Производные 2-алкилиден-19-нор-витамина d для лечения слабости, поражения мышц или саркопении

Производные 2-алкилиден-19-нор-витамина d для лечения слабости, поражения мышц или саркопении

Иллюстрации

Показать все

Реферат

ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к способам лечения слабости, поражения мышц или саркопении, включающим введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества 2-метилен-19-нор-20(S)-1α,25-дигидроксивитамина D₃.

ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Витамин D является общим термином, который обозначает группу стероидных молекул. Активная форма витамина D, которая называется 1,25-дигидроксивитамином D₃ (1,25-дигидроксихолекальциферолом), синтезируется в организме людей путем превращения 7-дегидрохолестерина в витамин D₃ (холекальциферол). Это превращение происходит в коже и требует УФ-облучения, которое обычно происходит из солнечного света. Затем в печени в процессе обмена веществ витамин D₃ превращается в 25-гидроксивитамин D₃ (25-гидроксихолекальциферол), который затем дополнительно метаболизируется в почках в активную форму витамина D, 1,25-дигидроксивитамин D₃. 1,25-Дигидроксивитамин D₃ затем распределяется по всему организму, где он связывается с внутриклеточными рецепторами витамина D.

Активная форма витамина D представляет собой гормон, который, как известно, участвует в минеральном обмене и росте костей и способствует поглощению кальция в кишечнике.

Аналоги витамина D раскрыты в патенте США №5843928, опубликованном 1 декабря 1998 года. Раскрытые соединения представляют собой производные 2-алкилиден-19-нор-витамина D и характеризуются низкой активностью транспорта кальция в кишечнике и высокой активностью мобилизации кальция из костей по сравнению с 1,25-дигидроксивитамином D₃.

Найдено, что производные 2-алкилиден-19-нор-витамина D, и особенно соединение 2-метилен-19-нор-20(S)-1α,25-дигидроксивитамин D₃ (также известное как 2MD), можно применять в лечении слабости, поражения мышц или саркопении. 2-метилен-19-нор-20(S)-1α,25-дигидроксивитамин D₃ может быть введен перорально, парентерально или трансдермально.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

Фиг.1 представляет собой гистограмму, показывающую эффект введения 2MD на процентное содержание жира тела у опытных животных по сравнению с контрольными животными подгруппы «фиктивная операция - носитель» и «овариэктомия-носитель» по результатам измерения посредством двухэнергетической рентгеновской абсорбциометрии (DEXA). DEXA определяет вклад мягкой тощей ткани, мягкой жировой ткани и костных компартментов в общую массу тела путем дифференциации между тканевым ослаблением рентгеновского излучения с двумя различными длинами волн.

Фиг.2 представляет собой гистограмму, показывающую результаты введения 2MD на состав тела овариэктомизированных крыс по результатам измерения посредством DEXA.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к лечению слабости, поражения мышц или саркопении с использованием 2-метилен-19-нор-20(S)-1α,25-дигидроксивитамина D₃. Производные 2-алкилиден-19-нор-витамина D раскрыты в патенте США 5843928, и они характеризуются общей формулой I, представленной ниже:

где Y₁ и Y₂, которые могут быть одинаковыми или разными, каждый выбран из группы, состоящей из водорода и защитной группы для гидрокси, R₆ и R₈, которые могут быть одинаковыми или разными, каждый выбран из группы, состоящей из водорода, алкила, гидроксиалкила и фторалкила, или взятые вместе представляют собой группу -(СН₂)_x-, где x представляет собой целое число от 2 до 5, и где группа R представляет собой любые типичные боковые цепи, известные для соединений типа витамина D.

Более конкретно, R может представлять собой насыщенный или ненасыщенный углеводородный радикал, содержащий от 1 до 35 атомов углерода, который может быть неразветвленным, разветвленным или циклическим и который может содержать один или более дополнительных заместителей, таких как гидроксигруппы или защищенные гидроксигруппы, фтор, карбонильная, сложноэфирная, эпокси, аминогруппа или другие гетероатомные группы. Предпочтительные боковые цепи этого типа представлены нижеприведенной структурой:

где стереохимический центр (соответствующий С-20 в стероидной нумерации) может иметь R- или S-конфигурацию (то есть либо природную конфигурацию у 20-го атома углерода, либо 20-эпи-конфигурацию) и где Z выбран из Y, -OY, -CH₂OY, -C=CY и -CH=CHY, где двойная связь может иметь цис- или транс-конфигурацию, и где Y выбран из водорода, метила, -COR⁵ и радикала следующей структуры:

где m и n независимо представляют собой целые числа от 0 до 5, где R¹ выбран из водорода, дейтерия, гидроксигруппы, защищенной гидроксигруппы, фтора, трифторметила и С_1-5-алкила, который может представлять собой неразветвленную или разветвленную цепь и, возможно, несет на себе заместитель гидроксигруппы или защищенной гидроксигруппы, и где каждый из R², R³ и R⁴ независимо выбран из дейтерия, дейтероалкила, водорода, фтора, трифторметила и С_1-5-алкила, который может представлять собой неразветвленную или разветвленную цепь и, возможно, несет на себе заместитель гидроксигруппы или защищенной гидроксигруппы, и где R¹ и R², взятые вместе, представляют собой оксогруппу или алкилиденовую группу, =CR²R³ или группу -(СН₂)_р-, где р представляет собой целое число от 2 до 5, и где R³ и R⁴, взятые вместе, представляют собой оксогруппу или группу -(CH₂)_q-, где q представляет собой целое число от 2 до 5, и где R⁵ представляет собой водород, гидроксигруппу, защищенную гидроксигруппу или С_1-5-алкил, и где любая из СН-групп в положениях 20, 22 или 23 в боковой цепи может быть замещена атомом азота, или где любая из групп -СН(СН₃)-, -CH(R³)- или -CH(R²)- в положениях 20, 22 и 23 соответственно может быть замещена атомом кислорода или серы.

Волнистая линия при метильном заместителе у С-20 показывает, что 20-й атом углерода может иметь либо R-, либо S-конфигурацию.

Конкретные важные примеры боковых цепей с природной 20R-конфигурацией представляют собой структуры, представленные ниже формулами (а), (б), (в), (г) и (д), то есть боковую цепь в том виде, в каком она присутствует в 25-гидроксивитамине D₃ (а); витамине D₃ (б); 25-гидроксивитамине D₂(в); витамине D₂ (г) и С-24 эпимере 25-гидроксивитамина D₂ (д):

В контексте данного описания термин "защитная группа для гидрокси" обозначает любую группу, обычно используемую для временной защиты гидроксильных функциональных групп, такую как, например, алкоксикарбонильные, ацильные, алкилсилильные или алкиларилсилильные группы (далее в настоящем изобретении называемые "силильными" группами) и алкоксиалкильные группы. Алкоксикарбонильные защитные группы представляют собой алкил-О-СО-группировки, такие как метоксикарбонил, этоксикарбонил, пропоксикарбонил, изопропоксикарбонил, бутоксикарбонил, изобутоксикарбонил, трет-бутоксикарбонил, бензилоксикарбонил или аллилоксикарбонил. Термин "ацил" обозначает алканоильную группу из 1-6 атомов углерода во всех ее изомерных формах, или карбоксиалканоильную группу из 1-6 атомов углерода, такую как оксалильная, малонильная, сукцинильная или глутарильная группа, или ароматическую ацильную группу, такую как бензоильная группа или галогено-, нитро- или алкил-замещенная бензоильная группа. Слово "алкил", используемый в данном описании или формуле изобретения, означает неразветвленный или разветвленный алкильный радикал из 1-10 атомов углерода во всех его изомерных формах. Алкоксиалкильные защитные группы представляют собой такие группировки, как метоксиметил, этоксиметил, метоксиэтоксиметил или тетрагидрофуранил и тетрагидропиранил. Предпочтительные силил-защитные группы представляют собой триметилсилил, триэтилсилил, трет-бутилдиметилсилил, дибутилметилсилил, дифенилметилсилил, фенилдиметилсилил, дифенил-трет-бутилсилил и аналогичные алкилированные силильные радикалы. Термин "арил" обозначает фенил-замещенную или любую алкил-, нитро- или галогено-замещенную фенильную группу.

"Защищенная гидроксигруппа" представляет собой производное гидроксигруппы или гидроксигруппу, защищенную с помощью любой из вышеперечисленных групп, обычно используемых для временной или постоянной защиты гидроксильных функциональных групп, например с помощью силильных, алкоксисилильных, ацильных или алкоксикарбонильных групп, как определено ранее. Термины "гидроксиалкил", "дейтероалкил" и "фторалкил" относятся к любому алкильному радикалу, замещенному одной или более гидроксильными, дейтериевыми группами или фторо соответственно.

Следует отметить, что в данном описании термин "24-гомо" относится к добавлению одной метиленовой группы, а термин "24-дигомо" относится к добавлению двух метиленовых групп к атому углерода в положении 24 в боковой цепи. Аналогично, термин "тригомо" относится к добавлению трех метиленовых групп. Также термин "26,27-диметил" относится к добавлению метильной группы к атомам углерода в положениях 26 и 27, так что, например, R³ и R⁴ представляют собой этильные группы. Аналогично, термин "26,27-диэтил" относится к добавлению этильной группы в положениях 26 и 27, так что R³ и R⁴ представляют собой пропильные группы.

В настоящем изобретении используется 2-метилен-19-нор-20(S)-1α,25-дигидроксивитамин D₃.

Слабость характеризуется прогрессирующей и неуклонной потерей массы скелетных мышц, приводящей к высокому риску травмы при падении, трудности выздоровления, удлинению срока госпитализации и длительной нетрудоспособности, требующей помощи при самообслуживании. Уменьшение мышечной массы, физической силы и физической работоспособности обычно приводит к снижению качества жизни, потере независимости и смерти. Слабость обычно ассоциируется со старением, но она также может возникать, когда потеря мышечной массы и уменьшение силы являются следствием других факторов, таких как индуцированная болезнью кахексия, иммобилизация или индуцированная лекарствами саркопения. Другим термином, который используют для обозначения слабости, является саркопения, которая представляет собой общее обозначение потери массы или качества скелетных мышц. Примеры свойств скелетных мышц, которые вносят вклад в их качество в целом, включают сократимость, размер и тип волокон, утомляемость, гормональную реактивность, поглощение/метаболизм глюкозы и плотность капилляров. Потеря качества мышц, даже при отсутствии потери мышечной массы, может приводить к потере физической силы и нарушению физической работоспособности.

Термин "поражение мышц" в контексте данного описания представляет собой поражение любой мышечной ткани. Поражение мышц может являться результатом физической травмы мышечной ткани в результате несчастного случая, спортивной травмы, эндокринных расстройств, заболевания, ран или хирургических вмешательств. Способы по настоящему изобретению полезны для лечения пораженных мышц, поскольку способствуют регенерации пораженных мышц. Настоящие методы являются полезными также для облегчения мышечных спазмов.

Следует отметить, что при рассмотрении соединений в данном описании предполагается, что эти соединения могут быть введены пациенту в виде фармацевтически приемлемой соли, пролекарства или соли пролекарства. Подразумевается, что все такие вариации включены в объем изобретения.

Термин "пациент, нуждающийся в таком лечении" обозначает людей и других животных, у которых имеется слабость, поражение мышц или саркопения или которые рискуют приобрести их.

Термин "лечение", "лечить" или "терапия" в контексте данного описания включает превентивное (например, профилактическое), паллиативное и радикальное лечение.

Под термином "фармацевтически приемлемый" подразумевают, что носитель, разбавитель, эксципиенты и/или соли или пролекарства должны быть совместимы с другими ингредиентами препарата и не представлять опасности для пациента.

Термин "пролекарство" обозначает соединение, которое превращается in vivo с получением соединения по настоящему изобретению. Это превращение происходит с помощью различных механизмов, например посредством гидролиза в крови. Использование пролекарств обсуждается в Т. Higuchi and W. Stella, "Pro-drugs as Novel Delivery Systems", Vol.14 of the A.C.S. Symposium Series и в Bioreversible Carriers in Drug Design, ed. Edward B.Roche, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987.

Например, когда соединение, полезное в настоящем изобретении, содержит функциональную группу карбоновой кислоты, пролекарство может включать сложный эфир, образованный путем замещения атома водорода этой кислотной группы такой группой, как (С₁-С₈)алкил, (С₂-С₁₂)алканоилоксиметил, 1-(алканоилокси)этил, содержащий от 4 до 9 атомов углерода, 1-(метил-1-(алканоилокси)-этил, содержащий от 5 до 10 атомов углерода, алкоксикарбонилоксиметил, содержащий от 3 до 6 атомов углерода, 1-(алкоксикарбонилокси)этил, содержащий от 4 до 7 атомов углерода, 1-метил-1-(алкоксикарбонилокси)этил, содержащий от 5 до 8 атомов углерода, N-(алкоксикарбонил)аминометил, содержащий от 3 до 9 атомов углерода, 1-(N-(алкоксикарбонил)амино)этил, содержащий от 4 до 10 атомов углерода, 3-фталидил, 4-кротонолактонил, гамма-бутиролактон-4-ил, ди-N,N-(С₁-С₂)алкиламино(С₂-С₃)алкил (такой как β-диметиламиноэтил), карбамоил-(С₁-С₂)алкил, N,N-ди(С₁-С₂)алкилкарбамоил-(С₁-С₂)алкил и пиперидино-, пирролидино- или морфолино(С₂-С₃)алкил.

Аналогично, когда соединение, используемое в настоящем изобретении, включает спиртовую функциональную группу, пролекарство может быть образовано путем замещения атома водорода спиртовой группы такой группой, как (С₁-С₆)алканоилоксиметил, 1-((С₁-С₆)алканоилокси)этил, 1-метил-1-((С₁-С₆)алканоилокси)этил, (С₁-С₆)алкоксикарбонилоксиметил, N-(С₁-С₆)алкоксикарбониламинометил, сукциноил, (С₁-С₆)алканоил, α-амино(С₁-С₄)алканоил, арилацил и α-аминоацил или α-аминоацил-α-аминоацил, где каждая α-аминоацильная группа независимо выбрана из природных L-аминокислот, Р(O)(ОН)₂, -Р(O)(O(С₁-С₆)алкил)₂ и гликозила (радикала, получающегося в результате удаления гидроксильной группы полуацетальной формы углевода).

Когда соединение, полезное в настоящем изобретении, включает функциональную аминогруппу, пролекарство может быть образовано путем замещения атома водорода в аминогруппе такой группой, как R^X-карбонил, R^ХO-карбонил, NR^ХR^Х,-карбонил, где каждый из R^X и R^X, независимо представляет собой (С₁-С₁₀)алкил, (С₃-С₇)циклоалкил, бензил, или R^Х-карбонил представляет собой природный α-аминоацил или природный α-аминоацил-природный α-аминоацил, -C(OH)C(O)OY^x, где Y^x представляет собой Н, (С₁-С₆)алкил или бензил, -C(OY^X0)Y^X1, где Y^X0 представляет собой (С₁-С₆алкил, a Y^X1 представляет собой (С₁-С₆)алкил, карбокси(С₁-С₆)алкил, амино(С₁-С₆)алкил или моно-N- или ди-N,N-(С₁-С₆)алкиламиноалкил, -C(Y^X2)Y^X3, где Y^X2 представляет собой водород или метил, a Y^X3 представляет собой моно-N- или ди-N,N-(С₁-С₆)алкиламино, морфолино, пиперидин-1-ил или пиролидин-1-ил.

Выражение "фармацевтически приемлемая соль" относится к нетоксичным анионным солям, содержащим такие анионы, как хлорид, бромид, иодид, сульфат, бисульфат, фосфат, ацетат, малеат, фумарат, оксалат, лактат, тартрат, цитрат, глюконат, метансульфонат и 4-толуол-сульфонат (но не ограничено ими). Это выражение также относится к нетоксичным катионным солям, таким как соль натрия, калия, кальция, магния, аммония или протонированного бензатина (N,N-дибензилэтилендиамина), холина, этаноламина, диэтаноламина, этилендиамина, мегламина (N-метилглюкамина), бенетамина (N-бензилфенетиламина), пиперазина или трометамин-(2-амино-2-гидроксиметил-1,3-пропандиола) (но не ограничено ими).

Необходимо учитывать, что соединения, используемые в этом изобретении, могут существовать в меченной радиоизотопом форме, то есть указанные соединения могут содержать один или более атомов, имеющих атомную массу или массовое число, отличные от атомной массы или массового числа, обычно встречающихся в природе. Радиоизотопы водорода, углерода, фосфора, фтора и хлора включают ³Н, ¹⁴С, ³²Р, ³⁵S, ¹⁸F и ³⁶С соответственно. Соединения, используемые в этом изобретении, которые содержат эти радиоизотопы и/или другие радиоизотопы других атомов, входят в объем данного изобретения. Радиоизотопы трития, то есть ³Н, и углерода-14, то есть ¹⁴С, являются особенно предпочтительными из-за простоты их получения и выявления. Меченные радиоизотопом соединения по этому изобретению обычно могут быть получены с помощью способов, хорошо известных специалистам в данной области. Такие меченные радиоизотопом соединения удобно могут быть получены путем выполнения раскрытых в данном описании методик, за исключением замещения нерадиоактивного реагента легко доступным меченным радиоизотопом реагентом.

Кроме того, когда 2MD образует гидраты или сольваты, их использование также включено в объем изобретения.

Введение 2MD может быть выполнено любым способом, который доставляет это соединение системно и/или местно. Эти способы включают пероральный, парентеральный и интрадуоденальный пути и так далее. Обычно это соединения вводят перорально, но парентеральное введение (например, внутривенное, внутримышечное, трансдермальное, подкожное, ректальное или интрамедуллярное) может быть использовано, например, тогда, когда пероральное введение не подходит для мишени или когда пациент не способен проглотить лекарство.

Это соединение в пригодном носителе или разбавителе можно применять также местно к участку внутри организма или на поверхности тела пациента.

2MD можно вводить пациенту-человеку в диапазоне от приблизительно 0,01 мкг/сутки до приблизительно 10 мкг/сутки. Предпочтительный диапазон доз составляет от приблизительно 0,05 мкг/сутки до приблизительно 1 мкг/сутки, а более предпочтительный диапазон доз составляет от приблизительно 0,1 мкг/сутки до приблизительно 0,4 мкг/сутки. Количество и время введения обычно, конечно, зависят от субъекта, которого лечат, от тяжести заболевания, от способа введения и от мнения лечащего врача. Таким образом, из-за вариабельности, существующей между пациентами, приведенные в данном описании дозы представляют собой инструкции, и врач сможет определить дозы лекарства для того, чтобы достичь лечения, которое врач считает подходящим для данного пациента. При рассмотрении степени требуемого лечения врач должен учесть целый ряд факторов, таких как возраст пациента, наличие предсуществующего заболевания, а также наличие других заболеваний. Дозу можно вводить один раз в сутки или более одного раза в сутки и можно вводить в виде препарата с замедленным высвобождением или контролируемым высвобождением. Соединения также можно вводить, используя комбинацию препаратов немедленного высвобождения и контролируемого высвобождения и/или замедленного высвобождения.

Введение 2MD может быть выполнено согласно любой схеме непрерывного или дробного введения. Введение один раз в сутки, несколько раз в сутки, один раз в неделю, несколько раз в неделю, один раз каждые две недели, несколько раз каждые две недели, один раз в месяц, несколько раз в месяц, один раз каждые два месяца, один раз каждые три месяца, один раз каждые шесть месяцев и один раз в год представляют собой неограничивающие примеры схем введения для 2MD.

2MD обычно вводят в форме фармацевтической композиции, содержащей это соединение вместе с фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем. Таким образом, это соединение может быть введено в любой стандартной пероральной, парентеральной, ректальной или трансдермальной лекарственной форме.

Фармацевтическая композиция для перорального введения может принимать форму растворов, суспензий, таблеток, пилюль, капсул/порошков и тому подобного. Используют таблетки, содержащие, наряду с различными разрыхлителями, такими как крахмал, и предпочтительно крахмал картофеля или тапиоки, и некоторые комплексные силикаты, различные эксципиенты, такие как цитрат натрия, карбонат кальция и фосфат кальция, вместе со связующими агентами, такими как поливинилпирролидон, сахароза, желатин и гуммиарабик. Кроме того, для целей таблетирования часто очень полезными являются скользящие агенты, такие как стеарат магния, лаурилсульфат натрия и тальк. Твердые композиции подобного типа также используют в качестве наполнителей в мягких и твердых заполненных желатиновых капсулах; при этом предпочтительные вещества также включают лактозу, или молочный сахар, а также высокомолекулярные полиэтиленгликоли. Когда для перорального введения требуются водные суспензии и/или эликсиры, 2MD можно комбинировать с различными подслащивающими агентами, корригентами, окрашивающими агентами, эмульгирующими агентами и/или суспендирующими агентами, а также с такими разбавителями, как вода, этанол, пропиленгликоль, глицерин и их различные возможные комбинации. Примером приемлемого препарата 2MD является мягкая желатиновая капсула, содержащая метиловый эфир бензойной кислоты, в котором растворен 2MD. Другие пригодные препараты являются очевидными для специалистов в данной области.

Для целей парентерального введения можно использовать растворы в кунжутном или арахисовом масле или в водном полиэтиленгликоле, а также стерильные водные растворы соответствующих водорастворимых солей. Такие водные растворы могут быть соответствующим образом забуферены, если необходимо, а жидкий разбавитель сначала сделан изотоническим с помощью достаточного количества физиологического раствора или глюкозы. Эти водные растворы являются особенно подходящими для целей внутривенных, внутримышечных, подкожных и интраперитонеальных инъекций. При этом все используемые стерильные водные среды легко получить с помощью стандартных методик, хорошо известных специалистам в данной области.

Для целей трансдермального (например, местного) введения готовят разбавленные стерильные водные или частично водные растворы (обычно в концентрации от приблизительно 0,1% до 5%), во всем остальном схожие с вышеупомянутыми парентеральными растворами.

Способы приготовления различных фармацевтических композиций с определенным количеством активного ингредиента известны или будут очевидны в свете данного описания специалистам в данной области. Примеры способов приготовления фармацевтических композиций смотри в Remington′s Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, Pa., 19th Edition (1995).

Могут быть предложены наборы для применения потребителем при лечении слабости, поражения мышц или саркопении. Эти наборы включают: а) фармацевтическую композицию, содержащую 2-метилен-19-нор-20(S)-1α,25-дигидроксивитамин D3, и фармацевтически приемлемый носитель, наполнитель или разбавитель; и б) инструкции, описывающие способ применения этой фармацевтической композиции при лечении слабости, поражения мышц или саркопении.

Используемый в настоящей заявке термин "набор" включает контейнер, в котором содержатся фармацевтические композиции, а также может включать отдельные контейнеры, такие как отдельный флакон или отдельный пакет из фольги. Контейнер может быть представлен в любой стандартной форме, известной в данной области, которую изготавливают из фармацевтически приемлемого материала, например, в виде бумажной или картонной коробки, стеклянной или пластмассовой бутылки или банки, повторно герметизируемого пакета (например, для удерживания таблеток, предназначенных для пополнения другого контейнера) или блистерной упаковки с отдельными дозами, предназначенными для выдавливания из этой упаковки в соответствии со схемой лечения. Используемый контейнер может быть рассчитан на конкретную содержащуюся в нем лекарственную форму, например, стандартная картонная коробка, как правило, не могла бы использоваться для хранения жидкой суспензии. Допустимо, чтобы более одного контейнера можно было использовать вместе в одной упаковке при продаже одной лекарственной формы. Например, таблетки могут содержаться во флаконе, который, в свою очередь, содержится внутри коробки.

Примером такого набора является так называемая блистерная упаковка. Блистерные упаковки хорошо известны в упаковочной промышленности и широко используются для упаковки фармацевтических стандартных лекарственных форм (таблеток, капсул и тому подобного). Блистерные упаковки обычно состоят из слоя относительно плотного материала, покрытого пленкой, предпочтительно из прозрачного пластика. Во время процесса упаковки в полимерной пленке формируют углубления. Эти углубления имеют размер и форму отдельных таблеток или капсул, которые подлежат упаковке, или могут иметь такой размер и форму, чтобы вмещать несколько таблеток и/или капсул, которые подлежат упаковке. Затем таблетки или капсулы помещают соответственно в углубления и запечатывают слоем относительно плотного материала с лицевой стороны полимерной пленки, которая противоположна тому направлению, в котором формировали углубления. В результате, таблетки или капсулы запечатывают по отдельности или вместе, по желанию, в углублениях между полимерной пленкой и этим слоем. Предпочтительно прочность слоя такова, что таблетки или капсулы можно извлечь из блистерной упаковки, надавливая рукой на углубления, в силу чего на слое напротив углубления образуется отверстие. Затем таблетка или капсула может быть извлечена через указанное отверстие.

Может быть желательным приложение письменной памятки, которая представляет собой тип памятки, содержащий информацию и/или инструкции для врача, фармацевта или пациента, например в форме цифр рядом с таблетками или капсулами, где цифры соответствуют дням схемы приема лекарства, когда следует проглотить таким образом обозначенные таблетки или капсулы, или в форме карточки, которая содержит такую же информацию. Другим примером такой памятки является календарь, напечатанный на карточке, например следующим образом: "первая неделя, понедельник, вторник" и так далее, "вторая неделя, понедельник, вторник" и так далее. Другие варианты памяток будут достаточно очевидными. "Суточная доза" может представлять собой одну таблетку или капсулу, или несколько таблеток или капсул, которые надо принимать в определенный день.

Другим конкретным воплощением набора является дозатор, разработанный для распределения суточных доз в количестве одной дозы за один раз. Предпочтительно дозатор снабжают памяткой, чтобы дополнительно облегчить соблюдение схемы приема лекарства. Примером такой памятки является механический счетчик, который указывает количество суточных доз, которые уже распределены. Другим примером такой памятки является микрочип памяти с питанием от батарейки, связанный с жидкокристаллическим индикатором, или слышимый напоминающий сигнал, который, например, зачитывает вслух дату, когда принята последняя суточная доза, и/или напоминает, когда надо принять следующую дозу.

Получение соединений 1α-гидрокси-2-алкил-19-нор-витамина D, в частности соединений 1α-гидрокси-2-метил-19-нор-витамина D, имеющих основную структуру I, может быть выполнено с помощью простого и распространенного способа, то есть путем конденсации бициклического кетона Виндаус-Грундмановского типа (Windaus-Grundmann) (II) и аллильного фосфиноксида (III) с получением соответствующих аналогов 2-метилен-19-нор-витамина D (IV), с последующим снятием защиты у С-1 и С-3 в последних соединениях:

В структурах II, III и IV группы Y_i и Y₂ и R представляют собой группы, определенные выше; Y₁ и Y₂ предпочтительно представляют собой защитные группы для гидрокси, при этом также предполагается, что любые функциональные группы в R, которые могут быть чувствительными или которые мешают реакции конденсации, соответствующим образом защищены, как общепринято в данной области. Способ, указанный выше, представляет собой применение принципа конвергентного синтеза, который был эффективно применен для получения соединений витамина D (например, в Lythgoe et al., J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1, 590 (1978); Lythgoe, Chem. Soc.Rev. 9, 449 (1983); Toh et al., J. Org. Chem. 48. 1414 (1983); Baggiolini et al., J. Org. Chem. 51, 3098 (1986); Sardina ef al., J.Org. Chem. 51. 1264 (1986); J. Pro. Chem. 51.1269 (1986); DeLuca et al., патент США №5086191; DeLuca et al., патент США №5536713).

Гидринданоны с общей структурой II известны или могут быть получены известными способами. Конкретные важные примеры таких известных бициклических кетонов представляют собой вышеописанные структуры с боковыми цепями (а), (б), (в) и (г), то есть 25-гидрокси-кетон Грундмана (е) [Baggiolini et al., J. Org. Chem. 51, 3098 (1986)]; кетон Грундмана (ж) [Inhoffen et al., Chem. Ber. 90, 664 (1957)]; 25-гидрокси-кетон Виндауса (з) [Baggiolini et al., J. Org. Chem. 51, 3098 (1986)] и кетон Виндауса (и) [Windaus et al., Ann.. 524, 297 (1936)]:

Для получения желаемых фосфиноксидов с общей структурой III был разработан новый синтетический путь, начинающийся с метилхинникатного производного 1, легко получаемого из имеющейся в продаже (1R,3R,4S,5R)-(-)-хинной кислоты, как описано Perlman et al., Tetrahedron Lett. 32, 7663 (1991) и DeLuca et al., патент США №5086191. Полный процесс превращения исходного метилового эфира 1 в желаемые А-кольцевые синтоны суммирован на схеме 1. Соответственно, вторую 4-гидроксильную группу соединения 1 окисляли с помощью RuO₄ (каталитический способ с участием RuCl₃ и NalO₄ в качестве соокислителя). Применение такого сильного окислителя требовалось для эффективного процесса окисления этого очень затрудненного гидроксила. Однако можно применять также другие более часто используемые окислители (например, дихромат пиридиния), хотя эти реакции для завершения обычно требуют намного больше времени. Вторая стадия синтеза включает реакцию Виттига между стерически затрудненным 4-кетосоединением 2 и илидом, полученным из метилтрифенилфосфония бромида и н-бутиллития. Для образования химически активного метиленфосфорана могут быть использованы также другие основания, например t-BuOK, NaNH₂, NaH, K/HMPT, NaN(TMS)₂ и так далее. Для получения 4-метиленового соединения 3 могут быть использованы некоторые описанные модификации способа Виттига, например взаимодействие соединения 2 с активированным метилентрифенилфосфораном [Corey et al., Tetrahedron Lett. 26, 555 (1985)]. В качестве альтернативы для метиленирования химически нереакционноспособных кетонов можно применять другие широко используемые способы, например реакцию Виттига-Хорнера с РО-илидом, полученным из оксида метилдифенилфосфина при депротонировании н-бутиллитием [Schosse et al., Chimia 30, 197 (1976)], или взаимодействие кетона с метилсульфинатом натрия [Corey et al., J.Org. Chem. 28, 1128 (1963)] и метилсульфинатом калия [Greene et al., Tetrahedron Lett. 3755 (1976)]. В результате восстановления сложного эфира 3 алюмогидридом лития или другим подходящим восстановителем (например, DIBALH) получали диол 4, который затем окисляли периодатом натрия до соединения 5, производного циклогексанона. Следующая стадия этого способа включает реакцию Петерсона между кетоном 5 и метил(триметилсилил)ацетатом. Полученный аллильный эфир 6 обрабатывали гидридом диизобутилалюминия и образующийся аллильный спирт 7, в свою очередь, превращали в желаемый А-кольцевой фосфиноксид 8. Превращение соединения 7 в соединение 8 включало 3 стадии, а именно тозилирование in situ н-бутиллитием и пара-толуолсульфонилхлоридом, с последующим взаимодействием с литиевой солью дифенилфосфина и окислением перекисью водорода.

Некоторые соединения 2-метилен-19-нор-витамина D с общей структурой IV могут быть синтезированы при использовании А-кольцевого синтона 8 и подходящего кетона Виндауса-Грундмана II, имеющего желаемую структуру боковой цепи. Так, например, сочетание по Виттигу-Хорнеру фосфиноксикарбаниона лития, образованного из соединения 8 и н-бутиллития, с защищенным 25-гидроксикетоном Грундмана 9, полученным согласно опубликованной методике [Sicinski et al., J. Med. Chem. 37, 3730 (1994)], давало ожидаемое соединение 10 защищенного витамина. После снятия защитных групп с помощью катионообменной смолы AG 50W-X4 это соединение давало 1α,25-дигидрокси 2-метилен-19-нор-витамин D3 (11).

С-20-эпимеризацию выполняли путем аналогичного взаимодействия фосфиноксида 8 с защищенным (20S)-25-гидрокси-кетоном Грундмана 13 (Схема II) и получали 19-нор-витамин 14, который после гидролиза защитных групп для гидрокси давал 20(S)-1α,25-дигидрокси-2-метилен-19-нор-витамин D₃ (15). Как указано выше, другие аналоги 2-метилен-19-нор-витамина D могут быть синтезированы способом, раскрытым в данном описании. Например, 1α-гидрокси-2-метилен-19-нор-витамин D₃ может быть получен с помощью кетона Грундмана (ж).

ПРИМЕРЫ

В этой заявке использованы следующие сокращения:

ЯМР	ядерный магнитный резонанс
mp	температура плавления
Н	водород
ч	час(ы)
мин	минуты
t-Bu	трет-бутил
THF	тетрагидрофуран
n-BuLi	н-бутиллитий
MS	масс-спектры
HPLC	жидкостная хроматография высокого давления
SEM	стандартная ошибка измерений
Ph	фенил
Me	метил
Et	этил
DIBALH	диизобутилалюминия гидрид
LDA	диизопропиламид лития

Получение соединений формулы I было описано в патенте США №5843928, как изложено ниже.

В этих примерах конкретные продукты реакций, идентифицированные арабскими цифрами (например, 1, 2, 3 и так далее), относятся к конкретным структурам, идентифицированным таким образом в предшествующем описании и на схеме 1 и схеме 2.

ПРИМЕР 1

Получение 1α,25-дигидрокси-2-метилен-19-нор-витамина D₃(11)

Обратимся сначала к схеме 1, исходное метилхинникатное производное 1 получали из имеющейся в продаже (-)-хинной кислоты, как описано ранее [Perlman et al., Tetrahedron Lett. 32, 7663 (1991) и DeLuca et al., патент США №5086191]. Соединение 1:mp 82°-82,5°C (из гексана), ¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ 0,098, 0,110, 0,142 и 0,159 (каждый 3Н, каждый s, 4xSiCH₃), 0,896 и 0,911 (9Н и 9Н, каждый s, 2xSi-t-Bu), 1,820 (1Н, dd, J=13,1, 10,3 Гц), 2,02 (1Н, ddd, J=14,3, 4,3, 2,4 Гц), 2,09 (1Н, dd, J=14,3, 2,8 Гц), 2,19 (1Н, ddd, J=13,1, 4,4, 2,4 Гц), 2,31 (1Н, d, J=2,8 Гц, ОН), 3,42 (1Н, m; после D₂O dd, J=8,6, 2,6 Гц), 3,77 (3Н, s), 4,12 (1Н, m), 4,37 (1Н, m), 4,53 (1H, br s, ОН).

(а) Окисление 4-гидроксигруппы в метилхинникатном производном 1

(3R,5R)-3,5-Бис[(трет-бутилдиметилсилил)окси]-1-гидрокси-4-оксоциклогексанкарбоновой кислоты метиловый эфир (2). К перемешиваемой смеси гидрата хлорида рутения (III) (434 мг, 2,1 ммоль) и периодата натрия (10,8 г, 50,6 ммоль) в воде (42 мл) добавляли раствор метилхинниката 1 (6,09 г, 14 ммоль) в CCl₄/CH₃CN (1:1, 64 мл). Интенсивное перемешивание продолжали в течение 8 ч. Добавляли несколько капель 2-пропанола, смесь выливали в воду и экстрагировали хлороформом. Органические экстракты объединяли, промывали водой, сушили (MgSO₄) и упаривали с получением темного маслянистого осадка (приблизительно 5 г), который очищали с помощью флэш-хроматографии. Элюирование смесью гексан/этилацетат (8:2) давало чистый маслянистый 4-кетон 2 (3,4 г, 56%): ¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ 0,054, 0,091, 0,127 и 0,132 (каждый 3Н, каждый s, 4xSiCH₃), 0,908 и 0,913 (9Н и 9Н, каждый s, 2xSi-t-Bu), 2,22 (1Н, dd, J=13,2, 11,7 Гц), 2,28 (1Н, ˜dt J=14,9, 3,6 Гц), 2,37 (1Н, dd, J=14,9, 3,2 Гц), 2,55 (1Н, ddd, J=13,2, 6,4, 3,4 Гц), 3,79 (3Н, s), 4,41 (1Н, t, J˜3,5 Гц), 4,64 (1Н, s, ОН), 5,04 (1Н, dd, J=11,7, 6,4 Гц); МС m/z (относительная интенсивность) отсутствует М+, 375 (M+-t-Bu, 32), 357 (M+-t-Bu-H₂O, 47), 243 (31), 225 (57), 73 (100).

(б) Реакция Виттига с участием 4-кетона 2

(3R,5R)-3,5-Бис[(трет-бутилдиметилсилил)окси]