Ингибиторы взаимодействия между mdm2 и р53

Ингибиторы взаимодействия между mdm2 и р53

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Область техники, к которой относится изобретение

Изобретение относится к соединениям и композициям, содержащим указанные соединения, действующим в качестве ингибиторов взаимодействия между MDM2 и p53. Кроме того, настоящее изобретение предоставляет способы получения раскрытых ингибиторов, композиций, включающих их, и способы их применения, например, в качестве лекарственных средств.

p53 представляет собой супрессорный белок опухоли, который играет ключевую роль в регуляции баланса между клеточной пролиферацией и остановкой/апоптозом клеточного роста. При нормальных условиях время полужизни p53 очень короткое и, следовательно, содержание p53 в клетках находится на низком уровне. Однако в ответ на повреждение клеточной ДНК или клеточный стресс (например, активацию онкогена, эрозию теломера, гипоксию) уровень содержания ρ53 возрастает. Это увеличение уровня p53 приводит к активации транскрипции ряда генов, которые приводят клетку к остановке роста или к процессу апоптоза. Таким образом, важная функция ρ53 заключается в том, чтобы предотвратить неконтролируемую пролиферацию поврежденных клеток и, тем самым, защитить организм от развития рака.

MDM2 представляет собой основной негативный регулятор функции ρ53. Он формирует негативную ауторегуляторную петлю путем связывания с аминоконцевым трансактивирующим доменом p53 и, таким образом, MDM2 ингибирует способность p53 активировать транскрипцию и делает p53 мишенью протеолитической деградации. В нормальных условиях эта регуляторная петля отвечает за поддержание низких уровней p53. Однако в опухоли с p53 дикого типа равновесная концентрация активного p53 может быть увеличена за счет противодействия взаимодействию между MDM2 и p53. В результате это приведет к восстановлению опосредованных p53 про-апоптических и анти-пролиферативных эффектов в таких опухолевых клетках.

MDM2 представляет собой клеточный протоонкоген. Сверхэкспрессия MDM2 была отмечена в ряде видов рака. Повышенная экспрессия MDM2 имеет место в разнообразных опухолях в результате амплификации генов или повышенной транскрипции или трансляции. Механизм, за счет которого амплификация MDM2 способствует онкогенезу, по меньшей мере, частично относится к его взаимодействию с p53. В клетках со сверхэкспрессией MDM2 блокируется защитная функция p53, и, в связи с этим, клетки становятся неспособными к ответу на повреждение ДНК или на клеточный стресс путем повышения уровня p53, что приводит к остановке роста клетки и/или апоптозу. Соответственно, после повреждения ДНК и/или клеточного стресса сверхэкспрессирующие MDM2 клетки становятся свободными для продолжения пролиферации и приобретают онкогенный фенотип. В этих условиях нарушение взаимодействия p53 и MDM2 позволит высвободить p53 и, следовательно, позволит функционировать нормальным сигналам остановки роста и/или апоптоза.

MDM2 также может обладать отдельными функциями в дополнение к ингибированию p53. Например, было показано, что MDM2 непосредственно взаимодействует с pRb-регулируемым фактором транскрипции E2F1/DP1. Это взаимодействие может иметь решающее значение для p53-независимых онкогенных воздействий MDM2. Домен E2F1 показывает поразительное сходство с MDM2-связывающимся доменом p53. Так как взаимодействия MDM2 как с p53, так и с E2F1 локализованы на одном и том же связывающемся сайте MDM2, то ожидается, что MDM2/p53 антагонисты будут не только активировать клеточный p53, но также регулировать воздействия E2F1, которые обычно не регулируются в опухолевых клетках.

Кроме того, терапевтическая эффективность повреждающих ДНК средств, используемых в настоящее время (химиотерапия и лучевая терапия), может быть ограничена путем негативной регуляции p53 посредством MDM2. Таким образом, если прерывается обратная связь ингибирования p53 посредством MDM2, то увеличение функциональных уровней ρ53 приведет к увеличению терапевтической эффективности таких средств за счет восстановления функции p53 дикого типа, что приводит к апоптозу и/или обращению связанной с p53 лекарственной устойчивости. Было продемонстрировано, что сочетание ингибирования MDM2 и повреждающих ДНК обработок in vivo приводит к синергичным противоопухолевым эффектам (Vousden K.H., Cell, Vol. 103, 691-694, 2000).

Таким образом, нарушение взаимодействия MDM2 и ρ53 обеспечивает подход для терапевтического вмешательства в опухоли с диким типом p53, возможно даже проявление анти-пролиферативных эффектов в опухолевых клетках, которые не имеют функциональных p53 и, кроме того, может сделать чувствительными к химиотерапии и радиотерапии онкогенные клетки.

Уровень техники

В JP 11130750, опубликованном 18 мая 1999 года, описаны среди прочих замещенные фениламинокарбонилиндолильные производные в качестве антагонистов рецептора 5-HT.

В EP 1129074, опубликованном 18 мая 2000 года, описаны амиды антраниловой кислоты в качестве ингибиторов рецепторов факторов роста сосудистого эндотелия (VEGFR) и применимые для лечения ангиогенных расстройств.

В EP 1317443, опубликованном 21 марта 2002 года, раскрыты трициклические производные третичных аминов, применимые в качестве модуляторов хемокинового рецептора CXCR4 или CCR5 для лечения вируса иммунодефицита человека и вируса иммунодефицита кошек.

В EP 1379239, опубликованном 10 октября 2002 года, раскрыты N-(2-арилэтил)бензиламины в качестве антагонистов рецептора 5-HT₆.

В WO00/15357, опубликованном 23 марта 2000 года, описаны пиперазин-4-фенильные производные в качестве ингибиторов взаимодействия между MDM2 и p53. В EP1137418, опубликованном 8 июня 2000 года, представлены трициклические соединения для восстановления конформационной стабильности белка вида p53.

В EP1443937, опубликованном 22 мая 2003 года, описаны замещенные 1,4-бензодиазепины и их применение в качестве ингибиторов взаимодействий MDM2-p53.

В EP 1458380, опубликованном 26 июня 2003 года, представлены цис-2,4,5-трифенилимидазолоны, которые ингибируют взаимодействие белка MDM2 с p53-подобными пептидами и обладают антипролиферативной активностью.

В EP 1519932, опубликованном 15 января 2004 года, раскрыты бисарилсульфонамидные соединения, которые связываются с MDM2 и могут применяться в терапии рака.

В настоящее время сохраняется потребность в эффективных и сильнодействующих малых молекулах, которые ингибируют взаимодействия между MDM2 и p53.

Соединения по настоящему изобретению отличаются от предшествующего уровня техники по структуре, по их фармакологической активности и/или по фармакологической эффективности.

Описание изобретения

Настоящее изобретение предоставляет соединения, композиции и способы, ингибирующие взаимодействия между MDM2 и p53, для лечения рака. Кроме того, соединения и композиции по настоящему изобретению пригодны для повышения эффективности химиотерапии и лучевой терапии.

Настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I)

их N-оксидной форме, аддитивной соли или стереохимически изомерной форме, где

m равно 0, 1 или 2 и, когда m равно 0, то подразумевается прямая связь;

n равно 0, 1, 2, 3 или 4 и, когда n равно 0, то подразумевается прямая связь;

p равно 0 или 1 и, когда p равно 0, то подразумевается прямая связь;

s равно 0 или 1 и, когда s равно 0, то подразумевается прямая связь;

t равно 0 или 1 и, когда t равно 0, то подразумевается прямая связь;

R¹ и R² каждый независимо представляет собой водород, галоген, C_1-6алкил, C_1-6алкилокси, арилC_1-6алкилокси, гетероарилC_1-6алкилокси, фенилтио, гидроксиC_1-6алкилкарбонил, C_1-6алкил, замещенный заместителем, выбранным из амино, арила и гетероарила; или C_3-7циклоалкил, замещенный заместителем, выбранным из амино, арила и гетероарила;

A представляет собой радикал, выбранный из

где R⁴ и R⁵ каждый независимо выбран из водорода, галогена, C_1-6алкила, полигалогенC_1-6алкила, циано, цианоC_1-6алкила, гидроксиC_1-6алкила, гидрокси, амино, C_1-6алкилокси, C_1-6алкилкарбонила, метилсульфониламино, арила или гетероарила;

Z представляет собой радикал, выбранный из

где

R⁶ и R⁷ каждый независимо выбран из водорода, галогена, гидрокси, амино, C_1-6алкила, нитро, полигалогенC_1-6алкила, циано, цианоC_1-6алкила, тетразолоC_1-6алкила, арила, гетероарила, арилC_1-6алкила, гетероарилC_1-6алкила, арил(гидрокси)C_1-6алкила, гетероарил(гидрокси)C_1-6алкила, арилкарбонила, гетероарилкарбонила, C_1-6алкилкарбонила, арилC_1-6алкилкарбонила, гетероарилC_1-6алкилкарбонила, C_1-6алкилокси, C_3-7циклоалкилкарбонила, C_3-7циклоалкил(гидрокси)C_1-6алкила, арилC_1-6алкилоксиC_1-6алкила, C_1-6алкилоксиC_1-6алкилоксиC_1-6алкила, C_1-6алкилкарбонилоксиC_1-6алкила, C_1-6алкилоксикарбонилC_1-6алкилоксиC_1-6алкила, гидроксиC_1-6алкилоксиC_1-6алкила, C_1-6алкилоксикарбонилC_2-6алкенилC_1-6алкилоксиC_1-6алкила, C_1-6алкилоксикарбонила, C_1-6алкилкарбонилокси, аминокарбонила, гидроксиC_1-6алкила, аминоC_1-6алкила, гидроксикарбонила, гидроксикарбонилC_1-6алкила и -(CH₂)_v-(C(=O)_r)-(CHR¹⁰)_u-NR⁸R⁹; где

v равно 0, 1, 2, 3, 4, 5 или 6 и, когда v равно 0, то подразумевается прямая связь;

r равно 0 или 1 и, когда r равно 0, то подразумевается прямая связь;

u равно 0, 1, 2, 3, 4, 5 или 6 и, когда u равно 0, то подразумевается прямая связь;

R¹⁰ представляет собой водород или C_1-6алкил;

R⁸ и R⁹ каждый независимо выбран из водорода, C_1-12алкила, C_1-6алкилкарбонила, C_1-6алкилсульфонила, арилC_1-6алкилкарбонила, C_3-7циклоалкила, C_3-7циклоалкилкарбонила, -(CH₂)_k-NR¹¹R¹², C_1-12алкила, замещенного заместителем, выбранным из гидрокси, гидроксикарбонила, циано, C_1-6алкилоксикарбонила, C_1-6алкилокси, арила или гетероарила; или C_3-7циклоалкила, замещенного заместителем, выбранным из гидрокси, C_1-6алкилокси, арила, амино, арилC_1-6алкила, гетероарила или гетероарилC_1-6алкила; или R⁸ и R⁹ вместе с азотом, к которому они присоединены, могут необязательно образовывать морфолинил, пиперидинил, пирролидинил, пиперазинил или пиперазинил, замещенный заместителем, выбранным из C_1-6алкила, арилC_1-6алкила, арилC_1-6алкилоксикарбонила, гетероарилC_1-6алкила, C_3-7циклоалкила и C_3-7циклоалкилC_1-6алкила; где

k равно 0, 1, 2, 3, 4, 5 или 6 и, когда k равно 0, то подразумевается прямая связь;

R¹¹ и R¹² каждый независимо выбран из водорода, C_1-6алкила, арилC_1-6алкилоксикарбонила, C_3-7циклоалкила, C_1-12алкила, замещенного заместителем, выбранным из гидрокси, C_1-6алкилокси, арила и гетероарила; и C_3-7циклоалкила, замещенного заместителем, выбранным из гидрокси, C_1-6алкилокси, арила, арилC_1-6алкила, гетероарила, и гетероарилC_1-6алкила; или

R¹¹ и R¹² вместе с азотом, к которому они присоединены, могут необязательно образовывать морфолинил, пиперазинил или пиперазинил, замещенный C_1-6алкилоксикарбонилом;

арил представляет собой фенил или нафталинил;

каждый фенил или нафталинил необязательно может быть замещен одним, двумя или тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена, гидрокси, гидроксиC_1-6алкила, C_1-6алкила, амино, полигалогенC_1-6алкила и C_1-6алкилокси; и каждый фенил или нафталинил необязательно может быть замещен бивалентным радикалом, выбранным из метилендиокси и этилендиокси;

гетероарил представляет собой пиридинил, индолил, хинолинил, имидазолил, фуранил, тиенил, оксадиазолил, тетразолил, бензофуранил или тетрагидрофуранил;

каждый пиридинил, индолил, хинолинил, имидазолил, фуранил, тиенил, оксадиазолил, тетразолил, бензофуранил или тетрагидрофуранил необязательно может быть замещен одним, двумя или тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена, гидрокси, C_1-6алкила, амино, полигалогенC_1-6алкила, арила, арилC_1-6алкила или C_1-6алкилокси; и

каждый пиридинил, индолил, хинолинил, имидазолил, фуранил, тиенил, бензофуранил или тетрагидрофуранил необязательно может быть замещен бивалентным радикалом, выбранным из метилендиокси или этилендиокси.

Соединения формулы (I) могут также существовать в их таутомерных формах. Несмотря на то, что такие формы прямо не указаны в вышеприведенной формуле, они подразумеваются включенными в объем настоящего изобретения.

Ряд терминов, используемых в предыдущих определениях и далее по тексту, приведен ниже. Эти термины иногда используются индивидуально или в составных терминах.

Используемый в предыдущих определениях и далее по тексту галоген представляет собой фтор, хлор, бром и йод; C_1-6алкил определяет прямую и разветвленную цепь насыщенного углеводородного радикала, имеющего от 1 до 6 атомов углерода, такого как, например, метил, этил, пропил, бутил, пентил, гексил, 1-метилэтил, 2-метилпропил, 2-метилбутил, 2-метилпентил и т.п.; гидроксиC_1-6алкил определяет замещенную гидрокси прямую и разветвленную цепь насыщенного углеводородного радикала, имеющего от 1 до 6 атомов углерода; тригалогенметил определяет метил, содержащий три одинаковых или различных галогеновых заместителя, например, трифторметил; C_3-7циклоалкил включает циклическую углеводородную группу, имеющую от 3 до 10 атомов углерода, такую как циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклопентенил, циклогексил, циклогексенил, циклогептил и т.п.

Термин «аддитивная соль» включает соли, которые способны образовывать соединения формулы (I) с органическими или неорганическими основаниями, такими как амины, основания щелочных металлов и основания щелочноземельных металлов, или четвертичные аммониевые основания, или с органическими или неорганическими кислотами, такими как неорганические кислоты, сульфоновые кислоты, карбоновые кислоты или фосфорсодержащие кислоты.

Термин «аддитивная соль» дополнительно включает фармацевтически приемлемые соли, комплексы и сольваты металлов и их соли, которые способны образовывать соединения формулы (I).

Термин «фармацевтически приемлемые соли» подразумевает фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные или основно-аддитивные соли. Фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные или основно-аддитивные соли, как подразумевается выше, включают терапевтически активные формы нетоксичной кислотно-аддитивной и нетоксичной основно-аддитивной соли, которые способны образовывать соединения формулы (I). Соединения формулы (I), которые обладают основными свойствами, могут быть преобразованы в их фармацевтически приемлемую кислотно-аддитивную соль путем обработки указанной основной формы подходящей кислотой. Подходящие кислоты включают, например, неорганические кислоты, такие как галогенводородные кислоты, например, хлористоводородная или бромистоводородная кислота; серная; азотная; фосфорная и подобные кислоты; или органические кислоты, такие как, например, уксусная, пропановая, гидроксиуксусная (гликолевая), молочная, пировиноградная, щавелевая, малоновая, янтарная (т.е. бутандиовая кислота), малеиновая, фумаровая, яблочная, винная, лимонная, метансульфоновая, этансульфоновая, бензолсульфоновая, п-толуолсульфоновая, цикламовая, салициловая, п-аминосалициловая, памовая и подобные кислоты.

Соединения формулы (I), которые обладают кислотными свойствами, могут быть преобразованы в их фармацевтически приемлемые основно-аддитивные соли путем обработки указанной кислотной формы подходящим органическим или неорганическим основанием. Соответствующие солевые формы основания включают, например, аммониевые соли, соли щелочных и щелочноземельных металлов, например, соли лития, натрия, калия, магния, кальция и тому подобное, соли органических оснований, например, соли бензатина, N-метил-D-глюкамина, гидрабамина, и соли с аминокислотами, такими как, например, аргинин, лизин и тому подобное.

Термин кислотно-аддитивная или основно-аддитивная соль также включает гидраты и формы с добавлением растворителя, которые способны образовывать соединения формулы (I). Примерами таких форм являются, например, гидраты, алкоголяты и тому подобное.

Термин «комплексы металлов» подразумевает комплекс, образованный между соединением формулы (I) и одной или несколькими органической или неорганической солью или солями металла. Примеры указанных органических или неорганических солей включают галогениды, нитраты, сульфаты, фосфаты, ацетаты, трифторацетаты, трихлорацетаты, пропионаты, тартраты, сульфонаты, например, метилсульфонаты, 4-метилфенилсульфонаты, салицилаты, бензоаты и тому подобное металлов второй основной группы периодической системы, например, соли магния или кальция, третьей или четвертой основной группы, например, соли алюминия, олова, свинца, а также с первой по восьмую переходной группы периодической системы, такие как, например, хрома, марганца, железа, кобальта, никеля, меди, цинка и тому подобное.

Вышеуказанный термин «стереохимически изомерные формы соединений формулы (I)» определяет все возможные соединения, состоящие из тех же самых атомов, связанных той же самой последовательностью связей, но имеющих различные трехмерные структуры, которые не являются равноценными, которыми могут обладать соединения формулы (I). Если не упомянуто или не указано иное, химическое обозначение соединения охватывает смесь всех возможных стереохимически изомерных форм, которые указанное соединение может иметь. Указанная смесь может содержать все диастереомеры и/или энантиомеры основной молекулярной структуры указанного соединения. Все стереохимически изомерные формы соединений формулы (I), как в чистом виде, так и в смеси друг с другом, включены в объем настоящего изобретения.

Особый интерес представляют такие соединения формулы (I), которые являются стереохимически чистыми.

Чистые стереоизомерные формы соединений и промежуточных соединений, упомянутые в данном описании, определяют как изомеры, по существу свободные от других энантиомерных или диастереомерных форм такой же молекулярной структуры указанных соединений или промежуточных соединений. В частности, термин «стереоизомерно чистые» относится к соединениям или промежуточным соединениям, имеющим стереоизомерный избыток по меньшей мере от 80% (т.е. минимум 90% одного изомера и максимум 10% других возможных изомеров) до стереоизомерного избытка 100% (т.е. 100% одного изомера и никаких других), более конкретно, соединения или промежуточные соединения, имеющие стереоизомерный избыток от 90% до 100%, еще более конкретно, имеющие стереоизомерный избыток от 94% до 100% и наиболее конкретно, имеющие стереоизомерный избыток от 97% до 100%. Термины «энантиомерно чистый» и «диастереомерно чистый» следует понимать аналогичным образом, но имеющими отношение к энантиомерному избытку, соответственно, диастереомерному избытку в обсуждаемой смеси.

Таутомерные формы соединений формулы (I) подразумеваются включающими такие соединения формулы (I), где, например, енольная группа преобразована в кетогруппу (кето-енольная таутомерия).

N-оксидные формы соединений формулы (I) подразумеваются включающими такие соединения формулы (I), где один или несколько атомов азота окислены до так называемого N-оксида, более конкретно, такие N-оксиды, где один или несколько пиперидиновых, пиперазиновых или пиридазинильных азотов являются N-окисленными.

Соединения формулы (I) могут быть преобразованы в соответствующие N-оксидные формы с использованием следующих известных в данной области методик по преобразованию трехвалентного азота в его N-оксидную форму. Указанная реакция N-окисления, как правило, может быть осуществлена путем взаимодействия исходного вещества формулы (I) с подходящим органическим или неорганическим пероксидом. Подходящие неорганические пероксиды включают, например, перекись водорода, пероксиды щелочных или щелочноземельных металлов, например, пероксид натрия, пероксид калия; подходящие органические пероксиды могут включать пероксикислоты, такие как, например, бензолкарбопероксокислота или галогензамещенная бензолкарбопероксокислота, например, 3-хлорбензолкарбопероксокислота, пероксоалкановые кислоты, например, пероксоуксусная кислота, алкилгидропероксиды, например, трет-бутилгидропероксид. Подходящими растворителями являются, например, вода, низшие спирты, например, этанол и тому подобное, углеводороды, например, толуол, кетоны, например, 2-бутанон, галогенированные углеводороды, например, дихлорметан, и смеси таких растворителей.

Настоящее изобретение также предполагает включение любых изотопов атомов, присутствующих в соединениях по изобретению. Например, изотопы водорода включают тритий и дейтерий, а изотопы углерода включают C-13 и С-14.

Во всех случаях использования в данном описании термин «соединения формулы (I)» подразумевает включение также N-оксидных форм, фармацевтически приемлемых кислотно-аддитивных или основно-аддитивных солей и всех стереоизомерных форм.

Первая группа представляющих интерес соединений состоит из таких соединений формулы (I), где применяется одно или несколько из следующих ограничений:

a) m равно 0;

b) n равно 0 или 2;

c) p равно 1;

d) s равно 0;

e) t равно 0;

f) R¹ и R² каждый независимо представляет собой водород;

g) A представляет собой радикал, выбранный из (a-15), (a-21), (a-30), (a-39) или (a-40);

h) R⁴ и R⁵ каждый независимо выбран из водорода или C_1-6алкилокси;

i) Z представляет собой радикал (b-2); или

j) R⁶ и R⁷ каждый независимо выбран из водорода.

Вторая группа представляющих интерес соединений состоит из таких соединений формулы (I) и таких соединений описанной выше группы, где применяется одно или несколько из следующих ограничений:

a) m равно 0;

b) n равно 2;

c) p равно 1;

d) s равно 0;

e) t равно 0;

f) R¹ и R² каждый независимо представляет собой водород;

g) A представляет собой радикал, выбранный из (a-21), (a-39) или (a-40);

h) R⁴ и R⁵ каждый независимо выбран из водорода или C_1-6алкилокси;

i) Z представляет собой радикал (b-2); или

j) R⁶ и R⁷ каждый независимо выбран из водорода.

Группа предпочтительных соединений состоит из таких соединений формулы (I) или любой их подгруппы, где m равно 0; n равно 0 или 2; p равно 1; s равно 0; t равно 0; R¹ и R² каждый независимо представляет собой водород; A представляет собой радикал, выбранный из (a-15), (a-21), (a-30), (a-39) или (a-40); R⁴ и R⁵ каждый независимо выбран из водорода или C_1-6алкилокси; Z представляет собой радикал (b-2); или R⁶ и R⁷ каждый независимо выбран из водорода.

Группа более предпочтительных соединений состоит из таких соединений формулы (I) или любой их подгруппы, где m равно 0; n равно 2; p равно 1; s равно 0; t равно 0; R¹ и R² каждый независимо представляет собой водород; A представляет собой радикал, выбранный из (a-21), (a-39) или (a-40); R⁴ и R⁵ каждый независимо выбран из водорода или C_1-6алкилокси; Z представляет собой радикал (b-2); или R⁶ и R⁷ каждый независимо выбран из водорода.

Наиболее предпочтительными соединениями являются соединение № 2, соединение № 3 или соединение № 5.

Соед. № 2	Соед. № 3
Соед. № 5

Соединения формулы (I), их фармацевтически приемлемые соли и N-оксидные и стереохимически изомерные формы могут быть получены общепринятыми способами. Исходные вещества и некоторые промежуточные соединения являются известными соединениями и коммерчески доступны или могут быть получены согласно общепринятым реакционным методикам, известным в данной области.

Ряд таких способов получения будет описан далее более подробно. Другие способы получения конечных соединений формулы (I) описаны в примерах.

Соединения формулы (I) могут быть получены взаимодействием промежуточного соединения формулы (II) с промежуточным соединением формулы (III), где W представляет собой соответствующую уходящую группу, такую как, например, галоген, например, фтор, хлор, бром или йод, или радикал сульфонилокси, такой как метилсульфонилокси, 4-метилфенилсульфонилокси и подобные. Реакция может быть проведена в реакционно-инертном растворителе, таком как, например, спирт, например, метанол, этанол, 2-метоксиэтанол, пропанол, бутанол и тому подобное; эфир, например 4,4-диоксан, 1,1'-оксибиспропан и тому подобное; кетон, например, 4-метил-2-пентанон; или N,N-диметилформамид, нитробензол, ацетонитрил, уксусная кислота и тому подобное. Для поглощения кислоты, которая высвобождается в процессе реакции, можно использовать добавление подходящего основания, такого как, например, карбонат или гидрокарбонат щелочного или щелочноземельного металла, например, триэтиламин или карбонат натрия. Небольшое количество соответствующего йодида металла, например, йодида натрия или калия, может быть добавлено для активирования реакции. Перемешивание может увеличить скорость реакции. Реакцию удобно проводить при температуре в диапазоне от комнатной температуры до температуры кипения реакционной смеси с обратным холодильником, и, если требуется, реакцию можно проводить при повышенном давлении.

Соединения формулы (I), где p равно 1, именуемые здесь соединениями формулы (I-a), могут быть получены преобразованием промежуточных соединений формулы (IV) с помощью алюмогидрида лития в подходящем растворителе, таком как тетрагидрофуран.

Соединения формулы (I-a) могут быть также получены взаимодействием соответствующего карбоксальдегида формулы (VI) с промежуточным соединением формулы (V) в присутствии соответствующего реагента, такого как боргидрид натрия, например, тетрагидроборат натрия или нанесенный на полимер цианотригидроборат, в подходящем растворителе, таком как спирт, например, метанол.

Таким же способом соединения формулы (I), где t равно 1, именуемые здесь соединениями формулы (I-b), могут быть получены взаимодействием промежуточного соединения формулы (II) с соответствующим карбоксальдегидом формулы (VII).

Соединения формулы (I), где s равно 1, именуемые здесь соединениями формулы (I-c), могут быть получены взаимодействием промежуточного соединения формулы (VIII) с алюмогидридом лития в подходящем растворителе, таком как тетрагидрофуран.

Соединения формулы (I) или их промежуточные соединения могут быть также преобразованы друг в друга посредством известных в данной области реакций или трансформаций функциональных групп. Ряд таких трансформаций уже описан выше. Другими примерами являются гидролиз сложных эфиров соответствующих карбоновых кислот или спиртов; гидролиз амидов соответствующих карбоновых кислот или аминов; гидролиз нитрилов соответствующих амидов; аминогруппы у имидазола или фенила могут быть заменены водородом путем известных в данной области реакций диазотирования и последующей замены диазогруппы водородом; спирты могут быть преобразованы в простые и сложные эфиры; первичные амины могут быть преобразованы во вторичные или третичные амины; двойные связи могут быть гидрированы до соответствующих одинарных связей; йодный радикал у фенильной группы может быть преобразован в сложноэфирную группу путем введения моноксида углерода в присутствии подходящего палладиевого катализатора.

Промежуточные соединения формулы (II), где m равно 0 и s равно 0, именуемые здесь промежуточными соединениями формулы (II-a), могут быть получены реакцией восстановления нитрогруппы в амин, исходя из промежуточного соединения формулы (IX), в присутствии металлического катализатора, такого как никель Ренея, и подходящего восстановителя, такого как водород, в подходящем растворителе, таком как метанол или этанол.

Промежуточные соединения формулы (X), где s равно 0, могут быть получены взаимодействием промежуточного соединения формулы (XI) с промежуточным соединением формулы (XII) в присутствии соответствующих реагентов, таких как моногидрохлорид N'-(этилкарбонимидоил)-N,N-диметил-1,3-пропандиамина (EDC) и 1-гидрокси-1H-бензотриазол (HOBT). Реакция может быть проведена в присутствии основания, такого как триэтиламин, в подходящем растворителе, таком как смесь дихлорметана и тетрагидрофурана.

Промежуточные соединения формулы (VI) могут быть получены взаимодействием промежуточных соединений формулы (XIII) с алюмогидридом лития в подходящем растворителе, таком как тетрагидрофуран.

Промежуточные соединения формулы (VIII) могут быть получены взаимодействием промежуточного соединения формулы (XIV) с промежуточным соединением формулы (XV) в присутствии йодида 2-хлор-1-метилпиридиния и триэтиламина в подходящем растворителе, таком как ацетонитрил.

Промежуточные соединения формулы (IX), где p равно 1, именуемые здесь промежуточными соединениями формулы (IX-a), могут быть получены взаимодействием промежуточного соединения формулы (XVI) с промежуточным соединением формулы (XVII), где Q представляет собой соответствующую уходящую группу, такую как, например, галоген, например, фтор, хлор, бром или йод, или C_1-6алкилокси, например, метилокси, в диизопропилэтиламине.

Промежуточные соединения формулы (XIV) могут быть получены преобразованием промежуточного соединения формулы (XVIII) в присутствии гидроксида натрия и воды в подходящем растворителе, таком как этанол.

Промежуточные соединения формулы (XVIII), где m равно 0, именуемые здесь промежуточными соединениями формулы (XVIII-a), могут быть получены взаимодействием промежуточного соединения формулы (XVI) с промежуточным соединением формулы (XIX), где Q определен выше, в подходящем растворителе, таком как диизопропилэтиламин.

Промежуточные соединения формулы (V), где m, n и s равны 0, именуемые здесь промежуточными соединениями формулы (V-a), могут быть получены преобразованием промежуточного соединения формулы (XX) с помощью раствора гидрохлорида.

Промежуточные соединения формулы (XX) могут быть получены взаимодействием промежуточного соединения формулы (XXI) с промежуточным соединением формулы (III), где W представляет собой соответствующую уходящую группу, такую как, например, галоген. Реакция может быть проведена в реакционно-инертном растворителе, таком как, например, уксусная кислота.

Соединения формулы (I) и некоторые промежуточные соединения могут иметь по меньшей мере один стереогенный центр в своей структуре. Такие стереогенные центры могут быть представлены в R- или S-конфигурации.

Некоторые соединения формулы (I) и некоторые промежуточные соединения в настоящем изобретении могут содержать асимметрический атом углерода. Стереохимически чистые изомерные формы указанных соединений и указанных промежуточных соединений могут быть получены с использованием известных в данной области методик. Например, диастереоизомеры могут быть разделены физическими способами, такими как селективная кристаллизация или хроматографические методы, например, распределение противотока, жидкостная хроматография и подобные способы. Энантиомеры могут быть получены из рацемических смесей первичным преобразованием указанных рацемических смесей в смеси диастереомерных солей или соединений с помощью подходящих разделяющих агентов, таких как, например, хиральные кислоты; затем физическим разделением указанных смесей диастереомерных солей или соединений с использованием, например, селективной кристаллизации, хроматографии со сверхкритической подвижной фазой или хроматографических методов, например, жидкостной хроматографии, и подобных способов; и заключительным преобразованием указанных выделенных диастереомерных солей или соединений в соответствующие энантиомеры. Стереохимически чистые изомерные формы можно также получить из стереохимически чистых изомерных форм соответствующих промежуточных соединений и исходных веществ, обеспечивая стереоспецифическое протекание промежуточных реакций.

Соединения формулы (I), их фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли и стереоизомерные формы обладают ценными фармакологическими свойствами, заключающимися в ингибировании взаимодействия между p53 и MDM2.

Используемый в настоящем описании термин «MDM2» означает белок, полученный в результате экспрессии гена mdm2. В значении этого термина MDM2 охватывает все белки, кодируемые mdm2, их мутанты, альтернативные слои их белков и их фосфорилированные белки. Кроме того, как используется в настоящем описании, термин «MDM2» включает аналоги MDM2, например, MDMX, также известный как MDM4, и гомологи и аналоги MDM2 других животных, например, гомолог HDM2 человека или аналог HDMX человека.

Используемый в настоящем описании термин «ингибирующий взаимодействие» или «ингибитор взаимодействия» обозначает предотвращение или понижение непосредственной или косвенной ассоциации одной или нескольких молекул, пептидов, белков, ферментов или рецепторов; или предотвращение или понижение обычной активности одной или нескольких молекул, пептидов, белков, ферментов или рецепторов.

Термин «ингибитор взаимодействия между p53 и MDM2» или «ингибитор p53-MDM2» используется в настоящем документе для описания агента, который повышает экспрессию p53 в анализе, описанном в C.1. Это повышение может быть вызвано за счет одного или нескольких следующих механизмов воздействия, но не ограничивается приведенным:

- ингибирование взаимодействия между p53 и MDM2,

- непосредственное связывание либо с MDM2, либо с белком p53,

- взаимодействие с вышележащими или нижележащими мишенями, например киназами, или ферментативная активность, включенная в убиквитинирование или SUMO модификацию,

- изолирование или транспортировка MDM2 и p53 в различные клеточные компартменты,

- модуляция белков, связывающихся с MDM2, например (но не ограничиваясь приведенным), p73, E2F-1, Rb, p21wafl или cipl,

- реактивация или нарушение экспрессии MDM2 и/или активности MDM2, например (но не ограничиваясь приведенным), воздействием на его клеточную локализацию, посттрансляционную модификацию, ядерный экспорт или убиквитинлигазную активность,

- прямая или косвенная стабилизация белка p53, например, путем удерживания его в функциональной структурной форме, или путем предотвращения его агрегирования,

- повышение экспрессии p53 или экспрессии членов семейства p53, например, p63 и p73,

- повышение активности p53, например (но не ограничиваясь приведенным), путем повышения его транскрипционной активности и/или

- повышение экспрессии генов и белков p53-сигнального пути, например (но не ограничиваясь приведенным), p21wafl, cipl, MIC-I (GDF-15), PIG-3 и ATF-3.

Таким образо