N-гидроксиформамидные соединения в качестве ингибиторов металлопротеиназ

N-гидроксиформамидные соединения в качестве ингибиторов металлопротеиназ

Реферат

Настоящее изобретение относится к некоторым N-гидроксиформамидным производным, полезным при ингибировании металлопротеиназ, способам их получения, фармацевтическим композициям, содержащим их, и их применению в терапии.

Соединения по этому изобретению являются ингибиторами одного или более чем одного фермента металлопротеиназы. Металлопротеиназы представляют собой суперсемейство протеиназ (ферментов), известное число которых за последние годы значительно увеличилось. Исходя из структурного и функционального анализа эти ферменты классифицированы на семейства и подсемейства, как описано в N.M. Hooper (1994) FEBS Letters 354:1-6. Примеры металлопротеиназ включают матриксные металлопротеиназы (ММР), такие как коллагеназы (ММР1, ММР8, ММР13), желатиназы (ММР2, ММР9), стромелизины (ММРЗ, ММР10, ММР11), матрилизин (ММР7), металлоэластазу (ММР12), энамелизин (ММР19), МТ-ММР (ММР14, ММР15, ММР16, ММР17); репролизин или адамализин, или семейство MDC, которое включает секретазы и шеддазы, такие как ФНО-конвертирующие ферменты (ADAM10 и ТАСЕ); астациновое семейство, которое включает такие ферменты, как протеиназа, катализирующая процессинг проколлагена (procollagen processing proteinase, РСР); и другие металлопротеиназы, такие как аггреканаза, семейство эндотелин-конвертирующих ферментов и семейство ангиотензин-конвертирующих ферментов.

Полагают, что металлопротеиназы имеют важное значение при плеторе при болезненных физиологических процессах, в которые вовлечено ремоделирование тканей, такое как эмбриональное развитие, формирование костей и маточное ремоделирование во время менструации. Это обосновано способностью металлопротеиназ расщеплять широкий ряд матриксных субстратов, таких как коллаген, протеогликан и фибронектин. Также металлопротеиназы, как полагают, являются важными при процессинге, или секреции, биологически важных клеточных медиаторов, таких как фактор некроза опухоли (ФНО), и пост-трансляционном протеолитическом процессинге, или шеддинге, биологически важных мембранных белков, таких как IgE рецептор CD23 с низкой аффинностью (более полный перечень смотри в N.M. Hooper et al., (1997) Biochem J. 321:265-279).

Металлопротеиназы ассоциированы со многими болезненными состояниями. Ингибирование активности одной или более чем одной металлопротеиназы может быть очень полезным при этих болезненных состояниях, например при различных воспалительных и аллергических заболеваниях, таких как воспаление суставов (в частности, ревматоидный артрит, остеоартрит и подагра), воспаление желудочно-кишечного тракта (в частности, воспалительное заболевание кишечника, неспецифический язвенный колит и гастрит), воспаление кожи (в частности псориаз, экзема, дерматит); при метастазировании или инвазии опухолей; при заболевании, ассоциированном с неконтролируемым разрушением внеклеточного матрикса, таком как остеоартрит; при заболевании, характеризующемся резорбцией кости (таком как остеопороз или болезнь Педжета); при заболеваниях, ассоциированных с аберрантным ангиогенезом; при усиленном коллагеновом ремоделировании, ассоциированном с диабетом, заболеванием периодонта (таким как гингивит), образованием язвы роговицы, образованием кожных язв, послеоперационными состояниями (такими как ободочный анастомоз) и заживлением кожных ран; при демиелинизирующих заболеваниях центральной и периферической нервной системы (таких как рассеянный склероз); болезни Альцгеймера; ремоделировании внеклеточного матрикса, наблюдаемом при сердечно-сосудистых заболеваниях, таких как рестеноз и атеросклероз, и хронических обструктивных болезнях легких, ХОБЛ (в которые вовлечена ММР12).

Известен ряд ингибиторов металлопротеиназ; разные классы соединений могут иметь разные степени эффективности и селективности в отношении ингибирования различных металлопротеиназ. Авторы настоящего изобретения обнаружили новый класс соединений, которые являются ингибиторами металлопротеиназ и, в частности, представляют особый интерес в отношении ингибирования коллагеназы 3 (также известной как ММР-13). Соединения по этому изобретению обладают благоприятными воздействием и/или фармакокинетическими свойствами.

Первоначально коллагеназа 3 (ММР13) была клонирована из библиотеки кДНК, полученной из опухоли груди [J. М. Р. Freije et al. (1994) Journal of Biological Chemistry 269(24):16766-16773]. ПЦР-РНК анализ РНК широкого ряда тканей показал, что экспрессия коллагеназы 3 (ММР13) была ограничена карциномами груди, так как она не была обнаружена в фиброаденомах груди, нормальной или покоящейся молочной железе, плаценте, печени, яичнике, матке, предстательной железе или околоушной железе или в клеточных линиях рака груди (T47-D, MCF-7 и ZR75-1). После этого коллагеназа 3 (ММР13) была обнаружена в трансформированных эпидермальных кератиноцитах [N. Johansson et al., (1997) Cell Growth Differ. 8(2):242-250], плоскоклеточных карциномах [N. Johansson et al., (1997) Am. J. Pathol. 151 (2):499-508] и эпидермальных опухолях [К. Airola et al., (1997) J. Invest. Dermatol. 109(2):225-231]. Эти результаты подтверждают, что коллагеназа 3 (ММР13) секретируется трансформированными эпителиальными клетками и может быть вовлечена в деградацию внеклеточного матрикса и взаимодействие "клетка-матрикс", ассоциированное с метастазированием, как это особенно наблюдается при инвазивных очагах рака груди и при злокачественной эпителиальной опухоли при кожных карциномах.

В недавно опубликованных данных подразумевается, что коллагеназа 3 (ММР13) играет роль при обновлении других соединительных тканей. Например, в соответствии со специфичностью субстрата коллагеназы 3 (ММР13) и предпочтительностью для распада коллагена типа II [Р.G.Mitchell et al., (1996) J.Clin. Invest. 97(3):761-768; V.Knauper et al., (1996) The Biochemical Journal 271:1544-1550], коллагеназа 3 (ММР13), как предположили, играет роль во время первичной оссификации и ремоделировании скелета [М.Stahle-Backdahl et al., (1997) Lab. Invest. 76(5):717-728; N.Johansson et al., (1997) Dev. Dyn. 208(3): 387-397], при деструктивных заболеваниях суставов, таких как ревматоидный и остеоартрит [D.Wernicke et al., (1996) J.Rheumatol. 23:590-595; P.G.Mitchell et al., (1996) J. Clin. Invest. 97(3):761-768: O.Lindy et al., (1997) Arthritis Rheum 40(8):1391-1399] и во время асептического расшатывания эндопротезов тазобедренного сустава [S.Imai et al., (1998) J.Bone Joint Surg. Br. 80(4):701-7101. Коллагеназа 3 (ММР13) также вовлечена в хронические периодонтиты у взрослых, так как она локализована в эпителии хронически воспаленной слизистой оболочки десневой ткани человека [V.J.Uitto et al., (1998) Am. J.Pathol 152(6): 1489-1499] и при ремоделировании коллагенового матрикса в хронических ранах [М.Vaalamo et al., (1997) J.Invest. Dermatoi. 109(1):96-101].

Соединения, которые ингибируют действие металлопротеиназ, в частности коллагеназы 3 (ММР13), описаны в WO 00/12478, WO 00/75108 и WO 01/62742. В число этих ингибиторов, о которых сообщалось, включены арил/гетероарилпиперазинсульфонилметилзамещенные N-гидроксиформамидные соединения, в которых арильное кольцо замещено рядом возможных заместителей, включая среди прочего алкокси и арилокси. Нигде не раскрыто, что алкокси- или арилоксизаместитель в таких соединениях сам дополнительно может быть замещен.

Замещенные алкокси- или арилокси-арил/гетероарилпиперазинсульфонилметилзамещенные N-гидроксиформамидные соединения как ингибиторы матриксных металлопротеиназ описаны в общем в описании WO 99/38843. Среди множества перечисленных возможных заместителей для алкоксигруппы присутствует галоген. Однако такое алкоксизамещенное соединение не раскрыто, и действительно, единственным конкретно раскрытым N-гидроксиформамидным соединением является N-{1S-[4-(4-хлорфенил)пиперазин-1-сульфонилметил]-2-метилпропил}-N-гидроксиформамид.

Авторы настоящего изобретения обнаружили, что замещенные арил- или гетероарил-пиперазинсульфонилметилзамещенные N-гидроксиформамидные соединения, в которых заместителем является алкоксигруппа, которая сама замещена одной или более чем одной группой фторо, являются особенно полезными ингибиторами металлопротеиназ, в частности коллагеназы 3 (ММР13), и обладают желаемыми профилями активности.

В первом аспекте настоящего изобретения предложено соединение формулы (I)

или его фармацевтически приемлемые соль, пролекарство или сольват,

где кольцо В представляет собой моноциклическое арильное кольцо, имеющее шесть кольцевых атомов, или моноциклическое гетероарильное кольцо, имеющее вплоть до шести кольцевых атомов и содержащее один или более чем один кольцевой гетероатом, где каждый указанный гетероатом представляет собой азот;

R2 представляет собой группу, выбранную из С1-6алкила или арила, где указанная группа замещена одной или более чем одной группой фторо;

n равен 1, 2 или 3 и

R1 представляет собой возможно замещенную группу, выбранную из С1-6алкила, С5-7циклоалкила, гетероциклоалкила, арила, гетероарила, С1-6алкил-арила, С1-6алкил-гетероарила, C1-6алкил-циклоалкила или С1-6алкил-гетероциклоалкила.

Термин "арил", как он использован здесь, означает ароматический карбоциклический радикал с одним или двумя кольцами, имеющими вплоть до десяти кольцевых атомов, такой как фенил или нафтил. В тех случаях, когда подразумевается ароматический карбоциклический радикал с одним кольцом, его обозначают как "моноциклическое арильное кольцо". В тех случаях, когда подразумевается, что арильное кольцо имеет шесть кольцевых атомов, это указывают конкретно.

"Гетероарил" относится к ароматическим кольцевым системам, имеющим вплоть до десяти атомов, в частности вплоть до шести кольцевых атомов, и содержащим один или более кольцевых гетероатомов, которые могут быть одинаковыми или разными, выбранных из N, О и S. Примеры включают пирролил, фуранил, тиофенил, имидазолил, тиазолил, пиридинил, пиримидинил и пиразинил. Гетероатомы азота будут замещенными по необходимости; также они могут быть в виде N-оксидов. Атомы серы могут быть в виде S, S(O) или S(O)₂. В тех случаях, когда подразумевается гетероароматическая система с одним кольцом, ее обозначают как "моноциклическое гетероарильное кольцо" и в тех случаях, когда подразумевается, что максимальное количество кольцевых атомов гетероарильного кольца составляет менее десяти, это указывают конкретно. В тех случаях, когда подразумевается, что кольцевым гетероатомом является один из N, S или О, в частности, или, что гетероарильное кольцо содержит более чем один гетероатом, в определенном сочетании, например, где гетероатомы являются одинаковыми, это указывают конкретно.

Термин "галоген" включает фтор, хлор, бром и йод, в частности фтор.

Если не оговорено особо, термин "С1-6алкил", когда его используют отдельно или в комбинации, относится к алкильной группировке с неразветвленной или разветвленной цепью, имеющей от одного до шести атомов углерода, включая метил, этил, пропил, изопропил, бутил, трет-бутил, пентил, гексил и тому подобное. Соответственно, под "С1-4алкилом" следует понимать обозначение алкильной группировки с неразветвленной или разветвленной цепью, имеющей от одного до четырех атомов углерода.

Термин "циклоалкил" относится к насыщенной алициклической группировке, имеющей пять, шесть или семь атомов углерода, и включает, например, циклопентил и циклогексил. Гетероциклоалкильное кольцо относится к насыщенному пяти-, шести- или семичленному кольцу, содержащему один или более кольцевых гетероатомов, которые могут быть одинаковыми или разными, выбранных из N, О и S, и включает, например, пиперидинил, пирролидинил, тетрагидрофуранил, тетрагидропиранил.

Термин "возможно замещенный" используют здесь для указания на возможное замещение группой или группами, предусмотренное в любом подходящем доступном положении.

Соответственно, кольцо В представляет собой моноциклическое арильное кольцо, имеющее шесть кольцевых атомов, такое как фенил, или моноциклическое гетероарильное кольцо, имеющее вплоть до шести кольцевых атомов и содержащее от одного до четырех кольцевых атомов азота, такое как пиридинил или пиримидинил, триазинил или тетразинил.

В тех случаях, когда кольцо В представляет собой гетероарильное кольцо, предпочтительным является шестичленное кольцо, содержащее от одного до четырех кольцевых атомов азота, более предпочтительно шестичленное кольцо, содержащее один или два кольцевых атома азота, такое как пиридинил или пиримидинил.

В одном из предпочтительных воплощений кольцо В представляет собой фенильное кольцо.

В другом предпочтительном воплощении кольцо В представляет собой шестичленное гетероарильное кольцо, содержащее один или два кольцевых атома азота. Одним из предпочтительных значений для кольца В является пиридинил, в частности 2-пиридинил. Особо предпочтительным значением для кольца В является пиримидинил, в частности 2-пиримидинил.

R2 может представлять собой арильную группу, имеющую вплоть до десяти кольцевых атомов, в частности моноциклическую арильную группу, имеющую шесть кольцевых атомов (такую как фенил), замещенную одной или более чем одной группой фторо, но предпочтительно представляет собой С1-6алкильную, в частности С1-4алкильную, группу (такую как метил и особенно этил), замещенную одной или более чем одной группой фторо.

Предпочтительно R2 замещен группами фторо в количестве от одной до пяти, в частности тремя или четырьмя группами фторо.

В одном из предпочтительных воплощений R2 представляет собой С1-6алкил, в частности С1-4алкил, замещенный тремя или четырьмя группами фторо.

Одним из предпочтительных значений для R2 является CF2CHF2.

В другом особо предпочтительном воплощении R2 представляет собой CH2CF3.

Подходящее значение n равно 1 или 2 и предпочтительно 1. Предпочтительно заместитель R2O- по кольцу В находится в пара-положении относительно места присоединения к кольцу.

R1 представляет собой подходящую возможно замещенную группу, выбранную из C1-4-алкила (такого как метил или этил), арила, имеющего шесть кольцевых атомов (такого как фенил), 5-6-членного гетероциклоалкильного кольца, содержащего один или два кольцевых гетероатома, которые могут быть одинаковыми или разными, выбранных из N, О и S (такого как пиперидинил или тетрагидропиранил), или С1-4алкил-гетероарила, где гетероарил имеет вплоть до шести кольцевых атомов и содержит один или два кольцевых гетероатома, выбранных из N, О и S (такого как алкилпиримидинил или алкилпиридинил).

Предпочтительно R1 представляет собой возможно замещенное 5-6-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее один или два кольцевых гетероатома, которые могут быть одинаковыми или разными, выбранных из N, О и S, или С1-4алкил-гетероарильную группу, имеющую вплоть до шести кольцевых атомов и содержащую один или более гетероатомов, которые могут быть одинаковыми или разными, выбранных из N, О и S, возможно замещенную по гетероарильному кольцу.

В одном из предпочтительных воплощений R1 является незамещенным.

В одном из предпочтительных воплощений R1 представляет собой тетрагидропиранильную группу, в частности 4-тетрагидропиранил.

В другом предпочтительном воплощении R1 представляет собой С2-3алкил-пиримидинильную группу, возможно замещенную по пиримидинильному кольцу.

Одним из предпочтительных значений для R1 является 2-пиримидинил-СН2СН2-. Другим особо предпочтительным значением для R1 является 2-пиримидинил-СН2СН2СН2-.

Подходящие возможные заместители для R1 включают одну или более чем одну группу, независимо выбранную из NO2, CF3, CN, галогена, С1-4алкила, карбокси(С1-4)алкила, циклоалкила, -OR4, -SR4, С1-4алкила, замещенного -OR4, SR4 (и его окисленными аналогами), NR4, N-Y-R4, или С1-4алкил-Y-NR4, где R4 представляет собой водород, С1-6алкил, арил, гетероарил или С1-6алкил-арил, каждый из которых независимо возможно замещен галогеном, NO2, CN, CF3, С1-6алкилом, -S-C1-6алкил, -SO-C1-6алкил, -SO2-С1-6алкил или С1-6алкокси, и Y выбран из -SO2- и -СО-.

Когда R1 в соединениях формулы (I) является замещенным, то предпочтительно он замещен одним или двумя заместителями, которые могут быть одинаковыми или разными, выбранными из С1-4алкила, галогена, CF3 и CN. Предпочтительным заместителем является галоген, в частности фтор. Предпочтительно, если R1 является замещенным, то он является монозамещенным. Одним из предпочтительных значений для R1 в соединениях формулы (I), где R1 замещен, является 5-F-2-пиримидинил-СН2СН2-.

Следует понимать, что количество и природа заместителей по кольцам, образованным R1 и/или R2, в соединениях по изобретению будут выбраны таким образом, чтобы избежать стерически нежелательных комбинаций.

В одной из предпочтительных групп соединений по изобретению R2 представляет собой С1-6алкил, замещенный группами фторо в количестве от одной до пяти; n равен 1; кольцо В представляет собой фенил, пиридинил или пиримидинил и R1 представляет собой возможно замещенное 5-6-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее один или два кольцевых гетероатома, которые могут быть одинаковыми или разными, выбранных из N, О и S, или С1-4алкил-гетероарильную группу, имеющую вплоть до шести кольцевых атомов и содержащую один или более гетероатомов, которые могут быть одинаковыми или разными, выбранных из N, О и S, возможно замещенную по гетероарильному кольцу.

Особо предпочтительными соединениями по изобретению в этой группе являются соединения, в которых R1 не замещен или замещен галогеном, в частности фтором.

Конкретные соединения включают

В тех случаях, когда соединения по изобретению содержат один или более чем один асимметрически замещенный атом углерода, изобретение включает все стереоизомеры, в том числе энантиомеры и диастереомеры и смеси, включая их рацемические смеси. Также включены таутомеры и их смеси.

Рацематы могут быть разделены на индивидуальные энантиомеры с использованием известных методик (см. Advanced Organic Chemistry: 3^rd Edition: author J March, p.104-107). Подходящая методика включает образование диастереомерных производных путем взаимодействия рацемического вещества со вспомогательным хиральным веществом с последующим разделением диастереомеров, например, хроматографией, и затем отщеплением этих вспомогательных веществ.

Не желая ограничиваться первоначальными определениями, полагают, что в настоящем случае активный энантиомер имеет S-стереохимию. Это основано на сравнении с родственными соединениями, для которых была подтверждена эта абсолютная конфигурация. Соответственно, S-структура указана в формулах, приведенных ниже в примерах. Однако следует понимать, что рацемат любого соединения по изобретению может быть разделен на индивидуальные энантиомеры способом, изложенным выше, и более активный энантиомер может быть затем идентифицирован подходящим методом анализа без необходимости определения абсолютных конфигураций.

Соединения по изобретению могут быть предложены в виде фармацевтически приемлемых солей. Подходящие фармацевтически приемлемые соли включают основные соли, такие как соль щелочного металла, например натрия, соль щелочноземельного металла, например кальция или магния, соль органического амина, например триэтиламина, морфолина, N-метилпиперидина, N-этилпиперидина, прокаина, дибензиламина, N,N-дибензилэтиламина, или аминокислот, например лизина. В другом аспекте, в тех случаях, когда соединение является достаточно основным, подходящие соли включают соли присоединения кислоты, такие как метансульфонат, фумарат, гидрохлорид, гидробромид, цитрат, малеат, и соли, образованные с фосфорной и серной кислотой.

Подходящие пролекарства соединений формулы (I) представляют собой соединения, которые гидролизуются in vivo с образованием соединений формулы (I). Они могут быть получены традиционными способами.

В настоящем изобретении также предложен способ получения соединения формулы (I), как оно определено выше, или его фармацевтически приемлемых солей, пролекарств или сольватов, включающий превращение подходящего гидроксиаминосоединения формулы (IV)

где R2, n, кольцо В и R1 являются такими, как определено в формуле (I), в соединение формулы (I) путем формилирования с подходящим смешанным ангидридом и затем, если необходимо превращение полученного соединения в другое соединение по изобретению и/или образование фармацевтически приемлемых соли, пролекарства или сольвата данного соединения.

Процесс формилирования можно подходящим образом проводить путем взаимодействия соединения формулы (IV) со смешанным ангидридом, полученным в результате взаимодействия муравьиной кислоты и уксусного ангидрида. Взаимодействие легко осуществляют в присутствии органической кислоты, такой как муравьиная кислота. Взаимодействие предпочтительно проводят в подходящем инертном растворителе или разбавителе, таком как дихлорметан (ДХМ) или тетрагидрофуран, и при температуре в интервале, например, от 0 до 50°С.

Соединения формулы (IV) могут быть получены из соответствующего алкена формулы (III)

где R2, n, В и R1 являются такими, как определено в формуле (I), который сам может быть получен из соответствующего соединения формулы (II)

где R2, n и кольцо В являются такими, как определено в формуле (I), путем взаимодействия с подходящим соединением формулы R1CHO (где R1 является таким, как определено для формулы (I)) или путем взаимодействия с подходящим сложным эфиром с образованием кетона, с последующими восстановлением до соответствующего спирта и дегидратацией. Следует понимать, что соединение формулы (III) может быть в виде Е- или Z-изомера, или в виде их смеси. Структура, представленная в формуле (III), не подразумевает ограничения какой-либо конкретной геометрической изомерии вокруг двойной связи.

Соединения формул (III) и (IV) могут быть получены с использованием известных методик способами, аналогичными способам, описанным в упомянутых выше WO 00/12478, WO 00/75108 и WO 01/62742. Примеры способов получения некоторых из этих соединений даны ниже в примерах.

Соединения формулы (II), (III) и (IV) являются новыми и составляют дополнительный аспект изобретения. Конкретные соединения формулы (II) включают

Примеры способов получения этих соединений приведены ниже в примерах.

Соединения формулы (I) могут быть превращены в другие соединения формулы (I) с использованием стандартных методик, общепринятых в данной области техники.

Следует понимать, что получение соединений формулы (I) может включать на различных стадиях присоединение и удаление одной или более чем одной защитной группы. Введение защитных групп и снятие защиты с функциональных групп описаны в "Protective Groups in Organic Chemistry", edited by J.W.F. McOmie, Plenum Press (1973), и "Protective Groups in Organic Synthesis", 2nd edition, T.W. Greene and P.G.M. Wuts, Wiley-lnterscience (1991).

Соединения по изобретению являются ингибиторами металлопротеиназ, в частности они являются ингибиторами коллагеназы 3 (ММР13) и поэтому показаны при лечении заболеваний или состояний, опосредованных ферментами металлопротеиназами, включая артрит (такой как остеоартрит), атеросклероз и хронические обструктивные болезни легких (ХОБЛ), как рассмотрено выше. В частности, соединения по изобретению показаны при лечении заболеваний или состояний, опосредованных коллагеназой 3 (ММР13). Конкретное преимущество ингибиторов коллагеназы 3 по изобретению заключается в том, что они проявляют улучшенную селективность по сравнению с другими металлопротеиназами.

Таким образом, в дополнительном аспекте настоящего изобретения предложено соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, пролекарство или сольват, как они определены выше, для применения в терапии человека или животного.

Также в изобретении предложено применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, пролекарства или сольвата, как они определены выше, в производстве лекарства для применения в терапии.

Следует понимать, что "терапия" также включает "профилактику", если не указано иного. Термины "терапевтический" и "терапевтически" следует понимать соответствующим образом.

В еще одном дополнительном аспекте настоящего изобретения предложен способ лечения болезненного состояния, опосредованного металлопротеиназой, включающий введение теплокровному животному терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемых соли, пролекарства или сольвата.

Следует понимать, что вводимая дозировка будет варьировать в зависимости от используемого соединения, способа введения, требуемого лечения и указанного расстройства. Обычно принимают суточную дозу от 0,5 до 75 мг/кг массы тела (и предпочтительно от 0,5 до 30 мг/кг массы тела). Эту суточную дозу можно давать в разделенных дозах, если необходимо, при этом точное количество принимаемого соединения и путь введения зависят от массы, возраста и пола пациента, которого лечат, и от конкретного болезненного состояния, которое лечат, в соответствии с принципами, известными в данной области.

Соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли, пролекарство и сольваты могут быть использованы сами по себе, но обычно их будут вводить в форме фармацевтической композиции вместе с фармацевтически приемлемым адъювантом, разбавителем или носителем.

Таким образом, в настоящем изобретении также предложена фармацевтическая композиция, включающая соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемые соль, пролекарство или сольват вместе с фармацевтически приемлемым адъювантом, разбавителем или носителем.

Фармацевтические композиции по изобретению можно вводить способом, общепринятым для болезненного состояния, которое требуется лечить, например пероральным, местным, парентеральным, буккальным, назальным, вагинальным или ректальным введением или путем ингаляции. Для этих целей соединения по этому изобретению могут быть приготовлены с помощью известных в данной области средств в форме, например, таблеток, капсул, водных или масляных растворов, суспензий, эмульсий, кремов, мазей, гелей, назальных спреев, суппозиториев, тонкоизмельченных порошков или аэрозолей для ингаляции, а для парентерального применения (в том числе внутривенного, внутримышечного введения или инфузии) в форме стерильных водных или масляных растворов или суспензий либо стерильных эмульсий.

В дополнение к соединениям по настоящему изобретению фармацевтическая композиция по изобретению может также содержать один или более чем один фармакологический агент, показанный при лечении одного или более чем одного болезненного состояния, указанного выше, либо она может быть введена совместно с таким(и) агентом(ами) (одновременно или последовательно). Обычно стандартные лекарственные формы будут содержать приблизительно от 1 до 500 мг соединения по изобретению.

Активность и селективность соединений по изобретению могут быть определены с использованием соответствующего теста на ингибирование фермента, как описано в WO 00/12478, WO 00/75108 и WO 01/62742. Ингибиторную активность в отношении коллагеназы 3 (ММР13) можно оценить, например, с использованием методики, изложенной ниже.

Рекомбинантная человеческая proMMP13 может быть экспрессирована и очищена, как описано Knauper et al. [V. Knauper et al., (1996) The Biochemical Journal 271:1544-1550 (1996)]. Очищенный фермент может быть использован для контроля активности ингибиторов следующим образом: очищенную proMMP13 активируют с использованием 1 мМ аминофенилртутной кислоты (amino phenyl mercuric acid, АРМА), 20 часов при 21°С; активированную ММР13 (11,25 нг на анализ) инкубируют в течение 4-5 часов при 35°С в буфере для тестирования (0,1 М Трис-HCl, рН 7,5, содержащем 0,1 М NaCl, 20 мМ CaCl₂, 0,02 мМ ZnCl и 0,05% (мас./об.) Brij 35 с использованием синтетического субстрата 7-метоксикумарин-4-ил)ацетил. Pro. Leu.Giy.Leu. N-3-(2,4-динитрофенил)-L-2,3-диаминопропионил.Ala.Arg.NH₂ в присутствии или в отсутствие ингибиторов. Активность определяют путем измерения флуоресцентности при λех 328 нм и λem 393 нм. Измеряя активность в диапазоне концентраций можно получить кривую, из которой может быть определена ИК50, представляющая собой ингибиторную концентрацию, при которой активность фермента уменьшается на 50%.

Следует понимать, что фармакологические свойства соединений по изобретению будут варьировать в зависимости от их структуры, но, в общем, как определено анализом, описанным выше, соединения по изобретению демонстрируют ингибиторную активность в отношении коллагеназы 3 с концентрациями ИК50 в интервале от 0,01 до 1000 нМ. В следующей таблице приведены значения ИК50 для репрезентативной выборки соединений по изобретению, которые были протестированы в описанном выше анализе.

Соединение примера №	ИК50 (нМ)
2б	0,24
2е	13,0
5	3,6
7а	0,12
7в	0,19
7е	2,8
8б	1,5
8ж	4,0

Соединение формулы I можно применять в комбинации с другими лекарственными средствами и терапиями, применяемыми при лечении болезненных состояний, при которых полезно ингибирование металлопротеиназ, в частности коллагеназы 3 (ММР13). Например, соединение формулы I можно применять в комбинации с лекарственными средствами и терапиями, применяемыми при лечении ревматоидного артрита, астмы, воспалительного заболевания кишечника, рассеянного склероза, СПИДа, септического шока, застойной сердечной недостаточности, ишемической болезни сердца, псориаза и других болезненных состояний, упомянутых выше в этом описании.

Например, благодаря своей способности ингибировать металлопротеиназы соединение формулы I полезно при лечении некоторых воспалительных и невоспалительных заболеваний, которые в настоящее время лечат нестероидным противовоспалительным лекарственным средством (NSAID), ингибирующим циклооксигеназу, таким как индометацин, кеторолак, ацетилсалициловая кислота, ибупрофен, сулиндак, толметин и пироксикам. Совместное введение соединения формулы 1 по настоящему изобретению с NSAID может привести к снижению количества последнего агента, необходимого для достижения терапевтического эффекта. В связи с этим уменьшается вероятность неблагоприятных побочных эффектов от NSAlD, таких как влияние на желудочно-кишечный тракт. Таким образом, в соответствии с дополнительным аспектом изобретения предложена фармацевтическая композиция, которая включает соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль в сочетании или смеси с нестероидным противовоспалительным агентом, ингибирующим циклооксигеназу, и фармацевтически приемлемый разбавитель или носитель.

Соединение формулы I также можно применять с противовоспалительными агентами, такими как ингибитор фермента 5-липоксигеназы.

Соединение формулы I также можно применять при лечении таких состояний, как ревматоидный артрит, в комбинации с противоартритными агентами, такими как золото, метотрексат, стероиды и пенициллинамин, и таких состояний, как остеоартрит, в комбинации со стероидами.

Соединение формулы I также можно вводить при деградативных заболеваниях, например, остеоартрите, с хондропротекторными, антидеградативными и/или репаративными агентами, такими как Diacerhein, препараты гиалуроновой кислоты, такие как гиалган, румалон, артепарон и глюкозаминовые соли, такие как антрил.

Соединение формулы I можно применять при лечении астмы в комбинации с противоастматическими агентами, такими как стероиды, бронходилататоры и антагонисты лейкотриенов.

В частности, для лечения воспалительных заболеваний, ревматоидного артрита, остеоартрита, псориаза, воспалительного заболевания кишечника, хронической обструктивной болезни легких, астмы и аллергического ринита соединение по настоящему изобретению можно объединять с такими агентами, как ингибиторы ФНО-α, такие как анти-ФНО моноклональные антитела (такие как Ремикейд, CDP-870 и D.sub2.E.sub7.) и ФНО-рецепторные иммуноглобулиновые молекулы (такие как Enbrel.reg.), неселективные ингибиторы циклооксигеназы-1 (СОХ-1)/циклооксигеназы-2 (СОХ-2) (такие как пироксикам, диклофенак, пропионовые кислоты, такие как напроксен, флубипрофен, фенопрофен, кетопрофен и ибупрофен, фенаматы, такие как мефенамовая кислота, индометацин, сулиндак, апазон, пиразолоны, такие как фенилбутазон, салицилаты, такие как аспирин), ингибиторы СОХ-2 (такие как мелоксикам, целекоксиб, рофекоксиб, валдекоксиб или эторикоксиб), метотрексат в низких дозах, лефуномид; циклесонид; гидроксихлорохин, d-пеницилламин, ауранофин или парентеральное или пероральное золото.

Кроме того, настоящее изобретение дополнительно относится к комбинации соединения формулы I вместе с ингибитором биосинтеза лейкотриенов, ингибитором 5-липоксигеназы (5-LO) или антагонистом белка, активирующего 5-липоксигеназу (FLAP), таким как зилеутон; АВТ-761; фенлеутон; тепоксалин; Abbott-79175; Abbott-85761; N-(5-замещенные)-тиофен-2-алкилсульфонамиды; 2,6-ди-трет-бутилфенолгидразоны; метокситетрагидропираны, такие как Zeneca ZD-2138; соединение SB-210661; пиридинил-замещенные 2-цианонафталиновые соединения, такие как L-739010; 2-цианохинолиновые соединения, такие как L-746530; индольные и хинолиновые соединения, такие как МК-591, МК-886 и BAY x 1005.

Кроме того, настоящее изобретение дополнительно относится к комбинации соединения формулы I вместе с антагонистами рецепторов лейкотриенов LTB₄, LTC₄, LTD₄ и LTF₄, выбранными из группы, состоящей из фенотиазин-3-онов, таких как L-651392; амидиносоединений, таких как CGS-25019с; бензоксаламинов, таких как онтазоласт; бензолкарбоксимидамидов, таких как BIIL 284/260, и таких соединений, как зафирлукаст, аблукаст, монтелукаст, пранлукаст, верлукаст (МК-679), RG-12525, Ro-254913, иралукаст (CGP 45715А) и BAY × 7195.

Кроме того, настоящее изобретение дополнительно относится к комбинации соединения формулы I вместе с ингибитором PDE4, включая ингибиторы изоформы PDE4D.

Кроме того, настоящее изобретение дополнительно относится к комбинации соединения формулы I вместе с антагонистами антигистаминовых рецепторов H₁, такими как цетиризин, лоратадин, деслоратадин, фексофенадин, астемизол, азеластин и хлорфенирамин.

Кроме того, настоящее изобретение дополнительно относится к комбинации соединения формулы 1 вместе с гастропротекторным антагонистом рецепторов Н₂.

Кроме того, настоящее изобретение дополнительно относится к комбинации соединения формулы I вместе с агонистом α₁- и α₂-адреноцепторов симпатомиметическим агентом, таким как пропилгекседрин, фенилэфрин, фенилпропаноламин, псевдоэфедрин, гидрохлорид нафазолина, гидрохлорид оксиметазолина, гидрохлорид тетрагидрозолина, гидрохлорид ксилометазолина и гидрохлорид этилнорэпинефрина.

Кроме того, настоящее изобретение дополнительно относится к комбинации соединения формулы I вместе с антихолинергическими агентами, такими как ипратропия бромид; тиотропия бромид; окситропия бромид; пирензепин и телензепин.

Кроме того, настоящее изобретение дополнительно относится к комбинации соединения формулы I вместе с агонистами β₁-β₄-адренорецепторов, такими как метапротеренол, изопротеренол, изопреналин, альбутерол, сальбутамол, формотерол, сальметерол, тербуталин, оксипреналин, мезилат битолтерола и пирбутерол, или метилксантанинами, в то