они являются предпочтительными.

С точки зрения тесной взаимосвязи между новыми соединениями в свободной форме и в форме их солей, включая те соли, которые могут быть использованы в качестве промежуточных веществ, например, при очистке или идентификации новых соединений, любую ссылку на свободные соединения выше и впредь следует понимать как относящуюся также к соответствующим солям в качестве подходящих и целесообразных.

Соединения формулы I и их N-оксиды обладают ценными фармакологическими свойствами, как описано выше и впредь.

Эффективность соединений по изобретению как ингибиторов активности тирозинкиназного рецептора VEGF может быть продемонстрирована следующим образом.

Тест на активность в отношении тирозинкиназного рецептора VEGF. Тест проводили, используя Fit-1, тирозинкиназный рецептор VEGF. Подробная методика состоит в следующем: 30 мкл киназного раствора (10 нг киназного домена Fit-1, Shibuya и др., Oncogene 5, 519-24 [1990]) в смеси, включающей 20 мМ трис-HCl, рН 7,5, 3 мМ дихлорид марганца (MnCl₂), 3 мМ хлористый магний (MgCl₂), 10 мкМ ванадат натрия, 0,25 мг/мл полиэтиленгликоля (PEG) 2000, 1 мМ дитиотреит и 3 мкг/мкл поли(Clu, Tyr), 4:1 (Sigma, Buchs, Switzerland), 8 мкМ [³³Р]-АТФ (0,2 мкКи), 1% диметилсульфоксид и от 0 до 100 мкМ исследуемого соединения, инкубировали в течение 10 мин при комнатной температуре. Затем реакцию прекращали добавлением 10 мкл 0,25 М этилендиаминтетраацетата (EDTA), рН 7. Используя многоканальный распределитель (LAB SYSTEMS, USA), аликвоту 20 мл наносили на поливинилдифторидную (PVDF) мембрану Immobilon P (Millipore, USA) через систему фильтров для микротитрования Millipore и соединяли с вакуумом. После полного удаления жидкости мембраны промывали 4 раза подряд в бане, содержащей 0,5% фосфорную кислоту (Н₃PO₄) и один раз этанолом, инкубировали в течение 10 мин при встряхивании, затем вставляли в коллектор Hewlett Packard TopCount и измеряли радиоактивность после прибавления 10 мкл Microscint® (β-сцинтилляционной жидкости для счета). Определяли IC₅₀ с помощью линейного регрессионного анализа процентов ингибирования каждого соединения в трех концентрациях (как правило, 0,01, 0,1 и 1 мкМ). Значения IC₅₀, которые можно было определить с соединениями формулы I, находились в интервале 0,001-1 мкМ, предпочтительно в интервале 0,001-0,1 мкМ.

Противоопухолевая эффективность соединений по изобретению может быть продемонстрирована in vivo следующим образом.

Активность in vivo на модели ксенотрансплантата у бестимусных мышей: самок бестимусных мышей линии BALB/c (в возрасте 8-12 недель) (Novartis Animal Farm, Sisseln, Switzerland) выдерживали в стерильных условиях со свободным доступом к воде и корму. Опухоли индуцировали или подкожной инъекцией мышам опухолевых клеток [например, линии клеток карциномы простаты Du 145 (Американская коллекция тканевых культур (АТСС), №НТВ 81; смотри Cancer Research, 37, 4049-58 (1978)], или имплантированием фрагментов опухоли (примерно 25 мг) подкожно в левый бок мышей, используя троакарную иглу размера 13 при анестезии фореном® (Abbott, Switzerland). Обработку изучаемым соединением начинали, как только опухоль достигала среднего объема 100 мм³. Рост опухоли измеряли 2-3 раза в неделю и через 24 ч после последней обработки путем определения длины двух перпендикулярных осей. Объемы опухолей рассчитывали в соответствии с опубликованными способами (смотри Evans и др., Brit. J. Cancer, 45. 466-8 [1982]).

Противоопухолевую эффективность определяли как среднее увеличение объема опухоли обработанных (Т) животных, деленное на среднее увеличение объема опухоли и необработанных животных (контроли, С), и после умножения на 100 выражали как Т/С%. Опухолевая регрессия (выраженная в %) приводится как наименьший средний объем опухоли по отношению к среднему опухолевому объему в начале обработки. Изучаемое соединение вводили ежедневно с помощью зонда.

В качестве альтернативы можно использовать таким же способом другие линии клеток, например:

- линия клеток аденокарциномы молочной железы MCF-7 (АТСС №НТВ 22; смотри также J. Natl. Cancer Inst. (Bethesda), 51, 1409-16 [1973]);

- линия клеток аденокарциномы молочной железы MDA-MB 468 (АТСС №НТВ 132; смотри также In Vitro, 14, 911-15 [1978]);

- линия клеток аденокарциномы молочной железы MDA-MB 231 (АТСС №НТВ 26; смотри также J. Natl. Cancer Inst. (Bethesda), 53, 661-74 [1974]);

- линия клеток карциномы ободочной кишки (АТСС №CCL 222; смотри также Cancer Res., 38, 1345-55 [1978]);

- линия клеток карциномы ободочной кишки (АТСС №CCL 247; смотри также Cancer Res., 41., 1751-6 [1981]);

- линия клеток карциномы предстательной железы DU 145 (АТСС №НТВ 81; смотри также Cancer Res., 37, 4049-58 [1978]); и

- линия клеток карциномы предстательной железы РС-3 (АТСС №CRL 1435; смотри также Cancer Res., 40, 524-34 [1980]).

Ингибирование индуцированного VEGF рецептора аутофосфорилирования KDR может быть подтверждено дальнейшим экспериментом в клетках in vitro: трансфицированные клетки яичника китайского хомячка (СНО), которые постоянно экспрессируют рецептор человеческого VEGF (KDR), высевали в полную культуральную среду (с 10% эмбриональной телячьей сыворотки FCS) в 6-луночные планшеты для культивирования и инкубировали при 37°С в атмосфере 5% СО₂ до 80%-ного слияния. Соединения, подлежащие изучению, затем разводили в культуральной среде (без FCS, с 0,1% бычьим сывороточным альбумином (BSA)) и добавляли к клеткам. (Контроли включали среду без изучаемых соединений). После инкубации в течение 2 ч при 37°С прибавляли рекомбинантный VEGF; конечная концентрация VEGF составила 20 нг/мл). После дальнейшей пятиминутной инкубации при 37°С клетки дважды промывали охлажденным льдом ЗФР и незамедлительно лизировали в 100 мкл лизисного буфера на лунку. Затем лизаты центрифугировали, чтобы удалить клеточные ядра, и концентрации белка в супернатантах определяли, используя коммерческий анализ белка (BIORAD). Затем лизаты могли или незамедлительно использоваться, или, если необходимо, храниться при -20°С.

Проводили многослойный иммуноферментный анализ ELISA, чтобы измерить фосфорилирование рецептора KDR: моноклональное антитело к KDR (например, Mab 1495.12.14; полученное Н. Towbin) иммобилизовывали на черных планшетах ELISA (OptiPlate^ТМ HTRF-96 от Packard). Затем планшеты промывали и остающиеся свободными белок-связывающие сайты насыщали с 1% BSA в ЗФР. Клеточные лизаты (20 мкг белка на лунку) затем инкубировали в этих планшетах в течение ночи при 4°С вместе с антифосфотирозиновым антителом (PY20), сопряженным со щелочной фосфатазой (АР) (PY20:AP от Transduction Laboratories). Планшеты промывали снова и связывание антитела с захваченным фосфорилированным рецептором затем демонстрировали, используя люминесцентный субстрат щелочной фосфатазы (CDP-Star®, готовый к применению, с Emerald II^ТМ; TROPIX). Люминесценцию определяли в сцинтилляционном счетчике Packard Top Count Microplate (Top Count). Различие между сигналом положительного контроля (стимулированного с VEGF) и сигналом отрицательного контроля (не стимулированного с VEGF) соответствует индуцированному VEGF фосфорилированию (100%) рецептора KDR. Активность изученных веществ рассчитывали как процент ингибирования индуцированного VEGF фосфорилирования рецептора KDR, где концентрация вещества, которая вызывала половину максимального ингибирования, определяли как ED₅₀ (эффективная доза для 50%-ного ингибирования).

Соединение формулы I или его N-оксид ингибируют также в различной степени другие тирозинкиназы, вовлеченные в передачу сигнала, которые опосредованы трофическими факторами, например киназы семейства Src, особенно киназа c-Src, Lck и Fyn; также киназы семейства эпидермального фактора роста, например киназа c-erbB2 (HER-2), киназа с-erbB4, киназа с-erbВ4; киназа рецептора инсулиноподобного фактора роста (киназа IGF-1), особенно члены семейства тирозинкиназ рецептора полученного из тромбоцитов фактора роста (PDGF), такие как киназа рецептора PDGF, киназа рецептора CSF-1, киназа рецептора Kit и киназа рецептора VEGF; и также серин/треонинкиназы, все из которых играют роль в регуляции роста и трансформации в клетках млекопитающих, включая человеческие клетки.

На основании данных исследований соединение формулы I по изобретению проявляет терапевтическую эффективность, особенно против нарушений, зависимых от протеинкиназы, главным образом пролиферативных заболеваний.

Полезность соединения формулы I в лечении артрита в качестве примера воспалительного ревматического или ревматоидного заболевания может быть продемонстрирована следующим образом.

Использовали хорошо известную крысиную модель адъювантного артрита (Pearson, Proc. Soc. Exp.BioL, 91, 95-101 (1956)), чтобы изучить противоартритную активность соединений формулы I или их солей. Адъювантный артрит может подвергнуться терапии с использованием двух различных схем дозирования: или (i) начальный период иммунизации с адъювантом (профилактическое дозирование); или со дня 15, когда артритный ответ уже установлен (терапевтическое дозирование). Предпочтительно используют схему терапевтического дозирования. Для сравнения ингибитор циклооксигеназы-2, такой как 5-бром-2-(4-фторфенил)-3-[4-(метилсульфонил)фенил]тиофен или диклофенак, вводят в отдельной группе.

Подробно: крысам-самцам Wistar (5 животных на группу, с массой приблизительно 200 г, поставлены Iffa Credo, France) вводили внутрикожно в основание хвоста 0,1 мл минерального масла, содержащего 0,6 мг лиофилизированных дезактивированных теплом Mycobacterium tuberculosis. Крыс обрабатывали изучаемым соединением (3, 10 или 30 мг/кг перорально один раз в день) или наполнителем (водой), начиная со дня 15 до дня 22 (схема терапевтического дозирования). В конце эксперимента опухание тарзальных суставов измеряли посредством микромерной вилки. Процент ингибирования опухания лапы рассчитывали по сравнению с обработанными наполнителем артритными животными (0% ингибирования) и обработанными наполнителем нормальными животными (100% ингибирования).

На основании этих исследований соединение формулы I неожиданно оказалось пригодным для терапии воспалительных (особенно ревматических или ревматоидных) заболеваний.

На основе их эффективности в качестве ингибиторов тирозинкиназной активности рецептора VEGF соединения формулы I прежде всего ингибируют рост кровеносных сосудов и, следовательно, являются, например, эффективными против заболеваний, ассоциированных с разрегулированным ангиогенезом, особенно заболеваний, вызванных глазной неоваскуляризацией, в частности ретинопатий, таких как диабетическая ретинопатия или возрастная дегенерация с появлением пятен на роговице, псориаза, гемангиобластомы, такой как гемангиома, нарушений мезангиальной клеточной пролиферации, таких как хронические или острые заболевания почек, например диабетическая нефропатия, злокачественный нефросклероз, синдромов тромботической микроангиопатии или отторжения трансплантата или особенно воспалительных почечных заболеваний, таких как гломерулонефрит, в частности мезангиопролиферативный гломерулонефрит, гемолитический уремический синдром, диабетическая нефропатия, гипертензивный нефросклероз, атеромы, артериального рестиноза, аутоиммунных заболеваний, острого воспаления, фиброзных нарушений (например, цирроза печени), диабета, эндометриоза, хронической астмы, артериального или посттрансплантационного атеросклероза, нейродегенеративных нарушений и особенно опухолевых заболеваний, как лейкозы, в частности острого лимфобластного лейкоза, острого миелоидного лейкоза и хронического миелоидного лейкоза, и других "текучих" опухолей, главным образом опухолей, экспрессирующих рецепторы c-kit, KDR или fit-1, и солидных опухолей, главным образом рака молочной железы, рака ободочной кишки, рака легкого (особенно мелкоклеточного рака легкого), рака предстательной железы или саркомы Капоши. Соединение формулы I (или его N-оксид) ингибирует рост опухолей и особенно пригодно для предотвращения распространения метастазов опухолей и роста микрометастазов.

Соединение формулы I может быть введено как таковое или в комбинации с одним или несколькими другими терапевтическими агентами, возможная комбинированная терапия приобретает форму заданных комбинаций или введение соединения по изобретению и одного или нескольких других терапевтических агентов происходит ступенчато, или они даются независимо друг от друга, или комбинированное введение заданных комбинаций и одного или нескольких других терапевтических агентов. Кроме этого или в дополнение, соединение формулы I может быть введено, особенно при терапии опухолей, в комбинации с химиотерапией, радиотерапией, иммунотерапией, хирургическим вмешательством или путем сочетания этих видов терапии. Длительная терапия в равной мере возможна, как и адъювантная терапия, в контексте других стратегий лечения, как описано выше. Другими возможными видами лечения является терапия для поддержания состояния пациента после опухолевой регрессии или даже химиопрофилактическая терапия, например, у пациентов с повышенным риском заболевания.

Терапевтическими агентами для возможной комбинации являются в основном одно или несколько цитостатических или цитотоксических соединений, например химиотерапевтический агент или несколько, выбранные из группы, которая включает, но без ограничения, ингибитор биосинтеза полиаминов, ингибитор протеинкиназы, особенно серин/треонинпротеинкиназы, такой как протеинкиназа С, или тирозинпротеинкиназы, такой как тирозинкиназа рецептора эпидермального фактора роста, цитокин, регулятор отрицательного роста, такой как фактор роста опухоли (TGF-β) или β-интерферон (INF-β), ингибитор ароматазы, ингибитор взаимодействия домена SH2 с фосфорилированным белком, антиэстрогены, ингибиторы топоизомеразы I, ингибиторы топоизомеразы II, активные в отношении микротрубочек агенты, алкилирующие агенты, противоопухолевые антиметаболиты, соединения платины, другие антиангиогенные соединения, агонисты гонадорелина, антиандрогены, бисфосфонаты и трастузумаб.

С группами предпочтительных соединений формулы I и их N-оксидов, упомянутых ниже, приемлемо использовать определения заместителей, происходящие от общих определений, упомянутых выше, например, чтобы заменить более общие определения более специфическими определениями или особенно определениями, характеризующимися как являющиеся предпочтительными.

Кроме того, изобретение относится к применению соединения формулы I, где радикалы и символы имеют значения, определенные выше, или его N-оксида, или его фармацевтически приемлемой соли при получении фармацевтического продукта для лечения ретинопатии или возрастной дегенерации с появлением пятен на роговице.

Кроме того, изобретение относится к способу лечения опухолевого заболевания, которое отвечает на ингибирование активности тирозинкиназы рецептора VEGF, который включает введение теплокровному млекопитающему, нуждающемуся в таком лечении, соединения формулы I или его N-оксида, или его фармацевтически приемлемой соли, где радикалы и символы имеют значения, определенные выше, в количестве, эффективном в отношении упомянутого заболевания.

Кроме того, изобретение относится к способу лечения ретинопатии или возрастной дегенерации с появлением пятен на роговице, который включает введение теплокровному млекопитающему, нуждающемуся в таком лечении, соединения формулы I или его N-оксида, или его фармацевтически приемлемой соли, где радикалы и символы имеют значения, определенные выше, в количестве, эффективном в отношении упомянутого заболевания.

Изобретение относится, в частности, к соединению формулы I,

где

R₁ означает водород или (низш.)алкил,

R₂ означает водород или низший алкил,

R₃ означает трифторметил, и

Х означает кислород,

к его N-оксиду или его таутомеру и

к соли такого соединения, ее N-оксиду или ее таутомеру.

Предпочтительно изобретение относится, в частности, к соединению формулы I, где

R₁ означает водород или метил,

R₂ означает водород или метил,

R₃ означает трифторметил и

Х означает кислород,

к его таутомеру и

к соли такого соединения или ее таутомеру.

Более конкретно предпочтение отдается следующим соединениям формулы I:

гидрохлоридная соль 2-[[6-метокси-3-пиридинил]метил]амино-N-[3-(трифторметил)фенил] бензамида,

2-[[6-метокси-3-пиридинил]метил]амино-N-[2-метил-3-(трифторметил)фенил]-бензамид,

2-[[(1,6-дигидро-6-оксо-3-пиридинил)метил]амино]-N-[3-(трифторметил)фенил]бензамид и

2-[[(1,6-дигидро-6-оксо-3-пиридинил)метил]амино]-N-[2-метил-3-(трифторметил)фенил]бензамид и

их таутомеры или

соль такого соединения, или ее таутомер.

Соединение по изобретению может быть получено способами, которые хотя и не применялись до сих пор для получения новых соединений по настоящему изобретению, являются по сути известными, особенно способ, отличающийся тем, что для синтеза соединения формулы I, где R₁ означает (низш.)алкил, а оставшиеся символы R₂ и R₃ имеют значения, определенные для соединения формулы I, соединение формулы II

где

R₂ и R₃ имеют значения, определенные для соединения формулы I, реагирует с карбонильным соединением формулы III

где

Х означает кислород или серу, и

R₁ означает (низш.)алкил,

в присутствии восстанавливающего агента;

где исходные соединения формул II и III могут также присутствовать с защищенными функциональными группами, если необходимо, и/или в виде солей, при условии что имеется солеобразующая группа, и реакция в форме соли возможна;

где любые защитные группы в защищенном производном соединения формулы I удаляются;

и, если потребуется, получаемое соединение формулы I превращают в другое соединение формулы I или его N-оксид, свободное соединение формулы I превращают в соль, получаемую соль соединения формулы I превращают в свободное соединение или другую соль, и/или смесь изомерных соединений формулы I разделяют на индивидуальные изомеры.

Подробное описание восстановительного алкилирования

В более подробном описании способа, приведенном ниже, R₁, R₂, R₃ и Х имеют значения, определенные для соединений формулы I, если не указано иначе.

Карбонильное соединение формулы III может также присутствовать в форме реакционноспособного производного; однако свободный альдегид или кетон является предпочтительным.

Реакционноспособными производными соединений формулы III являются, например, соответствующие бисульфитные аддукты или особенно полуацетали, ацетали, полукетали или кетали соединений формулы III со спиртами, например (низш.) алканолами; или тиоацетали либо тиокетали соединений формулы III с меркаптанами, например (низш.)алкансульфидами.

Восстановительное алкилирование предпочтительно осуществляют путем гидрирования в присутствии катализатора, в основном катализатора на основе благородных металлов, таких как платина или особенно палладий, которые предпочтительно связаны с веществом-носителем, таким как углерод, или катализатора на основе тяжелого металла, такого как Ni-Ренея, при нормальном давлении или при давлении от 0,1 до 10 мегапаскалей (МПа), или путем восстановления посредством сложных гидридов, таких как боргидриды, особенно цианборгидрида щелочного металла, например цианборгидрида натрия, в присутствии соответствующей кислоты, предпочтительно относительно слабых кислот, таких как (низш.)алканкарбоновые кислоты, особенно уксусная кислота, или сульфоновая кислота, такая как n-толуолсульфоновая кислота; в традиционных растворителях, например спиртах, таких как метанол или этанол, или простых эфирах, например циклических простых эфирах, таких как тетрагидрофуран, в присутствии или в отсутствие воды.

Защитные группы

Если одна или несколько функциональных групп, например карбокси, гидрокси, амино или меркапто, защищены или их необходимо защитить в соединении формулы II или III, потому что они не должные принимать участие в реакции, то защитные группы являются такими, которые обычно используют в синтезе пептидов, цефалоспоринов и пенициллинов, а также производных нуклеиновых кислот и углеводов.

Защитные группы могут уже присутствовать в предшественниках и должны защищать затрагиваемые функциональные группы от нежелательных вторичных реакций, таких как ацилирование, образование простых эфиров, образование сложных эфиров, окисление, сольволиз и подобные реакции. Отличительная особенность защитных групп состоит в том, что они легко поддаются, т.е. без нежелательных вторичных реакций, удалению, обычно сольволизом, восстановлением, фотолизом или также с помощью ферментативной активности, например, в условиях, аналогичных физиологическим условиям, и что они не присутствуют в конечных продуктах. Специалист знает или может легко установить, какие защитные группы соответствуют реакциям, упомянутым выше и впредь.

Блокирование таких функциональных групп такими защитными группами, сами защитные группы и реакции их удаления описаны, например, в стандартных снабженных ссылками руководствах, таких как J.F.W. McOmie, "Защитные группы в органической химии", изд-во Plenum Press, London и New York, 1973; в: Т.W.Greene, "Защитные группы в органическом синтезе", изд-во Wiley, New York, 1981; в: "Пептиды", том 3 (редакторы: Е. Gross и J. Meienhofer), изд-во Academic Press, London и New York, 1981; в: "Методы органической химии", Houben Weyl, 4-ое издание, том 15/1, изд-во Georg Thieme Verlag, Stuttgart, 1974; в: H.-D.Jakubke и H.Jescheit, "Аминокислоты, пептиды, белки", изд-во Verlag Chemie, Weinheim, Deerfield Beach и Basel, 1982; и в: Jochen Lehmann, "Химия углеводов: моносахариды и производные", изд-во Georg Thieme Verlag, Stuttgart, 1974.

Дополнительные этапы способа

Соли соединения формулы I с солеобразующей группой могут быть получены известным по сути способом. Так, кислотно-аддитивные соли соединений формулы I могут быть получены путем обработки с кислотой или с соответствующим анионообменным реагентом. Соль с двумя молекулами кислоты (например, дигалогенид соединения формулы I) может быть превращена в соль с одной молекулой кислоты на соединение (например, моногалогенид); это может быть сделано путем нагревания до плавления или, например, нагреванием в виде твердого вещества в высоком вакууме при повышенной температуре, например от 130 до 170°С, при этом вытесняется одна молекула кислоты на молекулу соединения формулы I.

Обычно соли могут быть превращены в свободные соединения, например, обработкой с соответствующими основными агентами, например карбонатами щелочных металлов, гидрокарбонатами щелочных металлов или гидроксидами щелочных металлов, характерно карбонатом калия или гидроксидом натрия.

Амид антраниловой кислоты формулы I, где R₁ означает (низш.)алкил, а остающиеся символы R₂ и R₃ такие, как определено для соединения формулы I, полученный взаимодействием соединений формулы II и формулы III, может далее реагировать в соответствии со следующим способом, давая амид антраниловой кислоты формулы I, где R₁ означает водород. Амид антраниловой кислоты формулы I, где R₁ означает (низш.)алкил, обрабатывали триметилсилилйодидом в течение примерно 25-30 ч при температуре между 45°С и 70°С в соответствующем растворителе, например галоидированном алкане, как хлороформ, необязательно с последующей обработкой метанолом.

Общие условия способа

Все этапы способа, описанного в изобретении, могут осуществляться при известных реакционных условиях, предпочтительно при условиях, упомянутых конкретно, в отсутствие или обычно в присутствии растворителей или разбавителей, предпочтительно таких, которые инертны по отношению к используемым реагентам и способны их растворять, в отсутствие или в присутствии катализаторов, конденсирующих агентов или нейтрализующих агентов, например ионообменников, обычно катионообменников, например, в Н⁺-форме, в зависимости от типа реакции и/или реагирующих веществ при пониженной, нормальной или повышенной температуре, например, в диапазоне от -100°С до примерно 190°С, предпочтительно от примерно -80°С до примерно 150°С, например, при -80°С до -60°С, при комнатной температуре, при -20°С до 40°С или при температуре кипения используемого растворителя, при атмосферном давлении или в закрытом сосуде, если уместно - под давлением и/или в инертной атмосфере, например, под аргоном или азотом.

Соли могут присутствовать во всех исходных и промежуточных соединениях, если таковые содержат солеобразующие группы. Соли могут также присутствовать в ходе реакции таких соединений, при условии, что реакция при этом не нарушается.

Растворители, из которых могут быть выбраны такие, которые пригодны для обсуждаемой реакции, включают, например, воду, сложные эфиры, типично (низш.)алкил(низш.)алканоаты, например диэтилацетат, простые эфиры, типично алифатические простые эфиры, например диэтиловый эфир, или циклические простые эфиры, например тетрагидрофуран, жидкие ароматические углеводороды, типично бензол или толуол, спирты, типично метанол, этанол или 1- либо 2-пропанол, нитрилы, типично ацетонитрил, галоидированные углеводороды, типично дихлорметан, амиды кислот, типично диметилформамид, основания, типично гетероциклические азотсодержащие основания, например пиридин, карбоновые кислоты, типично (низш.)алканкарбоновые кислоты, например уксусная кислота, ангидриды карбоновых кислот, типично ангидриды (низш.)алкановых кислот, например уксусный ангидрид, циклические, линейные или разветвленные углеводороды, типично циклогексан, гексан или изопентан, или смеси этих растворителей, например водные растворы, если в описании способа не заявлено иначе. Такие смеси растворителей могут быть также использованы в технологии, например, посредством хроматографии или распределения.

Соединения формулы I, включая их соли, получаются также в форме гидратов или их кристаллы могут включать, например, растворитель, использованный для кристаллизации (присутствуют как сольваты).

В предпочтительном варианте воплощения изобретения соединение формулы I получают в соответствии или по аналогии с методиками и этапами методики, определенными в примерах.

Доза активного ингредиента зависит от разнообразных факторов, включая тип, вид, возраст, массу, пол и общее состояние пациента; тяжесть состояния, подлежащего лечению; путь введения; функцию почек и печени пациента; и конкретного используемого соединения. Врач, клиницист или ветеринар обычной квалификации может легко определить и назначить эффективное количество препарата, требуемого для того, чтобы предотвратить, противостоять или остановить прогрессирование состояния. Оптимальная точность в достижении концентрации препарата в диапазоне, который обеспечивает эффективность без токсичности, требует режима, основанного на кинетике доступности препарата к участкам-мишеням. Это включает принятие во внимание распределения, равновесия и элиминации препарата.

Изобретение относится также к фармацевтическим композициям, включающим эффективное количество, особенно количество, эффективное в лечении одного из упомянутых выше нарушений, амида антраниловой кислоты формулы I или его N-оксида, или его таутомера наряду с фармацевтически приемлемыми носителями, которые пригодны для местного, энтерального, например перорального либо ректального, или парентерального введения и которые могут быть неорганическими или органическими, твердыми или жидкими.

Для перорального введения используют особенно таблетки или желатиновые капсулы, которые включают активный ингредиент наряду с разбавителями, например лактоз