Производные индола или бензимидазола для модуляции ikb-киназы

Производные индола или бензимидазола для модуляции ikb-киназы

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Изобретение касается производных индола или бензимидазола, ингибирующих IkB-киназу, способа их получения и их применения в качестве лекарственных средств.

В заявке WO 94/12478 среди прочих описываются производные индола, ингибирующие агрегацию тромбоцитов. В заявках WO 01/00610 и WO 01/30774 описываются производные индола и бензимидазола, которые могут модулировать NFkB.

NFkB является гетеродимерным фактором транскрипции, который может активировать большое число генов, кодирующих, среди прочих, предвоспалительные цитокины, такие как IL-1, IL-2, TNFα или IL-6. NFkB находится в цитозоле клеток, образуя комплекс с его встречающимся в природе ингибитором IkB. Стимуляция клеток, например, посредством цитокинов, приводит к фосфорилированию и последующему протеолитическому расщеплению IkB. Это протеолитическое расщепление ведет к активации NFkB, который затем переходит в ядро клетки и там активирует множество предвоспалительных генов.

При заболеваниях, таких как ревматический артрит (при воспалении), остеоартрит, астма, инфаркт миокарда, болезни Альцгеймера, диабета типа II, воспалительные заболевания кишечника "inflammatory bowel disease" или артериосклероз, NFkB является активизированным сверх нормальной меры. Торможение NFkB применяется также при лечении рака, так как оно используется в этом случае само по себе или для усиления цитостатического лечения. Было показано, что лекарственные средства, такие как глюкокортикоиды, салицилаты или соли золота, которые используются при лечении ревматизма, ингибирующе встраиваются в различные сайты сигнальной цепи, активирующей NFkB, или непосредственно интерферируют с транскрипцией генов.

Первым этапом в названных сигнальных каскадах является расщепление IkB. Это фосфорилирование регулируется специфической IkB-киназой. До сих пор неизвестны ингибиторы, ингибирующие специфическую IkB-киназу.

Недостатком известных ингибиторов IkB-киназы часто является недостаточная специфичность ингибирования только одного класса киназ. Например, большинство ингибиторов IkB-киназы тормозят одновременно несколько различных киназ, так как каталитические домены этих киназ имеют похожую структуру. Вследствие этого ингибиторы нежелательным образом воздействуют на многие ферменты, также на ферменты с жизненной функцией.

В заявке WO 01/30774 уже были описаны производные индола, которые могут модулировать NFkB и оказывают сильное ингибирующее действие на IkB-киназу. Соединения, описанные в заявке WO 01/30774, которые приведены в примерах, однако оказывают сильное тормозящее действие также на другие киназы такие, как cAMP-зависимую протеинкиназу, протеинкиназу С или казеинкиназу II. Однако некоторые эти производные индола при улучшении специфичности проявляют пониженное ингибирование IkB-киназы. Далее достигаемый уровень плазмы крови посредством соединений, описанных в заявке WO 01/30774, недостаточен для орального введения этих производных.

При поиске эффективных соединений для лечения ревматического артрита (при воспалении), остеоартрита, астмы, инфаркта миокарда, болезней Альцгеймера, раковых заболеваний (потенцирование цитотоксической терапии) или артериосклероза было обнаружено, что производные индола и бензимидазола согласно изобретению не имеют вышеназванных недостатков. Производные индола и бензимидазола согласно изобретению являются сильными ингибиторами IkB-киназы, при этом очень селективно ингибируют киназы и характеризуются высоким уровнем плазмы крови после орального введения.

Таким образом, изобретение касается соединения формулы I

и/или стереоизомерной формы соединения формулы I, и/или физиологически совместимой соли соединения формулы I, причем

X и M являются одинаковыми или разными и независимо друг от друга обозначают атом N или CH,

R1 и R11 являются одинаковыми или разными и независимо друг от друга обозначают

1. атом водорода,

2. F, Cl, J или Br,

3. -(C₁-C₄)-алкил,

4. -CN,

5. -CF₃,

6. -OR⁵, где R⁵ обозначает атом водорода или -(C₁-C₄)-алкил,

7. -N(R⁵)-R⁶, где R⁵ и R⁶ независимо друг от друга обозначают атом водорода или -(C₁-C₄)-алкил,

8. -C(O)-R⁵, где R⁵ обозначает атом водорода или -(C₁-C₄)-алкил, или

9. -S(O)_X-R⁵, где x обозначает целое число ноль, 1 или 2 и R⁵ обозначает атом водорода или -(C₁-C₄)-алкил,

R2 обозначает

1. гетероарильный остаток из группы, включающей 3-гидроксипирро-2,4-дион, имидазол, имидазолидин, имидазолин, индазол, изотиазол, изотиазолидин, изоксазол, 2-изоксазолидин, изоксазолидин, изоксазолон, морфолин, оксазол, 1,3,4-оксадиазол, оксадиазолидиндион, оксадиазолон, 1,2,3,5-оксатиадиазол-2-оксид, 5-оксо-4,5-дигидро-[1,3,4]оксадиазол, 5-оксо-1,2,4-тиадиазол, пиперазин, пиразин, пиразол, пиразолин, пиразолидин, пиридазин, пиримидин, тетразол, тиадиазол, тиазол, тиоморфолин, триазол или триазолон, и гетероарильный остаток является незамещенным или, независимо друг от друга, одно-, двух- или трехкратно замещенным

1.1. -C(O)-R⁵, где R⁵ обозначает атом водорода или -(C₁-C₄)-алкил,

1.2. -(C₁-C₄)-алкилом,

1.3. -O-R⁵, где R⁵ обозначает атом водорода или -(C₁-C₄)-алкил,

1.4. -N(R⁵)-R⁶, где R⁵ и R⁶ независимо друг от друга обозначают атом водорода или -(C₁-C₄)-алкил,

1.5. галогеном,

1.6. кето-остатком,

2. -C(O)-R⁵, где R⁵ обозначает атом водорода или -(C₁-C₄)-алкил,

3. -C(O)-OR⁵, где R⁵ обозначает атом водорода или -(C₁-C₄)-алкил, или

4. -C(O)-N(R⁷)-R⁸, где R⁷ и R⁸ независимо друг от друга обозначают атом водорода, -(C₁-C₄)-алкил-ОН, -О-(C₁-C₄)-алкил или -(C₁-C₄)-алкил,

R3 обозначает атом водорода или -(C₁-C₄)-алкил,

R4 обозначает

1. гетероарильный остаток из группы, включающей пиррол, фуран, тиофен, имидазол, пиразол, оксазол, изоксазол, тиазол, изотиазол, тетразол, 1,2,3,5-оксатиадиазол-2-оксиды, триазолоны, оксадиазолон, изоксазолон, оксадиазолидиндион, триазол, 3-гидроксипирро-2,4-дионы, 5-оксо-1,2,4-тиадиазолы, пиридин, пиразин, пиримидин, индол, изоиндол, индазол, фталазин, хинолин, изохинолин, хиноксалин, хиназолин, циннолин, β-карболин и бензанелированные, циклопента- или циклогекса-производные этих гетероарильных остатков, причем гетероарильный остаток незамещен или одно-, двух- или трехкратно замещен, независимо друг от друга, -(C₁-C₅)-алкилом, -(C₁-C₅)-алкокси, галогеном, нитро, амино, трифторметилом, гидроксилом, гидрокси-(C₁-C₄)-алкилом, метилендиокси, этилендиокси, формилом, ацетилом, циано, гидроксикарбонилом, аминокарбонилом или -(C₁-C₄)-алкоксикарбонилом, или

2. арильный остаток из группы, включающей фенил, нафтил, 1-нафтил, 2-нафтил, бифенилил, 2-бифенилил, 3-бифенилил и 4-бифенилил, антрил или флуоренил, и арильный остаток незамещен или одно-, двух- или трехкратно замещен, независимо друг от друга, -(C₁-C₅)-алкилом, -(C₁-C₅)-алкокси, галогеном, нитро, амино, трифторметилом, гидроксилом, гидрокси-(C₁-C₄)-алкилом, метилендиокси, этилендиокси, формилом, ацетилом, циано, гидроксикарбонилом, аминокарбонилом или -(C₁-C₄)-алкоксикарбонилом.

Изобретение касается далее соединений формулы I, причем X и M являются одинаковыми или разными и независимо друг от друга обозначают атом N или CH,

R1 и R11 определены, как в указано выше в пунктах 1-9,

R2 обозначает

1. гетероарильный остаток из группы, включающей имидазол, изотиазол, изоксазол, 2-изоксазолидин, изоксазолидин, изоксазолон, 1,3,4-оксадиазол, оксадиазолидиндион, 1,2,3,5-оксадиазолон, оксазол, 5-оксо-4,5-дигидро-[1,3,4]оксадиазол, тетразол, тиадиазол, тиазол, триазол или триазолон, и гетероарильный остаток является незамещенным или, независимо друг от друга, одно-, двух- или трехкратно замещенным

1.1. кето-остатком,

1.2. галогеном или

1.3. -(C₁-C₂)-алкилом, или

2. -C(O)-N(R⁷)-R⁸, где R⁷ и R⁸, независимо друг от друга, обозначают атом водорода, -(C₁-C₄)-алкил-ОН, -О-(C₁-C₄)-алкил или -(C₁-C₄)-алкил,

R3 обозначает атом водорода, метил или этил,

R4 обозначает

1. гетероарильный остаток из группы ненасыщенных, частично насыщенных или полностью насыщенных циклов, образованных из пиридина, пиразина, пиримидина, пиридазина, пиррола, фурана, тиофена, имидазола, пиразола, оксазола, изоксазола, тиазола, триазола или изотиазола, причем гетероарильный остаток незамещен или одно-, двух- или трехкратно замещен, независимо друг от друга, -(C₁-C₄)-алкилом, -(C₁-C₄)-алкокси, F, Cl, J, Br, нитро, амино, трифторметилом, гидроксилом, гидрокси-(C₁-C₄)-алкилом, метилендиокси, этилендиокси, формилом, ацетилом, циано, гидроксикарбонилом, аминокарбонилом или -(C₁-C₄)-алкоксикарбонилом, или

2. фенил, и фенил незамещен или одно-, двух- или трехкратно замещен, независимо друг от друга, F, Cl, J, Br, CF₃, -OH, (C₁-C₄)-алкилом или -(C₁-C₄)-алкокси.

Далее изобретение касается соединений:

[(S)-2-дифениламино-1-(5-оксо-4,5-дигидро-[1,3,4]оксадиазол-2-ил)-этил]-амид 2-(2-метиламино-пиримидин-4-ил)-1H-индол-5-карбоновой кислоты,

{1-карбамоил-2-[(4-фтор-фенил)-пиридин-2-ил-амино]-этил}-амид 2-(2-метиламино-пиримидин-4-ил)-1H-индол-5-карбоновой кислоты,

[(S)-1-(5-оксо-4,5-дигидро-1,3,4-оксадиазол-2-ил)-2-(фенил-пиридин-2-ил-амино)-этил]-амид 2-(2-метиламино-пиримидин-4-ил)-1H-индол-5-карбоновой кислоты,

{1-карбамоил-2-[(4-фтор-фенил)-пиридин-2-ил-амино]-этил}-амид 2-(2-амино-пиримидин-4-ил)-1H-индол-5-карбоновой кислоты,

[2-[(4-фтор-фенил)-пиридин-2-ил-амино]-1-(4H-[1,2,4]триазол-3-ил)-этил]-амид 2-(2-метиламино-пиримидин-4-ил)-1H-индол-5-карбоновой кислоты,

[1-карбамоил-2-(фенил-тиазол-2-ил-амино)-этил]-амид (S)-2-(2-метиламино-пиримидин-4-ил)-1H-индол-5-карбоновой кислоты,

[1-метоксикарбамоил-2-(фенил-пиридин-2-ил-амино)-этил]-амид (S)-2-(2-метиламино-пиримидин-4-ил)-1H-индол-5-карбоновой кислоты,

{1-карбамоил-2-[(фенил)-пиридин-2-ил-амино]-этил}-амид 2-(2-амино-пиримидин-4-ил)-1H-индол-5-карбоновой кислоты,

{1-карбамоил-2-[(фенил)-пиримидил-2-ил-амино]-этил}-амид 2-(2-метиламино-пиримидин-4-ил)-1H-индол-5-карбоновой кислоты,

[1-(2-гидрокси-этилкарбамоил)-2-(фенил-пиримидин-2-ил-амино)-этил]-амид 2-(2-метиламино-пиримидин-4-ил)-1H-индол-5-карбоновой кислоты,

(S)-2-{[2-(2-метиламино-пиримидин-4-ил)-1H-индол-5-карбонил]-амино}-3-[фенил-(4-трифторметил-пиримидин-2-ил)-амино]-пропионовая кислота,

{1-карбамоил-2-[(4-фтор-фенил)-(5-метил-пиримидин-2-ил)-амино]-этил}-амид 2-(2-метиламино-пиримидин-4-ил)-1H-индол-5-карбоновой кислоты,

((S)-1-карбамоил-2-дифениламино-этил)-амид 2-(2-метиламино-пиримидин-4-ил)-1H-бензоимидазол-5-карбоновой кислоты,

{1-карбамоил-2-[(фенил)-пиримидин-2-ил-амино]-этил}-амид 2-(2-метиламино-пиримидин-4-ил)-1H-бензимидазол-5-карбоновой кислоты или

{1-карбамоил-2-[(фенил)-пиридин-2-ил-амино]-этил}-амид 2-(2-метиламино-пиримидин-4-ил)-1H-бензоимидазол-5-карбоновой кислоты.

Под понятием «галоген» имеют в виду фтор, хлор, бром или иод. Под понятиями «-(С₁-С₅)-алкил» или «-(С₁-С₅)-алкокси» имеют в виду углеводородные остатки, углеродные цепи которых являются неразветвленными или разветвленными и содержат от 1 до 5 атомов углерода, такие как метил, этил, пропил, н-бутил, пентил или трет.-бутил. Под понятием «гетероарильный остаток из группы ненасыщенных, частично насыщенных или полностью насыщенных циклов, образованных из пиридина, пиразина, пиримидина, пиридазина, пиррола, фурана, тиофена, имидазола, пиразола, оксазола, изоксазола, тиазола, изотиазола» имеют в виду, например, соединения такие, как пиперазин, пиразолин, имидазолин, пиразолидин, имидазолидин, тетрагидропиридин, изоксазолин, изоксазолидин, морфолин, изотиазолин, изотиазолидин, тетрагидро-1,4-тиазин или пиперидин.

Получение соединений формулы I осуществляют, например, как описано в заявках WO 01/00610 и WO 01/30774. Исходные вещества для химических превращений являются известными или могут быть легко получены описанными в литературе способами.

Далее изобретение касается способа получения соединения формулы I и/или стереоизомерной формы соединения формулы I, и/или физиологически совместимой соли соединения формулы I, отличающегося тем, что

а) соединение формулы IV

где R1, R2 и R4 определены, как в формуле I, подвергают взаимодействию с хлорангидридом или активированным сложным эфиром соединения формулы III

причем D1 обозначает -COOH, и R11, X, M и R3 определены как в формуле I, в присутствии основания или, в случае необходимости, обезвоживающего средства в растворе, и переводят в соединение формулы I,

b) соединение формулы I, полученное по способу a), вследствие своей химической структуры существующее в энантиомерных формах, разделяют путем солеобразования с энантиомерно чистыми кислотами или основаниями, хроматографией на хиральных стационарных фазах или превращением посредством хиральных энантиомерно чистых соединений таких, как аминокислоты, отделением таким образом полученных диастереомеров, и отщеплением хиральных вспомогательных групп в чистых энантиомерах, или

c) соединение формулы I, полученное по способу a) или b), выделяют или в свободной форме, или, в случае наличия кислотных или основных групп, переводят в физиологически совместимые соли.

Получение производных индол- или бензимидазолкарбоновых кислот осуществляется по методике, описанной в Houben-Weyl "Methoden der Org. Chemie", Band E6-2A или E6-2B. Так, для получения производных индол- или бензимидазолкарбоновых кислот формулы III предпочтительно могут подвергаться взаимодействию гидразинобензойные кислоты и арил- или гетероарилкетоны, в присутствии полифосфорной кислоты в качестве растворителя при 145^оС. Получение необходимых гидразинобензойных кислот осуществляют известными специалистам способами, например, из соответствующих анилинов бензойной кислоты, арил- или гетероарилкетоны также получают общепринятыми среди специалистов способами, например, из соответствующих хлорангидридов кислот или нитрилов посредством взаимодействия, например, с металлоорганическими соединениями.

Для конденсации соединений формулы IV с соединениями формулы III предпочтительно используют сами по себе хорошо известные специалистам из химии пептидов способы присоединения (см., например, Houben-Weyl, Methoden der Organischen Chemie, Band 15/1 и 15/2, Georg Thieme Verlag, Stuttgart, 1974). В качестве средств для конденсации или реагентов присоединения имеют в виду такие соединения, как карбонилдиимидазол, карбодиимид, как дициклогексилкарбодиимид или диизопропилкарбодиимид (DIC), О-((циано(этокси-карбонил)-метилен)амино)-N,N,N^'N^'-тетраметилурониум-тетрафторборат (TOTU) или ангидрид пропилфосфоновой кислоты (PPA).

Конденсация может проводиться в стандартных условиях. При конденсации, как правило, необходимо, чтобы имеющиеся нереагирующие аминогруппы были защищены обратимыми защитными группами. Это относится равным образом к не участвующим в реакции карбоксильным группам, которые во время конденсации предпочтительно находятся в виде -(С₁-С₆)-алкиловых сложных эфиров, бензиловых сложных эфиров или трет.-бутиловых сложных эфиров. Защита аминогрупп является излишней, если аминогруппы еще находятся в форме стадии предшественника, как нитрогруппы или цианогруппы, и образуются только после конденсации посредством гидрирования. После конденсации имеющиеся защитные группы отщепляют пригодным образом. Например, NO₂-группы (гуанидиновая защита в аминокислотах), бензилоксикарбонильные группы и бензильные группы в бензиловых сложных эфирах могут быть удалены гидрированием. Защитные группы трет.-бутильного типа отщепляются в кислых условиях, в то время как остаток 9-флуоренилметилоксикарбонильного остатка удаляют с помощью вторичных аминов.

Изобретение касается также лекарственных средств, отличающихся эффективным содержанием, по меньшей мере, одного соединения формулы I и/или одной физиологически совместимой соли соединения формулы I, и/или, в случае необходимости, одной стереоизомерной формы соединения формулы I, вместе с фармацевтически пригодными и физиологически совместимыми носителем, добавкой и/или другими биологически активными и вспомогательными веществами.

Благодаря фармакологическим свойствам соединения согласно изобретению пригодны для профилактики и лечения всех заболеваний, протекание которых обусловлено повышенной активностью IkB-киназы. К ним относятся, например, хронические заболевания двигательного аппарата, такие, как воспалительные, иммунологически или обменом веществ обусловленные острые и хронические артриты, артропатии, ревматоидный артрит, или дегенеративные заболевания суставов, такие, как остеоартрозы, спондилезы, диабет типа II, воспалительные заболевания кишечника, атрофия хряща после травмы сустава или длительного положения покоя сустава после повреждения мениска или коленной чашечки, или разрывов связок, или заболевания соединительной ткани такие, как коллагенозы и периодонтальные заболевания, миалгии и нарушения обмена веществ кости, или заболевания, обусловленные сверхэкспрессией фактора некроза опухоли альфа (TNFα) или повышенной концентрацией TNFα такие, как истощение, рассеянный склероз, черепно-мозговая травма, болезнь Крона и язвы кишечника, или заболевания такие, как артериосклероз, стенозы, ульцерация, болезнь Альцгеймера, диссимиляция мышц, раковые заболевания (потенцирование цитотоксической терапии), инфаркт миокарда, подагра, сепсис, септический шок, эндотоксический шок, вирусные инфекции такие, как грипп, гепатит, тяжелые вирусные инфекции (HIV-инфекции), СПИД, или заболевания, вызванные аденовирусами или герпесвирусами, паразитарные инфекции такие, как малярия или лепра, грибковые или дрожжевые инфекции, воспаления мозговых оболочек, хронические воспалительные легочные заболевания такие, как хронический бронхит или астма, острые респираторные дистрессовые синдромы, острый синовит, туберкулез, псориаз, диабет, лечение острых или хронических реакций отторжения органа реципиента против трансплантированного органа, хронические заболевания «трансплантат против хозяина» и воспалительные заболевания сосудов. Названные заболевания можно лечить соединениями согласно изобретению в основном специфически и с минимальным спектром побочного действия, так как в основном ингибируется только IkB-киназа.

Лекарственные средства согласно изобретению можно вводить орально, путем ингаляции, ректально или чрезкожно, или путем подкожных, внутрисуставных, внутрибрюшинных или внутривенных инъекций. Предпочтительно оральное введение.

Изобретение касается также способа получения лекарственного средства, отличающегося тем, что, по меньшей, одно соединение формулы I с фармацевтически пригодным и физиологически совместимым носителем и, в случае необходимости, другими пригодными биологически активными веществами, добавками или вспомогательными веществами доводят до пригодной формы введения.

Пригодными твердыми или галеновыми препаративными готовыми формами являются, например, грануляты, порошки, драже, таблетки, (микро)капсулы, суппозитории, сиропы, соки, суспензии, эмульсии, капли или растворы для инъекций, а также препараты с пролонгированным высвобождением биологически активного вещества, для получения которых используются обычные вспомогательные вещества, как носители, распылители, связующие, вещества для покрытий, агенты набухания, вещества, придающие скользкость или смазки, вкусовые добавки, подсластители и агенты растворения. В качестве часто используемых вспомогательных веществ называют карбонат магния, диоксид титана, лактозу, маннит и другие сахара, тальк, молочный белок, желатин, крахмал, целлюлозу и ее производные, животные и растительные масла, как рыбий жир, подсолнечное, арахисовое или кунжутное масло, полиэтиленгликоль и растворитель, как, например, стерильная вода, и одно- или многоатомные спирты как глицерин. Предпочтительно фармацевтические препараты изготавливают и вводят в разовых дозах, причем каждая разовая доза содержит в качестве активного компонента одну определенную дозу соединения формулы I согласно изобретению. Для твердых разовых доз в виде таблеток, капсул, драже или суппозиториев эта доза может составлять вплоть до около 1000 мг, предпочтительно от приблизительно 50 до 300 мг, и для инъекционных растворов в форме ампул вплоть до около 300 мг, предпочтительно от приблизительно 10 до 100 мг. Для лечения взрослых пациентов весом около 70 кг, в зависимости от эффективности соединения согласно формуле I, показана суточная доза от приблизительно 20 до 1000 мг биологически активного вещества, предпочтительно от приблизительно 100 до 500 мг. При известных условиях, однако, также могут быть использованы большие или меньшие суточные дозы. Введение суточной дозы может осуществляться как посредством одноразового введения в форме отдельной разовой дозы, или же нескольких меньших разовых доз, так и посредством многократного приема разделенных доз в определенные интервалы.

Целевые продукты, как правило, определяются посредством масс-спектрометрических методов (FAB-, ESI-МС). Температуру обозначают в градусах Цельсия, КТ (RT) обозначает комнатную температуру (от 22 до 26^оС). Используемые сокращения или пояснены, или соответствуют общепринятым соглашениям. Далее изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Примеры получения.

А) Получение анилина.

А.1.) 2-(п-фторанилино)-пиридин(3)

Смесь из 29,34 г (0,264 моль) 4-фторанилина (1) и 29,98 г (0,264 моль) 2-хлорпиридина (2) нагревали 2 часа при 150^оС. После охлаждения до комнатной температуры (КТ) распределяли между 500 мл 1 н. NaOH и 500 мл этилового эфира уксусной кислоты. Водную фазу 2 раза экстрагировали этилацетатом (по 300 мл) и объединенные органические фазы сушили сульфатом магния. После выпаривания растворителя осадок поглощали 500 мл этилацетата и добавляли около 40 г активированного угля. 10 минут перемешивали при КТ и затем отфильтровывали через кизельгур. Активированный уголь 4 раза промывали этилацетатом (по 1 л). Растворитель отгоняли под вакуумом и осадок вымешивали из 120 мл этилацетата. Твердое вещество отсасывали и при 50^оС сушили под вакуумом. Получили 41 г 2-(п-фторанилино)-пиридина (3); выход 83%.

Суммарная формула C₁₁H₉N₂; М.В.=188,21; МС (M+H) 189,1.

¹H ЯМР (CDCl₃) 6,68-6,75 (м, 2H), 6,88 (с, 1H), 7,05 (т, 2H), 7,24-7,32 (м, 2H), 7,43-7,49 (м, 1H), 8,18 (д, 1H).

A.2.) 2-(анилино)-пиримидин (6).

Из 16,2 г анилина (4) посредством аналогичных превращений, вышеописанных в п. А.1.), посредством 2-хлорпиримидина (5) получили 9,15 г (31%) анилинопиримидина 6.

Суммарная формула C₁₀H₉N₃; М.В.=171,08; МС (M+H) 172,2.

B.) Синтез аминокислоты через Z-серин-лактон 8

B.1) Метиловый эфир (S)-2-амино-3-дифениламино-пропионовой кислоты (11)

B.1.1.) N-бензилокси-карбонил-L-серин-β-лактон (8)

54,8 г (0,209 моль) трифенилфосфина суспендировали в 600 мл ацетонитрила и охлаждали до температуры от -35 до -45^оС при исключении влажности. При этой температуре в течение 50 минут по каплям прибавляли 36,4 г (0,209 моль) диэтилового эфира азодикарбоновой кислоты. Затем перемешивали 15 минут при -35^оС. К этой смеси затем медленно прикапывали раствор из 50 г (0,209 моль) N-бензилоксикарбонил-L-серина (7) в 500 мл ацетонитрила, так что температура не поднималась выше -35^оС. Затем 12 час перемешивали при 5^оС. По прекращению реакции реакционный раствор при пониженном давлении освобождали от растворителя, и сырой продукт очищали посредством хроматографии среднего давления на кизельгеле (DCM/ацетонитрил (AcCN):25/1). После удаления растворителя получили 20,8 г N-бензилокси-карбонил-L-серин-β-лактона (8) в виде тонких иголок; выход 45% (см. также Org. Synth. 1991 (70) 1ff.).

Суммарная формула C₁₁H₁₁NO₄; М.В.=221,2; МС (M+H) 222,1.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆) 4,30 (м, 1H), 4,45 (м,1H) 5,10 (с, 2H), 5,22 (м, 2H), 7,45 (м, 5H), 8,20 (д, J=9,8 Гц, 1H).

B.1.2.) (S)-2-бензилоксикарбониламино-3-дифениламинопропионовая кислота (9)

5,0 г (22,6 ммоль) серинлактона (5) примешивали к 20 г (118,2 ммоль) дифениламина и 2 часа нагревали при 100^оС. Сырой продукт очищали посредством хроматографии среднего давления на кизельгеле (DCM/метанол:9/1, затем ЭА(этилацетат)/н-гептан:4/1). После удаления растворителя получили 3,65 г (выход 42%) чистой 2-бензилоксикарбониламино-3-дифениламинопропионовой кислоты (9).

Суммарная формула C₂₃H₂₂N₂O₄; М.В.=390,44; МС (M+H) 391,2.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆) 3,85 (м, 1H), 4,18 (м, 1H), 4,3 (м, 1H), 4,9 (м, 2H), 6,9 (м, 5H), 7,25 (м, 10H).

B.1.3.) метиловый эфир (S)-2-бензилоксикарбониламино-3-дифениламино-пропионовой кислоты (10)

К 75 мл метанола прикапывали при -5^оС 6,5 мл (89,1 ммоль) тионилхлорида и 15 мин перемешивали. Затем добавляли 3,6 г (9,22 ммоль) растворенной в 75 мл метанола 2-бензилоксикарбониламино-3-дифениламино-пропионовой кислоты (9) и далее перемешивали 3 часа при комнатной температуре. После выпаривания растворителя осадок поглощали этилацетатом и экстрагировали раствором карбоната натрия. После очистки посредством флэш-хроматографии (н-гептан/этилацетат 7:3) получили 2,76 г (50% выход) метилового эфира 2-бензилоксикарбониламино-3-дифениламино-пропионовой кислоты (10). Суммарная формула С₂₄H₂₄N₂O₄; М.В.=404,47; МС (M+H) 405,2.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆) 3,58(с, 3H), 3,95(м, 1H), 4,18(м,1H) 4,4(м,1H), 4,95(м, 2H), 6,9(м, 6H), 7,3(м,9H), 7,85(д,J=9,8 Гц, 1H).

B.1.4.) метиловый эфир (S)-2-амино-3-дифениламино-пропионовой кислоты (11)

Для отщепления защитной Z-группы 2,7 г (6,68 ммоль) производного (10), защищенного Z-группой, растворяли в 500 мл метанола и прибавляли в защитной атмосфере азота 100 мг катализатора (10% Pd(ОН)₂-C). Затем замещали инертный газ большим избытком водорода и 2 часа встряхивали в атмосфере водорода. После завершения реакции отфильтровывали катализатор и концентрировали фильтрат. Получили 1,65 г (выход 91%) метилового эфира 2-амино-3-дифениламино-пропионовой кислоты (11).

Суммарная формула С₁₆H₁₈N₂O₂; М.В.=270,32; МС (M+H) 271,2.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆) 3,45 (с, 3H), 3,58 (м, 1H), 3,8 (м, 1H), 3,95 (м, 1H), 6,9 (м, 6H), 7,3(м, 4H).

B.2.) Синтез аминокислот через акриловую кислоту 13

B.2.1.) Разделение энантиомеров

Рацемические аминокислоты, полученные через акриловую кислоту, могли быть разделены на энантиомеры посредством препаративной ВЭЖХ (HPLC) с хиральными фазами, как, например, Chiralpak AD (Daicel) 100x380, КТ, поток 300 мл/мин. Чистота энантиомеров могла быть определена посредством аналитической ВЭЖХ как Chiralpak AD-H (Daicel) 4,6x250, 30^оС, поток 1 мл/мин, комнатная температура).

B.2.2.) метиловый эфир (3-(N-4-фторфенил-N-2-пиридил)-амино)-2-(ди-трет.-бутилоксикарбонил)-амино-пропионовой кислоты (14)

B.2.2.1.) метиловый эфир 2-(ди-трет.-бутилоксикарбонил)-амино-акриловой кислоты (13)

50 г (0,228 моль) Boc-серина (12) растворяли в 300 мл ацетонитрила. Добавляли 107 г (0,493 моль) Boc-ангидрида и 2,64 г (22 ммоль) DMAP. Оставляли на ночь перемешиваться при КТ, отгоняли растворитель под вакуумом и осадок поглощали 500 мл этилацетата. Органическую фазу промывали 500 мл 1 н. HCl и сушили сульфатом магния. Посредством кристаллизации из 200 мл гептана при -30^оС после отсасывания получили 23 г акриловой кислоты 13. Маточный раствор концентрировали и осадок растворяли в 140 мл ацетонитрила. Добавляли 31 г (0,142 моль) Boc-ангидрида и 1,26 г (10 ммоль) DMAP. После нагревания до 50^оС в течение 8 час отгоняли растворитель под вакуумом и осадок поглощали 500 мл этилацетата. Органическую фазу промывали 400 мл 1 н. HCl и сушили над сульфатом магния. После удаления растворителя под вакуумом посредством кристаллизации из гептана далее получили 31,5 г акрилата 13. Выход 54,5 г (0,181 моль), 79%. Суммарная формула С₁₄H₂₃NO₆; М.В.=301,34; МС ((M*2)+Na⁺) 625,7.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆) 1,40 (с, 18H), 3,74 (с, 3H), 5,85(с, 1H), 6,28(с, 1H).

B.2.2.2.) метиловый эфир (3-(N-4-фторфенил-N-2-пиридил)-амино)-2-(ди-трет.-бутилоксикарбонил)-амино-пропионовой кислоты (14)

11,5 г (38,2 ммоль) акрилата 13 смешивали с 7,2 г (38,2 ммоль) анилина 3 и 37,3 г (114 ммоль) карбоната цезия. Добавляли 100 мл ацетонитрила и оставляли 2 дня перемешиваться при 55^оС. После этого оставляли далее на 2 дня перемешиваться при комнатной температуре. Твердое вещество отсасывали через кизельгур и 3 раза промывали ацетонитрилом (по 100 мл). Из объединенных органических фаз под вакуумом отгоняли растворитель и осадок хроматографировали на кизельгеле с элюентом гептан/этилацетат 4:1. Выход: 14 г (75%) 14.

Суммарная формула С₂₅H₃₂FN₃O₆; М.В.=489,55; МС (M+H) 490,6.

¹H ЯМР (CDCl₃) 1,28 (с, 18H), 3,72 (с, 3H), 4,25(дд, 1H), 4,75(дд, 1H), 5,83(дд, 1H), 6,22(д, 1H), 6,56-6,61(м, 1H), 7,05-7,12(м, 2H), 7,19-7,26(м, 3H), 8,18(д, 1H).

B.2.3.) метиловый эфир (3-(N-фенил-N-2-пиримидил)-амино)-2-(ди-трет.-бутилоксикарбонил)-амино-пропионовой кислоты (15)

Из 35 г 6, при аналогичном превращении, описанном в п. B.2.2.2.), получили 3 г (7%) аминокислоты 15.

Суммарная формула С₂₄H₃₂N₄O₆; М.В.=472,23; МС (M+H) 473,1.

С.) Синтез гетероциклических основных фрагментов

С.1.) Синтез индольного основного фрагмента:

2-(2-метиламино-пиримидин-4-ил)-1Н-индол-5-карбоновая кислота (20)

С.1.1.) 1-диметиламино-4,4-диметокси-пент-1-ен-3-он (18)

100 г (0,76 моль) 3,3-диметокси-2-бутанона (16) при 120^оС перемешивали в течение 48 час с 90,2 г N,N-диметилформамид-диметилацеталя (17) (0,76 моль). Метанол, образующийся в результате реакции, непрерывно удаляли из реакционного раствора посредством дистилляции. При охлаждении раствора начиналась спонтанная кристаллизация, которая с помощью небольшой добавки гептана доходила до полного завершения. Таким образом получили 128,24 г сырого продукта 18 (выход 90%), который подвергали превращению без дальнейшей очистки.

Суммарная формула С₉H₁₇NO₃; М.В.=187,24; МС (M+H) 188,2.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆) 1,22(с, 3H), 2,80(с, 3H), 3,10 (с, 9H), 5,39(д,J=15 Гц, 1H), 7,59(д,J=15 Гц, 1H).

С.1.2.) [4-(1,1-диметокси-этил)-пиримидин-2-ил]-метил-амин (19)

1,22 г (53 ммоль) натрия растворяли в 100 мл абсолютного этанола. К этому при перемешивании добавляли 5,8 г (53 ммоль) метилгуанидингидрохлорида и 10 г (53 ммоль) 1-диметиламино-4,4-диметокси-пент-1-ен-3-он (18) и 4 часа нагревали до кипения. По завершении реакции выпаривали этанол. Полученный таким образом продукт 19 без дальнейшей очистки использовали в последующей реакции. Выход 11,5 г (58 ммоль, количественно).

Суммарная формула С₉H₁₅N₃O₂; М.В.=197,24; МС (M+H) 198,2.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆) 1,45(с, 3H), 2,78(с, 3H), 3,10 (с, 6H), 6,75(д, J=3 Гц, 1H), 7,0-7,1 (с(уш.), 1Н), 8,30(д, J=3 Гц, 1H).

С.1.3.) 2-(2-метиламино-пиримидин-4-ил)-1Н-индол-5-карбоновая кислота (20)

К 150 мл 50%-ной серной кислоты при комнатной температуре при перемешивании добавляли 5 г (25 ммоль) [4-(1,1-диметокси-этил)-пиримидин-2-ил]-метиламина (19) и 3,85 г 4-гидразинбензойной кислоты и 4 часа нагревали при 130^оС. Метанол, образующийся в результате реакции, непрерывно удаляли из реакционного раствора посредством дистилляции. После охлаждения до 10^оС реакционную смесь выливали на 200 мл льда и с помощью концентрированного раствора гидроксида натрия устанавливали значение рН около 5,5. Образующийся при этом осадок сульфата натрия и смеси продукта отфильтровывали и осадок с фильтра многократно экстрагировали метанолом. Объединенный метанольный экстракт концентрировали и продукт 20 очищали посредством флэш-хроматографии (DCM/метанол 9:1). Выход 0,76 г (11%).

Суммарная формула С₁₄H₁₃N₄O₂; М.В.=268,28; МС (M+H) 269,1.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆) 2,95 (с, 3H), 6,90-7,10 (с(уш.), 1H), 7,18 (д, J=3 Гц, 1H), 7,4(с, 1H), 7,58(д, J=4,5 Гц, 1H), 7,80 (д, J=4,5 Гц, 1H), 8,30(с, 1H), 7,80(д, J=4,5 Гц, 1H), 8,38 (д, J=3 Гц, 1H), 11,85(с, 1H), 12,40-12,60(с(уш.), 1H).

С.2.) Синтез бензимидазольного основного фрагмента:

2-(2-метиламино-пиримидин-4-ил)-1Н-бензимидазол-5 карбоновая кислота (25)

С.2.1) 4-диметиламин-1,1-диметокси-бут-3-ен-2-он (22)

300 г (307 мл, 2,54 моль) метилглиоксальдиметилацеталя (21) при 110^оС перемешивали в течение 4 час с 300 г (337 мл, 2,54 моль) N,N-диметилформамид-диметилацеталя (17). Метанол, образующийся в результате реакции, непрерывно удаляли из реакционного раствора посредством дистилляции. После охлаждения раствор экстрагировали гептаном и испаряли растворитель. Получили 303 г сырого продукта 22 (выход 70%), который подвергали превращению без дальнейшей очистки.

Суммарная формула С₈H₁₅NO₃; М.В.=173,21; МС (M+H) 174,1.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆) 2,10(с, 1H), 2,80(с, 3H), 3,10 (с, 3H), 3,25 (с, 3H), 3,3 (с, 3H), 4,42 (с, 1H), 5,19 (д(уш.), J=12,8 Гц, 1H), 7,60 (д, J=15 Гц, 1H).

С2.2.) (4-диметоксиметил-пиримидин-2-ил)-метил-амин (23)

0,33 г (14,4 ммоль) натрия растворяли в 50 мл абсолютного этанола. К этому при перемешивании добавляли 1,57 г (14,4 ммоль) метилгуанидингидрохлорида и 2,48 г (14,4 ммоль) 4-диметиламин-1,1-диметокси-бут-3-ен-2-она (22) и 3 часа нагревали до кипения. По завершении реакции выпаривали этанол. Полученный таким образом продукт 23 использовали без дальнейшей очистки. Выход 2,6 г (количественно).

Суммарная формула С₈H₁₃N₃O₂; М.В.=183,21; МС (M+H) 184,1.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆) 2,78(с, 6H), 3,10(с, 3H), 5,02 (с, 1H), 6,62 (д, J=3 Гц, 1H), 8,30 (д, J=3 Гц, 1H).

С.2.3.) 2-метиламино-пиримидин-4-карбальдегид (24)

10 г (54 ммоль) (4-диметоксиметил-пиримидин-2-ил)-метил-амина (23) растворяли в 54 мл 2 н. серной кислоты и при перемешивании нагревали 3 часа до 80^оС. После охлажения реакции реакционный раствор осторожно доводили до рН около 9 твердым Na₂CO₃ и 3 раза экстрагировали этанолом. Объединенный высушенный экстракт после выпаривания растворителя содержал титульный альдегид 24 с 60%-ным выходом (4,47 г).

Суммарная формула С₆H₇N₃O; М.В.=137,12; МС (M+H) 138,2.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆) 2,60-2,80 (с(уш.), 3H), 6,95 (д, J=3 Гц, 1H), 7,40-7,60 (с(уш.), 1H), 8,55 (д, J=3 Гц, 1H).

С.2.4.) 2-(2-метиламин-пиримидин-4-ил)-1Н-бензоимидазол-5-карбоновая кислота (25)

4,3 г (31,3 ммоль) метиламин-пиримидин-4-карбальдегида (24) и 4,8 г (31,1 ммоль) 3,4-диамино-бензойной кислоты 2 часа нагревали в 300 мл нитробензола до 150^оС. После охлаждения до 0^оС осадок бензимидазола отделяли от нитробензола путем фильтрации, и продукт 25 очищали посредством флэш-хроматографии (DCM/метанол 4:1). Выход 2,66 г (32%).

Суммарная формула С₁₃H₁₁N₅O₂; М.В.=269,28; МС (M+H) 270,2.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆) 2,95 (с, 3H), 7,50 (д, J=3 Гц, 1H), 7,75 (д, J=4,5 Гц, 1H), 7,90 (д, J=4,5 Гц, 1H), 8,35(с, 1H), 8,55 (д, J=3 Гц, 1H), 8,70-9,05(с(уш.), 1H).

D.) Целевой продукт индол

D.1.) [(S)-2-дифениламино-1-(5-оксо-4,5-дигидро-[1,3,4]оксадиазол-2-ил)-этил]-амид 2-(2-метиламино-пиримидин-4-ил)-1Н-индол-5-карбоновой кислоты (28)

D.1.1.) метиловый эфир 3-дифениламино-2-{[2-(2-метиламино-пиримидин-4-ил)-1Н-индол-5-карбонил]-(S)-амино}-пропионовой кислоты (26)

5,0 г (18,64 ммоль) 2-(2-метиламино-пиримидин-4-ил)-1Н-индол-5-карбоновой кислоты (20) растворяли в 1,2 л диметилформамида (ДМФ) и друг за другом добавляли 7,9 г (24,08 ммоль) TOTU (О-[(циано-(этоксикарбонил)метилиден)амино)-1,1,3,3-тетраметил]урониум-тетрафторборат) и 7,9 мл (46,45 ммоль) этилдиизопропиламина. Перемешивали 20 мин при 5^оС и добавляли к раствору 0,73 г (3,28 ммоль) метилового эфира (S)-2-амино-3-дифениламинопропионовой кислоты (11). После 15 час перемешивания реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, осадок поглощали н-бутанолом, и органическую фазу для отделения побочных продуктов экстрагировали насыщенным раствором гидрокарбоната натрия. После сушки над MgSO₄ и концентрирования органической фазы выделяли метиловый эфир титульного соединения 26 посредством флэш-хроматографии на кизельгеле (DCM:метанол=19:1). Выход 4,3 г (98%).

Суммарная формула С₃₀H₂₈N₆O₃; М.В.=520,22; МС (M+H) 521,3.

¹H ЯМР (ДМСО-d₆) 2,95 (c(уш.), 3H), 3,60 (с, 3H), 4,19-4,58 (м, 2H), 4,85 (кв, 1H), 6,90-7,10 (м, 7H), 7,18 (д, J=3 Гц, 1H), 7,25-7,40 (м, 5H), 7,50 (д, J=4,5 Гц, 1H), 7,65 (д, J=4,5 Гц, 1H), 8,05 (с, 1H), 8,35 (д, J=3 Гц, 1H), 8,70 (д, J=3,75Гц, 1H), 11,85 (с, 1H).

D.1.2.) ((S)-2-дифениламино-1-гидразин-карбонил-этил)-амид 2-(2-метиламино-пиримидин-4-ил)-1Н-индол-5-карбоновой кислоты (27)

1,0 г (1,92 ммоль) метилового эфира 3-дифениламино-2-{[2-(2-метиламино-пиримидин-4-ил)-1Н-индол-5-карбонил]-(S)-амино}-пропионовой кислоты (26) растворяли в 10 мл метанола, добавляли 0,48 г (9,95 ммоль) гидразинг