Композиция для лечения, замедления или предотвращения у животного слабоумия, старения мозга, когнитивного нарушения, инсульта или болезни альцгеймера и ее применение (варианты)

Композиция для лечения, замедления или предотвращения у животного слабоумия, старения мозга, когнитивного нарушения, инсульта или болезни альцгеймера и ее применение (варианты)

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение касается пищи млекопитающих и ее влияния на усиление целостности сосудов и защиту клеток от повреждения, связанного с ишемией или ишемическим приступом в мозге. В частности, настоящее изобретение использует комбинации соединений, высвобождающих оксид азота, длинноцепочечных полиненасыщенных жирных кислот и, не обязательно, других компонентов, включая антиоксиданты, противовоспалительные агенты, факторы роста и витамины группы В, которые вводятся как часть регулярной диеты для улучшения целостности сосудов, повышения выживания клеток и, таким образом, уменьшения ишемического повреждения в мозге и/или других органах, например в случае ишемии мозга.

Предшествующий уровень техники, к которому относится изобретение

Различные публикации, включая патенты, опубликованные заявки на изобретения, технические статьи и академические статьи, цитируются всюду в тексте описания. Каждая из этих процитированных публикаций включается в настоящую заявку во всей своей полноте путем отсылки.

Гипоксическое повреждение головного мозга происходит в результате уменьшенного снабжения мозга кислородом из-за временного или постоянного сокращения или прекращения притока крови к мозгу. Ишемия мозга приводит к инсульту с последующим апоптозом и некрозом мозговой ткани, что приводит к инфаркту. Подобно сердечно-сосудистой ишемии, ишемия мозга может быть вызвана различными факторами, такими как кровяные сгустки, тромбоз, эмболия, блокирование кровеносных сосудов атеросклеротическими бляшками или другими преградами. Гиперхолестеринемия, гипертония, диабет и тучность, среди других факторов, были идентифицированы как факторы риска для ишемических инсультов. Ишемические инсульты являются ведущей причиной смерти людей во всем мире, а также затрагивают других животных, включая домашних животных.

Известно, что ишемические повреждения также вносят значительный вклад в старение мозга и слабоумие. Слабоумие представляет собой главную болезнь, затрагивающую популяцию пожилых людей. Уровень слабоумия увеличивается от примерно 0,3-1% у людей в возрасте 60-64 лет до 50% у людей старше, чем 95 лет, с распространенностью, удваивающейся каждые 5 лет (McDowell, I., Aging (Milano) 13: (2001) 143-162). Среди населения стран Запада Болезнь Альцгеймера (AD) рассматривается в качестве главной формы слабоумия, в то время как сосудистое слабоумие (VD), вероятно, является преобладающей формой среди населения стран Востока (Fratiglioni, L. et al., Drugs Aging (1999) 15: 365-375; Ott, A., et al., The Rotterdam Study, BMJ (1995) 310: 970-973). Увеличивающееся число доказательств указывает, что сосудистое слабоумие и Болезнь Альцгеймера часто сосуществуют среди населения, страдающего слабоумием. Например, Kalaria (Neurobiol Aging (2000) 2k 321-330) сообщает, что примерно 90% пациентов с AD имели церебрально-сосудистые патологии и примерно 30% пациентов с VD имели AD патологию. Сосуществование церебрально-сосудистого повреждения и AD у слабоумных пожилых людей было подтверждено Snowdon et al. (J. Am. Med. Soc. (1997) 277:813-817). Кроме того, было установлено, что признаки патологического диагноза AD (амилоидные образования и нейрофибриллярные клубки) присутствуют у пожилых людей, не страдающих слабоумием (Snowdon et al., 1997, supra). Эти данные позволяют предположить, что наличие амилоидных образований и нейрофибриллярных клубков является недостаточным, чтобы вызвать слабоумие у пациентов с AD, что подчеркивает существенный вклад мозговых ишемических повреждений в старение мозга и развитие и прогрессирование как VD, так и AD (Korczyn, A.J. Neurol Sci. (2005) 230: 3-6). Таким образом, предотвращение вызванного ишемией повреждения мозга и апоптоза нейронов у людей и животных может задержать старение мозга, уменьшить риск когнитивного нарушения и задержать развитие слабоумия.

Ишемия может возникнуть в любой ткани, но наиболее часто она связана с повреждением мозга, сердца или почек. Как обсуждалось выше, ишемия в мозге может вызвать острое повреждение, например инсульт, или хронические нарушения, такие как слабоумие и связанные с ним состояния. В сердце ишемические приступы могут привести к остановке сердца; аналогично этому почечная недостаточность может быть результатом ишемических событий в почке.

Во время ишемического инсульта или приступов ишемии в мозговой или любой другой ткани в кровеносных сосудах происходят биохимические реакции, которые могут привести к отеку, геморрагической трансформации и дальнейшему нарушению в затронутой ткани, например к неврологическому нарушению. Таким образом, лечение и защита кровеносных сосудов были идентифицированы в качестве потенциального пути исследования острого ишемического инсульта для разработки новых методов лечения. Более того, защита сосудов играет важную роль в уменьшении повреждения ткани, которое происходит в результате приступа ишемии.

Установлено, что эндотелий сосудов выполняет разнообразные регуляторные функции, включая модуляцию тонуса сосудов, воспаление и гомеостаз, путем поддерживания неадгезивной антитромботической поверхности (Boak, L., et al., Cur. Vase. Pharmacol. (2004) 2:45-52). Гомеостаз сосудов отчасти является функцией сокращения и расслабления гладких мышц сосудов, которые опосредуются множеством факторов, включая свободный радикал оксида азота (NO), который является сильным релаксантом гладких мышц сосудов.

NO производится тремя различными ферментами - NO-синтетазами (NOS): нейрональными NOS (nNOS), которые локализованы преимущественно в нервной ткани и генерируют NO для передачи нервного возбуждения; индуцибельными NOS (iNOS), которые найдены прежде всего в макрофагах и могут отвечать на провоспалительные медиаторы; и эндотелиальными NOS (eNOS), которые продуцируются клетками эндотелия, такими как клетки, найденные в эндотелии сосудов (Michel, Т., et al. J. Clin. Invest. (1997) 100: 2146-2152, Moncada, S., et al. Pharmacol. Rev. (1991) 43: 109-142 и Nathan, С. (1992) FASEBJ6: 3051-3064). Продуцируемый eNOS NO играет главную роль в расширении кровеносных сосудов (вазодилатации), пролиферации гладких мышц, регуляции артериального давления крови и обладает антикоагулянтным и противовоспалительным действием за счет ингибирования адгезии и агрегации тромбоцитов и лейкоцитов (Gewaltig, М.Т., et al. Cardiovasc. Res. (2002) 55:250-260, De Graaf, J.C. et al. Circulation (1992) 85:2284-2290, Freedman, J.E., et al. Circ. Res. (1999) 84: 1416-1421, Furchgott, R.F., et al. FASEB J (1989) 3:2007-2018, Gaboury, J., et al. Am J Physiol. Heart. Circ. Physiol. (1993) 265: H862-H867 and Kubes, P., et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1991) 88:4651-4655). Снижение продукции NO во время длительной ишемии было связано с повреждением эндотелия (Laude, L., et al. Braz. J. Med. Biol. Res. (2001) 34:1-7).

Ферменты NOS окисляют L-аргинин до цитруллина, что приводит к образованию NO как побочного продукта. Таким образом, было высказано предположение, что введение предшественников NO, таких как L-аргинин, может улучшить здоровье сосудов и может облегчить восстановление сосудов при болезненных состояниях. Действительно, было показано, что введение аргинина в качестве диетической добавки приводило к восстановлению вазодилатации и улучшало коронарное кровообращение в моделях на животных и у пациентов-людей с гиперхолестеринемией, а также увеличивало общую эндотелиальную функцию у пациентов с болезнью коронарных артерий (Boak, L., et al. 2004). Кроме того, было также установлено, что введение L-аргинина в качестве обогащающей добавки увеличивало уровни NO и уменьшало опосредованное свободными радикалами O₂ повреждение миокарда у пациентов-людей. (Kiziltepe, U., et al. Int. J. Cardiol. (2004) 97:93-100). Более недавние исследования показали, что введение аргинина в качестве обогащающей добавки облегчает восстановление эндотелия в кишечнике крыс после искусственной ишемии и последующей реперфузии кишечника (Sukhotnik, I., et al., Pediatr. Surg. Int. (2005) 3:191-196). Таким образом, введение предшественников NO, таких как L-аргинин, может применяться для активации и защиты эндотелиальных клеток, особенно в отношении клеток эндотелия сосудов.

Были также установлено, что жирные кислоты модулируют активацию эндотелиальных клеток. Было обнаружено, что введение длинноцепочечных полиненасыщенных жирных кислот (ДЦПНЖК) ингибирует адгезию лимфоцитов к клеткам эндотелия сосудов (Khalfoun, В., et al. Transplantation (1996) 62:1649-1657). Дальнейшие исследования показали, что введение ДЦПНЖК уменьшает экспрессию эндотелиальными клетками молекул адгезии и цитокинов в ответ на возбуждение, что позволяет предполагать, что ДЦПНЖК обладают антиатерогенными и противовоспалительными свойствами (De Caterina, R., et al. Am. J. Clin. Nutr. (2000) 71 (suppl) 213S-223S). Приведенное доказательство показывает, что регулярное потребление ДЦПНЖК, в частности n-3 жирных кислот, защищает сердечно-сосудистую систему, уменьшает формирование атеросклеротических бляшек и уменьшает риск смерти от сердечно-сосудистой болезни, в частности после инфаркта миокарда (Calder, P.С. Clin. Sci. (Lond). 2004 107:1-11). В отличие от этого, было проведено только небольшое количество исследований влияния принимаемых с пищей ДЦПНЖК на сосуды и ткань мозга, особенно в отношении приступов ишемии в мозге.

Давно известно, что в процесс старения вовлечены окислительный стресс и окислительное повреждение. Также было установлено, что окислительный стресс играет важную роль в патогенезе многих нейродегенеративных болезней, включая Болезнь Альцгеймера и определенные формы слабоумия (например, Smith, M.A., Dementia & Geriatric Cognitive Disorders (1999), Vol.10, Supp.1). Соответственно этому, дополнительное введение антиоксидантов использовалось для замедления процесса старения и защиты против дегенеративных эффектов окислительного стресса. Аналогично этому, витамины группы В - фолиевая кислота, витамин В6 и витамин В12 - являются важными для здоровья и нормального функционирования мозга. У пожилых людей статус этих витаминов часто нарушен, и эти нарушения могут привести к гипергомоцистеинемии, недавно идентифицированному фактору риска для развития атеросклероза (Temple M.E., et al., Ann Pharmacother 2000; 34:57-65; Hankey G.J., et al., Lancet 1999; 354:407-413) и болезни Альцгеймера (Clarke R., et al., Arch Neurol 1998; 55:1449-1455). Эти нарушения могут привести к ишемии мозга или других тканей вследствие окклюзивной болезни сосудов, инсульта или тромбоза.

Сущность изобретения

Один аспект настоящего изобретения предоставляет композицию, включающую одну или более длинноцепочечную полиненасыщенную жирную кислоту (ДЦПНЖК) и одно или более соединение, высвобождающее оксид азота (NORC), в количестве, эффективном для повышения целостности сосудов, например в мозге, и/или подавления апоптоза у животного. Повышенная целостность сосудов, например в мозге, и/или повышенное выживание клеток обеспечивают уменьшение ишемического повреждения в тканях, например в мозге, в случае приступа ишемии и может также обеспечить защитный эффект против первоначального возникновения таких ишемических приступов.

В определенных воплощениях композиция представляет собой композицию корма для животных, диетическую добавку или пищевой продукт, предназначенный для потребления человеком. В различных воплощениях ДЦПНЖК включают, по меньшей мере, одну из арахидоновой кислоты, эйкозапентаеновой кислоты, докозапентаеновой кислоты или докозагексаеновой кислоты, и NORC включают, по меньшей мере, одно из L-аргинина или его производных. Композиции могут включать дополнительные компоненты. Например, могут быть включены один или более антиоксидантов, витамины группы В, факторы роста клеток или противовоспалительные вещества.

В определенных воплощениях композиции приготовлены для домашних животных, таких как собака или кошка. В других воплощениях композиции приготовлены для употребления человеком.

Другой аспект настоящего изобретения предоставляет способ для увеличения целостности сосудов и/или уменьшения вызванного ишемией повреждения головного мозга у животного, включая введение животному на регулярной основе композиции, включающей одну или более ДЦПНЖК и одно или более NORC, необязательно с добавлением дополнительных компонентов, как описано выше, в количестве, эффективном для повышения целостности сосудов в ткани(ях) животного и/или уменьшения вызванного ишемией повреждения головного мозга в случае приступа ишемии в мозге животного. В определенных воплощениях способ применяется к домашнему животному, такому как собака или кошка. В других воплощениях способ применяется к людям.

В определенных воплощениях регулярное введение композиции животному приводит к снижению повреждения головного мозга в случае приступа ишемии в мозге животного, или это приводит к замедлению старения мозга у животного. В другом воплощении регулярное введение композиции животному приводит к подавлению апоптоза клеток в очаге ишемии, происходящей у животного, которая (ишемия) может происходить в любой ткани, включая мозг, сердце и почки.

Другие особенности и преимущества настоящего изобретения станут очевидными при обращении к фигурам, из подробного описания изобретения и примеров, которые приведены ниже.

Краткое описание чертежей

Фиг.1. Гистограмма, демонстрирующая влияние контрольной и опытных диет на объем ишемического поражения у всех крыс, подвергнутых кратковременной мозговой ишемии. Составы контрольной и опытных диет описаны в примере 1 (*р 0,01 по сравнению с контролем).

Фиг.2. Гистограмма, демонстрирующая влияние контрольной и опытных диет на объем ишемического поражения у крыс, демонстрирующих повреждения кратковременной мозговой ишемии. Составы контрольной и опытных диет описаны в примере 1 (*р<0,01 по сравнению с контролем).

Фиг.3. Гистограмма, демонстрирующая влияние контрольной и опытных диет на индуцируемый ишемией апоптоз в мозге крыс. Составы контрольной и опытных диет описаны в примере 1 (*р<0,01 по сравнению с контролем).

Фиг.4. График, показывающий корреляцию между объемом ишемического поражения (ось X) и процентом апоптозных клеток, выявленных при окрашивании TUNEL (ось Y), у крыс, подвергнутых кратковременной мозговой ишемии. Составы контрольной и опытных диет описаны в примере 1.

Подробное описание изобретения в иллюстративных воплощениях

Определения

Различные термины, касающиеся способов и других аспектов настоящего изобретения, используются всюду по тексту описания и в формуле изобретения. Эти термины имеют свое обычное значение, применяемое в данной области техники, если не указано иначе. Другие специфически определяемые термины должны толковаться в манере, совместимой с предоставляемым здесь определением.

Следующие сокращения могут использоваться в спецификации и примерах: АК, арахидоновая кислота; АЛК, альфа-линолевая кислота; ANOVA, дисперсионный анализ; ДГК, докозагексаеновая кислота; DM, сухое вещество; ДПК, докозапентаеновая кислота; ЭПК, эйкозапентаеновая кислота; ЛК, линолевая кислота; ДЦПНЖК, длинноцепочечная полиненасыщенная жирная кислота; NORC, соединение, высвобождающее оксид азота; L-Arg, L-аргинин.

В контексте данной спецификации термин "примерно" интерпретируется для обозначения произвольно плюс или минус 20%; более предпочтительно произвольно плюс или минус 10%; еще более предпочтительно произвольно плюс или минус 5%; наиболее предпочтительно произвольно плюс или минус 2%.

"Эффективное количество" обозначает количество соединения, материала или композиции, как описано здесь, которое является эффективным для достижения специфического биологического результата. Такие результаты включают, но ими не ограничиваются, увеличение целостности сосудов или уменьшение ишемического повреждения головного мозга. Такая эффективность может быть достигнута, например, путем введения композиции настоящего изобретения животному.

Термин "целостность сосудов" обозначает здоровье кровеносных сосудов в целом у животного, включая, без ограничения, здоровые тонус сосудов и их структуру, здоровый рост сосудов, здоровое сокращение и расслабление, пониженную проницаемость, пониженную пролиферацию, пониженное воспаление, пониженную адгезию клеток и/или тромбоцитов, поддержание нормального давления крови и кровотока и т.п. "Повышенная целостность сосудов" обозначает любое улучшение здоровья кровеносных сосудов в целом у животного, что может быть измерено любым подходящем методом из данной области техники.

В используемом здесь значении термин "длинноцепочечная полиненасыщенная жирная кислота", или "ДЦПНЖК", обозначает любую монокарбоновую кислоту, имеющую, по меньшей мере, 20 углеродных атомов и, по меньшей мере, две двойных связи. Неограничивающие примеры ДЦПНЖК включают (n-6) жирные кислоты, такие как арахидоновая кислота, и (n-3) жирные кислоты, такие как кислота эйкозапентаеновая, докозапентаеновая кислота и докозагексаеновая кислота.

В используемом здесь значении термин "соединения, высвобождающие оксид азота", или "NORC", обозначают любое соединение, которое вызывает высвобождение свободного оксида азота у животного. Предпочтительные примеры таких соединений включают L-аргинин и аналоги или производные L-аргинина, такие как альфа-кетоглутарат аргинина, GEA 3175, нитропруссид натрия, глицерилтринитрат, S-нитрозо-N-ацетил-пеницилламин, нитроглицерин, S-NO-глутатион, NO-конъюгированные нестероидные противовоспалительные лекарства, такие как NO-напроксен, NO-аспирин, NO-ибупрофен, NO-диклофенак, NO-флурбипрофен и NO-кетопрофен, NO-выпускающий состав-7, NO-выпускающий состав-5, NO-выпускающий состав-12, NO-высвобождающее соединение-18, диазениумдиолаты и их производные, диэтиламин NONOaт или любое органическое или неорганическое соединение, биомолекула или аналог, гомолог, конъюгат или их производное, которое вызывает высвобождение свободного оксида азота у животного.

Термин "ишемия" обозначает любое уменьшение или прекращение кровоснабжения любого органа тела, ткани или части, вызванное любым сокращение или обструкцией кровеносного сосуда. "Приступ ишемии" обозначает любой временный или постоянный период ишемии.

Термин "кровеносные сосуды" обозначает любую сеть кровеносных сосудов в организме животного, кровеносные сосуды, включая, без ограничения, артерии, вены и капилляры.

Термин "клетки эндотелия сосудов" или "эндотелий сосудов" обозначает клетки, которые включают слой тонких, плоских клеток, которые выстилают внутреннюю поверхность кровеносных сосудов, формируя границу раздела между циркулирующей кровью в просвете сосуда и остальной частью стенки сосуда.

Настоящее изобретение касается любых животных, предпочтительно млекопитающих, более предпочтительно домашних животных и наиболее предпочтительно людей. "Домашнее животное" представляет собой любое одомашненное животное и включает, без ограничения, кошек, собак, кроликов, морских свинок, хорьков, хомячков, мышей, песчанок, лошадей, коров, коз, овец, ослов, свиней и т.п.

В используемом здесь значении термин "корм для животных" или "композиция корма для животных" обозначает композицию, которая предназначена для кормления животных, и предпочтительно домашних животных. "Полный и сбалансированный корм для животных" представляет собой такой корм, который содержит все известные необходимые питательные вещества в соответствующем количестве и пропорциях на основе рекомендаций признанных органов в области корма для домашних животных и который поэтому может применяться в качестве единственного источника пищи для поддержания жизни или обеспечения воспроизводства без добавления дополнительных источников пищи. Сбалансированные композиции корма для животных широко известны и широко используются в данной области техники.

В используемом здесь значении термин "диетическая добавка" представляет собой продукт, который предназначен для потребления в дополнение к нормальной диете животного.

В используемом здесь значении термин "пищевой продукт, приготовленный для употребления человеком" представляет собой любую композицию, предназначенную для употребления в пищу человеком.

Описание

Изобретатели заметили, что у собак вводимый в качестве добавки аргинин увеличивал экспрессию многих факторов роста и противовоспалительных белков дозозависимым способом. Многие из этих факторов роста, включая NGF, nIGF и BDNF, проявляют мощные нейрозащитные эффекты (Mattson, M.P. et al. Neurobiol. Aging. (2002) 23:695-705 and Kruttgen, A. et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1998) 95:9614-9619). В дальнейших исследованиях на собаках с использованием естественных источников аргинина, включая корма из отходов производства сельди (содержащие рыбий жир, богатый ДЦПНЖК), изобретатели получили такой же или лучший результат, чем тот, который наблюдался при использовании чистого L-аргинина. Как подробно описано здесь в примерах, функциональные исследования временной мозговой ишемии в овариэктомизированной модели на крысах показали, что диета, содержащая комбинацию L-аргинина, рыбьего жира, антиоксидантов и витаминов группы В, заметно уменьшала мозговые повреждения и апоптоз, больше чем диеты, содержащие только один аргинин или только один рыбий жир. Соответственно этому различные аспекты настоящего изобретения используют эти открытия путем предоставления пищевых композиций и способов, чтобы улучшить целостность сосудов у животного и уменьшить ишемическое повреждение в случае ишемии у животного, например повреждение головного мозга в случае мозговой ишемии у животного.

Ожидается, что диетические композиции будут эффективны при различных ишемических ситуациях, включая, но ими не ограничиваясь, старение мозга (инсульты и мини-инсульты) и связанные нарушения, ишемические сердечные приступы, вызванную хирургическим вмешательством ишемию и реперфузию (пред- и постоперативное введение), вызванную диабетом периферическую ишемию, и, как альтернативу пост-менопаузы, лечение эстрогенами для снижения риска инсульта и сердечно-сосудистого заболевания у женщин в период после менопаузы.

В различных воплощениях композиции и способы настоящего изобретения применяют многокомпонентный подход к улучшению функциональной целостности сосудов, подавлению апоптоза и повышению выживания клеток после появления ишемии. Эти компоненты включают (1) повышение целостности и функции сосудов, (2) усиление восстановление клеток, (3) улучшение противовоспалительных эффектов, (4) оптимизацию клеточного метаболизма и (5) снижение окислительного стресса.

Композиции

Один аспект настоящего изобретения предоставляет композиции, включающие одну или более длинноцепочечную полиненасыщенную жирную кислоту (ДЦПНЖК) и одно или более соединение, высвобождающее оксид азота (NORC), в количестве, эффективном для повышения целостности сосудов у животных. ДЦПНЖК и NORC могут присутствовать в композиции как основной компонент или добавка. В предпочтительных воплощениях композиции ДЦПНЖК включают, по меньшей мере, одну из (n-3) жирных кислот, таких как АЛК, ЭПК, ДПК и ДГК, и NORC включают, по меньшей мере, одно из L-Arg и его производных. Такие композиции обогащают плазму крови ДЦПНЖК и NORC у животных, которым вводится композиция.

Композиции по настоящему изобретению могут включать различные дополнительные компоненты с целью обеспечения многокомпонентного подхода к повышению целостности сосудов и усилению выживания клеток при ишемии, как обсуждалось в общих чертах выше. Они включают антиоксиданты, витамины группы В, факторы роста и противовоспалительные вещества.

В одном предпочтительном воплощении композиции настоящего изобретения представляют собой композиции корма для животных. Они будут преимущественно включать корма и нутриенты, предназначенные для удовлетворения необходимых диетических потребностей, а также обработанные продукты (например, гранулированные корма) или другие диетические добавки. Композиции корма для животных не обязательно могут представлять собой сухую композицию (например, крупные гранулы), полувлажную композицию, влажную композицию или любую их смесь.

В другом предпочтительном воплощении композиции по настоящему изобретению представляют собой продовольственные продукты, приготовленные для употребления человеком. Они будут преимущественно включать пищевые продукты и нутриенты вещества, предназначенные для удовлетворения необходимых диетических потребностей человека, а также как другие диетические добавки, предназначенные для людей. В конкретном воплощении продовольственные продукты, приготовленные для употребления человеком, являются полными и сбалансированными продуктами.

В другом предпочтительном воплощении композиция представляет собой диетическую добавку, такую как соус, вода для питья, напиток, жидкий концентрат, йогурт, порошок, гранула, паста, суспензия, жевательная таблетка, легкая закуска, обработанный продукт, батончик, шарик, пилюля, капсула, таблетка или любая другая форма доставки. Диетические добавки могут быть специально приготовлены для употребления конкретным животным, таким как домашнее животное или человек. В одном конкретном воплощении диетическая добавка может включать высокую концентрацию ДЦПНЖК и NORC таким образом, чтобы добавку можно было вводить животному в небольших количествах или, альтернативно этому, чтобы добавку можно было разводить перед введением животному. Диетическую добавку может быть необходимо смешивать с водой перед введением животному.

Композиция может быть заморожена. ДЦПНЖК и NORC могут быть предварительно смешаны с другими компонентами композиции для обеспечения необходимых полезных количеств, могут быть нанесены в качестве оболочки на композицию корма для животного, диетическую добавку или пищевой продукт, приготовленный для употребления человеком, или могут быть добавлены к композиции перед введением ее животному, например, с использованием порошка или смеси.

Композиции по настоящему изобретению включают ДЦПНЖК и NORC в количестве, эффективном для повышения целостности сосудов у животного, которому эта композиция введена. Для кормов для животных и продовольственных продуктов, приготовленных для потребления человеком, количество ДЦПНЖК в процентах от всей композиции находится в диапазоне от примерно 0,1% до примерно 13% от сухой массы композиции, хотя может применяться и более высокое процентное содержание. В различных воплощениях это количество составляет примерно 0,1%, 0,2%, 0,3%, 0,4%, 0,5%, 0,6%, 0,7%, 0,8%, 0,9%, 1,0%, 1,1%, 1,2%, 1,3%, 1,4%, 1,5%, 1,6%, 1,7%, 1,8%, 1,9%, 2,0%, 2,1%, 2,2%, 2,3%, 2,4%, 2,5%, 2,6%, 2,7%, 2,8%, 2,9%, 3,0%, 3,1%, 3,2%, 3,3%, 3,4%, 3,5%, 3,6%, 3,7%, 3,8%, 3,9%, 4,0%, 4,1%, 4,2%, 4,3%, 4,4%, 4,5%, 4,6%, 4,7%, 4,8%, 4,9%, 5,0% или больше, например, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 11%, 12%, 13% или больше, от сухой массы композиции, и количество NORC в процентах от всей композиции находится в диапазоне от примерно 0,1% до примерно 12% от сухой массы композиции, хотя может применяться и более высокое процентное содержание. В различных воплощениях это количество составляет примерно 0,1%, 0,2%, 0,3%, 0,4%, 0,5%, 0,6%, 0,7%, 0,8%, 0,9%, 1,0%, 1,1%, 1,2%, 1,3%, 1,4%, 1,5%, 1,6%, 1,7%, 1,8%, 1,9%, 2,0%, 2,1%, 2,2%, 2,3%, 2,4%, 2,5%, 2,6%, 2,7%, 2,8%, 2,9%, 3,0%, 3,1%, 3,2%, 3,3%, 3,4%, 3,5%, 3,6%, 3,7%, 3,8%, 3,9%, 4,0%, 4,1%, 4,2%, 4,3%, 4,4%, 4,5%. В определенном воплощении применяется 2-2,5% ДЦПНЖК и 2-2,5% чистого L-аргинина. Диетические добавки могут быть приготовлены таким образом, чтобы они содержали в несколько раз более высокие концентрации ДЦПНЖК и NORC для введения животному в форме таблетки, капсулы, жидкого концентрата или другой подобной дозированной формы или для разведения перед введением в воде, распыления или опрыскивания корма для животного и для других подобных способов введения.

В альтернативном воплощении количество ДЦПНЖК и NORC в композиции представляет собой функцию от количества, необходимого для достижения определенной концентрации ДЦПНЖК и NORC в сыворотке крови животного. Определенная концентрация ДЦПНЖК в сыворотке крови может быть рассчитана путем определения уровней ДЦПНЖК в сыворотке крови у животных, получивших рекомендуемое количество ДЦПНЖК и NORC, указанное выше, что легко может сделать специалист в данной области техники.

Источником каждой из ДЦПНЖК может быть любой подходящий источник, синтетический или натуральный. Предпочтительные источники ДЦПНЖК включают, но ими не ограничиваются, первоцвет (примулу), темно-зеленые овощи, такие как шпинат, водоросли и сине-зеленые водоросли, такие как спирулина, семена и масла растений, такие как льняное семя, рапс, соя, грецкий орех, тыква, сафлор, кунжут, зародыши пшеницы, подсолнечник, кукуруза и конопля, рыбу, особенно холодноводную рыбу, такую как лосось, тунец, макрель, сельдь, морской окунь, полосатый окунь (лаврак), акула, палтус, зубатка, сардины, креветки и моллюски и экстрагированные из них масла, или ДЦПНЖК могут быть синтезированы de novo согласно любым способам, применимым в данной области техники.

Источником каждого NORC может быть любой подходящий источник, синтетический или натуральный. Предпочтительные источники аргинина включают, но ими не ограничиваются, белки животных и растений. Неограничивающие примеры растений, содержащих особенно много аргинина, включают бобовые, такие как соя, люпин и плоды рожкового дерева, злаковые, такие как пшеница и рис, и фрукты, такие как виноград. Семена и орехи, такие как какао и арахис, также богаты содержанием аргинина. Неограничивающие примеры белков животных, содержащих особенно много аргинина, включает продукты из рыбы и домашней птицы. NORC могут быть синтезированы de novo согласно любым способам, применимым в данной области техники, или получены из коммерческих источников.

Композиции настоящего изобретения могут не обязательно включить дополнительные вещества, такие как минералы, витамины, соли, приправы, красители и консерванты. Не ограничивающие примеры дополнительных минералов включают кальций, фосфор, калий, натрий, железо, хлор, бор, медь, цинк, магний, марганец, йод, селен и т.п. Не ограничивающие примеры дополнительных витаминов включают витамин А, различные витамины группы В, витамин С, витамин D, витамин Е и витамин К. Могут также быть включены дополнительные пищевые добавки, например, ниацин, пантотеновая кислота, инулин, фолиевая кислота, биотин, аминокислоты и т.п.

Композиции по настоящему изобретению могут не обязательно включать одно или более из дополнительных веществ, которые повышают или поддерживают здоровье сосудов или дополнительно увеличивают целостность сосудов или выживание клеток. Такие вещества включают, но ими не ограничиваются, одно или более из винпоцетина, кофермента Q₁₀, фосфатидилсерина, ацетил-L-карнитина, альфа-липоевой кислоты, экстрактов, таких как экстракт черники (Vaccinium myrtilis), или антиоксидантов, включая токоферолы, токотриенолы, каротиноиды, такие как альфа - и бета-каротин, ликопин, лютеин, астаксантин, зеаксантин, и флавоноиды, такие как флаванолы, флаваноны, флавоны, флаван-3-олы (катехины), антоцианы и изофлавоны (изофлавоноиды) и т.п., а также противовоспалительные вещества и факторы роста (особенно применимые для повышения выживания клеток), что является понятным любому специалисту в данной области техники.

В различных воплощениях корма для животных или композиции диетических добавок по настоящему изобретению могут включать в перерасчете на сухое вещество от примерно 15% до примерно 50% общего белка от массы всей композиции. Общий белок может включать растительные белки, такие как соя, семена хлопчатника и арахис, или белки животных, такие как казеин, альбумин и белок мяса. Неограничивающие примеры белка мяса, применимого здесь, включают свинину, ягненка, лошадь, домашнюю птицу, рыбу и их смеси.

Композиции могут дополнительно включать в пересчете на сухое вещество от примерно 5% до примерно 40% жира от общей массы композиции. Композиции могут дополнительно включать источник углеводов. Композиции могут включать в пересчете на сухое вещество от примерно 15% до примерно 60% углеводов от общей массы композиции. Неограничивающие примеры таких углеводов включают зерновые или хлебные злаки, такие как рис, кукуруза, сорго обыкновенное, люцерна, ячмень, соя, рапс, овес, пшеница и их смеси. Композиции могут также не обязательно включать другие материалы, такие как сухая молочная сыворотка и другие молочные вторичные продукты.

Композиции могут также включать, по меньшей мере, один источник волокна. Может применяться множество растворимых или нерастворимых волокон, что известно любому специалисту средней квалификации в данной области техники. Источником волокна может быть жом свеклы (сахарной свеклы), аравийская камедь, камедь талха (gum talha), подорожник, отруби риса, камедь бобов рожкового дерева, мякоть цитрусовых, пектин, фруктоолигосахариды дополнительно к короткоцепочечной олигофруктозе, манноолигофруктоза, волокно сои, волокно люпинов, арабиногалактан, галактоолигосахарид, арабиноксилан или их смеси. Альтернативно этому источником волокна может быть ферментированное волокно. Как было описано ранее, ферментированное волокно полезно для иммунной системы домашних животных. Ферментированное волокно или другие композиции, известные специалистам в данной области техники, которые предоставляют пребиотическую композицию для усиления роста пребиотических микроорганизмов в кишечнике, могут также быть включены в композицию с целью усиления полезного действия на иммунную систему животного, представляемого в соответствии с настоящим изобретением. В композицию дополнительно могут быть включены, например, пребиотические микроорганизмы, такие как виды Lactobacillus или Bifidobacterium.

В конкретном воплощении композиция представляет собой комплексный и сбалансированный корм для животных. В этом контексте корм для животных может быть влажным кормом, сухим кормом или кормом с промежуточным содержанием влаги, что хорошо известно специалистам в области техники, касающейся составления и производства композиций корма для животных. Термин "влажная пища" относится к корму для животных, который обычно продается в банках или пакетах из фольги и имеет содержание влаги обычно в диапазоне от примерно 70% до примерно 90%. Термин "сухая пища" относится к корму для животных, который имеет состав, подобный составу влажной пищи, но содержит ограниченное количество влаги, обычно в диапазоне от примерно 5% до примерно 15%, и поэтому производится, например, в виде маленькие гранул или подушечек. Композиции и диетические добавки могут специально готовиться для взрослых животных или для старых или молодых животных, например "корм для щенка", "корм для котенка" или композиция для "старших животных". В целом специализированные композиции будут включать источники энергии и питательных веществ, подходящие для животных на разных стадиях развития или разного возраста.

Определенные аспекты настоящего изобретения предпочтительно применяются в комбинации с полной и сбалансированной пищей (например, как описано в National Research Council, 1985, Nutritional Requirements for Dogs, National Academy Press, Washington D.C., or Association of American Feed Control Officials, Official Publication, 1996). Таким образом, композиции, включающие ДЦПНЖК или ДГК согласно определенным аспектам настоящего изобретения, предпочтительно применяются в сочетании с высококачественными коммерчески доступными кормами. В используемом здесь значении термин "высококачественный коммерчески доступный корм" относится к корму, произведенному для обеспечения хорошего усвоения ключевых питательных веществ на 80% или больше, как, например, указано выше в рекомендациях National Research Council для собак. Подобные высокие стандарты в отношении кормов должны применяться и для других животных.

Квалифицированный специалист в данной области техники поймет, как определить соответствующее количество ДЦПНЖК и NORC, которые нужно добавить в данную композицию. Такие факторы, которые могут быть приняты во внимание, включают тип композиции (например, композиция корма для животного, диетическая добавка или пищевой продукт, приготовленный для употребления человеком), среднее потребление определенных типов композиций различными животными и условия производства, в которых приготовлена данная композиция. Предпочтительно, чтобы концентрации ДЦПНЖК и NORC, которые будут добавлены в композицию, рассчитывались на основе потребностей животного в энергии и питательных веществах. Согласно определенным аспектам настоящего изобретения, ДЦПНЖК и NORC могут быть добавлены в любое время во время изготовления и/или обработки композиции. Это означает, без ограничения, что они могут входить в качестве части в композицию корма для животного, диетической добавки или пищевого продукта, предназначенного для употребления человеком, или входить в состав покрытия, наносимого на поверхность композиции корма для животного, диетической добавки или пищевого про