Способ лечения инфаркта миокарда

Способ лечения инфаркта миокарда

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Настоящая заявка является заявкой в частичное продолжение заявки на патент США №10/298377, поданной 18 ноября 2002 г., которая является заявкой в частичное продолжение заявки на патент США №09/538248, поданной 29 марта 2000 г., которая является заявкой в частичное продолжение заявки на патент США №09/470881, поданной 22 декабря 1999 г., которая, в свою очередь, является заявкой в частичное продолжение международной заявки на патент № PCT/US99/11780 с указанием США в качестве страны назначения и поданной 29 мая 1998 г., которая заявляет приоритет предварительной заявки на патент США №60/087220, поданной 29 мая 1998 г. Указанные заявки включены в данное описание во всей своей полноте в качестве ссылки.

Заявление по вопросу прав Правительства

Настоящая заявка на патент выполнена при поддержке правительства согласно контрактам №№ СА 50286, СА 45726, СА 75924, СА 78045, HL 54444 и HL 09435 Национального Института Здоровья. Правительство имеет определенные права на настоящее изобретение.

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к области медицины, конкретно к способам и композициям для лечения инфаркта миокарда у млекопитающих.

Уровень техники

Проницаемость сосудов в результате повреждения, заболевания или другой травмы кровеносных сосудов вызывает сосудистую утечку и отек, связанные с повреждением ткани. Например, нарушение мозгового кровообращения, связанное с инсультом (CVA), или другое повреждение кровеносных сосудов мозга или тканей позвоночника являются самым распространенным случаем неврологического нарушения и основной причиной нетрудоспособности. Обычно поражение мозга или тканей позвоночника в области CVA включает сосудистую утечку и/или отек. Обычно CVA может включать повреждение, вызванное ишемией мозга, нарушением нормального кровообращения мозга; умственную недостаточность вследствие транзиторных нарушений кровообращения; инфаркт вследствие отека и тромбоза внутричерепных и внечерепных артерий; кровоизлияние; и артериовенозные мальформации. Ишемический удар и внутримозговое кровоизлияние могут развиться внезапно, и последствия инцидента обычно отражают пораженную область мозга (См. The Merck Manual, 16-е издание, глава 123, 1992).

Помимо CVA инфекции или заболевание центральной нервной системы (ЦНС) также могут поражать кровеносные сосуды мозга и позвоночника и вызывать воспаление и отек, как, например, при бактериальных менингитах, вирусных энцефалитах и абсцедировании мозга (См. The Merck Manual, 16-е издание, глава 125, 1992). Также могут ослаблять кровеносные сосуды и приводить к сосудистой утечке и отеку состояния при системных заболеваниях, таких как диабет, заболевание почек, атеросклероз, инфаркт миокарда и т.п. Таким образом, сосудистая утечка и отек представляют собой критические патологии, отличные и независимые от рака, которые нуждаются в эффективном специфическом терапевтическом воздействии в соответствии с видом повреждения, травмы или состояний заболевания.

Инфаркт миокарда представляет собой гибель сердечных тканей вследствие перекрытия поступления крови в сердечную мышцу. Инфаркт миокарда является одним из самых распространенных диагнозов у госпитализированных пациентов в западных странах. Сообщалось, что в Соединенных Штатах около 1,1 миллиону людей в год ставят диагноз острого инфаркта миокарда. Смертность от инфаркта миокарда может превышать 53%, а до 66% выживших пациентов не достигают полного восстановления. Снижение смертности только на один процент могло бы спасти до 3400 жизней в год. Инфаркт миокарда и сопровождающий отек обычно происходят при окклюзии коронарной артерии, перекрытии поступления кислорода в сердечную ткань, которая снабжается блокированной артерией. При блокировании поставки крови ткань, в норме снабжаемая кровью блокированной артерией, становится ишемической. В результате сердечная ткань с кислородной недостаточностью начинает отмирать (некроз). Honkanen и др., патент США №5914242, описывает способ уменьшения зоны инфаркта миокарда, включающий введение пациенту некоторых ингибиторов фермента серин/треонин фосфатазы и родственных полипептидов после приступа ишемии сердца. Такие ферменты и полипептиды являются дорогостоящими и сложными в производстве и при очистке для фармацевтического использования.

Авторы изобретения обнаружили, что ингибирование активности тирозинкиназы семейства Src обеспечивает способ лечения инфаркта миокарда посредством уменьшения отека и образующегося некроза коронарной ткани, который обычно является результатом окклюзии коронарной сосудистой сети, таким образом уменьшая эффекты повреждение ткани при инфаркте миокарда.

Раскрытие изобретения

Настоящее изобретение относится к способу лечения инфаркта миокарда (ИМ) посредством ингибирования активности тирозинкиназы семейства Src. Способ включает лечение коронарной ткани млекопитающего, страдающего окклюзией коронарных сосудов, эффективным количеством ингибитора тирозинкиназы семейства Src. Млекопитающее может быть человеком или млекопитающим, не являющимся человеком. Коронарная ткань, требующая лечения, может представлять собой любую часть сердца, которая страдает от ишемии (т.е. снижения кровообращения) вследствие окклюзии коронарных сосудов. Терапевтическое лечение проводится путем взаимодействия целевой коронарной ткани с эффективным количеством желаемой фармацевтической композиции, содержащей химический (т.е. небелковый) ингибитор тирозинкиназы семейства Src. Полезно обрабатывать больную коронарную ткань в области, близкой к месту, где происходит или произошла опасная окклюзия сосудов. Способ обеспечивает уменьшение некроза тканей (инфаркта), обычно являющегося результатом окклюзии коронарных сосудов.

Еще одним аспектом настоящего изобретения является изделие, которое содержит упаковочный материал и фармацевтическую композицию, содержащуюся в упаковочном материале, причем фармацевтическая композиция способна уменьшить некроз коронарной ткани, страдающей от снижения кровообращения в результате окклюзии коронарных сосудов. Упаковочный материал содержит маркировку, которая указывает, что фармацевтическая композиция может быть применена для лечения инфаркта миокарда и что фармацевтическая композиция содержит терапевтически эффективное количество ингибитора тирозинкиназы семейства Src в фармацевтически приемлемом носителе.

Подходящие ингибиторы тирозинкиназы семейства Src для целей настоящего изобретения включают ингибиторы тирозинкиназы семейства Src класса пиразолопиримидинов, такие как 4-амино-5-(4-метилфенил)-7-(трет-бутил)пиразоло[3,4-d-]пиримидин (AGL 1872), 4-амино-5-(4-хлорфенил)-7-(трет-бутил)пиразоло[3,4-d-]пиримидин (AGL 1879) и т.п.; ингибиторы тирозинкиназы семейства Src класса макроциклических диенонов, такие как радицикол R2146 (Radicicol R2146), гелданамицин, гербимицин А и т.п.; ингибиторы тирозинкиназы семейства Src класса пиридо[2,3-d]пиримидинов, такой как PD173955 и т.п.; ингибиторы тирозинкиназы семейства Src класса 4-анилино-3-хинолинкарбонитрила, такой как SKI-606 и т.п.; и их смеси.

Способы настоящего изобретения являются пригодными для лечения инфаркта миокарда. Более конкретно способы настоящего изобретения являются пригодными для уменьшения некроза сердечной ткани вследствие закупорки коронарных сосудов в результате заболевания, повреждения или травмы сердца.

Краткое описание чертежей, составляющих часть данного описания:

Фиг.1 представляет собой последовательность кДНК (SEQ ID NO:1) c-Src человека, которая впервые была описана у Braeuninger и др., Proc. Natl. Acad. Sci., США, 88:10411-10415 (1991). Данная последовательность является доступной через GenBank Accession под номером X59932 X71157. Последовательность содержит 2187 нуклеотидов с частью, кодирующей белок, которая начинается и заканчивается позициями нуклеотидов, соответствующими 134 и 1486.

Фиг.2 представляет собой кодированную последовательность аминокислотных остатков c-Src человека, которая кодируется последовательностью, показанной на Фиг.1 (SEQ ID NO:2).

На Фиг.3 изображена последовательность нуклеиновых кислот (SEQ ID NO:3) кДНК, кодирующая c-Yes белок человека. Данная последовательность является доступной через GenBank Accession под номером М15990. Последовательность содержит 4517 нуклеотидов с частью, кодирующей белок, которая начинается и заканчивается позициями нуклеотидов, соответствующими 208 и 1839, и транслируется в аминокислотную последовательность, изображенную на Фиг.4.

На Фиг.4 изображена аминокислотная последовательность c-Yes (SEQ ID NO:4).

На Фиг.5 показаны результаты модифицированных тестов Miles для ПС при VEGF в коже мышей с дефицитом Src, Fyn и Yes. Фиг.5,А представляет собой фотографии обработанных ушей. Фиг.5,В представляет собой графики результатов эксперимента по стимуляции мышей с различными типами дефицита. Фиг.5,С представляет собой диаграмму количества красителя Evan's blue, элюированного из обработанных тканей.

Фиг.6 представляет собой график, изображающий относительный размер церебрального инфаркта у Src+/-, Src-/-, дикого типа (WET) и AGL1872 (т.е. 4-амино-5-(4-метилфенил)-7-(трет-бутил)пиразоло[3,4-d-]пиримидин) обработанных мышей дикого типа. Доза составляла 1,5 мг/кг веса тела.

На Фиг.7 изображены последовательные снимки ЯМР-томографии головного мозга контрольных и обработанных AGL1872 мышей, демонстрирующие уменьшение размера мозгового инфаркта у животных, обработанных AGL1872 (справа), по сравнению с контрольными животными (слева).

На Фиг.8 изображены структуры предпочтительных ингибиторов тирозинкиназы семейства Src класса пиразолопиримидинов настоящего изобретения.

На Фиг.9 изображены структуры предпочтительных ингибиторов тирозинкиназы семейства Src макроциклических диенонов настоящего изобретения.

На Фиг.10 изображена структура предпочтительных ингибиторов тирозинкиназы семейства Src класса пиридо[2,3-d]пиримидинов настоящего изобретения.

На Фиг.11 приведены фотомикрографические изображения живой окрашенной сердечной ткани крысы, которая была травмирована для индуцирования инфаркта миокарда; изображение справа, показывающее значительную степень некроза, представляет собой контроль; изображение слева, показывающее резко сниженную степень некроза, представляет собой ткань, обработанную химическим ингибитором тирозинкиназы семейства Src (AGL1872).

На Фиг.12 изображена гистограмма размера инфаркта миокарда как функция концентрации ингибитора (AGL1872).

На Фиг.13 изображена гистограмма размера инфаркта миокарда как функция времени после обработки ингибитором (AGL1872).

На Фиг.14 изображена гистограмма содержания воды в миокарде как функция концентрации ингибитора (AGL1872).

Осуществление изобретения

А. Определения

Термин "аминокислотный остаток", как используется в настоящем описании, относится к аминокислоте, образованной путем химического расщепления (гидролиза) полипептида по его пептидным связям. Предпочтительно аминокислотные остатки, рассматриваемые в настоящем описании, представляют собой "L" изомерную форму. Однако остатки в "D" изомерной форме могут замещаться любым L-аминокислотным остатком при условии, что у полипептида сохраняется требуемое функциональное свойство. NH₂ относится к свободной аминогруппе, находящейся на аминоконце полипептида. COOH относится к свободной карбоксильной группе, находящейся на карбоксильном конце полипептида, придерживаясь стандартной номенклатуры полипептидов (описанной в J. Biol. Chem., 243:3552-59 (1969) и принятой 37 CFR §1.822(b)(2)).

Следует отметить, что все последовательности аминокислотных остатков представлены в настоящем описании в виде формулы, у которой ориентация слева направо соответствует стандартному направлению от аминоконца (N-конец) к карбоксильному концу (С-конец). Помимо этого, следует отметить, что тире в начале или в конце последовательности аминокислотных остатков указывает на пептидную связь со следующей последовательностью из одной или нескольких остатков аминокислот.

Термин "полипептид", как используется в настоящем описании, относится к линейным последовательностям аминокислотных остатков, соединенных друг с другом пептидными связями между альфа-аминогруппой и карбоксильной группой соседних аминокислотных остатков.

Термин "пептид", как используется в настоящем описании, относится к линейным последовательностям, состоящим не более чем из 50 аминокислотных остатков, соединенных друг с другом как в полипептиде.

Термин "белок", как используется в настоящем описании, относится к линейным последовательностям, состоящим более чем из 50 аминокислотных остатков, соединенных друг с другом как в полипептиде.

В. Общее обсуждение

В общем случае настоящее изобретение относится к (1) установлению того, что VEGF-индуцируемая проницаемость сосудов (ПС) специфически опосредована белками тирозинкиназы, такими как Src и Yes, и что ПС может модулироваться ингибитором активности тирозинкиназы семейства Src; и (2) установлению того, что введение in vivo ингибитора тирозинкиназы семейства Src уменьшает поражение тканей в результате увеличения проницаемости сосудов, связанной с болезнью или повреждением.

Это открытие является важным ввиду роли, которую играет проницаемость сосудов в ряде патологических процессов. Настоящее изобретение относится к установлению того, что проницаемость сосудов может специфически модулироваться и уменьшаться путем ингибирования активности тирозинкиназы семейства Src. В частности, настоящее изобретение относится к установлению того, что введение in vivo ингибитора тирозинкиназы семейства Src уменьшает поражение тканей в результате увеличения проницаемости сосудов, связанной с болезнью или повреждением, которое не связано с раком или ангиогенезом.

Проницаемость сосудов вовлечена в ряд патологических процессов, в которых поражение ткани вызывается резким увеличением ПС вследствие травмы кровеносного сосуда. Таким образом, возможность специфически модулировать ПС предоставляет новые и эффективные виды лечения для уменьшения неблагоприятных последствий удара.

Примеры тканей, связанных с заболеванием или повреждением, индуцируемым сосудистой утечкой и/или отеком, на которые может быть оказано благоприятное действие при специфической модуляции посредством ингибитора с использованием ингибитора тирозинкиназы семейства Src, включают ревматоидный артрит, диабетическую ретинопатию, воспалительные заболевания, рестеноз, удар, инфаркт миокарда и т.п.

Сообщалось, что системная нейтрализация белка VEGF с использованием IgG слитого белка c VEGF рецепторами уменьшает размер инфаркта после церебральной ишемии. Такой эффект сопровождался уменьшением VEGF-регулируемой проницаемости сосудов (N. van Bruggen и др., J. Clin. Inves. 104:1613-1620 (1999)). Однако VEGF не является ключевым медиатором увеличения проницаемости сосудов, которым, как обнаружено в настоящее время, является Src. Более того, Src может быть активирован стимулом, отличным от VEGF (См., например, Erpel и др., Cell Biology, 7:176-182 (1995)).

Более конкретно, настоящее изобретение относится к установлению того, что ингибиторы тирозинкиназы семейства Src, конкретно ингибиторы Src, являются пригодными для лечения инфаркта миокарда путем уменьшения поражения коронарной ткани у млекопитающего вследствие окклюзии коронарных сосудов.

С. Белки тирозинкиназы семейства Src

Как используется в настоящем описании и прилагаемой формуле изобретения, термин "белок тирозинкиназы семейства Src" и его грамматические вариации относятся в частности к белку, имеющему аминокислотную последовательность, гомологичную v-Src, N-терминальную миристоляцию, сохраненную структуру домена, имеющую N-терминальную вариабельную область, за которой следует SH3-домен, SH2-домен, каталитический домен тирозинкиназы и С-терминальный регуляторный домен. Термины "белок Src" и "Src" используются для совместного обозначения различных форм белка Src тирозинкиназы, имеющего молекулярный вес 60 КДа, N-терминальную вариабельную область, включающую в себя 2 сайта фосфорилирования РКС и один сайт фосфорилирования РКА, относительно более высокую общую идентичность аминокислотной последовательности известным белкам Src, чем известным членам других подгрупп семейства Src (например, Yes, Fyn, Lck и Lyn), и которая активируется фосфорилированием тирозина, который соответствует тирозину в позиции 416 в SEQ ID NO:2. Термины "Yes белок" и "Yes" используют для совместного обозначения различных форм Yes белка тирозинкиназы, имеющего молекулярный вес 62 КДа, N-терминальную вариабельную область, у которой отсутствует какой-либо сайт фосфорилирования, относительно более высокую общую идентичность аминокислотной последовательности известным Yes белкам, чем известным членам других подгрупп семейства Src (например, Yes, Fyn, Lck и Lyn), и которая активируется фосфорилированием тирозина, который соответствует тирозину в позиции 426 в SEQ ID NO:4.

Предпочтительный способ измерения коронарной ишемии включает индуцирование ишемии у крыс путем наложения лигатуры на коронарную артерию и определения размера инфаркта миокарда при помощи ЯМР-томографии, эхокардиографии и аналогичных способов в течение всего времени, как более подробно изложено в настоящем описании ниже.

D. Способы лечения и предупреждения инфаркта миокарда

Способы настоящего изобретения включают взаимодействие ишемической коронарной ткани с фармацевтической композицией, которая включает, по меньшей мере, один химический ингибитор тирозинкиназы семейства Src.

Подходящие ингибиторы тирозинкиназы семейства Src для целей настоящего изобретения включают химические ингибиторы Src, такие как ингибиторы тирозинкиназы семейства Src класса пиразолопиримидинов, ингибиторы тирозинкиназы семейства Src класса макроциклических диенонов, ингибиторы тирозинкиназы семейства Src класса пиридо[2,3-d]пиримидинов и ингибиторы тирозинкиназы семейства Src класса 4-анилино-3-хинолинкарбонитрила. Также могут быть использованы смеси ингибиторов.

Предпочтительные ингибиторы тирозинкиназы семейства Src класса пиразолопиримидинов включают 4-амино-5-(4-метилфенил)-7-(трет-бутил)пиразоло[3,4-d-]пиримидин (также иногда называемый РР1 или AGL1872), 4-амино-5-(4-хлорфенил)-7-(трет-бутил)пиразоло[3,4-d-]пиримидин (также иногда называемый РР2 или AGL1879) и т.п., получение которых более подробно описано у Waltenberger и др., Circ. Res., 85:12-22 (1999), релевантное раскрытие которой включено в данное описание во всей своей полноте в качестве ссылки. Химические структуры AGL1872 и AGL1879 проиллюстрированы на Фиг.8. AGL1872 (РР1) является доступным от Biomol по лицензии от Pfizer, Inc. AGL1879 (РР2) является доступным от Calbiochem по лицензии от Pfizer, Inc. (см. также Hanke и др., J.Biol. Chem. 271(2):695-701 (1996)).

Предпочтительные ингибиторы тирозинкиназы семейства Src класса макроциклических диенонов включают, например, радицикол R2146, гелданамицин, гербимицин А и т.п. Структуры радицикола R2146, гелданамицина, гербимицина А проиллюстрированы на Фиг.9. Гелданамицин доступен от Life Technologies. Гербимицин А доступен от Sigma. Радицикол, который коммерчески доступен от различных компаний (например, Calbiochem, RBI, Sigma), является антибактериальным антибиотиком с макроциклическим лактонным кольцом, который также действует как неспецифический белковый ингибитор тирозинкиназы и проявляет ингибирование активности Src киназы. Ингибиторы макроциклических диенонов содержат макроциклическое лактонное кольцо с 12-20 атомами углерода или структуру лактонного кольца, содержащего группу α,β,γ,δ-бис-ненасыщенного кетона (т.е. диенона) и группу оксигенированного арила как часть макроциклического кольца.

Предпочтительные ингибиторы класса пиридо[2,3-d]пиримидинов включают, например, PD173955 и т.п. Структура PD173955, ингибитора, разработанного Parke Davis, раскрыта у Moasser и др., Cancer Res., 59:6145-6152 (1999), релевантное раскрытие которой включено в данное описание во всей своей полноте в качестве ссылки. Химическая структура PD173955 проиллюстрирована на Фиг.10.

Предпочтительные ингибиторы класса 4-анилино-3-хинолинкарбонитрила включают, например, SKI-606, доступный от Wyeth. Примеры ингибиторов Src 4-анилино-3-хинолинкарбонитрила раскрыты в публикациях патентов США № 2001/0051520 и № 2002/00260052, релевантное раскрытие которых включено в данное описание во всей своей полноте в качестве ссылки.

Другие специфические ингибиторы Src киназы, используемые в способах и композициях настоящего изобретения, включают PD162531 (Owens и др., Mol. Biol. Cell 11:51-64 (2000)), который разработан Parke Davis, но структура которого не доступна из литературных источников.

Предпочтительно химический ингибитор представляет собой ингибитор пиразолопиримидинов, более предпочтительно AGL1872 и AGL1879, наиболее предпочтительно химический ингибитор представляет собой AGL1872. Другой предпочтительный ингибитор Src представляет собой 4-анилино-3-хинолинкарбонитрил, известный как SKI-606.

Дополнительные подходящие ингибиторы тирозинкиназы семейства Src могут быть идентифицированы и охарактеризованы с использованием стандартных видов анализа, известных в данной области техники. Например, скрининг химических соединений для сильнодействующих и селективных ингибиторов Src или других тирозинкиназ может быть выполнен и может быть получен в результате идентификации химических групп, используемых в белковых ингибиторах тирозинкиназы семейства Src.

Например, катехолы были идентифицированы как важные связывающие элементы для некоторых ингибиторов тирозинкиназы, полученных из природных продуктов, и были обнаружены в соединениях, выбранных при помощи комбинаторного отбора управляемого мишенью для селективных ингибиторов c-Src (См. Maly et al., "Combinatorial target-guided ligand assembly: Identification of protein subtype-selective c-Src inhibitors" PNAS (США) 97(6):2419-2424 (2000)). Комбинаторная химия, основанная на скрининге соединений-кандидатов ингибитора, используя группы, которые известны как значимые для ингибирования Src, в качестве стартовой точки является действенным и эффективным средством для выделения и получения характеристик других химических ингибиторов тирозинкиназы семейства Src.

Однако даже тщательный отбор потенциальных связывающих элементов, основанный на возможности имитации широкого ряда функциональных групп, присутствующих на полипептидах и нуклеиновых кислотах, может быть использован для выполнения комбинаторного скрининга активных ингибиторов. Например, для такой задачи в частности подходят библиотеки О-метилоксима с учетом того, что библиотеку легко создать путем конденсации О-метилгидроксиламина с любым из большого количества коммерчески доступных альдегидов. Образование О-алкилоксима совместимо с широким рядом функциональных групп, которые являются стабильными при физиологическом рН (См. выше Maly и др.).

Млекопитающее, которое может быть подвергнуто лечению способом согласно настоящему изобретению, желательно, является человеком, хотя понятно, что принципы настоящего изобретения указывают на то, что способы настоящего изобретения являются эффективными также и в отношении млекопитающих, не являющихся людьми. В этом контексте понятно, что млекопитающее включает любые виды млекопитающих, виды сельскохозяйственных и домашних млекопитающих, а также людей, которым требуется лечение сосудистой утечки или отека, связанного с поражением ткани.

Предпочтительный способ лечения содержит введение млекопитающему, страдающему от инфаркта миокарда, терапевтически эффективного количества физиологически совместимой композиции, содержащей химический ингибитор тирозинкиназы семейства Src, более точно химический (т.е. небелковый) ингибитор Src.

Предпочтительный способ предупреждения инфаркта миокарда включает введение млекопитающему с повышенным риском инфаркта миокарда профилактического количества физиологически совместимой композиции, содержащей химический ингибитор тирозинкиназы семейства Src, более точно химический (т.е. небелковый) ингибитор Src.

Пределы дозирования для введения химического ингибитора тирозинкиназы семейства Src, такого как AGL1872 или SKI-606, могут находиться в диапазоне от примерно 0,1 мг/кг веса тела до примерно 100 мг/кг веса тела или ограничиваются растворимостью активного агента в фармацевтическом носителе. Предпочтительная доза составляет примерно 1,5 мг/кг веса тела. Фармацевтические композиции, реализующие настоящее изобретение, также могут быть введены орально. Иллюстративные дозированные формы для введения орально включают капсулы, таблетки с энтеросолюбильным покрытием или без него и т.п.

В случае острого повреждения или травмы самое лучшее начать лечение настолько быстро после того, как произошел инцидент, насколько это возможно. Однако в случаях острого инцидента время для эффективного введения ингибиторов тирозинкиназы семейства Src может находиться в пределах 48 часов после возникновения повреждения или травмы. Предпочтительным является введение в течение примерно 24 часов, лучше - введение в течение 6 часов. Наиболее предпочтительно введение пациенту ингибитора тирозинкиназы семейства Src в течение примерно 45 минут после повреждения. Введение после 48 часов после первичного повреждения может быть подходящим для уменьшения дополнительного поражения ткани вследствие последующей сосудистой утечки или отека; однако в таких случаях положительное воздействие на первичное поражение ткани может быть уменьшенным.

Если профилактическое введение произведено для предупреждения инфаркта миокарда, связанного с хирургической процедурой, или произведено ввиду предрасполагающих диагностических показателей, введение может происходить до любой острой окклюзии коронарных сосудов, или во время события, вызывающего такую окклюзию, например, подкожные сердечно-сосудистые вмешательства, такие как коронарная ангиопластика. Для лечения хронических состояний, которые приводят к окклюзии коронарных сосудов, введение химических ингибиторов тирозинкиназы семейства Src может быть произведено в режиме непрерывного дозирования.

Обычно доза может меняться в зависимости от возраста, состояния, пола и степени повреждения, от которого страдает пациент, и может определяться специалистом в данной области техники. В случае какого-либо осложнения доза также может подбираться конкретным врачом.

Фармацевтические композиции настоящего изобретения предпочтительно вводят парентерально путем инъекции или при помощи постепенной инфузии в течение некоторого времени. Хотя обычно ткань, требующая лечение, может быть доступна в теле посредством системного введения и, следовательно, наиболее часто ее лечат при помощи внутривенного введения терапевтических композиций, другие ткани и средства подачи рассматриваются в том случае, если существует вероятность того, что целевая ткань содержит целевую молекулу. Таким образом, композиции настоящего изобретения могут быть введены внутривенно, внутрибрюшинно, внутримышечно, подкожно, внутриполостно, чрескожно, орально и также могут подаваться при помощи перистальтических средств.

Внутривенное введение осуществляется, например, путем инъекции единичной дозы. Термин "единичная доза", при использовании в отношении к терапевтической композиции настоящего изобретения, относится к физически дискретным единицам, подходящим в качестве однократной дозы для субъекта, причем каждая единица содержит заданное количество активного вещества, рассчитанное для получения желаемого терапевтического эффекта в соответствии с требуемым разбавителем, т.е. носителем или наполнителем.

В одном из предпочтительных вариантов осуществления активный агент вводят внутривенно одной дозой. Локализованное введение может быть выполнено путем прямой инъекции или путем использования анатомически изолированных областей, изоляции микроциркуляции целевых систем органов, реперфузии в системе циркуляции или временной окклюзии целевых областей сосудистой системы, связанных с больными тканями с использованием катетера.

Фармацевтические композиции вводят способом, совместимым с лекарственной дозированной формой и в терапевтически эффективном количестве. Термины "терапевтически эффективное количество" и "профилактическое количество", как используются в настоящем описании и в прилагаемой формуле изобретения, относятся к фармацевтическим композициям, обозначают количество фармацевтической композиции, вызывающее у субъекта биологический или медицинский ответ, который необходим врачу-клиницисту (например, уменьшение поражения тканей или предупреждение инфаркта миокарда).

Количество, предназначенное для введения, и временные параметры зависят от субъекта, нуждающегося в лечении, способности организма субъекта усваивать активный ингредиент и степени желаемого терапевтического эффекта. Точное количество активного ингредиента, предназначенное для введения, зависит от заключения практикующего врача и является специфическим для каждого индивида. Однако подходящие пределы дозирования для системного введения изложены в настоящем описании и зависят от типа введения. Подходящие режимы введения также являются изменяемыми, но в типичном случае представляют собой начальное введение с последующими повторными дозами с интервалами от одного до нескольких часов путем инъекции или другим способом введения, например введения орально. В качестве альтернативы предлагается длительная внутривенная инфузия, достаточная для поддержания концентраций в крови в пределах, установленных для терапии in vivo.

Способы настоящего изобретения уменьшают поражение тканей в результате окклюзии коронарных сосудов, связанное с различными формами коронарной болезни, либо в результате повреждения, либо травмы сердца, уменьшают симптомы заболевания, и в зависимости от заболевания могут способствовать лечению данного заболевания. Степень некроза ткани и, следовательно, степень ингибирования, достижимая способами настоящего изобретения, может быть оценена различными способами. В частности, способы настоящего изобретения чрезвычайно хорошо подходят для лечения инфаркта миокарда.

Уменьшение поражения тканей в результате окклюзии коронарных сосудов может происходить за короткий промежуток времени после введения терапевтической композиции. Большинство из терапевтических эффектов может быть визуализировано через 24 часа после введения в случае острого поражения или травмы. Однако в случае длительного применения эффекты не будут заметны так быстро.

Факторы временного ограничения включают скорость абсорбции ткани, усвоение на клеточном уровне, транслокацию белка или трансляцию нуклеиновых кислот (в зависимости от лекарства) и нацеливание белка. Таким образом, эффекты, регулирующие повреждение ткани, могут происходить в течение часа с момента введения ингибитора. Сердечная ткань также может быть подвержена дополнительному или пролонгированному воздействию ингибиторов тирозинкиназы семейства Src, применяя надлежащие условия. Таким образом, может быть разработано множество желаемых терапевтических временных рамок путем модификации параметров.

Е. Терапевтические композиции

Ингибиторы тирозинкиназы семейства Src, как изложено в настоящем описании, могут быть использованы для изготовления лекарственных веществ для лечения инфаркта миокарда. Ингибиторы могут быть включены в фармацевтические композиции, пригодные для осуществления терапевтических и профилактических способов, изложенных в настоящем описании. Фармацевтические композиции настоящего изобретения содержат физиологически совместимый носитель вместе с химическим ингибитором тирозинкиназы семейства Src, как изложено в настоящем описании, растворенным или диспергированным в нем в качестве активного ингредиента. В предпочтительном варианте осуществления фармацевтическая композиция не является иммуногенной при введении с терапевтической целью пациенту, относящемуся к млекопитающему, такому как человек.

Как используется в настоящем описании, термины "фармацевтически приемлемый" и "физиологически совместимый" и их грамматические вариации, если они относятся к композициям, носителям, разбавителям и реагентам, используются взаимозаменяемо и означают, что млекопитающему можно принимать вещества внутрь или наружно без получения нежелательных физиологических эффектов, таких как тошнота, вертиго, расстройство желудка и т.п.

Изготовление фармакологической композиции, которая содержит активные ингредиенты, растворенные или диспергированные в ней, хорошо известны в данной области техники и не ограничены лекарственной формой. Обычно такие композиции изготавливают в виде инъекций, либо в виде жидких растворов, либо в виде суспензий. Также могут быть изготовлены твердые формы, пригодные для растворения или суспендирования в жидкости перед использованием. Лекарственные препараты также могут быть эмульгированными или могут быть представлены в виде липосомной композиции.

Активный ингредиент может быть смешан с наполнителем, который является фармацевтически приемлемым и совместимым с активным ингредиентом, и находится в количестве, подходящем для применения в терапевтических способах, изложенных в настоящем описании. Подходящими наполнителями являются, например, вода, физиологический раствор, декстроза, глицерин, этанол и т.п. и их комбинации. Дополнительно, при необходимости, композиции могут содержать некоторые количества вспомогательных веществ, таких как увлажняющие или эмульгирующие агенты, агенты рН буферизации и т.п., которые усиливают эффективность активного ингредиента.

Терапевтическая композиция настоящего изобретения может включать в себя фармацевтически приемлемые соли активных компонентов. Фармацевтически приемлемые соли включают соли присоединения кислоты (образованные со свободными аминогруппами полипептидов), которые образованы неорганическими кислотами, такими как, например, хлористоводородная или фосфорная кислоты, или органическими кислотами, такими как уксусная, винная, миндальная и т.п. Соли, образованные свободными карбоксильными группами, также могут быть получены из неорганических оснований, таких как, например, гидроксиды натрия, калия, аммония, кальция или железа, и органических оснований, таких как изопропиламин, триметиламин, 2-этиламиноэтанол, гистидин, прокаин и т.п.

Физиологически совместимые носители хорошо известны в данной области техники. Примерами жидких носителей являются стерильные водные растворы, которые не содержат вещества помимо активных ингредиентов и воды, или содержат буфер, такой как натрий-фосфатный с физиологическим рН, физиологический раствор, или оба эти компонента, такой как забуференный фосфатом физиологический раствор. Дополнительно к этому, водные носители могут содержать более чем одну буферную соль, а также соли, такие как хлориды натрия и калия, декстрозу, полиэтиленгликоль и другие растворы.

Жидкие композиции также могут содержать жидкие фазы дополнительно к воде или вместо нее. Примерами таких дополнительных жидких фаз являются глицерин, растительные масла, такие как хлопковое масло, и водно-масляные эмульсии.

Химические терапевтические композиции настоящего изобретения содержат физиологически совместимые носители совместно с ингибитором тирозинкиназы семейства Src, растворенным или диспергированным в них в качестве активного ингредиента.

Подходящие ингибиторы тирозинкиназы семейства Src ингибируют биологическую тирозинкиназную активность тирозинкиназы семейства Src. Более подходящие тирозинкиназы семейства Src имеют первичную специфичность для ингибирования активности белка Src и дополнительно ингибируют наиболее близкородственные тирозинкиназы семейства Src.

F. Изделия

Настоящее изобретение также предлагает изделие, которое представляет собой емкость с маркировкой для предоставления терапевтически эффективного количества ингибитора тирозинкиназы семейства Src. Ингибитор может представлять собой отдельно упакованный химический ингибитор тирозинкиназы семейства Src или сочетание из одного или нескольких ингибиторов. Изделие содержит упаковочный материал и фармацевтический агент, содержащийся внутри упаковочного материала. Изделие также может содержать две или более суб-терапевтически эффективные дозы фармацевтической композиции, которые совместно действуют синергидно, приводя в результате к уменьшен