Производные циклического амина, способы их получения и фармацевтические композиции, их содержащие

Производные циклического амина, способы их получения и фармацевтические композиции, их содержащие

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Настоящее изобретение относится к производным циклического амина, способам их получения, фармацевтическим композициям, содержащим их, и их применению в медицине.

В WO 2004/005256 раскрываются некоторые производные циклических аминов в качестве антагонистов рецепторов тахикининов (особенно рецептора Nk1) и в качестве селективных ингибиторов обратного захвата серотонина (SSRI). Указанные соединения используют для лечения нарушений ЦНС и психотических расстройств, в частности, для лечения или профилактики депрессивных состояний и/или для лечения тревоги (страха).

Однако в вышецитированном документе не имеется ни раскрытия, ни какого-либо упоминания в отношении соединения, заявляемого в настоящем описании.

Таким образом, настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I)

где R представляет радикал, выбранный из

в которых R₇ представляет галоген, циано, С_1-4алкил, С_1-4алкокси, трифторметил или трифторметокси;

p равно целому числу от 0 до 3;

R₁ представляет водород, галоген, циано, С_2-4алкенил, С_1-4алкил, необязательно замещенный галогеном, циано или С_1-4алкокси;

R₂ представляет водород или С_1-4алкил;

R₃ и R₄ независимо представляют водород, С_1-4алкил или R₃ вместе с R₄ образуют С_3-7циклоалкил;

R₅ представляет

фенил, замещенный 1-3 группами, независимо выбранными из трифторметила, С_1-4алкила, циано, С_1-4алкокси, трифторметокси, галогена или (SO)_rC_1-4алкила,

нафтил, замещенный 1-3 группами, независимо выбранными из трифторметила, С_1-4алкила, циано, С_1-4алкокси, трифторметокси, галогена или (SO)_rC_1-4алкила,

9-10-членную конденсированную бициклическую гетероциклическую группу, замещенную 1-3 группами, независимо выбранными из трифторметила, С_1-4алкила, циано, С_1-4алкокси, трифторметокси, галогена или (SO)_rC_1-4алкила, или

R₅ представляет 5- или 6-членную гетероарильную группу, замещенную 1-3 группами, независимо выбранными из трифторметила, С_1-4алкила, циано, С_1-4алкокси, трифторметокси, галогена или (SO)_rC_1-4алкила;

R₆ представляет водород или (CH₂)_qR₈;

R₈ представляет водород, C_3-7циклоалкил, С_1-4алкокси, амин, С_1-4алкиламин, (С_1-4алкил)₂амин, OC(О)NR₉R₁₀ или C(О)NR₉R₁₀;

R₉ и R₁₀ независимо представляют водород, С_1-4алкил или С_3-7циклоалкил;

m равно нулю или 1;

n равно 1 или 2;

q представляет целое число от 1 до 4;

r равно 1 или 2;

при условии, что когда R₅ представляет фенил, замещенный 1-3 группами, независимо выбранными из трифторметила, С_1-4алкила, циано, С_1-4алкокси, трифторметокси, галогена или (SO)_rC_1-4алкила, R не является радикалом i)

или их фармацевтически приемлемым солям или сольватам.

Другой вариант изобретения предлагает соединения формулы (I) или их фармацевтически приемлемые соли и сольваты, где R представляет радикал, выбранный из

в которых R₇ представляет галоген, циано, С_1-4алкил, С_1-4алкокси, трифторметил или трифторметокси;

p означает целое число от 0 до 3;

R₁ представляет водород, галоген, циано, C_1-4алкил, необязательно замещенный галогеном, циано, С_1-4алкокси;

R₂ представляет водород или С_1-4алкил;

R₃ и R₄ независимо представляют водород, С_1-4алкил или R₃ вместе с R₄ образуют С_3-7циклоалкил;

R₅ представляет замещенный фенил, замещенный нафтил, замещенную 9-10-членную конденсированную бициклическую гетероциклическую группу или замещенную 5- или 6-членную гетероарильную группу, и эти указанные группы замещены 1-3 группами, независимо выбранными из трифторметила, С_1-4алкила, циано, С_1-4алкокси, трифторметокси, галогена или (SO)_rC_1-4алкила;

R₆ представляет водород или (CН₂)_qR₈;

R₈ представляет водород, С_3-7циклоалкил, С_1-4алкокси, амин, С_1-4алкиламин, (С_1-4алкил)₂амин, OC(О)NR₉R₁₀ или C(О)NR₉R₁₀;

R₉ и R₁₀ независимо представляют водород, С_1-4алкил или С_3-7циклоалкил;

m представляет нуль или целое число от 1 до 4;

n равно 1 или 2;

q представляет целое число от 1 до 4;

r равно 1 или 2;

при условии, что когда R₅ представляет фенил, замещенный 1-3 группами, выбранными из трифторметила, С_1-4алкила, циано, С_1-4алкокси, трифторметокси, галогена или (SO)_rC_1-4алкила, R не является радикалом i)

Подходящие фармацевтически приемлемые соли соединений общей формулы (I) включают аддитивные соли кислоты, образованные с фармацевтически приемлемыми органическими или неорганическими кислотами, например гидрохлориды, гидробромиды, сульфаты, алкил- или арилсульфонаты (например, метансульфонаты или п-толуолсульфонаты), фосфаты, трифторацетаты, ацетаты, цитраты, сукцинаты, тартраты, лактаты, малаты, фумараты и малеаты.

Сольваты могут, например, быть гидратами.

В дальнейшем ссылки на соединение в соответствии с изобретением включают как соединения формулы (I), так и их фармацевтически приемлемые аддитивные соли кислоты и их фармацевтически приемлемые сольваты.

Для специалистов в данной области очевидно, что соединения формулы (I), когда n равно 1 и R₁ не является водородом или когда n равно 2, содержат, по крайней мере, один асимметричный атом углерода (а именно, атом углерода, показанный * в формуле (I)), и могут быть представлены формулой (1a) и (1b).

Клиновидная связь указывает, что связь расположена над плоскостью бумаги. Пунктирная связь указывает, что связь расположена ниже плоскости бумаги.

По крайней мере, два асимметричных атома углерода присутствуют в соединениях формулы (I), когда R₁ является отличным от водорода (а именно, атом углерода, показанный как * в формуле (I), и атом углерода, с которым связана группа R₁), и соединения могут быть представлены формулой (1а), (1b), (1с) и (1d).

Для соединений по данному изобретению, где m равно 1, конфигурацию асимметричных атомов углерода соединений, показанных в формулах 1а и 1d, в дальнейшем обозначают как син-изомер, и в формулах 1b и 1c как антиизомер.

Для соединений по данному изобретению, где m равно 0, конфигурацию асимметричных атомов углерода соединений, показанных в формулах 1b и 1c, в дальнейшем обозначают как син-изомер, и в формулах 1a и 1d как антиизомер.

Возможны и другие асимметричные атомы углерода, когда R₃ и R₄ не являются одной и той же группой, а именно атом углерода, идентифицированный как ** в формуле (1a)

Таким образом, например, когда R₁ представляет группу, отличную от водорода, и R₃ и R₄ не являются одной и той же группой, по крайней мере, три асимметричных атома углерода присутствуют в соединениях формулы (I) и они могут быть представлены формулой (1e) (1f), (1g), (1h), (1i), (1l), (1m) и (1n).

Необходимо иметь в виду, что все стереоизомерные формы, включая все энантиомеры и диастереоизомеры и их смеси, входят в объем данного изобретения и ссылки на соединения формулы (I) включают все стереоизомерные формы, если не оговорено особо.

Кроме того, соединения формулы (I) могут существовать в одной или нескольких кристаллических формах и кристаллические формы соединений структуры (I) могут существовать в виде полиморфных форм, которые также входят в настоящее изобретение.

Настоящее изобретение также включает меченные изотопом соединения, которые идентичны соединениям, описанным в формулах I и после, за исключением того факта, что один или несколько атомов заменены атомом, имеющим атомную массу или массовое число, отличное от атомной массы или массового числа, обычно встречаемого в природе. Примеры изотопов, которые могут быть включены в соединения по данному изобретению, включают изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, фосфора, фтора, йода и хлора, такие как ³Н, ¹¹C, ¹⁴C, ¹⁸F, ¹²³I и ¹²⁵I.

Соединения по данному изобретению и фармацевтически приемлемые соли указанных соединений, которые содержат вышеупомянутые изотопы и/или другие изотопы других атомов, также входят в объем настоящего изобретения. Меченные изотопом соединения по изобретению, например соединения, в которые включены радиоактивные изотопы, такие как ³Н, ¹⁴C, используют в анализах распределения лекарственного средства и/или субстрата в тканях. Изотопы, тритированный, т.е. ³Н, и углерод-14, т.е. ¹⁴С, особенно предпочтительны из-за их легкости получения и обнаружительной способности. В частности, изотопы ¹¹С и ¹⁸F используют в PET (позитрон-эмиссионная томография), и изотоп ¹²⁵I, в частности, используют в SPECT (однофотонная эмиссионная компьютерная томография), все используют для визуализации (получения изображения) головного мозга. Кроме того, замена более тяжелыми изотопами, такими как дейтерий, т.е. ²Н, может предоставить определенные терапевтические преимущества, вытекающие из более высокой метаболической стабильности, например увеличение in vivo полупериода существования или снижение требований к дозировке и, следовательно, может оказаться предпочтительной в некоторых обстоятельствах. Меченные изотопом соединения формулы I и последующие по данному изобретению можно получить, осуществляя способы, раскрытые на схемах и/или в примерах, представленных ниже, заменяя немеченный изотопом реагент на легко доступный меченный изотопом реагент.

Используемый в описании термин “C_1-4алкил” как группа или часть группы относится к прямой или разветвленной алкильной группе, содержащей от 1 до 4 углеродных атомов; примеры таких групп включают метил, этил, пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, трет-бутил.

Термин “С_2-4алкенил” относится к прямой или разветвленной алкиленовой группе, содержащей от 2 до 4 углеродных атомов; примеры таких групп включают этенил, 1-пропенил, аллил, бутенил и т.п.

Термин “галоген” относится к фтору, хлору, брому или йоду.

Термин “С_3-7циклоалкильная группа” означает неароматическую моноциклическую углеводородную циклическую структуру из 3-7 углеродных атомов, такую как, например, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил или циклогептил.

Термин “С_1-4алкоксигруппа” может представлять алкоксигруппу с прямой или разветвленной цепью, например метокси, этокси, пропокси, проп-2-окси, бутокси, бут-2-окси или метилпроп-2-окси.

Когда R₅ представляет 5- или 6-членную гетероарильную группу согласно данному изобретению, эта группа включает фуранил, тиофенил, пирролил, имидазолил, тиазолил, оксазолил, пиразолил, изоксазолил, изотиазолил, 1,2,3-триазолил, 1,2,3-оксадиазолил, 1,2,3-тиадиазолил, 1,2,4-триазолил, 1,3,4-оксадиазолил, 1,3,4-тиадиазолил, 1,2,5-оксадиазолил, 1,2,5-тиадиазолил, пиридил, пиридазинил, пиримидинил, пиразинил, 1,2,4-оксадиазолил, 1,2,5-триазинил или 1,3,5-триазинил и т.п.

Термин “9-10-членная конденсированная бициклическая гетероциклическая группа” относится к 5,6/6,5- или 6,6- бициклической структуре, содержащей, по крайней мере, один гетероатом, выбранный из кислорода, серы или азота, которая может быть насыщенной, ненасыщенной или ароматической. Термин “9-10-членная конденсированная бициклическая гетероциклическая группа” также относится к фенилу, конденсированному с одной 5- или 6-членной гетероциклической группой. Примеры таких групп включают бензофуранил, бензотиофенил, индолил, бензоксазолил, 3Н-имидазо[4,5-с]пиридинил, дигидрофтазинил, 1Н-имидазо[4,5-с]пиридин-1-ил, имидазо[4,5-b]пиридил, 1,3-бензо[1,3]диоксолил, 2H-хроманил, изохроманил, 5-оксо-2,3-дигидро-5H-[1,3]тиазоло[3,2-a]пиримидил, 1,3-бензотиазолил, 1,4,5,6-тетрагидропиридазиил, 1,2,3,4,7,8-гексагидроптеридинил, 2-тиоксо-2,3,6,9-тетрагидро-1H-пурин-8-ил, 3,7-дигидро-1H-пурин-8-ил, 3,4-дигидропиримидин-1-ил, 2,3-дигидро-1,4-бензодиоксинил, бензо[1,3]диоксолил, 2H-хроменил, хроманил, 3,4-дигидрофталазинил, 2,3-дигидро-1H-индолил, 1,3-дигидро-2H-изоиндол-2-ил, 2,4,7-триоксо-1,2,3,4,7,8-гексагидроптеридинил, тиено[3,2-d]пиримидинил, 4-оксо-4,7-дигидро-3H-пирроло[2,3-d]пиримидинил, 1,3-диметил-6-оксо-2-тиоксо-2,3,6,9-тетрагидро-1H-пуринил, 1,2-дигидроизохинолинил, 2-оксо-1,3-бензоксазолил, 2,3-дигидро-5H-1,3-тиазоло[3,2-a]пиримидинил, 5,6,7,8-тетрагидрохиназолинил, 4-оксохроманил, 1,3-бензотиазолил, бензимидазолил, бензотриазолил, пуринил, фурилпиридил, тиофенилпиримидил, тиофенилпиридил, пирролилпиридил, оксазолилпиридил, тиазолилпиридил, 3,4-дигидропиримидин-1-ил, имидазолилпиридил, хинолиил, изохинолинил, хиназолинил, хиноксалинил, нафтиридинил, пиразолил[3,4]пиридин, 1,2-дигидроизохинолинил, циннолинил, 2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-6-ил, 4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофенил-2-ил, 1,8-нафтиридинил, 1,6-нафтиридинил, 3,4-дигидро-2H-1,4-бензотиазин, 4,8-дигидроксихинолинил, 1-оксо-1,2-дигидроизохинолинил или 4-фенил-[1,2,3]тиадиазолил и т.п.

В соединениях формулы (I), где n равно 1, группа R₁ может быть в положении 2, 3, 5 или 6 пиперидинового кольца, как представлено в формуле (1b). Соединения, в которых R₁ находится в положении 2 или 6, являются предпочтительными.

В соединениях формулы (I), где n равно 2, группа R₁ может быть в положении 2, 3, 4, 6 или 7 кольца, как представлено в формуле (1с).

Для соединений формулы (I) n предпочтительно равно 1.

Для соединений формулы (I) m предпочтительно равно 1.

R является предпочтительно фенилом, в котором R₇ представляет предпочтительно галоген (например, фтор или хлор), циано, трифторметил, С_1-4алкокси (например, метокси) или С_1-4алкил (например, метил) и в пределах этого класса p равно предпочтительно 0 или целому числу от 1 до 2 или R представляет предпочтительно группу, выбранную из

где p равно 0.

R₁ представляет предпочтительно водород, С_2-4алкенил (например, этенил), галоген (например, фтор) или С_1-4алкил (например, метил). Внутри этого класса те соединения, в которых R₁ находится в положении 1 или 2 пиперидинового кольца, являются предпочтительными.

R₂ является предпочтительно водородом или метилом.

R₃ является предпочтительно водородом или метилом.

R₄ является предпочтительно водородом или метилом.

Когда R₅ представляет замещенный фенил, то он предпочтительно замещен одной или 2 группами, выбранными из галогена (например, фтор, бром или хлор), циано, трифторметила или С_1-4алкила (например, метил).

Когда R₅ представляет замещенный нафтил, то это предпочтительно 1-нафтильная группа, замещенная одной или 2 группами, выбранными из галогена (например, фтор, бром или хлор), циано, трифторметила или С_1-4алкила (например, метил).

Когда R₅ представляет замещенную 9-10-членную конденсированную бициклическую гетероциклическую группу, то это предпочтительно бензофуранил (например, бензофуран-7-ил или бензофуран-4-ил), бензотиофенил (например, бензотиофен-4-ил или бензотиофен-7-ил), индолил (индо-4-ил или индол-7-ил) или бензоксазолил, и эти указанные группы замещены одной группой, выбранной из галогена (например, фтор, бром или хлор), циано, трифторметила или С_1-4алкила (например, метил).

Когда R₅ представляет замещенную 5- или 6-членную гетероарильную группу, то это предпочтительно фуранил (например, фуран-2-ил или фуран-3-ил), тиофенил или пирролил, и эти указанные группы замещены одной группой, выбранной из галогена (например, фтор, бром или хлор), циано, трифторметила или С_1-4алкила (например, метил).

R₆ является предпочтительно водородом или С_1-4алкилом (например, метил).

R₅ представляет, более предпочтительно, фенил, замещенный одной или двумя группами, выбранными из фтора, брома, хлора, циано или метила, нафтил, замещенный одной или двумя группами, выбранными из фтора, брома, хлора, циано или метила, бензофуранил, замещенный одной или двумя группами, выбранными из фтора, брома, хлора, циано или метила, или R₅ представляет фуранил, замещенный одной или двумя группами, выбранными из фтора, брома, хлора, циано или метила.

Предпочтительный класс соединений формулы (I) включает соединения, где n и m равны 1.

Другой предпочтительный класс соединений представляет класс, где R₂, R₃ и R₄ представляют независимо водород или метил.

Другим предпочтительным классом соединений является класс, где n равно 1, m равно 1, R₃ и R₄ представляют независимо водород или метил и R₆ представляет водород или С_1-4алкил.

Предпочтительная группа соединений формулы (I) включает соединения, где n равно 1, m равно 1, R₂ представляет водород или метил, R₃ представляет водород, R₄ представляет водород или метил, R₆ представляет водород или метил и R₁ представляет водород, С_2-4алкенил, галоген или С_1-4алкил в положении 1 или 2 пиперидинового кольца.

Другая предпочтительная группа соединений формулы (I) включает соединения, где n и m равно 1, R₂ представляет водород или метил, R₃ представляет водород, R₄ представляют водород или метил, R₅ представляет фенил (замещенный одной или двумя группами, выбранными из фтора, брома, хлора, циано или метила), нафтил (замещенный одной или двумя группами, выбранными из фтора, брома, хлора, циано или метила), бензофуранил (замещенный одной или двумя группами, выбранными из фтора, брома, хлора, циано или метила), или R₅ представляет фуранил (замещенный одной или двумя группами, выбранными из фтора, брома, хлора, циано или метила), или R₅ представляет бензофуранил (замещенный фтором, бромом, хлором, циано или метилом), R₆ представляет водород или метил и R₁ представляет водород, С_2-4алкенил, С_1-4алкил или галоген в положении 1 или 2 пиперидинового кольца.

Другая предпочтительная группа соединений формулы (I) включает соединения, где n и m равно 1, R₂ представляет водород или метил, R₃ представляет водород, R₄ представляют водород или метил, R₅ представляет фенил (замещенный одной или двумя группами, выбранными из фтора, брома, хлора, циано или метила), нафтил (замещенный одной или двумя группами, выбранными из фтора, брома, хлора, циано или метила), бензофуранил (замещенный одной или двумя группами, выбранными из фтора, брома, хлора, циано или метила), или R₅ представляет фуранил (замещенный одной или двумя группами, выбранными из фтора, брома, хлора, циано или метила), или R₅ представляет бензофуранил (замещенный фтором, бромом, хлором, циано или метилом), R₆ представляет водород или метил, R₁ представляет водород, С_2-4алкенил, С_1-4алкил или галоген в положении 1 или 2 пиперидинового кольца и R представляет фенил, в котором R₇ представляет галоген, трифторметил, циано, С_1-4алкокси или С_1-4алкил и p равно 0 или целому числу от 1 до 2 или R представляет группу, выбранную из

где р равно 0.

Другая предпочтительная группа соединений формулы (I) включает соединения, где n и m равны 1, R₂ представляет водород или метил, R₃ представляет водород, R₄ представляет водород или метил, R₅ представляет фенил (замещенный одной или двумя группами, выбранными из фтора, брома, хлора, циано или метила), нафтил (замещенный одной или двумя группами, выбранными из фтора, брома, хлора, циано или метила), бензофуранил (замещенный одной или двумя группами, выбранными из фтора, брома, хлора, циано или метила), или R₅ представляет бензофуранил (замещенный фтором, бромом, хлором, циано или метилом), R₆ представляет водород или метил, R₁ представляет водород, С_2-4алкенил, С_1-4алкил или галоген в положении 1 или 2 пиперидинового кольца и R представляет фенил, в котором R₇ представляет галоген, трифторметил, циано, С_1-4алкокси или С_1-4алкил и р равно 0 или целому числу от 1 до 2, или R представляет группу, выбранную из

где р равно 0.

Следующая предпочтительная группа соединений формулы (I) включает соединения, где n и m равны 1, R₂ представляет водород или метил, R₃ представляет водород, R₄ представляет водород или метил, R₅ представляет фенил, замещенный одной или двумя группами, выбранными из фтора, брома или хлора, циано или метила, 1-нафтил, замещенный одной или двумя группами, выбранными из фтора, брома или хлора, циано или метила, или R₅ представляет бензофуран-7-ил, замещенный фтором, бромом или хлором, циано или метилом, R₆ представляет водород или метил, R₁ представляет водород или этенил, фтор или метил в положении 1 или 2 пиперидинового кольца и R представляет фенил, в котором R₇ представляет фтор, метокси, циано или метил и р равно 0 или целому числу от 1 до 2 или R представляет группу, выбранную из

где р равно 0.

Конкретные предпочтительные соединения согласно данному изобретению представляют

N-[1-(3-хлор-1-нафталинил)этил]-2-[4-(4-фторфенил)-1-метил-4-пиперидинил]-N-метилацетамид (энантиомер 1);

N-[1-(3-хлор-1-нафталинил)этил]-N-метил-2-(1-метил-4-фенил-4-пиперидинил]ацетамид (энантиомер 1);

N-[1-(3-хлор-1-нафталинил)этил]-N-метил-2-(1-метил-4-фенил-4-пиперидинил]ацетамид (энантиомер 2);

2-[4-(1-бензофуран-5-ил)-1-метил-4-пиперидинил]-N-[1-(3-хлор-1-нафталинил)этил]-N-метилацетамид (энантиомер 1);

N-[1-(3-хлор-1-нафталинил)этил]-N-метил-2-{1-метил-4-[4-(метилокси)фенил]-4-пиперидинил}ацетамид (энантиомер 1);

N-[1-(3-хлор-1-нафталинил)этил]-2-[4-(4-фторфенил)-1,2-диметил-4-пиперидинил]-N-метилацетамид (син-изомер 2, цепной энантиомер 1);

N-[1-(3-хлор-1-нафталинил)этил]-2-(1,2-диметил-4-фенил-4-пиперидинил)-N-метилацетамид (син-изомер 2, цепной энантиомер 1);

или их фармацевтически приемлемые соли или сольваты.

Следует иметь в виду, что химические соединения могут быть названы различными способами и в соответствии с различными принятыми условностями наименования.

Соединения по данному изобретению являются антагонистами рецепторов тахикининов, включая вещество Р и другие нейрокинины, как in vitro, так и in vivo, и поэтому имеют применение для лечения состояний, опосредованных тахикининами, включая вещество Р и другие нейрокинины.

Тахикинины представляют семейство пептидов, которые имеют общую последовательность (Phe-X-Gly-Leu-Met-NH₂), на С-конце. Они активно участвуют в физиологии как низших, так и высших жизненных [биологических] форм. У млекопитающих основные тахикинины представляют вещество Р (SP), нейрокинин A (NKA) и нейрокинин B (NKB), которые действуют как нейромедиаторы (нейротрансмиттеры) и нейромодуляторы. Тахикинины млекопитающих могут вносить свой вклад в патофизиологию ряда заболеваний человека.

Было идентифицировано три типа рецепторов тахикининов, а именно NK1(SP-предпочитающие), NK2 (NKA-предпочитающие) и NK3 (NKB-предпочитающие), которые распространены по всей центральной нервной системе (ЦНС) и периферической нервной системе.

В частности, соединения по данному изобретению являются антагонистами рецепторов NK1.

Кроме того, соединения по данному изобретению имеют активность как селективные ингибиторы обратного захвата серотонина (в дальнейшем называемые SSRI) и поэтому являются полезными для лечения состояний, опосредованных селективным ингибированием белка-транспортера обратного захвата серотонина.

Таким образом, соединения по изобретению объединяют в себе двойную активность как антагонисты тахикининов, включая вещество Р и другие нейрокинины, и как SSRI. В частности, соединения по изобретению объединяют в себе двойную активность как антагонисты рецептора NK₁ и как SSRI.

Сродство к связыванию с NK₁-рецепторами было определено in vitro с использованием сцинтилляционного проксимального анализа (SPA), измеряя способность соединений вытеснять [¹²⁵I]Tyr8-вещество Р (SP) c рекомбинантных человеческих рецепторов NK₁, стабильно экспрессируемых в клеточных мембранах яичника китайского хомячка (CHO), полученных, используя модификацию метода, описанного в Beattie D.T. et al. (Br. J. Pharmacol, 116:3149-3157, 1995). Кратко, шарики из полистирола Leadseeker WGA-SPA (Amersham Biosciences) смешивали с клеточными мембранами при соотношении шарик/мембрана 50:1 (мас./мас.) в буфере для анализа (75 мМ Трис рН 7,8, 75 мМ NaCl, 4 мМ MnCl₂, 1 мМ EDTA, 0,05% Chaps, 1 мМ PMSF). Смесь помещали на лед в течение 30 мин, чтобы позволить образоваться комплексу мембрана/шарик, прежде чем добавить BSA (бычий сывороточный альбумин) до конечной концентрации 1%. После дополнительной инкубации на льду в течение 30 мин комплекс шарик/мембрана промывали дважды и суспендировали в буфере для анализа. Затем добавляли [¹²⁵I]Tyr8-вещество Р (2200 Ки/ммоль, PerkinElmer) к комплексу шарик/мембрана при конечной концентрации 0,4 нМ. Затем 30 мкл конечной смеси дозировали в каждую лунку 384-луночного планшета Nalgen NUNC, содержащую 1 мкл соединения, предварительно распределенного в ДМСО. Затем планшеты герметизировали и кратковременно центрифугировали при 1100 об/мин. После инкубации при вибрации при комнатной температуре в течение 3 час планшеты центрифугировали в течение 2 мин при 1100 об/мин и измеряли в преобразователе изображения Viewlux (PerkinElmer) в течение 5 мин с фильтром 618-нм. Ингибирование связывания [¹²⁵I]Tyr8-вещества Р с NK₁-рецепторами измеряли по уменьшению люминесцентного сигнала. Значения IC₅₀ каждого соединения определяли по кривой ингибирования, полученной для 11 точек 3× разбавления. Значения рK_i рассчитывали, используя K_D [¹²⁵I]Tyr8-вещества Р, определенную в отдельном эксперименте.

Для предпочтительных соединений по изобретению также было определено сродство к связыванию с NK₁-рецептором in vitro, используя обычные методы фильтрации, измеряя способность соединений вытеснять [³Н]-вещество P (SP) с рекомбинантных человеческих NK₁-рецепторов, экспрессируемых в клеточных мембранах яичника китайского хомячка (CHO), как описано выше. Кратко, связывание лиганда выполняли в 0,2 мл 50 мМ HEPES, pH 7,4, содержащем 3 мМ MnCl₂, 0,02% БСА (BSA), 0,5 нМ [³H]-вещество P (30-56 Ки/ммоль Amersham), конечная концентрация мембранного белка 30-50 мкг/мл, и испытуемые соединения. Инкубацию проводили при комнатной температуре в течение 40 мин и останавливали фильтрацией. Неспецифическое связывание определяли, используя избыточное количество вещества Р (1 мкМ), и оно составляет около 6-10% от общего связывания.

Кроме того, предпочтительные соединения по данному изобретению были охарактеризованы в функциональном тесте, заключающемся в определении их воздействия на ингибирование увеличения внутриклеточного кальция, индуцируемого SP в человеческих NK₁-CHO клетках, используя метод FLIPR. Кратко, после 15-минутной инкубации с индикатором цитоплазматического кальция Fluo-4 АМ (2 мкМ) клетки промывали и инкубировали в отсутствие или присутствии трех или большего числа различных концентраций антагониста в течение 60 мин при 37°С в сбалансированном солевом растворе Хэнкса с 20 мМ Hepes и затем строили некумулятивные кривые доза-ответ SP (2пM-300нM). Эффективность антагониста (значение рК_В) рассчитывали исходя из Schild's анализа.

Действие соединений по данному изобретению на рецептор NK₁ и/или транспортер серотонина может быть определено, используя обычные животные модели.

Так, способность связываться с NK₁ рецептором и/или транспортером серотонина определяли, используя модель беспокойства на животных - крики детенышей морской свинки при их отделении, как описано Pettijohn, Psychol. Rep., 1979 and Rupniak et al., Neuropharmacology, 2000.

Проявление страх-подавляющей активности при введении соединения по изобретению может быть продемонстрировано в тесте на адаптацию к среде на модели песчанки по способу, описанному Cheeta et al. (Cheeta S. et al., 2001. Brain Research 915: 170-175).

Сродство к связыванию с SERT было определено in vitro по способности соединений вытеснять [³Н]-циталопрам с клеточных мембран hSERT-LLCPK. Для реакции связывания конечную концентрацию 0,25 нМ [³Н]-циталопрама (84 Ки/ммоль, Amersham) инкубировали с 3-5 мкг/мл клеточной мембраны и соединением, подлежащим испытанию, при различных концентрациях (7 концентрационных точек, каждая в двух экземплярах) в 50 мМ Трис HCl, рН 7,7, содержащем 120 мМ NaCl, 5 мМ KCl, 10 мкМ паргилина и 0,1% аскорбиновой кислоты. Реакцию проводили в течение 120 мин при 22°С и обрывали посредством кассетного фильтра (юнифильтра GF/B) (предварительно пропитанного в 0,5% PEI), используя харвестер клеток (Tomtec). К каждому фильтрованному пятну добавляли сцинтилляционную жидкость и определяли радиоактивность, используя сцинтилляционный счетчик (TopCount (Packard)). Неспецифическое связывание определяли, используя пароксетин (10 мкМ), и оно составляет около 2-5% от общего связывания. Эксперименты по конкурентному связыванию проводили, дублируя определение для каждой точки. Для обработки данных по конкурентному связыванию использовали Пакет программ Msat601. Значения IC₅₀ переводили в значения Ki, используя уравнение Cheng-Prusoff и используя K_D [³Н]-циталопрама, определенную в отдельных экспериментах.

Для предпочтительных соединений по данному изобретению была определена in vitro ингибирующая активность соединений в отношении человеческого транспортера серотонина (hSERT), используя свиные LLCPK клетки (ATCC), устойчиво трансфицированные с hSERT (hSERT-LLCPK). Клетки помещали на 96-луночные планшеты (10000 клеток/лунку). Через 24 часа клетки промывали в буфере поглощения (сбалансированный солевой раствор Хэнкса+20 мМ Hepes) и предварительно инкубировали в течение 10 мин при 30°C с 50 мкл буфера, содержащего испытуемые соединения. 50 мкл 50нМ раствора [³H]-серотонина (5-HT) (конечная концентрация: 25 нМ [³H]-5-HT) добавляли и планшеты инкубировали при 30°C в течение 7 мин, во время которых клетки поглощают меченный радиоактивным изотопом 5-HT. Удаление раствора и быстрое промывание клеток холодным буфером обрывало поглощение. Затем измеряли количество радиоактивного 5-НТ, вовлеченного в клетки, добавляя сцинтилляционный коктейль непосредственно на клетки и считывая планшет в Top Count. Полученные данные подвергали цифровой обработке, получая значения pIC₅₀ ингибиторов поглощения.

Соединения по изобретению используют для лечения расстройств ЦНС и психотических расстройств, в частности для лечения или профилактики депрессивных состояний и/или для лечения страха, определенных в, но не ограничиваясь этим, Diagnostic Statistical of Mental Disorder (DSM) IV edition edit by American Psychiatric Association and International Classification Diseases 10th revision (ICD10).

Так, например, депрессивное состояние включает эпизоды подавленного настроения, депрессивные нарушения, биполярные нарушения, другое настроение, психотические расстройства, регулируемые расстройства, предменструальное и расстройство (дисфория), характеризуемое чувством недовольства или внутреннего дискомфорта (PMDD). Так, например, эпизоды подавленного настроения включают основные депрессивные эпизоды и смешанные эпизоды. Депрессивные нарушения включают основное депрессивное расстройство (MDD), однократные или рецидивирующие эпизоды (с или без психотических признаков, кататонических признаков, меланхолических признаков, атипических признаков; депрессии, выражающейся в патологическом страхе, или депрессии послеродового периода), дистимическое расстройство (с ранним или поздним проявлением и с или без атипических признаков) и депрессивное нарушение, которое не определено особо. Биполярные нарушения включают биполярные нарушения I и II типа, циклотимическое расстройство и биполярное нарушение, которое не определено особо. Другое настроение, психотические и регулируемые расстройства включают нейропатическую депрессию; нарушения настроения, обусловленные общим состоянием здоровья, включая, но не ограничиваясь ими, инфаркт миокарда, диабет, выкидыш, аборт, слабоумие типа Альцгеймера (с ранним или поздним проявлением) с симптомом подавленного настроения, сосудистую деменцию с симптомом подавленного настроения; нарушения настроения, индуцированные злоупотреблением веществ (лекарственных средств), включая, но не ограничиваясь ими, депрессию, вызванную спиртом, амфетаминами, кокаином, галлюциногенами; средствами, применяемыми при ингаляции; опиоидами, фенциклидинами, седативными средствами, снотворными средствами, анксиолитиками и другими веществами; шизоаффективное нарушение депрессивного типа; регулируемое расстройство с симптомом подавленного настроения; регулируемое расстройство с симптомами смешанного типа, тревожного состояния и угнетенного настроения.

Термин “тревога (беспокойство)” включает приступы беспричинной тревоги, агорафобию, состояния тревоги, регулируемые расстройства и расстройство, обусловленное страхом предстоящей разлуки; и предменструальное нарушение, характеризуемое чувством недовольства или внутреннего дискомфорта (PMDD). Так, например, состояния тревоги включают паническое расстройство с или без симптомов агорафобии, агорафобию без предшествующих симптомов приступов паники, специфическую фобию, социальную фобию (нарушение, связанное с социальной тревогой), обсессивно-компульсивное нарушение, острые и посттравматические стрессовые расстройства, расстройства генерализованной тревоги; невроз тревоги (тревожное состояние), обусловленный общим состоянием здоровья; тревожное состояние, вызванное злоупотреблением веществ (лекарственных средств), тревожное состояние, которое не определено особо, и расстройства с симптомами смешанного типа, тревожного состояния и подавленного настроения. Регулируемые расстройства включают регулируемое расстройство с симптомом тревожного состояния и регулируемое расстройство с симптомами смешанного типа, тревожного состояния и подавленного настроения. Соединения по изобретению используют в качестве анальгетиков. В частности, они являются полезными для лечения травматической боли, такой как послеоперационная боль; боли, вызванной травматической авульсией, например плечевого сплетения; хронической боли, как, например, артритной боли типа возникающей при остео-, ревматоидном или псориатическом артрите; нейропатической боли, как например, типа невралгии при опоясывающем лишае, невралгии тройничного нерва, сегментарной или межреберной невралгии, фибромиалгии, каузалгии, периферической нейропатии, диабетической нейропатии; нейропатии, индуцированной химиотерапией; нейропатии, обусловленной AIDS, невралгии в области затылка, невралгии при синдроме коленчатого ганглия, глоссофарингеальной невралгии, рефлексе симпатической дистрофии, фантомной боли; различных форм головной боли, таких как мигрень, острая или хроническая головная боль напряжения, боли в области височно-нижнечелюстного сустава, боли в области верхнечелюстной [гайморова] пазухи, гистаминовая головная боль; одонталгии; боли при раке; боли висцерального происхождения; боли в области желудочно-кишечного тракта; боли при ущемлении нерва; боли, вызванной травмой при занятии спортом; дисменореи; менструальной боли; менингита; арахноидита; костно-мышечной боли; поясничная боль, например спинальный стеноз; выпадение диска; ишиалгии; стенокардии; анкилозирующего спондилоартрита; подагры; ожогов; рубцовой боли; боли при зуде и таламической боли, как, например, таламическая боль после инсульта.

Соединения по изобретению являются также полезными для лечения нарушений сна или расстройств сна, включая дисомнию, бессонницу (инсомнию), приступы апноэ во сне, нарколепсию и нарушения циркадного (околосуточного) ритма, или для лечения нарушений сна и/или расстройств сна, связанных с или обусловленных другими нарушениями.

Соединения по изобретению также используют для лечения или профилактики когнитивных расстройств. Когнитивные расстройства включают слабоумие, амнестические