Способ лечения аномального роста клеток

Способ лечения аномального роста клеток

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Данная заявка претендует на приоритет по предварительной заявке на патент США № 60/742766, зарегистрированной 5 декабря 2005 г., и предварительной заявке на патент США № 60/864637, зарегистрированной 7 ноября 2006 г., включенных в данное описание в качестве ссылок.

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к применению ингибиторов c-Met/HGFR для лечения аномального роста клеток у млекопитающих. В частности, изобретение относится к способам лечения млекопитающих, страдающих от рака.

Предпосылки создания изобретения

Соединение (R)-3-[1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-5-(1-пиперидин-4-ил-1Н-пиразол-4-ил)пиридин-2-иламин, представленное формулой 1

является сильным низкомолекулярным ингибитором киназы c-Met/HGFR (рецептор фактора роста гепатоцитов) и активности ALK (киназа анапластической лимфомы). Соединение 1 обладает противоопухолевыми свойствами, которые фармакологически опосредуются через ингибирование с-Met/HGFR, вовлеченной в регуляцию роста и развития метастаза широкого ряда типов опухолей, и ALK, вовлеченной в патогенез ALCL (анапластическая крупноклеточная лимфома). Соединение 1 раскрывается в поданной в МПВ заявке № РСТ/IB2005/002837 и заявке на патент США № 11/212331, которые обе включены в данное описание в качестве ссылок. Кроме того, раскрывается рацемат соединения 1 в поданной в МПВ заявке № РСТ/IB05/002695 и заявке на патент США № 11/213039, которые обе включены в данное описание в качестве ссылок.

Онкозаболевания человека включают в себя разнообразные заболевания, в совокупности являющиеся одной из основных причин смерти в развитых странах во всем мире (American Cancer Society, Cancer Facts and Figures 2005. Atlanta: American Cancer Society; 2005). Распространение онкозаболеваний вызвано сложным рядом многих генетических и молекулярных событий, включая генные мутации, хромосомные транслокации и кариотипические аномалии (Hanahan D., Weinberg RA. The hallmarks of cancer. Cell, 2000; 100: 57-70). Хотя лежащие в основе рака генетические причины являются и разнообразными, и комплексными, отмечено, что каждый тип онкозаболевания проявляет общие признаки и приобретенные возможности, которые облегчают его развитие. К таким приобретенным возможностям относятся нарушение регуляции роста клеток, длительная способность образования новых кровеносных сосудов (т.е. ангиогенез) и способность опухолевых клеток распространяться локально, а также метастазировать в другие органы (Hanahan D., Weinberg RA. The hallmarks of cancer. Cell, 2000; 100: 57-70). Поэтому идентификация новых лечебных средств, которые 1) ингибируют молекулярные мишени, которые изменяются в ходе развития рака, или 2) воздействуют на множество процессов, общих для развития рака при разных опухолевых заболеваниях, является насущной потребностью.

Обширная литература показывает, что с-Met/HGFR является одной из наиболее часто мутируемых или, иначе, аномально активируемых RTK при различных онкозаболеваниях человека (Christensen JG, Burrows J, Salgia R. c-Met as a target in human cancer and characterization of inhibitors for therapeutic intervention. Cancer Letters, 2005, 225: 1-26). Типы опухолей, при которых, как известно, киназа с-Met/HGFR изменена генетически в результате мутации или амплификации гена, включают в себя, но ими не ограничиваются, онкологические заболевания с весьма неудовлетворенной потребностью в лечении, такие как рак почек, метастазирующий колоректальный рак, глиальный рак, немелкоклеточный рак легких, онкозаболевания желудка, головы и шеи и другие онкозаболевания (Christensen JG, Burrows J, Salgia R. c-Met as a target in human cancer and characterization of inhibitors for therapeutic intervention. Cancer Letters, 2005, 225: 1-26).

Мутации HGFR вовлечены в образование карциномы почек (см., например, L. Schmidt, K. Junker, N. Nakaigawa, T. Kinjierski, G. Weirich, M. Miller et al., Novel mutations of the MET proto-oncogene in papillary renal carcinomas, Oncogene, 1999, 18: 2343-2350; L. Schmidt, F.M. Duh, F, Chen, T. Kishida, G. Glenn, P. Choyke et al., Germline and somatic mutations in the tyrosine kinase domain of the MET proto-oncogene in papillary renal carcinomas, Nat. Genet., 1997, 16: 68-73; L. Schmidt, K. Junker, G. Weirich, G. Glenn, P. Choyke, L. Lubensky et al., Two North American famillies with hereditary papillary renal carcinoma and identical novel mutations of the MET proto-oncogene, Cancer Res., 1998, 58: 1719-1722). Мутации HGFR связывают с карциномой головы и шеи (см., например, M.F. Di Renzo, M. Olivero, T. Martone, A. Maffe, P. Maggiora, A.D. Stefani et al., Somatic mutations of the MET oncogene are selected during metastatic spread of human HNSC carcinomas, Oncogene, 2000, 19: 1547-1555; D.M. Aebersold, O. Landt, S. Berthou, G. Gruber, K.T. Beer, R.H. Greiner, Y. Zimmer, Prevalence and clinical impact of Met Y1253D-activating point mutation in radiotherapytreated squamous cell cancer of the oropharynx, Oncogene, 2003, 22: 8519-8523). Мутации HGFR связывают с карциномой легких (см., например, P.C. Ma, T. Kijima, G. Maulik, E.A. Fox, M. Satter, J.D. Griffin et al., c-MET mutations analysis in small cell lung cancer: novel juxtamembrane domain mutations regulating cytoskeletal functions, Cancer Res., 2003, 63: 6272-6281; P.C. Ma, S. Jagdeesh, R. Jagadeeswaran, E.A. Fox, J.G. Christensen, G. Maulik et al., c-MET expression/activation, functions, and mutations in non-small cell lung cancer, Proc. Am. Assoc. Cancer Res., 2004, 63: 1875).

Кроме того, мутации HGFR вовлечены в другие состояния, включая гепатоцеллюлярные карциномы у детей, рак желудка человека, рак желудка фиброзного типа, колоректальный рак и злокачественные меланомы, и пр. (см., например, W.S. Park, S.M. Dong, S.Y. Kim, E.Y. Na, M.S. Shin, J.H. Pi, Somatic mutations in the kinase domain of the Met/hepatocyte drouth factor receptor gene in cheildhood hepatocellular carcinomas, Cancer Res., 1999, 59: 307-310; J.H. Lee, S.U. Han, H. Cho, B. Jennigs, B. Gerrard, M. Dean et al., A novel germ line juxtamembrane Met mutation in human: gastric cancer, Oncogene, 2000, 19: 4947-4953; A. Lorenzato, M. Olivero, S. Patane, E. Rosso, A. Oliaro, P.M. Comoglio, M.F. Di Renzo, Novel somatic mutations of the MET oncogene in human carcinoma metastases activating cell motility and invasion, Cancer Res., 2002, 62: 7025-7030; H. Kuniyasu, W. Yasui, Y. Kitadai, H. Yokozaki, H. Ito, E. Tahara, Frequent amplification of the c-met gene scirhous type stomach cancer, Biochem. Biophys. Res. Commun., 1992, 189: 227-232; M.F. Di Renzo, M. Olivero, A. Glacomini, H. Porte, E. Chastre, L. Mirossay et al., Overexpression and amplification of the met/HGF receptor gene during the progression of colorectal cancer, Clin. Cancer Res., 1995, 1: 147-154; T. Hara, A. Ooi, M. Kobayashi, M. Mai, K. Yanagihara, Amplification of c-myc, K-sam, and c-met in gastric cancers: detection by fluorescence in situ hybridization, Lab. Invest., 1998, 76: 1143-1153).

Установлена также взаимосвязь мутаций HGFR с функцией и онкогенным потенциалом (см., например, M. Jeffers, L. Schmidt, N. Nakaigawa, C.P. Webb, G. Weirich, T. Kishida et al., Activating mutations for the met tyrosine Kinase receptor in human cancer, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1997, 94: 11445-11450; M. Jeffers, M. Fiscella, C.P. Webb, M. Anver, S. Koochekpour, G.F. Vande Woude, The mutationally activated Met receptor mediates motility and metastasis, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1998, 95: 14417-14422).

Наконец, мутации HGFR вовлечены и исследованы в опухолях мышей (см., например, H. Takayama, W.J. LaRochelle, R. Sharp, T. Otsuka, P. Kriebel, M. Anver et al., Diverse tumorigenesis associated with aberrant development in mice overexpressing hepatocyte growth factor/scatter factor, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1997, 94: 701-706; T. Otsuka, H. Takayama, R. Sharp, G. Celli, W.J. LaRochelle, D.P. Bottero et al., c-Met autocrine activation induces development of malignant melanoma and acquisition of the metastatic phenotype, Cancer Res., 1998, 58: 5157-5167; M.I. Gallego, B. Bierie, L. Henighausen, Targeted expression of HGF/SF in mouse epithelium leads to metastatic adenosquamous carcinomas through the activation of multiple signal transduction pathways, Oncogene, 2003, 22: 8498-8508; C.R. Graveel, Y. Su, L.M. Wang, M. Fiscella, T. Lino, C. Birchmeier et al., Tumorigenic effects of activating Met mutations in a knock-in mouse model, Proc. Am. Assoc. Cancer Res., 2004, 44: 5102).

NMP-ALK - вариант онкогенного слитого белка киназы анапластической лимфомы, который является результатом хромосомной транслокации, вовлекается в патогенез крупноклеточной анапластической лимфомы человека (Pulford K., Morris S.W., Turturro F., Anaplastic lymphoma kinase proteins in grouth control and cancer, J. Cell. Physiol., 2004, 199: 330-58). Роль аберрантной экспрессии конститутивно активных химерных белков ALK в патогенезе ALCL хорошо установлена (Weihua Wan et al., Anaplastic lymphoma kinase activity is essential for the proliferation and survival of anaplastic large cell lymphoma cells, Blood First Edition Paper, интерактивная публикация 27 октября 2005, DOI 10.1182/blood-2005-08-3254).

Несоответствующая активация c-Met/HGFR (включая с-Met дикого типа) также вовлечена в разрегулирование многих опухолевых онкогенных процессов, таких как митогенез, выживаемость, ангиогенез, инвазивный рост и, в особенности, метастатический процесс (Christersen et al., 2005). Кроме того, показано, что экспрессия c-Met и HGF - ее единственного высокоаффинного лиганда коррелирует с плохим прогнозом или развитием метастаза в случае ряда основных онкозаболеваний человека (Christersen et al., 2005). NMP-ALK вовлекается в разрегулирование клеточной пролиферации и апоптоза в клетках лимфомы ALCL (Pulford et al., 2004).

Сущность изобретения

В одном воплощении настоящее изобретение относится к способу лечения аномального роста клеток у млекопитающего, нуждающегося в таком лечении, включающему введение указанному млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения формулы 1

или его фармацевтически приемлемой соли.

В другом воплощении млекопитающим является человек. В еще одном воплощении млекопитающим является собака.

В другом воплощении аномальный рост клеток опосредован киназой рецептора фактора роста гепатоцитов (c-Met/HGFR) или киназой анапластической лимфомы (ALK). В другом воплощении аномальный рост клеток опосредован киназой рецептора фактора роста гепатоцитов (c-Met/HGFR). В другом воплощении аномальный рост клеток опосредован киназой анапластической лимфомы (ALK).

В другом воплощении аномальный рост клеток представляет собой онкозаболевание. В другом воплощении онкозаболевание выбирают из числа рака легких, рака костей, рака поджелудочной железы, рака кожи, рака головы или шеи, кожной или внутриглазной меланомы, рака матки, рака яичников, ректального рака, рака анальной области, рака желудка, рака толстой кишки, рака молочной железы, карциномы фаллопиевых труб, карциномы эндометрия, карциномы шейки матки, карциномы влагалища, карциномы вульвы, болезни Ходжкина, рака пищевода, рака тонкой кишки, онкозаболевания эндокринной системы, рака щитовидной железы, рака паращитовидной железы, рака надпочечников, саркомы мягких тканей, рака уретры, рака полового члена, рака предстательной железы, хронического или острого лейкоза, лимфоцитарных лимфом, рака мочевого пузыря, рака почек или мочеточников, почечно-клеточного рака, карциномы почечных лоханок, неоплазм центральной нервной системы (ЦНС), первичной лимфомы ЦНС, опухолей позвоночника, глиомы мозгового ствола, аденомы гипофиза и их сочетаний.

В еще одном воплощении онкозаболевание выбирают из группы, состоящей из немелкоклеточного рака легких (NSCLC), плоскоклеточного рака, гормонорезистентного рака предстательной железы, папиллярного почечно-клеточного рака, колоректальной аденокарциномы, нейробластом, анапластической крупноклеточной лимфомы (ALCL) и рака желудка.

В еще одном воплощении соединение или его фармацевтически приемлемую соль вводят в виде фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы 1 и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель.

В еще одном воплощении настоящее изобретение относится к способу ингибирования активности киназы c-Met/HGFR в клетке путем введения соединения формулы 1

или его фармацевтически приемлемой соли.

В еще одном воплощении клетку выбирают из группы, состоящей из клеток карциномы легких человека А549, карциномы желудка человека GTL-16, карциномы толстой кишки человека НТ29, карциномы толстой кишки человека Colo205, карциномы почки человека А498, карциномы почки человека 786-О, карциномы молочной железы человека МВА-MD-231, эпителиальных клеток Madlin-Darby почки собаки (MDCK), клеток MDCK, сконструированных для экспрессии Р-гликопротеина (MDCK-MDR1), эпителиальных клеток почки мыши mlMCD3, HUVEC (эпителиальные клетки пупочной вены человека), карциномы почек Caki-1 и клеток NIH-3T3, сконструированных для экспрессии человеческой c-Met/HGFR дикого типа и мутантных c-Met/HGFR, включая HGFR-V1092I, HGFR-H1094R, HGFR-Y1230C и HGFR-М1250Т.

Краткое описание чертежей

Фигура 1. АТФ-конкурентное ингибирование активности рекомбинантной киназы c-Met/HGFR человека соединением 1.

Фигура 2. Бестимусным мышам с полученными опухолями GTL-16 в течение 11 дней вводили перорально соединение 1 в указанной дозе или один носитель. Фигура 2А: исследование ингибирования фосфорилирования c-Met/HGFR в GTL-16. Фигура 2В: исследование ингибирования роста опухоли GTL-16.

Фигура 3. Бестимусным мышам с полученными опухолями U87MG (150 мм³) в течение 9 дней вводили перорально соединение 1 в указанной дозе или один носитель. Фигура 3А: исследование ингибирования роста опухоли. Фигура 3В: исследование ингибирования фосфорилирования c-Met/HGFR.

Фигура 4. Бестимусным мышам с установленными трансплантатами опухоли GTL-16 ежедневно перорально вводили соединение 1. Фигура 4А: регрессия больших установленных трансплантатов опухоли GTL-16 у бестимусных мышей. Фигура 4В: масса тела мышей после ежедневного перорального введения соединения 1.

Фигура 5. Ежедневное пероральное введение соединения 1 бестимусным мышам с установленными трансплантатами опухоли NCI-H441 или РС-3. Фигура 5А: регрессия опухоли NCI-H441 у бестимусных мышей. Фигура 5В: регрессия опухоли у бестимусных мышей с установленными трансплантатами опухоли РС-3.

Фигура 6. Противоопухолевая эффективность соединения 1 на модели NPM-ALK-зависимой лимфомы (модель Karpas 299 ALCL). Фигура 6А: исследование ингибирования роста опухоли. Фигура 6В: исследование ингибирования фосфорилирования NPM-ALK.

Подробное описание изобретения

Если не указано иное, все упоминания соединений по изобретению включают их соли, сольваты, гидраты и комплексы и сольваты, гидраты и комплексы их солей, включая их полиморфы, стереоизомеры и варианты, меченные изотопами.

Определения

Используемый в данном описании, если не указано иное, термин “аномальный рост клеток” относится к росту клеток, который не зависит от нормальных регулирующих механизмов (например, утрата контактного ингибирования).

Используемый в данном описании, если не указано иное, термин “лечение” обозначает реверсию, облегчение, ингибирование развития или предупреждение расстройства или состояния, для которого применяется указанный термин, или одного или нескольких симптомов такого расстройства или состояния. Термин “лечение”, используемый в данном описании, если не указано иное, относится к действию лечения как “лечения”, имеющего вышеуказанное определение.

Используемый в данном описании термин “фармацевтически приемлемые соли” включает соли присоединения кислот и оснований (включая дисоли).

Подходящие соли присоединения кислот образуются с кислотами, которые образуют нетоксичные соли. Примеры включают соли ацетаты, аспартаты, бензоаты, безилаты, бикарбонаты/карбонаты, бисульфаты/сульфаты, бораты, камзилаты, цитраты, эдизилаты, формиаты, фумараты, глюцептаты, глюконаты, глюкуронаты, гексафторфосфаты, гибензаты, гидрохлориды/хлориды, гидробромиды/бромиды, гидроиодид/иодид, изэтионаты, лактаты, малаты, малеаты, малонаты, мезилаты, метилсульфат, нафтилаты, 2-напсилаты, никотинаты, нитраты, оротаты, оксалаты, палмитаты, памоаты, фосфаты/гидрофосфаты/дигидрофосфаты, сахараты, стеараты, сукцинаты, тартраты, тозилаты и трифторацетаты.

Подходящие соли оснований образуются с основаниями, которые образуют нетоксичные соли. Примеры включают соли алюминия, аргинина, бензатина, кальция, холина, диэтиламина, диоламина, глицина, лизина, магния, меглумина, оламина, калия, натрия, трометамина и цинка.

Обзор подходящих фармацевтически приемлемых солей см. в работе “Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use”, Stahl and Wermuth (Wiley-VCH, Weinheim, Germany, 2002), включенной в данное описание в качестве ссылки.

Фармацевтически приемлемые соли соединений по изобретению можно легко получить, смешивая вместе растворы соединения и нужной кислоты или основания в соответствующем случае. Соль можно высадить из раствора, и ее можно собрать фильтрацией или можно извлечь выпариванием растворителя. Степень ионизации в соли можно изменять от полной ионизации до почти отсутствия ионизации.

Соединения по изобретению могут существовать как в сольватированной, так и в несольватированной форме. Термин “сольват” используется в данном описании для описания молекулярного комплекса, содержащего соединение по изобретению и одну или несколько молекул фармацевтически приемлемого растворителя, например этанола. Термин “гидрат” используют тогда, когда растворителем является вода. Фармацевтически приемлемые сольваты по изобретению включают гидраты и сольваты, в которых в растворителе кристаллизации может быть заменен изотоп, как, например, в D₂O, d₆-ацетоне, d₆-ДМСО.

Изобретение также включает соединения, меченные изотопами, которые идентичны соединению 1, за исключением того, что один или несколько атомов заменены атомом с атомной массой или массовым числом, отличающимися от атомной массы или массового числа, обычно встречающихся в природе. Примеры изотопов, которые можно вводить в соединения по изобретению, включают изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, фосфора, серы, фтора и хлора, такие как ²Н, ³Н, ¹³С, ¹⁴С, ¹⁵N, ¹⁸O, ¹⁷O, ³¹P, ³²P, ³⁵S, ¹⁸F и ³⁶Cl, соответственно. Соединения по настоящему изобретению и фармацевтически приемлемые соли указанных соединений, которые содержат вышеуказанные изотопы и/или другие изотопы других атомов, входят в объем данного изобретения. Некоторые меченные изотопами соединения по настоящему изобретению, например, соединения, в которые введены радиоактивные изотопы, такие как ³Н и ¹⁴С, применимы в анализах распределения лекарственных средств и/или субстрата в тканях. Тритиевый, т.е., ³Н, изотоп и изотоп углерод-14, т.е., ¹⁴С, особенно предпочтительны ввиду легкости их получения и обнаружения. Далее, замещение более тяжелыми изотопами, такими как дейтерий, т.е., ²Н, может дать некоторое лечебное преимущество, следующее из большей устойчивости при метаболизме, например, повышенный период полувыведения in vivo или уменьшенные требования по дозировке, и, следовательно, может быть предпочтительным при некоторых обстоятельствах. Меченное изотопами соединение 1 по изобретению можно, как правило, получить, осуществляя процедуры, описанные для немеченного соединения, заменяя легкодоступным меченным изотопом реагентом реагент, не меченный изотопом.

В объем изобретения также входят комплексы, такие как клатраты, комплексы включения лекарственное средство-носитель, в которых, в отличие от вышеуказанных сольватов, лекарственное средство и носитель присутствуют в стехиометрических или нестехиометрических количествах. Также входят комплексы лекарственного средства, содержащие два или большее число органических и/или неорганических компонентов, которые могут присутствовать в стехиометрических или нестехиометрических количествах. Полученные комплексы могут быть ионизированы, частично ионизированы или неионизированы. Обзор по таким комплексам см. в работе Haleblian, J. Pharm. Sci., 64 (8), 1269-1288 (August 1975), включенной в данное описание в качестве ссылки.

Пероральное введение

Соединения по изобретению можно вводить перорально. Пероральное введение может включать проглатывание, так что соединение попадает в желудочно-кишечный тракт, или можно использовать трансбуккальное или сублингвальное введение, при которых соединение поступает в кровоток непосредственно через рот.

Препараты, подходящие для перорального введения, включают твердые препараты, такие как таблетки, капсулы, содержащие частички вещества, жидкости или порошки, лепешки (включая наполненные жидкостью), жвачки, поли- и наночастицы, гели, твердые растворы, липосомы, пленки (включая мукоадгезивы), овулы (ovules), спреи и жидкие препараты.

Жидкие препараты включают суспензии, растворы, сиропы и эликсиры. Такие препараты могут быть использованы как наполнители в мягких или твердых капсулах и типично включают фармацевтически приемлемый носитель, например воду, этанол, полиэтиленгликоль, пропиленгликоль, метилцеллюлозу или подходящее масло, и один или несколько эмульгаторов и/или суспендирующих веществ. Жидкие препараты также можно получить восстановлением твердого вещество, например, из саше.

Соединения по изобретению также можно использовать в быстрорастворяющихся, быстрорассыпающихся лекарственных формах, таких, какие описаны в работе Liang and Chen, Expert Opinion in Therapeutic Patents, 11 (6), 981-986 (2001), включенной в данное описание в качестве ссылки.

В случае таблеточных лекарственных форм, в зависимости от дозы, лекарственное средство может составлять от 1 до 80 мас.% лекарственной формы, типичнее, от 5 до 60 мас.% лекарственной формы. Кроме лекарственного средства, таблетки обычно содержат вещество, способствующее рассыпанию. Примеры веществ, способствующих рассыпанию, включают натрийкрахмалгликолят, натрийкарбоксиметилцеллюлозу, кальцийкарбоксиметилцеллюлозу, натрийкроскармелозу, кросповидон, поливинилпирролидон, метилцеллюлозу, микрокристаллическую целлюлозу, алкилгидроксипропилцеллюлозу с низкой степенью замещения, предварительно набухший крахмал и альгинат натрия. Как правило, вещество, способствующее рассыпанию, будет составлять от 1 до 25 мас.%, предпочтительно, от 5 до 20 мас.%, лекарственной формы.

Как правило, используют связующие вещества для придания таблеточному препарату когезивных свойств. Подходящие связующие вещества включают микрокристаллическую целлюлозу, желатин, сахара, полиэтиленгликоль, природные и синтетические смолы, поливинилпирролидон, предварительно набухший крахмал, гидроксипропилцеллюлозу и гидроксипропилметилцеллюлозу. Таблетки также могут содержать разбавители, такие как лактоза (моногидрат, высушенный распылением моногидрат, безводная и т.п.), маннит, ксилит, декстрозу, сахарозу, сорбит, микрокристаллическую целлюлозу, крахмал и дигидрат двухосновного фосфата кальция.

Таблетки также могут включать, необязательно, поверхностно-активные вещества, такие как лаурилсульфат натрия и полисорбат 80, и глианды, такие как диоксид кремния и тальк. Когда поверхностно-активные вещества присутствуют, они типично содержатся в таблетке в количествах от 0,2 до 5 мас.%, а глианды типично составляют от 0,2 до 1 мас.% таблетки.

Таблетки также, как правило, содержат смазывающие вещества, такие как стеарат магния, стеарат кальция, стеарат цинка, стеарилфумарат натрия и смеси стеарата магния с лаурилсульфатом натрия. Смазывающие вещества обычно присутствуют в количествах от 0,25 до 10 мас.%, предпочтительно, от 0,5 до 3 мас.%, от массы таблетки.

Другие обычные ингредиенты включают антиоксиданты, красители, корригенты, консерванты и вещества, маскирующие вкус.

Характерно таблетки содержат до примерно 80 мас.% лекарственного средства, от примерно 10 до примерно 90 мас.% связующего вещества, от примерно 0 до примерно 85 мас.% разбавителя, от примерно 2 до примерно 10 мас.% вещества, способствующего рассыпанию, и от примерно 0,25 до примерно 10 мас.% смазывающего вещества.

Смеси для таблеток можно прессовать непосредственно или с помощью прикатчика для формирования таблеток. С другой стороны, перед таблетированием смеси для таблеток или их части можно гранулировать в мокром, сухом или расплавленном состоянии, подвергать застыванию расплава или экструдировать. Конечный препарат может включать один или несколько слоев и может иметь или не иметь покрытие или может быть инкапсулированным.

Состав таблеток подробно обсуждается в работе “Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets, Vol.1”. H. Lieberman and L. Lachman, Marcel Dekker, N.Y., N.Y., 1980 (IBSN 0-8247-6918-X), включенной в данное описание в качестве ссылки.

Твердые препараты для перорального введения могут быть получены для немедленного и/или модифицированного высвобождения. Препараты с модифицированным высвобождением включают препараты для отсроченного, пролонгированного, импульсного, регулируемого, направленного и программированного высвобождения.

Подходящие препараты с модифицированным высвобождением описаны в патенте США № 6106864. Подробности других подходящих технологий для высвобождения лекарственного средства, таких как высокоэнергетические дисперсии и осмотические частицы или частицы с покрытием, можно найти в Verma et al., Pharmaceutical Technology On-line, 25(2), 1-14 (2001). Применение жевательной резинки для достижения регулируемого высвобождения описано в WO 00/35298. Указанные работы включены в данное описание в качестве ссылок.

Парентеральное введение

Соединения по изобретению также можно вводить непосредственно в кровоток, в мышцу или во внутренний орган. Подходящие способы парентерального введения включают внутривенное, интраперитонеальное, интратекальное, внутрижелудочковое, интрауретральное, внутристволовое, интракраниальное, внутримышечное и подкожное введение. Подходящие устройства для парентерального введения включают иглы (в том числе, микроиглы), шприцы, безигольные шприцы и средства для осуществления инфузии.

Парентеральные препараты типично представляют собой водные растворы, которые могут содержать эксципиенты, такие как соли, углеводы и буферирующие вещества (предпочтительно, для рН от 3 до 9), но для некоторых применений они могут быть получены в виде стерильных неводных растворов или в сухой форме для использования в сочетании с подходящей средой, такой как стерильная апирогенная вода.

Получение парентеральных препаратов в стерильном состоянии, например, лиофилизацией, можно легко осуществить с использованием стандартных фармацевтических методов, хорошо известных специалистам в данной области техники.

Растворимость соединений по изобретению, используемых при получении парентеральных растворов, можно увеличить, используя подходящие методы получения композиций, такие как включение веществ, усиливающих растворимость.

Препараты для парентерального введения могут быть получены для немедленного и/или модифицированного высвобождения. Препараты с модифицированным высвобождением включают препараты для отсроченного, пролонгированного, импульсного, регулируемого, направленного и программированного высвобождения. Так, соединения по изобретению можно ввести в композицию в виде твердого вещества, полутвердого вещества или тиксотропной жидкости для введения в виде имплантированного депо, обеспечивающего модифицированное высвобождение активного соединения. Примеры таких препаратов включают стенты с покрытием из лекарственного средства и микросферы из PGLA.

Местное введение

Соединения по изобретению также можно вводить местно в кожу или слизистую оболочку, т.е., дермально или трансдермально. Типичные препараты для такой цели включают гели, гидрогели, лосьоны, растворы, кремы, мази, присыпки, перевязочные материалы, пенки, пленки, кожные пэтчи, пластины, имплантаты, тампоны, волокна, бандажи и микроэмульсии. Можно использовать липосомы. Типичные носители включают спирт, воду, минеральное масло, вазелиновое масло, глицерин, полиэтиленгликоль и пропиленгликоль. Можно включать усилители пенетрации, см., например, Finnin and Morgan, J. Pharm. Soc., 88 (10), 955-958 (October 1999). Другие способы местного введения включают доставку электропорацией, ионофорезом, фонофорезом, сонофорезом и инъекцию микроиглой или безигольным способом (например, Powderject™, Bioject™, и т.д.). Указанные работы включены в данное описание в качестве ссылок.

Препараты для местного введения могут быть получены для немедленного и/или модифицированного высвобождения. Препараты с модифицированным высвобождением включают препараты для отсроченного, пролонгированного, импульсного, регулируемого, направленного и программированного высвобождения.

Введение ингаляцией/интраназальным способом

Соединения по изобретению также можно вводить интраназально или ингаляцией, типично, в форме сухого порошка (или одного или в виде смеси, например сухой смеси с лактозой, или в виде смешанных частиц компонентов, например, смешанных с фосфолипидами, такими как фосфатидилхолин), из порошкового ингалятора, или в виде аэрозольного спрея из емкости под давлением, насоса, распылителя, пульверизатора (предпочтительно, пульверизатора с использованием электрогидродинамического устройства для получения тонкого аэрозоля) или небулайзера без пропеллента или с применением подходящего пропеллента, такого как 1,1,1,2-тетрафторэтан или 1,1,1,2,3,3,3-гептафторпропан. Для интраназального применения порошок может включать биоадгезивное средство, например хитозан или циклодекстрин.

Емкость под давлением, насос, распылитель, пульверизатор или небулайзер содержит раствор или суспензию соединения(й) по изобретению с включением, например, этанола, водного этанола или подходящего другого вещества для диспергирования, солюбилизации или длительного высвобождения активного средства, пропеллент(ы) в качестве растворителя и, необязательно, поверхностно-активное вещество, такое как триолеат сорбитана, олеиновая кислота или олигомолочная кислота.

Перед применением в сухом порошке или суспензии лекарственное средство измельчают до частиц размера, подходящего для доставки ингаляцией (типично менее 5 микрон). Этого можно достичь любым подходящим способом тонкого измельчения, таким как размол на спиральной струйной мельнице, струйной мельнице в псевдоожиженным слоем, обработка supercritical fluid с образованием наночастиц, гомогенизация под высоким давлением или распылительная сушка.

Капсулы (изготовленные, например, из желатина или НРМС), блистеры и картриджи для применения в ингаляторе или инсуффляторе могут содержать порошковую смесь соединения по изобретению, подходящей основы, такой как лактоза или крахмал, и модификатора свойств, такого как 1-лейцин, маннит или стеарат магния. Лактоза может быть безводной или в форме моногидрата, предпочтительно последнее. Другие подходящие эксципиенты включают декстран, глюкозу, мальтозу, сорбит, ксилит, фруктозу, сахарозу и трегалозу.

Подходящий раствор для применения в пульверизаторе с использованием электродинамического устройства для получения тонкого аэрозоля, может содержать от 1 до 20 мкг соединения по изобретению на одно действие, и объем для действия может изменяться от 1 до 100 мкл. Типичный препарат включает соединение по изобретению, пропиленгликоль, стерильную воду, этанол и хлорид натрия. Другие растворители, которые можно использовать вместо пропиленгликоля, включают глицерин и полиэтиленгликоль.

В такие композиции по изобретению, предназначенные для введения ингаляцией/интраназальным способом, можно добавлять подходящие корригенты, такие как ментол и левоментол, или подслащивающие вещества, такие как сахарин или натрийсахарин.

Препараты для введения ингаляцией/интраназальным способом могут быть получены для немедленного и/или модифицированного высвобождения с использованием, например, сополимера DL-молочной и гликолевой кислоты (PGLA). Препараты с модифицированным высвобождением включают препараты для отсроченного, пролонгированного, импульсного, регулируемого, направленного и программированного высвобождения.

В случае ингаляторов для сухих порошков и аэрозолей единица лекарственной формы определяется клапаном, который доставляет отмеренное количество. Единицы, согласно изобретению, типично устанавливают для введения отмеренной дозы или “пуффа”, содержащих нужное количество соединения по изобретению. Общую ежесуточную дозу можно вводить в виде одной дозы или, что более обычно, в виде разделенных доз на протяжении суток.

Ректальное/Интравагинальное введение

Соединения по изобретению можно вводить ректально или вагинально, например, в форме суппозитория, пессария или клизмы. Масло какао является традиционной основой суппозиториев, но в соответствующих случаях можно использовать различные другие средства.

Препараты для ректального/вагинального введения могут быть получены для немедленного и/или модифицированного высвобождения. Препараты с модифицированным высвобождением включают препараты для отсроченного, пролонгированного, импульсного, регулируемого, направленного и программированного высвобождения.

Окулярное введение

Соединения по изобретению также можно вводить непосредственно в глаз или ухо, типично, в форме капель тонкой суспензии или раствора в изотоничном с отрегулированным рН стерильном физиологическом растворе. Другие препараты, подходящие для введения в глаза и введения в уши, включают мази, биоразлагаемые имплантаты (например, рассасывающиеся тампоны, коллаген) и неразлагаемые биологически имплантаты (например, силиконовые), пластины, линзы и системы из частиц или везикул, таких как ниосомы или липосомы. Можно включать полимер, такой как сшитая полиакриловая кислота, поливиниловый спирт, гиалуроновая кислота, целлюлоза, например гидроксипропилметилцеллюлоза, гидроксиэтилцеллюлоза или метилцеллюлоза, или гетеросахарид, например gelan камедь, вместе с консервантом, таким как хлорид бензалкония. Такие препараты также можно доставлять ионофорезом.

Препараты для введения в глаза/уши могут быть получены для немедленного и/или модифицированного высвобождения. Препараты с модифицированным высвобождением включают препараты для отсроченного, пролонгированного, импульсного, регулируемого, направленного и программированного высвобождения.

Другие технологии

Соединения по изобретению можно комбинировать с растворимыми макромолекулярными материалами, такими как циклодекстрин и их подходящие производные, или полимерами, содержащими этиленгликолевые звенья, для того, чтобы улучшить их растворимость, скорость растворения, улучшить вкус, биодоступность и/или устойчивость для применения в любом из вышеперечисленных способов введения.

Например, обнаружено, что комплексы лекарственных средств с циклодекстрином, как правило, применимы для большинства лекарственных форм и способов введения. Можно использовать как комплексы включения, так и невключения. Как альтернативу непосредственному образованию комплекса с лекарственным средством циклодекстрин можно использовать как вспомогательную добавку, т.е. как носитель, разбавитель или солюбилизатор. Наиболее часто для таких целей используют альфа-, бета- и гамма-циклодекстрины, примеры которых можно найти в публикациях РСТ №№ WO 91/11172, WO 94/02518 и WO 98/55148, включенных в данное описание в качестве ссылок.

Дозировка

Количество вводимого активного соединения будет зависеть от субъекта, которого лечат, тяжести расстройства или состояния, скорости введения, распределения соединения и предписания лечащего врача. Однако эффективная дозировка типично находится в интервале от примерно 0,001 до примерно 100 мг на кг массы тела в сутки, предпочтительно, от примерно 0,01 до примерно 35 мг/кг/сутки, в одной или разделенных дозах. Для 70-кг человека такое количество может составлять от примерно 0,07 до примерно 7000 мг/сутки, предпочтительно, от примерно 0,7 до примерно 2500 мг/сутки. В некоторых случаях более чем адекватными могут быть уровни дозировки меньше нижнего предела вышеуказанного интервала, в то время как в других случаях можно использовать еще большие дозы без появления какого-либо вредного побочного действия, и такие более крупные дозы типично делят на несколько более мелких доз для введения на протяжении суток.

Наборы из частей

Так как может быть желательно введение сочетания активных соединений, например, в целях лечения определенного заболевания или состояния, в объеме настоящего изобретения две или большее число фармацевтических композиций, из которых, по меньшей мере, одна содержит соединение по изобретению, можно удобно объединить в форме набора, подходящего для совместного введения композиций. Такой набор по изобретению включает две или большее число отдельных фармацевтических композиций, из которых, по меньшей мере, одна содержит соединение по изобретению, и средства для отдельного содержания указанных композиций, такие как контейнер, пузырек с делениями или пакет из фольги с делениями. Примером такого набора является блистерная упаковка, используемая для упаковки таблеток, капсул и т.п.

Набор по изобретению особенно подходит для введения различных лекарственных форм, например пероральной и парентеральной, для введения отдельных композиций с различными интервалами между дозировками или для титрования отдельных композиций против друг друга. Для удобства набор типично включает указания по введению и может снабжаться памяткой.

Примеры

Анализы in vitro

Материалы и методы

Методы in vitro

Методы биохимического анализа киназ

Биохимические показатели K_i соединения 1 для ингибирования киназы c-Met/HGFR определяют с использованием общей процедуры контроля за окислением NADH, который соединяется с превращением в АТФ, следующим образом. Реагенты для анализа соединения и киназу вводят в лунки для испытаний и инкубируют в течение 10 минут при 37°С. Анализ инициируют, добавляя фермент c-Met/HGFR. Ингибиторы фермента уменьшают измеряемую активность фермента. В непрерывном анализе в сочетании со спектрофотометрией определяют зависящее от времени продуцирование АДФ киназой, анализируя скорость расходования NADH путем измерения сниже