Применение пиримидиламинобензамидов для лечения заболеваний, чувствительных к модуляции активности киназы тie-2

Применение пиримидиламинобензамидов для лечения заболеваний, чувствительных к модуляции активности киназы тie-2

Реферат

Краткое описание сущности настоящего изобретения

Настоящее изобретение относится к применению пиримидиламинобензамидов для получения лекарственного средства, предназначенного для лечения заболеваний, чувствительных к модуляции активности киназ, прежде всего активности киназы tie-2, а также к способу лечения заболеваний, чувствительных к модуляции активности киназ, прежде всего активности киназы tie-2, прежде всего для лечения и/или профилактики лейкоза и миелодиспластического синдрома.

Предпосылки создания настоящего изобретения

Киназы включают рецепторные киназы и нерецепторные киназы, а также тирозинкиназы и серин/треонинкиназы. Рецепторная тирозинкиназа Tie-2 (рецептор ангиопоэтина-1, так называемая ТЕК) экспрессируется в эндотелиальных клетках, которые выстилают просветы кровеносных сосудов. Установлено, что киназа Tie-2 принимает участие в миграции, росте, выживании эндотелиальных клеток и в пополнении периэндотелиальных клеток в процессе ангиогенеза.

В отличие от VEGF (эндотелиальный фактор роста сосудов) и рецепторной тирозинкиназы VEGF, которые контролируют развитие ангиогенеза, ангиопоэтины и рецепторная киназа Tie-2 принимают участие в процессах стабилизации и реконструкции сосудов. Киназа Tie-2 активируется ангипоэтином-1, но второй лиганд, ангиопоэтин-2 (ang2) является антагонистом киназы Tie-2. В участках ангиогенеза наблюдается избыточная регуляция антагониста ang2. Таким образом, в настоящее время еще не установлено, что киназа Tie-2 ускоряет или ингибирует процесс ангиогенеза.

С учетом множества механизмов, по которым происходит патогенез развития и роста опухолей, а также патогенез других пролиферативных заболеваний, существует необходимость в разработке новых пригодных модуляторов активности киназ, которые в большинстве случаев играют важную роль. Таким образом, соединения, модулирующие активность киназы Tie-2, могут влиять на рост опухолей и ангиогенез, и их можно использовать для разработки нового подхода к целевому действию на сосуды опухоли, на которые не влияет ингибирование рецептора VEGFR.

В настоящем изобретении предлагаются новые соединения, которые обладают преимуществами при лечении пролиферативных заболеваний, таких как опухолевые заболевания.

Краткое описание настоящего изобретения

Неожиданно было установлено, что пиримидиламинобензамиды по настоящему изобретению способны ингибировать активность киназ Tie-2 и, следовательно, являются пригодными для лечения пролиферативных заболеваний.

Подробное описание вариантов осуществления настоящего изобретения

Настоящее изобретение относится к применению пиримидиламинобензамидов формулы I:

где

R₁ означает водород, (низш.)алкил, (низш.)алкокси(низш.)алкил, ацилокси(низш.)алкил, карбокси(низш.)алкил, (низш.)алкоксикарбонил(низш.)алкил или фенил(низш.)алкил,

R₂ означает водород, (низш.)алкил, необязательно замещенный одним или более одинаковых или различных заместителей R₃, циклоалкил, бензциклоалкил, гетероциклил, арил или моно- или бициклический гетероарил, несодержащий или содержащий один, два или три атома азота, и несодержащий или содержащий один атом кислорода, и несодержащий или содержащий один атом серы, при этом указанные группы в каждом случае являются незамещенными, моно- или полизамещенными,

и R₃ означает гидрокси, (низш.)алкокси, ацилокси, карбокси, (низш.)алкоксикарбонил, карбамоил, N-моно- или N,N-дизамещенный карбамоил, амино, моно- или дизамещенный амино, циклоалкил, гетероциклил, арил или моно- или бициклический гетероарил, несодержащий или содержащий один, два или три атома азота, и несодержащий или содержащий один атом кислорода, и несодержащий или содержащий один атом серы, причем указанные группы в каждом случае являются незамещенными, моно- или полизамещенными,

или где R₁ и R₂ вместе означают алкилен, содержащий 4, 5 или 6 атомов углерода, необязательно моно- или дизамещенный группами (низш.)алкил, циклоалкил, гетероциклил, фенил, гидрокси, (низш.)алкокси, амино, моно- или дизамещенный амино, оксо, пиридил, пиразинил или пиримидинил; означают бензалкилен, содержащий 4 или 5 атомов углерода; оксаалкилен, содержащий 1 атом кислорода и 3 или 4 атома углерода, и азаалкилен, содержащий 1 атом азота и 3 или 4 атома кислорода, где атом азота является незамещенным или замещенным группами (низш.)алкил, фенил(низш.)алкил, (низш.)алкоксикарбонил(низш.)алкил, карбокси(низш.)алкил, карбамоил(низш.)алкил, N-моно- или N,N-дизамещенный карбамоил(низш.)алкил, циклоалкил, (низш.)алкоксикарбонил, карбокси, фенил, замещенный фенил, пиридинил, пиримидинил или пиразинил,

R₄ означает водород, (низш.)алкил или галоген,

а также к применению N-оксидов или фармацевтически приемлемых солей указанных соединений для получения фармацевтической композиции, предназначенной для лечения зависимых от киназ заболеваний, прежде всего заболеваний, зависимых от киназы Tie-2, например, в качестве лекарственных средств для лечения одного или более пролиферативных заболеваний. Настоящее изобретение относится также к применению соединений формулы I для лечения или профилактики зависимых от киназ заболеваний, прежде всего заболеваний, зависимых от киназы Tie-2.

Основные термины, использованные в данном контексте, предпочтительно имеют следующие значения, если не указано иное.

Термин «(низш.)» означает радикал, содержащий от 1 до 7 включительно, прежде всего от 1 до 4 атомов углерода включительно, с прямой или разветвленной цепью, содержащей одно или более ответвлений.

Множественное число соединений, солей и т.п. означает также и единственное число соединения, соли и т.п.

Любые асимметричные атомы углерода могут присутствовать в (R)-, (S)- или (R,S)-конфигурации, предпочтительно в (R)- или (S)-конфигурации. Соединения могут присутствовать в виде смесей изомеров или индивидуальных изомеров, предпочтительно энантиомерно чистых диастереомеров.

Настоящее изобретение относится также к возможным таутомерным формам соединений формулы I.

Термин «(низш.)алкил» предпочтительно означает алкил, содержащий от 1 до 7 включительно, предпочтительно от 1 до 4, атомов углерода включительно, с прямой или разветвленной цепью, предпочтительно (низш.)алкил означает бутил, такой как н-бутил, втор-бутил, изобутил, трет-бутил, пропил, такой как н-пропил или изопропил, этил или метил. Предпочтительно (низш.)алкил означает метил, пропил или трет-бутил.

Термин «(низш.)ацил» предпочтительно означает формил или (низш.)алкилкарбонил, прежде всего ацетил.

Термин «арильная группа» означает ароматический радикал, присоединенный к молекуле через связь, расположенную у атома углерода в ароматическом кольце. В предпочтительном варианте арил означает ароматический радикал, содержащий от 6 до 14 атомов углерода, прежде всего фенил, нафтил, тетрагидронафтил, флуоренил или фенантренил, и является незамещенным или замещенным одним или более, предпочтительно не более 3, прежде всего одним или двумя заместителями, которые прежде всего выбирают из групп амино, моно- или замещенный амино, галоген, (низш.)алкил, замещенный (низш.)алкил, (низш.)алкенил, (низш.)алкинил, фенил, гидрокси, этерифицированный гидрокси (в виде простого или сложного эфира), нитро, циано, карбокси, этерифицированный карбокси, алканоил, бензоил, карбамоил, N-моно- или N,N-дизамещенный карбамоил, амидино, гуанидино, уреидо, меркапто, сульфо, (низш.)алкилтио, фенилтио, фенил(низш.)алкилтио, (низш.)алкилфенилтио, (низш.)алкилсульфинил, фенилсульфинил, фенил(низш.)алкилсульфинил, (низш.)алкилфенилсульфинил, (низш.)алкилсульфонил, фенилсульфонил, фенил(низш.)алкилсульфонил, (низш.)алкилфенилсульфонил, галоген(низш.)алкилмеркапто, галоген(низш.)алкилсульфонил, такой как прежде всего трифторметансульфонил, дигидроксибора (-В(ОН)₂), гетероциклил, моно- или бициклический гетероарил и (низш.)алкилендиокси, присоединенный к двум соседним атомам углерода в кольце, такой как метилендиокси. Арил более предпочтительно означает фенил, нафтил или тетрагидронафтил, каждый из которых является незамещенным или независимо замещенным 1 или 2 заместителями, которые выбирают из группы, включающей атом галогена, прежде всего фтор, хлор или бром, гидрокси, гидрокси, этерифицированный (низш.)алкилом, например метилом, галоген(низш.)алкилом, например трифторметилом, или фенилом; (низш.)алкилендиокси, присоединенный к двум соседним атомам углерода, например метилендиокси, (низш.)алкил, например метил или пропил, галоген(низш.)алкил, например трифторметил, гидрокси(низш.)алкил, например гидроксиметил или 2-гидрокси-2-пропил, (низш.)алкокси(низш.)алкил, например метоксиметил или 2-метоксиэтил, (низш.)алкоксикарбонил(низш.)алкил, например метоксикарбонилметил, (низш.)алкинил, такой как 1-пропинил, этерифицированный карбокси (сложный эфир), прежде всего (низш.)алкоксикарбонил, например метоксикарбонил, н-пропоксикарбонил или изопропоксикарбонил, N-монозамещенный карбамоил, прежде всего карбамоил, монозамещенный (низш.)алкилом, например метилом, н-пропилом или изопропилом; амино, (низш.)алкиламино, например метиламино, ди(низш.)алкиламино, например диметиламино или диэтиламино, (низш.)алкиленамино, например пирролидино или пиперидине, (низш.)оксаалкиленамино, например морфолино, (низш.)азаалкиленамино, например пиперазино, ациламино, например ацетиламино или бензоиламино, (низш.)алкилсульфонил, например метилсульфонил, сульфамоил или фенилсульфонил.

Термин «циклоалкильная группа» предпочтительно означает циклопропил, циклопентил, циклогексил или циклогептил и является незамещенной или замещенной одним или более, прежде всего 1 или 2, заместителями, которые выбирают из группы, включающей заместители, описанные выше для группы арил, наиболее предпочтительно (низш.)алкил, такой как метил, (низш.)алкокси, такой как метокси, или этокси, или гидрокси, а также группой оксо, или циклоалкил сопряжен с бензольным кольцом и образует систему, такую как бензилциклопентил или бензилциклогексил.

Термин «замещенный алкил» означает алкил, определенный выше, прежде всего (низш.)алкил, предпочтительно метил, замещенный одним или более, прежде всего не более трех, заместителями, которые предпочтительно выбирают из группы, включающей атом галогена, прежде всего фтор, амино, N-(низш.)алкилтио, N,N-ди(низш.)алкиламино, N-(низш.)алканоиламино, гидрокси, циано, карбокси, (низш.)алкоксикарбонил и фенил(низш.)алкоксикарбонил. Наиболее предпочтительным является трифторметил.

Термин «моно- или дизамещенный амино» означает аминогруппу, замещенную 1 или 2 заместителями, которые независимо друг от друга выбирают из группы, включающей (низш.)алкил, такой как метил, гидрокси(низш.)алкил, такой как 2-гидроксиэтил, (низш.)алкокси(низш.)алкил, такой как метоксиэтил, фенил(низш.)алкил, такой как бензил или 2-фенилэтил, (низш.)алканоил, такой как ацетил, бензоил, замещенный бензоил, где фенильный радикал прежде всего замещен одним или более, предпочтительно 1 или 2 заместителями, которые выбирают из группы, включающей нитро, амино, галоген, N-(низш.)алкиламино, N,N-ди(низш.)алкиламино, гидрокси, циано, карбокси, (низш.)алкоксикарбонил, (низш.)алканоил и карбамоил; а также фенил(низш.)алкоксикарбонил, где фенильный радикал является незамещенным или замещенным прежде всего одним или более, предпочтительно 1 или 2, заместителями, которые выбирают из группы, включающей нитро, амино, галоген, N-(низш.)алкиламино, N,N-ди(низш.)алкиламино, гидрокси, циано, карбокси, (низш.)алкоксикарбонил, (низш.)алканоил и карбамоил; и указанный термин предпочтительно означает N-(низш.)алкиламино, такой как N-метиламино, гидрокси(низш.)алкиламино, такой как 2-гидроксиэтиламино или 2-гидроксипропил, (низш.)алкокси(низш.)алкил, такой как метоксиэтил, фенил(низш.)алкиламино, такой как бензиламино, N,N-ди(низш.)алкиламино, N-фенил(низш.)алкил-К-(низш.)алкиламино, N,N-ди(низш.)алкилфениламино, (низш.)алканоиламино, такой как ацетиламино, или заместитель выбирают из группы, включающей бензоиламино и фенил(низш.)алкоксикарбониламино, где фенильный остаток в каждом случае является незамещенным или прежде всего замещенным группами нитро или амино, или атомом галогена, группами амино, N-(низш.)алкиламино, N,N-ди(низш.)алкиламино, гидрокси, циано, карбокси, (низш.)алкоксикарбонил, (низш.)алканоил, карбамоил или аминокарбониламино.

Термин «дизамещенная аминогруппа» также означает (низш.)алкиленамино, например пирролидино, 2-оксопирролидино или пиперидино, (низш.)оксаалкиленамино, например морфолино, или (низш.)азаалкиленамино, например пиперазино или N-замещенный пиперазино, такой как N-метилпиперазино или N-метоксикарбонилпиперазино.

Термин «галоген» означает фтор, хлор, бром или иод, прежде всего фтор, хлор или бром.

Термин «этерифицированный гидрокси (в виде простого эфира)» прежде всего означает С₈-С₂₀алкилокси, такой как н-децилокси, (низш.)алкокси (предпочтительно), такой как метокси, этокси, изопропилокси или трет-бутокси, фенил(низш.)алкокси, такой как бензилокси, фенилокси, галоген(низш.)алкокси, такой как трифторметокси, 2,2,2-трифторэтокси или 1,1,2,2-тетрафторэтокси, или (низш.)алкокси, замещенный моно- или бициклическим гетероарилом, содержащим 1 или 2 атома азота, предпочтительно (низш.)алкокси, замещенный группами имидазолил, такой как 1Н-имидазол-1-ил, пирролил, бензимидазолил, такой как 1-бензимидазолил, пиридил, прежде всего 2-, 3- или 4-пиридил, пиримидинил, прежде всего 2-пиримидинил, пиразинил, изохинолинил, прежде всего 3-изохинолинил, хинолинил, индолил или тиазолил.

Термин «этерифицированный гидрокси (в виде сложного эфира)» означает прежде всего (низш.)алканоилокси, бензоилокси, (низш.)алкоксикарбонилокси, такой как трет-бутоксикарбонил, или фенил(низш.)алкоксикарбонилокси, такой как бензилоксикарбонилокси.

Термин «этерифицированный карбокси (сложный эфир)» означает прежде всего (низш.)алкоксикарбонил, такой как трет-бутоксикарбонил, изопропоксикарбонил, метоксикарбонил или этоксикарбонил, фенил(низш.)алкоксикарбонил или фенилоксикарбонил.

Термин «алканоил» означает прежде всего алкилкарбонил, прежде всего (низш.)алканоил, например ацетил.

Термин «N-моно- или N,N-дизамещенный карбамоил» означает прежде всего карбамоил, замещенный 1 или 2 заместителями, которые независимо выбирают из группы, включающей (низш.)алкил, фенил(низш.)алкил и гидрокси(низш.)алкил, или (низш.)алкилен, окса(низш.)алкилен или аза(низш.)алкилен, необязательно замещенный по концевому атому азота.

Термин «моно- или бициклическая гетероарильная группа», не содержащая или содержащая 1, 2 или 3 атома азота в цикле, и не содержащая или содержащая 1 атом кислорода, и не содержащая или содержащая 1 атом серы, причем указанные группы в каждом случае являются незамещенными или моно- или полизамещенными, означает гетероциклический остаток, который содержит ненасыщенный остаток, связанный через гетероарильный радикал с остальной молекулой формулы I, и предпочтительно является циклом, который содержит в связующем цикле, и необязательно также в любом сопряженном цикле, по крайней мере один атом углерода, который заменен на гетероатом, который выбирают из группы, включающей азот, кислород или серу, причем связующий цикл предпочтительно содержит от 5 до 12, более предпочтительно 5 или 6, атомов в цикле, и который является незамещенным или замещенным одним или более, прежде всего 1 или 2, заместителями, которые выбирают из группы, определенной выше для заместителей арильной группы, наиболее предпочтительно включающей (низш.)алкил, такой как метил, (низш.)алкокси, такой как метокси или этокси, или гидрокси. Предпочтительно моно- или бициклическую гетероарильную группу выбирают из группы, включающей 2Н-пиррол, пирролил, имидазолил, бензимидазолил, пиразолил, индазолил, пуринил, пиридил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, 4Н-хинолизинил, изохинолил, хинолил, фталазинил, нафтиридинил, хиноксалил, хиназолинил, хиннолинил,птеридинил, индолизинил, 3Н-индолил,индолил,изоиндолил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, изотиазолил, триазолил, тетразолил, фуразанил, бензо[d]пиразолил, тиенил и фуранил. Более предпочтительно моно- или бициклическую гетероарильную группу выбирают из группы, включающей пирролил, имидазолил, такой как 1Н-имидазол-1-ил, бензимидазолил, такой как 1-бензимидазолил, индазолил, прежде всего 5-индазолил, пиридил, прежде всего 2-, 3- или 4-пиридил, пиримидинил, прежде всего 2-пиримидинил, пиразинил, изохинолинил, прежде всего 3-изохинолинил, хинолинил, прежде всего 4- или 8-хинолинил, индолил, прежде всего 3-индолил, тиазолил, бензо[d]пиразолил, тиенил и фуранил. В одном предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения пиридильный остаток замещен гидроксильной группой в орто-положении по отношению к атому азота и, следовательно, существует, по крайней мере частично, в форме соответствующего таутомера пиридин-(1Н)2-она. В другом предпочтительном варианте пиримидинильный радикал замещен гидроксильными группами в положениях 2 и 4 и, следовательно, существует в нескольких таутомерных формах, например в виде пиримидин-(1Н,3Н)2,4-диона.

Термин «гетероциклическая группа» прежде всего означает 5, 6 или 7-членную гетероциклическую систему, содержащую 1 или 2 гетероатома, которые выбирают из группы, включающей азот, кислород и серу, и которая является ненасыщенной или полностью или частично насыщенной, и которая незамещена или замещена прежде всего группами (низш.)алкил, такой как метил, фенил(низш.)алкил, такой как бензил, оксо или гетероарил, такой как 2-пиперазинил, гетероциклил прежде всего означает 2- или 3-пирролидинил, 2-оксо-5-пирролидинил, пиперидинил, N-бензил-4-пиперидинил, N-(низш.)алкил-4-пиперидинил, N-(низш.)алкилпиперазинил, морфолинил, например 2- или 3-морфолинил, 2-оксо-1Н-азепин-3-ил, 2-тетрагидрофуранил или 2-метил-1,3-диоксолан-2-ил.

Соли являются прежде всего фармацевтически приемлемыми солями соединений формулы I.

Указанные соли, прежде всего фармацевтически приемлемые соли, получают, например, в виде кислотно-аддитивных солей, предпочтительно органических или неорганических кислот, и соединений формулы I, содержащих основный атом азота. Пригодные неорганические кислоты включают, например, галогенводородные кислоты, такие как хлористоводородная кислота, серную кислоту или фосфорную кислоту. Пригодными органическими кислотами являются, например, карбоновые, фосфоновые, сульфоновые или сульфамовые кислоты, например уксусная кислота, пропионовая кислота, октановая кислота, декановая кислота, додекановая кислота, гликолевая кислота, молочная кислота, фумаровая кислота, янтарная кислота, адипиновая кислота, пимеловая кислота, субериновая кислота, азелаиновая кислота, яблочная кислота, винная кислота, лимонная кислота, аминокислоты, такие как глутамовая кислота или аспарагиновая кислота, малеиновая кислота, гидроксималеиновая кислота, метилмалеиновая кислота, циклогексанкарбоновая кислота, адамантанкарбоновая кислота, бензойная кислота, салицилловая кислота, 4-аминосалицилловая кислота, фталевая кислота, фенилуксусная кислота, миндальная кислота, коричная кислота, метан- или этансульфоновая кислота, 2-гидроксиэтансульфоновая кислота, этан-1,2-дисульфоновая кислота, бензолсульфоновая кислота, 2-нафталинсульфоновая кислота, 1,5-нафталиндисульфоновая кислота, 2-, 3- или 4-метилбензолсульфоновая кислота, метилсерная кислота, этилсерная кислота, додецилсерная кислота, N-циклогексилсульфамовая кислота, N-метил-, N-этил или N-пропилсульфамовая кислота, или другие органические протонные кислоты, такие как аскорбиновая кислота.

В присутствии отрицательно заряженных радикалов, таких как карбокси или сульфо, соединения образуют также соли оснований, например соли металлов или аммония, такие как соли щелочных или щелочноземельных металлов, например соли натрия, калия, магния или кальция, или соли аммония или пригодных органических аминов, таких как третичные моноамины, например триэтиламин или три(2-гидроксиэтил)амин, или гетероциклических оснований, например N-этилпиперидин или N,N'-диметилпиперазин.

Если в молекуле одновременно присутствуют основная и кислотная группы, то соединения формулы I образуют также внутренние соли.

Для выделения или очистки используют также фармацевтически неприемлемые соли, например пикраты или перхлораты. В терапевтических целях используют только фармацевтически приемлемые соли или свободные соединения (по возможности в форме фармацевтических препаратов), которые являются предпочтительными.

В связи с близкой структурой новых соединений в свободной форме и форме их солей, включая соли, которые используют в качестве промежуточных соединений, например, для очистки или идентификации новых соединений, любая ссылка на свободные соединения в настоящем контексте означает также соответствующие соли.

Соединения формулы I и способ их получения описан в заявке WO 04/005281, опубликованной 15 января 2004 г., включенной в настоящее описание в качестве ссылки. Предпочтительным соединением является 4-метил-3-[[4-(3-пиридинил)-2-пиримидинил]амино]-N-[5-(4-метил-1Н-имидазол-1-ил)-3-(трифторметил)фенил]бензамид.

Термин «лечение» или «терапия» (прежде всего зависимых от тирозинпротеинкиназы заболеваний или нарушений) означает профилактику или предпочтительно лечение (включая, без ограничения перечисленным, ослабление проявления болезни, излечение, ослабление симптомов, снижение интенсивности симптомов, регуляция активности киназы и/или ингибирование активности киназы) указанных заболеваний, прежде всего указанных ниже заболеваний.

Теплокровным животным (или пациентом) является млекопитающее, прежде всего человек.

Термин «применение» (в отношении применения соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли) включает (если в контексте не указано или не предполагается иное) любой один или более следующих вариантов осуществления настоящего изобретения, соответственно (если не указано иное): применение при лечении зависимого от протеинкиназы (прежде всего от тирозинкиназы, предпочтительно от киназы Tie-2) заболевания, применение для получения фармацевтических композиций, предназначенных для лечения зависимого от протеинкиназы заболевания, способы применения одного или более соединений формулы I при лечении зависимого от протеинкиназы заболевания и/или пролиферативного заболевания, фармацевтических композиций, включающих одно или более соединений формулы I, предназначенных для лечения указанного зависимого от протеинкиназы заболевания, и одного или более соединений формулы I, предназначенных для лечения указанного зависимого от протеинкиназы заболевания, соответственно, если не указано иное. Прежде всего, заболевания, предназначенные для лечения и, таким образом, предпочтительные для применения соединения формулы, выбирают из группы, включающей зависимые (термин «зависимые» означает также связанные с протеинкиназами, а не только зависимые) указанные ниже, прежде всего пролиферативные заболевания, указанные ниже, более предпочтительно любое одно или более указанных или других заболеваний, зависимых от киназы Tie-2, например, при которых наблюдается аномальная сверхэкспрессия конститутивно активированной, нормальной и/или мутантной киназы Tie-2.

В предпочтительном варианте настоящего изобретения заболеванием или нарушением, зависимым от активности протеинкиназы (предпочтительно тирозинкиназы), прежде всего киназы Tie-2, которое можно лечить соединением формулы I, называется одно или более пролиферативных заболеваний (т.е. заболевание, зависимое от аномальной активности киназы), включая гиперпролиферативное состояние, такое как одно или более заболеваний, выбранное из группы, включающей лейкозы, гиперплазию, фиброзы (прежде всего легочные, но также и фиброзы других типов, таких как почечный фиброз), ангиогенез, псориаз, атеросклероз или пролиферацию клеток гладкой мускулатуры в кровеносных сосудах, такую как стеноз или рестеноз после ангиопластики. Соединение формулы I можно также использовать для лечения тромбоза и/или склеродермы, а также легочной гипертензии. Применение ингибиторов киназы Tie-2 при лечении легочной гипертензии описано в литературе (см. статьи J. Thorac. Cardiovasc Surg. т.129(2), cc.268-276 (февраль 2005), Ann Thorac Surg., т.77(2), cc.449-456, обсуждение на с.456-457 (февраль 2004), Proc Nati Acad Sci U S А., т.100(21), cc.12331-12336 (октябрь 2003, опубл. в Интернете 25 сентября (2003)).

Предпочтительным является применение соединения формулы I для лечения (включая профилактику) пролиферативного нарушения (прежде всего зависимого от активности (например, аномальной активности) киназы Tie-2, которое выбирают из опухолевых заболеваний или рака, прежде всего предпочтительно для лечения доброкачественных или прежде всего злокачественных опухолевых заболеваний или рака, более предпочтительно солидных опухолей, например карциномы мозга, почек, печени, надпочечников, мочевого пузыря, молочной железы, желудка (прежде всего опухолей желудка), яичников, ободочной кишки, прямой кишки, предстательной железы, поджелудочной железы, легких (например, мелкоклеточной или крупноклеточной карциномы легких), влагалища, щитовидной железы, саркомы, глиобластом, множественной миеломы или рака желудочно-кишечного тракта, прежде всего карциномы ободочной кишки или колоректальной аденомы, или опухоли шеи и головы, например плоскоклеточной карциномы головы и шеи, включая новообразования, прежде всего эпителиального характера, например, в случае карциномы молочной железы, эпидермальной гиперпролиферации (в отличие от рака), прежде всего псориаза, гиперплазии предстательной железы, или лейкоза, прежде всего острого миелоидного лейкоза (AML) и хронического миелоидного лейкоза (CML).

Соединение формулы I или его применение вызывает регрессию опухолей или позволяет проводить профилактику развития метастаз опухолей и роста метастаз (а также микрометастаз).

Ангиогенез является абсолютно необходимым условием образования опухолей, максимальный диаметр которых составляет более приблизительно 1-2 мм, вплоть до этого предела кислород и питательные вещества поступают в опухолевые клетки за счет диффузии. Таким образом, каждая опухоль в процессе роста после достижения определенного размера, независимо от природы и причины ее развития, зависит от ангиогенеза. Три принципиальных механизма играют важную роль в активности ингибиторов ангиогенеза в отношении опухолей: 1) подавление роста сосудов, прежде всего капилляров, питающих кровью опухоли, расположенные вне сосудов, что приводит к подавлению роста сети опухолей за счет баланса между апоптозом и пролиферацией, 2) предотвращение миграции опухолевых клеток вследствие отсутствия кровотока в опухоли и из опухолей и 3) подавление пролиферации эндотелиальных клеток, что приводит к предотвращению паракринного рост-стимулирующего эффекта, влияющего на окружающие ткани с участием эндотелиальных клеток, обычно выстилающих сосуды.

Соединения формулы I, благодаря способности ингибировать киназу Tie-2 и, следовательно, модулировать ангиогенез, являются прежде всего пригодными для лечения заболеваний или нарушений, связанных с аномальной активностью киназы Tie-2, прежде всего с ее сверхэкспрессией. Наиболее предпочтительными среди таких заболеваний являются прежде всего ретинопатиии (например, ишемические ретинопатии), дегенерация желтого пятна (например, связанная с возрастом), псориаз, ожирение, гемангиобластома, гемангиома, воспалительные заболевания, такие как ревматоидные или ревматические воспалительные заболевания, прежде всего артрит, такой как ревматоидный артрит, или другие хронические воспалительные нарушения, такие как хроническая астма, артериальный атеросклероз или атеросклероз после трансплантации, эндометриоз, и прежде всего новообразования, например так называемые солидные опухоли (прежде всего рак желудочно-кишечного тракта, поджелудочной железы, молочной железы, желудка, шейки матки, мочевого пузыря, почек, предстательной железы, яичников, эндометрия, легкого, мозга, меланома, саркома Капоши, плоскоклеточная карцинома головы и шеи, злокачественная плевральная мезотериома, лимфома или множественная миелома) и другие жидкие опухоли (например, лейкозы).

Соединения формулы I прежде всего можно использовать для профилактики или лечения заболеваний, которые развиваются в связи с устойчивым ангиогенезом, таким как рестеноз, например рестеноз, вызванный стентами, болезнь Крона, болезнь Ходжкина, глазные заболевания, такие как диабетическая ретинопатия и неоваскулярная глаукома, заболевания почек, такие как гломерулонефрит, диабетическая нефропатия, воспалительное заболевание кишечника, злокачественный нефросклероз, тромботические микроангиопатические синдромы, отторжение трансплантатов (например, хроническое отторжение) и гломерулопатия, фиброзные заболевания, такие как цирроз печени, пролиферативные заболевания мезангиальных клеток, повреждения нервной ткани, а также для подавления повторной закупорки сосудов после лечения баллонным катетером, для применения при реконструкции сосудов или после использования механических устройств для удерживания сосудов в открытом состоянии, таких как стенты, в качестве иммунодепрессантов, в качестве средств для безрубцового ранозаживления, а также для лечения возрастных пятен и контактного дерматита.

Настоящее изобретение предпочтительно относится к применению соединений формулы I или их фармацевтически пригодных солей для лечения указанных выше солидных опухолей.

Точная доза соединений формулы I для модулирования активности киназы Tie-2 зависит от ряда факторов, включающих организм пациента, природу и тяжесть состояния, предназначенного для лечения, и способ введения. Соединение формулы I вводят любым способом, включая пероральный, парентеральный, например внутрибрюшинный, внутривенный, внутримышечный, подкожный, внутриопухолевый или ректальный, или энтеральный способы. Предпочтительно соединение формулы I вводят пероральным способом, причем предпочтительная суточная доза составляет от 1 до 300 мг/кг массы тела или, для наиболее крупных приматов, суточная доза составляет от 50 до 5000, предпочтительно от 500 до 3000 мг. Предпочтительная суточная доза для перорального введения составляет от 1 до 75 мг/кг массы тела, или, для наиболее крупных приматов, суточная доза составляет от 10 до 2000 мг, которую вводят в виде однократной дозы или в виде разделенных доз, например, 2 раза в сут.

В большинстве случаев сначала вводят небольшую дозу, а затем ее постепенно увеличивают до достижения оптимальной дозы для пациента, который проходит курс лечения. Таким образом, верхний предел дозы зависит от побочных эффектов и определяется для пациентов в ходе клинических испытаний.

Соединения формулы I смешивают с одним или более фармацевтически приемлемыми носителями и, необязательно, с одним или более другими стандартными фармацевтическими адъювантами и вводят энтеральным способом, например пероральным способом в форме таблеток, капсул, микротаблеток и т.п., или парентеральным способом, например внутрибрюшинным или внутривенным способом в виде стерильных растворов или суспензий для инъекций. Композиции для введения энтеральным или парентеральным способом получают стандартными способами.

Примеры

Эффективность пиримидиламинобензамидов формулы I, предназначенных для лечения заболеваний, зависимых от активности киназы Tie-2, оценивают, как описано ниже. Здесь лишь иллюстрируется настоящее изобретение и не ограничивается его объем.

Пример

Автофосфорилирование рецепторной киназы Tie-2

Ингибирование автофосфорилирования рецепторной киназы Tie-2 определяли в эксперименте in vitro с использовнием клеток, таких как трансфектированные клетки COS (№ по каталогу АТСС: CRL-1651), которые устойчиво экспресируют киназу Tie-2 человека (№ по каталогу SwissProt Асе Q02763) и которые высевали в полную культуральную среду (содержащую 10% эмбриональной телячьей сыворотки (ЭТС)) в 6-луночные культуральные планшеты и инкубировали при 37°С в присутствии 5% СО₂ до приблизительно 90% конфлюентности. Исследуемые соединения разбавляли культуральной средой (не содержащей ЭТС и содержащей 0,1% бычьего сывороточного альбумина) и добавляли в клетки. Контрольные образцы содержали среду в отсутствии исследуемых соединений. Через 40 мин инкубирования при 37°С в клетки добавляли ортованадат до конечной концентрации 10 мМ. После инкубирования в течение 20 мин при 37°С клетки дважды промывали ледяным ФБС (фосфатно-солевой буферный раствор) и немедленно лизировали в 100 мкл буферного раствора для лизиса (на одну лунку). Затем для удаления клеточных ядер лизаты центрифугировали и в супернатантах определяли концентрацию белка с использованием коммерческого набора для определения белка (BIORAD). Полученные лизаты использовали или хранили при -20°С.

Степень фосфорилирования киназы Tie-2 определяли с использованием сандвич-метода ИФА: моноклональные антитела против киназы Tie-2 (например, клон anti-Tie2 AB33, Upstate, № по каталогу 05-584 или аналогичные моноклональные антитела) иммобилизовали с использованием 0,1 мл раствора с концентрацией 2 мкг/мл на черных планшетах для ИФА (OptiPlate^TM HTRF-96 фирмы Packard). Затем планшеты промывали и оставшиеся свободные участки связывания белков блокировали с использованием 3% раствора реагента TopBlock® (фирмы Juro, № по каталогу ТВ232010) в фосфатно-солевом буферном растворе, содержащем Твин 20® (монолаурат полиоксиэтилен(20)сорбита фирмы ICI/Uniquema, ТФСБ). Затем лизаты клеток (100 мкг белка в лунке) инкубировали в указанных планшетах в течение ночи при 4°С в присутствии конъюгата антител против фосфотирозина с щелочной фосфатазой (PY20:AP фирмы Zymed). Планшеты снова промывали и связывание антител против фосфотирозина с фосфорилированным рецептором регистрировали с использованием люминесцентного субстрата АР (продукт CDP-Star, готовый к употреблению, в комбинации с реагентом Emerald II, фирмы Applied Biosystems). Люминесценцию измеряли на сцинтилляционном счетчике для микропланшетов Packard Top Count. Разность между сигналами положительного контроля (стимулированного ванадатом) и отрицательного контроля (не стимулированного) соответствовало максимуму фосфорилирования киназы Tie-2 (100%). Активность исследуемых соединений оценивали по ингибированию в процентах максимального фосфорилирования киназы Tie-2, a концентрацию соединения, которая вызывала половину максимального ингибирования, определяли в виде величины IC₅₀ (доза для ингибирования 50% активности). Для соединений формулы I предпочтительные величины IC50 составляли от 0,0005 до 5 мкМ, например более предпочтительно от 0,001 до 1 мкМ. Например, величины IC50 для 4-метил-3-[[4-(3-пиридинил)-2-пиримидинил]амино]-N-[5-(4-метил-1Н-имидазол-1-ил)-3-(трифторметил)фенил]бензамида при разбавлении до концентрации 500, 100, 10 или 1 нМ составляли от 10 до 20 нМ.

Полученные данные свидетельствуют о преимущественном профиле селективности соединений формулы I, то есть о достаточно высокой специфичности ингибирования киназы Tie-2, причем селективность не обязательно означает, что только киназа Tie-2 ингибируется на преимущественном и фармацевтически приемлемом уровне.

1. Применение 4-метил-3-[[4-(3-пиридинил)-2-пиримидинил]амино]-N-[5-(4-метил-1H-имидазол-1-ил)-3-(трифторметил)фенил]бензамида или его фармацевтически приемлемых солей для получения фармацевтической композиции, предназначенной для лечения заболевания, зависимого от активности протеинкиназы, где указанное заболевание является легочной гипертензией.

2. Способ лечения заболевания, зависимого от активности киназы, прежде всего киназы Tie-2, где указанное заболевание является легочной гипертензией, включающий введение теплокровному животному, прежде всего человеку, нуждающемуся в таком лечении, фармацевтически эффективного количества 4-метил-3-[[4-(3-пиридинил)-2-пиримидинил]амино]-N-[5-(4-метил-1Н-имидазол-1-ил)-3-(трифторметил)фенил]бензамида или его фармацевтически приемлемой соли.