Соединения и композиции в качестве ингибиторов протеинкиназ

Соединения и композиции в качестве ингибиторов протеинкиназ

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Перекрестные ссылки на родственные заявки

Данная заявка испрашивает более ранний приоритет, основанный на предварительной заявке США сер. номер 60/681853, зарегистрированной 16 мая 2005 г. Полное описание этой заявки включено в настоящее описание в качестве ссылки в полном объеме и с указанием всей области применения.

Предпосылки создания изобретения

Область изобретения

В изобретении предлагаются новый класс соединений, фармацевтические композиции, включающие такие соединения, и способы применения таких соединений для лечения или профилактики заболеваний или нарушений, ассоциированных с аномальной или разрегулированной активностью киназы, прежде всего заболеваний или нарушений, которые включают аномальную активацию киназ CDK, Aurora, Jak2, Rock, САМКII, FLT3, Tie2, TrkB, FGFR3 и KDR.

Предпосылки создания изобретения

Протеинкиназы представляют собой многочисленное семейство белков, которые играют центральную роль в регуляции широкого круга клеточных процессов и в осуществлении контроля клеточных функций. Перечень таких киназ включает, без ограничения перечисленным, рецепторные тирозинкиназы, такие как FLT3, Tie2, TrkB, KDR и рецептор фактора роста фибробластов FGFR3, и серин/треонинкиназы, такие как CDK, Aurora, Jak2, Rock, САМКII. Аномальная активность киназ наблюдается при многих патологических состояниях, включая доброкачественные и злокачественные пролиферативные заболевания, а также заболевания, обусловленные аномальной активацией иммунной и нервной систем.

Новые соединения по настоящему изобретению ингибируют активность одной или более протеинкиназ и, следовательно, их можно использовать для лечения заболеваний, ассоциированных с киназами.

Краткое описание сущности изобретения

В одном объекте настоящего изобретения предлагаются соединения формулы Ia, Ib и Iс:

где n равно 0, 1 и 2,

R₁ выбирают из группы, включающей галоген, C₁-С₆алкил, C₁-С₆алкокси, галогензамещенный C₁-С₆алкил и галогензамещенный C₁-С₆алкокси,

R₂ выбирают из группы, включающей С₆-С₁₀арил(С₀-С₄)алкил и С₅-С₁₀гетероарил(С₀-С₄)алкил, причем указанный арил или гетероарил в составе R₂ необязательно замещен 1-3 радикалами, выбранными из группы, включающей галоген, C₁-С₆алкил, C₁-С₆алкокси, галогензамещенный C₁-С₆алкил, галогензамещенный C₁-С₆алкокси, -S(O)_0-2R₅, -СООR₅, -C(O)NR₅R₆ и -NR₅C(O)R₆, причем R₅ выбирают из водорода и C₁-С₆алкила, а R₆ выбирают из С₆-С₁₀арила и С₅-С₁₀гетероарила, причем указанный арил или гетероарил в составе R₆ необязательно замещен 1-3 радикалами, независимо выбранными из группы, включающей галоген, C₁-С₆алкил, C₁-С₆алкокси, галогензамещенный C₁-С₆алкил и галогензамещенный C₁-С₆алкокси,

Х выбирают из CR₇ или N, причем R₇ выбирают из водорода и C₁-С₆алкила,

а также N-оксиды, пролекарства, защищенные производные, индивидуальные изомеры и смеси изомеров, а также фармацевтически приемлемые соли и сольваты (например, гидраты) таких соединений.

Во втором объекте настоящего изобретения предлагается фармацевтическая композиция, включающая соединение формулы I или N-оксид, индивидуальные изомеры и смеси изомеров, или их фармацевтически приемлемые соли, в смеси с одним или более пригодных эксципиентов.

В третьем объекте настоящего изобретения предлагается способ лечения заболевания у животного, который заключается в том, что при ингибировании киназной активности, прежде всего активности CDKs, Aurora, Jac2, Rock, САМКII, FLT3, Tie2, TrkB, FGFR3 и/или KDR, наблюдается предотвращение, подавление или снижение интенсивности заболевания и/или симптомов заболеваний, причем способ включает введение животному терапевтически эффективного количества соединения формулы I или N-оксида, индивидуальных изомеров и смеси изомеров, или их фармацевтически приемлемой соли.

В четвертом объекте настоящего изобретения предлагается применение соединения формулы I для получения лекарственного средства, предназначенного для лечения заболевания у животного, причем киназная активность, прежде всего активность CDKs, Aurora, Jac2, Rock, САМКII, FLT3, Tie2, TrkB, FGFR3 и/или KDR, принимает участие в развитии заболевания и/или симптомов заболевания.

В пятом объекте настоящего изобретения предлагается способ получения соединения формулы I и N-оксидов, пролекарств, защищенных производных, индивидуальных изомеров и смеси изомеров, а также фармацевтически приемлемых солей.

Подробное описание осуществления изобретения

Определение терминов

«Алкил» в качестве группы и структурного элемента других групп, например галогензамещенный алкил и алкокси, является линейным или разветвленным. С₁-С₄алкокси включает метокси, этокси и т.п. Галогензамещенный алкил включает трифторметил, пентафторэтил и т.п.

«Арил» означает моноциклический или конденсированный бициклический ароматический цикл, содержащий 6-10 атомов углерода в цикле. Например, арил означает фенил или нафтил, предпочтительно фенил. «Арилен» означает двухвалентный радикал, производное арила.

«Гетероарил» имеет значения, определенные выше для арила, причем один или более атомов углерода в цикле заменены на гетероатомы. Например, С₅-С₈гетероарил включает пиридил, индолил, индазолил, хиноксалинил, хинолинил, бензофуранил, бензопиранил, бензотиопиранил, бензо[1,3]диоксол, имидазолил, бензимидазолил, пиримидинил, фуранил, оксазолил, изоксазолил, триазолил, тетразолил, пиразолил, тиенил и т.п.

«Циклоалкил» означает насыщенный или частично ненасыщенный, моноциклический, конденсированный бициклический или мостиковый полициклический цикл, содержащий указанное количество атомов в цикле. Например, С₅-С₁₀циклоалкил включает циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил и т.п.

«Гетероциклоалкил» означает циклоалкил, как определено в данном контексте, при условии, что один или более указанных атомов углерода в цикле заменены на группу, выбранную из следующих групп: -О-, -N=, -NR-, -C(O)-, -S-, -S(O)- или -S(O)₂-, где R означает водород, С₁-С₄алкил или азотзащитную группу. Например, С₅-С₈гетероциклоалкил, используемый в данном контексте для описания соединений по настоящему изобретению, включает морфолино, пирролидинил, пирролидинил-2-он, пиперазинил, пиперидинил, пиперидинилон, 1,4-диокса-8-азаспиро[4.5]дец-8-ил и т.п.

«Галоген» предпочтительно означает хлор или фтор, но также может означать бром или иод.

«Панель киназ» включает следующие киназы: Ab1 (человека), Ab1 (T315I), JAK2, JAK3, ALK, JNK1α1, ALK4, KDR, Aurora-A, Lck, Blk, MAPK1, Bmx, MAPKAP-K2, BRK, MEK1, CaMKII (крысы), Met, CDKl/циклинВ, p70S6K, CHK2, PAK2, CK1, PDGFRα, CK2, PDK1, c-kit, Pim-2, c-RAF, РКА (человека), CSK, PKBα, cSrc, PKCα, DYRK2, Plk3, EGFR, ROCK-I, Fes, Ron, FGFR3, Ros, Flt3, SAPK2α, Fms, SGK, Fyn, SIK, GSK3β, Syk, IGF-1R, Tie-2, IKKβ, TrKB, IR, WNK3, IRAK4, ZAP-70, ITK, AMPK (крысы), LIMK1, Rsk2, Axl, LKB1, SAPK2β, BrSK2, Lyn (человека), SAPK3, ВТК, МАРКАР-К3, SAPK4, KaMKIV, MARK1, Snk, СDК2/циклинА, MINK, SRPK1, СDК3/циклинЕ, МКК4 (мыши), ТАК1, CDK5/p25, МКR6 (человека), ТВК1, СDR6/циклинD3, MLCK, TrkA, СDК7/циклинН/МАТ1, MRCKβ, TSSK1, CHK1, MSK1, Yes, CK1d, MST2, ZIPK, c-Kit (D816V), MuSK, DAPK2, NEK2, DDR2, NEK6, DMPK, PAK4, DRAK1, PAR-1Bα, EphAl, PDGFRβ, EphA2, Pim-1, EphA5, PKBβ, EphB2, PKCβI, Ephβ4, PKCδ, FGFR1, PKCη, FGFR2, PKCθ, FGFR4, PKD2, Fgr, PKGlβ, Flt1, PRK2, Hck, PYK2, HIPK2, Ret, IKKα, RIPK2, IRR, ROCK-II (человека), JNK2α2, Rse, JNK3, Rsk1 (человека), PI3 Kγ, PI3 Kδ и РI3-Кβ. Соединения по настоящему изобретению анализировали с использованием указанной панели киназ (дикий тип и/или мутантная форма), полученные результаты свидетельствуют о том, что соединения ингибируют активность по крайней мере одной киназы из указанной панели.

"Мутантные формы BCR-Аbl" означают замену одной или многих аминокислот в последовательности киназы дикого типа. Мутации в киназе BCR-ABL часто приводят к повреждению важных контактных участков между белком и ингибитором (например, ингибитором Gleevec, и т.п.), индуцируя переход из неактивного состояния в активное состояние, т.е. переход в конформацию, при которой BCR-ABL и Gleevec неспособны связываться. Анализ клинических случаев свидетельствует о том, что спектр мутаций, ассоциированных с устойчивым фенотипом, со временем медленно, но неуклонно увеличивается. По-видимому, мутации накапливаются в четырех основных фрагментах. Одна группа мутаций (G250E, Q252R, Y253F/H, E255K/V) включает аминокислоты, которые образуют фосфат-связывающую петлю для АТФ (известную также как Р-петля). Вторая группа мутаций (V289A, F311L, T315I, F317L) обнаружена в участке связывания с ингибитором Gleevec и непосредственно взаимодействует с ингибитором за счет водородных связей и Вандер-Ваальсовых сил. Третья группа мутаций (М351Т, E355G) расположена вблизи каталитического домена. Четвертая группа мутаций (H396R/P) локализована в петле активации, конформация которой является молекулярным переключателем, регулирующим активацию/инактивацию киназной активности. Точечные мутации в BCR-ABL, ассоциированные с устойчивостью к ингибитору Gleevec, обнаруженные у пациентов с диагнозом CML и ALL, включают M224V, L248V, G250E, G250R, Q252R, Q252H, Y253H, Y253F, Е255К, E255V, D276G, Т277А, V289A, F311L, T315I, T315N, F317L, М343Т, М315Т, E355G, F359V, F359A, V379I, F382L, L387M, L387F, Н396Р, H396R, А397Р, S417Y, Е459К и F486S (положения аминокислот, указанных однобуквенным кодом, приводятся в соответствии с последовательностью, указанной в базе данных GenBank, номер ААВ60394, соответствующей ABL тип 1a, Martinelli и др., Haematologica/The Hematology Journal, 90-94, (2005, апрель). Если не указано иное, Всr-Abl означает фермент дикого типа и его мутантные формы.

"Лечение" означает способ снижения или ослабления интенсивности заболевания и/или его симптомов.

Подробное описание предпочтительных вариантов осуществления настоящего изобретения

В настоящем изобретении предлагаются соединения, композиции и способы лечения связанных с киназами заболеваний, прежде всего с киназами CDK, Aurora, Jak2, Rock, CAMKII, FLT3, Tie2, TrkB, FGFR3 и KDR.

В одном варианте осуществления изобретения предлагаются соединения формулы Ia, Ib и Iс,

где n равно 0 и 1,

R₁ означает С₁-С₆алкокси, a R₂ выбирают из группы, включающей С₆-С₁₀арил(С₀-С₄)алкил и С₅-С₁₀гетероарил(С₀-С₄)алкил, причем указанный арил или гетероарил в составе R₂ необязательно замещен 1-3 радикалами, выбранными из группы, включающей галоген, С₁-С₆алкил, C₁-С₆алкокси, галогензамещенный C₁-С₆алкил, -S(O)_0-2R₅, -COOR₅ и -NR₅C(O)R₆, причем R₅ выбирают из водорода и C₁-С₆алкила, а R₆ означает С₆-С₁₀арил, необязательно замещенный 1-3 радикалами, независимо выбранными из галогензамещенного C₁-С₆алкила.

В другом варианте осуществления изобретения R₁ означает метокси, R₂ выбирают из фенила, бензила и пиридинила, причем указанный фенил, бензил или пиридинил в составе R₂ необязательно замещен 1-2 радикалами, независимо выбранными из группы, включающей хлор, бром, фтор, метил, трифторметокси, трифторметил, -СОО₂R₅, -S(O)₂R₅ и -NHC(O)R₆, причем R₅ выбирают из метила и этила, a R₆ означает фенил, необязательно замещенный трифторметилом.

Предпочтительные соединения по настоящему изобретению выбирают из группы, включающей (3-хлорфенил)[4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)пиримидин-2-ил]амин, (4-фторфенил)[4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)пиримидин-2-ил]амин, [4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)пиримидин-2-ил](4-трифторметоксифенил)амин, [4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)пиримидин-2-ил](3-трифторметилфенил)амин, (3,4-дифторфенил)[4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)пиримидин-2-ил]амин, [4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)пиримидин-2-ил](4-трифторметилфенил)амин, этиловый эфир 4-[4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)пиримидин-2-иламино]бензойной кислоты, (3-метоксифенил)[4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)пиримидин-2-ил]амин, (3-фторбензил)[4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)пиримидин-2-ил]амин, (3,5-диметоксифенил)[4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)пиримидин-2-ил]амин, (2-метилпиридин-4-ил)[4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)пиримидин-2-ил]амин, (2-хлорпиридин-4-ил)[4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)пиримидин-2-ил]амин, (2-метоксипиридин-4-ил)[4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)пиримидин-2-ил]амин, (4-метансульфонилфенил)[4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)пиримидин-2-ил]амин, пиридин-4-ил[4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)пиримидин-2-ил]амин, (4-метилпиримидин-2-ил)[4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)пиримидин-2-ил]амин, (3-бромфенил)[4-(1-метил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)пиримидин-2-ил]амин, (3-хлорфенил)[4-(1-метил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)пиримидин-2-ил]амин, [4-(1-метил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)пиримидин-2-ил](3-трифторметилфенил)амин, (3-бром-4-метилфенил)[4-(1-метил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)пиримидин-2-ил]амин, 2-{4-[2-(3-бромфениламино)пиримидин-4-ил]пирроло[2,3-b]пиридин-1-ил}этанол, 2-{4-[2-(3-трифторметилфениламино)пиримидин-4-ил]пирроло[2,3-b]пиридин-1-ил}этанол, 2-{4-[2-(3-хлорфениламино)пиримидин-4-ил]пирроло[2,3-b]пиридин-1-ил}этанол, 2-{4-[2-(3-бром-4-метилфениламино)пиримидин-4-ил]пирроло[2,3-b]пиридин-1-ил}этанол, {4-[1-(2-аминоэтил)-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил]пиримидин-2-ил}(3-бромфенил)амин, {4-[1-(2-аминоэтил)-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил]пиримидин-2-ил}(3-бромфенил)метиламин, {4-[1-(2-аминоэтил)-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил]пиримидин-2-ил}(4-трифторметилфенил)амин, N-{4-метил-3-[4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)пиримидин-2-иламино]фенил}-3-трифторметилбензамид, [4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-3-ил)пиримидин-2-ил](4-трифторметилфенил)амин, (3,5-диметоксифенил)[4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-3-ил)пиримидин-2-ил]амин, (3,5-дифторфенил)[4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-3-ил)пиримидин-2-ил]амин, (3-бромфенил)[4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-3-ил)пиримидин-2-ил]амин, (3-метоксифенил)[4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-3-ил)пиримидин-2-ил]амин, (4-хлорфенил)[4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-3-ил)пиримидин-2-ил]амин, этиловый эфир 4-[4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино]бензойной кислоты, N-{4-метил-3-[4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино]фенил}-3-трифторметилбензамид, (3-хлорфенил)[4-(4-метокси-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-3-ил)пиримидин-2-ил]амин, [4-(4-метокси-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-3-ил)пиримидин-2-ил](3-трифторметилфенил)амин, (3-бромфенил)[4-(4-метокси-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-3-ил)пиримидин-2-ил]амин, N-{4-метил-3-[4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)пиримидин-2-иламино]фенил}-3-трифторметилбензамид, N-этил-4-[4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)пиримидин-2-иламино]бензолсульфонамид, N-(2-метоксиэтил)-4-[4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)пиримидин-2-иламино]бензолсульфонамид, N-(3-метоксипропил)-4-[4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)пиримидин-2-иламино]бензолсульфонамид, N-(3-метоксипропил)-4-[4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино]бензолсульфонамид, (3-бромфенил)[4-(2-метил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)пиримидин-2-ил]амин, (3-хлорфенил)[4-(2-метил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)пиримидин-2-ил]амин, [4-(2-метил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)пиримидин-2-ил](3-трифторметилфенил)амин, N-(2-метоксиэтил)-4-[4-(2-метил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)пиримидин-2-иламино]бензолсульфонамид, N-(3-метоксипропил)-4-[4-(2-метил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)пиримидин-2-иламино]бензолсульфонамид, (3-бромфенил)[4-(1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-4-ил)пиримидин-2-ил]амин, (3-хлорфенил)[4-(1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-4-ил)пиримидин-2-ил]амин, [4-(1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-4-ил)пиримидин-2-ил](3-трифторметилфенил)амин, (3-хлорфенил)[4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)пиримидин-2-ил]амин, (3-бромфенил)[4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)пиримидин-2-ил]амин и [4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)пиримидин-2-ил](3-трифторметилфенил)амин.

Другие предпочтительные соединения по настоящему изобретению приведены ниже в разделе «Примеры» и в таблице.

Фармакология и промышленная применимость

Соединения по изобретению модулируют активность киназ и как таковые используются для лечения заболеваний или нарушений, при которых киназы принимают участие в развитии патологии и/или симптоматике заболевания. Примеры киназ, которые ингибируются соединениями и композициями, описанными в данном контексте, и для подавления которых используются методы, описанные в данном контексте, включают, без ограничения перечисленным, CDK, Aurora, Jak2, Rock, CAMKII, FLT3, Tie2, TrkB, FGFR3 и KDR.

Тирозинкиназа Абельсона (т.е. Abl, с-Abl) принимает участие в регуляции клеточного цикла, в клеточном ответе на генотоксический стресс и в передаче информации о клеточном окружении через интегриновый сигнал. Таким образом белок Ab1 выполняет сложную функцию в качестве клеточного модуля, который интегрирует сигналы от различных межклеточных и внутриклеточных источников, что оказывает влияние на принятие решений относительно клеточного цикла и апоптоза. Тирозинкиназа Абельсона включает подтипы, такие как химерный гибридный белок (онкопротеин) BCR-Abl с разрегулированной тирозинкиназной активностью или v-Аbl. BCR-Abl играет решающую роль в патогенезе в 95% случаев хронического миелогенного лейкоза (CML) и в 10% случаев острого лимфолейкоза. STI-571 (Gleevec) является ингибитором онкогенной тирозинкиназы BCR-Abl и используется при лечении хронического миелоидного лейкоза (CML). Однако у некоторых пациентов на стадии бластного криза CML наблюдается устойчивость к STI-571 из-за мутаций в киназе BCR-Abl. К настоящему времени идентифицировано 22 мутации, наиболее частыми из которых являются G250E, E255V, T315I, F317L и М351Т.

Соединения по настоящему изобретению ингибируют киназу abl, прежде всего киназу v-abl. Соединения по настоящему изобретению также ингибируют дикий тип киназы BCR-Abl и мутированные формы киназы BCR-Abl и, следовательно, пригодны для лечения Всr-аbl-позитивного рака и опухолевых заболеваний, таких как лейкоз (прежде всего хронический миелоидный лейкоз и острый лимфолейкоз, при развитии которых прежде всего установлен апоптотический механизм действия), а также оказывают действие на подгруппу лейкозных стволовых клеток и могут использоваться для очистки этих клеток in vitro после их удаления из организма (например, удаления костного мозга) и реплантации популяции клеток, очищенных от раковых клеток (например, реплантации очищенных клеток костного мозга).

Сигнальный путь Ras-Raf-MEK-ERK опосредует клеточный ответ на ростовые сигналы. Ras мутирован в онкогенную форму в ~15% случаев рака человека. Семейство Raf относится к семейству серин/треонинпротеинкиназ и включает три члена семейства A-Raf, В-Раг и c-Raf (или Raf-1). Исследование Raf как мишени лекарственных средств направлено на изучение действия Raf в качестве подавляющего эффектора на Ras. Однако полученные недавно данные свидетельствуют о том, что B-Raf выполняет важную функцию в образовании некоторых опухолей без обязательного участия активированной аллели Ras (Nature, 417, 949-954 (01 июля 2002). Мутации B-Raf прежде всего обнаружены в большинстве злокачественных меланом.

Существующие методы лечения меланомы характеризуются недостаточной эффективностью прежде всего на поздней стадии заболевания. Соединения по настоящему изобретению ингибируют также клеточные процессы с участием киназы b-Raf и представляют собой новый терапевтический подход к лечению рака человека, прежде всего меланомы.

Соединения по настоящему изобретению, кроме того, ингибируют клеточные процессы с участием киназы c-Raf. c-Raf активируется онкогеном ras, который мутирован при многих видах рака человека. Следовательно, ингибирование киназной активности c-Raf представляет собой перспективный способ предотвращения роста опухоли, опосредованного геном ras (Campbell S.L., Oncogene, 17, 1395 (1998)).

PDGF (фактор роста тромбоцитов) представляет собой очень распространенный ростовой фактор, который играет важную роль как в процессе нормального роста, так и в патологической клеточной пролиферации, например, которая наблюдается при онкогенезе и при заболеваниях клеток гладкой мускулатуры кровеносных сосудов, например при атеросклерозе и тромбозе. Соединения по изобретению ингибируют активность рецептора PDGF (PDGFR) и, следовательно, могут использоваться при лечении опухолевых заболеваний, таких как глиома, саркома, рак предстательной железы и рак ободочной кишки, молочной железы и яичника.

Соединения по настоящему изобретению можно использовать не только в качестве подавляющих опухоль агентов, например при мелкоклеточном раке легких, но и в качестве агента для лечения незлокачественных пролиферативных нарушений, таких как атеросклероз, тромбоз, псориаз, склеродерма и фиброз, а также для защиты стволовых клеток, например, для борьбы с гемотоксическим действием химиотерапевтических агентов, таких как 5-фторурацил, и для лечения астмы. Соединения по изобретению прежде всего можно использовать для лечения заболеваний, которые чувствительны к ингибированию рецепторной киназы PDGF.

Соединения по настоящему изобретению оказывают лечебное действие при лечении нарушений, возникающих в результате трансплантации, например аллогенной трансплантации, прежде всего при отторжении тканей, таких как прежде всего облитерирующий бронхиолит (ОВ), т.е. хроническое отторжение аллогенных трансплантатов легкого. В отличие от пациентов, не страдающих от ОВ, у пациентов с диагнозом ОВ часто наблюдается повышенная концентрация PDGF в бронхоальвеолярной промывной жидкости.

Соединения по настоящему изобретению также являются эффективными при заболеваниях, ассоциированных с миграцией и пролиферацией клеток гладкой мускулатуры сосудов (при которых PDGF и PDGF-R часто играют заметную роль), таких как рестеноз и атеросклероз. Такое воздействие и его последующее влияние на пролиферацию и миграцию клеток гладкой мускулатуры сосудов in vitro и in vivo можно оценивать при введении соединений по настоящему изобретению, а также при исследовании воздействия на утолщение внутренней оболочки сосудов после механического повреждения in vivo.

Семейство trk рецепторов нейтрофина (trkA, trkB, trkC) стимулирует выживание, рост и дифференциацию нейронных и ненейронных тканей. Белок TrkB экспрессируется в клетках нейроэндокринного типа в тонкой кишке и ободочной кишке, в α-клетках поджелудочной железы, в моноцитах и макрофагах лимфатических узлов и селезенки и в гранулярных слоях эпидермиса (Shibayama и Koizumi, 1996). Экспрессия белка TrkB ассоциируется с неблагоприятным прогнозом и прогрессированием опухолей Вилмса и нейробластомы. Более того, TkrB экспрессируется в злокачественных клетках предстательной железы, но не обнаруживается в нормальных клетках. Сигнальный путь подавления (экспрессии) рецепторов trk включает каскад активации МАРК с участием Shc, активированного Ras, генов ERK-1 и ERK-2, и пути трансдукции PLC-γ1 (Sugimoto и др., 2001).

Киназа c-Src передает онкогенные сигналы многих рецепторов. Например, сверхэкспрессия EGFR или HER2/neu в опухолях приводит к конститутивной активации c-src, что является характеристикой злокачественных клеток, но не наблюдается в нормальных клетках. С другой стороны, мыши с дефицитом экспрессии c-src представляют собой фенотип «мраморной болезни», что свидетельствует о ключевой роли c-src в функционировании остеокластов и возможном участии в развитии ассоциированных нарушений.

Киназа семейства Tec, Bmx, нерецепторная протеинтирозинкиназа, контролируют пролиферацию эпителиальных раковых клеток молочной железы.

Установлено, что рецептор 3 фактора роста фибробластов обладает отрицательным регуляторным действием на рост костной ткани и ингибирование пролиферации хондроцитов. Летальная дисплазия вызывается различными мутациями в рецепторе 3 фактора роста фибробластов, а одна мутация, TDII FGFR3, обладает конститутивной тирозинкиназной активностью, которая активирует фактор транскрипции Stal1, что приводит к экспрессии ингибитора клеточного цикла, остановке роста и аномальному развитию костной ткани (Su и др., Nature, 386, 288-292 (1997)). Кроме того, FGFR3 часто экспрессируется в опухолях типа множественной миеломы. Ингибиторы активности FGFR3 можно использовать для лечения воспалительных или аутоиммунных заболеваний, опосредованных Т-клетками, включающих, без ограничения перечисленным, ревматоидный артрит (RA), коллагеновый артрит II, рассеянный склероз (МС:), системную красную волчанку (SLE), псориаз, юношеский диабет, болезнь Шенгрена, заболевание щитовидной железы, саркоидоз, аутоиммунный увеит, воспалительное заболевание кишечника (болезнь Крона и язвенный колит), глютеновую болезнь и тяжелую псевдопаралитическую миастению.

Активность сывороточной и глюкокортикоид-регулируемой киназы (SGK) коррелирует с активностями возмущенных ионных каналов, прежде всего активностью натриевых и/или калиевых каналов, и соединения по изобретению можно использовать для лечения гипертензии.

В работах Lin и др., J.Clin. Invest. 100, 8, 2072-2078 (1997) и Р.Lin, PNAS, 95, 8829-8834 (1998) установлено подавление роста опухоли и васкуляризации, а также снижение метастазирования в легких при аденовирусных инфекциях или при инъекциях внеклеточного домена Tie-2 (Tek) в опухоли молочной железы и модели ксенотрансплантата меланомы. Ингибиторы Tie2 можно использовать в случаях, при которых наблюдается аномальная неоваскуляризация (например, при диабетической ретинопатии, хроническом воспалении, псориазе, саркоме Капоши, хронической неоваскуляризации при дегенерации желтого пятна, ревматоидном артрите, инфантильной гемангиоме и раке).

Lck принимает участие в передаче сигнала Т-клетками. У мышей с отсутствием гена Lck наблюдается низкий уровень тимоцитов. Функция Lck в качестве положительного активатора передачи сигнала Т-клетками свидетельствует о том, что ингибиторы Lck можно использовать для лечения аутоиммунного заболевания, такого как ревматоидный артрит.

Киназы JNK и другие МАРК принимают участие в опосредовании клеточного ответа на рак, тромбин-индуцированную агрегацию тромбоцитов, нарушениях типа иммунодефицита, аутоиммунные заболевания, гибель клеток, аллергию, остеопороз и болезнь сердца. Терапевтические мишени, связанные с активацией пути JNK, включают хронический миелогенный лейкоз (CML), ревматоидный артрит, астму, остеоартрит, ишемию, рак и нейродегенеративные заболевания. В связи с активацией JNK, ассоциированной с заболеванием печени или приступами гепатической ишемии, соединения по изобретению можно также использовать для лечения различных нарушений функции печени. Сообщается также об участии JNK в развитии сердечно-сосудистого заболевания, такого как инфаркт миокарда или застойная сердечная недостаточность, а также установлено, что JNK опосредует гипертрофические ответные реакции на различные формы сердечного стресса. Установлено, что каскад JNK принимает участие в активации Т-клеток, включая активацию промотора IL-2. Таким образом, ингибиторы JNK могут оказывать лечебное действие при коррекции патологических ответных иммунных реакций. Установлена также роль активации JNK при развитии различных видов рака, что свидетельствует о возможности эффективного использования ингибиторов JNK при заболевании раком. Например, конститутивно активируемая JNK ассоциируется с онкогенезом, опосредованным HTLV-1 (Oncogene, 13, 135-142 (1996)]. JNK принимает участие в развитии саркомы Капоши (KS). Пролиферативное действие других цитокинов, принимающих участие в пролиферации KS, таких, как эндотелиальный фактор роста сосудов (VEGF), IL-6 и TNFα, также может оказаться опосредованным JNK. Кроме того, регуляция гена c-jun в клетках р210, трансформированных BCR-ABL, соответствует активности JNK, что свидетельствует о возможности применений ингибиторов JNK при лечении хронического миелогенного лейкоза (CML) (Blood 92, 2450-2460 (1998)).

Принято считать, что некоторые аномальные пролиферативные состояния ассоциированы с экспрессией raf и, следовательно, чувствительны к ингибированию экспрессии raf. Аномально высокие уровни экспрессии белка raf также связаны с трансформацией и аномальной пролиферацией клеток. Предполагается также, что указанные аномальные пролиферативные состояния чувствительны к ингибированию экспрессии raf. Например, предполагается, что экспрессия белка c-raf играет роль в аномальной клеточной пролиферации, поскольку сообщается, что 60% всех клеточных линий карциномы легкого обычно экспрессируют высокий уровень мРНК и белка c-raf. Другими примерами аномальных пролиферативных состояний являются гиперпролиферативные нарушения, такие как рак, опухоли, гиперплазия, фиброз легких, ангиогенез, псориаз, атеросклероз и пролиферация клеток гладкой мускулатуры кровеносных сосудов, такие как стеноз или рестеноз после пластической операции на сосудах. Клеточный сигнальный путь, частью которого является raf, также принимает участие в воспалительных нарушениях, характеризующихся пролиферацией Т-клеток (активация и рост Т-клеток), таких, например, как отторжение тканевого трансплантата, эндотоксиновый шок и гломерулярный нефрит.

Стресс-активируемые протеинкиназы (SAPK) представляют собой семейство протеинкиназ, которые принимают участие на предпоследней стадии пути передачи сигнала, при этом происходит активация фактора транскрипции с-jun и экспрессия генов, регулируемых c-jun. Прежде всего c-jun принимает участие в транскрипции генов, которые кодируют белки, связанные с репарацией ДНК, поврежденной вследствие генотоксических эффектов. Следовательно, агенты, которые ингибируют активность SAPK в клетке, предотвращают репарацию ДНК и сенсибилизируют клетку к агентам, которые индуцируют повреждение ДНК или ингибируют синтез ДНК и индуцируют апоптоз клетки, или к агентам, которые ингибируют клеточную пролиферацию.

Митоген-активируемые протеинкиназы (МАРК) являются членами консервативных путей передачи сигнала, которые активируют факторы транскрипции, факторы трансляции и другие молекулы-мишени в ответ на различные внеклеточные сигналы. МАРК активируются митоген-активируемыми протеинкиназами (МКК) за счет двойного фосфорилирования по двум аминокислотам в последовательности Thr-X-Tyr. У высших эукариотов физиологическая роль передачи сигнала МАРК коррелирует с клеточными процессами, такими как пролиферация, онкогенез, развитие и дифференциация. Соответственно, способность регулировать передачу сигнала по указанным путям (прежде всего с участием МКК4 и МКК6) можно использовать при разработке способов лечения и профилактики заболеваний человека, ассоциированных с передачей сигнала МАРК, таких как воспалительные заболевания, аутоиммунные заболевания и рак.

Семейство протенкиназ рибосомального белка S6 человека включает по крайней мере 8 членов (RSK1, RSK2, RSK3, RSK4, MSK1, MSK2, p70S6K и p70S6 Kb). Протенкиназы рибосомального белка S6 выполняют важные плеотропные функции, в том числе играют ключевую роль в регуляции трансляции мРНК при биосинтезе белка (Eur. J. Biochem., 267 (21), 6321-6330 (2000, ноябрь); Exp Cell Res., 253 (1), 100-109 (1999, 25 ноября); Mol Cell Endocrinol., 151 (1-2), 65-77 (1999, 25 мая)). Кроме того, фосфорилирование рибосомального белка S6 киназой p70S6 связано с регуляцией клеточной подвижности (Immunol. Cell Biol., 78 (4), 447-451 (2000, август)) и клеточного роста (Prog. Nucleic Acid Res. Mol. Biol., 65, 101-127 (2000)), и, следовательно, является важным фактором при метастазировании опухоли, иммунном ответе и репарации ткани, а также при других патологических состояниях.

Киназы SAPK (называемые также "jun N-концевые киназы" или "JNK") представляют собой семейство протеинкиназ, которые принимают участие на предпоследней стадии пути передачи сигнала, при этом происходит активация фактора транскрипции c-jun и экспрессия генов, регулируемых c-jun. Прежде всего c-jun принимает участие в транскрипции генов, которые кодируют белки, связанные с репарацией ДНК, поврежденной вследствие генотоксических эффектов. Агенты, которые ингибируют активность SAPK в клетке, предотвращают репарацию ДНК и сенсибилизируют клетку к таким терапевтическим противоопухолевым агентам, которые оказывают действие за счет индуцирования повреждения ДНК.

ВТК играют важную роль в развитии аутоиммунного и/или воспалительного заболевания, такого как системная красная волчанка (SLE), ревматоидный артрит, рассеянный васкулит, идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура (ITP), тяжелая псевдопаралитическая миастения и астма. Благодаря участию ВТК в активации В-клеток, ингибиторы ВТК можно использовать для подавления патогенных состояний, опосредованных В-клетками, таких как продуцирование аутоантител, и при лечении лимфомы и лейкоза В-клеток.

СНК2 является киназой контрольных точек семейства серин/треонинпротеинкиназ и принимает участие в механизме контроля повреждений ДНК, таких как повреждения, вызванные мутагенами окружающей среды и эндогенными видами активного кислорода. В результате ее можно использовать в качестве супрессора опухоли и мишени при онкотерапии.

CSK влияет на метастазирующую активность опухолевых клеток, прежде всего рака ободочной кишки.

Fes является нерецепторной протеинтирозинкиназой, которая принимает участие в ряде путей передачи сигнала с участием цитокинов, а также дифференциации миелоидных клеток. Fes является также ключевым компонентом в механизме дифференциации гранулоцитов.

Рецепторная тирозинкиназа Flt3 принимает участие в развитии лейкоза и миелодиспластического синдрома. Приблизительно 25% клеток лейкоза AML экспрессируют конститутивно активную форму аутофосфорилированной тирозинкиназы (ф)FLТ3 на клеточной поверхности. Активность ф-FLT3 обеспечивает рост и выживание предпочтительно лейкозных клеток. Пациенты с острым лейкозом, у которых лейкозные клетки экспрессируют киназу ф-FLТ3, в основном характеризуются неблагоприятным клиническим прогнозом. Ингибирование киназы ф-FLT3 индуцирует апоптоз (программируемую гибель клеток) лейкозных клеток.

Ингибиторы IKKα и IKKβ (1 и 2) являются лекарственными средствами для лечения заболеваний, включающих ревматоидный артрит, отторжение трансплантата, воспалительное заболевание кишечника, остеоартрит, астму, хроническое обструктивное заболевание легких, атеросклероз, псориаз, рассеянный склероз, инсульт, системную красную волчанку, болезнь Альцгеймера, ишемию головного мозга, травматическое повреждение мозга, болезнь Паркинсона, боковой амиотрофический склероз, субарахноидальное кровоизлияние и другие заболевания или нарушения, ассоциированные с избыточным продуцированием воспалительных медиаторов в головном мозге и центральной нервной системе.

Met ассоциируется с большинством типов основных раков человека и экспрессия этого фермента часто коррелирует с неблагоприятным прогнозом и метастазированием. Ингибиторы Met являются лекарственными средствами для лечения заболеваний, включающих различные виды рака, такие как рак легких, NSCLC (немелкоклеточный рак легких), рак костной ткани, рак поджелудочной железы, рак кожи, рак головы и шеи, кожная и внутриглазная меланома, рак матки, рак яичника, ректальный рак, рак анальной области, рак желудка, рак ободочной кишки, рак молочной железы, гинекологические опухоли (например, саркома матки, карцинома маточных труб, карцинома эндометрия, карцинома шейки матки, карцинома влагалища или карцинома вульвы), болезнь Ходжкина, рак пищевода, рак тонкой кишки, рак эндокринной системы (например, рак щитовидной железы, паратиреоидный рак или рак надпочечников), саркомы мягких тканей, рак мочеиспускательного канала, рак пениса, рак предстательной железы, хронический или острый лейкоз, детские солидные опухоли, лимфоцитарные лимфомы, рак мочевого пузыря, рак почек или мочеточника (например, почечноклеточный рак, карцинома почечного пелвиса), детские злокачественные заболевания, опухоли центральной нервой системы (например, первичная лимфома ЦНС, опухоли позвоночника, глиома мозгового ствола или гипофизарная аденома), рак крови, такой как острый миелоидный лейкоз, хронический миелоидный лейкоз и т.п., язва пищевода Баррета (предраковый синдром), неопластическое заболевание кожи, псориаз, грибовидные микозы и доброкачественная гипертрофия предстательной железы, заболевания, ассоциированные с диабетом, такие как диабетическая ретинопатия, ретинальная ишемия и ретинальная неоваскуляризация, цирроз печени, сердечно-сосудистые заболевания, такие как атеросклероз, иммунологические заболевания, такие как аутоиммунное заболевание и почечное заболевание. Предпочтительно заболевание означает рак, такой как острый миелоидный лейкоз и колоректальный рак.

Nima-ассоциированная киназа 2 (Nek2) является протеинкиназой, регулирующей клеточный цикл, причем фермент локализуется в центросоме и обладает максимальной активностью на стадии митоза. Функциональные исследования свидетельствуют об участии Nek2 в регуляции разделения центросомы и образовании веретена. Повышенное содержание белка Nek2 (в 2-5 раз) наблюдается в клеточных линиях, полученных из некоторых опухолей человека, таких как рак шейки матки, яичника, предстательной железы и прежде всего рак