Замещенные 4-имидазолы, способ их получения и их применение

Замещенные 4-имидазолы, способ их получения и их применение

Иллюстрации

Показать все

Реферат

Настоящее изобретение относится к соединениям формулы I,

где R¹ представляет собой атом водорода или низший алкил;

R² представляет собой атом водорода или низший алкил;

R³ представляет собой атом водорода, низший алкил, низший алкокси, фенилокси, бензилокси, атом галогена или

низший алкил, замещенный атомом галогена;

R⁴ представляет собой атом водорода или низший алкил;

Х представляет собой -CH₂-, -CH- или -O-;

Y представляет собой -СН₂-, -CH₂CH₂-, -CH- или связь; когда Х представляет собой -O-, Y представляет собой -СН₂-;

Z представляет собой -СН₂- или -CH-;

m имеет значение 1 или 2; когда m имеет значение 2, R² могут быть одинаковыми или разными;

n имеет значение 1 или 2; когда n имеет значение 2, R³ могут быть одинаковыми или разными;

и к их фармацевтически приемлемым солям присоединения кислот.

Изобретение включает все их рацемические смеси, все соответствующие энантиомеры и/или оптические изомеры.

Кроме того, все таутомерные формы соединений формулы I также включены в объем настоящего изобретения.

Установлено, что соединения формулы I обладают высокой аффинностью к рецепторам, ассоциированным со следовыми аминами (trace amine associated receptors, TAAR), особенно к TAAR1.

Данные соединения можно применять в лечении депрессии, тревожных расстройств, биполярного расстройства, синдрома дефицита внимания и гиперактивности (СДВГ), расстройств, вызванных стрессом, психотических расстройств, таких как шизофрения, неврологических заболеваний, таких как болезнь Паркинсона, нейродегенеративных расстройств, таких как болезнь Альцгеймера, эпилепсии, мигрени, гипертензии, злоупотребления веществами, вызывающими зависимость, метаболических расстройств, таких как расстройства приема пищи, диабет, диабетические осложнения, ожирение, дислипидемия, расстройств потребления и ассимиляции энергии, расстройств и нарушений температурного гомеостаза, нарушений сна и циркадного ритма и сердечно-сосудистых заболеваний.

Классические биогенные амины (серотонин, норэпинефрин, эпинефрина, допамин, гистамин) как нейромедиаторы играют важную роль в центральной и периферической нервной системе [1]. Их синтез и хранение, а также их деградация и обратный захват после высвобождения строго регулируются. Известно, что дисбаланс уровней биогенных аминов является ответственным за изменение функции мозга при многих патологических состояниях [2-5]. Соединения, образующие второй класс эндогенных аминов, так называемые следовые амины (trace amines, ТА), очень схожи с классическими биогенными аминами по своей структуре, метаболизму и субклеточной локализации. ТА включают пара-тирамин, β-фенилэтиламин, триптамин и октопамин, и их уровень в нервной системе млекопитающих существенно ниже уровня классических биогенных аминов [6].

Нарушение их регуляции связано с различными психическими заболеваниями, такими как шизофрения и депрессия [7], и другими состояниями, такими как синдром дефицита внимания и гиперактивности, головная боль типа мигрени, болезнь Паркинсона, злоупотребление веществами, вызывающими зависимость, и расстройства приема пищи [8, 9].

В течение долгого времени существование ТА-специфических рецепторов являлось всего лишь гипотезой, основанной на присутствии в ЦНС (центральной нервной системе) человека и других млекопитающих анатомически дискретных сайтов связывания, обладающих высокой аффинностью к ТА [10, 11]. Соответственно, считалось, что фармакологическое действие ТА опосредовано тем же известным механизмом, что и действие классических биогенных аминов, то есть либо сигналом, вызывающим их высвобождение, либо ингибированием их обратного захвата, либо "перекрестным связыванием" с их рецепторной системой [9, 12, 13]. В последнее время данная точка зрения претерпела значительные изменения в связи с идентификацией нескольких членов нового семейства GPCR (G-белоксопряженных рецепторов), рецепторов, ассоциированных со следовыми аминами (trace amine associated receptors, TAAR) [7, 14]. Обнаружено 9 TAAR-генов в геноме человека (включая 3 псевдогена) и 16 генов в геноме мыши (включая 1 псевдоген). TAAR-гены не содержат интронов (за одним исключением, TAAR2 содержит 1 интрон) и расположены рядом на одном хромосомном сегменте. Филогенетическое родство генов этих рецепторов, находящееся в соответствии с высокой степенью их сходства с GPCR-фармакофором и в соответствии с фармакологическими данными дает возможность предположить, что эти рецепторы образуют три различных подсемейства [7, 14]. TAAR1 относится к первому подклассу, состоящему из четырех генов (TAAR1-4), которые представлены в геномах человека и грызунов высококонсервативными последовательностями. ТА активируют TAAR1 через Gα. Показано, что нарушение регуляции ТА связано с этиологией различных заболеваний, таких как депрессия, психоз, синдром дефицита внимания и гиперактивности, злоупотребление веществами, вызывающими зависимость, болезнь Паркинсона, головная боль типа мигрени, расстройства приема пищи, метаболические расстройства, и поэтому использование TAAR1-лигандов в лечении данных заболеваний может являться весьма перспективным.

Поэтому получение новых знаний о рецепторах, ассоциированных со следовыми аминами (trace amine associated receptors), весьма актуально.

Литература

1. Deutch, A.Y. and Roth, R.H. (1999) Neurotransmitters. In Fundamental Neuroscience (2^nd edn) (Zigmond, M.J., Bloom, F.E., Landis, S.C., Roberts, J.L, and Squire, L.R., eds.), pp.193-234, Academic Press;

2. Wong, M.L. and Licinio, J. (2001) Research and treatment approaches to depression. Nat. Rev. Neurosci. 2, 343-351;

3. Carlsson, A. et al. (2001) Interactions between monoamines, glutamate, and GABA in schizophrenia: new evidence. Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol. 41, 237-260;

4. Tuite, P. and Riss, J. (2003) Recent developments in the pharmacological treatment of Parkinson's disease. Expert Opin. Investig. Drugs 12, 1335-1352;

5. Castellanos, F.X. and Tannock, R. (2002) Neuroscience of attention-deficit/hyperactivity disorder: the search for endophenotypes. Nat. Rev. Neurosci. 3, 617-628;

6. Usdin, E. and Sandler, M. eds. (1984), Trace Amines and the brain, Dekker;

7. Lindemann, L. and Hoener, M. (2005) A renaissance in trace amines inspired by a novel GPCR family. Trends in Pharmacol. Sci. 26, 274-281;

8. Branchek, T.A. and Blackburn, T.P. (2003) Trace amine receptors as targets for novel therapeutics: legend, myth and fact. Curr. Opin. Pharmacol. 3, 90-97;

9. Premont, R.T. et al. (2001) Following the trace of elusive amines. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 98, 9474-9475;

10. Mousseau, D.D. and Butterworth, R.F. (1995) A high-affinity [3H] tryptamine binding site in human brain. Prog. Brain Res. 106, 285-291;

11. McCormack, J.K. et al. (1986) Autoradiographic localization of tryptamine binding sites in the rat and dog central nervous system. J. Neurosci. 6, 94-101;

12. Dyck, L.E. (1989) Release of some endogenous trace amines from rat striatal slices in the presence and absence of a monoamine oxidase inhibitor. Life Sci. 44, 1149-1156;

13. Parker, E.M. and Cubeddu, L.X. (1988) Comparative effects of amphetamine, phenylethylamine and related drugs on dopamine efflux, dopamine uptake and mazindol binding. J. Pharmacol. Exp. Ther. 245, 199-210;

14. Lindemann, L. et al. (2005) Trace amine associated receptors form structurally and functionally distinct subfamilies of novel G protein-coupled receptors. Genomics 85, 372-385.

Целью настоящего изобретения являются новые соединения формулы I, их получение, лекарства на основе соединения по изобретению и их изготовление, а также применение соединений формулы I для контроля над заболеваниями, такими как депрессия, тревожные расстройства, биполярное расстройство, синдром дефицита внимания и гиперактивности, расстройства, вызванные стрессом, психотические расстройства, такие как шизофрения, неврологические заболевания, такие как болезнь Паркинсона, нейродегенеративные расстройства, такие как болезнь Альцгеймера, эпилепсия, мигрень, гипертензия, злоупотребление веществами, вызывающими зависимость, метаболические расстройства, такие как расстройства приема пищи, диабет, диабетические осложнения, ожирение, дислипидемия, расстройства потребления и ассимиляции энергии, расстройства и нарушения температурного гомеостаза, нарушения сна и циркадного ритма и сердечно-сосудистые заболевания, или для предупреждения перечисленных заболеваний.

Предпочтительными показаниями к применению соединений по настоящему изобретению являются депрессия, психоз, болезнь Паркинсона, тревожность и синдром дефицита внимания и гиперактивности (СДВГ).

В контексте данного описания термин "низший алкил" означает группу с насыщенной нормальной или разветвленной цепью, содержащую от 1 до 7 атомов углерода, например, метил, этил, пропил, изопропил, н-бутил, изо-бутил, 2-бутил, трет-бутил и тому подобное. Предпочтительными алкильными группами являются группы, содержащие 1-4 атома углерода.

В контексте данного описания термин "низший алкокси" означает группу, где алкильный остаток, такой как определено выше, присоединен через атом кислорода.

В контексте данного описания термин "низший алкил, замещенный атомом галогена", означает алкильную группу, такую как определено выше, где по меньшей мере один атом водорода заменен на атом галогена, например CF₃, CHF₂, CH₂F, CH₂CF₃, CH₂CH₂CF₃, CH₂CF₂CF₃ и тому подобное.

Термин "атом галогена" означает атом хлора, иода, фтор и брома.

Термин "фармацевтически приемлемые соли присоединения кислот" включает соли с неорганическими и органическими кислотами, такими как соляная кислота, азотная кислота, серная кислота, фосфорная кислота, лимонная кислота, муравьиная кислота, фумаровая кислота, малеиновая кислота, уксусная кислота, янтарная кислота, винная кислота, метан-сульфоновая кислота, пара-толуолсульфоновая кислота и тому подобное.

Предпочтительными соединениями формулы I являются те соединения, где Х представляет собой CH₂ и Y представляет собой связь.

К таким соединениям относятся

(RS)-1-(1Н-имидазол-4-илметил)-2-метил-2,3-дигидро-1Н-индол,

1-(3Н-имидазол-4-илметил)-2,3-дигидро-1Н-индол,

5-бром-1-(1Н-имидазол-4-илметил)-2,3-дигидро-1Н-индол,

5-хлор-1-(1Н-имидазол-4-илметил)-2,3-дигидро-1Н-индол,

(RS)-5-хлор-1-(1Н-имидазол-4-илметил)-2-метил-2,3-дигидро-1Н-индол,

7-этил-1-(1Н-имидазол-4-илметил)-2,3-дигидро-1Н-индол,

4-хлор-1-(1Н-имидазол-4-илметил)-2,3-дигидро-1Н-индол,

1-(1Н-имидазол-4-илметил)-5-метокси-2,3-дигидро-1Н-индол,

1-(1Н-имидазол-4-илметил)-6-метокси-2,3-дигидро-1Н-индол,

1-(1Н-имидазол-4-илметил)-7-метокси-2,3-дигидро-1Н-индол,

1-(1Н-имидазол-4-илметил)-5-метил-2,3-дигидро-1Н-индол,

1-(1Н-имидазол-4-илметил)-4-метокси-2,3-дигидро-1Н-индол,

7-хлор-1-(1Н-имидазол-4-илметил)-2,3-дигидро-1Н-индол,

1-(1Н-имидазол-4-илметил)-6-метил-2,3-дигидро-1Н-индол,

(RS)-1-(1Н-имидазол-4-илметил)-3-метил-2,3-дигидро-1Н-индол,

5-фтор-1-(1Н-имидазол-4-илметил)-2,3-дигидро-1Н-индол,

6-фтор-1-(1Н-имидазол-4-илметил)-2,3-дигидро-1Н-индол,

5,6-дифтор-1-(1Н-имидазол-4-илметил)-2,3-дигидро-1Н-индол,

(RS)-5-фтор-1-(1Н-имидазол-4-илметил)-2-метил-2,3-дигидро-1Н-индол,

1-(1Н-имидазол-4-илметил)-7-метил-2,3-дигидро-1Н-индол или

1-(1Н-имидазол-4-илметил)-4-метил-2,3-дигидро-1Н-индол.

Предпочтительными соединениями формулы I являются те соединения, где Х представляет собой СН₂ и Y представляет собой СН₂.

К таким соединениям относятся

(RS)-1-(1Н-имидазол-4-илметил)-2-метил-1,2,3,4-тетрагидро-хинолин,

(RS)-6-фтор-1-(1Н-имидазол-4-илметил)-2-метил-1,2,3,4-тетрагидро-хинолин,

1-(3Н-имидазол-4-илметил)-1,2,3,4-тетрагидро-хинолин,

6-бром-1-(1Н-имидазол-4-илметил)-1,2,3,4-тетрагидро-хинолин,

(-)-1-(1Н-имидазол-4-илметил)-2-метил-1,2,3,4-тетрагидро-хинолин,

5-бензилокси-1-(1Н-имидазол-4-илметил)-1,2,3,4-тетрагидро-хинолин,

7-бензилокси-1-(1Н-имидазол-4-илметил)-1,2,3,4-тетрагидро-хинолин или

1-(1Н-имидазол-4-илметил)-5-фенокси-1,2,3,4-тетрагидро-хинолин.

Предпочтительными соединениями формулы I являются те соединения, где Х представляет собой О и Y представляет собой СН₂.

К таким соединениям относятся

4-(1Н-имидазол-4-илметил)-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин,

(RS)-4-(1Н-имидазол-4-илметил)-3-метил-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин или

(-)-4-(1Н-имидазол-4-илметил)-3-метил-3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазин.

Предпочтительными соединениями формулы I являются те соединения, где Х представляет собой СН₂ и Y представляет собой СН₂СН₂.

К таким соединениям относятся

1-(3Н-имидазол-4-илметил)-7-метокси-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-бензо[b]азепин или

1-(3Н-имидазол-4-илметил)-2,3,4,5-тетрагидро-1Н-бензо[b]азепин.

Соединения по настоящему изобретению формулы I и их фармацевтически приемлемые соли могут быть получены с помощью методик, известных в данной области техники, например с использованием нижеописанных методик, которые включают

а) восстановительное аминирование, где соединение формулы

взаимодействует с соединением формулы

с получением соединения формулы

где R¹, R², R³, R⁴, X, n и m являются такими, как определено выше, или

б) восстановительное аминирование, где соединение формулы

взаимодействует с соединением формулы

с получением соединения формулы

.

где R¹, R², R³, R⁴, m и n являются такими, как определено выше, или

в) восстановительное аминирование, где соединение формулы

взаимодействует с соединением формулы

с получением соединения формулы

,

где R¹, R², R³, R⁴, X, Y, m и n являются такими, как определено выше; и,

при желании, превращение полученных соединений в фармацевтически приемлемые соли присоединения кислот.

Соединения формулы I могут быть получены с использованием вышеописанных вариантов методики и в соответствии с приведенными далее схемами 1-4. Исходные вещества или имеются в продаже, или же описаны в химической литературе, или могут быть получены с помощью методик, хорошо известных в данной области техники.

Методика 1

Схема 1

Схема 1 описывает восстановительное аминирование с использованием 1,2,3,4-тетрагидрохинолина (Х=СН₂) или 3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазина (Х=O) формулы II, в качестве аминного компонента, и имидазол-4-карбоксальдегида или (имидазол-4-ил)-алкил-кетона формулы III, в качестве карбонильного компонента.

Методика 2

Схема 2

Схема 2 описывает восстановительное аминирование с использованием индолинового соединения формулы IV, в качестве аминного компонента, и имидазол-4-карбоксальдегида или (имидазол-4-ил)-алкил-кетона формулы III, в качестве карбонильного компонента. Данные индолиновые соединения могут быть получены путем восстановления соответствующих индоловых аналогов формулы V.

Методика 3

Схема 3

Схема 3 описывает восстановительное аминирование с использованием индолинового соединения (-X-Y-=-CH₂-), или 1,2,3,4-тетрагидрохинолинового соединения (-X-Y-=-CH₂-CH₂-), или 3,4-дигидро-2Н-бензо[1,4]оксазинового соединения (-X-Y-=-O-CH₂-) формулы VI, в качестве аминного компонента, и имидазол-4-карбоксальдегида или (имидазол-4-ил)-алкил-кетона формулы III, в качестве карбонильного компонента. Указанные амино-соединения могут быть получены из соответствующего 1,3-дигидро-индол-2-онового соединения (-X-Y-=-СН₂-), или 3,4-дигидро-2(1Н)-хинолинонового соединения (-X-Y-=-СН₂-СН₂-), или 2Н-1,4-бензоксазин-3(4Н)-онового соединения (-X-Y-=-O-СН₂-) формулы VII путем добавления реактива Гриньяра и последующего восстановления.

Методика 4

Схема 4

PG = защитная группа для атома азота, устойчивая к условиям, используемым для превращения FG¹ в R³, например трет-бутоксикарбонил (ВОС)

В тех случаях, когда исходное вещество содержит реакционноспособную функциональную группу (например, свободную гидроксильную группу) на арильном кольце, перед выполнением стадии восстановительного аминирования может быть выполнено превращение функциональной группы. Чтобы выполнить превращение желаемой функциональной группы, часто оказывается полезным сначала защитить атом азота, который участвует в восстановительном аминировании на следующей стадии. Например, данный атом азота может быть защищен путем превращения в трет-бутилкарбаматную группировку. Примеры превращений функциональных групп включают общеизвестные превращения функциональных групп, уже описанные в химической литературе, такие как превращение FG1 = гидрокси в R³ = алкиловый эфир путем обработки основанием, таким как гидрид натрия, и алкилирующим агентом, таким как алкилгалогенид. Другое возможное превращение функциональной группы представляет собой превращение FG¹ = гидрокси в R³ = ариловый эфир путем обработки арилбороновой кислотой и ацетатом меди (II) в соответствии с методикой, описанной Evans с соавт. (Tetrahedron Lett. 1998, 39, 2937-2940).

Выделение и очистка соединений

Выделение и очистка соединений и промежуточных соединений, описанных в данном изобретении, могут быть выполнены, при желании, с использованием любой подходящей методики разделения или очистки, такой как, например, фильтрация, экстракция, кристаллизация, колоночная хроматография, тонкослойная хроматография, хроматография в толстом слое, препаративная жидкостная хроматография низкого или высокого давления, или с использованием комбинации данных методик. Для конкретной иллюстрации подходящих методик разделения или выделения можно сослаться на препараты и примеры, приведенные в данном описании ниже. Однако могли бы быть использованы и другие эквивалентные методики разделения или выделения. Рацемические смеси хиральных соединений формулы I могут быть разделены с использованием хиральной ЖХВД (жидкостной хроматографии высокого давления).

Соли соединений Формулы I

Соединения формулы I являются основаниями и могут быть превращены в соответствующую соль присоединения кислоты. Такое превращение осуществляют путем обработки по меньшей мере стехиометрическим количеством подходящей кислоты, такой как соляная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота и тому подобное и такие органические кислоты, как уксусная кислота, пропионовая кислота, гликолевая кислота, пировиноградная кислота, щавелевая кислота, яблочная кислота, малоновая кислота, янтарная кислота, малеиновая кислота, фумаровая кислота, винная кислота, лимонная кислота, бензойная кислота, коричная кислота, миндальная кислота, метансульфоновая кислота, этансульфоновая кислота, пара-толуолсульфоновая кислота, салициловая кислота и тому подобное. Обычно свободное основание растворяют в инертном органическом растворителе, таком как диэтиловый эфир, этилацетат, хлороформ, этанол или метанол и тому подобное, и добавляют кислоту в похожем растворителе. Температуру поддерживают в диапазоне от 0°С до 50°С. Получающаяся соль или спонтанно выпадает в осадок, или может быть осаждена из раствора с использованием менее полярного растворителя.

Соли присоединения кислот основных соединений формулы 1 могут быть превращены в соответствующие свободные основания путем их обработки по меньшей мере стехиометрическим эквивалентом подходящего основания, такого как гидроксид натрия или калия, карбонат калия, бикарбонат натрия, аммиак и тому подобное.

Соединения формулы 1 и их фармацевтически приемлемые соли присоединения обладают полезными фармакологическими свойствами. Конкретно, найдено, что соединения по настоящему изобретению обладают высокой аффинностью к рецепторам, ассоциированным со следовыми аминами (trace amine associated receptors, TAAR), особенно к TAAR1.

Данные соединения были исследованы в соответствии с тестом, приведенным в данном описании ниже.

Материалы и методики

Конструирование TAAR-экспрессирующих плазмид и стабильно трансфицированных клеточных линий

Для конструирования экспрессирующих плазмид амплифицировали кодирующие последовательности TAAR1 из геномной ДНК человека, крысы и мыши по существу таким способом, как описано Lindemann et al. [14]. Использовали Expand High Fidelity PCR System (Roche Diagnostics) с 1,5 мМ Mg²⁺, и очищенные ПЦР-продукты клонировали в клонирующий вектор pCR2.1-TOPO (Invitrogen) в соответствии с инструкцией производителя. ПЦР-продукты субклонировали в вектор plRESneo2 (BD Clontech, Palo Alto, California), и до введения в клеточные линии последовательности полученных экспрессирующих плазмид подтверждали путем секвенирования.

Клетки HEK293 (АТСС (Американская коллекция типовых культур) # CRL-1573) культивировали по существу так, как описано Lindemann et al. (2005). Для получения стабильно трансфицированных клеточных линий клетки HEK293 трансфицировали экспрессирующими плазмидами plRESneo2, содержащими кодирующие последовательности TAAR (описанные выше) с использованием реагента для трансфекции Lipofectamine 2000 (Invitrogen) в соответствии с инструкцией производителя, и через 24 часа после трансфекции в культуральную среду добавляли G418 (Sigma, Buchs, Switzerland) в концентрации 1 мг/мл. После культивирования в течение приблизительно 10 суток клоны выделяли, рассевали, и исследовали их отвечаемость на следовые амины (все соединения приобретены в Sigma) с использованием cAMP Biotrak Enzyme immunoassay (EIA) System (Amersham) в соответствии с протоколом EIA (иммуноферментного анализа) без ацетилирования, предоставленным производителем. Для всех последующих исследований использовали моноклональные клеточные линии, которые показывали стабильную ЕС₅₀ (концентрацию, требуемую для достижения 50% эффекта) в течение периода культивации, составляющего 15 пассажей.

Приготовление мембран и связывание радиолиганда

Клетки из монослоя клеточной культуры смывали охлажденным до 0°С фосфатно-солевым буфером без Са²⁺ и Mg²⁺, содержащим 10 мМ ЭДТА (этилендиаминтетраацетат), и осаждали путем центрифугирования при 1000 об/мин в течение 5 мин при 4°С. Затем осадок дважды промывали охлажденным до 0°С фосфатно-солевым буфером, и клеточный осадок сразу замораживали путем погружения в жидкий азот и хранили до использования при -80°С. Затем клеточный осадок суспендировали в 20 мл буфера HEPES-NaOH (20 мМ), рН 7,4, содержащего 10 мМ ЭДТА, и гомогенизировали на Polytron (РТ 3000, Kinematica) при 10000 об/мин в течение 10 с. Данный гомогенат центрифугировали при 48000 × g в течение 30 мин при 4°С, и полученный осадок ресуспендировали в 20 мл буфера HEPES-NaOH (20 мМ), рН 7,4, содержащего 0,1 мМ ЭДТА, (буфер А) и гомогенизировали на Polytron при 10000 об/мин в течение 10 с.Затем гомогенат центрифугировали при 48000 х g в течение 30 мин при 4°С, и полученный осадок ресуспендировали в 20 мл буфера А и гомогенизировали на Polytron при 10000 об/мин в течение 10 с. Концентрацию белка определяли согласно методике Pierce (Rockford, IL). Затем гомогенат центрифугировали при 48000 × g в течение 10 мин при 4°С, осадок ресуспендировали в буфере HEPES-NaOH (20 мМ), рН 7,0, содержащем MgCl₂ (10 мМ) и CaCl₂ (2 мМ), (буфер В) до концентрации белка 200 на мл и гомогенизировали на Polytron при 10000 об/мин в течение 10 с.

Анализ связывания выполняли при 4°С в конечном объеме 1 мл, время инкубации составляло 30 мин. Радиолиганд [³H]-рац-2-(1,2,3,4-тетрагидро-1-нафтил)-2-имидазолин использовали в концентрации, равной рассчитанному значению K_d 60 нМ, при которой связывается приблизительно 0,1% всего добавленного радиолиганда, и специфическое связывание составляет приблизительно 70-80% от общего связывания. Неспецифическое связывание определяли как количество [³H]-рац-2-(1,2,3,4-тетрагидро-1-нафтил)-2-имидазолина, связанного в присутствии соответствующего немеченого лиганда (10 мкМ). Конкурирующие лиганды исследовали в широком диапазоне концентраций (10 пМ - 30 мкМ). Конечная концентрация диметилсульфоксида в пробах составляла 2%, и это не оказывало влияния на связывание радиолиганда. Каждый эксперимент выполняли с двойной повторностью. Инкубацию останавливали путем быстрой фильтрации через планшеты UniFilter-96 (Packard Instrument Company) и стеклянный фильтр GF/C, который предварительно вымачивали в течение по меньшей мере 2 ч в 0,3% полиэтиленимине, с использованием харвестера Filtermate 96 Cell Harvester (Packard Instrument Company). Затем пробирки и фильтры 3 раза промывали аликвотами холодного буфера В объемом 1 мл. Фильтры без предварительной сушки вымачивали в Ultima gold (45 мкл/лунку, Packard Instrument Company), и связанную радиоактивность подсчитывали на счетчике TopCount Microplate Scintillation Counter (Packard Instrument Company).

Ниже в таблице приведены предпочтительные соединения, которые в анализе с использованием мышиных TAAR1 показывали значение Ki в диапазоне 0,001-0,100 мкМ.

Пример	Ki (µM) мышиные рецепторы	Пример	Ki	Пример	Ki
1	0,0688	27	0,0389	40	0,0405
2	0,0104	28	0,0409	41	0,0104
3	0,0258	29	0,0115	43	0,0538
4	0,0091	31	0,0243	44	0,0151
6	0,0598	32	0,0403	45	0,017
7	0,0264	33	0,003	47	0,0872
14	0,0102	34	0,0133	49	0,0573
16	0,0345	35	0,0323	55	0,0046
18	0,0578	36	0,0277	57	0,0702
23	0,0042	37	0,0106	61	0,0027
25	0,0016	38	0,0144
26	0,0834	39	0,0493

Соединения формулы I и фармацевтически приемлемые соли соединений формулы I можно применять в качестве лекарств, например в форме фармацевтических препаратов. Данные фармацевтические препараты можно вводить перорально, например в форме таблеток, таблеток, покрытых оболочкой, драже, твердых и мягких желатиновых капсул, растворов, эмульсий или суспензий. Однако они могут быть ведены также ректально, например в форме суппозиториев, парентерально, например в форме инъекционных растворов.

Для получения фармацевтических препаратов соединения формулы I могут быть приготовлены вместе фармацевтически инертными, неорганическими или органическими носителями. Например, в качестве таких носителей для таблеток, таблеток, покрытых оболочкой, драже и твердых желатиновых капсул могут быть использованы лактоза, кукурузный крахмал или его производные, тальк, стеариновые кислоты или их соли и тому подобное. Подходящими носителями для мягких желатиновых капсул являются, например, растительные масла, воски, жиры, полутвердые и жидкие полиолы и тому подобное. В случае мягких желатиновых капсул носители обычно не требуются, однако это зависит от природы активного вещества. Подходящими носителями для приготовления растворов и сиропов являются, например, вода, полиол, глицерин, растительное масло и тому подобное. Подходящими носителями для суппозиториев являются, например, natural или отвержденные масла, воски, жиры, полужидкие или жидкие полиолы и тому подобное.

Кроме того, данные фармацевтические препараты могут содержать консерванты, солюбилизаторы, стабилизаторы, увлажняющие агенты, эмульгаторы, подсластители, красящие вещества, корригенты, соли для регулирования осмотического давления, буферные агенты, маскирующие агенты или антиоксиданты. Они также могут дополнительно содержать другие терапевтически полезные вещества.

Лекарства, содержащие соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль и терапевтически инертный носитель, также являются предметом настоящего изобретения, как и способ их изготовления, который включает использование одного или более чем одного соединения формулы I, и/или фармацевтически приемлемых солей присоединения кислот и, при желании, одного или более чем одного другого терапевтически полезного вещества в форме галенова препарата вместе с одним или более чем с одним терапевтически инертным носителем.

Наиболее предпочтительными показаниями согласно настоящему изобретению являются показания, которые включают расстройства центральной нервной системы, например лечение или предупреждение депрессии, психоза, болезни Паркинсона, тревожности и синдрома дефицита внимания и гиперактивности (СДВГ).

Конечно, дозировку можно варьировать в широких пределах, и обычно в каждом конкретном случае она должна быть подобрана в соответствии с индивидуальными потребностями. В случае перорального введения доза для взрослых может изменяться в диапазоне от приблизительно 0,01 мг до приблизительно 1000 мг в сутки для соединения общей формулы I или в соответствующем диапазоне для его фармацевтически приемлемой соли. Суточную дозу можно вводить в виде однократной дозы или в виде дробных доз, и, кроме того, также может быть превышен верхний предел, когда для этого имеются показания.

Методика приготовления

1. Смешивают вещества 1, 2, 3 и 4 и гранулируют с очищенной водой.

2. Сушат гранулы при 50°С.

3. Пропускают гранулы через подходящее помольное оборудование.

4. Добавляют вещество 5 и перемешивают в течение трех минут; прессуют на подходящем прессе.

Препарат для капсул
Пункт	Ингредиенты	мг/таблетку
		5 мг	25 мг	100 мг	500 мг
1.	Соединение формулы I	5	25	100	500
2.	Лактоза водная	159	123	148	-
3.	Кукурузный крахмал	25	35	40	70
4.	Тальк	10	15	10	25
5.	Стеарат магния	1	2	2	5
6.	Всего	200	200	300	600

Методика приготовления

1. Смешивают вещества 1, 2 и 3 в подходящем смесителе в течение 30 минут.

2. Добавляют вещества 4 и 5 и смешивают в течение 3 минут.

3. Заполняют подходящую капсулу.

Эксперименты

Следующие примеры иллюстрируют изобретение, но предполагается, что они не ограничивают его объем.

Пример 1

(RS)-1-(1Н-Имидазол-4-илметил)-2-метил-2,3-дигидро-1Н-индол

К раствору 2-метилиндолина (0,50 г, 5,20 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (12 мл) последовательно добавляли имидазол-4-карбоксальдегид (0,75 г, 7,81 ммоль), триацетоксиборгидрид натрия (3,31 г, 15,6 ммоль) и уксусную кислоту (0,06 мл, 1,04 ммоль). Данную реакционную смесь встряхивали при 40°С в течение 16 часов, затем добавляли триэтиламин (0,5 мл) и смесь дополнительно встряхивали в течение 5 мин. Полученную суспензию фильтровали, и фильтрат концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем хроматографии на силикагеле (элюант: градиент метанол/дихлорметан) с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (0,28 г, 25%); МС (ISP) (масс-спектрометрия с ионизацией ионораспылением): 214,1 ([М+Н⁺]).

Следующие соединения получали аналогично соединению Примера 1.

Пример 2

1-(3Н-Имидазол-4-илметил)-2,3-дигидро-1Н-индол

Получали из индолина, имидазол-4-карбоксальдегида, триацетоксиборгидрида натрия и уксусной кислоты в 1,2-дихлорэтане. МС (ISP): 200,1 ([М+Н]⁺).

Пример 3

(RS)-1-(1Н-Имидазол-4-илметил)-2-метил-1,2,3,4-тетрагидро-хинолин

Получали из 1,2,3,4-тетрагидрохинальдина, имидазол-4-карбоксальдегида, триацетоксиборгидрида натрия и уксусной кислоты в 1,2-дихлорэтане. МС (ISP): 228,4 ([М+Н]⁺).

Пример 4

5-Бром-1-(1Н-имидазол-4-илметил)-2,3-дигидро-1Н-индол

Получали из 5-броминдолина, имидазол-4-карбоксальдегида, триацетоксиборгидрида натрия и уксусной кислоты в 1,2-дихлорэтане. МС (ISP): 280,1 ([{⁸¹Br}M+Н]⁺), 278,1 ([{⁷⁹Br}М+Н]⁺).

Пример 5

1-(1Н-Имидазол-4-илметил)-6-трифторметил-2,3-дигидро-1Н-индол

Получали из 6-(трифторметил)индолина, имидазол-4-карбоксальдегида, триацетоксиборгидрида натрия и уксусной кислоты в 1,2-дихлорэтане. МС (ISP): 268,3 ([M+H]⁺).

Пример 6

(RS)-6-Фтор-1-(1Н-имидазол-4-илметил)-2-метил-1,2,3,4-тетрагидро-хинолин

Получали из 6-фтор-2-метил-1,2,3,4-тетрагидро-хинолина, имидазол-4-карбоксальдегида, триацетоксиборгидрида натрия и уксусной кислоты в 1,2-дихлорэтане. МС (ISP): 246,3 ([M+H]⁺).

Пример 7

1-(3Н-Имидазол-4-илметил)-1,2,3,4-тетрагидро-хинолин

Получали из 1,2,3,4-тетрагидро-хинолина, имидазол-4-карбоксальдегида, триацетоксиборгидрида натрия и уксусной кислоты в 1,2-дихлорэтане. МС (ISP): 214,4 ([М+Н]⁺).

Пример 8

(RS)-2-Метил-1-(2-метил-1Н-имидазол-4-илметил)-2,3-дигидро-1Н-индол

Получали из 2-метилиндолина, 2-метил-имидазол-4-карбоксальдегида, триацетоксиборгидрида натрия и уксусной кислоты в 1,2-дихлорэтане. МС (ISP): 228,4 ([M+H]⁺).

Пример 9

2-Метил-1-(2-метил-1Н-имидазол-4-илметил)-1,2,3,4-тетрагидро-хинолин

Получали из 1,2,3,4-тетрагидрохинальдина, 2-метил-имидазол-4-карбоксальдегида, триацетоксиборгидрида натрия и уксусной кислоты в 1,2-дихлорэтане. МС (ISP): 242,3 ([М+Н]⁺).

Пример 10

5-Бром-1-(2-метил-1Н-имидазол-4-илметил)-2,3-дигидро-1Н-индол

Получали из 5-броминдолина, 2-метил-имидазол-4-карбоксальдегида, триацетоксиборгидрида натрия и уксусной кислоты в 1,2-дихлорэтан. МС (ISP): 294,0 ([{⁸¹Br}М+Н]⁺), 292,0 ([{⁷⁹В}М+Н]⁺).

Пример 11

1-(2-Метил-1Н-имидазол-4-илметил)-6-трифторметил-2,3-дигидро-1Н-индол

Получали из 6-(трифторметил)индолина, 2-метил-имидазол-4-карбоксальдегида, триацетоксиборгидрида натрия и уксусной кислоты в 1,2-дихлорэтане. МС (ISP): 282,3 ([M+H]⁺).

Пример 12

(RS)-6-Фтор-2-метил-1-(2-метил-1Н-имидазол-4-илметил)-1,2,3,4-тетрагидро-хинолин

Получали из 6-фтор-2-метил-1,2,3,4-тетрагидро-хинолина, 2-метил-имидазол-4-карбоксальдегида, триацетоксиборгидрида натрия и уксусной кислоты в 1,2-дихлорэтане. МС (ISP): 260,3 ([М+Н]⁺).

Пример 13

1-(2-метил-1Н-имидазол-4-илметил)-1,2,3,4-тетрагидро-хинолин

Получали из 1,2,3,4-тетрагидрохинолина, 2-метил-имидазол-4-карбоксальдегида, триацетоксиборгидрида натрия и уксусной кислоты в 1,2-дихлорэтане. МС (ISP): 228,6 ([M+H]⁺).

Пример 14

5-Хлор-1-(1Н-имидазол-4-илметил)-2,3-дигидро-1Н-индол

Получали из 5-хлориндолина, имидазол-4-карбоксальдегида, триацетоксиборгидрида натрия и уксусной кислоты в 1,2-дихлорэтане. МС (ISP): 236,2 ([{³⁷Cl}М+Н]⁺), 234,2 ([{³⁵Cl}М+Н]⁺).

Пример 15

5-Хлор-1-(2-метил-1Н-имидазол-4-илметил)-2,3-дигидро-1Н-индол

Получали из 5-хлориндолина, 2-метил-имидазол-4-карбоксальдегида, триацетоксиборгидрида натрия и уксусной кислоты в 1,2-дихлорэтане. МС (ISP): 250,1 ([{³⁷Cl}М+Н]⁺), 248,2 ([{³⁵Cl}М+Н]⁺).

Пример 16

(RS)-5-Хлор-1-(1Н-имидазол-4-илметил)-2-метил-2,3-дигидро-1Н-индол

а) (RS)-5-Хлор-2-метил-2,3-дигидро-1Н-индол

К раствору 5-хлор-2-метилиндола (1,00 г, 6,04 ммоль) в уксусной кислоте (7 мл) добавляли порциями цианоборгидрид натрия (0,76 г, 12,1 ммоль), и данную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Полученный раствор разбавляли этилацетатом и последовательно промывали водой и 5 н. водным раствором гидроксида натрия. Органическую фазу сушили над сульфатом натрия и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали путем хроматографии на силикагеле (элюант: градиент гептан/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (1,00 г, 100%); МС (ISP): 170,2 ([{³⁷Cl}М+Н]⁺), 168,3 ([{³⁵Cl}М+Н]⁺).

б) (RS)-5-Хлор-1-(1Н-имидазол-4-илметил)-2-метил-2.3-дигидро-1Н-индол

Получали аналогично соединению Примера 1 из (RS)-5-хлор-2-метил-2,3-дигидро-1Н-индола, имидазол-4-карбоксальдегида, триацетоксиборгидрида натрия и уксусной кислоты в 1,2-дихлорэтане. МС (ISP): 250,2 ([{³⁷Cl}М+Н]⁺), 248,3 ([{³⁵Cl}М+Н]⁺).

Следующее соединение получали аналогично соединению Примера 16.

Пример 17

(RS)-5-Хлор-2-метил-1-(2-метил-1Н-имидазол-4-илметил)-2,3-дигидро-1Н-индол

Получали из (RS)-5-хлор-2-метил-2,3-дигидро-1Н-индола, 2-метил-имидазол-4-карбоксальдегида, триацетоксиборгидрида натрия и уксусной кислоты в 1,2-дихлорэ